一种用于检测Hg2+的荧光探针RBLS

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及用于检测Hg

背景技术

汞作为生态环境中毒性最强的元素之一，因其生物蓄积性、水体易吸收性、蛋白靶向性等特点，对生态环境和生物健康构成巨大威胁。汞离子对生物体内蛋白质和酶中硫醇基团具有很高的亲和力，一旦进入生物体，会造成极为严重的细胞功能障碍，损害神经系统和内分泌系统。从而引发一系列疾病，如水俣病、阿尔兹海默症、亨特-罗素综合征等。采矿、垃圾焚烧、燃煤和工业制造等是汞排放的主要来源，广泛存在人类的生产生活中。因此开发一种能在体内外方便、快速、高选择性和高灵敏度的Hg

目前电化学分析、电感耦合等离子体质谱法、原子吸收光谱法等传统方法可以对汞离子选择性检测，但存在时间长、成本高、样品预处理繁琐和无法实时检测等缺点。荧光生物成像技术在细胞成像中的优势被广泛应用于目标分子的快速检测，如低成本、生物相容性好、灵敏度高、实时性等，是未来环境监测、疾病诊断领域中有力工具之一。

本专利制备了一种近红外荧光探针RBLS。这种探针通过开闭环表达光谱信号从而检测目标物质，具有响应快速、选择性高等特点，可痕量检测水样中的Hg

发明内容

本发明目的是提供一种用于检测Hg

实现本发明目的的技术解决方案是：

一种用于检测Hg

本发明中的近红外荧光探针RBLS的制备方法，包括以下步骤：

将化合物1和化合物2以等摩尔比混合于甲苯，110℃下回流过夜，完成后加入石油醚得到沉淀即为化合物3；将化合物3(2.577g)和化合物4(3.87g)在20mL浓硫酸中回流过夜，反应结束后加入1mL高氯酸搅拌30分钟后再加入100mL纯水，瓶内放出大量热量并伴有黑色固体沉淀析出，将沉淀抽滤、洗涤、烘干，以CH

本发明中所述的用于检测Hg

本发明与现有技术相比，其显著优点是：(1)本发明以合成了一种Hg

附图说明

图1化合物5的

图2化合物5的

图3化合物RBLS的

图4化合物RBLS的

图5化合物RBLS的的ESI质谱图

图6化合物RBLS在含有不同阳离子、阴离子的溶液中的荧光光谱

图7化合物RBLS对Hg

图8化合物RBLS对Hg

图9化物RBLS在细胞成像中的应用(1)用化合物RBLS培育6小时细胞，(2)用化合物RBLS培育6小时后再加入Hg2+培育两小时的细胞，(A)亮场，(B)蓝通道，(C)红通道，(D)叠加通道

图10化合物RBLS在斑马鱼的活体荧光成像中的应用(1)用探针RBLS培育的斑马鱼(2)RBLS+Hg2+共同培育的斑马鱼(A)荧光图像，(B)亮场(C)叠加通道

图11 RBLS试纸对不同金属离子的响应

图12 RBLS试纸对Hg

具体实施方式

(一)荧光探针RBLS的合成

本发明提供了用于检测Hg

(二)荧光性能测试

将Fe

(三)化合物RBLS对细胞及斑马鱼体内Hg

(四)RBLS试纸相关测试

下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步详细说明。

实施例1

荧光探针RBLS的合成

将化合物1和化合物2以等摩尔比混合于甲苯，110℃下回流过夜，完成后加入石油醚得到沉淀即为化合物3；将化合物3(2.577g)和化合物4(3.87g)在20mL浓硫酸中回流过夜，反应结束后加入1mL高氯酸搅拌30分钟后再加入100mL纯水，瓶内放出大量热量并伴有黑色固体沉淀析出，将沉淀抽滤、洗涤、烘干，以CH

具体合成路径如下：

其中化合物5的相关图谱见说明书附图1，2。

其中化合物RBLS的相关图谱见说明书附图3，4，5

实施例2

荧光探针RBLS对Hg

荧光探针RBLS在乙醇和水中都具有很好的溶解性，经验证，化合物RBLS可以溶解在EtOH/H

精确配置荧光探针RBLS为1×10

取3mL EtOH/H

实验结果如附图6所示。由附图6知，荧光探针RBLS在与各种阳离子、阴离子接触后，只有与Hg

实施例3

荧光探针RBLS对Hg

精确配置荧光探针RBLS为1×10

取60×10

RBLS对Hg

实施例4

化合物RBLS对Hg

精确配置荧光探针RBLS为1×10

将HgCl

实施例5

化合物RBLS在细胞成像中的应用

将HeLa细胞在37℃(5％CO

实施例6

化合物RBLS在斑马鱼的活体荧光成像中的应用

首先将一组斑马鱼置于含有20μM化合物RBLS溶液中孵育1小时，然后将斑马鱼更换至含Hg

实施例7

RBLS试纸对不同金属离子的响应

将滤纸浸入用二氯甲烷溶解的RBLS溶液中(100μM)30秒后风干，将此操作重复三次，即得RBLS试纸。将制备的RBLS试纸用不同金属阳离子液体浸泡处理。如附图11所示，只有Hg

实施例8

RBLS试纸对Hg

将滤纸浸入用二氯甲烷溶解的RBLS溶液中(100μM)30秒后风干，将此操作重复三次，即得RBLS试纸。将制备的RBLS试纸浸泡于不同浓度Hg