一类选择性丁酰胆碱酯酶抑制剂或其可药用盐及其制备方法与用途

技术领域

本发明涉及一类丁酰胆碱酯酶抑制剂或其可药用盐及其制备方法与用途，尤其涉及一类选择性丁酰胆碱酯酶抑制剂或其可用盐及其制备方法与用途。

背景技术

阿尔茨海默症(Alzheimer's disease,AD)是一种常见的神经退行性疾病，也是痴呆症的主要病因。据统计，AD影响着大约2400万人，预计到2050年将翻两番。AD患者主要集中为65岁甚至85岁以上的老人，临床表现为记忆和认知功能的退行性丧失，日常生活能力的减退并伴有各种神经精神症状。这个问题在中国显得更为突出：随着中国老龄化进程的加快，未来中国将成为阿尔茨海默症的重灾区。因此，寻找对AD治疗有效的药物及治疗策略已成为整个世界医药领域内亟待解决的关键性难题。

AD发病因素极为复杂，尽管目前科学家们对AD确切病因尚未定论，但前期大量研究表明，AD主要是由于遗传基因、衰老和外界环境因素共同的作用后所诱发的，主要病理学表现为胆碱能功能障碍，淀粉样蛋白β肽(amyloid-βprotein,Aβ)沉积形成老年斑(senileplaque,SP),Tau蛋白过度磷酸化导致的神经原纤维缠结(neurofibrillary tangle,NFT)、Ca+失衡、氧化应激、线粒体功能损伤及神经炎性反应。AD患者有着明显的胆碱能功能障碍，由此演变来的胆碱能学说是比较公认的AD病理生理学假说，并提供了首要合理治疗AD的方法。胆碱能假说认为在AD病理过程中，在患者的前脑和基底核内出现胆碱能神经元的大量缺失，胆碱能受体及受体后信号传导遭到破坏，导致其神经纤维投射区——海马和大脑皮层的乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)水平显著降低。胆碱能功能障碍表现出的胆碱能神经元死亡，ACh降低，胆碱能传递丧失，导致记忆和认知功能障碍，均表示可以通过增强胆碱能系统改善AD表现出的认知功能障碍。

胆碱能系统是指合成ACh并以此作为神经递质的神经网络系统，广泛分布于脊髓、脑干和大脑皮质等。在乙酰胆碱合成并释放至突触间隙发挥生理效应后，乙酰胆碱与受体解离，经突触间隙内的胆碱酯酶水解为胆碱和乙酸而失活，部分胆碱可被重新吸收再利用。胆碱酯酶分为乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)和(Butyrylcholinesterase,BChE)，其中AChE负责80％胆碱活性，BChE占20％。BChE的辅助调节功能随着AD病程的发展发生变化，随进程发展AChE的水平下降到正常的55％～67％，然而AChE的下调并未引起疾病，晚期AD患者BChE/AChE由正常脑中的0.2升高到11，BChE代替AChE起水解胆碱的作用。大脑皮质的AChE活性也逐渐降低并较正常脑组织降低10％～15％，而BChE活性逐渐增高甚至可升高120％。据研究，认知功能正常组的额叶皮质几乎不表达BChE，但AD组额叶皮质BChE表达水平明显增高。以上均可促使乙酰胆碱分解增加、表达下调，从而引起胆碱能神经递质传递障碍，导致并加重AD。此外，BChE出现在神经炎性斑形成之前，贯穿Aβ沉积自良性至恶性的过程，促进了AD的发病与进程。

根据胆碱能学说开展药物设计即抑制大脑中皮质和海马体的胆碱酯酶以缓解AD症状是目前一直最有效的治疗方向之一。目前已经上市的治疗AD的药物主要有多奈哌齐、美金刚、卡巴拉汀和加兰他敏，另外，石杉碱甲是一种从中药石杉属植物千层塔中分离的生物碱，在中国也被批准用作治疗AD的药物，在美国作为膳食补充剂销售。其中除了N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDAR)受体拮抗剂美金刚以外其余四个均为胆碱酯酶抑制剂。多奈哌齐、加兰他敏和石杉碱甲为选择性AChE抑制剂，卡巴拉汀为双向AChE-BChE抑制剂。目前，AChE抑制剂广泛应用于恢复ACh水平，但是患者服用“经典”AChE抑制剂可能会产生恶心等副作用和呕吐，这些伴随不良的结果主要是由于抑制外周AChE，选择性BChE抑制剂可以规避经典胆碱能毒性。

两种胆碱酯酶的蛋白结构相似，均含有一个CAS(催化活性位点)、一个PAS(外周阴离子位点)和一个深峡谷，氨基酸序列有高于60％的同源性。与AChE相比，BChE有更广泛的酰基结合位点，空腔饱满，空间开阔，可以被更多的底物识别并水解。此外，AChE底物广泛，在生理情况下发挥作用，存在外周胆碱能不良反应，而BChE主要在病理状态中后期发挥作用，规避了不良反应。

综合考虑，选择性抑制丁酰胆碱酯酶相比抑制乙酰胆碱酯酶的作用可能更有效，尤其是针对中晚期AD，然后现在有的丁酰胆碱酯酶抑制剂多存在选择性差骨架不新颖的特点，因此，针对于具有新颖骨架的选择性丁酰胆碱酯酶抑制剂的开发存在着重要意义。

发明内容

发明目的：本发明的目的为提供一种具有良好的体外靶标活性，极高的选择性的选择性丁酰胆碱酯酶抑制剂或其可药用的盐；本发明的另一目的是提供所述选择性丁酰胆碱酯酶抑制剂或其可药用的盐的制备方法；本发明的最后一目的是提供所述选择性丁酰胆碱酯酶抑制剂或其可药用的盐的用途。

技术方案：本发明的具有通式(Ⅰ)或通式(Ⅱ)的选择性丁酰胆碱酯酶抑制剂或其可药用的盐：

其中，R

进一步地，R

另一方面，R

选择性丁酰胆碱酯酶抑制剂的可药用的盐为盐酸盐、马来酸盐或枸橼酸盐。

本发明的药物组合物，含有治疗有效量的一种或多种具有通式(Ⅰ)或通式(Ⅱ)的选择性丁酰胆碱酯酶抑制剂或其可药用的盐，及药学上可接受的载体。

本发明的药物组合物，含有治疗有效量的一种或多种具有通式(Ⅰ)或通式(Ⅱ)的选择性丁酰胆碱酯酶抑制剂或其可药用的盐，及药学上可接受的辅料。

具有通式(Ⅰ)或通式(Ⅱ)的选择性丁酰胆碱酯酶抑制剂或其可药用的盐为如下任一种：

本发明的具有通式(Ⅰ)或通式(Ⅱ)的选择性丁酰胆碱酯酶抑制剂或其可药用的盐的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

以不同取代、不同环系的芳胺为起始原料，与溴乙酰溴反应形成不同的酰胺中间体

当通式(Ⅰ)中R

本发明的具有通式(Ⅰ)或通式(Ⅱ)的选择性丁酰胆碱酯酶抑制剂或其可药用盐在制备预防或治疗阿尔茨海默氏病药物中的应用。

有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下显著优点：本发明所示的化合物或其可药用的盐具有良好的体外靶标活性，极高的选择性，可作为进一步开发通过选择性抑制丁酰胆碱酯酶来发挥抗阿尔茨海默氏病作用的先导物质。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的技术方案作进一步说明。

实施例1

(1)2-溴-N-(2-氟苯基)乙酰胺(中间体1)的合成。

取2-氟苯胺(193.1μl，2mmol)使用二氯甲烷溶解，在冰浴条件下加入碳酸钾(331.7mg，2.4mmol)，将溴乙酰溴(191.7μl，2.2mmol)溶于二氯甲烷置于分液漏斗中，逐滴滴加，室温反应6小时。抽滤，滤液减压浓缩，经硅胶层析柱分离得到中间体2-溴-N-(2-氟苯基)乙酰胺(290mg，产率62.5％)。

(2)N-苄基-1-(呋喃-2-基)甲胺(中间体2)的合成。

将苯甲醛(204.1μl，2mmol)溶于无水乙醇置于茄形瓶中，加入2-呋喃甲胺(185μl，2mmol)，常温下搅拌12小时后，在冰浴下加入硼氢化钠(113.5mg，3mmol)，搅拌30分钟后于室温搅拌过夜。减压除去溶剂，加入水，使用乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，经硅胶柱层析分离得到N-苄基-1-(呋喃-2-基)甲胺(250mg，产率66.8％)。

(3)2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(2-氟苯基)乙酰胺的合成

将2-溴-N-(2-氟苯基)乙酰胺(中间体1)(116mg，0.5mmol)和N-苄基-1-(呋喃-2-基)甲胺(中间体2)(93.6mg，0.5mmol)置于茄形瓶中，用四氢呋喃溶解，加入三乙胺(104.3μl，0.75mmol)，65℃加热回流5小时。抽滤后滤液加压浓缩，经硅胶层析柱分离得到2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(2-氟苯基)乙酰胺(90mg，产率53.2％)。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例2

2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(间甲苯基)乙酰胺的合成

参考实施例1的合成方法，实施例1中的中间体1替换为2-溴-N-(间甲苯基)乙酰胺，经硅胶柱层析分离得到2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(间甲苯基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例3

2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(3-溴苯基)乙酰胺的合成

参考实施例1的合成方法，实施例1中的中间体1替换为2-溴-N-(3-溴苯基)乙酰胺，经硅胶柱层析分离得到2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(3-溴苯基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例4

2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(2-氰基苯基)乙酰胺的合成

参考实施例1的合成方法，实施例1中的中间体1替换为2-溴-N-(2-氰基苯基)乙酰胺，经硅胶柱层析分离得到2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(2-氰基苯基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例5

2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺的合成

参考实施例1的合成方法，实施例1中的中间体1替换为2-溴-N-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺，经硅胶柱层析分离得到2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例6

2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(2,3-二氟苯基)乙酰胺的合成

参考实施例1的合成方法，实施例1中的中间体1替换为2-溴-N-(2,3-二氟苯基)乙酰胺，经硅胶柱层析分离得到2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(2,3-二氟苯基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例7

2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(萘-1-基)乙酰胺的合成

参考实施例1的合成方法，实施例1中的中间体1替换为2-溴-N-(萘-1-基)乙酰胺，经硅胶柱层析分离得到2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(萘-1-基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例8

2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(萘-2-基)乙酰胺的合成

参考实施例1的合成方法，实施例1中的中间体1替换为2-溴-N-(萘-2-基)乙酰胺，经硅胶柱层析分离得到2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(萘-2-基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例9

N-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-基)-2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)乙酰胺的合成

参考实施例1的合成方法，实施例1中的中间体1替换为N-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-基)-2-溴乙酰胺，经硅胶柱层析分离得到N-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-基)-2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例10

2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(喹啉-3-基)乙酰胺的合成

参考实施例1的合成方法，实施例1中的中间体1替换为2-溴-N-(喹啉-3-基)乙酰胺，经硅胶柱层析分离得到2-(苄基(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(喹啉-3-基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例11

2-((呋喃-2-基甲基)(萘-1-基甲基)氨基)-N-苯基乙酰胺的合成

参考实施例1的合成方法，实施例1中的中间体1替换为2-溴-N-苯基乙酰胺，中间体2替换为1-(呋喃-2-基)-N-(萘-1-基甲基)甲胺，经硅胶柱层析分离得到2-((呋喃-2-基甲基)(萘-1-基甲基)氨基)-N-苯基乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例12

2-(((1H-吲哚-3-基)甲基)(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-苯基乙酰胺的合成

参考实施例1的合成方法，实施例1中的中间体1替换为2-溴-N-苯基乙酰胺，中间体2替换为N-((1H-吲哚-3-基)甲基)-1-(呋喃-2-基)甲胺，经硅胶柱层析分离得到2-(((1H-吲哚-3-基)甲基)(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-苯基乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例13

2-(((1H-吲哚-3-基)甲基)(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(邻甲苯基)乙酰胺的合成

参考实施例1的合成方法，实施例1中的中间体1替换为2-溴-N-(邻甲苯基)乙酰胺，中间体2替换为N-((1H-吲哚-3-基)甲基)-1-(呋喃-2-基)甲胺，经硅胶柱层析分离得到2-(((1H-吲哚-3-基)甲基)(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(邻甲苯基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例14

2-(((1H-吲哚-3-基)甲基)(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(间甲苯基)乙酰胺的合成

参考实施例1的合成方法，实施例1中的中间体1替换为2-溴-N-(间甲苯基)乙酰胺，中间体2替换为N-((1H-吲哚-3-基)甲基)-1-(呋喃-2-基)甲胺，经硅胶柱层析分离得到2-(((1H-吲哚-3-基)甲基)(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(间甲苯基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例15

2-(((1H-吲哚-3-基)甲基)(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(2,3-二甲基苯基)乙酰胺的合成参考实施例1的合成方法，实施例1中的中间体1替换为2-溴-N-(2,3-二甲基苯基)乙酰胺，中间体2替换为N-((1H-吲哚-3-基)甲基)-1-(呋喃-2-基)甲胺，经硅胶柱层析分离得到2-(((1H-吲哚-3-基)甲基)(呋喃-2-基甲基)氨基)-N-(2,3-二甲基苯基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例16

(1)1-(呋喃-2-基)-N-(萘-2-基甲基)甲胺(中间体3)的合成

将2-萘甲酸(516.55mg，3mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺中，冰浴下依次加入六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(1.873g，3.6mmol)，N,N-二异丙基乙胺(1.187ml，7.2mmol)，搅拌30分钟，加入2-呋喃甲胺(305.2μl，3.3mmol)，置于室温下反应。水淬灭反应，使用乙酸乙酯萃取，使用卤水洗涤，合并有机层，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后经硅胶柱层析分离得到N-(呋喃-2-基甲基)-2-萘酰胺。

将氢化铝锂(303.6mg，8mmol)分散在无水四氢呋喃中，将N-(呋喃-2-基甲基)-2-萘酰胺(502.57mg，2mmol)溶于无水四氢呋喃中置于恒压分液漏斗中，氮气保护，在冰浴条件下逐渐滴加，加完后反应30分钟，65℃回流反应过夜。在冰浴条件下缓慢小心滴加0.3ml水，0.3ml 15％氢氧化钠溶液，最后加入0.9ml水，通过硅藻土抽滤，使用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗一次，合并有机层，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后经柱层析分离得到淡黄色油状物，即1-(呋喃-2-基)-N-(萘-2-基甲基)甲胺(中间体3)。

(2)2-((呋喃-2-基甲基)(萘-2-基甲基)氨基)-N-苯基乙酰胺的合成

参考实施例1(1)的合成方法，将合成中间体1的原料替换成苯胺，即得到中间体2-溴-N-苯基乙酰胺。将2-溴-N-苯基乙酰胺(107mg，0.5mmol)与1-(呋喃-2-基)-N-(萘-2-基甲基)甲胺(中间体3)(118.65mg，0.5mmol)用四氢呋喃溶解，加入三乙胺(104.3μl，1.5mmol)，65℃回流5小时。抽滤后滤液减压浓缩，经硅胶层析柱分离得到2-((呋喃-2-基甲基)(萘-2-基甲基)氨基)-N-苯基乙酰胺(97mg，52.4％)。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例17

2-((呋喃-2-基甲基)(萘-2-基甲基)氨基)-N-(邻甲苯基)乙酰胺的合成

参考实施例1(1)的合成方法，将合成中间体1的原料替换成邻甲苯胺，即得到中间体2-溴-N-(邻甲苯基)乙酰胺，参考实施例16，将2-溴-N-(邻甲苯基)乙酰胺与中间体3反应处理后得到2-((呋喃-2-基甲基)(萘-2-基甲基)氨基)-N-(邻甲苯基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例18

2-((呋喃-2-基甲基)(萘-2-基甲基)氨基)-N-(间甲苯基)乙酰胺的合成

参考实施例1(1)的合成方法，将合成中间体1的原料替换成间甲苯胺，即得到中间体2-溴-N-(间甲苯基)乙酰胺，参考实施例16，将2-溴-N-(间甲苯基)乙酰胺与中间体3反应处理后得到2-((呋喃-2-基甲基)(萘-2-基甲基)氨基)-N-(间甲苯基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例19

N-(2,3-二甲基苯基)-2-((呋喃-2-基甲基)(萘-2-基甲基)氨基)乙酰胺的合成

参考实施例1(1)的合成方法，将合成中间体1的原料替换成2,3-二甲基苯胺，即得到中间体2-溴-N-(2,3-二甲基苯基)乙酰胺，参考实施例16，将2-溴-N-(2,3-二甲基苯基)乙酰胺与中间体3反应处理后得到N-(2,3-二甲基苯基)-2-((呋喃-2-基甲基)(萘-2-基甲基)氨基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例20

N-(呋喃-2-基甲基)-N-(萘-2-基甲基)-3-苯基丙-1-胺的合成

参考实施例16(1)，得到中间体3，将中间体3(118.65mg，0.5mmol)与1-溴-3-苯基丙烷(76ul，0.5mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺，加入碳酸钠(63.6mg，0.6mmol)，65°回流反应。加水淬灭反应，使用乙酸乙酯萃取，使用卤水洗洗涤，合并有机层，无水硫酸钠干燥。减压浓缩后经硅胶柱层析分离得到N-(呋喃-2-基甲基)-N-(萘-2-基甲基)-3-苯基丙-1-胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例21

(1)N-(萘-2-基甲基)丙-1-胺(中间体4)的合成

将2-萘甲醛(468.55mg，3mmol)，正丙胺(370μl，4.5mmol)和无水硫酸钠(500mg)置于无水乙醇中，在常温下搅拌12小时，加入硼氢化钠(170.24mg，4.5mmol)，继续搅拌4小时。减压除去溶剂，加入水，使用二氯甲烷萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥。加压干燥后经硅胶柱层析分离得到N-(萘-2-基甲基)丙-1-胺(中间体4)(312mg，产率52.2％)。

(2)2-((萘-2-基甲基)(丙基)氨基)-N-(邻甲苯基)乙酰胺的合成

参考实施例1(1)的合成方法，将合成中间体1的原料替换成邻甲苯胺，即得到中间体2-溴-N-(邻甲苯基)乙酰胺。将2-溴-N-(邻甲苯基)乙酰胺(114mg，0.5mmol)与N-(萘-2-基甲基)丙-1-胺(中间体4)(74.62mg，0.5mmol)溶于四氢呋喃中，加入三乙胺(104.25μl，7.5mmol)，65℃加热回流5小时。抽滤后滤液减压浓缩，经硅胶层析柱分离得到2-((萘-2-基甲基)(丙基)氨基)-N-(邻甲苯基)乙酰胺(82mg，产率55.33％)。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例22

2-(丁基(萘-2-基甲基)氨基)-N-(邻甲苯基)乙酰胺的合成

参考实施例21，将中间体4替换为N-(萘-2-基甲基)丁-1-胺，得2-(丁基(萘-2-基甲基)氨基)-N-(邻甲苯基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例23

2-(异丁基(萘-2-基甲基)氨基)-N-(邻甲苯基)乙酰胺的合成

参考实施例21，将中间体4替换为2-甲基-N-(萘-2-基甲基)丙-1-胺，得2-(异丁基(萘-2-基甲基)氨基)-N-(邻甲苯基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例24

2-((萘-2-基甲基)(新戊基)氨基)-N-(邻甲苯基)乙酰胺的合成

参考实施例21，将中间体4替换为2,2-二甲基-N-(萘-2-基甲基)丙-1-胺，得2-((萘-2-基甲基)(新戊基)氨基)-N-(邻甲苯基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例25

2-(环己基(萘-2-基甲基)氨基)-N-(邻甲苯基)乙酰胺的合成

参考实施例21，将中间体4替换为N-(萘-2-基甲基)环己胺，得2-(环己基(萘-2-基甲基)氨基)-N-(邻甲苯基)乙酰胺。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例26

2-((2-(二乙基氨基)乙基)(萘-2-基甲基)氨基)-N-(邻甲苯基)乙酰胺的合成

参考实施例21，将中间体4替换为N

实施例27

N-(萘-2-基甲基)-3-苯基-N-丙基丙-1-胺的合成

参考实施例21(1)，得到中间体4，将中间体4(99.65mg，0.5mmol)与1-溴-3-苯基丙烷(76μl，0.5mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺，加入碳酸钠(63.6mg，0.6mmol)，65°回流反应。加水淬灭反应，使用乙酸乙酯萃取，使用卤水洗涤，合并有机层，无水硫酸钠干燥。减压浓缩后经硅胶柱层析分离得到N-(萘-2-基甲基)-3-苯基-N-丙基丙-1-胺(79mg，产率49.8％)。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例28

N-(萘-2-基甲基)-N-(3-苯基丙基)丁-1-胺的合成

参考实施例21(1)，将中间体4替换为N-(萘-2-基甲基)丁-1-胺，将N-(萘-2-基甲基)丁-1-胺(106.66mg，0.5mmol)与1-溴-3-苯基丙烷(76μl，0.5mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺，加入碳酸钠(63.6mg，0.6mmol)，65°回流反应。加水淬灭反应，使用乙酸乙酯萃取，使用卤水洗涤，合并有机层，无水硫酸钠干燥。减压浓缩后经硅胶柱层析分离得到N-(萘-2-基甲基)-N-(3-苯基丙基)丁-1-胺(72mg，产率43.4％)。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

实施例29

N-异丁基-N-(萘-2-基甲基)-3-苯基丙烷-1-胺的合成

参考实施例21(1)，将中间体4替换为2-甲基-N-(萘-2-基甲基)丙-1-胺，将2-甲基-N-(萘-2-基甲基)丙-1-胺(106.66mg，0.5mmol)与1-溴-3-苯基丙烷(76μl，0.5mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺，加入碳酸钠(63.6mg，0.6mmol)，65°回流反应。加水淬灭反应，使用乙酸乙酯萃取，使用卤水洗涤，合并有机层，无水硫酸钠干燥。减压浓缩后经硅胶柱层析分离得到N-异丁基-N-(萘-2-基甲基)-3-苯基丙烷-1-胺(76mg，产率45.85％)。TLC检测为一点，紫外灯254nm下有暗斑，365nm下无荧光。

以上实施例中合成的化合物及结构式，见表1。

表1实施例1-29中合成的化合物结构式

下面是本发明部分化合物酶活试验及结果：

胆碱酯酶抑制活性的测定：

药品与试剂：待测化合物、AChE(E.C.3.1.1.7,Type VI-S,选自电鳗)、BChE(E.C.3.1.1.8,选自马血清)、5,5’-二硫双(2-硝基苯甲酸)(DTNB)、乙酰硫代胆碱(ATC)以及丁酰硫代胆碱(BTC)碘化物均购于西格玛公司；阳性对照他克林盐酸盐(9-Amino-1,2,3,4-tetrahydroacridine hydrochloride hydrate)购自BioTrend公司。

仪器：THERMO Varioskan Flash全波长多功能酶标仪。

实验方法：

(1)配制缓冲液：13.6g磷酸二氢钾溶于1L水中，以氢氧化钾调节pH＝8±0.1溶液于4℃保存，备用。

(2)配制0.01M DTNB溶液：将0.396g DTNB及0.15g碳酸氢钠溶于100mL水中制得0.01M DTNB溶液，于-30℃保存，备用。

(3)配制0.075MBTC溶液：将0.237g BTC溶于10mL水中制得0.075M BTC溶液，于-30℃保存，备用。

(4)配制AChE、BChE溶液：将5000单位的AChE溶于1mL 1％的凝胶溶液中，然后用水稀释至100mL制得浓度为5单位/mL的AChE溶液，于-30℃保存，备用；将5000单位的BChE溶于1mL 1％的凝胶溶液中，然后用水稀释至100mL制得浓度为5单位/mL的BChE溶液，于-30℃保存，备用。

(5)配制受试物溶液：将受试化合物溶于乙醇中以制得浓度为10

实验开始前，所用溶液均加温至室温，并将AChE、BChE溶液用水稀释一倍制成浓度为2.5单位/mL的酶溶液。用空白缓冲液(3mL)测得背景紫外吸收。先将100μL受试化合物溶液、100μL DTNB溶液、100μL酶溶液加至3mL缓冲液中，待加入20μL ATC或BTC溶液触发反应后立即计时并同时快速混匀测试溶液，2min后于412nm波长下测量紫外吸收度。空白对照组用等容积的水代替受试物溶液测得。所有测试均平行操作三次。以空白对照组的紫外吸收值作为100％，记录受试化合物在各个浓度下的吸光度(OD值)，所得结果用GraphPadPrism

表2各化合物对胆碱酯酶的测试结果

表2中的化合物表现出了对BChE较好的抑制活性(最优化合物即化合物21的BChE抑制活性为186nM)，且所有化合物在10μM浓度下对AChE均无抑制活性，说明该系列化合物有极高的选择性。在人正常的大脑中，80％的ACh由AChE负责水解，BChE几乎无作用。然而，在进行性的AD中，大脑中AChE的水平逐渐下降到正常值的55～67％，随着病程的加重，AChE的水平下降，功能几乎丧失，此时，BChE的水平提高至正常值的120％，取代AChE成为ACh的主要代谢酶。而面对AChE抑制剂表现出来的对外周AChE的影响，以BChE为靶点的选择性抑制剂具有更强的药物安全性，对AD的治疗有积极作用。因此，开发新型的选择性BChE抑制剂具有较好的前景，更具有重大意义。本发明所涉及化合物对BChE有很好的抑制活性和极高的选择性，有望对轻度及重度AD产生很好的疗效。