一种改善微循环的组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于皮肤微循环技术领域，具体涉及一种改善微循环的组合物及其制备方法。

背景技术

黑色素是决定肌肤颜色的重要因素。人体黑色素可以分为两类，一类为碱性难溶的真黑色素，另一类为碱性易溶的褐黑色素，真黑色素和褐黑色素均由黑色素细胞合成，虽然黑色素细胞可同时合成真黑色素和褐黑色素，但是一个黑色素单元中仅存在一个合成途径。具体地，黑色素细胞中的酪氨酸在酪氨酸酶的作用下可羟化为3,4-二羟基苯丙氨酸(多巴)，然后经酪氨酸酶的氧化形成多巴醌，再通过两条不同的途径生成真黑色素与褐黑色素。

在正常生理状态下，黑色素细胞分泌黑色素处于均衡状态，形成人的固有肤色，在保护肌肤免受氧化损伤、细胞DNA损伤及紫外线损伤中发挥着重要作用。然而，黑色素细胞周围分布的角质形成细胞、炎症细胞、成纤维细胞、神经细胞及血管等在受到外界刺激时，会将外界刺激转化成胞外信号，其经过细胞膜转化成胞内信号后，容易在黑素细胞中通过信号级联放大而加速黑色素细胞分泌黑色素。当这些过量的黑色素来不及代谢时，便会发生聚集，分布不均，进而使得肌肤变得暗沉、发黑，甚至显斑。研究表明，肌肤血液微循环能够维持肌肤中各种细胞良好的功能，保证肌肤中细胞的新陈代谢。为此，越来越多学者开始着手于研究能够改善肌肤微循环的产品。

如中国专利CN102440928A公开了一种具有促进皮肤微循环功效的中药组合物、制剂及其制备方法，具体公开了由下列重量份配比的原料药制成：益母草30～50份，当归15～30份，丹参10～30份，桃仁1～10份，三七花1～10份。该发明中药组合物经提取得到的中药提取物具有很好的促进皮肤微循环功效，可将其作为植物功效添加剂添加到化妆品中。

又如中国专利CN105381007A公开了一种具有美白功效的外用中药组合物、制剂及其制备方法和用途，由下述重量份配比的原料药制成：牡丹花20-60份、旱金莲15-45份、啤酒花10-30份以及雪莲花5-20份，其较佳重量份配比为：牡丹花30-50份、旱金莲20-40份、啤酒花15-25份以及雪莲花8-15份。该中药组合物通过促进皮肤微循环可改善面部红血丝症状，同时具有抗氧化、抗炎功效，提高皮肤抵御外界刺激的能力，使皮肤白皙润泽，达到美白护肤的功效。

由此可见，市面上已出现有能够改善微循环的组合物，然后在实际上，却存在吸收效果不明显的缺陷，使其应用范围受限。

发明内容

本发明旨在提供一种改善微循环的组合物及其制备方法，采用防防风、川芎、桃仁、丹参、白芍、延胡索、白鲜皮、一匹绸和干姜为原料，利用原料药粉末的制备-二氧化碳保压处理-提取-微循环组合物的制备的步骤制得了组合物，具有改善微循环的作用，且吸收效果明显。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种改善微循环的组合物，包括以下质量份数的原料药制成：防风10～20份、川芎5～10份、桃仁3～8份、丹参10～15份、白芍5～10份、延胡索1～5份、白鲜皮1～2份、一匹绸1～2份和干姜1～2份。

本发明另一目的是提供所述改善微循环组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1)取配方量的防风、川芎、桃仁、丹参、白芍、延胡索、白鲜皮、一匹绸和干姜洗净，干燥，粉碎，过筛，得到固体粉末；

S2)将步骤S1的固体粉末在常温下通入二氧化碳，6～9MPa下保压5～10min，得到处理型粉末；

S3)将十三烷醇偏苯三酸酯加入到步骤S2的处理型粉末中，超声3～5min；再加入混合液，超声2～3min后，高压均质3～5次，除去不溶物，-18℃预冻12h，真空减压干燥，即得。

在本发明中，利用防风、川芎、桃仁、丹参、白芍、延胡索、白鲜皮、一匹绸和干姜中的有效成分(如黄酮)进行互相产生协同作用，能够改善细胞的微循环作用，促进细胞的新陈代谢。

进一步地，为了更好的使组合物发挥有效作用，发现先对组合物进行二氧化碳保压处理后再进行提取能够得以实现。二氧化碳保压处理能使处理型粉末内部出现疏松多孔的现象，而甘草酸作为植物表面活性剂能够促进组合物中有效成分的溶出，同时，甘草酸溶于水后作为水相，能与油相十三烷醇偏苯三酸酯形成纳米乳，起到进一步的促进作用。并且，发明人还意外地发现，当在提取时引入咖啡酰氨基酸乙酯，能够进一步改善细胞的微循环作用，推测咖啡酰氨基酸乙酯能够使组合物保持较为稳定的粒径以促进组合物发挥作用，也有可能是咖啡酰氨基酸乙酯本身具有抗氧化作用，在与防风、川芎、桃仁、丹参、白芍、延胡索、白鲜皮、一匹绸和干姜中的有效成分(如黄酮)相互作用中进一步起到协同作用。

进一步地，所述处理型粉末与十三烷醇偏苯三酸酯的质量比为1:0.7～0.95。

进一步地，所述处理型粉末与混合液的质量比为1:1。

进一步地，所述混合液由甘草酸、咖啡酰氨基酸乙酯和水组成，所述甘草酸、咖啡酰氨基酸乙酯和水的质量比为1:0.2～0.3:1。

进一步地，所述步骤S3超声的频率为20～25kHz、功率为100～400W。

进一步地，所述步骤S3高压均质的压力为80～120MPa。

本发明第二目的是提供所述组合物或任一所述制备方法制得的组合物在化妆品或/和护肤品中的应用。

本发明最后一目的是提供一种改善微循环的制剂，包含所述组合物或任一所述制备方法制得的组合物和有效量的化妆品常用助剂。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

(1)本发明采用特有的配方，具体含有防风、川芎、桃仁、丹参、白芍、延胡索、白鲜皮、一匹绸和干姜，使得到的组合物能够起到改善微循环功效。

(2)利用本发明制备方法得到组合物平均粒径小，复溶后的平均粒径也较小，经实验二表明，组合物的单位面积累积透皮量和皮肤滞留量大，说明其能够促使皮肤对其进行吸收，从而使改善微循环功效得到体现。

(3)本发明组合物对皮肤的刺激性，能够很好的添加到化妆品或护肤品中，更好地发挥护肤功效。

具体实施方式

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。

实施例1、一种改善微循环的组合物

由以下质量份数的原料药制成：防风10份、川芎5份、桃仁3份、丹参10份、白芍5份、延胡索1份、白鲜皮1份、一匹绸1份和干姜1份。

改善微循环组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1)取配方量的防风、川芎、桃仁、丹参、白芍、延胡索、白鲜皮、一匹绸和干姜洗净，干燥，粉碎，过筛，得到固体粉末；

S2)将步骤S1的固体粉末在常温下通入二氧化碳，6MPa下保压7.5min，得到处理型粉末；

S3)将十三烷醇偏苯三酸酯加入到步骤S2的处理型粉末中，超声3min；再加入混合液，超声3min后，高压均质3次，除去不溶物，-18℃预冻12h，真空减压干燥，即得。

其中，处理型粉末与十三烷醇偏苯三酸酯的质量比为1:0.7；处理型粉末与混合液的质量比为1:1；混合液由甘草酸、咖啡酰氨基酸乙酯和水组成，甘草酸、咖啡酰氨基酸乙酯和水为1:0.2:1；步骤S3超声的频率为20kHz、功率为200W；步骤S3高压均质的压力为100MPa。

实施例2、一种改善微循环的组合物

由以下质量份数的原料药制成：防风12份、川芎8份、桃仁5份、丹参10份、白芍5份、延胡索2份、白鲜皮1份、一匹绸1份和干姜1份。

改善微循环组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1)取配方量的防风、川芎、桃仁、丹参、白芍、延胡索、白鲜皮、一匹绸和干姜洗净，干燥，粉碎，过筛，得到固体粉末；

S2)将步骤S1的固体粉末在常温下通入二氧化碳，7MPa下保压5min，得到处理型粉末；

S3)将十三烷醇偏苯三酸酯加入到步骤S2的处理型粉末中，超声3min；再加入混合液，超声2min后，高压均质3次，除去不溶物，-18℃预冻12h，真空减压干燥，即得。

其中，处理型粉末与十三烷醇偏苯三酸酯的质量比为1:0.8；处理型粉末与混合液的质量比为1:1；混合液由甘草酸、咖啡酰氨基酸乙酯和水组成，甘草酸、咖啡酰氨基酸乙酯和水为1:0.2:1；步骤S3超声的频率为20kHz、功率为200W；步骤S3高压均质的压力为100MPa。

实施例3、一种改善微循环的组合物

由以下质量份数的原料药制成：防风15份、川芎8份、桃仁5份、丹参10份、白芍5份、延胡索2份、白鲜皮2份、一匹绸1份和干姜1份。

改善微循环组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1)取配方量的防风、川芎、桃仁、丹参、白芍、延胡索、白鲜皮、一匹绸和干姜洗净，干燥，粉碎，过筛，得到固体粉末；

S2)将步骤S1的固体粉末在常温下通入二氧化碳，8MPa下保压7.5min，得到处理型粉末；

S3)将十三烷醇偏苯三酸酯加入到步骤S2的处理型粉末中，超声3min；再加入混合液，超声2min后，高压均质3次，除去不溶物，-18℃预冻12h，真空减压干燥，即得。

其中，处理型粉末与十三烷醇偏苯三酸酯的质量比为1:0.9；处理型粉末与混合液的质量比为1:1；混合液由甘草酸、咖啡酰氨基酸乙酯和水组成，甘草酸、咖啡酰氨基酸乙酯和水为1:0.3:1；步骤S3超声的频率为20kHz、功率为300W；步骤S3高压均质的压力为100MPa。

实施例4、一种改善微循环的组合物

由以下质量份数的原料药制成：防风20份、川芎10份、桃仁8份、丹参15份、白芍10份、延胡索5份、白鲜皮2份、一匹绸2份和干姜2份。

改善微循环组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1)取配方量的防风、川芎、桃仁、丹参、白芍、延胡索、白鲜皮、一匹绸和干姜洗净，干燥，粉碎，过筛，得到固体粉末；

S2)将步骤S1的固体粉末在常温下通入二氧化碳，9MPa下保压10min，得到处理型粉末；

S3)将十三烷醇偏苯三酸酯加入到步骤S2的处理型粉末中，超声3min；再加入混合液，超声2min后，高压均质3次，除去不溶物，-18℃预冻12h，真空减压干燥，即得。

其中，处理型粉末与十三烷醇偏苯三酸酯的质量比为1:0.95；处理型粉末与混合液的质量比为1:1；混合液由甘草酸、咖啡酰氨基酸乙酯和水组成，甘草酸、咖啡酰氨基酸乙酯和水为1:0.3:1；步骤S3超声的频率为25kHz、功率为300W；步骤S3高压均质的压力为100MPa。

对比例1、一种改善微循环的组合物

与实施例3相比，区别在于组合物中未加入白鲜皮。

对比例2、一种改善微循环的组合物

与实施例3相比，区别在于制备方法中未加入咖啡酰氨基酸乙酯。

对比例3、一种改善微循环的组合物

与实施例3相比，区别在于未进行步骤S2。

对比例4、一种改善微循环的组合物

由以下质量份数的原料药制成：防风15份、川芎8份、桃仁5份、丹参10份、白芍5份、延胡索2份、白鲜皮2份、一匹绸1份和干姜1份。

改善微循环组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1)取配方量的防风、川芎、桃仁、丹参、白芍、延胡索、白鲜皮、一匹绸和干姜洗净，干燥，粉碎，过筛，得到固体粉末；

S2)将步骤S1的固体粉末在常温下通入二氧化碳，8MPa下保压7.5min，得到处理型粉末；

S3)将水加入到步骤S2的处理型粉末中，超声6min，高压均质3次，除去不溶物，-18℃预冻12h，真空减压干燥，即得。

其中，处理型粉末与水的质量比为1:1；步骤S3超声的频率为20kHz、功率为300W；步骤S3高压均质的压力为100MPa。

与实施例3相比，区别在于，步骤S3不相同。

对比例5、一种改善微循环的组合物

由以下质量份数的原料药制成：防风15份、川芎8份、桃仁5份、丹参10份、白芍5份、延胡索2份、白鲜皮2份、一匹绸1份和干姜1份。

改善微循环组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1)取配方量的防风、川芎、桃仁、丹参、白芍、延胡索、白鲜皮、一匹绸和干姜洗净，干燥，粉碎，过筛，得到固体粉末；

S2)将水加入到步骤S2的处理型粉末中，超声6min，高压均质3次，除去不溶物，-18℃预冻12h，真空减压干燥，即得。

其中，处理型粉末与水的质量比为1:1；步骤S3超声的频率为20kHz、功率为300W；步骤S3高压均质的压力为100MPa。

与实施例3相比，区别在于，制备方法不相同。

实验一、微循环功效验证试验

实验方法：将实施例/对比例配制成1％的受试品，对AB系野生型斑马鱼24hpf胚胎进行测试，每组20尾，重复数3组。除正常对照组外，使用血管新生抑制剂造模，构造斑马鱼微循环损伤模型。第三天时，观察胚胎微循环发育状态，每组选取代表性2-3尾进行荧光显微成像，并进行定量分析和数据处理，本实验委托广东工业大学生物医药研究院进行。

表1正常对照组、实施例组、对比例组新生血管长度

从表1可以看出，实施例1～4的新生血管长度较正常对照组增加了，长度增加率是正常对照组的199％～236％。与实施例3相比，对比例1～5的新生血管长度也较正常对照组增加了，但是所增加的长度值小于实施例2。

实验二、体外透皮吸收实验

实验方法：采用Franz扩散池法评估实施例/对比例的体外透皮渗透性。

步骤1：取雄性SD大鼠，实验前禁食不禁水1夜，脱毛，然后将大鼠处死剪下约2cm*2cm下腹部皮肤，除去皮下脂肪和肌肉组织，生理盐水清洗干净，再置于Franz扩散池中间，角质层面向供给池，真皮层面向接收池(加入pH为7.2、20％、V/VPEG400的磷酸盐缓冲液)，接收池中放入一枚200r/min搅拌磁子。

步骤2：将实施例/对比例配制成1％的受试品并加入到供给池中进行透皮实验，然后在1、2、3、6、8、10、12h时间点从接收池中取出0.5mL接收液，离心，取上清液，用HPLC法测黄酮总量，并计算出各时间点的单位面积累计透皮量。

步骤S3：12h结束后，取下鼠皮并用生理盐水洗净，破碎后加入1mL生理盐水研磨，加入乙腈超声20min，离心，取上清液，用HPLC法测黄酮总量，再计算出在皮肤中的滞留量。

计算公式：单位面积累计透皮量

其中，V为接收液体积，A为4cm

表2测试结果

从表2可以看出，实施例1～4单位面积累积透皮量和皮肤滞留量大，说明本发明组合物有利于皮肤进行吸收。与实施例3相比，对比例2未加入咖啡酰氨基酸乙酯，导致单位面积累积透皮量和皮肤滞留量降低。而对比例3没有进行步骤S2，单位面积累积透皮量和皮肤滞留量也降低，推测是受到本发明组合物有效成分降低。对比例4没有形成脂质体结构，导致吸收不好。对比例5为常规提取方法得到的组合物，导致吸收不好。

实验三、皮肤刺激性评价

取(2.0±0.2)kg体重的健康家兔30只，随机分为10组，每组动物3只；实验前24h将家兔背部皮肤两侧去毛，24h后检查去毛皮肤是否受伤，排除受伤皮肤的健康家兔。将实施例/对比例配制成1％的受试品，每天涂抹3次，连续涂抹7天，观察去毛皮肤的状况，空白组涂生理盐水。评价标准为：O为皮肤无充血、红肿现象；△为皮肤出现充血、红肿现象；×为皮肤严重出现充血、红肿现象。

表3观察结果

从表3可以看出，实施例1～4使用后，皮肤无充血、红肿现象，说明本发明组合物对皮肤刺激性小。

实验四、组合物的平均粒径测试

复溶后平均粒径的实验方法：取实施例/对比例分别置于25mL量瓶中，用水稀释10倍，采用纳米激光粒度仪进行测定，平行测定3次，取平均值。

表4测试结果(x±s，n＝3)

从表4可以看出，实施例1～4平均粒径小，复溶后的平均粒径变化不大，能满足实际应用需求。与实施例3相比，对比例2的平均粒径稍大；对比例3相差不大；对比例4的步骤S3不加入混合液和十三烷醇偏苯三酸酯，平均粒径大，对比例5为常规水提工艺，水提得到的固体平均粒径大，复溶后平均粒径大，说明复溶后固体之间有聚集现象。

上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。