一种1-萘乙胺手性纯度的分析方法

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种1-萘乙胺手性纯度的分析方法。

背景技术

1-萘乙胺(1-NEA)是重要的手性药物原料，例如(R)-1-NEA是盐酸西那卡塞重要的手性中间体。盐酸西那卡塞是一种新型口服拟钙剂，由美国NPS Pharmaceuticals公司开发，是FDA批准上市的首个拟钙剂，盐酸西那卡塞作用于甲状旁腺细胞膜表面存在的钙受体，对甲状旁腺激素分泌的抑制作用与血清Ca

1-NEA手性纯度测定方法常规采用比旋光度测定法，Pallavicini等(Tetrahedron：Asymmetry,2002,13(20)：2277-2282)使用Perkin Elmer 241旋光仪测量旋光度，测定结果为：[a]

1-NEA手性纯度测定方法主要有手性色谱柱分析法，Pallavicini等采用DaicelChiralcel OD-R(250mm×4.6mm,10μm)手性柱测定1-NEA的手性纯度；Marx等(AdvancedSynthesis&Catalysis,2018,360(11)：2157-2165)采用Daicel Chiralcel OJ-H(250mm×4.6mm,5μm)和Chiralpak IA手性柱测定1-NEA的手性纯度；Pan等(The Journal ofOrganic Chemistry,2018,83(19)：11502-11509)采用Daicel Chiralcel OD-H(250mm×4.6mm,5μm)手性柱测定1-NEA的手性纯度；Sun等(Asymmetric Negishi Cross-Coupling.Chirality,2019,31(9)：682-687)采用Phenomenex cellulose-1(250mm×4.6mm,5μm)手性柱测定1-NEA的手性纯度。此方法结果准确、可靠，但是手性色谱柱具有其固有的缺点，包括手性色谱柱使用条件苛刻、手性色谱柱成本高、载样量过少、流动相中溶剂比例的范围严格等。

相比使用手性色谱柱进行1-NEA的手性纯度分析，采用非手性固定相色谱测定1-NEA的手性纯度具有简单、快捷、有效且成本低廉等优点。但在混旋的1-NEA中对映异构体的理化性质基本相同，若未经衍生化，使用非手性固定相色谱不可能将其分离并进行纯度分析，通常采用衍生化方法使之对映异构体转化为非对映异构体，能够直接在非手性固定相色谱上进行异构体的分析。在以往的报道中，Calmes等(Tetrahedron Asymmetry,1993,4(12)：2437-2440)采用Marfey试剂作为手性衍生试剂与1-NEA进行衍生化反应，乙腈和水作为流动相，在梯度洗脱模式下，衍生产物的保留时间为17.46～19.09min。Jun等(AnalyticaChimica Acta,2004,515(2)：243-253)采用DBD-顺式-4-羟基-L-脯氨酸、DBD-反式-4-羟基-L-脯氨酸等作为手性衍生试剂与1-NEA进行衍生化反应，甲醇和水作为流动相，在ULTRON VX-ODS(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱上衍生产物的保留时间均在40min左右。以上两种方法虽然经过衍生化反应后，使用反相色谱测定1-NEA的手性纯度，但衍生产物的检测时间过长，检测效率低。Mochizuki(Analytica Chimica Acta,2013,773：76-82)等采用L-PGA作为手性衍生试剂与1-NEA进行衍生化反应，在UPLC上使用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(1.7μm,100mm×2.1mm)，乙腈和水作为流动相，衍生产物的保留时间分别为8.58min和9.03min，虽然缩短了衍生产物的保留时间，但是衍生化过程使用EDC和HOBt作为缩合剂，存在原子经济性较差的问题，同时UPLC价格昂贵。

现有专利技术中也有披露过衍生化过程，比如专利号ZL201610043272.9、ZL201610043273.3、ZL201610043277.1和ZL201610043270.X中披露了3-氨基哌啶和2-氨基丁醇的对映异构体的HPLC分离检测方法，但是由于目标底物不同，相应的特定的手性衍生试剂是技术关键，手性试剂的选择并不是显而易见或者推导出来的，原因有以下几点：(1)一些手性试剂不易购买，难以合成，如在先专利用到的手性衍生试剂(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯不易购买，若先自制合成(R)-(+)-1-苯基乙磺酸，再经过氯代反应制得手性衍生试剂(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯，不仅增加了检测成本，而且大大增加了检测时间，过程不再具有便捷性。

(2)一些化合物如(S)-COXA-Osu、OTPTHE等虽然可直接用作手性衍生试剂，但其价格较为昂贵，增加了检测成本。

(3)另外常见的手性氨基酸，如(D)-苯甘氨酸、(D)-对羟基苯甘氨酸，在经过常规的氯代反应过程中，会有副产物生成，所以不适用于作为手性衍生试剂；如果选用缩合剂直接与1-NEA进行缩合，不仅大大增加了反应时间，而且不利于原子经济化。

(4)采用手性酸(S)-扁桃酸，经取代反应合成(S)-扁桃酸酰氯作为手性衍生试剂，TLC结果显示有副产物生成，考虑(S)-扁桃酸在酸性条件下自身进行酯化反应。不适合作为手性衍生试剂。

针对这一现状，需要研发一种操作简单、灵敏度高、衍生产物保留时间短的方法，为新型口服拟钙剂盐酸西那卡塞的研发创造了不可或缺的条件。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服上述现有技术的不足，提供一种1-萘乙胺手性纯度的分析方法，该方法具有操作简单、灵敏度高以及衍生产物保留时间短的优点。

本发明解决其技术问题所采取的技术方案为：其包括以下步骤，

(1)衍生化

将1-NEA溶于有机溶剂中，在一定的温度条件下，以(D)-樟脑磺酰氯为衍生化试剂，使用三乙胺作为缚酸剂，控制1-NEA和(D)-樟脑磺酰氯的摩尔比，进行衍生化反应，得到衍生化后的1-NEA；反应式见式I；

(2)分离检测

采用反相高效液相色谱-紫外检测器对衍生化后的1-NEA进行定性、定量和手性纯度测定测定；

所述的反相高效液相色谱使用的色谱柱是普通反相柱。优选色谱柱为反相C18柱。

进一步地，步骤(1)中，所述有机溶剂选自乙酸乙酯、石油醚、二氯甲烷和氯仿中的一种。

进一步地，步骤(1)中，所述1-NEA与有机溶剂的固液质量比为1∶5～20。，优选的体积比为1∶5。

进一步地，步骤(1)中，所述一定的温度条件指从15～45℃，优选为25℃。

进一步地，所述1-NEA和(D)-樟脑磺酰氯的摩尔比为1∶0.8～1.2，优选的摩尔比是1∶0.8。

进一步地，所述1-NEA与缚酸剂三乙胺的摩尔比为1∶1～5，优选的摩尔比是1∶3。

进一步地，所述反相高效液相色谱的流动相由缓冲盐溶液和有机溶剂组成，该有机溶剂选自甲醇和乙腈中的一种，优选为乙腈。

进一步地，所述反相高效液相色谱的流动相中，有机溶剂占流动相的体积比为60％～70％，优选的为65％。

进一步地，所述反相高效液相色谱的缓冲盐溶液是磷酸二氢钾溶液，浓度为40mmol/L，用磷酸调pH值为4.0～7.0，优选的pH值为4.0～5.0。

进一步地，步骤(2)中，所述的紫外检测器的检测波长为223nm；

流动相流速为0.5～1.5mL/min，优选的流速为1.0mL/min。

本发明的有益效果：

本发明以(D)-樟脑磺酰氯为手性衍生试剂，以二氯甲烷为溶剂，以三乙胺为缚酸剂，经取代反应得到产物(D)-樟脑磺酰基·(R)-1-萘乙胺和(D)-樟脑磺酰基·(S)-1-萘乙胺，采用非手性固定相HPLC即可快速测定1-NEA的手性纯度。本发明公开的工艺路线以(D)-樟脑磺酰氯为手性衍生试剂，采用酰氯法合成酰胺，以三乙胺为缚酸剂，促进反应正向进行，使反应更彻底。反应时间短、效率高。

本发明给出了1-NEA的衍生化方法，通过对(D)-樟脑磺酰氯和1-NEA衍生物进行手性纯度分析，从而实现对1-NEA的手性纯度分析。通过控制反应条件，快速生成(D)-樟脑磺酰氯和1-NEA的衍生物，本发明还建立了对(D)-樟脑磺酰氯和1-NEA衍生物手性纯度的高效液相色谱分析方法，具有灵敏度高和衍生产物保留时间短的优点。

本发明方法操作简单、重现性好、灵敏度高、衍生产物保留时间短。为新型口服拟钙剂盐酸西那卡塞的研发创造了不可或缺的条件。

附图说明

图1：实施例1-1中(D)-樟脑磺酰氯与(R)-1-NEA衍生化后色谱图；

图2：实施例1-2中(D)-樟脑磺酰氯与(S)-1-NEA衍生化后色谱图；

图3：实施例1-3中(D)-樟脑磺酰氯与(RS)-1-NEA衍生化后色谱图；

图4：对比例1中合成(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯反应的薄层色谱图；

在附图中：1为(D)-樟脑磺酰氯与(R)-1-NEA的衍生物；2为(D)-樟脑磺酰氯与(S)-1-NEA的衍生物。

具体实施方式

以下结合附图对本发明进行进一步详细的叙述。

实施例1：(D)-樟脑磺酰氯与1-NEA衍生物的液相色谱分析

1-1：(D)-樟脑磺酰氯与(R)-1-NEA衍生物的液相色谱分析

取(R)-1-NEA 5g(0.029mol)，三乙胺12mL(0.087mol)溶于15g(11.32mL)二氯甲烷中，25℃下搅拌，将(D)-樟脑磺酰氯6g(0.024mol)溶于10g(7.55mL)二氯甲烷中，搅拌均匀后转移至恒压滴液漏斗，将其缓慢滴加到体系中，TLC监测反应，反应结束后蒸干得到黄色粘稠液体，为了能更好的提取固体产物，进一步地，正庚烷浸泡析出白色固体即(D)-樟脑磺酰基·(R)-1-萘乙胺衍生物，甲苯重结晶得到纯品。

将(D)-樟脑磺酰基·(R)-1-萘乙胺衍生物用流动相溶解，浓度为15μg/mL，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：Agilent C18色谱柱，流动相为乙腈-磷酸二氢钾溶液(40mmol/L,K

1-2：(D)-樟脑磺酰氯与(S)-1-NEA衍生物的液相色谱分析

取(S)-1-NEA 5g(0.029mol)，三乙胺12mL(0.087mol)溶于15g(11.32mL)二氯甲烷中，25℃下搅拌，将(D)-樟脑磺酰氯6g(0.024mol)溶于10g(7.55mL)二氯甲烷中，搅拌均匀后转移至恒压滴液漏斗，将其缓慢滴加到体系中，TLC监测反应，反应结束后蒸干得到黄色粘稠液体，正庚烷浸泡析出白色固体即(D)-樟脑磺酰基·(S)-1-萘乙胺衍生物，正丁醇重结晶得到纯品。

将(D)-樟脑磺酰基·(S)-1-萘乙胺衍生物用流动相溶解，浓度为15μg/mL，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：Agilent C18色谱柱，流动相为乙腈-磷酸二氢钾溶液(40mmol/L,K

1-3：(D)-樟脑磺酰氯与(RS)-1-NEA衍生物的液相色谱分析

取(RS)-1-NEA 5g(0.029mol)，三乙胺12mL(0.087mol)溶于15g(11.32mL)二氯甲烷中，25℃下搅拌，将(D)-樟脑磺酰氯6g(0.024mol)溶于10g(7.55mL)二氯甲烷中，搅拌均匀后转移至恒压滴液漏斗，将其缓慢滴加到体系中，TLC监测反应，反应结束后蒸干得到黄色粘稠液体，正庚烷浸泡析出白色固体即(D)-樟脑磺酰基·(R)-1-萘乙胺衍生物和(D)-樟脑磺酰基·(S)-1-萘乙胺。

将(D)-樟脑磺酰基·(RS)-1-萘乙胺衍生物用流动相溶解，浓度为30μg/mL，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：Agilent C18色谱柱，流动相为乙腈-磷酸二氢钾溶液(40mmol/L,K

实施例2∶1-NEA与(D)-樟脑磺酰氯的衍生化反应条件考察试验

2-1：取(RS)-1-NEA 5g(0.029mol)，三乙胺4mL(0.029mol)溶于25g(27.78mL)乙酸乙酯中，25℃下搅拌，将(D)-樟脑磺酰氯7.3g(0.029mol)溶于25g(27.78mL)乙酸乙酯中，搅拌均匀后转移至恒压滴液漏斗，将其缓慢滴加到体系中，TLC监测反应，反应结束后蒸干得到黄色粘稠液体，正庚烷浸泡析出白色固体即(D)-樟脑磺酰基·(RS)-1-萘乙胺衍生物。

将(D)-樟脑磺酰基·(RS)-1-萘乙胺衍生物用流动相溶解，浓度为30μg/mL，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：Agilent C18色谱柱，流动相为乙腈-磷酸二氢钾溶液(40mmol/L,K

2-2：取(RS)-1-NEA 5g(0.029mol)，三乙胺20mL(0.145mol)溶于45g(69.23mL)石油醚中，15℃下搅拌，将(D)-樟脑磺酰氯8.8g(0.035mol)溶于30g(46.15mL)石油醚中，搅拌均匀后转移至恒压滴液漏斗，将其缓慢滴加到体系中，TLC监测反应，反应结束后蒸干得到黄色粘稠液体，正庚烷浸泡析出白色固体即(D)-樟脑磺酰基·(RS)-1-萘乙胺衍生物。

将(D)-樟脑磺酰基·(RS)-1-萘乙胺衍生物用流动相溶解，浓度为30μg/mL，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：Agilent C18色谱柱，流动相为乙腈-磷酸二氢钾溶液(40mmol/L,K

2-3：取(RS)-1-NEA 5g(0.029mol)，三乙胺12mL(0.087mol)溶于15g(10.14mL)氯仿中，35℃下搅拌，将(D)-樟脑磺酰氯6g(0.024mol)溶于10g(6.77mL)氯仿中，搅拌均匀后转移至恒压滴液漏斗，将其缓慢滴加到体系中，TLC监测反应，反应结束后蒸干得到黄色粘稠液体，正庚烷浸泡析出白色固体即(D)-樟脑磺酰基·(RS)-1-萘乙胺衍生物。

将(D)-樟脑磺酰基·(RS)-1-萘乙胺衍生物用流动相溶解，浓度为30μg/mL，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：Agilent C18色谱柱，流动相为乙腈-磷酸二氢钾溶液(40mmol/L,K

2-4：称取(R)-1-NEA 5g(0.029mol)，三乙胺12mL(0.087mol)溶于50g(37.74mL)二氯甲烷中，25℃下搅拌，将(D)-樟脑磺酰氯6g(0.024mol)溶于50g(37.74mL)二氯甲烷中，搅拌均匀后转移至恒压滴液漏斗，将其缓慢滴加到体系中，TLC监测反应，反应结束后蒸干得到黄色粘稠液体，正庚烷浸泡析出白色固体即(D)-樟脑磺酰基·(R)-1-萘乙胺衍生物。

将(D)-樟脑磺酰基·(R)-1-萘乙胺衍生物用流动相溶解，浓度为15μg/mL，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：Agilent C18色谱柱，流动相为乙腈-磷酸二氢钾溶液(40mmol/L,K

2-5：称取(S)-1-NEA 5g(0.029mol)，三乙胺12mL(0.087mol)溶于15g(11.32mL)二氯甲烷中，45℃回流状态下搅拌，将(D)-樟脑磺酰氯6g(0.024mol)溶于10g(7.55mL)二氯甲烷中，搅拌均匀后转移至恒压滴液漏斗，将其缓慢滴加到体系中，加热至回流状态，TLC监测反应，反应结束后蒸干得到黄色粘稠液体，正庚烷浸泡析出白色固体即(D)-樟脑磺酰基·(S)-1-萘乙胺衍生物。

将(D)-樟脑磺酰基·(S)-1-萘乙胺衍生物用流动相溶解，浓度为15μg/mL，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：Agilent C18色谱柱，流动相为乙腈-磷酸二氢钾溶液(40mmol/L,K

实施例3：色谱条件考察试验

(1)衍生化

取(RS)-1-NEA 5g(0.029mol)，三乙胺12mL(0.087mol)溶于15g(11.32mL)二氯甲烷中，25℃下搅拌，将(D)-樟脑磺酰氯6g(0.024mol)溶于10g(7.55mL)二氯甲烷中，搅拌均匀后转移至恒压滴液漏斗，将其缓慢滴加到体系中，TLC监测反应，反应结束后蒸干得到黄色粘稠液体，正庚烷浸泡析出白色固体即(D)-樟脑磺酰基·(RS)-1-萘乙胺衍生物。

(2)对(D)-樟脑磺酰氯与(RS)-1-NEA衍生物采用以下不同色谱条件进行分离检测

3-1：将(D)-樟脑磺酰基·(RS)-1-萘乙胺衍生物用流动相溶解，浓度为50μg/mL，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：Agilent C18色谱柱，流动相为甲醇-磷酸二氢钾溶液(40mmol/L,K

3-2：将(D)-樟脑磺酰基·(RS)-1-萘乙胺衍生物用流动相溶解，浓度为30μg/mL，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：Agilent C18色谱柱，流动相为乙腈-磷酸氢二氢溶液(40mmol/L,K

3-3：将(D)-樟脑磺酰基·(RS)-1-萘乙胺衍生物用流动相溶解，浓度为30μg/mL，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：Agilent C18色谱柱，流动相为乙腈-磷酸氢二氢溶液(40mmol/L,未使用K

3-4：将(D)-樟脑磺酰基·(RS)-1-萘乙胺衍生物用流动相溶解，浓度为30μg/mL，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：Agilent C18色谱柱，流动相为乙腈-磷酸氢二氢溶液(40mmol/L,K

3-5：将(D)-樟脑磺酰基·(RS)-1-萘乙胺衍生物用流动相溶解，浓度为50μg/mL，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：Agilent C18色谱柱，流动相为乙腈-磷酸氢二氢溶液(40mmol/L,K

3-6：将(D)-樟脑磺酰基·(RS)-1-萘乙胺衍生物用流动相溶解，浓度为30μg/mL，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：Agilent C18色谱柱，流动相为乙腈-磷酸氢二氢溶液(40mmol/L,K

3-7：将(D)-樟脑磺酰基·(RS)-1-萘乙胺衍生物用流动相溶解，浓度为30μg/mL，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：Agilent C18色谱柱，流动相为乙腈-磷酸氢二氢溶液(40mmol/L,K

3-8：将(D)-樟脑磺酰基·(RS)-1-萘乙胺衍生物用流动相溶解，浓度为50μg/mL，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：Agilent C18色谱柱，流动相为乙腈-磷酸氢二氢溶液(40mmol/L,K

3-9：将(D)-樟脑磺酰基·(RS)-1-萘乙胺衍生物用流动相溶解，浓度为30μg/mL，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：Agilent C18色谱柱，流动相为乙腈-磷酸氢二氢溶液(40mmol/L,K

本发明的研究思路涉及一种衍生化技术，就是通过化学反应将样品中难于分析检测的目标化合物定量的转化成另一易于分析检测的化合物，通过后者的分析检测可以对目标化合物进行定性和定量分析，该技术在色谱分析中得到广泛应用。采用手性衍生试剂将手性化合物的一对对映体转化为一对非对映异构体,使用非手性固定相色谱即可测定非对映异构体过量值(％d.e.)。对映异构体过量值(％e.e.)等于两种非对映异构体的非对映异构体过量值，间接表征了手性纯度。

采用非手性固定相色谱测定手性纯度成功的关键是选择合适的手性衍生试剂和HPLC检测条件。合适的手性衍生试剂应该易于使对映体生成非对映异构体，且非对映异构体理化性质差别较大；合适的HPLC检测条件应能够使非对映异构体完全分离，并且尽量缩短检测时间，提高检测效率。因此筛选合适的手性衍生试剂和HPLC检测条件的过程之间几乎没有参考价值和技术启示，筛选手性衍生试剂和HPLC检测条件的过程都属于探索创新的过程。非对映异构体的分离度高低是衍生过程与检测过程是否成功的重要指标，是衍生方法能否作为工业化方法的关键。

本发明中，衍生化过程中的衍生化试剂的选择是本发明成功分离的技术关键点之一，为了说明本发明的衍生化试剂的创造性，结合一下两个对比例进行说明。

对比例1

以选用(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯为衍生化试剂进行说明：

(1)衍生化

由于手性衍生试剂(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯不易购买，故采用实验室制备(R)-(+)-1-苯基乙磺酸时，合成的(R)-(+)-1-苯基乙磺酸与(D)-对羟基苯甘氨酸形成的复盐((+)-PES·D-HPG)进行衍生试剂的合成。

将复盐(+)-PES·D-HPG(15g)溶到50mL水中,用5％的NaOH调溶液的pH值在5.0-5.5,搅拌1h,静置析晶,过滤,滤饼用冰水淋洗,烘干滤饼,得白色固体D-HPG。将滤液旋干得到(+)-PES·Na，通过离子交换得到(+)-PES，即(R)-(+)-1-苯基乙磺酸。将(R)-(+)-1-苯基乙磺酸溶于二氯甲烷中，冰浴条件下滴加过量的氯化亚砜，滴加完毕后室温下搅拌过夜。

TLC结果显示，原料有较多剩余，得到的手性衍生试剂(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯纯度较低，若再经过纯化过程，将大大增加反应的时间，不利于后续的衍生化反应。综合以上原因，1-NEA的衍生不可以选择(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯作为手性衍生试剂。

图4为合成(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯反应的薄层色谱图，展开剂甲醇：二氯甲烷＝1：1。从图4中可以看出，有较多原料剩余，反应不完全。

对比例2

以选用(R)-α-甲基-2-萘乙酰氯为衍生化试剂进行说明：

(1)衍生化

(R)-α-甲基-2-萘乙酰氯不易购买，若以此作为手性衍生试剂，需先合成(R)-α-甲基-2-萘乙酸，再经过氯代反应才能合成(R)-α-甲基-2-萘乙酰氯，增加了整个衍生、检测过程反应的难度。综合分析，1-NEA的衍生不能选择(R)-α-甲基-2-萘乙酰氯作为手性衍生试剂。

对于本发明的研究对象1-萘乙胺，本发明的发明人发现仅具有单一羧酸或磺酸官能团、结构中无易与羧基反应的其他官能团的(D)-樟脑磺酸和(S)-萘普生，不仅价格实惠、性质稳定、无毒害，且经过氯代反应，无其他副产物生成，即可合成相应的酰氯作为手性衍生试剂，可以长期存放。采用(D)-樟脑磺酰氯和(S)-萘普生酰氯作为手性衍生试剂尚未见报道。

在衍生化过程中，1-NEA与(D)-樟脑磺酰氯的优选的摩尔比是1∶0.8，选择三乙胺作为缚酸剂促进反应正向进行，反应结束后以盐酸水溶液洗涤除去过量的1-NEA，提升衍生产物纯度。因此筛选合适的手性衍生试剂及衍生化反应过程中没有任何参考价值和技术启示，没有规律可以遵循，对所属领域技术人员而言也不是显而易见的，这些筛选手性衍生试剂的过程都属于探索创新的过程。

以上所述实施方式仅为本发明的优选实施例，而并非本发明可行实施的穷举。对于本领域一般技术人员而言，在不背离本发明原理和精神的前提下对其所作出的任何显而易见的改动，都应当被认为包含在本发明的权利要求保护范围之内。