一种从仙茅中提取仙茅苷的方法

技术领域

本发明涉及化学成分分离纯化技术领域，具体涉及一种从仙茅中提取仙茅苷的方法。

背景技术

仙茅(Curculigo orchioides Gaertn)为仙茅科仙茅属多年生草本植物，其药用部位为根状茎。仙茅根茎呈圆柱形，长3～10cm，直径0.4～0.8cm，表面呈黑褐色或棕褐色，且粗糙，有纵皱及细孔状的须根痕。根硬而脆，易折断，其断面略呈角质状，近中心处颜色较深。仙茅药用历史悠久，历代文献均有记载。味苦，性温，小毒。有补肾壮阳、益精血、强健筋骨、行血消肿的功效。用于肾虚不足、阳痿遗精、虚痨内伤、腰脊冷痛、寒虚冷泻、带下、小便频数等临床病症。

仙茅主要分布于国内中南、华南及西南等地区，也分布东南亚各国。全世界约有20余种仙茅属植物，主要分布于亚洲、非洲以南及南美洲等地。在中国有七种仙茅植物，主要产自广西、四川、云南贵州等地。

仙茅成分复杂，主要含有仙茅苷、仙茅皂苷、仙茅素、苔黑酚葡萄糖苷等，按化学成分分类主要包括酚、酚苷类，酚苷类又包括苯甲酸醋类衍生物、苔黑酚苷类和氯苯酚类衍生物。现代药理研究表明，仙茅具有抗骨质疏松、免疫调节、促进乳腺发育、抗氧化作用、保巧心脑血管系统、抑菌、补肾壮阳及延缓生殖系统老化等作用，被广泛应于药品和保健食品中。

仙茅苷是多酚中的糖苷类化合物，从仙茅根茎中提取获得，和其他的多酚类化合物相似，现代研究表明仙茅苷与仙茅药理活性密切相关。目前仙茅苷主要通过加热提取、膜分离、树脂纯化、萃取、重结晶等方法处理，例如CN 102344471 A，CN 103203122 A等专利，上述方法具有工艺复杂、操作不方便、周期长、效率低等缺点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种采用高效制备液相分离纯化仙茅苷的方法，该方法制备的仙茅苷具有工艺简单、操作方便、周期短、效率高等特点。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种从仙茅中提取仙茅苷的方法，由下述步骤组成：

(1)提取：取仙茅药材粉碎，加10～15倍量的乙醇溶液，80℃～85℃下加热回流提取2～3次，每次1～2小时，粗滤后得仙茅粗提液；

(2)浓缩干燥：将上述过滤后的提取液减压真空浓缩干燥；

(3)制备纯化：取干燥后的提取物加入20～30倍量20％～30％乙腈，过0.22μm微孔滤膜后上制备液相；

(4)馏分收集：收集仙茅苷馏分；

(5)浓缩干燥：将上述收集的馏分减压真空浓缩干燥,温度55-65℃。

优选的，所述步骤(1)中乙醇溶液的浓度为80％～85％。

优选的，所述步骤(2)中干燥温度为50-55℃。

优选的，所述步骤(3)中色谱柱为：C18反相色谱柱，具体色谱条件为：流动相为乙腈：0.1％冰醋酸进行梯度洗脱，流速15-25mL/min，检测波长282-290nm,柱温25-30℃

优选的，所述梯度洗脱条件为：

优选的，所述步骤(5)中干燥温度为55-65℃。

本发明与现有技术相比，具有以下优点：

一、工艺简单，生产周期短：仙茅苷常规工艺，提取后需要先进行大孔树脂进行吸附除杂再进行后续处理。而本发明将仙茅提取液直接浓缩干燥后上制备液相进行分离纯化，从而得到高纯度的仙茅苷，同时达到了简化工艺、缩短周期的目的，与常规工艺比较，缩短了近7个工作日时间。

二、高转移率：仙茅苷常规工艺，需要将仙茅提取液浓缩后经过大孔树脂纯化、萃取结晶等操作，仙茅苷损耗较大，而本发明将仙茅提取液浓缩干燥后直接上高效制备液相进行分离纯化，提高了仙茅苷的转移率，得率为0.3％～0.5％，收率为85％～86％。

三、产物纯度高：仙茅提取物经过高效制备液相分离纯化，得到高纯度的仙茅苷单体(纯度大于90％)。

具体实施方式

下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

(1)提取：取100g仙茅药材，加82％乙醇提取2次，每次加1000mL，80℃下提取2小时，滤网粗滤，收集并合并滤液；

(2)浓缩干燥：将上述提取液53℃减压浓缩干燥，得到提取物7.2g；

(3)制备纯化：取干燥后的提取物适量加入20倍量20％乙腈超声溶解，过微孔滤膜后上制备液相，色谱柱为：C18反相色谱柱，具体色谱条件为：流动相为乙腈：0.1％冰醋酸按照下表梯度洗脱，流速15mL/min，检测波长282nm，柱温25℃；

(4)馏分收集：收集仙茅苷馏分；

(5)浓缩干燥：将上述收集的馏分减压真空浓缩干燥,温度55℃，仙茅苷得率分别为0.35％，收率为85.3％，纯度为92.3％。

实施例2

(1)提取：取100g仙茅药材，加80％乙醇提取2次，每次加1200mL，82℃下提取2小时，滤网粗滤，收集并合并滤液；

(2)浓缩干燥：将上述提取液50℃减压浓缩干燥，得到提取物8.0g；

(3)制备纯化：取干燥后的提取物适量加入25倍量25％乙腈超声溶解，过微孔滤膜后上制备液相，色谱柱为：C18反相色谱柱，具体色谱条件为：流动相为乙腈：0.2％冰醋酸按照下表梯度洗脱，流速20mL/min，检测波长285nm，柱温30℃。

(4)馏分收集：收集仙茅苷馏分；

(5)浓缩干燥：将上述收集的馏分减压真空浓缩干燥,温度50℃，仙茅苷得率为0.41％，收率为85.5％，纯度为92.5％。

实施例3

(1)提取：取100g仙茅药材，加85％提取3次，每次加1500mL，80℃下提取1小时，滤网粗滤，收集并合并滤液；

(2)浓缩干燥：将上述提取液55℃减压浓缩干燥，得到提取物8.9g；

(3)制备纯化：取干燥后的提取物适量加入30倍量30％乙腈超声溶解，过微孔滤膜后上制备液相，色谱柱为：C18反相色谱柱，具体色谱条件为：流动相为乙腈：0.1％冰醋酸按照下表梯度洗脱，流速25mL/min，检测波长290nm，柱温35℃。

(4)馏分收集：收集仙茅苷馏分；

(5)浓缩干燥：将上述收集的馏分减压真空浓缩干燥,温度65℃，仙茅苷得率分别为0.45％，收率为85.6％，纯度为92.8％。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。