抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体及其用途

技术领域

本公开涉及能够有效阻断BCMA与其配体的相互作用并激活4-1BB信号传导的抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体；其制备方法；以及其用途。双特异性抗体可以对BCMA蛋白和4-1BB蛋白都具有高结合亲和力。

背景技术

B细胞成熟抗原(B-cell maturation antigen；BCMA)是一种约20KDa的蛋白质，并属于肿瘤坏死因子受体(tumor necrosis factor-receptor；TNFR)超家族。还已知BCMA具有属于肿瘤坏死因子家族的B细胞激活因子(B-cell Activating Factor；BAFF)以及增殖诱导配体(A Proliferation Inducing Ligand；APRIL)。在病理情况下，BCMA在具有多发性骨髓瘤(multiple myeloma；MM)的患者的肿瘤性浆细胞中表达，并且具有多发性骨髓瘤的患者的存活率随着BCMA表达的升高而降低(Moreaux等人，欧洲血液学杂志(Eur JHaematol)2009 83：119-129)。多发性骨髓瘤是一种由浆细胞单克隆增殖而引起的肿瘤性疾病。由于诸如沙利度胺、硼替佐米和来那度胺的药物的开发以及治疗方法的开发，初始治疗率得以提高。然而，具有多发性骨髓瘤的患者的存活率并没有明显改善。

4-1BB是TNF受体超家族(TNF-receptor superfamily；TNFRSF)的成员，并是一种在皆包括先天性和适应性免疫细胞的免疫细胞激活后表达的共刺激分子。4-1BB在调节各种免疫细胞的活性的方面发挥着重要作用。激动性4-1BB抗体可增强免疫细胞增殖、存活、细胞因子分泌和CD8 T细胞的溶细胞活性。许多其他研究表明，4-1BB的激活增强免疫反应以消除小鼠中的肿瘤。因此，这表明4-1BB是癌症免疫学中很有前途的靶分子。尽管抗4-1BB抗体具有抗肿瘤功效，但抗4-1BB抗体在临床应用中已引起严重的肝毒性。

靶向两种或更多种抗原的多特异性抗体已被开发成各种种类和形式，并且有望作为相比于单克隆抗体具有优异治疗效果的新药抗体。因此，需要开发可有效治疗诸如多发性骨髓瘤的癌症的多特异性抗体。

发明内容

技术问题

提供一种抗B细胞成熟抗原(B-cell maturation antigen；BCMA)/抗4-1BB双特异性抗体或其抗原结合片段。

提供一种用于预防或治疗与BCMA、4-1BB或两者相关的疾病的药物组合物。

提供一种预防或治疗个体中与BCMA、4-1BB或两者相关的疾病的方法。

提供一种抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体或其抗原结合片段在预防或治疗与BCMA、4-1BB或两者有关的疾病中的用途。

技术方案

现在将详细参考在附图中示出的示例性实施例，其中相同的附图标记始终指示相同的元件。在这方面，本示例性实施例可以具有不同的形式并且不应被解释为限于本文所阐述的描述。因此，以下仅通过参考附图描述示例性实施例以解释本说明书的各方面。如本文所用，术语“和/或”包括一个或多个相关列出的项目的任何和所有组合。诸如“至少一个”之类的表达在元素列表之前时，会修改整个元素列表，而不修改列表中的各个元素。

根据本公开的一方面，抗B细胞成熟抗原(B-cell maturation antigen；BCMA)/抗4-1BB双特异性抗体或其抗原结合片段包括抗BCMA抗体或其抗原结合片段以及抗4-1BB抗体或其抗原结合片段。

术语“抗体”可与“免疫球蛋白(immunoglobulin；Ig)”互换使用。整个抗体的结构包括两条全长轻链和两条全长重链，所述两条全长轻链和两条全长重链通过二硫(SS)键连接。抗体可以是例如IgA、IgD、IgE、IgG或IgM。抗体可以是单克隆抗体或多克隆抗体。抗体可以是动物来源的抗体、小鼠-人嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。

术语“抗原结合片段”是指整个免疫球蛋白结构的片段，其可以是包括抗原结合位点的多肽的一部分。例如，抗原结合片段可以是scFv、(scFv)

有五种类型的重链，分别以γ、δ、α、μ和ε表示。重链的类型定义了抗体的类别。重链类型α和γ的每条链包括约450个氨基酸，而μ和ε的每条链包括约550个氨基酸。每条重链有两个区域，即可变区和恒定区。

有两种类型的轻链，分别以λ和κ表示。每条轻链包括约211至217个氨基酸。每个人抗体仅包括一种类型的轻链。每条轻链包括两个连续的结构域，其包括一个恒定区和一个可变区。

可变区是指抗体中与抗原结合的区域。

抗体或其抗原结合片段可以被修饰。例如，抗体或其抗原结合片段可以通过接合或结合、糖基化、标签附着或其组合而被修饰。抗体可以与其他药物如抗癌药物接合。例如，抗体或其抗原结合片段可以接合于辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase；HRP)、碱性磷酸酶、半抗原、生物素、链霉亲和素、荧光材料、放射性材料、量子点、聚乙二醇(polyethylene glycol；PEG)、组氨酸标签或其组合。荧光材料可以是ALEXA

抗BCMA抗体或其抗原结合片段可以包括：重链可变区，其包括选自由SEQ ID NO：10至21组成的组中的至少一种氨基酸序列；轻链可变区，其包括选自由SEQ ID NO：22至32和54至64组成的组中的至少一种氨基酸序列；或者所述重链可变区和所述轻链可变区。

抗4-1BB抗体或其抗原结合片段可以包括：重链可变区，其包括选自由SEQ ID NO：81至91组成的组中的至少一种氨基酸序列；轻链可变区，其包括选自由SEQ ID NO：92至97组成的组中的至少一种氨基酸序列；或者所述重链可变区和所述轻链可变区。

抗BCMA抗体或其抗原结合片段的重链可变区可以包括：互补决定区(complementarity-determining region；CDR)-H1(CDR-H1)，其包括选自由SEQ ID NO：10至13组成的组中的氨基酸序列；CDR-H2，其包括选自SEQ ID NO：14至17的氨基酸序列；以及CDR-H3，其包括选自SEQ ID NO：18至21的氨基酸序列。术语“互补决定区(CDR)”是指抗体可变区中赋予抗体或其抗原结合片段与抗原的结合特异性的位点。

抗BCMA抗体或其抗原结合片段的轻链可变区可以包括：互补决定区-L1(CDR-L1)，其包括选自由SEQ ID NO：22至25和54至62组成的组中的氨基酸序列；CDR-L2，其包括选自SEQ ID NO：26至28的氨基酸序列；以及CDR-L3，其包括选自SEQ ID NO：29至32、63和64的氨基酸序列。

抗BCMA抗体或其抗原结合片段可以选自由以下项组成的组：

(1)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：10的氨基酸序列的CDR-H1、具有SEQ ID NO：14的氨基酸序列的CDR-H2，和具有SEQ ID NO：18的氨基酸序列的CDR-H3；

(2)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：11的氨基酸序列的CDR-H1、具有SEQ ID NO：15的氨基酸序列的CDR-H2，和具有SEQ ID NO：19的氨基酸序列的CDR-H3；

(3)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：12的氨基酸序列的CDR-H1、具有SEQ ID NO：16的氨基酸序列的CDR-H2，和具有SEQ ID NO：20的氨基酸序列的CDR-H3；以及

(4)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：13的氨基酸序列的CDR-H1、具有SEQ ID NO：17的氨基酸序列的CDR-H2，和具有SEQ ID NO：21的氨基酸序列的CDR-H3。

抗BCMA抗体或其抗原结合片段可以选自由以下项组成的组：

(1)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：22的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：26的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：29的氨基酸序列的CDR-L3；

(2)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：23的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：27的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：30的氨基酸序列的CDR-L3；

(3)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：24的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：27的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：31的氨基酸序列的CDR-L3；

(4)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：25的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：28的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：32的氨基酸序列的CDR-L3；

(5)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：54的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：27的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：31的氨基酸序列的CDR-L3；

(6)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：55的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：27的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：31的氨基酸序列的CDR-L3；

(7)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：56的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：27的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：31的氨基酸序列的CDR-L3；

(8)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：57的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：27的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：31的氨基酸序列的CDR-L3；

(9)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：58的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：27的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：31的氨基酸序列的CDR-L3；

(10)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：59的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：28的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：32的氨基酸序列的CDR-L3；

(11)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：60的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：28的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：32的氨基酸序列的CDR-L3；

(12)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：25的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：28的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：63的氨基酸序列的CDR-L3；

(13)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：25的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：28的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：64的氨基酸序列的CDR-L3；

(14)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：61的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：28的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：63的氨基酸序列的CDR-L3；

(15)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：61的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：28的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：64的氨基酸序列的CDR-L3；

(16)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：62的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：28的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：63的氨基酸序列的CDR-L3；以及

(17)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：62的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：28的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：64的氨基酸序列的CDR-L3。

抗BCMA抗体或其抗原结合片段可以包括重链可变区，其包括选自由SEQ ID NO：2至5组成的组中的氨基酸序列。

抗BCMA抗体或其抗原结合片段可以包括轻链可变区，其包括选自由SEQ ID NO：6至9以及41至53组成的组中的氨基酸序列。

B细胞成熟抗原(BCMA)可以是BCMA多肽或其片段。BCMA也可称为肿瘤坏死因子受体超家族成员17(TNFRSF17)、BCM、CD269、TNFRSF13A或TNF受体超家族成员17。BCMA多肽可以包括GenBank登录号NP_001183(人)的氨基酸序列或GenBank登录号NP_035738(小鼠)的氨基酸序列。BCMA多肽可以包括由GenBank登录号NM_001192(人)或GenBank登录号NM_011608(小鼠)的多核苷酸编码的氨基酸序列。片段可以是包括BCMA多肽的氨基酸序列的任何部分的多肽。

抗BCMA抗体或其抗原结合片段可以对BCMA多肽或其片段具有亲和力，从而与BCMA特异性结合。

抗BCMA抗体或其抗原结合片段可以抑制BCMA蛋白与特异性结合到BCMA蛋白的物质之间的结合。与BCMA蛋白特异性结合的物质也可称为配体，例如属于肿瘤坏死因子家族的B细胞激活因子(BAFF)、增殖诱导配体(APRIL)，或其组合。

抗4-1BB抗体或其抗原结合片段的重链可变区可以包括：CDR-H1，其包括选自由SEQ ID NO：81至83组成的组的氨基酸序列；CDR-H2，其包括选自SEQ ID NO：84至86的氨基酸序列；以及CDR-H3，其包括选自SEQ ID NO：87至91的氨基酸序列。

抗4-1BB抗体或其抗原结合片段的轻链可变区可以包括：CDR-L1，其包括选自由SEQ ID NO：92和93组成的组中的氨基酸序列；CDR-L2，其包括选自SEQ ID NO：94和95的氨基酸序列；以及CDR-L3，其包括选自SEQ ID NO：96和97的氨基酸序列。

抗4-1BB抗体或其抗原结合片段可以选自由以下项组成的组：

(1)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：81的氨基酸序列的CDR-H1、具有SEQ ID NO：84的氨基酸序列的CDR-H2，和具有SEQ ID NO：87的氨基酸序列的CDR-H3；

(2)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：81的氨基酸序列的CDR-H1、具有SEQ ID NO：84的氨基酸序列的CDR-H2，和具有SEQ ID NO：88的氨基酸序列的CDR-H3；

(3)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：81的氨基酸序列的CDR-H1、具有SEQ ID NO：84的氨基酸序列的CDR-H2，和具有SEQ ID NO：89的氨基酸序列的CDR-H3；

(4)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：82的氨基酸序列的CDR-H1、具有SEQ ID NO：85的氨基酸序列的CDR-H2，和具有SEQ ID NO：90的氨基酸序列的CDR-H3；以及

(5)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：83的氨基酸序列的CDR-H1、具有SEQ ID NO：86的氨基酸序列的CDR-H2，和具有SEQ ID NO：91的氨基酸序列的CDR-H3。

抗4-1BB抗体或其抗原结合片段可以选自由以下项组成的组：

(1)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：92的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：94的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：96的氨基酸序列的CDR-L3；以及

(2)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：93的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：95的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：97的氨基酸序列的CDR-L3。

抗4-1BB抗体或其抗原结合片段可以选自由以下项组成的组：

(1)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：92的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：94的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：96的氨基酸序列的CDR-L3；以及

(2)抗体或其抗原结合片段，其包括具有SEQ ID NO：93的氨基酸序列的CDR-L1、具有SEQ ID NO：95的氨基酸序列的CDR-L2，和具有SEQ ID NO：97的氨基酸序列的CDR-L3。

抗4-1BB抗体或其抗原结合片段可以包括轻链可变区，其包括选自由SEQ ID NO：73至80组成的组中的氨基酸序列。

4-1BB可以是4-1BB多肽或其片段。4-1BB也可称为CD137、CDw137、ILA、肿瘤坏死因子受体超家族成员9(TNFRSF9)或TNF受体超家族成员9。4-1BB多肽可以包括GenBank登录号NP_001552(人)的氨基酸序列，或GenBank登录号NP_001070976、NP_001070977或NP_035742(小鼠)的氨基酸序列。BCMA多肽可以包括由GenBank登录号NM_001561(人)或GenBank登录号NM_001077508、NM_001077509或NM_011612(小鼠)的多核苷酸编码的氨基酸序列。片段可以是包括4-1BB多肽的氨基酸序列的任何部分的多肽。

抗4-1BB抗体或其抗原结合片段可以对4-1BB多肽或其片段具有亲和力，从而与4-1BB特异性结合。抗4-1BB抗体或其抗原结合片段能够在哺乳动物中增强免疫反应和/或治疗肿瘤(癌症)。与预先存在的抗4-1BB抗体相比，抗4-1BB抗体或其抗原结合片段的特征在于仅在肿瘤微环境(tumor microenvironment；TME)中定位和/或激活和/或显着降低肝毒性，并保持增强免疫反应增强和/或肿瘤治疗的功效。

在抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体或其抗原结合片段中，抗BCMA抗体或其抗原结合片段以及抗4-1BB抗体或其抗原结合片段各自独立地是嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。

在双特异性抗体中，BCMA靶向部分和4-1BB靶向部分之一可以是全长抗体，另一个可以是包括重链CDR、轻链CDR、或其组合的的抗原结合片段(例如，scFv)。靶向BCMA和4-1BB蛋白之一的全长抗体和靶向另一种蛋白的抗原结合片段可以直接或通过肽接头化学连接(例如，共价连接)。抗原结合片段(例如，scFv)可以直接或通过肽接头连接到全长抗体的N-末端(例如，全长抗体的轻链或重链的N-末端)、全长抗体的C-末端(例如，全长抗体的重链(或Fc或CH3结构域)的C-末端)，或上述两者(参见图1)。

抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体或其抗原结合片段可以进一步包括肽接头中的至少一种。术语“肽接头”可以是包括1至100个氨基酸的，特别是2至50个氨基酸，并且可以包括任何种类的氨基酸而没有任何限制。肽接头可以包括肽，其具有选自由SEQ ID NO:98和SEQ ID NO:99组成的组中的氨基酸序列。

在一实施例中，双特异性抗体可以包括全长抗BCMA抗体、抗4-1BB抗体的抗原结合片段(例如，scFv)，以及两者之间的肽接头。在另一实施例中，双特异性抗体可以包括全长抗4-1BB抗体、抗BCMA抗体的抗原结合片段(例如，scFv)，以及两者之间的肽接头。

在抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体或其抗原结合片段中，抗体可以是IgA、IgD、IgE、IgG或IgM。抗体可以是单克隆抗体或多克隆抗体。抗原结合片段可以是scFv、(scFv)

在一实施例中，双特异性抗体中所含的scFv可以以任意顺序包括重链可变区和轻链可变区。例如，双特异性抗体中所含的scFv可以在从N-末端到C-末端的方向上包括重链可变区和轻链可变区，并且在其之间选择性地包括肽接头，或者，双特异性抗体中所含的scFv可以在从N-末端到C-末端的方向上包括轻链可变区和重链可变区，并且在其之间选择性地包括肽接头。

抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体或抗原结合片段的形式为IgG-scFv、triomab、具有共同轻链的杵臼结构(kih)IgG、crossmab、邻-Fab IgG、双可变域免疫球蛋白(DVD-Ig)、2合1-IgG、scFv

取决于细胞表面上表达的BCMA，抗-BCMA/抗-4-1BB双特异性抗体或其抗原结合片段可以激活4-1BB信号传导。

根据本公开的另一方面，用于预防或治疗与BCMA、4-1BB或两者相关的疾病的药物组合物包括根据上述实施例中任一项的抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体或其抗原结合片段，以及药学上可接受的载体。

BCMA、4-1BB、抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体和其抗原结合片段与上述相同。

与BCMA、4-1BB或两者相关的疾病可以是癌症。癌症可以是实体癌或非实体癌。实体癌是指发生在实体器官如肝脏、肺、乳房或皮肤中的癌性肿瘤，而非实体癌是指影响血液的癌症，因此称为血癌。例如，癌症可以选自由乳癌、皮肤癌、头和颈癌、胰腺癌、肺癌、结肠癌、结直肠癌、胃癌、卵巢癌、前列腺癌、膀胱癌、子宫癌、肝癌、肾癌、透明细胞肉瘤、黑色素瘤、脑脊髓肿瘤、脑癌、胸腺瘤、间皮瘤、食道癌、胆道癌、睾丸癌、生发癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、宫颈癌、子宫内膜癌、淋巴瘤、骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes；MDS)、髓纤维化、急性白血病、慢性白血病、多发性骨髓瘤、霍奇金病、内分泌癌和肉瘤组成的组。

术语“预防”是指通过施用药物组合物抑制或延迟与BCMA、4-1BB或两者相关的疾病发作的任何行为。术语“治疗”是指通过施用药物组合物减轻与BCMA、4-1BB或两者相关的疾病症状的任何行为。

药物组合物可以包括药学上可接受的载体。载体可以解释为赋形剂、稀释剂或佐剂。例如，载体可以选自由乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯胶、藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、生理盐水、缓冲液如磷酸盐缓冲盐水(phosphate-buffered saline；PBS)、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁、甘氨酸、组氨酸、丝氨酸、聚山梨醇酯和矿物油组成的组。药物组合物可以包括填充剂、抗凝剂、润滑剂、润湿剂、调味剂、乳化剂、防腐剂或其组合。

可以使用本领域中的任何常用方法将药物组合物配制成任何形式。例如，药物组合物可以配制成口服剂型(例如，粉末、片、胶囊、糖浆、丸或颗粒)或肠胃外剂型(例如，注射)。药物组合物可以制备成用于全身给药的制剂，或制备成用于局部给药的制剂。

药物组合物还可以包括抗癌药物。抗癌药物可以是西妥昔单抗、帕尼单抗、厄洛替尼、吉非替尼、曲妥珠单抗、T-DM1、帕妥株单抗、拉帕替尼、紫杉醇、他莫昔芬、顺铂、抗CTLA-4抗体、抗PD-1抗体、抗PD-L1抗体、5-氟尿嘧啶(5FU)、吉西他滨或其组合。药物组合物可以包括单一组合物或单独的组合物。例如，药物组合物的抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体或其抗原结合片段可以是肠胃外剂型的组合物，并且抗癌药物可以是口服剂型。

药物组合物可以包括有效量的抗体或其抗原结合片段、抗癌药物或其组合。本文中使用的术语“有效量”是指当施用于需要此类预防或治疗的个体时足以预防或治疗与BCMA、4-1BB或两者相关的疾病的量。本领域的普通技术人可以根据所选细胞或个体来适当地选择有效量。例如，有效量可以根据疾病严重程度、患者年龄、体重、健康状况、性别、患者的药物敏感性、施用期间、施用途径、排泄率、治疗期间和包括与药物组合物组合或同时使用的药物的其他因素以及医学领域已知的其他因素而确定。有效量可以是约0.5μg至约2g的药物组合物。

当施用于成人时，药物组合物的剂量可以是例如约0.001㎎/kg至约100㎎/kg。施用的次数可以是例如一天一次或复数次，一周至四周一次，或一年一次至十二次。

根据本公开的另一方面，一种在个体中预防或治疗与BCMA、4-1BB或两者相关的疾病的方法包括将根据上述实施例中任一项的抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体或其抗原结合片段施用于个体。

BCMA、4-1BB、抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体、抗原结合片段、预防和治疗与上述相同。

个体可以是哺乳动物，例如人、猴、牛、马、猪、狗、绵羊、山羊或猫。个体可以是患有与BCMA、4-1BB或两者相关的疾病或易患该疾病的个体，所述疾病可以是癌症。

方法可以进一步包括向有需要的个体施用抗癌药物。抗癌药物可以与根据任何上述示例性实施例的抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体或其抗原结合片段同时、分开或依次施用。

例如，抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体或其抗原结合片段、抗癌药物或其组合可以通过任何方法直接施用于个体，例如通过口服、静脉内、肌内、经皮、粘膜、鼻内、气管内或皮下施用。抗体或其抗原结合片段、抗癌药物或其组合可以全身或局部施用。抗体或其抗原结合片段、抗癌药物或其组合可以单独或与药学活性化合物一起施用。

抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体或其抗原结合片段、抗癌药物或其组合的剂量可以根据患者的状况、体重、疾病严重程度、药物配方、施用途径以及施用期间而变动，并且可以由本领域的普通技术人员适当地选择。例如，当施用于成人时，抗体或其抗原结合片段、抗癌药物或其组合的剂量可以是约0.001㎎/kg至约100㎎/kg。施用的次数可以是例如一天一次或复数次，一周至四周一次，或一年一次至十二次。

根据本公开的另一方面，提供根据上述实施例中任一项的抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体或其抗原结合片段在预防或治疗与BCMA、4-1BB或两者相关的疾病中的用途。

BCMA、4-1BB、抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体、抗原结合片段、预防、治疗以及与BCMA、4-1BB或两者相关的疾病与上述相同。

有益效果

如上所述，根据一个或复数个示例性实施例，提供抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体或其抗原结合片段以及其用途。抗-BCMA/抗-4-1BB双特异性抗体或其抗原结合片段可有效用于预防或治疗与BCMA、4-1BB或两者相关的疾病。

附图简单说明

从下面结合附图对示例性实施例的描述中，这些和/或其他方面将变得显而易见并且更容易理解，其中：

图1为根据本公开实施例的双特异性抗体示意图；

图2A至图2C为显示使用DACE的靶蛋白结合测试的结果的图表，图2D至图2F为显示使用FACS系统的细胞表面结合测试的图表；

图3A至图3D为显示4-1BB报道生物测定的结果的图表；

图4A至图4C为显示基于PBMC的研究的结果的图表；

图5A为显示使用DACE(5D5 WT和5D5突变体)的靶蛋白结合测试的结果的图表，图5B为显示使用DACE(5A6 WT和5A6突变体)的靶蛋白结合测试的结果的图表，图5C为显示使用DACE(WT和突变体)的靶蛋白结合测试的结果的图表，以及图5D为显示使用FACS系统(WT和突变体)的细胞表面结合测试的图表。

图6A至图6C为显示体外4-1BB激活测试的结果的图表；

图7为显示通过DACE的猴交叉反应性测试的结果的图表；

图8A至图8C为显示通过BCMAx4-1BB双特异性抗体在携带H929的人源化NOG小鼠中抑制肿瘤生长的图表；

图9A为显示肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-infiltrating lymphocytes；TIL)的照片，并且图9B为显示肿瘤浸润淋巴细胞的分析结果的图表；以及

图10A和图10B分别是显示抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体在食蟹猴中的药代动力学的个体结果(n＝3)和总和结果(n＝3)的图表。

图11为显示施用抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体后的肿瘤生长曲线的图表((*P<0.05；**P<0.01)。

具体实施方式

现在将参考以下实施例详细描述本公开的一个或更多个实施例。然而，这些实施例仅用于说明目的，并不旨在限制本公开的一个或更多个实施例的范围。

实施例1.抗BCMA单克隆抗体的制备

1-1.抗原的制备

如下制备抗原以用于制备抗-BCMA抗体。分别包括来自人BCMA(GenBank登录号NP_001183.2，SEQ ID NO：1)的氨基酸序列的N-末端的氨基酸残基5-54、1-51、1-54和4-48的多肽用作抗原。

特别地，制备含有人BCMA(

如下制备人BCMA-Fc(4-48)。将编码人BCMA的氨基酸残基4-48的多核苷酸克隆到pAB1-Fc，其是一种包含CMV启动子的动物细胞表达载体。将克隆的载体转化到HEK293E细胞中，并使用蛋白A亲和层析纯化人BCMA-Fc(4-48)。以与上述相同的方式制备人BCMA-Fc(1-51)。

1-2.文库噬菌体制备和噬菌体展示淘选

制备能够与各种抗原结合的人源单链片段可变(ScFv)噬菌体文库细胞(Mol.Cells OT，225-235，2月28日，2009)。用辅助噬菌体感染所制备的噬菌体文库，然后诱导噬菌体包装。之后，将培养产物在4℃下以4,500rpm离心15分钟，然后加入4％(w/v)聚乙二醇6000(PEG 6000)(Fluka，81253)和3％(w/v)NaCl(Sigma，S7653)至上清并充分溶解，然后在冰上培养1小时。将所得产物在4℃下以8,000rpm离心20分钟，并将沉淀小球(pellets)浮在磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffered saline；PBS)中，然后在4℃下以12,000rpm再次离心10分钟，以获得含有文库噬菌体的上清液。所得文库噬菌体在使用前在4℃下保存。

以下列方式进行总共3次淘选以筛选对人BCMA有反应性或对人BCMA和猴BCMA有交叉反应性的抗体。将根据实施例1-1制备的5μg的抗原添加到免疫管(maxisorp444202)中并在4℃下培养16小时以涂覆蛋白于试管表面上。从中除去上清液，并向其中加入牛血清白蛋白(bovine serum albumin；BSA)以阻断非特异性结合。

将根据实施例1-2制备的1

1-3.单克隆噬菌体抗体筛选

进行单克隆噬菌体抗体筛选程序以从噬菌体库中选择特异性结合BCMA的单克隆抗体。

特别地，将根据实施例1-2得到的噬菌体库依次稀释，并在含有LB-四环素/羧苄青霉素的固体培养基上培养，从而得到单菌落。每个菌落在96深孔板上培养，使OD600为0.5至0.7。在每孔添加20MOI的辅助噬菌体，并在37℃下反应1小时。此后，向每个孔中添加卡那霉素并在30℃下培养过夜。在第二天，将培养物离心并收集上清液，然后进行酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay；ELISA)以选择BCMA特异性噬菌体。ELISA板的每个孔都涂有100ng的重组BCMA，然后与PBS-B(含有3％BSA的PBS)一起培养以防止非特异性结合。此后，用PBS洗涤板。在每孔添加所制备的单克隆噬菌体，在37℃下培养1小时，并用PBS-T洗涤板3次。为了检测结合的噬菌体，将接合有辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase；HRP)的抗血凝素(hemagglutinin；HA)抗体添加到每个孔中。在用PBS-T洗涤的步骤后，添加四甲基联苯胺(tetramethylbenzidine；TMB，Sigma，T0440)。选择在450nm波长处具有0.5或更大吸光度并且其吸光度比单独使用抗HA HRP的对照组大至少5倍的克隆。选择了与人BCMA特异性结合的四种抗体克隆(B58、5B5、5D5和5A6)。

从编码所选抗体的核苷酸序列中，分析重链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：2至5)和轻链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：6至9)，并根据Kabat定义确定互补决定区(complementarity determining region；CDR)。重链和轻链的所确定的CDR氨基酸序列(N->C)分别显示在表1和表2中。

【表1】

【表2】

编码重链可变区的核苷酸序列和编码轻链可变区的核苷酸序列示在下表3中。

【表3】

1-4.从选定的抗BCMA噬菌体生产抗BCMA IgG抗体

合成具有编码根据实施例1-3选择的抗体的核苷酸序列的多核苷酸。将所制备的多核苷酸克隆到动物细胞培养载体中(重链表达载体：pAB1-HC，以及轻链表达载体：pAB1-LC)。为四个抗体克隆(B58、5A6、5D5和5B5)中的每一个制备总共8个包含编码重链和轻链的多核苷酸的载体。每个制备的pAB1-HC载体都含有IgG1型序列。

CHO-S细胞在CD-CHO(Gibco，10743)培养基中培养，并使用聚乙烯亚胺(polyethylenimine；PEI)将所制备的载体导入CHO-S细胞。将转导的CHO-S细胞在CD-CHO培养基中在8％的CO2和37℃且摇晃(110rpm)下培养约7天。

收集培养的上清液后，将其通过用平衡缓冲液(50mM Tris-HCl，pH7.5，100mMNaCl)平衡的MabSelect SuRe柱(GE医疗(GE healthcare)，5mL)，以使表达的抗体与柱结合。用50mM柠檬酸钠(pH 3.4)和100mM NaCl的溶液洗脱抗体，然后用1M Tris-HCl(pH 9.0)中和以获得7.2的最终pH。然后用PBS(pH 7.4)更换缓冲液，并将抗BCMA IgG抗体B58、5A6、5D5和5B5保存在4℃下直至使用。

1-5.5A6和5D5突变的制备

为了提高所选的5A6和5D5抗体的生产率，按照表3的核苷酸序列，通过突变抗体的轻链CDR中的一个或两个氨基酸残基来制备突变抗体。

5D5突变抗体和5A6突变抗体的CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3的氨基酸序列分别示在表4和表5中。在表4和表5中，加下划线和粗体的氨基酸残基是突变部分(WT：野生型，LM：轻链突变体)。5D5突变抗体和5A6突变抗体的轻链可变区分别具有SEQ ID NO：41至45和SEQ IDNO：46至53的氨基酸序列。

【表4】

【表5】

实施例2.抗4-1BB单克隆抗体的制备

2-1.筛选针对4-1BB的全人源单克隆抗体(噬菌体文库免疫管淘选)

对于针对靶分子的文库的淘选，使用涂覆有4-1BB的免疫管进行了总共四轮淘选。

来自第3轮淘选输出的细菌菌落在96深孔板中在含有羧苄青霉素的SB培养基中生长至浑浊，此时将10

在第二天，将板离心并将含有噬菌体的上清液添加到用PBST中的3％(w/v)BSA封闭的涂覆有4-1BB抗原的ELISA板上。室温培养1小时后，用PBST洗涤板3次，并添加抗M13抗体。将板培养1小时，用PBST洗涤3次，并使用四甲基联苯胺(TMB)测量结合活性。

为质粒DNA测序扩增4-1BB特异性抗体。分析可变重链和轻链(VH和VL)的区域以鉴定独特的序列并确定序列多样性。选择了与人4-1BB特异性结合的三个抗体克隆(41B01、41B02和AB41)。如实施例1-5中所述，从所选抗体制备41B01 M4、41B01 M11、41B01 M12、41B01 M13和41B02 M1突变体。

从编码所选抗体的核苷酸序列中，分析抗体重链可变区(SEQ ID NO：65至72)的氨基酸序列和轻链可变区(SEQ ID NO：73至80)的氨基酸序列，并根据Kabat定义确定CDR。重链和轻链的所确定的CDR氨基酸序列(N->C)分别显示在表6和表7中。

【表6】

【表7】

2-2.抗4-1BB抗体对人4-1BB的抗原结合能力

(1)由ELISA测量的抗原结合

为了评估抗原结合活性，对候选抗体进行ELISA测试。简而言之，涂覆PBS中的0.1μg/mL的人4-1BB-Fc蛋白在微量滴定板上，100μl/孔在4℃下培养过夜，然后用100μl/孔的5％(w/v)BSA封闭。将从10μg/mL开始稀释5倍的人源化抗体41B01和41B02添加到每个孔中，并在室温下培养1至2小时。用PBS/吐温洗涤板，然后在室温下与结合有HRP的山羊抗人IgG抗体一起培养1小时。洗涤后，用TMB对板进行显影，并通过分光光度计在OD 450至630nm处进行分析。

(2)由FACS测量的细胞结合

为了评估抗原结合特性，通过FACS分析候选抗体与哺乳动物表达的4-1BB的结合。简而言之，4-1BB-T淋巴细胞(Jurkat)细胞与抗体(41B01和41B02)一起培养。用FACS缓冲液(PBS中的1％(w/v)BSA)洗涤后，将FITC抗人IgG抗体添加到每个孔中，并在4℃下培养1小时。FITC的MFI由流式细胞仪(FACS Calibrer)评估。

(3)4-1BB的蛋白质动力学

为了探索人源化抗体的结合动力学，本实施例用Octet Red 96进行亲和力排名。41B01和41B02如下表8所示。

【表8】

如表8所示，测试的抗4-1BB抗体显示出高4-1BB结合亲和力。

实施例3.抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体的界定

3-1.制备抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体

如表9所示，以全长IgG(抗BCMA抗体)-scFv(抗4-1BB抗体)形式制备各种抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体候选物。双特异性抗体中所含的抗BCMA抗体的恒定区仍可通过将多于一种的突变或变化引入人IgG1来进行修饰。在实施例中，引入NA突变(N297A)。

【表9】

分别示例性选择在实施例1和实施例2中制备的抗BCMA IgG和抗4-1BB scFv克隆，以制备IgG-scFv融合形式的抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体，其中一种抗原的scFv抗体片段与另一种抗原的IgG的c端融合。当BCMA置于完整IgG部分时，使用具有ADCC减少突变骨架的IgG1(N297A突变；癌细胞(Cancer Cell)，第19卷，第1期，pp.101-113，等)，并且当4-1BB置于完整IgG部分时，使用IgG4。抗BCMA IgG和41BB scF scFv的氨基酸序列分别示于表10和表11。

【表10】

【表11】

将具有编码抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体的IgG抗体的重链的核苷酸序列的DNA片段1插入pcDNA 3.4(Invitrogen，A14697；质粒1)，并且将具有编码抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体的IgG抗体的轻链的核苷酸序列的DNA片段2插入pcDNA3.4(Invitrogen，A14697；质粒2)。之后，通过使用编码具有由(GGGGS)4(SEQ ID NO：98)组成的15个氨基酸长度的接头肽的DNA片段4或使用编码具有由(GS)9(SEQ ID NO：99)组成的18个氨基酸长度的接头肽的DNA片段5，将编码scFv的DNA片段3融合在对应于插入至质粒1中的IgG抗体的Fc区的c末端的DNA片段1的部分，以构建用于表达双特异性抗体的载体。此外，为了稳定scFv，如实施例2所述，应用额外修饰以产生二硫键，其分别融合VL103-VH44(VL103：VL在103位具有G->C突变；VH 44：VH在44位具有G->C突变)到轻链的C-末端和重链的C-末端。

所制备的双特异性抗体的氨基酸序列示于表12。

【表12】

为了提高稳定性和效力、降低免疫原性等目的，可以在下面呈现的抗体中应用氨基酸序列中的一个或更多个点突变。

3-2.抗BCMA/抗4-1BB抗体(全长IgG形式)与靶蛋白的抗原结合能力

(1)由双抗原捕获ELISA(Dual Antigen Captured ELISA；DACE)测量的抗原结合

为了评估抗原结合活性，对候选抗体进行ELISA测试。简而言之，涂覆PBS中的0.5μg/mL的人BCMA-Fc蛋白在微量滴定板上，在4℃下过夜培养至100μl/孔，然后用100μl/孔的1％(w/v)BSA封闭。从20μg/mL开始稀释3倍的双特异性抗体添加到每个孔中，并在37℃下培养1小时。用PBS/吐温洗涤板，然后在37℃下与含有1％(w/v)的BSA的人4-1BBhis蛋白0.8μg/mL一起培养1小时。用PBST(PBS中的0.05％(v/v)吐温20)洗涤板。然后用TMB底物对板进行显影，并通过分光光度计在OD 450至630nm处进行分析。

如图2A至2C所示，所有双特异性抗体均能以剂量依赖性方式同时与人BCMA和4-1BB蛋白结合。EC50(nM)值总结在表13中。

【表13】

(2)通过流式细胞仪检的细胞表面结合测试

为了评估抗原结合特性，通过FACS分析候选抗体与BCMA表达细胞的结合。简而言之，使用100nM的指定抗体在4℃下将表达人BCMA(CHOK1-hBCMA)的CHOK1或表达内源性BCMA细胞的H929处理1小时。CHOK1细胞用于BCMA阴性对照组。用FACS缓冲液(PBS中的1％(w/v)BSA)洗涤后，将细胞与FITC抗人IgG体在4℃下培养1小时，然后进行FACS分析。如图2D至2F所示，抗BCMAx4-1BB抗体与表达BCMA的CHOK1-hBCMA和H929细胞系结合，但不与BCMA阴性CHOK1结合。这结果意味着抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体可以特异性结合肿瘤靶向抗原(BCMA)。图2D至图2F的结果被量化并总结在表14中。

【表14】

3-3.抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体的体外4-1BB激活测试(报道生物测定)

在这测定中，经基因修饰以稳定表达人4-1BB和应答元件下游的荧光素酶的GloResponse

如图3A至图3D所示，与单独应用抗4-1BB或交联4-1BB相比，所测试的BCMAx4-1BB双特异性抗体在存在肿瘤抗原(BCMA)的情况下显示出更强的4-1BB信号激活。而且作为激动性抗4-1BB单克隆抗体(参考抗体)的BMUR在不存在BCMA的情况下具有体外4-1BB激活效果(图3B和图3D)。

这意味着抗BCMA/抗4-1BB抗体只能在表达BCMA的癌细胞存在时特异性作用，而不能在激动性抗4-1BB抗体存在下特异性作用。图3A至图3D的结果被量化并总结在表15和表16中(表15：CHOK1-hBCMA(EC50，nM)，表16：H929(EC50，nM))。

【表15】

【表16】

3-4.抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体的体外4-1BB激活测试(基于人类PBMC的测试)

在抗人CD3抗体和待测抗体存在下，人PBMC与CHOK1细胞系(不表达人BCMA)或基因修饰的CHOK1-hBCMA(稳定表达人BCMA)一起共培养。简而言之，PBMC以每孔3×10

如图4A至图4C所示，抗BCMA/抗4-1BB抗体比单克隆抗体或BMUR(激动性抗4-1BB单克隆抗体)诱导更多的细胞因子释放。

3-5.靶蛋白结合活性比较(野生型与突变型)

为了稳定抗-BCMA/抗-4-1BB双特异性抗体，在如表4所示的抗体的重链或轻链CDR中引入氨基酸序列中的一个或更多个点突变。为了评估抗原结合活性，对候选抗体(野生型克隆和突变型克隆)进行如实施例3-2(1)中进行的双抗原捕获ELISA(DACE)测试。获得的结果显示在图5A和图5B中。

如图5A和5B所示，所有双特异性抗体均能以剂量依赖性方式同时与人BCMA和4-1BB蛋白结合。并且发现了几种突变体可以改善靶蛋白结合。在这些突变体中，5D5M4(NA)×41B01 M12和5A6M6(NA)×41B01 M12与野生型克隆相比显示出优异的抗原结合活性(图5C)。为了评估天然抗原结合特性，如实施例2-2(2)中进行的，通过FACS分析5D5M4(NA)×41B01 M12和5A6M6(NA)×41B01 M12与表达哺乳动物的BCMA的结合。如图5D所示，与野生型相比，5D5M4(NA)×41B01 M12和5A6M6(NA)×41B01 M12显示出增加的天然抗原结合活性。蛋白结合测试和细胞结合测试的结果被量化并总结在表17和表18中(表17：蛋白结合(EC50，nM))。

【表17】

【表18】

3-6.突变双特异性抗体与靶蛋白BCMA和4-1BB(SPR)的结合亲和力

在SPR试验中，在已通过胺耦合使抗BCMA/抗4-1BB(5D5M4(NA)×41B01 M12或5A6M6(NA)×41B01 M12)不动的蛋白A芯片上，将从实施例3至5中获得的抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体分别捕获在流动池2、3和4上并保持流动池1作为参考。重组人BCMA或人4-1BB蛋白在100nM至6.25nM的人BCMA或250nM至15.625nM的人4-1BB以及0.78nM的浓度中以30μl/分钟流过芯片300秒，然后是400秒的解离阶段。用10mM的甘氨酸-HCl(pH 2.0)进行再生。所得结果示于下表19和表20中。如表19和表20所示，5D5M4(NA)×41B01 M12和5A6M6(NA)×41B01 M12显示出对BCMA和4-1BB的高亲和力(表19：5D5M4(NA)×41B01 M12的亲和力测量结果，表20：5A6M6(NA)×41B01 M12的亲和力测量结果)。

【表19】

【表20】

3-7.突变双特异性抗体的体外4-1BB激活测试

通过使用如实施例2-3中的Promega试剂盒系统分析候选抗体的体外4-1BB活性。

如图6A至图6C所示，与野生形式相比，抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体的突变形式在BCMA阳性癌细胞中显示出更高的效力，而所有克隆都没有激活BCMA阴性癌细胞(Jurkat)中的4-1BB信号传导(表21：体外4-1BB激活结果(EC50，nM))。因此，5D5M4(NA)×41B01 M12和5A6M6(NA)×41B01 M12显示出改善的靶标介导的4-1BB激活。

【表21】

3-8.突变双特异性抗体的猴交叉反应性测试

为了评估交叉反应性，对候选抗体(5D5M4(NA)×41B01 M12和5A6M6(NA)×41B01M12)进行ELISA测试。简而言之，将猕猴BCMA-Fc蛋白(50ng/孔)在4℃下过夜涂覆在微量滴定板上，然后用200μl/孔的PBSB(PBS中的1％(w/v)BSA)封闭。将从100M开始稀释3倍的5D5M4(NA)×41B01 M12和5A6M6(NA)×41B01 M12添加到每个孔中，并在37℃下培养1小时。用PBST(PBS中的0.05％(v/v)吐温20)洗涤板，然后在37℃下与猕猴4-1BB-His蛋白(80ng/孔)一起培养1小时。用PBST(PBS中的0.05％(v/v)吐温20)洗涤板，然后在37℃下与接合有HRP的抗his抗体一起培养1小时。洗涤后，用TMB对板进行显影，并通过分光光度计在450至630nm处进行分析。如图7所示，5D5M4(NA)×41B01 M12和5A6M6(NA)×41B01 M12以剂量依赖性方式同时结合猕猴BCMA和4-1BB(表22：蛋白结合(EC50，nM))。

【表22】

3-9.突变双特异性抗体在携带H929的人源化NOG小鼠中抑制肿瘤生长

在注射了H929细胞的人源化NOG小鼠中测试了抗BCMA/抗4-1BB抗体的抗肿瘤效果。简而言之，通过NCI-H929细胞(5×10

3-10.肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-infiltrating lymphocytes；TIL)的分析

为了评估TIL，用抗CD45抗体(人白细胞标志物)和抗CD8抗体(人细胞毒性T淋巴细胞标志物)对来自携带H929的hPBMC移植小鼠的以福尔马林固定的且以石蜡包埋的肿瘤组织切片进行免疫染色。通过应用亲和素-生物素检测试剂盒进行免疫组织化学技术。所获得的结果显示在图9A和图9B。如图9A和9B所示，与肿瘤周围相比，抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体有效增强了包括CD45+细胞和CD8+T细胞的免疫细胞向肿瘤组织的浸润。这些结果表明，CD45+和CD8+细胞在抗BCMA/抗4-1BB双特异性治疗组中增加，尤其是在肿瘤区室中。

3-11.抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体在食蟹猴体内的药代动力学

通过食蟹猴的大隐静脉注射10mg/kg的抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体(5D5M4(NA)×41B01 M12和5A6M6(NA)×41B01 M12)。在施用药前和施用药后0.05至504小时的预定间隔通过股静脉从每只动物采集血样。将血样离心以获得血清。使用酶联免疫吸附测定(ELISA)测量食蟹猴血清中的5D5M4(NA)×41B01 M12和5A6M6(NA)×41B01 M12的浓度。将人BCMA-Fc蛋白涂覆在96孔板上，然后用封闭缓冲液封闭。之后，洗涤板，将标准品、质量控制样品和研究样品加入板中，然后在37℃下培养2小时。然后将板再次洗涤并与人4-1BBhis蛋白一起培养。洗涤后，用接合有辣根过氧化物酶的抗His标记抗体检测结合的分子。用TMB底物对板进行显影并通过分光光度计在OD 450至650nm处进行分析。使用4参数算法从用适当的食蟹猴血清中的已知量的5D5M4(NA)×41B01 M12和5A6M6(NA)×41B01 M12制备的标准曲线确定来自血清样品的浓度。5D5M4(NA)×41B01 M12和5A6M6(NA)×41B01 M12的标准曲线范围为46ng/mL至300,000ng/mL，并且定量下限(lower limit of quantitation；LLOQ)定义为300ng/mL。使用WinNonlin软件(Phoenix WinNonlin8.0)通过非隔室模型估计药代动力学参数。所获得的结果显示在图10A和图10B。图10A和图10B的结果分别被量化并总结在表23和表24中(WinNonlin设置、NCA、线性梯形线性插值法、静脉团注、半衰期计算时间：24小时至240小时)。结果表明，5D5M4(NA)×41B01 M12甚至具有优于5A6M6(NA)×41B01M12的PK特性。

【表23】

【表24】

3-12.抗BCMA/4-1BB双特异性抗体在携带过表达BCMA的MC38的4-1BB敲入小鼠中抑制肿瘤生长

用携带过表达BCMA的MC38的人4-1BB敲入小鼠系统(CRO：百奥赛图(Biocytogen))评估抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体的体内抗肿瘤效果。简而言之，通过皮下注射将MC38-hBCMA(5×10

所获得的结果显示在图11和表25。表25是5D5M4(NA)×41B01 M12在携带MC38-hBCMA的4-1BB敲入小鼠中的肿瘤生长抑制总结结果((*P<0.05；**P<0.01)。在表25中，Q3D是指每三天一次的给药频率。

【表25】

如图11和表25所示，5D5M4(NA)×41B01 M12显示出抗肿瘤功效。G2(5D5M4(NA)×41B01 M12,2mg/kg)的肿瘤生长抑制率(TGI％)约为62.2％，G3(5D5M4(NA)×41B01 M12,0.4mg/kg)约为47.4％。总体而言，抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体在人BCMA/MC38肿瘤中显示出优异的抗肿瘤功效。

序列表

<110> ABL BIO INC.

<120> 抗BCMA/抗4-1BB双特异性抗体及其用途

<130> GN-63722-PCT

<160> 130

<170> KoPatentIn 3.0

<210> 1

<211> 184

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人BCMA(NP_001183.2)

<400> 1

Met Leu Gln Met Ala Gly Gln Cys Ser Gln Asn Glu Tyr Phe Asp Ser

1 5 10 15

Leu Leu His Ala Cys Ile Pro Cys Gln Leu Arg Cys Ser Ser Asn Thr

20 25 30

Pro Pro Leu Thr Cys Gln Arg Tyr Cys Asn Ala Ser Val Thr Asn Ser

35 40 45

Val Lys Gly Thr Asn Ala Ile Leu Trp Thr Cys Leu Gly Leu Ser Leu

50 55 60

Ile Ile Ser Leu Ala Val Phe Val Leu Met Phe Leu Leu Arg Lys Ile

65 70 75 80

Asn Ser Glu Pro Leu Lys Asp Glu Phe Lys Asn Thr Gly Ser Gly Leu

85 90 95

Leu Gly Met Ala Asn Ile Asp Leu Glu Lys Ser Arg Thr Gly Asp Glu

100 105 110

Ile Ile Leu Pro Arg Gly Leu Glu Tyr Thr Val Glu Glu Cys Thr Cys

115 120 125

Glu Asp Cys Ile Lys Ser Lys Pro Lys Val Asp Ser Asp His Cys Phe

130 135 140

Pro Leu Pro Ala Met Glu Glu Gly Ala Thr Ile Leu Val Thr Thr Lys

145 150 155 160

Thr Asn Asp Tyr Cys Lys Ser Leu Pro Ala Ala Leu Ser Ala Thr Glu

165 170 175

Ile Glu Lys Ser Ile Ser Ala Arg

180

<210> 2

<211> 121

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体B58的重链可变区

<400> 2

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Trp Ile Tyr Pro Ser Asp Ser Ser Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Pro Phe Ala Asn Lys Tyr Arg Gln Phe Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 3

<211> 116

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体5B5的重链可变区

<400> 3

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Gly His

20 25 30

Tyr Trp Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Val Ser Gly Ser Gly Gly Asp Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly His Ser Val Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val

100 105 110

Thr Val Ser Ser

115

<210> 4

<211> 116

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体5D5的重链可变区

<400> 4

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Gly Leu Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Leu Ile Asp Ser Ser Gly Ser Ser Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Glu His Gly Leu Phe Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val

100 105 110

Thr Val Ser Ser

115

<210> 5

<211> 117

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体5A6的重链可变区

<400> 5

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Gly Val His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Gly Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asp Ser Asp Asp Phe Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 6

<211> 111

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体B58的轻链可变区

<400> 6

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn

20 25 30

Ser Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ala Asp Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Ser Trp Asp Tyr Ser Leu

85 90 95

Ser Gly Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 7

<211> 108

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体5B5的轻链可变区

<400> 7

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Asp Ser Tyr

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Leu Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Trp Pro Ile

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg

100 105

<210> 8

<211> 108

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体5D5的轻链可变区

<400> 8

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asp Asp Asp

20 25 30

Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Leu Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Leu Arg Thr Pro Ile

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg

100 105

<210> 9

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体5A6的轻链可变区

<400> 9

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Val

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Thr Val Val

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105

<210> 10

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的重链CDR1

<400> 10

Asn Tyr Asp Met Ser

1 5

<210> 11

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的重链CDR1

<400> 11

Gly His Tyr Trp Ser

1 5

<210> 12

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的重链CDR1

<400> 12

Asp Tyr Gly Leu Ser

1 5

<210> 13

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的重链CDR1

<400> 13

Asn Tyr Gly Val His

1 5

<210> 14

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的重链CDR2

<400> 14

Trp Ile Tyr Pro Ser Asp Ser Ser Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 15

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的重链CDR3

<400> 15

Thr Val Ser Gly Ser Gly Gly Asp Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 16

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的重链CDR4

<400> 16

Leu Ile Asp Ser Ser Gly Ser Ser Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 17

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的重链CDR5

<400> 17

Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Gly Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 18

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的重链CDR3

<400> 18

Arg Gly Pro Phe Ala Asn Lys Tyr Arg Gln Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 19

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的重链CDR3

<400> 19

Arg Gly His Ser Val Met Asp Val

1 5

<210> 20

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的重链CDR3

<400> 20

Lys Glu His Gly Leu Phe Asp Ser

1 5

<210> 21

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的重链CDR3

<400> 21

Arg Asp Ser Asp Asp Phe Gly Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 22

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的轻链CDR1

<400> 22

Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Ser Val Ser

1 5 10

<210> 23

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的轻链CDR1

<400> 23

Arg Ala Ser Gln Gly Ile Asp Ser Tyr Val Ala

1 5 10

<210> 24

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的轻链CDR1

<400> 24

Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asp Asp Asp Ile Asn

1 5 10

<210> 25

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的轻链CDR1

<400> 25

Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Val Asn

1 5 10

<210> 26

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的轻链CDR2

<400> 26

Ala Asp Ser Lys Arg Pro Ser

1 5

<210> 27

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的轻链CDR2

<400> 27

Asp Ala Ser Leu Arg Ala Thr

1 5

<210> 28

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的轻链CDR2

<400> 28

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr

1 5

<210> 29

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的轻链CDR3

<400> 29

Gly Ser Trp Asp Tyr Ser Leu Ser Gly Tyr Val

1 5 10

<210> 30

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的轻链CDR3

<400> 30

Gln Gln Tyr Asn Ser Trp Pro Ile

1 5

<210> 31

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的轻链CDR3

<400> 31

Gln Gln Ser Leu Arg Thr Pro Ile

1 5

<210> 32

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-BCMA抗体的轻链CDR3

<400> 32

Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Thr Val

1 5

<210> 33

<211> 363

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 编码抗-BCMA抗体B58的重链可变区的多核苷酸

<400> 33

gaggtgcagc tgctggagtc cggcggcggc ctggtgcagc ccggcggctc cctgcggctg 60

tcctgcgccg cctccggctt caccttctcc aactacgaca tgtcctgggt gcggcaggcc 120

cccggcaagg gcctggagtg ggtgtcctgg atctacccct ccgactcctc catctactac 180

gccgactccg tgaagggccg gttcaccatc tcccgggaca actccaagaa caccctgtac 240

ctgcagatga actccctgcg ggccgaggac accgccgtgt actactgcgc ccggggcccc 300

ttcgccaaca agtaccggca gttcgactac tggggccagg gcaccctggt gaccgtgtcc 360

tcc 363

<210> 34

<211> 348

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 编码抗-BCMA抗体5B5的重链可变区的多核苷酸

<400> 34

gaggtccagt tgttggaaag cggtggtggt ttggttcaac caggcggtag cctcagactc 60

tcctgcgctg cctccgggtt tactttctca gggcactatt ggtcctgggt ccgtcaggca 120

cctggtaagg gacttgaatg ggtatctaca gtttccggct ccggtggaga cactttttat 180

gcagacagcg ttaaggggcg ctttactata agtcgtgata attccaaaaa tactctctat 240

ctccaaatga actccctccg tgctgaagat accgctgtgt actactgcgc tcgaggtcac 300

tcagtcatgg acgtatgggg gcagggcaca ctggtgaccg tatcttcc 348

<210> 35

<211> 348

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 编码抗-BCMA抗体5D5的重链可变区的多核苷酸

<400> 35

gaggtccagt tgttggaaag cggtggtggt ttggttcaac caggcggtag cctcagactc 60

tcctgcgctg cctccgggtt tactttcagc gattatggac tgtcatgggt gcgtcaagct 120

cctggaaaag ggttggagtg ggtgagcctt atagacagca gtgggagtag cactttctac 180

gctgatagcg tgaaaggtag atttactatc tctcgtgata actccaagaa tacattgtat 240

cttcaaatga acagtctgag agctgaggac actgccgttt attattgtgc aaaggaacat 300

ggtcttttcg actcatgggg acagggaaca ctggtgaccg tatcttcc 348

<210> 36

<211> 351

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 编码抗-BCMA抗体5A6的重链可变区的多核苷酸

<400> 36

gaggtccagt tgttggaaag cggtggtggt ttggttcaac caggcggtag cctcagactc 60

tcctgcgctg cctccgggtt tactttcagt aactatggag tacattgggt cagacaagcc 120

cccggcaaag gtcttgagtg ggtcagctac atttcctata gcggaggaac ttactataac 180

ccctcactta aaagccgctt cactatatca cgcgataata gcaagaacac cctctatctt 240

caaatgaact ctctgcgagc agaagacacc gccgtgtact attgcgctag agatagcgac 300

gacttcgggt tcgattattg gggacagggc acactggtga ccgtatcttc c 351

<210> 37

<211> 333

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 编码抗-BCMA抗体B58的轻链可变区的多核苷酸

<400> 37

cagtccgtgc tgacccagcc cccctccgcc tccggcaccc ccggccagcg ggtgaccatc 60

tcctgctccg gctcctcctc caacatcggc tccaactccg tgtcctggta ccagcagctg 120

cccggcaccg cccccaagct gctgatctac gccgactcca agcggccctc cggcgtgccc 180

gaccggttct ccggctccaa gtccggcacc tccgcctccc tggccatctc cggcctgcgg 240

tccgaggacg aggccgacta ctactgcggc tcctgggact actccctgtc cggctacgtg 300

ttcggcggcg gcaccaagct gaccgtgctg ggc 333

<210> 38

<211> 324

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 编码抗-BCMA抗体5B5的轻链可变区的多核苷酸

<400> 38

gaaatagtac ttacacagtc ccctggaact ctgtcacttt cccctgggga gcgagctaca 60

ctgagctgtc gtgccagcca gggcattgat agttacgtgg catggtatca gcagaagccc 120

ggccaggctc caaggctgtt gatttacgat gcatcattgc gagccaccgg aatacctgac 180

cgtttctccg gcagtggctc cgggacagac tttaccctta ctatctcacg tctcgagcca 240

gaagactttg cagtgtatta ttgccaacaa tacaacagtt ggcctataac cttcggccag 300

gggacaaaac tggagataaa gcgt 324

<210> 39

<211> 324

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 编码抗-BCMA抗体5D5的轻链可变区的多核苷酸

<400> 39

gaaatagtac ttacacagtc ccctggaact ctgtcacttt cccctgggga gcgagctaca 60

ctgagctgta aagcctcaca ggacatagac gatgacatca actggtatca gcaaaaacct 120

ggacaagctc cacgtctcct gatttacgat gcatcactta gggccacagg aattcctgat 180

aggttctctg gtagcggcag tggaaccgat tttaccctca caatatctcg acttgaacca 240

gaagatttcg ccgtttatta ctgtcagcag tcccttagga cccccattac attcggccag 300

gggacaaaac tggagataaa gcgt 324

<210> 40

<211> 321

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 编码抗-BCMA抗体5A6的轻链可变区的多核苷酸

<400> 40

caatctgtcc ttacacagcc tccaagcgca agcggcaccc ccggacaaag ggtaacaata 60

tcatgccagg gggattctct tcgcagctat tacgtgaatt ggtatcagca gttgcccggc 120

actgccccca aacttttgat atacgatcac tccaagcgcc ccacaggagt gcctgatagg 180

ttcagcggat ctaagtctgg aacatccgct tctttggcaa tctctgggct gcgaagtgag 240

gacgaggcag actactactg ccagtcttat gacagctcta ctgtagtctt cggaggcggt 300

acaaaactga cagtgctcgg t 321

<210> 41

<211> 108

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5 M1的轻链可变区

<400> 41

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asp Asn Asp

20 25 30

Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Leu Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Leu Arg Thr Pro Ile

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg

100 105

<210> 42

<211> 108

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5 M2的轻链可变区

<400> 42

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asp Glu Asp

20 25 30

Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Leu Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Leu Arg Thr Pro Ile

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg

100 105

<210> 43

<211> 108

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5 M3的轻链可变区

<400> 43

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asp Ala Asp

20 25 30

Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Leu Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Leu Arg Thr Pro Ile

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg

100 105

<210> 44

<211> 108

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5 M4的轻链可变区

<400> 44

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asp Asp Ala

20 25 30

Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Leu Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Leu Arg Thr Pro Ile

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg

100 105

<210> 45

<211> 108

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5 M5的轻链可变区

<400> 45

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asp Asp Glu

20 25 30

Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Leu Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Leu Arg Thr Pro Ile

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg

100 105

<210> 46

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M1的轻链可变区

<400> 46

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Gln Gly Glu Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Val

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Thr Val Val

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105

<210> 47

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M2的轻链可变区

<400> 47

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Gln Gly Asp Ala Leu Arg Ser Tyr Tyr Val

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Thr Val Val

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105

<210> 48

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M3的轻链可变区

<400> 48

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Val

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Glu Ser Ser Thr Val Val

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105

<210> 49

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M4的轻链可变区

<400> 49

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Val

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ala Ser Thr Val Val

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105

<210> 50

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M5的轻链可变区

<400> 50

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Gln Gly Glu Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Val

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Glu Ser Ser Thr Val Val

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105

<210> 51

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M6的轻链可变区

<400> 51

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Gln Gly Glu Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Val

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ala Ser Thr Val Val

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105

<210> 52

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M7的轻链可变区

<400> 52

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Gln Gly Asp Ala Leu Arg Ser Tyr Tyr Val

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Glu Ser Ser Thr Val Val

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105

<210> 53

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M8的轻链可变区

<400> 53

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Gln Gly Asp Ala Leu Arg Ser Tyr Tyr Val

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ala Ser Thr Val Val

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105

<210> 54

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5 M1的轻链CDR1

<400> 54

Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asp Asn Asp Ile Asn

1 5 10

<210> 55

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5 M2的轻链CDR1

<400> 55

Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asp Glu Asp Ile Asn

1 5 10

<210> 56

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5 M3的轻链CDR1

<400> 56

Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asp Ala Asp Ile Asn

1 5 10

<210> 57

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5 M4的轻链CDR1

<400> 57

Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asp Asp Ala Ile Asn

1 5 10

<210> 58

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5 M5的轻链CDR1

<400> 58

Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asp Asp Glu Ile Asn

1 5 10

<210> 59

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M1的轻链CDR1

<400> 59

Gln Gly Glu Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Val Asn

1 5 10

<210> 60

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M2的轻链CDR1

<400> 60

Gln Gly Asp Ala Leu Arg Ser Tyr Tyr Val Asn

1 5 10

<210> 61

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M5和5A6 M6的轻链CDR1

<400> 61

Gln Gly Glu Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Val Asn

1 5 10

<210> 62

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5 M7和5D5 M8的轻链CDR1

<400> 62

Gln Gly Asp Ala Leu Arg Ser Tyr Tyr Val Asn

1 5 10

<210> 63

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M3、5A6 M5和5A6 M7的轻链CDR3

<400> 63

Gln Ser Tyr Glu Ser Ser Thr Val

1 5

<210> 64

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M4、5A6 M6和5A6 M8的轻链CDR3

<400> 64

Gln Ser Tyr Asp Ala Ser Thr Val

1 5

<210> 65

<211> 121

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-4-1BB抗体41B01的重链可变区

<400> 65

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Trp Ile Ser Tyr Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Gly Gln Arg Asn Ser Met Arg Glu Phe Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 66

<211> 121

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-4-1BB抗体41B01 M4的重链可变区

<400> 66

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Trp Ile Ser Tyr Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Ala Gln Arg Asn Ser Met Arg Glu Phe Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 67

<211> 121

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-4-1BB抗体41B01 M11的重链可变区

<400> 67

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Trp Ile Ser Tyr Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Ala Gln Arg Gln Ser Met Arg Glu Phe Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 68

<211> 121

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-4-1BB抗体41B01 M12的重链可变区

<400> 68

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Trp Ile Ser Tyr Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Ala Gln Arg Asn Ser Met Arg Glu Phe Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 69

<211> 121

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-4-1BB抗体41B01 M13的重链可变区

<400> 69

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Trp Ile Ser Tyr Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Ala Gln Arg Gln Ser Met Arg Glu Phe Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 70

<211> 127

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-4-1BB抗体41B02的重链可变区

<400> 70

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Gly Tyr

20 25 30

Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Val Ile Tyr Pro Asp Asp Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Ala Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys His Gly Gly Gln Lys Pro Thr Thr Lys Ser Ser Ser Ala Tyr

100 105 110

Gly Met Asp Gly Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 71

<211> 127

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-4-1BB抗体41B02 M1的重链可变区

<400> 71

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Gly Tyr

20 25 30

Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Val Ile Tyr Pro Asp Asp Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys His Gly Gly Gln Lys Pro Thr Thr Lys Ser Ser Ser Ala Tyr

100 105 110

Gly Met Asp Gly Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 72

<211> 119

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-4-1BB抗体AB41的重链可变区

<400> 72

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Val Ile Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Glu Ile Asn Pro Gly Asn Gly His Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Ser Arg Ala Thr Leu Thr Gly Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Phe Thr Thr Ala Arg Ala Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 73

<211> 111

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-4-1BB抗体41B01的轻链可变区

<400> 73

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Arg

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn

20 25 30

Tyr Val Thr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ala Asp Ser His Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Tyr Ser Leu

85 90 95

Ser Gly Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 74

<211> 111

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-4-1BB抗体41B01 M4的轻链可变区

<400> 74

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Arg

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn

20 25 30

Tyr Val Thr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ala Asp Ser His Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Tyr Ser Leu

85 90 95

Ser Gly Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 75

<211> 111

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-4-1BB抗体41B01 M11的轻链可变区

<400> 75

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Arg

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn

20 25 30

Tyr Val Thr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ala Asp Ser His Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Tyr Ser Leu

85 90 95

Ser Gly Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 76

<211> 111

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-4-1BB抗体41B01 M12的轻链可变区

<400> 76

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn

20 25 30

Tyr Val Thr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ala Asp Ser His Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Tyr Ser Leu

85 90 95

Ser Gly Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 77

<211> 111

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-4-1BB抗体41B01 M13的轻链可变区

<400> 77

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn

20 25 30

Tyr Val Thr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ala Asp Ser His Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Tyr Ser Leu

85 90 95

Ser Gly Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 78

<211> 111

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-4-1BB抗体41B02的轻链可变区

<400> 78

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Arg

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn

20 25 30

Tyr Val Thr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ala Asp Ser His Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Tyr Ser Leu

85 90 95

Ser Gly Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 79

<211> 111

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-4-1BB抗体41B02 M1的轻链可变区

<400> 79

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn

20 25 30

Tyr Val Thr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ala Asp Ser His Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Tyr Ser Leu

85 90 95

Ser Gly Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 80

<211> 108

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗-4-1BB抗体AB41的轻链可变区

<400> 80

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Phe Leu Ser Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Thr Ile Ser Asp Tyr

20 25 30

Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ala

65 70 75 80

Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asp Gly His Ser Phe Pro Pro

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg

100 105

<210> 81

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 41B01、41B01 M4、41B01 M11、41B01 M12和41B01 M13的重链CDR1

<400> 81

Ser Tyr Asp Met Ser

1 5

<210> 82

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 41B02和41B02 M1的重链CDR1

<400> 82

Gly Tyr Asp Met Ser

1 5

<210> 83

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> AB41的重链CDR1

<400> 83

Ser Tyr Trp Met His

1 5

<210> 84

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 41B01、41B01 M4、41B01 M11、41B01 M12和41B01 M13的重链CDR2

<400> 84

Trp Ile Ser Tyr Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 85

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 41B02和41B02 M1的重链CDR2

<400> 85

Val Ile Tyr Pro Asp Asp Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 86

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> AB41的重链CDR2

<400> 86

Glu Ile Asn Pro Gly Asn Gly His Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Ser

<210> 87

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 41B01的重链CDR3

<400> 87

Asp Gly Gln Arg Asn Ser Met Arg Glu Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 88

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 41B01 M4和41B01 M12的重链CDR3

<400> 88

Asp Ala Gln Arg Asn Ser Met Arg Glu Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 89

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 41B01 M11和41B01 M13的重链CDR3

<400> 89

Asp Ala Gln Arg Gln Ser Met Arg Glu Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 90

<211> 18

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 41B02和41B02 M1的重链CDR3

<400> 90

His Gly Gly Gln Lys Pro Thr Thr Lys Ser Ser Ser Ala Tyr Gly Met

1 5 10 15

Asp Gly

<210> 91

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> AB41的重链CDR3

<400> 91

Ser Phe Thr Thr Ala Arg Ala Phe Ala Tyr

1 5 10

<210> 92

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 41B01、41B01 M4、41B01 M11、41B01 M12、41B01 M13、41B02和41B02 M1的轻链CDR1

<400> 92

Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn Tyr Val Thr

1 5 10

<210> 93

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> AB41的轻链CDR1

<400> 93

Arg Ala Ser Gln Thr Ile Ser Asp Tyr Leu His

1 5 10

<210> 94

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 41B01、41B01 M4、41B01 M11、41B01 M12、41B01 M13、41B02和41B02 M1的轻链CDR2

<400> 94

Ala Asp Ser His Arg Pro Ser

1 5

<210> 95

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> AB41的轻链CDR2

<400> 95

Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser

1 5

<210> 96

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 41B01、41B01 M4、41B01 M11、41B01 M12、41B01 M13、41B02和41B02 M1的轻链CDR3

<400> 96

Ala Thr Trp Asp Tyr Ser Leu Ser Gly Tyr Val

1 5 10

<210> 97

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> AB41的轻链CDR3

<400> 97

Gln Asp Gly His Ser Phe Pro Pro Thr

1 5

<210> 98

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 接头(GGGGS)4

<400> 98

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 99

<211> 18

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 接头(GS)9

<400> 99

Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser

1 5 10 15

Gly Ser

<210> 100

<211> 451

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> B58抗体的BCMA-重链

<400> 100

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Trp Ile Tyr Pro Ser Asp Ser Ser Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Pro Phe Ala Asn Lys Tyr Arg Gln Phe Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser

115 120 125

Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala

130 135 140

Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val

145 150 155 160

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala

165 170 175

Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val

180 185 190

Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His

195 200 205

Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys

210 215 220

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

225 230 235 240

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

245 250 255

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

260 265 270

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

275 280 285

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr

290 295 300

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

305 310 315 320

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

325 330 335

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

340 345 350

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser

355 360 365

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

370 375 380

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

385 390 395 400

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

405 410 415

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

420 425 430

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

435 440 445

Pro Gly Lys

450

<210> 101

<211> 216

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> B58抗体的BCMA-轻链

<400> 101

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn

20 25 30

Ser Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ala Asp Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Ser Trp Asp Tyr Ser Leu

85 90 95

Ser Gly Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln

100 105 110

Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu

115 120 125

Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr

130 135 140

Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys

145 150 155 160

Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr

165 170 175

Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His

180 185 190

Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys

195 200 205

Thr Val Ala Pro Ala Glu Cys Ser

210 215

<210> 102

<211> 446

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5B5抗体的BCMA-重链

<400> 102

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Gly His

20 25 30

Tyr Trp Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Val Ser Gly Ser Gly Gly Asp Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly His Ser Val Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val

100 105 110

Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala

115 120 125

Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu

130 135 140

Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly

145 150 155 160

Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser

165 170 175

Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu

180 185 190

Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr

195 200 205

Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr

210 215 220

Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe

225 230 235 240

Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro

245 250 255

Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val

260 265 270

Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr

275 280 285

Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val

290 295 300

Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys

305 310 315 320

Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser

325 330 335

Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro

340 345 350

Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val

355 360 365

Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly

370 375 380

Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp

385 390 395 400

Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp

405 410 415

Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His

420 425 430

Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 103

<211> 214

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5B5抗体的BCMA-轻链

<400> 103

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Asp Ser Tyr

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Leu Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Trp Pro Ile

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 104

<211> 446

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5、5D5 M1、5D5 M2、5D5 M3和5D5 M4的BCMA-重链

<400> 104

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Gly Leu Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Leu Ile Asp Ser Ser Gly Ser Ser Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Glu His Gly Leu Phe Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val

100 105 110

Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala

115 120 125

Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu

130 135 140

Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly

145 150 155 160

Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser

165 170 175

Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu

180 185 190

Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr

195 200 205

Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr

210 215 220

Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe

225 230 235 240

Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro

245 250 255

Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val

260 265 270

Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr

275 280 285

Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val

290 295 300

Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys

305 310 315 320

Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser

325 330 335

Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro

340 345 350

Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val

355 360 365

Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly

370 375 380

Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp

385 390 395 400

Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp

405 410 415

Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His

420 425 430

Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 105

<211> 214

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5抗体的BCMA-轻链

<400> 105

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asp Asp Asp

20 25 30

Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Leu Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Leu Arg Thr Pro Ile

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 106

<211> 214

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5 M1抗体的BCMA-轻链

<400> 106

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asp Asn Asp

20 25 30

Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Leu Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Leu Arg Thr Pro Ile

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 107

<211> 214

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5 M2抗体的BCMA-轻链

<400> 107

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asp Glu Asp

20 25 30

Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Leu Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Leu Arg Thr Pro Ile

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 108

<211> 214

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5 M3抗体的BCMA-轻链

<400> 108

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asp Ala Asp

20 25 30

Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Leu Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Leu Arg Thr Pro Ile

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 109

<211> 214

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5 M4抗体的BCMA-轻链

<400> 109

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asp Asp Ala

20 25 30

Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Leu Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Leu Arg Thr Pro Ile

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 110

<211> 214

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5 M5抗体的BCMA-轻链

<400> 110

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asp Asp Glu

20 25 30

Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Leu Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Leu Arg Thr Pro Ile

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 111

<211> 447

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6、5A6 M1、5A6 M2、5A6 M3、5A6 M4、5A6 M5、5A6 M6、5A6 M7和5A6 M8的BCMA-重链

<400> 111

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Gly Val His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Gly Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asp Ser Asp Asp Phe Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu

115 120 125

Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys

130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser

145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser

165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser

180 185 190

Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn

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Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His

210 215 220

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val

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Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

245 250 255

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Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

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Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile

325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

340 345 350

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<210> 112

<211> 212

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6抗体的BCMA-轻链

<400> 112

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Val

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

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65 70 75 80

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Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly Ala Val

130 135 140

Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly Val Glu

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Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala Ser Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser Tyr Ser

180 185 190

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195 200 205

Ala Glu Cys Ser

210

<210> 113

<211> 212

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M1抗体的BCMA-轻链

<400> 113

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Gln Gly Glu Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Val

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Thr Val Val

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln Ala Asn

115 120 125

Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly Ala Val

130 135 140

Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly Val Glu

145 150 155 160

Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala Ser Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser Tyr Ser

180 185 190

Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val Ala Pro

195 200 205

Ala Glu Cys Ser

210

<210> 114

<211> 212

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M2抗体的BCMA-轻链

<400> 114

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Gln Gly Asp Ala Leu Arg Ser Tyr Tyr Val

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Thr Val Val

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln Ala Asn

115 120 125

Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly Ala Val

130 135 140

Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly Val Glu

145 150 155 160

Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala Ser Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser Tyr Ser

180 185 190

Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val Ala Pro

195 200 205

Ala Glu Cys Ser

210

<210> 115

<211> 212

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M3抗体的BCMA-轻链

<400> 115

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Val

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

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Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Glu Ser Ser Thr Val Val

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln Ala Asn

115 120 125

Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly Ala Val

130 135 140

Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly Val Glu

145 150 155 160

Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala Ser Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser Tyr Ser

180 185 190

Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val Ala Pro

195 200 205

Ala Glu Cys Ser

210

<210> 116

<211> 212

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M4抗体的BCMA-轻链

<400> 116

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Val

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ala Ser Thr Val Val

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln Ala Asn

115 120 125

Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly Ala Val

130 135 140

Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly Val Glu

145 150 155 160

Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala Ser Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser Tyr Ser

180 185 190

Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val Ala Pro

195 200 205

Ala Glu Cys Ser

210

<210> 117

<211> 212

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M5抗体的BCMA-轻链

<400> 117

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Gln Gly Glu Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Val

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Glu Ser Ser Thr Val Val

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln Ala Asn

115 120 125

Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly Ala Val

130 135 140

Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly Val Glu

145 150 155 160

Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala Ser Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser Tyr Ser

180 185 190

Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val Ala Pro

195 200 205

Ala Glu Cys Ser

210

<210> 118

<211> 212

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M6抗体的BCMA-轻链

<400> 118

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Gln Gly Glu Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Val

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ala Ser Thr Val Val

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln Ala Asn

115 120 125

Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly Ala Val

130 135 140

Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly Val Glu

145 150 155 160

Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala Ser Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser Tyr Ser

180 185 190

Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val Ala Pro

195 200 205

Ala Glu Cys Ser

210

<210> 119

<211> 212

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M7抗体的BCMA-轻链

<400> 119

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Gln Gly Asp Ala Leu Arg Ser Tyr Tyr Val

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Glu Ser Ser Thr Val Val

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln Ala Asn

115 120 125

Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly Ala Val

130 135 140

Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly Val Glu

145 150 155 160

Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala Ser Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser Tyr Ser

180 185 190

Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val Ala Pro

195 200 205

Ala Glu Cys Ser

210

<210> 120

<211> 212

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6 M8抗体的BCMA-轻链

<400> 120

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Gln Gly Asp Ala Leu Arg Ser Tyr Tyr Val

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp His Ser Lys Arg Pro Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ala Ser Thr Val Val

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln Ala Asn

115 120 125

Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly Ala Val

130 135 140

Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly Val Glu

145 150 155 160

Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala Ser Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser Tyr Ser

180 185 190

Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val Ala Pro

195 200 205

Ala Glu Cys Ser

210

<210> 121

<211> 251

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 41B01 scFV

<400> 121

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Arg

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn

20 25 30

Tyr Val Thr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ala Asp Ser His Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Tyr Ser Leu

85 90 95

Ser Gly Tyr Val Phe Gly Cys Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gly

100 105 110

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro

130 135 140

Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser

145 150 155 160

Ser Tyr Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu

165 170 175

Trp Val Ser Trp Ile Ser Tyr Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Tyr Ala Asp

180 185 190

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr

195 200 205

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245 250

<210> 122

<211> 251

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 41B01 M4 scFV

<400> 122

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Arg

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn

20 25 30

Tyr Val Thr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

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50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Tyr Ser Leu

85 90 95

Ser Gly Tyr Val Phe Gly Cys Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gly

100 105 110

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro

130 135 140

Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser

145 150 155 160

Ser Tyr Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu

165 170 175

Trp Val Ser Trp Ile Ser Tyr Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Tyr Ala Asp

180 185 190

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr

195 200 205

Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr

210 215 220

Tyr Cys Ala Arg Asp Ala Gln Arg Asn Ser Met Arg Glu Phe Asp Tyr

225 230 235 240

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245 250

<210> 123

<211> 251

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 41B01 M11 scFV

<400> 123

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Arg

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn

20 25 30

Tyr Val Thr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

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Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

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Ser Gly Tyr Val Phe Gly Cys Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gly

100 105 110

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro

130 135 140

Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser

145 150 155 160

Ser Tyr Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu

165 170 175

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180 185 190

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr

195 200 205

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210 215 220

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Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245 250

<210> 124

<211> 251

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 41B01 M12 scFV

<400> 124

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn

20 25 30

Tyr Val Thr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ala Asp Ser His Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Tyr Ser Leu

85 90 95

Ser Gly Tyr Val Phe Gly Cys Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gly

100 105 110

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro

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Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser

145 150 155 160

Ser Tyr Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu

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Trp Val Ser Trp Ile Ser Tyr Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Tyr Ala Asp

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Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr

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Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr

210 215 220

Tyr Cys Ala Arg Asp Ala Gln Arg Asn Ser Met Arg Glu Phe Asp Tyr

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<213> 人工序列

<220>

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Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro

130 135 140

Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser

145 150 155 160

Ser Tyr Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu

165 170 175

Trp Val Ser Trp Ile Ser Tyr Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Tyr Ala Asp

180 185 190

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr

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Tyr Cys Ala Arg Asp Ala Gln Arg Gln Ser Met Arg Glu Phe Asp Tyr

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<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

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Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

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Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro

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Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser

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Gly Tyr Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu

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<211> 257

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

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Ser Gly Tyr Val Phe Gly Cys Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gly

100 105 110

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro

130 135 140

Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser

145 150 155 160

Gly Tyr Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu

165 170 175

Trp Val Ser Val Ile Tyr Pro Asp Asp Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp

180 185 190

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr

195 200 205

Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr

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Tyr Cys Ala Lys His Gly Gly Gln Lys Pro Thr Thr Lys Ser Ser Ser

225 230 235 240

Ala Tyr Gly Met Asp Gly Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser

245 250 255

Ser

<210> 128

<211> 247

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

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<400> 128

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65 70 75 80

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Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Gly Gly Gly Gly

100 105 110

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

115 120 125

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Val Ile Lys Pro Gly Ala

130 135 140

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Tyr

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Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Cys Leu Glu Trp Ile

165 170 175

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180 185 190

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225 230 235 240

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245

<210> 129

<211> 715

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5D5M4(NA)x41B01 M12双特异性抗体的重组分

<400> 129

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1 5 10 15

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Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala

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130 135 140

Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly

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165 170 175

Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu

180 185 190

Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr

195 200 205

Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr

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<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 5A6M6(NA)x41B01 M12双特异性抗体的重组分

<400> 130

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

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Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

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Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu

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Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys

130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser

145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser

165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser

180 185 190

Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn

195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His

210 215 220

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val

225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

245 250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu

260 265 270

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile

325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

340 345 350

Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

370 375 380

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

405 410 415

Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly

435 440 445

Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly

450 455 460

Ser Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly

465 470 475 480

Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn

485 490 495

Asn Tyr Val Thr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu

500 505 510

Leu Ile Tyr Ala Asp Ser His Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe

515 520 525

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu

530 535 540

Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Tyr Ser

545 550 555 560

Leu Ser Gly Tyr Val Phe Gly Cys Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

565 570 575

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

580 585 590

Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln

595 600 605

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe

610 615 620

Ser Ser Tyr Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu

625 630 635 640

Glu Trp Val Ser Trp Ile Ser Tyr Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Tyr Ala

645 650 655

Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn

660 665 670

Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val

675 680 685

Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Ala Gln Arg Asn Ser Met Arg Glu Phe Asp

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Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

705 710 715