一种含溶酶菌的虾饲料添加剂及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于饲料领域，具体涉及一种含溶酶菌的虾饲料添加剂及其制备方法和应用。

背景技术

南美白对虾是一种优质的水产动物，在中国占所有虾类养殖总产量的80％。其产量大，经济价值高。但是由于对虾的发病率高，一般较为严重，且持续时间长，会造成巨大经济损失，因此提高南美白对虾的免疫力和存活率至关重要。

溶菌酶(lysozyme)又称胞壁质酶(muramidase)或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶(N-acetylmuramide glycanohydrlase)，是一种能水解细菌中黏多糖的碱性酶。溶菌酶主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡萄糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。其中根据其来源的不同，可以将其分为四类，分别是植物溶菌酶、动物溶菌酶、微生物溶菌酶以及蛋清溶菌酶。

溶菌酶由于其热稳定性强，耐酸性，能经受饲料制粒的高温；且具有广谱抗菌作用，能破坏革兰氏阳性菌的细胞壁，对革兰氏阴性菌等也有一定的溶解作用。而水产动物细胞无细胞壁亦无肽聚糖，故溶菌酶对水产动物细胞无毒性作用，同时溶菌酶可促进生长和提高免疫力，因此溶菌酶可作为一种优良的水产饲料添加剂。然而溶菌酶的价格贵，在水产饲料中大量添加会造成成本的骤增，而添加少量的溶菌酶又无法达到相应的效果。

因此，亟需提供有一种含溶酶菌的南美白对虾饲料添加剂，能够促进南美白对虾生长和提高其免疫力，且成本低。

发明内容

本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种含溶酶菌的虾饲料添加剂，能够促进虾的生长和提高其免疫力，且成本低。

一种含溶菌酶的虾饲料添加剂，包括以下组分：溶菌酶、多糖组合物、葡萄糖氧化酶和花生四烯酸；所述多糖组合物包括苦丁茶多糖。

优选的，所述多糖组合物还包括海藻多糖、黄芪多糖或木耳多糖中的至少两种；进一步优选的，所述多糖还包括海藻多糖、黄芪多糖和木耳多糖；更优选的，在所述多糖组合物中，苦丁茶多糖、海藻多糖、黄芪多糖和木耳多糖的质量比为(1-2)：(1-2)：(1-2)：(1-2)。

优选的，所述苦丁茶多糖的制备方法如下：取苦丁茶干叶，粉碎，然后用乙醇溶液浸提，过滤，取滤渣烘干，然后水提、浓缩，去蛋白，即得所述苦丁茶多糖。

具体的，所述苦丁茶多糖的制备方法如下：取苦丁茶干叶，粉碎，过80目筛，然后用70％的乙醇溶液浸提48h，过滤，取滤渣烘干，然后用去离子于90-100℃水浴3-4h，然后浓缩，采用氯仿正丁醇混合溶液(体积比为4：l)去蛋白，即得所述苦丁茶多糖。

所述乙醇溶液为75％-85％的乙醇水溶液。

优选的，所述苦丁茶多糖中总糖的含量为40％-60％，糖醛酸的含量为12％-20％，蛋白质的含量为3％-8％。

优选的，所述溶菌酶选自植物溶菌酶、动物溶菌酶、微生物溶菌酶或蛋清溶菌酶中的至少一种；进一步优选的，所述溶菌酶为植物溶菌酶。植物溶菌酶与植物多糖的匹配度更高，因而能产生更好效果。

优选的，所述虾饲料添加剂，还包括填料，按重量份数计，包括以下组分：

进一步优选的，所述虾饲料添加剂，按重量份数计，包括以下组分：

优选的，所述填料由羟丙甲纤维素和脂肪酸组成。所述脂肪酸可以为硬脂酸、高度棕榈油、饱和油酸、肉豆蔻酸或月桂酸中的至少一种。

以羟丙甲纤维素和脂肪酸作为填料，可以包覆，隔离各种有效成分，避免溶菌酶、多糖组合物、葡萄糖氧化酶、花生四烯酸之间的相互影响。

一种虾饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：

制备多糖组合物，然后将溶菌酶、多糖组合物、葡萄糖氧化酶、花生四烯酸和填料混合，制粒，即制得所述虾饲料添加剂。

优选的，所述制粒温度为40-60℃。

一种南美白对虾饲料，包括所述虾饲料添加剂，所述虾饲料添加剂的添加量为0.6％-2％。

所述南美白对虾饲料，还包括鱼粉、豆粕、花生粕、动物内脏粉、骨粉、面粉、磷酸二氢钙、鱼油、大豆磷脂。

苦丁茶富含多酚、黄酮、三萜类、皂苷和多糖等生理活性物质，具有抑菌、抗氧化、抗衰老、预防心血管疾病、增强免疫力等诸多功效；其中苦丁茶多糖作为重要成分，具有抑菌、增强免疫力的作用。

通过向溶菌酶中添加含苦丁茶多糖的多糖组合物，共同作用，使二者的抑菌能力和增强免疫力的作用得到提升，而花生四烯酸和溶菌酶，则进一步提高溶菌酶和苦丁茶多糖的抗菌性能和稳定性能。

相对于现有技术，本发明的有益效果如下：

通过添加本发明所述的饲料添加剂，可以提高南美白对虾的免疫力，南美白对虾生长良好、成活率高；且溶菌酶占饲料总质量的比例大大减小，能有效控制饲料原料的成本。

具体实施方式

为了让本领域技术人员更加清楚明白本发明所述技术方案，现列举以下实施例进行说明。需要指出的是，以下实施例对本发明要求的保护范围不构成限制作用。

以下实施例中所用的原料、试剂或装置如无特殊说明，均可从常规商业途径得到，或者可以通过现有已知方法得到。

实施例1

一种虾饲料添加剂，由以下组分组成：

其中，苦丁茶多糖的制备方法如下：取苦丁茶干叶，粉碎，过80目筛，然后用75％的乙醇溶液浸提48h，过滤，取滤渣烘干，然后用去离子于90℃水浴4h，然后浓缩，采用氯仿正丁醇混合溶液(体积比为4：l)去蛋白，制得苦丁茶多糖。经测定，苦丁茶多糖中总糖的含量为50％，糖醛酸的含量为16％，蛋白质的含量为5％。

实施例2

一种虾饲料添加剂，由以下组分组成：

其中，苦丁茶多糖的制备方法如下：取苦丁茶干叶，粉碎，过80目筛，然后用75％的乙醇溶液浸提48h，过滤，取滤渣烘干，然后用去离子于90℃水浴4h，然后浓缩，采用氯仿正丁醇混合溶液(体积比为4：l)去蛋白，制得苦丁茶多糖。经测定，苦丁茶多糖中总糖的含量为50％，糖醛酸的含量为16％，蛋白质的含量为5％。

实施例3

一种虾饲料添加剂，由以下组分组成：

其中，苦丁茶多糖的制备方法如下：取苦丁茶干叶，粉碎，过80目筛，然后用75％的乙醇溶液浸提48h，过滤，取滤渣烘干，然后用去离子于90℃水浴4h，然后浓缩，采用氯仿正丁醇混合溶液(体积比为4：l)去蛋白，制得苦丁茶多糖。经测定，苦丁茶多糖中总糖的含量为50％，糖醛酸的含量为16％，蛋白质的含量为5％。

实施例4

一种虾饲料添加剂，由以下组分组成：

其中，苦丁茶多糖的制备方法如下：取苦丁茶干叶，粉碎，过80目筛，然后用乙醇浸提48h，过滤，取滤渣烘干，然后用去离子于100℃水浴4h，然后浓缩，制得苦丁茶多糖。经测定，苦丁茶多糖中总糖的含量为46％，糖醛酸的含量为22％，蛋白质的含量为15％。

实施例5

一种虾饲料添加剂，由以下组分组成：

其中，苦丁茶多糖的制备方法如下：取苦丁茶干叶，粉碎，过80目筛，然后用70％的乙醇溶液浸提48h，过滤，取滤渣烘干，然后用去离子于90℃水浴4h，然后浓缩，采用氯仿正丁醇混合溶液(体积比为4：l)去蛋白，制得苦丁茶多糖。经测定，苦丁茶多糖中总糖的含量为50％，糖醛酸的含量为16％，蛋白质的含量为5％。

实施例6

一种虾饲料添加剂，由以下组分组成：

其中，苦丁茶多糖的制备方法如下：取苦丁茶干叶，粉碎，过80目筛，然后用75％的乙醇溶液浸提48h，过滤，取滤渣烘干，然后用去离子于90℃水浴4h，然后浓缩，采用氯仿正丁醇混合溶液(体积比为4：l)去蛋白，制得苦丁茶多糖。经测定，苦丁茶多糖中总糖的含量为50％，糖醛酸的含量为16％，蛋白质的含量为5％。

按实施例1-6的配方称量各组分，混合，制粒，制粒温度为45℃，制得虾饲料添加剂。

实施例7-14

按表1的配方，制备南美白对虾饲料。

表1南美白对虾饲料的配方

对比例1

在对比例1中，采用等量海藻多糖替代苦丁茶多糖，其他配方与制备方法同实施例1，制得饲料添加剂A，然后用饲料添加剂A替换实施例7的饲料添加剂，其余配方不变，制得南美白对虾饲料。

对比例2

在对比例2中，采用1份植物溶菌酶和2份花生四烯酸替代葡萄糖氧化酶，其他配方与制备方法同实施例1，制得饲料添加剂B，然后用饲料添加剂B替换实施例7的饲料添加剂，其余配方不变，制得南美白对虾饲料。

对比例3

市售普通含溶菌酶的饲料。

产品效果测试

采用实施例7-14，对比例1-3制得的饲料对南美白对虾进行养殖试验，养殖试验采用500L养殖桶，每种饲料设置三个平行试验，初始饲养密度为40尾/桶，饲养60天。

养殖试验结束后，测定增重率、饲料系数、存活率、蛋白质效率，各指标计算公式如下：

增重率(％)＝100％×(终末均重-初始均重)/初始均重；

存活率(％)＝100％×试验结束时活虾尾数/试验开始时放虾尾数；

饲料系数＝饲料投喂量/(终末均重-初始均重)；

蛋白质效率＝(终末总重-初始总重)/蛋白质摄取量；

试验结果如表1所示：

表1

由表1可知，采用实施例7-14制得的饲料喂养南美白对虾，其存活率、增重率等明显高于对比例1-3喂养的南美白对虾。由实施例13与对比例3比较可知，当溶菌酶在饲料中占比仅为0.15％时，所饲喂的南美白的存活率、增重率仍略高于对比例3含溶菌酶的普通饲料(溶菌酶在饲料中占比约为2％)，可见本发明的饲料溶菌酶含量为0.15％时，就能提高虾的免疫水平和生长状况，可以大大降低溶菌酶的使用，降低成本，同时促进南美白对虾的生长。