人参皂苷组合物在制备通过作用于毛囊组织防治脱发的药物中的用途
文献发布时间:2023-06-19 12:05:39
技术领域
本发明属于医药领域,涉及由人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷CK组成的人参皂苷组合物的一种新用途,具体涉及上述人参皂苷组合物在制备通过作用于毛囊组织防治脱发的药物中的用途。
背景技术
头发除了具有保温和保护头皮免受外界伤害等功能外,在美化个人形象方面具有重要的意义。正常人平均每天脱发40-100根左右,正常脱落的头发都是处于退行期及休止期的毛发,由于进入退行期与新进入生长期的毛发不断处于动态平衡,故能维持正常数量的头发。病理性脱发是指头发异常或过度的脱落,其原因很多。病理性异常头发脱落,如男性的秃顶或女生的发际线后移,是在某些因素的作用下毛囊长期处于休止期而无法进入生长周期。近年来,随着社会竞争加剧,生存压力增大,高脂饮食,睡眠减少,环境影响以及染发和烫发等美发造型产品的使用,脱发患者出现了年轻化迹象,中青年成为脱发的主力军。看似无伤大雅的脱发经常会给患者带来难以想象的精神和心理负担。脱发患者通常会有非常强烈的治疗欲望。
因此,防脱生发类药物和化妆品广受人们关注。目前,我国市场上常见的生发剂以各种生发洗发水、保健品、中药煎煮后的洗剂等为主,主要通过改善微循环达到促进生发的作用,但通常效果不佳。临床上治疗病理性脱发的药物很少,且这些药物也是只针对很少比例的患者有作用,并且长期使用可能存在一定的毒副作用。毛囊组织移植虽然可以从根本上解决脱发的问题,但也存在价格极其昂贵和毛囊组织存活率不高的问题。因而,目前对于能够有效防治脱发以及提高毛囊移植手术过程中的毛囊存活率且安全的药物仍存在极大需求。
人参是一种驰名中外的珍贵药材,使用人参养生治病已经有2000多年历史。但是,如何能够明确、详细地阐明人参对皮肤、毛发等的作用方式、作用途径,从机理上解决人参对皮肤、毛发影响的问题,以最大程度的开发人参在药物、保健品和化妆品领域的用途和商业价值,一直是国内外学者以及著名制药公司和化妆品企业不断探索的热点问题。有研究表明,人参具有防止与减少脱发,促进毛发生长发育的作用,并且效果显著,其防治脱发的机理主要为:人参内含有与雌激素有关的植物激素,这些物质的存在可改善头部皮肤血液循环和调节免疫力,达到促进毛发生长的作用。减少生长期毛囊角质形成细胞凋亡和退行性变。有研究表明人参及其组方中人参皂苷对毛囊间充质干细胞具有促增殖作用,促进毛囊生长,延长小鼠毛发生长期。
目前,也有很多针对具有人参皂苷成分防脱生发方面的研究。例如,WO2020/262933A1公开了人参皂苷Rg4或者人参皂苷Rg2、Rg4、Rg6和Rh1的混合物具有促进毛囊生长的作用。CN105250152A公开了一种防脱生发精华,包含人参茎叶三醇组皂苷Re、Rg1、Rg2和Rh1,还公开了该防脱生发精华可直接作用于头皮,促进头皮细胞的新陈代谢,扩张毛细血管,改善血液循环,使毛囊组织得到合理营养。
本申请的发明人在多年来也专注于人参皂苷防治脱发和提高毛囊组织存活方面的研究,并在研究过程中意外地发现了以特定比例将主要活性成分人参皂苷Rg1和人参皂苷Re与辅助成分人参皂苷CK组合,能够显著提高主要活性成分人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的疗效并且显著降低上述活性成分的用量,从而研制出了一种成分简单、安全有效的通过作用于毛囊组织防治脱发的药物组合物。特别是,此前未见包含人参皂苷CK的防治脱发以及提高毛囊组织的药物组合物的报道。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术的不足,实现采用现代药物研究方法对天然产物进行开发利用,结合大量药效学实验筛选,提供了以特定比例将主要活性成分人参皂苷Rg1和人参皂苷Re与辅助成分人参皂苷CK组合制备的人参皂苷组合物在制备防治脱发以及提高毛囊组织存活药物中的应用。
具体地,通过以下几个方面的技术方案实现了本发明:
在第一个方面中,本发明提供了一种人参皂苷组合物在制备通过作用于毛囊组织防治脱发的药物中的用途,所述人参皂苷组合物由人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷CK组成,其中以重量份数计人参皂苷Rg1:人参皂苷Re:人参皂苷CK的比例为(2-8):(2-8):(0.5-2)。
作为可选方式,在上述用途中,在所述人参皂苷组合物中以重量份数计人参皂苷Rg1:人参皂苷Re:人参皂苷CK的比例为5:4:1。
作为可选方式,在上述用途中,所述脱发为雄激素性脱发、神经性脱发、内分泌脱发、营养性脱发、物理性脱发、化学性脱发、感染性脱发、先天性脱发和季节性脱发中的一种或多种。
在第二个方面中,本发明提供了在第一个方面中所述的人参皂苷组合物在制备提高毛囊组织活性的药物中的用途。
作为可选方式,在上述用途中,所述药物促使休止期的毛囊进入再生周期,促进毛发生长。
作为可选方式,在上述第一个方面和第二个方面的用途中,所述药物包含上述第一个方面和第二个方面的人参皂苷组合物和药学上可接受的载体。
优选地,所述药物为外用药物。更优选地,所述外用药物的剂型为凝胶剂、软膏剂、乳膏剂、泡沫剂、洗发水、护发素或喷雾型液体制剂。
在第三个方面中,本发明提供了在上述第一个方面和第二个方面中所述的人参皂苷组合物在制备提高体外培养的毛囊组织活性的药物中的用途。
作为可选方式,在上述用途中,所述药物改善毛囊组织的微环境,促使休止期和退化期状态的毛囊组织转变为生长期毛囊组织,进而提高培养的毛囊组织的活性,显著提高移植毛囊的存活率。
作为可选方式,在上述第三个方面的用途中,所述药物包含在临床上常用的毛囊组织培养液中。
应理解,在本发明范围内中,本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合,从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅,在此不再一一赘述。
本发明相对于现有技术,具有以下有益效果:
本发明人在研究过程中意外地发现了以特定比例将主要活性成分人参皂苷Rg1和人参皂苷Re与辅助成分人参皂苷CK组合,能够显著提高主要活性成分人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的疗效并且显著降低上述活性成分的用量,从而研制出了一种成分简单、安全有效的通过作用于毛囊组织防治脱发的药物组合物。
通过药效学实验表明,在防治脱发以及激发毛发再生方面,人参皂苷CK对于人参皂苷Rg1和人参皂苷Re起到了协同增效作用。此外,本发明人参皂苷组合物对体外培养的小鼠毛囊毛发生长起促进作用,同时可促进毛囊球部细胞增殖,其作用效果显著优于不含人参皂苷CK的人参皂苷组合物(人参皂苷Rg1+人参皂苷Re)。
具体实施方式
为了更好的理解本发明,下面对本发明组合物中主要原辅料的作用进行进一步的解释说明。
如本文所用,“辅助成分”通常指不具有或几乎不具有目标药理活性,但是能够增强主要活性成分目标药理活性的物质。本发明的目标药理活性主要是通过作用于毛囊组织防治脱发,提高毛囊组织活性以及提高培养的毛囊组织活性和提高移植毛囊的存活率。
本发明人参皂苷组合物中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷CK可以采用天然药物化学领域的常规提取和纯化方法从含有这些活性成分的人参等植物中提取分离得到,也可购自市售产品。
以下对本发明的优选实施例进行说明,应当理解,此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明,并不用于限定本发明。实施例中未注明具体技术或条件者,按照本领域内的文献所描述的技术或条件,或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可通过正规渠道购买得到的常规产品。
实施例1:本发明人参皂苷组合物防治脱发的效果
为了本发明人参皂苷组合物具有防脱生发的效果,选择80名脱发受试者,年龄在18-60岁,平均年龄30.5岁,男女各半。将上述脱发受试者分成4组,每组20名受试者。
各组分别给予下述常规护发精华:(1)空白常规护发精华基质:(2)含人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的组合物以及常规护发精华基质的护发精华,其中以重量百分比计人参皂苷Rg1占护发精华总重量的5%,人参皂苷Re占护发精华总重量的4%;(3)含人参皂苷CK以及常规护发精华基质的护发精华,其中以重量百分比计人参皂苷CK占护发精华总重量的1%;(4)含人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷CK的组合物以及常规护发精华基质的护发精华,其中以重量百分比计人参皂苷Rg1占护发精华总重量的5%,人参皂苷Re占护发精华总重量的4%和人参皂苷CK占护发精华总重量的1%。
分别将上述(1)-(4)的护发精华直接涂抹在受试者头皮上,轻轻按摩5分钟,早晚各一次,持续使用2个月。研究结束时,对受试者的发量、头发密度进行观察和统计。实验结果如下表1所示。
表1:本发明人参皂苷组合物防治脱发的效果
由表1中的结果可知,与空白对照组相比,仅包含人参皂苷CK的组合物几乎没有防治脱发以及激发毛发再生的效果。包含人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的组合物具有一定的防治脱发以及激发毛发再生的作用,但是其效果远不及包含人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷CK的组合物。可见,在防治脱发方面,人参皂苷CK对于人参皂苷Rg1和人参皂苷Re起到了协同增效作用。
实施例2:本发明人参皂苷组合物对体外培养的小鼠毛囊毛发生长和毛囊球部细胞增殖的影响
1.小鼠触须毛囊器官培养
将4-6周龄C57BL/6J小鼠颈椎脱臼处死,剪去双侧胡须,用75%酒精消毒触须3次,无菌条件下剪下触须垫,置于D-Hanks液中洗涤3次,然后置于Wi l l iams培养液中,在解剖显微镜下,用显微剪、镊子分离出生长期毛囊,并剪去毛囊上1/3部分。毛囊培养在96孔板中进行,每孔放一个毛囊,每孔加入Wi l l iams培养液无血清培养基0.2mL,该培养基中含有转铁蛋白10mg/L,青霉素100U/mL、链霉素100μg/mL等成分,放入37℃、5%CO
2.实验分组
实验分为空白组、Rg1+Re组、CK组、Rg1+Re+CK组,每组12-14个毛囊,空白组不加药物。Rg1+Re组中,人参皂苷Rg1的终浓度为1×10
3.毛发生长情况观察
培养第1天至第7天,在倒置光学显微镜下,通过目镜测微器每天测量毛囊底部到毛发顶部的长度,第7天测量结果减去第1天测量结果即为毛发生长长度,比较各组的毛发生长长度。
1.小鼠毛囊球部细胞体外培养
将出生4d的C57BL/6J乳鼠,在无菌条件下取其背部整层皮肤,采用两步酶(含0.5%分离酶和0.2%I型胶原酶)消化法,分离取得纯度较高的毛囊球部细胞,用于上述空白组、Rg1+Re组、CK组、Rg1+Re+CK组的Wi l l iams培养液的96孔板中,每组设定6孔,每孔体积0.2mL,接种细胞浓度5×10
2MTT比色法检测本发明人参皂苷组合物对小鼠毛囊球部细胞生长活力的影响
分别于培养后24h和96h进行MTT比色测定,每孔加入MTT溶液(5mg/mL)20μL,37℃下继续培养4h,弃去孔内培养液。每孔加入0.2mL DMSO,振荡10mi n,使结晶充分溶解。波长570nm,在酶标仪上测定各孔吸光度值,比较各组吸光度值。
结果采用SPSS 20.0统计软件进行分析,数据以平均值±SD表示。多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验,p<0.05表示差异有统计学意义。
1.毛发生长长度
培养第7天,各组毛囊毛发平均生长长度如表2中所示。Rg1+Re+CK组的平均毛囊毛发生长长度显著大于空白组(p<0.05),尽管Rg1+Re组也能够促进小鼠触须毛囊生长,但是其与空白组之间的差异不具有显著性。CK组与空白组之间的毛囊毛发生长长度无统计学差异。提示Rg1和Re与CK组合后能够显著增加前两者促进小鼠触须毛囊生长的能力。
2.细胞生长活力
MTT比色法测定毛囊球部细胞的生长活力亦参见表2。培养24h后,空白组、Rg1+Re组、CK组以及Rg1+Re+CK组之间的平均吸光度值无统计学显著性差异,可见各组间细胞增殖程度相似。
在培养后96h时,CK组与空白组之间的平均吸光度值相似,提示这两组的细胞生长活力相似。Rg1+Re组的平均吸光度值高于空白组,但两者之间的差异不具有显著性,Rg1+Re+CK组的平均吸光度值显著高于空白组(p<0.05),提示将Rg1和Re与CK组合后能够显著增加前两者促进小鼠毛囊球部细胞生长的活力。
表2:本发明人参皂苷组合物对小鼠触须毛囊生长和小鼠毛囊球部细胞生长活力的影响
注释:*p<0.05,与空白组比较。
本发明人参皂苷组合物(Rg1+Re+CK组)对体外培养的小鼠毛囊毛发生长起促进作用,同时可促进毛囊球部细胞增殖,加入人参皂苷CK后其作用效果显著优于人参皂苷Rg1与人参皂苷Re两者的组合。
并且,人参皂苷CK与空白组相比,对小鼠毛囊毛发生长和小鼠毛囊球部细胞生长活力几乎不具有影响。
显然,本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样,倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内,则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
- 人参皂苷组合物在制备通过作用于毛囊组织防治脱发的药物中的用途
- 西红花苷II在制备通过作用于毛囊组织防治脱发的药物中的用途