烟酰胺腺嘌呤二核苷酸前体在制备免疫检查点抑制剂抗肿瘤增敏药物中的应用

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体地说，是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD

背景技术

近几年，免疫检查点抑制剂改善晚期肺癌、黑色素瘤、肾癌、霍奇金淋巴瘤等患者的生存方面取得了重大进展(文献：Ribas A,Wolchok JD.Cancer immunotherapy usingcheckpoint blockade.Science,2018,359:1350-1355.)。其中以程序性细胞死亡受体1(PD-1)或配体(PD-L1)为靶点的免疫检查点抑制剂因其显著临床疗效而备受关注，包括抗PD-1抗体：纳武单抗(Opdivo)和派姆单抗(Keytruda)、抗PD-L1抗体：阿替利珠单抗和度伐单抗等。虽然免疫检查点抑制剂在临床应用中取得了明显的治疗效果，但是在实体瘤中的有效率低是其非常突出的局限性。因此，寻找行之有效的疗效预测标志是提高肿瘤免疫治疗效果和推进肿瘤精准免疫治疗的重要方法(文献：Gibney GT,Weiner LM,AtkinsMB.Predictive biomarkers or checkpoint inhibitor-based immunotherapy.Lancetoncol.,2016,17:e542-e551)。越来越多的证据表明，PD-L1高表达的肿瘤癌患者能从抗PD-1/PD-L1抗体治疗中获得更好的疗效(文献：Reck M,Rodríguez-Abreu D,Robinson AG,HuiR,

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD

发明内容

本发明的目的在于提供烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD

为了实现上述目的，本发明的第一方面，提供烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD

本发明的第二方面，提供烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD

本发明的第三方面，提供烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD

进一步的，所述的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD

进一步的，所述的免疫检查点抑制剂为以程序性细胞死亡受体1(PD-1)或配体(PD-L1)为靶点的免疫检查点抑制剂；包括抗PD-1抗体：纳武单抗(Opdivo)和派姆单抗(Keytruda)、抗PD-L1抗体：阿替利珠单抗和度伐单抗等。

进一步的，所述的肿瘤为胰腺癌、肺癌、肝癌、黑色素瘤等。

更进一步的，所述的肿瘤为原发性免疫治疗耐受性胰腺癌、肺癌、肝癌、黑色素瘤。

更进一步的，所述的肿瘤为继发性免疫治疗耐受性胰腺癌、肺癌、肝癌、黑色素瘤。

本发明的第四方面，提供烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD

本发明的第五方面，提供一种抗肿瘤药物，包括烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD

本发明从体外细胞培养和体内动物实验两个方面研究发现补充NAD

本发明为NAD

附图说明

图1：实时荧光定量PCR检测小鼠胰腺癌细胞系Pan02(A)、小鼠肺癌细胞系LLC(B)、小鼠肝癌细胞系Hepa1-6(C)和人肝癌细胞系Huh7(D)先经NAD

图2：对照组、单用抗PD-L1抗体组、单用NMN组和NMN+抗PD-L1抗体组之间肿瘤体积的比较；其中A为免疫治疗耐受性胰腺癌，B为免疫治疗耐受性肺癌。实验数据用平均值土标准差(mean±SD)表示。**表示p值<0.01，***表示p值<0.001。

图3：继发免疫治疗耐受肝癌模型中对照组、单用抗PD-L1抗体组、单用NMN组和NMN+抗PD-L1抗体组之间肿瘤体积的比较。实验数据用平均值土标准差(mean±SD)表示。***表示p值<0.001。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明提供的具体实施方式作详细说明。

实施例1：体外补充NAD

实验方法：将处于对数生长期的小鼠胰腺癌细胞系Pan02、小鼠肺癌细胞系LLC、小鼠肝癌细胞系Hepa1-6和人肝癌细胞系Huh7接种于六孔细胞培养板中，待细胞密度长至约50％，分别添加0.5-1mM的NAM或NMN，对照组添加等量水溶剂，处理24小时后，再添加100ng/ml的干扰素γ或等量的对应溶剂作为对照，最后刺激24小时后，收集细胞RNA，检测PD-L1转录水平的变化。

结果：如图1A-D所示，添加100ng/ml的干扰素γ后，预先补充NAD

实施例2：补充NAD

实验方法：1×10

结果：如图2A和B所示，分组治疗两周后，仅用抗PD-L1抗体组与对照组相比无明显差别，说明该肿瘤模型对抗PD-L1抗体治疗不敏感，而NMN与抗PD-L1抗体联用可以明显抑制肿瘤生长，导致肿瘤体积变小，说明NMN可以增强抗PD-L1抗体对原发性免疫治疗耐受性胰腺癌和肺癌的杀伤作用。

实施例3：补充NAD

实验方法：1×10

结果：如图3所示，分组治疗两周后，仅用抗PD-L1抗体组与对照组相比无明显差别，说明该肿瘤模型对抗PD-L1抗体治疗不敏感，而NMN与抗PD-L1抗体联用可以明显抑制肿瘤生长，导致肿瘤体积变小，说明NMN可以增强抗PD-L1抗体对继发性免疫治疗耐受性肝癌的杀伤作用。

以上已对本发明创造的较佳实施例进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明创造精神的前提下还可做出种种的等同的变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。