一类黄嘌呤芳酸醚衍生物及用途

技术领域

本发明涉及一类黄嘌呤芳酸醚衍生物及用途，属于化学技术领域。

背景技术

脑卒中是一种急性脑血管病，包括出血性脑卒中和缺血性脑卒中，具有发病率高、死亡率高和致残率高的特点。近年来，随着全球人口老龄化的日益严重，导致脑卒中疾病的发病人数持续增加。迄今为止，还缺乏有效的预防和治疗脑卒中的药物应用于临床。研究表明，缺血性脑卒中是一个涉及多细胞因子和多信号传导的复杂病理级联反应。其机制主要为脑部血管在短时间内急剧阻塞形成血栓，导致脑部形成血栓，能量和氧气供养不足。进而导致活性氧的形成、兴奋性氨基酸的释放、神经细胞内钙超载以及诱导炎症等一系列级联反应。

临床上治疗缺血性脑卒中的策略主要集中在两个方面：一是以血管再通为目的的治疗，包括溶栓、扩张血管、血管重构、侧枝循环建立和调节血液状态，以恢复和促进脑缺血区的血液供应；二是以保护神经细胞结构和功能为目的的治疗，通过药物等方法阻断神经细胞死亡的级联反应，减轻由于缺血引起的神经细胞损伤。鉴于脑卒中疾病的复杂性，调节单个靶点的治疗在临床上似乎并不能提供令人满意的疗效。因此，临床急需新的具有显著治疗效果的药物。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术存在的缺陷，提供一类黄嘌呤芳酸醚类衍生物，为缺血性脑血管病治疗药物研发提供了一种新的途径。

本发明通过以下技术方案实现发明目的，首先提供一类黄嘌呤芳酸醚衍生物，包括式I所示的化合物其药学上可接受的盐、光学异构体或溶剂化物，

式中，R

当R

当R

n＝1-3，

Ar选自未取代或取代基为D的苯基、苯乙烯基、呋喃基、噻唑基，所述取代基D选自H、卤素、C

R

黄嘌呤芳酸醚衍生物，所述化合物含有以下通式，

式中，n＝1-3，

R

R

上述化合物含有以下通式，

式中，n＝1-3，

R

R

所述化合物或其药学上可接受的盐包括以下化合物，

所述药学上可接受的盐选择碱金属或者碱土金属，氨基酸或者含有氨基的碱性化合物形成的盐，或者药学上允许的无机酸或者有机酸形成的盐，所述无机酸或者有机酸形成的盐包括钾盐，钠盐，铵盐，盐酸、硫酸、磷酸盐、氢溴酸、马来酸、富马酸、枸橼酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、酒石酸或醋酸盐。

本发明进一步提供一种含黄嘌呤芳酸醚衍生物的组合物，所述组合物含有治疗有效量的式I所示的化合物其药学上可接受的盐、光学异构体或溶剂化物中至少一种和药学上可接受的载体。

所述组合物的剂型包括普通片剂或胶囊、缓释片剂或胶囊、控释片剂或胶囊、颗粒剂、口服液、糖浆剂、栓剂、透皮制剂、注射剂。

本发明再进一步提供上述组合物在制备预防和治疗神经损伤相关疾病的药物中的用途。包括神经损伤相关疾病包括缺血性脑卒中、后循环脑缺血、肌萎缩性侧索硬化、癫痫、亨廷顿病、阿尔兹海默症、多发性硬化、多系统萎缩症、帕金森病、原发性脊髓侧索硬化外周神经病、糖尿病性神经病。

本发明的化合物不仅对花生四烯酸(AA)和ADP诱导的血小板聚集具有显著的抑制作用，还具有显著的神经保护功能，并且部分化合物表现出优异的神经保护活性。可用于与神经损伤相关疾病的药物的研发，为缺血性脑血管病治疗药物研发提供了一种新的途径。

具体实施方式

本发明通过以下实施例制备化合物或其药用盐，但不仅限此例，下述示例性的方案解释了制备本发明的化合物分子的方法。这些方法不限于生产所示的化合物，可以用于制备多种分子，例如权利要求项中的化合物。通过在方案中没有明确解释、但是在本领域技术人员知识范围内的方法，可以合成本发明化合物。使用已知中间体的可容易得到的材料，可以制备本发明化合物。

实施例1

化合物4-(2-(3,7-二甲基-2,6-二氧代-2,3,6,7-四氢-1H-嘌呤 -1-基)乙氧基)苯甲酸(F-1)的合成:

步骤1在100mL干燥的圆底烧瓶中加入化合物1(10.0mmol, 1.0eq)和DMSO(30mL),在室温搅拌条件下分批加入60％的 NaH(15.0mmol,1.5eq)，继续搅拌10min，再向反应液中加入化合物1,2-二溴乙烷(40.1mmol,4.0eq)，60℃下搅拌6h，TLC显示反应基本完全。将反应液用300mL水稀释，并用二氯甲烷(80mL× 3)萃取，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，抽滤并减压浓缩滤液，残留物经硅胶柱分离得中间体2，为白色固体,收率45％。

步骤2在250mL干燥的圆底烧瓶中依次加入中间体2(2.3 mmol,1.0eq)，K

步骤3在100mL干燥的圆底烧瓶中加入中间体3(1.4mmol, 1.0eq)和CH

实施例2

化合物4-(3-(3,7-二甲基-2,6-二氧代-2,3,6,7-四氢-1H-嘌呤 -1-基)丙氧基)苯甲酸(F-2)的合成:

参考实施例1的合成方法，将1,2-二溴乙烷原料替换为1,3-二溴丙烷原料，制得化合物F-2，为白色固体，收率74.8％。 ESI-MS[M-H]

实施例3

化合物(E)-3-(4-(2-(3,7-二甲基-2,6-二氧代-2,3,6,7-四氢 -1H-嘌呤-1-基)乙氧基)-3-甲氧基苯基)丙烯酸(F-3)的合成:

参考实施例1的合成方法，将对羟基苯甲酸甲酯原料替换为阿魏酸甲酯原料，制得化合物F-3，为白色固体，收率79.2％。 ESI-MS[M-H]

实施例4

化合物(E)-3-(4-(3-(3,7-二甲基-2,6-二氧代-2,3,6,7-四氢 -1H-嘌呤-1-基)丙氧基)-3-甲氧基苯基)丙烯酸(F-4)的合成:

参考实施例1的合成方法，将1,2-二溴乙烷原料替换为1,3-二溴丙烷原料，对羟基苯甲酸甲酯原料替换为阿魏酸甲酯原料，制得化合物F-4，为白色固体，收率80.2％。ESI-MS[M-H]

实施例5

化合物4-(3-(3,7-二甲基-2,6-二氧代-2,3,6,7-四氢-1H-嘌呤 -1-基)丙氧基)-3-甲氧基苯甲酸(F-5)的合成:

参考实施例1的合成方法，将1,2-二溴乙烷原料替换为1,3-二溴丙烷原料，对羟基苯甲酸甲酯原料替换为香草酸甲酯原料，制得化合物F-5，为白色固体，收率76.5％。ESI-MS[M-H]

实施例6

化合物(E)-3-(4-(2-(3,7-二甲基-2,6-二氧代-2,3,6,7-四氢 -1H-嘌呤-1-基)乙氧基)苯基)丙烯酸(F-6)的合成:

参考实施例1的合成方法，将对羟基苯甲酸甲酯原料替换为反- 对香豆酸甲酯原料，制得化合物F-6，为白色固体，收率75.5％。 ESI-MS[M-H]

实施例7

化合物4-(3-(3,7-二甲基-2,6-二氧代-2,3,6,7-四氢-1H-嘌呤 -1-基)丙氧基)-3,5-二甲氧基苯甲酸(F-7)的合成:

参考实施例1的合成方法，将1,2-二溴乙烷原料替换为1,3-二溴丙烷原料，对羟基苯甲酸甲酯原料替换为丁香酸甲酯原料，制得化合物F-7，为白色固体，收率75.8％。ESI-MS[M-H]

实施例8

化合物4-(3-(1,3-二甲基-2,6-二氧-1,2,3,6-四氢-7H-嘌呤 -7-基)丙氧基)-3-甲氧基苯甲酸(F-8)的合成:

参考实施例1的合成方法，将1,2-二溴乙烷原料替换为1,3-二溴丙烷原料，对羟基苯甲酸甲酯原料替换为香草酸甲酯原料，制得化合物F-8，为白色固体，收率73.1％。ESI-MS[M-H]

实施例9

化合物4-(3-(1，3-二甲基-2,6-二氧-1,2,3,6-四氢-7H-嘌呤 -7-基)丙氧基)-3,5-二甲氧基苯甲酸(F-9)的合成:

参考实施例1的合成方法，将1,2-二溴乙烷原料替换为1,3-二溴丙烷原料，对羟基苯甲酸甲酯原料替换为丁香酸甲酯原料，制得化合物F-9，为白色固体，收率76.6％。ESI-MS[M-H]

实施例10

化合物(E)-3-(4-(3-(1,3-二甲基-2,6-二氧-1,2,3,6-四氢 -7H-嘌呤-7-基)丙氧基)-3-甲氧基苯基)丙烯酸(F-10)的合成:

参考实施例1的合成方法，将1,2-二溴乙烷原料替换为1,3-二溴丙烷原料，对羟基苯甲酸甲酯原料替换为阿魏酸甲酯原料，制得化合物F-10，为白色固体，收率70.3％。ESI-MS[M-H]

实施例11

化合物4-(3-(1,3-二甲基-2,6-二氧-1,2,3,6-四氢-7H-嘌呤-7-基)丙氧基)苯甲酸(F-11)的合成:

参考实施例1的合成方法，将1,2-二溴乙烷原料替换为1,3-二溴丙烷原料，制得化合物F-11，为白色固体，收率72.9％。 ESI-MS[M-H]

实施例12

化合物(E)-3-(4-(2-(1,3-二甲基-2,6-二氧-1,2,3,6-四氢 -7H-嘌呤-7-基)乙氧基)苯基)丙烯酸(F-12)的合成:

参考实施例1的合成条件，制得化合物F-12，为白色固体，收率72.5％。ESI-MS[M-H]

实施例13

化合物4-(2-(1,3-二甲基-2,6-二氧-1,2,3,6-四氢-7H-嘌呤 -7-基)乙氧基)苯甲酸(F-13)的合成:

参考实施例12的合成方法，制得化合物F-13，为白色固体，收率71.4％。ESI-MS[M-H]

实施例14

化合物4-(2-(1,3-二甲基-2,6-二氧-1,2,3,6-四氢-7H-嘌呤-7-基)乙氧基)-3-甲氧基苯甲酸(F-14)的合成:

参考实施例12的合成方法，制得实施例14化合物F-14，为白色固体，收率76.6％。ESI-MS[M-H]

生物活性测试

一、本发明化合物的抗血小板聚集活性测试

采用Bron比浊法测定本发明化合物对AA和ADP诱导的血小板聚集的抑制活性。取雄性新西兰家兔(体重1.8～2.2kg)，皮下注射 1％盐酸普鲁卡因注射液局部浸润麻醉，颈动脉插管取血。将血液与 3.8％枸橼酸钠(0.38g枸橼酸钠溶10mL生理盐水)以9∶1混合，以1000r/min离心10min，取富血小板血浆(PRP)，剩余部分以 3000r/min离心10min，取贫血小板血浆(PPP)。先取300μL PPP 加入测试孔，按“PPP”键进行定标。然后取280μL PRP加入测试杯中，加入10μL不同浓度的药液，在37℃预温槽中预热3min后放入测试孔，按“开始”键时立即加入诱导剂10μL，测定5min 内最大血小板聚集率，并计算各化合物的IC

表1化合物对AA诱导的血小板聚集抑制活性

由表1可见，化合物F-1～F-14不同程度的抑制了AA诱导的血小板聚集，但大部分化合物的抑制活性不如阿司匹林(ASP)。其中，化合物F-12(IC

表2.黄嘌呤芳酸醚类衍生物对ADP诱导的血小板聚集的抑制作用

由表3可见，所有化合物对ADP诱导的血小板聚集均有明显的抑制活性，并且均强于ASP。其中化合物F-4(IC

二、化合物对OGD/R介导的大鼠大脑皮层原代神经元损伤的保护作用

(1)试验动物

清洁级SD孕大鼠，体重350-400g，雌性，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，饲养于SPF级动物房，室内温度控制在23 ±2℃，自由饮食和摄水，昼夜时间为12h/12h。

(2)药物分组：

模型组(OGD/R)；阳性对照组(丁基苯酞(NBP))；药物组(浓度为0.1μmol/L,1μmol/L,10μmol/L)；对照组(羟乙茶碱)，每个浓度生物学重复5次。

(3)试验方法

取SD大鼠乳鼠(0-1d)，左手紧握乳鼠颈肩部及四肢，使头部固定，常规消毒头皮后，右手持眼科剪沿正中线剪开头皮与颅骨，用眼科镊迅速取出整个脑组织，放入冰上盛有D-Hank’s液的玻璃培养皿中，用镊子仔细剥离脑组织表面血管及脑膜，去除小脑、脑干，再用D-Hank’s液反复冲洗脑组织。用眼科剪刀剪取大脑皮质，移入玻璃培养皿中，剪碎大脑皮质，再加入胰酶，巴氏管反复吸取脑组织与胰酶混合物，将两者混匀，置于37℃恒温水浴箱中消化后，加入含有血清的培养基终止消化，然后用200目筛网过滤，滤液离心(800rpm,10min)，弃去上清液，加适量培养液悬浮沉淀，接种于6孔塑料培养板，置37℃、5％CO

选取生长到第7d左右的细胞进行体外OGD/R模型。调节细胞密度，以4×10

表3化合物对缺氧复氧模型介导的大鼠神经元损伤的保护作用

注：药物处理组与OGD/R组相比，*p<0.05,**p<0.01,等浓度物处理组与丁苯酞组相比，

由表3可见，与OGD/R组相比，丁苯酞(0.1μmol/L,1μmol/L, 10μmol/L)，F-2、F-7、F-9、F-10、F-11、F-12、F-14和羟乙茶碱 (1μmol/L,10μmol/L)，F-3、F-4、F-5、F-6、F-8均可以显著提高细胞存活率；F-7、F-10、F-11与等浓度阳性药物丁苯酞相比，差异不明显，其余化合物明显弱于阳性药物丁苯酞。

上述实验可知，本发明可用于制备预防和治疗神经损伤相关疾病的药物。

除上述实施外，本发明还可以有其他实施方式。凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本发明要求的保护范围。