一种中药掩味复合物、制剂及制备方法

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种中药掩味复合物、制剂及制备方法。

背景技术

众所周知，口服药物，特别是中药口服药物绝大部分具有苦味，导致患者的顺应性极差，目前，常见的苦味中药，大部分为生物碱类(如小檗碱、奎宁等)、萜类(如穿心莲内酯等)和黄酮糖苷类(如苦杏仁苷、连翘苷、槲皮素等)，这些苦味中药在服用时，会与味觉细胞表面苦味受体TAS2R结合，受到刺激的味觉细胞膜去极化，并将兴奋最终传导至大脑中央的味觉神经中枢整合产生苦味感知。

目前常用的苦味药物的掩味技术有薄膜包衣、添加矫味剂和环糊精包合等方法，但这些方法均存在不足，①通过薄膜包衣进行掩味，仅能对片剂进行包衣，对于儿童用药及难以分剂量的药物，该方法不适用；②通过添加矫味剂的方式进行掩味，对极苦药物效果较差，尤其对于苦味极为敏感的人，顺应性仍较差；③以环糊精为代表的高分子材料作为掩味剂，其对苦味药物的结构有极高的选择性，仅结构合适的苦味药物能够被成功包合，且环糊精的使用剂量过大进而导致腹泻和软便。

壳聚糖是一种阳离子聚合物，其具有良好的生物相容性和可降解性，且在口腔环境中几乎不溶，而在胃酸环境中可迅速溶解并释放药物，这些特性使得其作为一种很好的掩味材料而被大家广泛认可。然而，目前壳聚糖作为药物掩味材料的报道大多是作为包衣材料或物理屏障实现对苦味药物的掩味，而将壳聚糖作为分子掩味材料，从分子结构上对中药苦味成分进行掩味，目前未见文献或相关专利的报道。因此开发一种采用壳聚糖从分子水平上对苦味中药成分进行掩味的技术，特别是适合多种苦味中药成分混合的掩味技术，解决患者尤其是儿童患者用药适口性难题，具有重大挑战。

发明内容

本发明的第一目的在于提供适合一种或多种苦味中药成分混合的掩味复合物，解决难以对苦味中药成分或多种苦味中药组合成分进行掩味的技术性难题；本发明的第二目的在于提供一种适合儿童用药的掩味制剂，解决儿童患者用药顺应性差，吃药难的问题。

为了实现本发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明的第一个方面，提供一种中药掩味复合物，所述复合物包括：苦味中药、掩味剂、辅剂和溶剂，所述苦味中药为黄酮糖苷类药物和/或生物碱类药物，所述掩味剂包括壳聚糖。

优选地，所述黄酮糖苷类药物选自连翘苷、黄芩苷、苦杏仁苷、槲皮素和芦丁中的一种或多种；所述生物碱类药物选自小檗碱、咖啡因、奎宁和麻黄碱中的一种或多种。

优选地，所述辅剂包括氢氧化钠溶液或三聚磷酸钠溶液，氢氧化钠溶液的质量分数为8-10％，三聚磷酸钠溶液的浓度为1.0-2.0mg/ml。

优选地，所述复合物还包括溶剂，所述溶剂包括体积百分比为0.5％-2％的醋酸，

优选地，优选地，以单味苦味中药计,

单味苦味中药：壳聚糖：氢氧化钠溶液为20-80：30-50：5-30，比例关系为mg：mg：mL，优选的，20-80：30-50：15；

或，

单味苦味中药：壳聚糖：三聚磷酸钠溶液为20-50：100-500：5，比例关系为mg：mg：mL。

若为两种或多种中药，掩味剂，辅剂和溶液按比例倍数增加，例如若单味中药为80mg，壳聚糖为30mg,氢氧化钠溶液15mL；则两味中药为160mg，壳聚糖为60mg,氢氧化钠溶液为30mL。

本发明的第二个方面，提供一种中药掩味复合物的制备方法，所述制备方法包括：

S1，将掩味剂与溶剂混合，制备掩味剂溶液；

S2，将苦味中药与掩味剂溶液混合，制得苦味中药-掩味剂溶液；

S3，将苦味中药-掩味剂溶液与辅剂溶液混合，制备成中药掩味复合物。

优选地，所述辅剂为氢氧化钠溶液时，S3具体步骤为，

S3，将制得的苦味中药-掩味剂溶液滴入氢氧化钠溶液中得到掩味复合物混悬液，经固化、干燥，制备成中药掩味复合物；

所述固化时间为30-90min；

苦味中药-掩味剂溶液滴入氢氧化钠溶液中的速度为1.0-3.0mg/mL·min。

优选地，所述辅剂为三聚磷酸钠溶液时，S2和S3的具体步骤为，

S2，取苦味中药，加入冰醋酸溶解，制得苦味中药溶液，将苦味中药溶液加入掩味剂溶液中，混合均匀，制得苦味中药-掩味剂溶液；所述溶解的温度为40℃；

S3，将三聚磷酸钠溶液滴加到苦味中药-掩味剂溶液中，混合均匀，干燥后制得中药掩味复合物；所述滴加的速度为1.0-3.0mg/mL·min。

优选地，所述干燥为真空干燥或喷雾干燥，所述喷雾干燥入口温度120℃，喷头直径0.7mm，泵速30％。

本发明的第三个方面提供了第二方面所述制备方法制备得到的掩味复合物，所述复合物包括：苦味中药、掩味剂、辅剂和溶剂，所述苦味中药为黄酮糖苷类药物和/或生物碱类药物，

优选地，所述掩味剂包括壳聚糖。

优选地，所述黄酮糖苷类药物选自连翘苷、黄芩苷、苦杏仁苷、槲皮素和芦丁中的一种或多种；所述生物碱类药物选自小檗碱、咖啡因、奎宁和麻黄碱中的一种或多种。

苦味中药可为连翘苷和小檗碱，或连翘苷、黄芩苷、苦杏仁苷，或小檗碱、咖啡因，苦味中药不限于一种，在此不一一举例。

优选地，所述辅剂包括氢氧化钠溶液或三聚磷酸钠溶液，所述溶剂包括体积百分比为0.5％-2％的醋酸，

氢氧化钠溶液或三聚磷酸钠溶液分为为氢氧化钠或三聚磷酸钠的水溶液形式。

优选地，所述中药掩味复合物单味药配比为：

单味苦味中药：壳聚糖：氢氧化钠溶液为4:6:1-8:5:3，比例关系为mg：mg：mL，

该氢氧化钠溶液的质量分数为8-10％，

或，

单味苦味中药：壳聚糖：三聚磷酸钠溶液为4:20:1-10:100:1，比例关系为mg：mg：mL。

若为两种或多种中药，掩味剂，辅剂和溶液按比例倍数增加。

本发明的第四个方面提供一种中药掩味制剂，有效成分为上述所述的中药掩味复合物的混悬液，所述配制混悬液的溶剂包括但不限于纯净水，所述中药掩味制剂SD大鼠(200±10g)给药剂量为20-30mg/kg。

本发明的有益效果：

1.本发明通过使用壳聚糖进行掩味，弥补现有技术中未使用壳聚糖对苦味中药进行掩味的缺陷，通过实验进一步验证壳聚糖对苦味中药掩味机理是组分之间的弱氢键作用实现从分子水平的掩味，弥补目前掩味技术中包衣仅能对片剂掩味、环糊精包合对药物分子结构要求较高、物理包封难以实现对多种苦味药物组分的掩味以及矫味剂掩味难以对极苦药物进行掩味等不足。

2.本发明中的掩味剂壳聚糖可同时对多种苦味中药组分同时进行掩味，这是现有掩味技术无法实现的。

3.将壳聚糖掩味复合物混悬于纯净水中进一步制成中药口服液，可以实现对单一极苦药物或多种苦味药物混合组分的有效掩味，改善服用极苦中药的患者，尤其对于苦味极为敏感的儿童患者，顺应性差的难题。

附图说明

图1为本发明中连翘苷-壳聚糖复合物及连翘苷原料药电子舌测试主成分分析处理图，主成分在X轴上区分开(相离距离越远，掩味效果越好)代表掩味效果良好；

图2为本发明中连翘苷-壳聚糖复合物及连翘苷原料药人体味觉评价结果；

图3为本发明中小檗碱-壳聚糖复合物及小檗碱原料药电子舌测试主成分分析处理图，主成分在X轴上区分开(相离距离越远，掩味效果越好)代表掩味效果良好；

图4为本发明中小檗碱-壳聚糖复合物及小檗碱原料药人体味觉评价结果；

图5为本发明中连翘苷小檗碱-壳聚糖复合物及连翘苷小檗碱原料药电子舌测试主成分分析处理图，主成分在X轴上区分开(相离距离越远，掩味效果越好)代表掩味效果良好；

图6为本发明中连翘苷小檗碱-壳聚糖复合物及连翘苷小檗碱原料药人体味觉评价结果；

图7为本发明中奎宁-壳聚糖复合物及奎宁原料药人体味觉评价结果；

图8为本发明中槲皮素-壳聚糖复合物及槲皮素原料药人体味觉评价结果；

图9为本发明利用Materials Studio软件模拟壳聚糖与苦味中药的结合，圈出部分为模拟苦味药物与壳聚糖所形成的氢键：A)连翘苷；B)小檗碱；C)芦丁；D)槲皮素；E)黄芩苷；F)苦杏仁苷；

图10为本发明连翘苷-壳聚糖掩味复合物的傅里叶变换红外光谱图，由上至下谱图依次为连翘苷-壳聚糖复合物、空白复合物、壳聚糖、连翘苷及空白复合物1:1物理混合物以及连翘苷谱图；

图11为本发明小檗碱-壳聚糖掩味复合物的傅里叶变换红外光谱图，由上至下谱图依次为小檗碱-壳聚糖复合物、空白复合物、壳聚糖、小檗碱及空白复合物1:1物理混合物以及小檗碱谱图；

图12为本发明中利用Discovery Studio软件模拟壳聚糖/苦味药物与苦味受体蛋白结合方式：A)连翘苷；B)小檗碱；C)壳聚糖；

图13为本发明中连翘苷-壳聚糖复合物体外释放曲线；

图14为本发明中小檗碱-壳聚糖复合物体外释放曲线。

具体实施方式

为了便于理解，以下将通过具体的实施例及附图，对本发明的壳聚糖掩味制剂进行详细地描述。通过这些示例性说明，本发明的特点和优点将变得更为清楚明确。需要特别指出的是，具体实例和附图仅是为了说明，显然本领域的普通技术人员可以根据本文说明，在本发明的范围内对本发明做出各种各样的修正和改变，这些修正和改变也纳入本发明的范围内。

申请人列举下述实施例用以说明本发明的创造性劳动成果

实施例1连翘苷-壳聚糖掩味复合物的制备及苦味评价

具体制备过程：

S1，按表1称取30-50mg壳聚糖，在3mL体积百分比为1％的醋酸溶液中溶解，室温下磁力搅拌30min使其溶解，即得壳聚糖溶液；

S2，将20-80mg连翘苷与3mL壳聚糖溶液混合，室温磁力搅拌30min充分混匀，得含有连翘苷的壳聚糖溶液；

S3，将含有连翘苷的壳聚糖溶液以1.5mL/min的流速从注射器中滴入经磁力搅拌质量分数10％氢氧化钠溶液5-30mL中后，磁力搅拌，使产生的复合物固化60min，2500r/min离心5min，并在真空干燥器中干燥96小时，制成连翘苷壳掩味复合物。

结合率测定：称取相当于18mg连翘苷的连翘苷-壳聚糖复合物粉末于10mL容量瓶中，加入甲醇至刻度并定容，得混悬液。量取2mL混悬液，以8000r/min的转速在离心机上离心10min，待离心完成以后，吸取上清液100μL，甲醇稀释到1mL。HPLC法测定上清液中未结合的游离药物的量，计算结合率，结果见表1，表1连翘苷-掩味复合物结合率

/>

电子舌进行苦味评价：称取18mg连翘苷以及相当于18mg连翘苷的复合物(本着掩味辅料量最少而被掩味的苦味药物量最大的原则，选取样品6作为掩味评价对象进行掩味评价，平行取样3份)分别于40mL纯化水中，传感器达到平衡条件后，开始测试120秒。之后将传感器置于纯化水中清洗，根据清洗时信号曲线清洗1-6次，平行测定三次。电子舌测定掩味结果显示(图1)，与游离药物相比，所制备的壳聚糖掩味复合物对连翘苷具有良好的掩味效果。

人体味觉评价：选择8名年龄在20-35岁的男女健康志愿者，告知试验的目的和意义，但未透露具体的样品信息。向志愿者提供6.75mg连翘苷和相当于6.75mg连翘苷的壳聚糖掩味复合物(样品6)在10mL水中分散15秒。准备完成后，每位志愿者立即将约1mL的分散液放在舌头上保持30秒，然后将其吐出。迅速记录口感情况后，用纯净水漱口三次，等待15分钟待味道全部消失后进行下一样品的苦味评价。使用以下值记录苦味水平：0无味；1微苦；2中度苦味；3强烈的苦味；4非常强烈的苦味。志愿者们按照苦味程度打分来对各样品进行掩味评价。人体味觉评价结果显示(图2)，经过壳聚糖掩味的连翘苷-壳聚糖复合物与连翘苷味道存在显著差异，与电子舌结果相符。

实施例2小檗碱-壳聚糖掩味复合物制备及苦味评价

具体制备步骤：

S1，按表2称取30-50mg壳聚糖，在3mL体积百分比为1％的醋酸溶液中溶解，室温磁力搅拌30min使其溶解，得壳聚糖溶液；

S2，将20-80mg小檗碱与3mL壳聚糖溶液混合，室温磁力搅拌30min充分混匀，得含有小檗碱的壳聚糖溶液；

S3，将含有小檗碱的壳聚糖溶液以1.5mL/min的流速从注射器中滴入经磁力搅拌质量分数10％的氢氧化钠溶液5-30mL中制备复合物。磁力搅拌子轻轻搅拌，使产生的复合物固化60分钟。2500r/min离心5min，并在真空干燥器中干燥96小时，制备小檗碱掩味复合物。

结合率测定：称取相当于16.67mg小檗碱的小檗碱-壳聚糖复合物粉末于10mL容量瓶中，加入甲醇至刻度并定容。量取2mL混悬液，以8000r/min的转速在离心机上离心10min，待离心完成以后，吸取上清液100μL，甲醇稀释到1mL。HPLC测定上清液中未结合的游离药物的量，计算结合率，结果见表2。

表2小檗碱-壳聚糖复合物结合率

电子舌苦味评价：称取40mg小檗碱以及相当于40mg小檗碱的壳聚糖掩味复合物(本着掩味辅料量最少而被掩味的苦味药物量最大的原则，选取样品15作为掩味评价对象进行掩味评价，平行取样3份)分别于40mL纯化水中，按实施例1测定条件，平行测定三次。电子舌测定掩味结果显示(图3)，与游离药物相比，壳聚糖对小檗碱的掩味效果良好。

人体味觉评价：选取与实施例1相同的志愿者，向志愿者提供50mg小檗碱和相当于50mg小檗碱的壳聚糖掩味复合物(样品15)在20mL水中分散15秒。按实施例1操作后，人体味觉评价结果显示(图4)，经过壳聚糖掩味的小檗碱-壳聚糖复合物可明显降低或消除小檗碱的苦味，与电子舌结果相符。

实施例3小檗碱和连翘苷分别与壳聚糖制备掩味复合物制备及苦味评价具体制备过程：

S1：称取60mg壳聚糖，在6mL体积百分比1％的醋酸溶液中溶解，室温磁力搅拌30min使其溶解，得壳聚糖溶液，

S2：将连翘苷80mg及小檗碱80mg分散并与壳聚糖溶液6mL混合，室温磁力搅拌30min充分混合，得含有连翘苷和小檗碱得壳聚糖溶液；

S3：将同时含有连翘苷和小檗碱的壳聚糖溶液以1.5mL/min的流速从注射器中滴入经磁力搅拌质量分数10％的氢氧化钠溶液30mL中，磁力搅拌子轻轻搅拌，使产生的掩味复合物固化60分钟。2500r/min离心5min，并在真空干燥器中干燥96小时。制备连翘苷、小檗碱掩味复合物。

电子舌苦味评价：称取40mg小檗碱和40mg连翘苷混合并同时称取相当于40mg小檗碱和40mg连翘苷的上述壳聚糖掩味复合物分别于40mL纯化水中，按实施例1方法平行测定三次。电子舌测定掩味结果显示(图5)，与游离苦味药物连翘苷和小檗碱的组合物药物相比，壳聚糖对连翘苷和小檗碱苦味组合药物的掩味效果良好。

人体味觉评价：选取与实施例1相同的志愿者，向其提供20mg小檗碱和20mg连翘苷的混合物以及相当于20mg小檗碱和20mg连翘苷的复合物在20mL水中分散15秒，按实施例1操作后，人体味觉评价结果显示(图6)，壳聚糖可以实现对连翘苷和小檗碱苦味组合物的苦味掩盖，与电子舌结果一致。

实施例4奎宁-壳聚糖掩味复合物制备及苦味评价

具体制备过程：

S1：称取30mg壳聚糖，在3mL体积百分比1％的醋酸溶液中溶解，室温磁力搅拌30min使其溶解，得壳聚糖溶液，

S2：将奎宁80mg分散并与壳聚糖溶液3mL混合，室温磁力搅拌30min充分混合，得含有奎宁得壳聚糖溶液；

S3：将含有奎宁的壳聚糖溶液以1.5mL/min的流速从注射器中滴入磁力搅拌的15ml氢氧化钠溶液质量分数10％中制备掩味复合物。磁力搅拌，使产生的掩味复合物固化60分钟。2500r/min离心5min，并在真空干燥器中干燥96小时，制备奎宁掩味复合物。

人体味觉评价：选取与实施例1相同的志愿者，向志愿者提供40mg奎宁和相当于40mg奎宁的复合物在20mL水中分散15秒。按实施例1测定方法，人体味觉评价结果显示(图7)，奎宁-壳聚糖掩味复合物可明显降低或消除奎宁的苦味。

实施例5槲皮素-壳聚糖掩味复合物的制备及苦味评价

具体制备过程：

S1，称取30mg壳聚糖，在3mL体积百分比1％的醋酸溶液中溶解，室温磁力搅拌30min使其溶解，得壳聚糖溶液，

S2，将槲皮素80mg分散并与壳聚糖溶液3mL混合，室温磁力搅拌30min充分混合，得含有槲皮素的壳聚糖溶液；

S3，将含有槲皮素的壳聚糖溶液以1.5mL/min的流速从注射器中滴入经磁力搅拌的15ml氢氧化钠溶液质量分数10％中，缓慢磁力搅拌，使产生的掩味复合物固化60分钟。2500r/min离心5min，并在真空干燥器中干燥96小时，制备槲皮素掩味复合物。

人体味觉评价：选取与实施例1相同的志愿者，向志愿者提供30mg槲皮素和相当于30mg槲皮素的壳聚糖掩味复合物在20mL水中分散15秒。按实施例1的测定方法，人体味觉评价结果显示(图8)，槲皮素-壳聚糖掩味复合物对槲皮素的苦味掩盖效果良好。

实施例6连翘苷-壳聚糖掩味复合物制备(TPP交联剂)

具体制备过程：

S1，将适量壳聚糖溶解于体积百分比1％乙酸水溶液50mL中，连续搅拌30min得质量分数为0.2％-0.8％壳聚糖溶液；

S2，按表3称取连翘苷25-50mg，加入500μL冰醋酸，水浴40℃5min，连翘苷完全溶解；将5-10mg的三聚磷酸钠溶解于5mL纯化水中，形成1.0-2.0mg/ml浓度的溶液，将连翘苷溶液缓慢加入壳聚糖溶液中，得到连翘苷-壳聚糖溶液的混合溶液，并磁力搅拌使其混合均匀。

S3，随后将三聚磷酸钠的溶液以1mL/min滴加到连翘苷-壳聚糖混合液中，滴加完毕后室温磁力搅拌15min，采用喷雾干燥法喷雾干燥制备壳聚糖-连翘苷物的掩味制剂,入口温度120℃，喷头直径0.7mm，泵速30％。表3中的药材比指苦味中药与掩味剂的质量比。

表3连翘苷-壳聚糖复合物结合率

结果显示，本发明采用三聚磷酸钠作为掩味复合物的辅剂，也可以对黄酮糖苷类药物起到一定的掩味效果。

申请人又进一步对中药掩味复合物的掩味机理进行了验证。

首先，申请人从黄酮糖苷类药物中选取连翘苷、黄芩苷、苦杏仁苷、槲皮素和芦丁，从生物碱类药物中选取小檗碱、奎宁为代表药，其中连翘苷和小檗碱是黄酮糖苷类药物和生物碱类药物中的常用药，因此探究壳聚糖对上述药物的掩味机理。

实验步骤：利用Materials Studio分子模拟软件考察连翘苷、小檗碱及其他黄酮糖苷类苦味中药与壳聚糖的结合方式，将苦味中药结构与壳聚糖结构文件导入软件，施加力场模拟苦味中药与壳聚糖结合方式，判断苦味中药与壳聚糖存在的分子间作用力，并计算是否包含氢键。

结果：如图9所示，图中已圈出部分代表壳聚糖与苦味中药分子之间形成了氢键，说明壳聚糖可以通过自身羟基与黄酮糖苷类或生物碱类药物六元环上的氢或氧原子形成氢键，阻碍苦味分子与口腔内苦味受体之间结合，以达到掩味目的。

随后，又分别从黄酮糖苷类药物中选取连翘苷，生物碱类药物中选取小檗碱为代表药，通过红外谱图，进一步探究壳聚糖对苦味中药的掩味机理。

实验步骤：取约2mg苦味中药或壳聚糖-苦味药物复合物和100mg溴化钾，将其研磨均匀后，加压到20MPa压片进行红外测试。波数范围是400-4000cm

结果：如图10所示，连翘苷的特征峰，主要包括属于在3479cm

如图11所示，小檗碱的特征峰主要包括在1455cm

随后，申请人又进行苦味中药与受体结合模拟的验证，选取连翘苷和小檗碱为例。

实验步骤：利用Discovery Studio模拟对接软件模拟连翘苷、小檗碱以及壳聚糖与人体苦味受体TAS2R 10的对接方式。将连翘苷、小檗碱、壳聚糖及人体苦味受体TAS2R 10的结构导入软件中，施加力场模拟苦味药物及壳聚糖与苦味受体的结合过程，并通过软件计算结合能以判断化合物与受体结合的紧密程度。

表4壳聚糖/苦味中药与苦味受体蛋白结合能

结果：对接结果如图12显示。壳聚糖与人体苦味受体TAS2R 10的结合能显著低于连翘苷及小檗碱分子与苦味受体TAS2R 10的结合能(如表4)，由此推断连翘苷以及小檗碱与苦味受体结合更紧密，苦味程度更重

连翘苷-壳聚糖掩味复合物及小檗碱-壳聚糖掩味复合物体外释放实验验证

实验步骤：称取20mg连翘苷或小檗碱以及相当于20mg连翘苷或小檗碱的复合物于500mL锥形瓶中，加入250mLpH为1.2的释放介质，在37℃，120rpm条件下考察连翘苷/小檗碱及其掩味复合物的释放，分别于10min、30min、1h、1.5h、2h及3h取1mL样品溶液，并补充1mL释放介质，HPLC测定药物的累积释放量。

结果：从图13、图14可知，连翘苷-壳聚糖和小檗碱-壳聚糖的掩味复合物在模拟口腔环境中不释放，但在模拟胃酸环境中连翘苷-壳聚糖掩味复合物中连翘苷的体外释放可达到70％，小檗碱-壳聚糖掩味复合物在模拟胃酸环境中小檗碱的体外释放超过50％，且能够快速释放，表明本发明的掩味复合物对苦味药物的掩味效果良好，且不影响其在体内的药物释放。