一种金耳液体菌种接耳栽培方法

技术领域

本发明属于食用菌栽培技术领域，具体涉及一种金耳液体菌种接耳栽培方法。

背景技术

金耳(

金耳的味道清香、营养价值丰富，不仅市场需求量较大，而且经济价值较高。但野生金耳产量较少，远远不足以满足市场的需求，因此人工栽培是十分必要的。

早在20世纪80年代，就有人开始研究金耳人工栽培，1982―1996年，刘正南等成功引种驯化了野生金耳，并进行大面积推广，取得了良好的经济和社会效益，目前金耳段木栽培和代料栽培技术都有了较大的研究进展。但由于金耳菌种制作要求较高，在实际产生过程中，菌种品质参差不齐，导致栽培后不能正常出菇的现象时常发生，子实体产量不够稳定，暂没有金耳工厂化栽培报道。

金耳子实体是由金耳菌丝和革菌菌丝联合组成的复合体，在生产中革菌菌丝大量生长，不利于金耳菌丝生长，影响子实体形成。另外，金耳在代料栽培金耳原基形成的初期很容易遭到杂菌感染，从而导致烂耳和出耳不整齐，最终严重影响金耳产量和生物转化率，阻碍了代料栽培金耳的大规模推广。

金耳作为一种重要的食药用真菌，其丰富的胶质即是美容养颜的佳品，也是润肺化痰的良品，口感润滑，老少皆宜，因此近年来对金耳的研究日趋增多，但人工栽培技术难度较大，周期较长，暂未实现工厂化栽培，致使满足不了市场需求价格较高。

因此，研究一种周期短、高出耳率及高品质的金耳栽培方法是极其必要的。

发明内容

本发明的第一目的是提供一种金耳的液体菌种培养基及其制备方法，本发明的第二目的是提供一种金耳液体菌种制备方法，本发明的第三目的是提供一种金耳液体菌种接耳栽培方法。

本发明的第一目的是这样实现的，一种金耳的液体菌种培养基，在每升培养基里含有淀粉1-5g，葡萄糖30-50g，蛋白胨3-5g，磷酸二氢钾4-6g，硫酸镁2-4g，VB1-2片，余量为水。所述培养基的制备方法是将上述原料按照配比溶于水中混合，灭菌后冷却即得。

本发明的第二目的是这样实现的，一种金耳液体菌种制备方法，是将毛韧革菌菌种接种于上述培养基中，再置于23-27℃摇床培养4~6天后得到金耳液体菌种。

本发明的第三目的是这样实现的，一种金耳液体菌种接耳栽培方法，是将上述金耳液体菌种接种到栽培袋或栽培瓶中进行暗培养，待菌丝萌发后，将金耳组织块嫁接到栽培料接种孔或半袋菌包的料面继续暗培养至出菇，在光照环境下进行出菇管理至成熟即可采摘。

金耳的传统栽培模式为接固体培养料或固体培养料嫁接子实体，固体培养料为杂菌丝，接种时易染菌，后期嫁接子实体使易染青霉而导致烂耳。而本发明通过将金耳的复合菌毛韧革菌纯培养后制作液体菌种，毛韧革菌菌丝生长速度极快，可快速萌发吃料，这样再进行金耳的嫁接，首先，作为复合菌更易结合供给子实体生长营养，其次可有效的避免嫁接后杂菌的侵染，成耳率大大升高。

与传统技术相比，本发明具有以下优势：

（1）本发明栽培方法使用毛韧革菌制作金耳液体菌种先接菌包，菌丝吃料速度快，做包到采收整个周期仅需50至60天，比传统栽培缩短了10-20天，明显缩短金耳栽培周期；

（2）本栽培方法染菌率低于1%，出耳率高达98%，一茬转换率高达95%；

（3）本栽培方法得到的子实体大小均匀，差异率低，品质高；

（4）本发明栽培方法使用的栽培料不仅木屑使用量少，而且出菇效果好，产量高，实现了低成本高收益；另外，本栽培方法简单易管理实施，值得进一步推广应用于工厂化生产。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。

本发明一种金耳的液体菌种培养基，每升培养基里含有淀粉1-5g，葡萄糖30-50g，蛋白胨3-5g，磷酸二氢钾4-6g，硫酸镁2-4g，VB1-2片片，余量为水。

所述淀粉为马铃薯淀粉或玉米木薯淀粉或两者的组合。

所述淀粉是通过添加含有淀粉的滤液实现的，含有淀粉的滤液的制备是将200-400g去皮土豆块加入400-600ml水中煮熟，过滤土豆，得到1L培养基所需淀粉含量的滤液。

所述金耳的液体菌种培养基的制备方法，是将所述原料按照配比溶于水中混合后灭菌冷却即得金耳的液体菌种培养基培养基。

本发明一种金耳液体菌种制备方法，是将毛韧革菌菌种接种于上述培养基中置于23-27℃摇床培养4~6天后得到金耳液体菌种。

本发明一种金耳液体菌种接耳栽培方法，是将金耳液体菌种接种到栽培袋或栽培瓶中进行暗培养，待菌丝萌发后，将金耳组织块嫁接到栽培料接种孔或半袋菌包的料面继续暗培养至出菇，在光照环境下进行出菇管理至成熟即可采摘。

所述液体菌种的接种方法为通过接种孔接种或直接播撒于栽培料表面。

所述方法采用的栽培料包括以下重量份的组分：玉米芯60-80份，木屑10-20份，麦麸13-15份，石膏0.3-0.7份，石灰0.3-0.7份，磷酸二氢钾0.05-0.15份。

所述方法采用的栽培料包括以下重量份的组分：玉米芯17-21份，棉子壳30-40份，木屑25-35份，麦麸5-15份，石膏0.8-1.2份。

所述金耳液体菌种暗培养温度为22-25℃，空气湿度为30%-50%。

所述金耳组织块暗培养温度为17℃-20℃，空气湿度为50%-60%。

所述出菇管理时培养温度为16℃-20℃，空气湿度80%-90%。

以下结合实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

取淀粉1g，葡萄糖30g，蛋白胨3g，磷酸二氢钾4g，硫酸镁2g，VB 1片，搅拌溶解于1L水中，并分装于三角瓶中于121℃灭菌20min后冷却得到液体培养基。在每瓶液体培养基中接种革菌菌种，于25℃摇床培养，发酵5天得到液体菌种。

将玉米芯60份，木屑10份，麦麸13份，石膏0.3份，石灰0.3份，磷酸二氢钾0.05份加水搅拌至含水量为60%后得栽培料。将栽培料装袋于5cm*15cm*55cm香菇菌袋中采用温度121℃高压蒸汽灭菌40mi后取出冷却；待栽培基质降温冷却至25℃时，在栽培袋表面打4个孔，在孔内接入革菌液体菌种后用外套袋套住菌包封口；液体菌种在22℃、30%空气湿度条件下暗培养菌丝5天后，菌丝萌发并开始吃料，将金耳组织块接种于接种孔，并于温度为17℃、空气湿度为50%的条件下暗培养20天；之后去除外套袋，在温度为16℃、空气湿度为80%的白光光照培养25天至金耳成熟，即可进行采摘。

实施例2

取淀粉3g，葡萄糖40g，蛋白胨4g，磷酸二氢钾5g，硫酸镁2-4g，VB 2片，搅拌溶解于1L水中，并分装于三角瓶中于121℃灭菌30min后冷却得到液体培养基。在每瓶液体培养基中接种革菌菌种，于23℃摇床培养，发酵5天得到液体菌种。

将玉米芯70份，木屑15份，麦麸14份，石膏0.5份，石灰0.5份，磷酸二氢钾0.1份加水搅拌至含水量为55%后得栽培料。将栽培料装袋于5cm*15cm*55cm香菇菌袋中采用温度121℃高压蒸汽灭菌50mi后取出冷却；待栽培基质降温冷却至24℃时，在栽培袋表面打4个孔，在孔内接入革菌液体菌种后用外套袋套住菌包封口；液体菌种在24℃、40%空气湿度条件下暗培养菌丝6天后，菌丝萌发并开始吃料，将金耳组织块接种于接种孔，并于18℃、空气湿度55%条件下暗培养30天；之后去除外套袋，在18℃、空气湿度85%、白光光照培养20天金耳成熟，即可进行采摘。

实施例3

取淀粉5g，葡萄糖50g，蛋白胨5g，磷酸二氢钾6g，硫酸镁2-4g，VB 1片，搅拌溶解于1L水中，并分装于三角瓶中于121℃灭菌40min后冷却得到液体培养基。在每瓶液体培养基中接种革菌菌种，于25℃摇床培养，发酵5天得到液体菌种。

将玉米芯80份，木屑20份，麦麸15份，石膏0.7份，石灰0.3-0.7份，磷酸二氢钾0.15份加水搅拌至含水量为50%后得栽培料。将栽培料装袋于5cm*15cm*55cm香菇菌袋中采用温度121℃高压蒸汽灭菌60mi后取出冷却；待栽培基质降温冷却至27℃时，在栽培袋表面打8个孔，在孔内接入革菌液体菌种后用气胶带封好接种口；液体菌种在25℃、50%空气湿度条件下暗培养菌丝7天后，菌丝萌发并开始吃料，将金耳组织块接种于接种孔，并于20℃、空气湿度60%条件下暗培养20天；之后去除外套袋，在20℃、空气湿度90%、白光光照培养30天金耳成熟，即可进行采摘。

实施例4

取淀粉1g，葡萄糖35g，蛋白胨4g，磷酸二氢钾5g，硫酸镁4g，VB1片，搅拌溶解于1L水中，并分装于三角瓶中于121℃灭菌40min后冷却得到液体培养基。在每瓶液体培养基中接种革菌菌种，于24℃摇床培养，发酵5天得到液体菌种。

将玉米芯17份，棉子壳30份，木屑25份，麦麸5份，石膏0.8份，加水搅拌至含水量为60%后得栽培料。将栽培料装袋于5cm*15cm*30cm菌包中，栽培料装袋只装一半压实即可，套好套环（套环尽量接近袋口留下更多空间），再采用温度121℃高压蒸汽灭菌40min后取出冷却；待栽培料降温冷却至25℃时，将金耳的液体菌种，撒播至栽培料即可；

液体菌种在22℃、35%空气湿度条件下暗培养菌丝5天后，菌丝萌发并开始吃料，将4块金耳组织块接种于菌包中央，并于温度为17℃、空气湿度为52%的条件下暗培养25天；去除上半部袋子，在温度为19℃、空气湿度为84%的白光光照培养30天至金耳成熟，即可进行采摘。

实施例5

取淀粉4g，葡萄糖30g，蛋白胨3g，磷酸二氢钾4g，硫酸镁2g，VB11片，搅拌溶解于1L水中，并分装于三角瓶中于121℃灭菌20min后冷却得到液体培养基。在每瓶液体培养基中接种革菌菌种，于25℃摇床培养，发酵5天得到液体菌种。

将玉米芯19份，棉子壳35份，木屑30份，麦麸10份，石膏1份，加水搅拌至含水量为55%后得栽培料。将栽培料装于3cm高盖，540ml塑料组培瓶中，装料装至齐瓶口，中间打一小孔；，再采用温度121℃高压蒸汽灭菌40min后取出冷却；待栽培料降温冷却至25℃时，将金耳的液体菌种接种至小孔内；

液体菌种在23℃、45%空气湿度条件下暗培养菌丝6天后，菌丝萌发并开始吃料，将3块金耳组织块接种于瓶子中央，并于温度为17℃、空气湿度为54%的条件下暗培养21天；去除上半部袋子，在温度为19℃、空气湿度为88%的白光光照培养27天至金耳成熟，即可进行采摘。

实施例6

取淀粉5g，葡萄糖40g，蛋白胨4g，磷酸二氢钾3g，硫酸镁4g，VB 2片，搅拌溶解于1L水中，并分装于三角瓶中于121℃灭菌30min后冷却得到液体培养基。在每瓶液体培养基中接种革菌菌种，于24℃摇床培养，发酵5天得到液体菌种。

将玉米芯21份，棉子壳40份，木屑35份，麦麸15份，石膏1.2份，加水搅拌至含水量为50%后得栽培料。将栽培料装袋于5cm*15cm*55cm香菇菌袋中采用温度121℃高压蒸汽灭菌60mi后取出冷却；待栽培基质降温冷却至27℃时，在栽培袋表面打8个孔，在孔内接入革菌液体菌种后用气胶带封好接种口；液体菌种在24℃、45%空气湿度条件下暗培养菌丝5天后，菌丝萌发并开始吃料，将3块金耳组织块接种于接种孔，并于温度为20℃、空气湿度为56%的条件下暗培养25天；去除上半部袋子，在温度为16℃、空气湿度为80%的白光光照培养25天至金耳成熟，即可进行采摘。

统计实施例1-6栽培的金耳子实体大小差异、出耳率、栽培周期以及一茬转换率。

表1 实施例1-6栽培的金耳出耳率、栽培周期、一茬转换率以及子实体大小情况统计

结论：传统的金耳栽培方法，整个栽培周期长达70-80天，出耳率仅75%左右。从表1可知，本发明金耳栽培周期仅50-60天，较传统方法明显缩短；本发明的出耳率高达98%，一茬转化率高达95%，均优于传统的金耳栽培方法。从表1我们还可以得出，本发明获得的金耳子实体大小均匀，差异度小，品质高。