一种纯牛奶中1,2-丙二醇的检测方法

文献发布时间：2024-04-18 19:59:31

技术领域

本发明涉及一种纯牛奶中1,2-丙二醇的检测方法，属于食品安全检测的检测技术。

背景技术

1,2-丙二醇，无色粘稠稳定的吸水性液体，是一种应用广泛的食品添加剂，可用做稳定剂和凝固剂、抗结剂、消泡剂、乳化剂、水分保持剂、增稠剂等。同时也广泛应用于化妆品、药品和烟草中。1,2-丙二醇毒性相对较低，但当长期过量食用时，会在人体中不断积累，对人体神经、泌尿系统和呼吸系统等造成不同程度的损害。2022年6月，市场监管局检出新疆麦趣尔集团股份有限公司生产的2批次纯牛奶中有丙二醇，经初步调查分析，麦趣尔纯牛奶中检出丙二醇为企业在生产过程中超范围使用食品添加剂香精所致。

根据《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》(GB 2760-2014)、《食品安全国家标准食品用香精》(GB 30616-2020)的规定，丙二醇是批准使用的食品添加剂，也是允许使用的食品用合成香料和食品用香精中允许使用的溶剂。食品添加剂丙二醇在生湿面制品、糕点中的最大使用量分别为1.5g/kg、3.0g/kg。GB 2760-2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》中明确规定，丙二醇不允许在纯牛奶(巴氏灭菌乳、发酵乳和灭菌乳)中使用。

GB 5009.251-2016食品中1,2-丙二醇的测定，第一法采用无水乙醇提取样品中丙二醇，气相色谱法测定，适合于固态及液态食品，第二法采用无水乙醇提取样品中丙二醇，气相色谱-质谱法测定，适合于固态食品。查阅文献和现有标准，均无关于液态食品的气相色谱-质谱法检测技术的前处理技术。本研究首次建立了液态奶的固相萃取富集净化、气相色谱-质谱法检测技术。

发明内容

1本发明的目的在于提供一种纯牛奶中1,2-丙二醇的检测方法，该方法包括如下步骤：(1)待测样品溶液的制备；(2)样品检测；(3)结果分析。

(1)待测样品溶液的制备包括如下具体步骤：

(a)纯牛奶样品的蛋白沉淀：称取2.0g纯牛奶样品于15ml塑料离心管中，

加入亚铁氰化钾溶液(92g/L)和醋酸锌溶液(183g/L)各0.2mL涡旋混匀1min进行蛋白沉淀，3000×g离心5min；

(b)固相萃取

离心后上清液加入已经活化好的4000mg/12mL的硅藻土固相萃取柱(5mL

甲醇活化)，下层沉淀物加入2mL水再提取一次，离心后上清液再加入固相萃取柱，待柱管下端不再有溶液滴出后抽干，5mL四氢呋喃洗脱并收集，过尼龙66膜，滤液待测；

(2)样品检测包括如下具体步骤：

(a)标准品溶液及标准系列溶液的制备：称取一定量1，2-丙二醇标准物质，

用甲醇定容，配制成10mg/mL储备液，取一定量标准储备溶液用乙酸乙酯稀释，配制成浓度为0.2μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL和50μg/mL的标准系列，待测；

(b)用岛津GCMS-QP2010 Ultra气质联用仪，配有电子轰击离子源(EI源)

测定待测样品溶液和标准系列溶液，仪器参考条件如下：

气相色谱条件

VF-624ms弹性的石英毛细管柱(30m×0.25mm×1.4μm)，柱温：初始温度60℃，保持1min，以10℃/min升至130℃，再以20℃/min升至250℃保持5min；载气：高纯氦气，流量1.0mL/min；进样口温度：250℃；进样量：1.0μL；进样方式：分流进样，分流比10∶1；

质谱条件

电子轰击电离(EI)；电离能量：70eV；离子源温度：200℃；传输线温度：250℃；扫描模式：选择离子监测模式；溶剂延迟：3min；扫描方式：选择离子监测(SIM)模式，1,2-丙二醇的定性、定量离子见表1。

表1 1,2-丙二醇的分子式、CAS号和定性、定量离子

测定1,2-丙二醇定量离子峰面积，然后分别作1,2-丙二醇的定量离子峰面积—1,2-丙二醇浓度(μg/mL)标准曲线，曲线方程见式(1)：

ρ＝ax+b·········(1)

式中：x——1,2-丙二醇的定量离子峰面积；

ρ——1,2-丙二醇的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)；

(3)结果分析包括如下具体步骤：

(a)样品溶液的测定：待测样品溶液中1,2-丙二醇的响应值应在标准曲线线性范围内，超过线性范围则应稀释样品净化溶液后再进样分析。

(b)定性判定：按照上述条件测定试样和标准系列溶液，如果试样中的质量色谱峰保留时间与标准溶液变化范围在±2.5％之内；样品中目标化合物的4个定性离子的相对丰度与浓度相当的标准溶液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过表2的规定，则可判断样品中存在目标化合物1,2-丙二醇。

表2定性离子相对丰度的最大允许偏差

(c)分析结果的表述：

试样中1,2-丙二醇含量按公式(2)计算：

ω＝ρ×5×D/m……………………………………(2)

式中：

ω——试样中1,2-丙二醇的含量，单位为毫克每千克(mg/kg)；

ρ——由标准曲线查得试样进样液中1,2-丙二醇的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)；

m——试样质量，单位为克(g)；

D——稀释倍数，不稀释则取1；

5表示待测样品溶液定容体积5mL。

本发明检测方法的可行性证实：

配制0.2μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL和50μg/mL的1,2-丙二醇标准系列溶液，进行测定，进行线性相关性试验，在0.2μg/mL～50μg/mL的线性范围内，线性相关系数可达到0.999以上。

方法的最低检出浓度和最低定量浓度是衡量方法灵敏度的指标。本方法以3倍信号与噪声之比所对应的浓度为最低检出浓度，以10倍信号与噪声之比所对应的浓度为最低定量浓度，得到本方法1,2-丙二醇的最低检出浓度和最低定量浓度分别为0.10mg/kg、0.33mg/kg。

样品加标回收率测定：

采用本发明的纯牛奶中1,2-丙二醇的检测方法，在纯牛奶中添加三个浓度水平:0.1mg/kg、0.5mg/kg、2.0mg/kg,进行加标回收率实验，步骤同发明的方法步骤，每个浓度重复6次，结果见表3，1,2-丙二醇的平均加标回收率和相对标准偏差分别在80.2～86.5％和3.1～6.2％之间。

表3 1,2-丙二醇的平均加标回收率和相对标准偏差(n＝6)

本发明检测纯牛奶中1,2-丙二醇的方法解决了纯牛奶中1,2-丙二醇检测的实际难点，对于纯牛奶中1,2-丙二醇能够有效测定，测定结果准确可靠。

附图说明

图1为阳性牛奶样品的总离子流图。

具体实施方式

实施例