光电关联技术中的细胞培养装置及方法

技术领域

本发明属于细胞培养装置领域，具体涉及一种光电关联技术中的细胞培养装置及方法。

背景技术

光电关联显微镜技术(Correlative light and electron microscopy，CLEM)将光学显微镜的高灵敏度和大视场与电子显微镜的高分辨率相结合，弥补了各自成像的局限，可在原位获得更全面、更精细的定位及结构信息，近年来受到广泛关注。

而在光电关联成像技术中，如何在电镜制样中找到光镜所拍摄的目标细胞是一大问题。普通培养皿没有用于定位细胞的标记，实际实验中人为用笔在玻片上记录又容易造成误差。而且普通培养皿多采用塑料材质，在电镜制样时需用到丙酮进行脱水，但是丙酮会与塑料反应，腐蚀共聚焦小皿，影响到最终电镜的超微结构。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明提供了一种光电关联技术中的细胞培养装置，使用该装置培养的细胞可以很平整的贴在坐标区域内，且该装置所用材质不会与丙酮发生反应。

本发明的技术方案如下：

一种光电关联技术中的细胞培养装置，包括培养皿本体，所述培养皿本体下方中央开有通孔，所述通孔底部贴有玻片，所述玻片内径大于所述通孔内径；所述玻片与所述通孔接触的一面内部设有刻痕，所述刻痕内径小于所述通孔内径。

优选地，所述刻痕外围设有定位坐标。

优选地，所述通孔为圆形或方形。

优选地，所述刻痕为方形。

优选地，所述培养皿本体和所述玻片均采用透明玻璃材质加工制成。

优选地，所述刻痕与所述定位坐标均采用紫外激光蚀刻技术雕刻而成。

优选地，所述玻片厚度为0.13-0.17mm。

本发明还提供了一种基于上述细胞培养装置的使用方法，包括以下步骤：

(1)将样品细胞培养在培养皿中，细胞密度达到50％-70％时，放置于光镜下进行观察，记录目标细胞；

(2)将玻片上的细胞进行电镜制样；

(3)制样完成后，去掉玻片，刻痕以及定位坐标印在树脂样品上，根据定位坐标，在树脂样品上找到目标细胞，进行超薄切片，然后电镜观察。

本发明的有益效果如下：

(1)本发明的玻片中央留下了大量的空白区域用来培养细胞，同时能够使用定位坐标找到目标细胞，并且在电镜制样后得到完整的细胞；

(2)本发明采用紫外激光刻蚀技术，使得定位坐标刻印在树脂样品上，方便操作人员快速找到目标细胞；

(3)本发明的玻片以及培养皿本体均采用玻璃材质，避免丙酮腐蚀，在电镜制样时就可以使用丙酮进行更好的脱水处理，使得电镜超微结构更完整；

(4)本发明的细胞培养装置结构简单，操作方便，实用性强。

附图说明

图1是本发明一实施例的立体示意图；

图2是本发明一实施例的侧视图；

图3是本发明一实施例的玻片示意图；

附图标记说明：1培养皿本体；2通孔；3玻片；4刻痕；5定位坐标；6目标细胞所在区域。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，并参照附图，对本发明进一步详细说明。

实施例1

一种光电关联技术中的细胞培养装置，参考图1～3，包括培养皿本体1，所述培养皿本体1下方中央开有通孔2，所述通孔2底部贴有玻片3，所述玻片3内径大于所述通孔2内径；所述玻片3与所述通孔2接触的一面内部设有刻痕4，所述刻痕4内径小于所述通孔2内径。

所述刻痕4外围设有定位坐标5，方便快速定位细胞。

所述通孔2为圆形。

所述刻痕4为方形。

所述培养皿本体1和所述玻片3均采用透明玻璃材质加工制成，避免丙酮腐蚀。

所述刻痕4与所述定位坐标5均采用紫外激光蚀刻技术雕刻而成，使得刻痕与定位坐标印在树脂样品上，通过定位坐标，方便操作人员快速找到目标细胞。

所述玻片3厚度为0.15mm。

实施例2

一种光电关联技术中的细胞培养装置的使用方法，包括以下步骤：

(1)将样品细胞培养在培养皿1中，使细胞主要生长在玻片3的刻痕4区域内，当细胞密度达到70％时，放置于光镜下进行观察，记录目标细胞及所在区域的坐标，如图3所示，目标细胞所在区域的坐标可记录为c-3；

(2)将玻片3上的细胞进行电镜制样；

(3)制样完成后，可以通过液氮反复冻融的方式去掉玻片3，刻痕4以及定位坐标5印在树脂样品上，根据记录的坐标c-3，在树脂样品上找到目标细胞所在区域c-3，进行超薄切片，然后电镜观察。

以上仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。