一种用于固定组织切片的试剂盒及其应用
文献发布时间:2023-06-19 11:47:31
本申请是申请日为2015年07月16日、申请号为201510419068.8、发明名称为《一种组织切片的固定方法及其用途》的分案申请。
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种用于固定组织切片的试剂盒及其应用。
背景技术
组织切片脱落始终是病理染色过程中不可避免的问题。目前已有的切片预防掉片的方法主要包括火棉胶涂覆、多聚赖氨酸及铬钒明胶处理玻片等。硬组织切片虽然也可以防止掉片,但其切片过厚(约40~100μm),组织重叠不易观察,无法进行病理染色。石蜡及冰冻切片可达到10μm以内,可以较好的观察细胞形态,但始终存在一些组织贴片不牢,在染色时易掉片的问题,尤其在蚕丝以及人工韧带等组织工程材料的切片染色中,掉片现象更加突出。同时在HE、丽春红三色和免疫组化等染色中,由于染色步骤繁琐,组织浸泡时间过长等原因,组织掉片现象尤为严重。
发明内容
本发明的目的在于提供一种组织切片的固定方法及其应用。
为达到上述目的,本发明采用了以下技术方案。
一种组织切片的固定方法,包括以下步骤:
1)将实验取材或手术病理标本用多聚甲醛固定,若实验取材或手术病理标本为骨组织,则在多聚甲醛固定后进行脱钙处理;
2)将经过步骤1)处理后的实验取材或手术病理标本用阿拉伯树胶溶液浸泡24~48小时,然后用冰冻切片机切至5~10μm,得组织切片;
3)将速干胶均匀涂覆于载玻片上,然后将组织切片固定在载玻片上均匀涂覆速干胶的区域上,然后自然风干或用烤片机于55~65℃烤片1~2小时。
所述组织切片取材自容易掉片的所有实验取材或手术病理标本。
所述实验取材或手术病理标本为蚕丝组织工程韧带。
所述将速干胶均匀涂覆于载玻片上具体包括以下步骤:滴若干滴速干胶于载玻片A上,然后立即用载玻片B覆盖在载玻片A上面,使滴在载玻片A上的速干胶水平铺展,从而使速干胶均匀涂覆于载玻片A以及载玻片B上。
上述组织切片的固定方法在组织染色中的应用。
所述组织切片用于HE染色、丽春红三色染色或免疫组化染色。
所述组织切片取材于蚕丝组织工程韧带。
本发明的有益效果体现在:
本发明在普通载玻片上均匀涂覆薄层速干胶后,将冰冻组织切片贴片,组织切片与载玻片结合紧密,且制作方便、操作简单,需要处理的时间短,成本低,有效避免了染色过程中出现的掉片现象,彻底解决了病理染色的掉片问题,尤其适用于易脱落的蚕丝材料、组织工程韧带或其他组织工程材料的切片染色,且有效解决了硬组织切片过厚,无法清晰显示细胞等结构的问题。
附图说明
图1为在经铬钒明胶处理玻片上固定蚕丝韧带切片并进行HE染色结果;
图2为在涂覆速干胶的玻片上固定蚕丝韧带切片并进行HE染色结果。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作详细说明。
取经多聚甲醛固定、脱钙的蚕丝韧带组织,使用阿拉伯树胶溶液(含质量分数10%阿拉伯树胶和30%的蔗糖的水溶液)浸泡24~48小时,得到样本,利用冰冻切片机将样本切成5~10μm厚的组织切片,在普通载玻片上滴1滴速干胶(例如,义乌市绿洁日用品厂,大象卡胶水),利用另外一张载玻片采用迅速压片的方法,将速干胶均匀地涂覆于两片载玻片上,再迅速将组织片粘附于其中一片载玻片上涂覆速干胶的区域上;然后自然风干或烤片机上(60℃)烤片1~2小时。对照组使用经铬钒明胶处理玻片粘附组织切片,同时进行HE染色。
参见图1以及图2,图1中可见染色后组织掉片严重(铬钒明胶处理玻片);图2中染色色泽正常(本发明方法处理的玻片),几乎无掉片现象。
本发明所述组织切片固定方法可以有效避免组织染色过程中的掉片(脱片)现象。
- 一种用于固定组织切片的试剂盒及其应用
- 一种用于组织冰冻切片保存的试剂盒