明日叶多糖提取物及其用途

技术领域

本发明属于食品和医药技术领域，具体涉及明日叶多糖提取物及其用途。

背景技术

多糖在食品和制药工业中具有特定的物理化学和生物学功能，近年来其潜在应用价值引起了人们极大的兴趣。明日叶(Angelica keiskei)因其强韧的生命力而命名，明日草、八丈草、长寿草、还阳草等多种名称也都是用来形容明日叶。根据医学研究，明日叶当中含有氨基酸、钙等多种矿物质、营养素，人体食用后能够吸收均衡、适量的氨基酸，从而对人体的各项生理机能和生理功能产生影响。现阶段，我国对明日叶的研究报道比较多，主要集中在酮类、油类等物质，对多糖提取物的研究还较少报道。

生物转化技术是目前所知的最高效和最具有选择性的温和催化技术。由于其条件温和、副产物少、后处理简单等优点，已经开始广泛地应用于一些特殊结构的合成、特定物质活性的增强、天然产物的改性。所需的酶无论在生物体内还是体外均可促进天然物质和或人工合成的化学分子发生转化反应，并且表现出优良的化学选择性、区域选择性、立体选择性。因此生物合成和生物转化提供了许多常规化学方法不能或不易进行的化合物合成方法。该方法不但具有较高的经济效益，而且对环境保护及社会发展都具有重要的战略意义。

发明内容

本发明的目的在于提供明日叶多糖提取物及其用途，该明日叶多糖提取物生物转化率高，药效强，具有优异的抗炎作用和抗氧化能力，且溶血栓效果良好，对骨折合并脑损伤的治疗效果优异，可用于相应药品或功能性保健食品的制备。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

本发明公开了一种明日叶多糖提取物和/或香草酸甲酯糖苷在制备用于治疗骨折合并脑损伤的药物中的用途。叶多糖提取物和/或香草酸甲酯糖苷对骨折合并脑损伤的治疗作用强，在一定程度可增强血清中低氧诱导因子1α及核心结合因子α1的表达量，有效激活与启动间充质细胞向成骨细胞系分化和调节成骨细胞的发育，更有利于恢复低氧环境中成骨细胞增殖活性，加快其增殖速率，增强成骨功能，从而促进骨折愈合；同时为骨折合并脑损伤的治疗寻找了一条新途径。

需要说明的是，明日叶多糖提取物和香草酸甲酯糖苷的质量比为1：0～1.2。

需要说明的是，明日叶多糖提取物和/或香草酸甲酯糖苷通过调节低氧诱导因子1α及核心结合因子α1的表达水平，增强成骨功能。

本发明还公开了一种明日叶多糖提取物和/或香草酸甲酯糖苷在制备保健品或药品中的用途。

上述明日叶多糖提取物，由鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖以及岩藻糖组成；以及，其相对分子量为：1～10kDa。

需要说明的是，鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖以及岩藻糖的摩尔比为1：0.8～1.4：2～3.6：6.8～9.4：6.5～8.2：3.1～4.3。

一种明日叶多糖提取物的制备方法，包括：

菌种活化，将绿色木霉接种在PDA培养基上进行培养；

菌种扩增，将上述活化菌种接种在液体培养基中培养得到菌种培养液；

微生物转化，将菌种培养液按照8～12％的接菌量接种于含有山橘脂酸的生物转化培养基中，然后放入恒温振荡摇床中，设置为30～32℃、210～220rpm，培养5～8d；

分离纯化，将微生物转化步骤后得到的液体离心，取上清液加入3～4倍体积的90～95％的乙醇，置于4℃冰箱中静置过夜，离心，保留沉淀，用90～95％的乙醇洗涤3～5次，冷冻干燥得到明日叶出多糖；接着进行CTAB沉淀、乙醇分级和透析(截留分子量在1～10kDa范围内)即得明日叶多糖提取物。生物转化法，具有反应条件温和、操作简便、成本较低、环境污染少、特异性强、副产物少、后处理简单、转化效率高等优点；山橘脂酸的加入，可作用于菌种可促进其胞外纤维素酶的分泌，增强酶活性，进而有效地提高多糖提取物生物转化率，增强多糖提取物的功效。本发明制得的明日叶多糖提取物，获得高效的生物活性物质，具有更高的药理活性，进一步提高抗炎作用和抗氧化能力，且具有优异的溶血栓性能；除此之外，本发明制得的叶多糖提取物，对骨折合并脑损伤具有一定的治疗效果，可可增强血清中低氧诱导因子1α及核心结合因子α1的表达量，促进骨折愈合，有利于病情恢复。同时促进了明日叶多糖资源的深度开发并为研究明日叶多糖降血糖提供理论依据。

需要说明的是，菌种活化条件为：温度28～30℃，培养时间3～5d；菌种扩增条件为：温度28～32℃，转速200～220rpm，培养2～3d。

需要说明的是，生物转化培养基的制备，具体为：将明日叶粉碎过60目筛，称取10～12g，按干物料比例添加(NH

需要说明的是，生物转化培养基中，按干物料比例0.06～0.1％加入山橘脂酸。

需要说明的是，上述制备方法还包括将提取得到明日叶多糖制备为片剂、膏剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、口服液或注射液的步骤。

进一步地，一种保健食品组合物，包括：

按重量份计，上述明日叶多糖提取物和/或香草酸甲酯糖苷3～6份，大豆低聚肽0.8～2.5份，高活性纳豆激酶0.5～1.5份，地龙蛋白0.4～1份，低聚果糖0.2～0.8份，黄芪提取物0.5～1份，壳寡糖0.05～0.2份，复合真菌提取物0.04～0.1份，绞股蓝提取物0.1～0.3份，木糖醇0.08～0.2份。本发明所提出的保健食品组合物是一款功能性复方食品，可促进骨愈合，和/或具有优异的溶解血栓性能，可预防心脑血管。

需要说明的是，复合真菌为香菇、灵芝、姬松茸中的至少一种。

进一步地，一种药物组合物，包括：

按重量份计，上述明日叶多糖提取物和/或香草酸甲酯糖苷1.2～2.5份，纳豆激酶2～3份，磷脂酰丝氨酸0.5～2份，维生素E聚乙二醇琥珀酸酯0.05～0.4份，抗坏血酸棕榈酸酯0.03～0.06份，葡萄糖酸锌0.008～0.02份。本发明所提出的药物组合物具有优异的溶解血栓性能，可促进骨愈合，和/或具有优异的溶解血栓性能，可防治心脑血管。

相比于现有技术，本发明具有如下有益效果：

本发明采用生物转化法，制得的明日叶多糖提取物，获得高效的生物活性物质，具有更高的药理活性，进一步提高抗炎作用和抗氧化能力，且具有优异的溶血栓性能；生物转化过程中加入山橘脂酸，可作用于菌种促进其胞外纤维素酶的分泌，增强酶活性，进而有效地提高多糖提取物生物转化率，增强多糖提取物的功效。除此之外，本发明制得的明日叶多糖提取物，对骨折合并脑损伤具有一定的治疗效果，可增强血清中低氧诱导因子1α及核心结合因子α1的表达量，促进骨折愈合，有利于病情恢复。且叶多糖提取物和香草酸甲酯糖苷配伍使用，对骨折合并脑损伤的治疗效果进一步增强。

因此，本发明提供了明日叶多糖提取物及其用途，该明日叶多糖提取物生物转化率高，药效强，具有优异的抗炎作用和抗氧化能力，且溶血栓效果良好，对骨折合并脑损伤的治疗效果优异，可用于相应药品或功能性保健食品的制备。

附图说明

图1为本发明实施例1中明日叶多糖组分及单糖组成测试结果；

图2为本发明实施例4中红外吸收光谱测试结果示意图；

图3为本发明试验例7中抗炎活性测试结果对比示意图；

图4为本发明试验例8中小鼠血清中mRNA相对表达量测试结果。

具体实施方式

以下结合具体实施方式和附图对本发明的技术方案作进一步详细描述：

本发明实施例所用绿色木霉菌购自四川省工业微生物菌种保藏管理中心，株保藏编号为：SCTCC 400231。

明日叶预处理粉：烘箱60℃干燥明日叶24h，用粉碎机粉碎后用60目筛网过筛后得到明日叶粉末。向粉碎的明日叶中加入2倍体积的石油醚，加入过程不断搅拌，每天更换一次石油醚，浸泡2d，脱脂。然后放置通风橱中干燥得到明日叶粉。再在脱脂后的明日叶粉中加入2倍体积95％乙醇溶液，不断搅拌，浸泡2d，每天更换一次乙醇；最后抽滤后放置通风橱中干燥，得到明日叶预处理粉。

本发明实施例所用生物转化培养基的制备，具体为：将明日叶预处理粉，按干物料比例添加(NH

实施例1：

一种明日叶多糖提取物的制备方法，包括：

菌种活化，将绿色木霉接种在PDA培养基上进行培养；

菌种扩增，将所述活化菌种接种在液体培养基中培养得到菌种培养液；

微生物转化，将菌种培养液按照10.5％的接菌量接种于含有0.086％的山橘脂酸的生物转化培养基中，然后放入恒温振荡摇床中，设置为30℃、220rpm，培养6d；

分离纯化，将微生物转化步骤后得到的液体离心，取上清液加入3倍体积的95％的乙醇，置于4℃冰箱中静置过夜，离心，保留沉淀，用95％的乙醇洗涤3次，冷冻干燥得到明日叶粗多糖；接着进行CTAB沉淀、乙醇分级和透析，具体操作过程如下：

(1)CTAB沉淀

配制2％的明日叶粗多糖提取物溶液，8000rpm离心30min，去除不溶物，按多糖溶液和CTAB体积比为2：1的比例加入5％(w/v)的CTAB溶液，静置12h，再8000rpm离心30min，分别取得上清液和沉淀。向上清液中等比例加入95％乙醇，8000rpm离心20min，去上清液，沉淀复溶后旋转蒸发，得到中性多糖浓缩液；

(2)乙醇分级

配制10mg/mL的中性多糖溶液，3000rpm离心30min后，向上清液中加入95％的乙醇至混合溶液中，乙醇浓度达到25％，静置2h；3000rpm离心30min，得到沉淀，复水后浓缩；

(3)透析

将步骤(2)得到的浓缩液装入透析袋(截留分子量在1～10kDa)中，置于去离子水中透析2d后换蒸馏水再透析24h，透析液减压浓缩、冷冻干燥，得到明日叶多糖提取物。

其中，菌种活化条件为：温度28～30℃，培养时间5d；菌种扩增条件为：温度28～32℃，转速200rpm，培养3d；扩增培养培养基原料组成：葡萄糖10g/L，爆破稻草5.4g/L，CaCl

1、明日叶多糖分子量测定

采用凝胶色谱法测定，将多糖配置成0.1mg/mL溶液；凝胶色谱条件：waterse2695，配有2414RI Detector，2489UV/Vis Detecror两个检测器；色谱柱：WatersUltrahydrogel 2000column(7.8mm×300mm)；保护柱：Ultrahydrogel(6mm×40mm)GuardColumn；流动相：0.1M NaNO

2、多糖含量的测定

采用硫酸-苯酚法测定糖含量(参考文献：Dubois M.,et al.Colorimetricmethod for detemination of sugars and related substances.Anal.Chem.1956；28：350-56)。测定结果：明日叶多糖的得率为43.18％。

3、明日叶多糖组分及单糖组成测定

将明日叶多糖配置成0.5mg/mL溶液；取100μL 0.5mg/mL的明日叶多糖样品溶于5mL试管中，加入100μL 4M三氟乙酸，充N

液相色谱条件：色谱柱：Waters XBridge C18色谱柱，5μm 4.6×250mm；流动相：缓冲液-乙腈(体积比为83：17)0.1M磷酸盐(pH 6.7)；检测波长：250nm；柱温：30℃；进样体积：20μL；流速：1mL/min(低点)。通过峰面积进行定量分析。

测试结果如图1所示，根据HPLC测定结果，参照CAS查询对比数据库得到各峰的单糖类型，得到明日叶多糖组分包括：鼠李糖(I)、甘露糖(II)、葡萄糖(III)、阿拉伯糖(IV)、半乳糖(V)以及岩藻糖(VI)；通过峰面积定量分析可得，鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖以及岩藻糖的摩尔比为1：1.25：2.56：8.43：7.31：3.68。

实施例2：

一种明日叶多糖提取物的制备方法与实施例1的不同之处在于：生物转化培养基中山橘脂酸的添加量为0.073％；获得的明日叶多糖的组分包括：鼠李糖(I)、甘露糖(II)、葡萄糖(III)、阿拉伯糖(IV)、半乳糖(V)以及岩藻糖(VI)；通过峰面积定量分析可得，鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖以及岩藻糖的摩尔比为1：1.03：2.94：7.28：6.91：4.11。

实施例3：

一种明日叶多糖提取物的制备方法与实施例1的不同之处在于：生物转化培养基中不添加山橘脂酸；获得的明日叶多糖的组分包括：鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、阿拉伯糖以及半乳糖；且鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、阿拉伯糖以及半乳糖的摩尔比为1：2.01：1.48：5.13：10.41。

实施例4：

一种明日叶多糖提取物的制备：

称取50g明日叶预处理粉，采用水溶法提取(料水为1：16，提取温度65℃，时间2.5h)后，过滤得到提取液，将提取液通过旋转蒸发进行浓缩，加入3倍体积的95％乙醇，静置过夜，析出沉淀，加入复溶，离心(8000rpm，30min)取上清液，将其冷冻干燥即得明日叶多糖提取物。

获得的明日叶多糖的组分包括：鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、阿拉伯糖以及半乳糖；且鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、阿拉伯糖以及半乳糖的摩尔比为1：2.83：3.49：6.24：10.72。

红外光谱测定(FT-IR)

将样品在恒温干燥箱中除水处理后，取少量样品与溴化钾在玛瑙研钵中混合均匀、研磨和压片后，放置在TENSOR 27型红外光谱仪上进行测试，其中扫描波数范围为4000～500cm

对实施例1和实施例4制得的明日叶多糖提取物进行上述测试，结果如图2所示。从图中分析，特征区：O-H的伸缩振动是在3600～3200cm

指纹区：实施例4样品在1192、1104、1032cm

实施例5：

胞外酶活性测定

1、菌株液体培养、粗酶液制备

将绿色木霉菌株在PDA平板上(28±1)℃恒温培养7d，形成一层绿色孢子，用无菌棉签从斜面培养基上蘸取适量培养好的绿色木霉的孢子溶入无菌水，充分搅拌使孢子在无菌水中均匀分散，形成孢子悬液(浓度1×10

取两等份上述孢子悬液，以1％的量接种到100mL生物转化培养基中(置于250mL三角瓶中)，其中一份加入0.08％的山橘脂酸(实验组)，一份不加(对照组)；于(30±1)℃恒温摇床中180r/min振荡培养5d，过滤后留滤液测定胞外酶活性。

2、纤维素酶活性测定

滤纸酶活力测定：取酶液0.5mL，加入1mL(pH 4.8，HAc-NaAc)缓冲溶液中，并卷入1条1cm×6cm的新华滤纸，准确计时在50℃水浴保温60min，分别加入2mL DNS试剂使酶失活后，具塞，沸水浴10min，迅速冷却后加水稀释至15mL，轻轻上下摇匀，用空白调零点，于540nm下测OD值。

羧甲基纤维素酶活力测定：底物为1mL质量分数为1％的羧甲基纤维素溶液，在50℃水浴保温30min，其他步骤同滤纸酶活力的测定。

微晶纤维素酶活力测定：底物为1mL质量分数为1％的微晶纤维素溶液，在50℃水浴保温30min，其他步骤同滤纸酶活力的测定。

均以在上述条件下每分钟由底物产生1.0μg还原糖所需的酶量定义为一个活力单位，用U/mL表示。

3、生物转化率的测定

(1)取10mL样品溶液注入洁净、干燥乌氏粘度计垂直固定于恒温水浴(水浴温度为25±0.05℃)中放置15min后；

(2)将供试品溶液在管内自然下落，用秒表准确记录液面自上刻度线下降至下刻度线的流出时间；

(3)重复测定两次，两次测定值相差不得超过0.1s，取两次的平均值为供试液的流出时间(T)。

转化率的按照下列式子计算为：

转化率＝(t

其中，t

4、结果分析

酶活性测试结果如表1所示：

表1酶活性测试结果

从表1中分析可知，相比于对照组，实验组胞外纤维素酶的活性明显增强；表明山橘脂酸的加入有利于菌株胞外纤维素酶的分泌，增强酶活性，进而作用于明日叶，获得具有上述生物活性的明日叶多糖提取物，提升明日叶多糖提取物的生物转化率，增强其功效。

生物转化率测试结果如表2所示：

表2生物转化率测试结果

从表2中分析可知，相比于对照组，实验组生物转化率明显提升；表明山橘脂酸的加入可有效提升明日叶多糖提取物的生物转化，与上述酶活性测试结果相一致。

实施例6：

1、羟自由基清除能力的测定

分别取0.5g实施例1～4制得明日叶多糖提取物于10mL试管中，先后加入1mL溶于50％乙醇的水杨酸(9mmol/L)、1mL的硫酸亚铁(9mmol/L)，1mL的双氧水(8.8mmol/L)，在37℃下水浴30min，用分光光度计测定反应液510nm波长下的吸光度值。按照下列公式计算羟自由基清除能力：

羟基自由基清除能力％＝[1－(A－A

其中，A为样品吸光度；A

测试结果如表3所示：

表3羟自由基去除能力测试结果

从表3中分析可知，实施例1～2制得的明日叶多糖提取物的羟自由基的去除能力明显高于实施例3～4，表明采用生物转化法提取明日叶多糖，其抗氧化能力明显提升，且山橘脂酸的加入，对明日叶多糖抗氧化能力的提升具有显著的增强作用。

2、体外溶血栓活性试验

材料：琼脂糖，购于上海伯奥生物有限公司；CaCL

实验步骤：

将0.1g琼脂糖倒入30mL蒸馏水中，加热煮沸，冷却至50℃，加入0.05moL/L(pH7.4)的磷酸盐缓冲溶液5mL，再加1.5mL血浆，最后加入0.025moL/L CaCL

溶解圈面积(mm

对实施例1～4制得的明日叶多糖提取物进行溶血栓测试，测试结果如表4所示：

表4溶解圈面积测试结果

从表4分析可知，实施例1～2制得的明日叶多糖提取物的羟自由基的去除能力明显高于实施例3～4，表明采用生物转化法提取明日叶多糖，具有更高的溶血栓活性，且山橘脂酸的加入，对明日叶多糖溶血栓能力的提升具有显著的增强作用。

实施例7：

明日叶多糖提取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响

二甲苯可使小鼠耳廓毛细管通透性增加，造成局部急性渗出性炎症水肿，常用于验证药物的抗炎作用。

1、供试药液：称取多糖样品，加入0.9％的氯化钠水溶液配置浓度为0.5mg/mL的母液。

2、实验方法：昆明小鼠50只，雄性，随机分成5组，药物组1(实施例1制得的明日叶多糖提取物)、药物组2(实施例2制得的明日叶多糖提取物)、药物组3(实施例3制得的明日叶多糖提取物)、药物组4(实施例4制得的明日叶多糖提取物)、空白对照组(生理盐水)，每组10只；每组每天给药1次，连用7d。其中，药物组和对照组均注射给药。末次给药30min后，每只小鼠右耳内、外侧涂布二甲苯，左耳作为对照。30min后脱颈椎处死小鼠，用直径6.0mm打孔器在左右耳廓同一位置打取耳片，分别称重，计算抑制率。

抑制率＝(对照组平均肿胀度－给药组平均肿胀度)/对照组平均肿胀度×100％

3、结果分析

测试结果如图3所示，分析可知，相比于空白对照组明日叶多糖提取物能均可抑制二甲苯导致的小鼠耳肿胀，且实施例1～2的效果要高于实施例3，实施例3的效果好于实施例4，表明山橘脂酸的存在可有效增强制得的明日叶多糖提取物的抗炎效果，起到增强药效的作用；且生物转化法制得的明日叶多糖的功效要好于水溶法。

实施例8：

明日叶多糖提取物和/或香草酸甲酯糖苷治疗骨折合并脑损伤

实验动物：雄性3月龄SD大鼠105只，体质量(270±20)g，购自解放军第三军医大学大坪医院动物实验中心。实验动物SD大鼠饲养于普通级动物室。大鼠标准饲料培养，自由进食，定期紫外线消毒。

构建股骨骨折大鼠模型：体积分数10％水合氯醛(3mL/kg)腹腔注射后麻醉单纯股骨骨折组大鼠，常规消毒，作右侧大腿中段外侧纵行切口，钝性分离肌肉层至股骨干，经股骨大转子下1.0cm处线锯锯断股骨中段，用直径1.0mm金属骨针髓腔中轴固定，缝合切口，消毒包扎。造模后摄X射线片证实股骨中段骨折并内固定模型建立成功。

构建股骨骨折合并脑损伤大鼠模型：股骨骨折合并脑损伤组在已行骨折模型制作的基础上立即进行脑损伤模型制作，采用改进的Marmarou自由落体装置撞击大鼠颅骨制作弥漫性中度脑损伤模型：颅顶部正中2cm×2cm手术区域剪除毛发，无菌条件下剪开大鼠脑顶部头皮，分离骨膜，在前囟与后囟连线中点用502粘连剂固定钢垫，将大鼠固定在海绵垫上，使400g的铁锤自1.75m高度落下，撞击正下方的钢垫。致伤后取下钢垫，缝合创口。造模成功后，常规饲养，并观察各组动物情况。

分组处理：将120只大鼠随机分为空白组(正常饲养)20只；治疗1组20只，明日叶多糖提取物(实施例1制备的)，50mg/次，口服，1次/1d；治疗2组20只，明日叶多糖提取物(实施例3制备的)，50mg/次，口服，1次/1d；治疗3组20只，明日叶多糖提取物(实施例4制备的)，50mg/次，口服，1次/1d；治疗4组20只：香草酸甲酯糖苷，50mg/次，口服，1次/1d；治疗5组20只：使用明日叶多糖提取物(实施例1制备的)和香草酸甲酯糖苷(两者质量比为1：0.8)，50mg/次，口服，1次/1d。3组均以4周为1个疗程，观察2个疗程。

RT-qPCR

根据TRIzol试剂说明，称取50mg左右的血清样品进行总RNA的提取，然后以提取的总RNA为模板，录反应得到cDNA；采用qRT-PCR法，以cDNA作为模板，β-actin作为内参，分析基因在血清中的表达。20μL扩增反应体系如下：

混匀离心后置于荧光定量PCR仪上，反应程序如下：95℃预变性4min；然后在95℃10s，60℃20s，72℃10s条件下循环45次n。反应完成后将数据整理，按2

依据金氏公式计算q值，q＝E

以上结果表明，明日叶多糖提取物和/或香草酸甲酯糖苷在一定程度可增强血清中低氧诱导因子1α及核心结合因子α1的表达量，有效激活与启动间充质细胞向成骨细胞系分化和调节成骨细胞的发育，从而促进骨折愈合。

表5RT-qPCR反应中使用的引物序列

实施例9：

一种保健食品组合物，包括：

按重量份计，实施例1制得的明日叶多糖提取物4份；大豆低聚肽1.8份；高活性纳豆激酶1份；地龙蛋白0.6份；低聚果糖0.5份；黄芪提取物0.8份；壳寡糖0.12份；复合真菌提取物0.09份；绞股蓝提取物0.2份；木糖醇0.15份。其中，复合真菌为香菇、灵芝、姬松茸，三者质量比为1：1：1。

实施例10：

一种保健食品组合物，包括：

按重量份计，香草酸甲酯糖苷5份；大豆低聚肽1.8份；高活性纳豆激酶1份；地龙蛋白0.6份；低聚果糖0.5份；黄芪提取物0.8份；壳寡糖0.12份；复合真菌提取物0.09份；绞股蓝提取物0.2份；木糖醇0.15份。其中，复合真菌为香菇、灵芝、姬松茸，三者质量比为1：1：1。

实施例11：

一种保健食品组合物，包括：

按重量份计，实施例1制得的明日叶多糖提取物和香草酸甲酯糖苷混合物(两者质量比为1：1.1)4份；大豆低聚肽1.8份；高活性纳豆激酶1份；地龙蛋白0.6份；低聚果糖0.5份；黄芪提取物0.8份；壳寡糖0.12份；复合真菌提取物0.09份；绞股蓝提取物0.2份；木糖醇0.15份。其中，复合真菌为香菇、灵芝、姬松茸，三者质量比为1：1：1。

实施例12：

一种药物组合物，包括：

按重量份计，实施例1制得的明日叶多糖提取物1.4份，纳豆激酶2份，磷脂酰丝氨酸1.2份，维生素E聚乙二醇琥珀酸酯0.12份，抗坏血酸棕榈酸酯0.05份，葡萄糖酸锌0.011份。

实施例13：

一种药物组合物，包括：

按重量份计，香草酸甲酯糖苷2.5份，纳豆激酶2.4份，磷脂酰丝氨酸1.2份，维生素E聚乙二醇琥珀酸酯0.09份，抗坏血酸棕榈酸酯0.04份，葡萄糖酸锌0.014份。

实施例14：

一种药物组合物，包括：

按重量份计，实施例1制得的明日叶多糖提取物和香草酸甲酯糖苷混合物(两者质量比为1：1)1.8份，纳豆激酶2.5份，磷脂酰丝氨酸1.6份，维生素E聚乙二醇琥珀酸酯0.2份，抗坏血酸棕榈酸酯0.06份，葡萄糖酸锌0.02份。

上述实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，故在此不再详细赘述。

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。