小花茉莉花蜡和/或小花茉莉净油组合物及应用

技术领域

本发明涉及化妆品技术领域，尤其是涉及小花茉莉花蜡和/或小花茉莉净油组合物及应用。

背景技术

小花茉莉，又名“阿拉伯茉莉”或“中国茉莉”，约含170种化学活性成分，香气浓郁而不乏清灵优雅。现阶段对茉莉花进行利用的方式有：1、观赏价值，室内栽培，制成成花束、花环用于装饰点缀；2、食用价值：将茉莉鲜花干燥后融入到食物、饮品中；3、经济价值：提取茉莉精油、茉莉浸膏或者净油作为香基原料，应用于日化、食品行业。

据Kline咨询公司估计，随着APT(美国石油学会)I类基础油产能萎缩，石油蜡的供货量持续走低，面对持续增长的蜡需求市场，植物蜡作为可持续发展资源在替代石油蜡、合成蜡、动物蜡上有明显的优势，常见的植物蜡有：巴西榈蜡、小烛树蜡、霍霍巴酯、橄榄酯或蓖麻蜡。小花茉莉花蜡作为一种植物蜡，有待进一步的开发和利用。

小花茉莉在我国资源丰富，在广西、福建、云南等省大面积栽培，是主要经济作物之一。主要集中在茶饮以及粗加工精油提取方面，对于其副产物的开发和应用鲜有研究，没有充分利用到其药用价值和经济附加值。关于茉莉花蜡的应用在国内鲜有深入研究，作物小花茉莉提取净油后的副产物茉莉花蜡的应用性不高，一般会被丢弃或者用于制作香氛蜡烛，在彩妆唇膏、口红上有少量应用，市售应用产品极少。茉莉花净油传统上作为香原料同时也可以用于芳香疗愈，主要成分研究集中在挥发油、黄酮类成分及多糖类成分的提取工艺上，关于茉莉花提取产物应用研究较少，缺乏高端产品。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于，将小花茉莉花蜡和/或小花茉莉净油作为核心功能组分用于护肤品或化妆品，期望能够取得延缓和预防皮肤衰老、减缓皱纹生成的效果。

本发明的另一个目的在于，将小花茉莉花蜡和小花茉莉净油与其他组分配合用于制备具有上述功能的护肤品或化妆品。

本发明还有一个目的在于，提供上述护肤品或化妆品的制备方法。

为了解决上述技术问题，实现上述目的，本发明提供以下技术方案：

第一方面，本发明提供小花茉莉花蜡和/或小花茉莉净油在(a)～(d)中任一项的应用：

(a)延缓皮肤衰老；

(b)预防皮肤衰老；

(c)减缓皱纹生成；

(d)制备具有(a)～(c)至少一项功能的护肤品或化妆品。

第二方面，本发明提供了具有前述实施方式所述(a)～(c)至少一项功能的组合物，所述组合物包括小花茉莉花蜡、小花茉莉净油和白池花籽油。

优选地，所述组合物还包括甜杏仁油、紫檀芪或水飞蓟素中的至少一种。

在可选的实施方式中，所述小花茉莉花蜡中含有碳氢化合物、脂肪酸脂类、脂肪醇、游离脂肪酸和甾醇；

所述小花茉莉净油中含有乙酸苄酯、芳樟醇、顺式-3-己烯醇苯甲酸酯和氨茴酸甲酯；

所述白池花籽油中含有二十碳烯酸、二十二碳烯酸和二十二碳二烯酸。

优选地，所述小花茉莉花蜡按照质量比含有碳氢化合物45％～54％、脂肪酸脂类12％～18％、脂肪醇6％～10％、游离脂肪酸6％～10％和甾醇0.2％～2％。

优选地，所述白池花籽油按照质量比含有二十碳烯酸55％～65％、二十二碳烯酸10％～20％和二十二碳二烯酸15％～25％。

在可选的实施方式中，所述甜杏仁油中含有棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸和亚油酸。

优选地，所述甜杏仁油按照质量比含有棕榈酸3.0％～9.0％、棕榈油酸0.1％～1％、硬脂酸0.5％～1.5％、油酸70.0％～75.0％和亚油酸16.0％～25.0％。

在可选的实施方式中，按照质量百分比，所述组合物中小花茉莉花蜡的含量为2％～10％，小花茉莉净油的含量为0.01％～0.2％，白池花籽油的含量为2％～10％。

优选地，小花茉莉花蜡的含量为3.5％，小花茉莉净油的含量为0.1％，白池花籽油的含量为8％；

优选地，所述组合物中甜杏仁油的含量为1％～2％，进一步优选为2％；

优选地，所述组合物中紫檀芪的含量为0.01％～0.5％，进一步优选为0.2％；

优选地，所述组合物中水飞蓟素的含量为0.01％～0.5％,进一步优选为0.2％。

在可选的实施方式中，所述组合物包括(a)或(b)两种形式：

(a)前述实施方式任一项所述组合物含有所有组分混合得到的混合物；

(b)包括分别独立包装的油相A和油相B，所述油相A中含有小花茉莉花蜡和白池花籽油；所述油相B中含有小花茉莉净油，还可选地含有甜杏仁油、紫檀芪或水飞蓟素中的至少一种。

第三方面，本发明提供了前述实施方式任一项所述组合物在制备护肤品或化妆品中的应用。

第四方面，本发明提供护肤品或化妆品，所述护肤品或化妆品包括前述实施方式任一项组合物和辅料，所述辅料包括水相溶剂、增稠剂或乳化稳定剂中的至少一种。

优选地，所述水相溶剂选自水、丁二醇、对羟基苯乙酮或1,2-己二醇中至少一种。

优选地，所述增稠剂包括丙烯酰二甲基牛磺酸铵-VP共聚物。

优选地，所述乳化稳定剂包括橄榄油来源乳化剂或山嵛醇聚醚-25中的至少一种。

优选地，所述辅料还包括聚二甲基硅氧烷、山嵛醇或鲸蜡醇中的至少一种。

优选地，所述护肤品包括前述实施方式任一项组合物占护肤品或化妆品质量百分比为4.01％～22.6％。

优选地，所述护肤品或化妆品的剂型包括精华液、乳液、膏霜或蜡基剂型产品。

优选地，所述精华液、乳液、膏霜包括O/W剂型或W/O剂型。

第五方面，本发明提供前述实施方式所述护肤品或化妆品的制备方法，所述制备方法包括，依次将(a)增稠剂和/或乳化稳定剂、(b)小花茉莉花蜡和白池花籽油，和(c)小花茉莉净油分散于水相或油相溶剂中，所述(b)小花茉莉花蜡和白池花籽油分散于水相或油相溶剂后，降低温度再将(c)小花茉莉净油分散于水相或油相溶剂中。

优选地，甜杏仁油、紫檀芪或水飞蓟素中的至少一种与(c)小花茉莉净油一起分散于水相或油相溶剂中。

优选地，聚二甲基硅氧烷、山嵛醇或鲸蜡醇中的至少一种与(b)小花茉莉花蜡和白池花籽油一起分散于水相或油相溶剂中。

在可选的实施方式中，(b)小花茉莉花蜡和白池花籽油分散于水相或油相溶剂中的温度为75～85℃；所述(c)小花茉莉净油分散于水相或油相溶剂中的温度为45～60℃。

本发明采用的小茉莉花蜡和小茉莉花净油均来源于小花茉莉浸膏通过分离后得到的产物，充分利用了我国丰富的小花茉莉这一植物资源产物进行深入开发与研究，通过实验设计，选出最佳功效小花茉莉净油组分含量，以及与小花茉莉花蜡组合，通过添加其他辅助植物成分，通过人体功效试验验证其具有保湿、紧致、修护、抗皱等功效。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明所述小花茉莉花蜡和小花茉莉净油的制备方法流程图；

图2为本发明实施例1中不同植物油与小花茉莉花蜡混溶后硬度值检测结果；

图3为本发明不同实施例和对比例提供的茉莉精华霜对皮肤角质层水分含量的影响；

图4为本发明不同实施例和对比例提供的茉莉精华霜对皮肤水分增加量的影响；

图5为本发明不同实施例和对比例提供的茉莉精华霜对皮肤角质水分散失率的影响；

图6为本发明不同实施例和对比例提供的茉莉精华霜对皮肤水分散失改变了的影响；

图7为实施例5中BC组荧光反应后的形貌图；

图8为实施例5中NC组荧光反应后的形貌图；

图9为实施例5中PC(VC+VE)组荧光反应后的形貌图；

图10为实施例5中本发明提供的精华霜组荧光反应后的形貌图；

图11为实施例5中不同精华霜组对应的IV胶原含量结果汇总图；

图12为本发明提供的精华霜使用不同天数后皮肤角质层水分含量对比结果；

图13为本发明提供的精华霜使用不同天数后皮肤经表皮水分流失TEWL值的对比结果；

图14为本发明提供的精华霜使用不同天数后皮肤角质层水分含量变化率；

图15为本发明提供的精华霜使用不同天数后皮肤经表皮水分流失TEWL值变化率；

图16为本发明提供的精华霜使用不同天数后皮肤弹性变化结果；

图17为本发明提供的精华霜使用不同天数后皮肤弹性变化率；

图18为本发明提供的精华霜使用不同天数后皮肤紧致F4值检测结果；

图19为本发明提供的精华霜使用不同天数后皮肤紧致F4值的变化率；

图20为本发明提供的精华霜使用不同天数后皮肤光泽度检测结果；

图21为本发明提供的精华霜使用不同天数后皮肤光泽度变化率；

图22为本发明提供的精华霜使用不同天数后皮肤皱纹深度检测结果；

图23为本发明提供的精华霜使用不同天数后皮肤皱纹数量检测结果；

图24为本发明提供的精华霜使用不同天数后皮肤皱纹面积检测结果；

图25为本发明提供的精华霜使用不同天数后皮肤皱纹长度检测结果；

图26为受试者A使用本发明提供的精华霜不同天数后PRIMOS-lite成像结果；

图27为受试者B使用本发明提供的精华霜不同天数后PRIMOS-lite成像结果；

图28为受试者C使用本发明提供的精华霜不同天数后PRIMOS-lite成像结果。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。

术语解释

本发明所述的“小花茉莉花蜡”和“小花茉莉净油”是按照图1所示制备流程得到的，所述小花茉莉花蜡中主要组分包括：碳氢化合物、脂肪酸脂类、脂肪醇、游离脂肪酸和甾醇。有文献通过使用联合气相色谱法和质谱法进行鉴定茉莉花蜡组分得出碳氢化合物部分主要由饱和链组成，以C29、C31和C27为主。醛类部分的特点是碳原子数为偶数的直链，碳原子数在C10和C28之间，而酮类部分包含了一个较长的碳链结构，即C36，其中C＝O被发现在C8和C11位置。小花茉莉花蜡中的初级脂肪醇以短链出现，以液态形式出现，而游离脂肪酸以长链出现，存在于固相中。本发明使用的小花茉莉花蜡按照质量比含有碳氢化合物45％～54％、脂肪酸脂类12％～18％、脂肪醇6％～10％、游离脂肪酸6％～10％和甾醇0.2％～2％。

所述小花茉莉净油购于吉安市中香天然植物有限公司，其中含有乙酸苄酯、芳樟醇、顺式-3-己烯醇苯甲酸酯、氨茴酸甲酯等活性成分。

本发明所述的“白池花籽油”提取自白池花。白池花是一种冬性一年生草本植物，其种子油95％的组分以上含超过20个碳原子长链脂肪酸，例如二十碳烯酸、二十二碳烯酸和二十二碳二烯酸，其中大部分不饱和双键在Δ5和Δ13位上，这种结构不会产生共轭双键，其自身具有氧化稳定性，可以延长含易氧化植物油及不稳定物质的配方的保存周期。同时也能舒展肌肤纹理，深层修复肌肤损伤，提升肌肤整体轮廓。

本发明所述的甜杏仁油提取自甜杏仁，杏仁作为蔷薇科落叶乔木植物的杏的种子，在我国新疆等地广泛种植。甜杏仁油的主要成分是油酸(70.0％～82.0％)和亚油酸(16.0％～25.0％)是脂肪酸(FA)的重要组成，能够补充皮肤胞外角质层脂油酸和亚油酸等必需(FA)，进一步外源性起到保护皮肤屏障的作用。

本发明所述的“紫檀芪”，提取自花榈木树皮，其分子结构式如下：

其分子结构中含有羟基和羰基结构，和大部分紫外光吸收剂结构类似，能够与紫外光发生反应，减少紫外光对皮肤的影响。利用紫外分光光度计测定SPF值(sunprotection factors)，SPF值越高，代表其皮肤防护效果越好，经过测试，紫檀芪的SPF为21.73±0.06。

本发明所述“水飞蓟素”，是一种天然的黄酮木脂素类化合物，系从菊科植物水飞蓟的干燥果实中提取而得到的天然活性物质。在皮肤衰老老化期间，作为表皮和真皮连接处的会显著变薄，受紫外线的影响，肌底细胞DNA发生变化，细胞呈现不同程度的凋亡。半胱氨酸-天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)通常以35kDa的分子链存在以没有活性的酶原形式存在于细胞内，受紫外光的照射会裂解成切成17kDa的分子导致酶原激活，是细胞凋亡的早期标记物。已有文献报道，在UVB照射下和不同浓度的水飞蓟素对比通过蛋白质印记法测定Caspase-3裂解产物，验证其对紫外线诱导下的细胞具有保护作用，从而验证其具有抗光老化的功效。

下面结合附图，对本发明的一些实施方式作详细说明。在不冲突的情况下，下述的实施例及实施例中的特征可以相互组合。

实施例1

本实施例采用的小花茉莉花蜡熔点在65℃左右，为黄色带茉莉特征气味固体蜡(购于桂林拓普香料有限公司)，分别选用化妆品中常用的液体油料角鲨烷、甜杏仁油(Norstar Lipids北星，Almond oil CB)、白池花籽油(NATURAL PLANT PRODUCTS公司，Meadowfoam Seed Oil)、GTCC(辛酸癸酸甘油三酯)、聚二甲基硅氧烷、向日葵籽油、霍霍巴籽油用来分散溶解小花茉莉花蜡，小花茉莉花蜡与不同液体油脂混合后的物理性能有所差异，呈现出不同硬度，当硬度提高时，脆度也会提升，对应的柔性以及铺展性就相对较低，相应的蜡的相容性就越差，不利于产品的使用。

分别取上述不同液体油脂6份，溶解2份的小花茉莉花蜡，即小花茉莉花蜡的质量分数占25％，在70℃下搅拌溶解后冷却至室温，观察小花茉莉花蜡的溶解分散均匀程度以及硬度。通过观察对比得知：不同植物液体油脂溶解小花茉莉花蜡后的混合物硬度比GTCC以及聚二甲剂硅氧烷要弱，最后使用邵氏硬度计邵氏A(Shore A)测量硬度值。

在试验力作用下垂直压入试样表面，当压足表面与试样表面完全贴合时，压针尖端面相对压足平面有一定的伸出长度L，以L值的大小来表征邵氏硬度的大小，L值越大，表示邵氏硬度越低，反之越高。计算公式为：HA＝100-L/0.025。与小花茉莉花蜡混溶后的硬度值为：白池花籽油<霍霍巴籽油<向日葵籽油<杏仁籽油<角鲨烷

上述结果表明：植物液体油与小花茉莉花蜡混溶后，能在一定程度上减少其硬度，其中以白池花籽油为最佳。

实施例2

本实施例提供了一组膏体组合物，具体组分如下：

以油膏成型稳定性、铺展涂抹性(使用性舒适度)测试做正交试验，试验因素分别为A小花茉莉花蜡和白池花籽油在组合物中分别含量占比、B灌装温度(℃)、C灌装后静置时间(h)。实验因素水平表如下：

交实验结果：按照正交试验设计表，根据上述项目进行高/低温稳定性、铺展涂抹性(使用性舒适度)评分作为判定(满分为5分)，结果如下：

根据上表可以分析得出：随着小花茉莉花蜡用量的增加，会影响膏体硬度。

成膏完整度分析表如下：

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铺展涂抹性分析表如下：

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由上表看出，在小花茉莉花蜡和白池花籽油投料分别为5％和8％(质量分数)，灌装温度在48℃，灌装后静置时间为6小时时，成膏完整度最好。

小花茉莉花蜡的质量分数对铺展涂抹性起着重要影响，当小花茉莉花蜡和白池花籽油投料分别为2％和5％(质量分数)时，灌装后静置6小时，涂抹铺展性最佳。综合评估，小花茉莉花蜡质量分数对膏体成型起决定性的影响，取质量分数2％～5％之间的小花茉莉花蜡有助于形成涂抹性佳，且有一定硬度的膏体。随着灌装温度的升高，膏体静置成型后更趋于平整。

实施例3

本实施例将小花茉莉净油用增溶剂(Solubilisant LRI)分散于水中，制成小花茉莉净油精华液，通过15人次以上的试用，用仪器测试的方法，验证其在人体皮肤上的功效。

实验试剂：小花茉莉净油(产地：广西吉安市中香天然植物有限公司供小花茉莉净油，INCI:茉莉花(JASMINUM SAMBAC)花油)

Solubilisant LRI(森馨供)

AVC(增稠剂，INCI:丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物)

苯氧乙醇(防腐剂)

将小花茉莉净油用Solubilisant LRI(增溶比例1:4)增溶分散于去离子水中，用0.4％AVC稳定增稠形成精华液，加以0.2％苯氧乙醇控制微生物，分别制得质量分数为0.1％和0.15％的茉莉净油精华液。在第7天、14天、28天试用后分别测试其皮肤弹性和紧致度，0.1％的小花茉莉净油能改善皮肤紧致度，0.15％的茉莉净油能改善皮肤紧致度和弹性，结果如下：

0.1％的茉莉净油皮肤紧致度数据结果如下：

说明：正态性检验渐进显著性(双侧)数值>0.05(Shapiro-Wilk)，数据服从正态分布。

进一步分析数据，结果如下：

产品区域与对照区域对比P<0.05，说明有显著性差异。

在使用0.1％茉莉净油7天、28天后，测试区域的皮肤紧致度与初始值对比显著改善，存在显著性差异(p<0.05)。

0.15％的茉莉净油皮肤紧致度、弹性数据结果如下：

说明：正态性检验渐进显著性(双侧)数值>0.05(Shapiro-Wilk)，数据服从正态分布。

进一步分析数据，结果如下：

产品区域与对照区域对比P<0.05,说明有显著性差异。

在使用0.15％茉莉净，14天、28天后，测试区域的皮肤紧致度以及弹性与初始值对比显著改善，使用14天后，皮肤紧致度提升15.07％，弹性提升10.00％，使用28天后，皮肤紧致度提升39.27％(p<0.05)。

综上，通过实施例2和实施例3对小花茉莉花蜡和小花茉莉净油用量的筛选，在基质一致的情况下，选用小花茉莉花蜡3％～5％(质量分数)、小花茉莉净油(0.1％～0.15％)将其制成含油分量较多的油膏对比放大进行实验，用白池花籽油进行分散溶解后制成膏霜。

实施例4～6和对比例1～3分别提供了一组制备茉莉精华霜的组合物及制备方法，具体组成如下表所示：

制备方法如下：

按照上表准确称量如下原料：

水相A：水、丁二醇、对羟基苯乙酮、1,2-己二醇。

增稠稳定相B：丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物、橄榄油来源乳化剂、山嵛醇聚醚-25。

油相高温相C：小花茉莉花蜡、白池花籽油、聚二甲基硅氧烷、山嵛醇、鲸蜡醇。

油相低温分散相D：小花茉莉净油、甜杏仁油、紫檀芪、水飞蓟素。

1)将水相原料A水、丁二醇、对羟基苯乙酮、1,2-己二醇等依次加入主反应锅分散均匀后，开启搅拌10-40HZ，加入增稠稳定相B，开启加热，加热至75-80℃溶解完全，持续搅拌，保温5-10min；

2)将油相高温相C小花茉莉花蜡、白池花籽油、山嵛醇、鲸蜡醇等加入油分散锅，开启加热，加热至75-80℃溶解完全后抽入主反应锅

3)开启均质，均质搅拌20-40HZ，5-10min,后转搅拌10-40HZ，同步开启降温；

4)降温至60-50℃，将油相低温分散相D小花茉莉净油、甜杏仁油、紫檀芪、水飞蓟素等分散均匀后缓慢加入主锅，均质搅拌20-40HZ，3-8min，持续搅拌10-40HZ至搅拌均匀；

5)降温至50℃-48℃，搅拌10-30HZ搅拌5min；出料。

6)保温45℃-50℃进行灌装，灌装完成后至于常温环境静置6h降温稳定成型。

通过皮肤手臂造膜测试对上述实施例和对比例的效果进行对比，采用的方法为，通过15人以上，采用胶带剥离损伤皮肤屏障，受试者单次使用产品，借助仪器测试的方法，验证产品使用前后具有及时补水和改善经皮水分散失的功效。

样品编号和使用方法如下：

测试方式如下：

1)测试环境：测试环境温度为22±1℃，湿度为50±5％，并且进行实时动态检测；

2)测试志愿者：年龄在16～55岁之间(妊娠或哺乳期妇女除外)；无严重系统疾病，无免疫缺陷或自身免疫性疾病者；既往对护肤类化妆品无严重过敏史者；近一个月内未曾使用激素类药物及免疫抑制剂者；未参加其他临床试验者；按规定使用受试药物且资料齐全；测试前所有自愿者应填写知情同意书。

3)测试步骤：测试前准备：受试部位前2～3天不能使用任何产品(化妆品或外用药品)。统一用干的面巾纸擦拭双手前臂内侧，标记试验区域2cm×2cm，每个区域之间间隔至少1cm，并在测试环境中休息15～20分钟，设置空白对照和产品涂抹区，区域随机分布。

4)测试过程：受试在恒温恒湿室内静坐30分钟后，用CM825、TM300等仪器对试验区域进行测试，每个区域平行测定2次，该次测试结果作为初始值。试验区域采用胶带剥离20次，剥离后即时用CM825、TM300等仪器对试验区域进数据采集。测试完成后对受试者产品涂抹区按照样品使用方法进行涂抹使用，使用后即时30min、使用后4h、6h用CM825、TM300等仪器对手臂进行数据采集。空白组不涂抹产品。

测试项目包括：

1)皮肤角质层水分含量

使用前、剥离损伤后即时、使用后即时30min、使用后4h，使用后6h，共5次对受试者仪器测试。使用Comemeter CM825测试2次，记录其数值，最终分析取平均值，结果如下表、图3和图4所示。

参数解释：测试值越高，说明皮肤角质层水分含量越高。结果判定：若产品使用后，测试区域角质层水分含量与初始值相比显著性升高，表示该受试样品具有提升肌肤水润度。

测试结果如下：

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如上图3、4：胶带剥离对皮肤水分的含量无显著性影响，当施用对比例和实施例后，30分钟内皮肤角质层水分迅速上升，整体在8小时内角质层水分含量呈上升趋势。其中实施例4皮肤长时间储水能力相对对比例1、2、3以及实施例5、6长时间角质层储水能力有明显优势。

2)皮肤经皮水分散失量

使用前、剥离损伤后即时、使用后即时、使用后4h、使用后6h，共5次对受试者仪器测试。使用TeaxmeterTM300测试2次，记录其数值，最终分析取平均值，结果如下表、图5和图6所示。

参数解释：测试值越高，说明皮肤经皮水分散失量越高，皮肤屏障功能越差。测试值越低，说明皮肤经皮水分散失量越低，皮肤屏障功能越好。

结果判定：若产品使用后，测试区域经皮水分散失量与初始值相比有显著性降低，表示该受试样品具有及时改善皮肤屏障功能的效果。

测试结果如下：

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通过图5、图6可知，胶带剥离对角质层水分散失有显著性影响，当皮肤角质层施用对比例和实施例后，均能在一定程度上减少角质层水分散失。其中，实施例对比角质层剥离前和剥离后对水分改善作用明显，尤其以实施例4对角质层水分散失改善作用显著。

实施例7

本实施例以体外重组3D全层皮肤模型为研究对象，用传统的抗坏血酸(VC)和生育酚(VE)作为修复皮肤老化的经典功效成分作为阳性对照。通过对比测定IV型胶原蛋白的含量，验证实施例4提供的精华液有助提升皮肤中胶原IV的表达，从而对DEJ层有修护的功效，从皮肤内源性上有助于防御皮肤衰老。

测试项目包括：

1)3D皮肤模型-IV型胶原蛋白

本实施例所用模型为全层皮肤模型(T-Skin

通过IV胶原蛋白免疫荧光结果显示，与BC组(空白对照)，NC组(阴性对照)皮肤模型的荧光反应显著降低，说明刺激条件有效。与NC组对比，PC(VC+VE)阳性对照组荧光反应升高，说明VC和VE作为组合物的阳性对照对本次实验有效。在组合物100％给药浓度下，其荧光反应显著升高，说明组合物能够促进皮肤细胞产生IV型胶原蛋白，内源性上有助于防御皮肤衰老。

BC组荧光反应后的形貌图、NC组荧光反应后的形貌图、PC(VC+VE)组荧光反应后的形貌图和本发明提供的精华霜组荧光反应后的形貌图分别如图7～10所示，可以看出，本发明的荧光反应强度高于BC组和NC组以及PC(VC+VE)组，说明本发明促进IV胶原蛋白结果显著。经统计，各组胶原含量如图11所示，通过分析荧光反应强度，有如下结果：基于3D皮肤模型，与NC组相比，在100％给药浓度下，实施例组IV胶原蛋白量显著性提高(P<0.050)。

通过以上实验可知，本发明实施例有助于促进胶原蛋白IV生成，支持并连接组织结构、调节组织和细胞的生理活动，以保持皮肤外观紧致弹性，在内源性抗衰老上有显著作用。

2)人体修护紧致抗皱功效

通过30名41～60岁亚洲成年女性28天正常连续使用实施例4提供精华霜，用仪器探头测量角质层水封、含量，皮肤经表皮水分流失TEWL值、皮肤弹性R2值、皮肤紧致F4值、采集面部图像分析皮肤粗糙度、皮肤平滑度、皮肤光泽度和眼角鱼尾纹的皮肤皱纹，经过皮肤科医生进行功效和安全性评估，证实该实施例4提供的精华霜在修护、紧致、抗皱、光泽度、安全性等维度具有显著正向影响，具有相应功效。

①修护功效

水分和皮水分流失TEWL值用于表征皮肤的修护能力。

Courage+Khazaka皮肤水分测试仪

Courage+Khazaka皮肤水分测试仪

结果如图12～15所示，通过上图证明：实施例与使用前对比，在14天、28天皮肤角质层水分含量显著增加、经表皮水分流失TEWL值显著性降低，具有修护功效。

②皮肤弹性

Courage+Khazaka皮肤弹性测试仪

③皮肤紧致度

Courage+Khazaka皮肤弹性测试仪

④皮肤光泽度

Courage+Khazaka皮肤光泽度测试探头

⑤皮肤皱纹深度与皱纹含量

Canfieldsci皮肤快速光学成像系统PRIMOS-lite用于检测皮肤皱纹深度、皱纹数量和皱纹面积和皱纹长度，测量值越小，说明皱纹深度越小，皱纹数量、面积减少，测试样品有抗皱功效，结果如图22～图25所示，部分受试者PRIMOS-lite成像如下图：通过图26～图28证明：实施例提供的精华霜与使用前对比，在14天、28天面颊部位的鱼尾纹部位的皱纹从深度、数量、面积、长度等维度都有显著性降低，说明实施例提供的精华霜有明显的抗皱效果。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。