一种培养食线虫真菌的液体培养基

技术领域

本发明涉及真菌培养技术领域，具体涉及一种培养食线虫真菌的液体培养基。

背景技术

目前食线虫真菌培养大多采用固相培养基，如马铃薯、玉米粉琼脂等，而液体培养基主要采用如马铃薯汁、酵母浸出物、蛋白胨、葡萄糖及微量盐制成的各种培养基。其中，用马铃薯汁制成的液体培养基较浑浊难于观察；用酵母浸出物等制成的人工复合培养基，较适用于细菌生长，虽然真菌也可以生长，但其成本昂贵，同时由于营养高易于造成细菌和其它微生物的污染。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种培养食线虫真菌的液体培养基，真菌生长快，菌丝产量高，且易于观察。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

一种培养食线虫真菌的液体培养基，由青稞汁、大豆皮浸出液、蔗糖、水混配而成。

进一步地，由以下质量百分比的原料混配而成：

青稞汁2～3％、大豆皮浸出液1～2％、蔗糖2％、余量水。

优选地，由以下质量百分比的原料混配而成：

青稞汁2％、大豆皮浸出液2％、蔗糖2％、余量水。

优选地，由以下质量百分比的原料混配而成：

青稞汁3％、大豆皮浸出液1％、蔗糖2％、余量水。

优选地，由以下质量百分比的原料混配而成：

青稞汁2.5％、大豆皮浸出液1.5％、蔗糖2％、余量水。

本发明还提供了上述一种培养食线虫真菌的液体培养基的制备方法，包括如下步骤：

S1、取适量青稞，脱皮后，置于汽爆罐内，先通入氮气至汽爆罐内压力为1～2MPa，爆破处理10～25min；然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为2～3MPa，蒸汽爆破处理1～2.5min后，瞬间恢复至常压，静置至室温，中空纤维超滤膜过滤，得青稞汁；

S2、取适量干燥的大豆皮粉碎至200目后，加入5倍量的水，搅拌状态下，微火煮沸1h后，用纱布过滤，滤液迅速冷冻后再自然解冻，使滤液中的淀粉老化沉淀，收集上清液，剩余部分离心，收集离心液体并合并于上清液中，得大豆皮浸出液；

S3、按质量百分比称取：青稞汁3％、大豆皮浸出液1％、蔗糖2％、余量水；

S4、将称取的青稞汁、大豆皮浸出液混合后，加热至60℃左右，加入称取的蔗糖，搅拌至蔗糖完全溶解，滤纸过滤，加水，分装，高压灭菌，即得。

本发明具有以下有益效果：

适用于食线虫真菌的生长，该液体培养基略带浅绿色，透明、清亮，易于观察，真菌生长快，菌丝产量高。实验证明，本发明的培养食线虫真菌的液体培养基菌丝产量的干重最高可达到0.0197±0.0036g/ml。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明的保护范围。

实施例1

一种培养食线虫真菌的液体培养基，通过以下方法制备所得：

S1、取适量青稞，脱皮后，置于汽爆罐内，先通入氮气至汽爆罐内压力为1～2MPa，爆破处理10～25min；然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为2～3MPa，蒸汽爆破处理1～2.5min后，瞬间恢复至常压，静置至室温，中空纤维超滤膜过滤，得青稞汁；

S2、取适量干燥的大豆皮粉碎至200目后，加入5倍量的水，搅拌状态下，微火煮沸1h后，用纱布过滤，滤液迅速冷冻后再自然解冻，使滤液中的淀粉老化沉淀，收集上清液，剩余部分离心，收集离心液体并合并于上清液中，得大豆皮浸出液；

S3、按质量百分比称取：青稞汁2％、大豆皮浸出液2％、蔗糖2％、余量水；

S4、将称取的青稞汁、大豆皮浸出液混合后，加热至60℃左右，加入称取的蔗糖，搅拌至蔗糖完全溶解，滤纸过滤，加水，分装，高压灭菌，即得。

实施例2

一种培养食线虫真菌的液体培养基，通过以下方法制备所得：

S1、取适量青稞，脱皮后，置于汽爆罐内，先通入氮气至汽爆罐内压力为1～2MPa，爆破处理10～25min；然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为2～3MPa，蒸汽爆破处理1～2.5min后，瞬间恢复至常压，静置至室温，中空纤维超滤膜过滤，得青稞汁；

S2、取适量干燥的大豆皮粉碎至200目后，加入5倍量的水，搅拌状态下，微火煮沸1h后，用纱布过滤，滤液迅速冷冻后再自然解冻，使滤液中的淀粉老化沉淀，收集上清液，剩余部分离心，收集离心液体并合并于上清液中，得大豆皮浸出液；

S3、按质量百分比称取：青稞汁3％、大豆皮浸出液1％、蔗糖2％、余量水；

S4、将称取的青稞汁、大豆皮浸出液混合后，加热至60℃左右，加入称取的蔗糖，搅拌至蔗糖完全溶解，滤纸过滤，加水，分装，高压灭菌，即得。

实施例3

一种培养食线虫真菌的液体培养基，通过以下方法制备所得：

S1、取适量青稞，脱皮后，置于汽爆罐内，先通入氮气至汽爆罐内压力为1～2MPa，爆破处理10～25min；然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为2～3MPa，蒸汽爆破处理1～2.5min后，瞬间恢复至常压，静置至室温，中空纤维超滤膜过滤，得青稞汁；

S2、取适量干燥的大豆皮粉碎至200目后，加入5倍量的水，搅拌状态下，微火煮沸1h后，用纱布过滤，滤液迅速冷冻后再自然解冻，使滤液中的淀粉老化沉淀，收集上清液，剩余部分离心，收集离心液体并合并于上清液中，得大豆皮浸出液；

S3、按质量百分比称取：青稞汁2.5％、大豆皮浸出液1.5％、蔗糖2％、余量水；

S4、将称取的青稞汁、大豆皮浸出液混合后，加热至60℃左右，加入称取的蔗糖，搅拌至蔗糖完全溶解，滤纸过滤，加水，分装，高压灭菌，即得。

对食线虫真菌3个属的22个分离株做振摇培养试验，结果表明，本发明的液体培养基适用于食线虫真菌的生长，真菌生长快，菌丝产量高，菌丝产量的干重最高可达到0.0197±0.0036g/ml。

以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变化或修改，这并不影响本发明的实质内容。在不冲突的情况下，本申请的实施例和实施例中的特征可以任意相互组合。