一种索马鲁肽侧链的合成方法

技术领域

本发明属于药物化学技术领域，具体涉及一种索马鲁肽侧链的合成方法。

背景技术

糖尿病(diabetes mellitus)是一组由遗传和环境因素相互作用而引起的临床综合征。因胰岛素分泌绝对或相对不足以及靶组织细胞对胰岛素敏感性降低，引起糖、蛋白、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱。根据国际糖尿病联盟公布了第八版的全球糖尿病地图，全球糖尿病成人患者(20-79岁)从2000年的1.51亿到2017年已达到4.25亿，增加近2倍。预计到2045年，糖尿病患者可能达到6.29亿。

索马鲁肽是继艾塞那肽、利拉鲁肽、阿必鲁肽、度拉鲁肽和利西拉来后第6个上市的GLP-1受体激动剂类药物，是第3个每周1次的长效GLP-1类降糖药。索马鲁肽是一种新的长效GLP-1类似物，每周皮下注射1次，可使2型糖尿病患者血糖水平大幅改善，并且低血糖风险较低。同时，索马鲁肽还能够通过降低食欲和减少食物摄入量，诱导减肥，还能够显著降低2型糖尿病患者重大心血管事件风险。丹麦诺和诺德公司公布了最新的临床研究结果，无论是降糖，还是减重，索马鲁肽均优于目前市场上表现最好的GLP-1降糖新药度拉鲁肽。

索马鲁肽将肽链第26位的赖氨酸位置连接上18碳脂肪二酸侧链，增加了PEG的修饰，使其可介导和促进索马鲁肽与白蛋白的强结合，降低肾清除率，相比C16侧链的利拉鲁肽，索马鲁肽侧链对白蛋白的亲和力增强了5～6倍，与白蛋白结合可以增大了本品的分子量，提高了它的分子大小，并且它还能携带大量的水分子，一种PEG-蛋白质因而增大了5～10倍。其次，PEG修饰使得以前不溶的蛋白质不仅容易溶解，而且具有高度移动性。此外，PEG修饰可以减少肾脏对药物的滤过作用，降低它的致热原性，还可以减少蛋白酶对其的消解，通过保护分子免受人体免疫系统的攻击来改善了它的输送。同时，因为它逃避了人体防御机构，因而在作用部位停留的时间就长得多，能够避免快速被肾脏清除并防止代谢性降解，延长体内半衰期。

索马鲁肽侧链结构如下所示：

现有技术中，索马鲁肽的侧链大多采用固相合成的方式偶联、再经过切割得到。但固相合成的原子经济性差，且侧链的原料相对较贵。现有技术WO2009022013、WO2009115469公开的索马鲁肽的侧链的合成方法均采用固相合成，将侧链看成是4个反应单元，存在操作复杂，成本高，不适宜大规模生产的问题。专利CN 104356224中披露的索马鲁肽的侧链合成工艺，存在步骤多，后处理纯化繁杂的问题；并且因为有些步骤需要彻夜搅拌，还存在效率较低的问题。专利CN 110041219中披露的工艺要求严格的操作，该工艺在多个反应步骤中都需要Pd/C，这使得该工艺不太适合商业用途。WO2021/205388A2中披露的工艺使用HOBT，会引入基因毒性杂质，增加药品的危险性；其生产工艺复杂，存在多个缺失肽，其所合成的索马鲁肽侧链未表明其对应3个异构体的大小(难控制的杂质)。

因此，提供一种索马鲁肽侧链的液相合成方法，过程可行、可控、成本低、产率高，适合于大规模生产，成为了本领域技术人员亟待解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于：提供一种索马鲁肽侧链的合成方法，解决现有技术中索马鲁肽侧链合成原子经济性差，原料成本高，操作复杂，效率较低，安全性不好的问题。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明提供的一种索马鲁肽侧链的合成方法，索马鲁肽侧链的结构如式I所示，其合成方法包括以下步骤：

S1.以十八烷二酸单叔丁酯为原料，与化合物R

S2.中间体a与L-谷氨酸-α-叔丁酯偶联得到中间体b；

S3.中间体b与化合物R

S4.将原料AEEA-AEEA的N端连接保护基团Boc，得到Boc-AEEA-AEEA；

S5.Boc-AEEA-AEEA与化合物R

S6.将中间体Boc-AEEA-AEEA-R

S7.将Boc-AEEA-AEEA-L-Lys-Fmoc脱除Boc，得到Fmoc-L-Lys-AEEA-AEEA；

S8.将中间体c与Fmoc-L-Lys-AEEA-AEEA偶联，得到式I所示的索马鲁肽侧链；

R

其反应式为：

本发明的部分实施方案中，S1中，十八烷二酸单叔丁酯与化合物R

优选地，R

优选地，第一缩合剂选自N,N'-二异丙基碳二亚胺、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐、N,N'-二环己基碳二亚胺，2-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯中的任意一种；更优选为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐；

优选地，反应溶剂选自乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯甲烷、氯仿中的任意一种或几种任意比例的混合物；更优选为乙腈、乙酸乙酯、二氯甲烷；进一步优选为乙腈；

优选地，R

优选地，十八烷二酸单叔丁酯、N-羟基琥珀酰亚胺与1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的摩尔比为1：1～1.3：0.9～1.3；更优选为1：1.2：1.1；

优选地，S1中缩合反应的温度为-10～30℃，更优选为15℃；

优选地，S1反应时间为4～10h，更优选为6h。

本发明的部分实施方案中，S2中，中间体a与L-谷氨酸-α-叔丁酯在碱性条件下偶联反应得到中间体b；

优选地，所述碱选自碳酸氢钠、碳酸氢钾、N,N-二异丙基乙胺、三乙胺、N-甲基吗啉，吡啶中的任意一种；更优选为N,N-二异丙基乙胺、三乙胺、吡啶，N-甲基吗啉；进一步优选为N-甲基吗啉；

优选地，S2中的溶剂选自乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢味喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、水中的任意一种或几种任意比例的混合物；更优选为二氯甲烷、DMF、甲醇；进一步优选为甲醇；

优选地，中间体a、L-谷氨酸-α-叔丁酯、碱的摩尔比为1：0.9～1.3：1～1.5，更优选为1：1.1：1.1；

优选地，S2中缩合反应的温度为0～40℃，更优选为20℃；

优选地，反应时间为6～10h，更优选为8h。

本发明的部分实施方案中，S3中，中间体b与化合物R

优选地，R

所述第二缩合剂选自N,N'-二异丙基碳二亚胺、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐、N,N'-二环己基碳二亚胺、2-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯中的任意一种；优选为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐；

优选地，S3中的反应溶剂为乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢味喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯甲烷、氯仿中的任意一种或几种任意比例的混合物；更优选为乙腈、乙酸乙酯；进一步优先为乙腈；

优选地，R

优选地，中间体b、R

优选地，S3的缩合反应的温度为-10～30℃，更优选为15℃；

优选地，反应时间为4～10h，更优选为6h。

本发明的部分实施方案中，S4中，原料AEEA-AEEA与(Boc)

优选地，所述碱为碳酸氢钠；

优选地，S4中的反应体系为THF/水；

优选地，AEEA-AEEA：(Boc)

优选地，所述S4的反应温度为常温，反应时间为6-24h，更优选为8h。

本发明的部分实施方案中，S5中，Boc-AEEA-AEEA与化合物R

优选地，R

优选地，第三缩合剂选自N,N'-二异丙基碳二亚胺、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐、N,N'-二环己基碳二亚胺，2-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯，O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯中的任意一种；

优选地，R

优选地，所述S5中的溶剂选自乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢味喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯甲烷、氯仿中的任意一种或几种任意比例的混合物，更优选为乙腈、乙酸乙酯、四氢呋喃、二氯甲烷，进一步优选为乙酸乙酯；

优选地，Boc-AEEA-AEEA、R

优选地，所述S5中缩合反应的温度为0～60℃，更优选为30℃；

优选地，所述S5中反应时间为3～8h，更优选为6h。

本发明的部分实施方案中，所述S6中，中间体Boc-AEEA-AEEA-R

优选地，S6中采用的碱选自碳酸氢钠、碳酸氢钾、N,N-二异丙基乙胺、三乙胺、N-甲基吗啉、吡啶中的任意一种；更优选为N,N-二异丙基乙胺、三乙胺、吡啶；进一步优选为三乙胺；

优选地，S6中采用的溶剂为乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢味喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、水中的任意一种或几种任意比例的混合物，更优选为二氯甲烷/甲醇、DMF/甲醇、四氢呋喃/甲醇；进一步优选为二氯甲烷/甲醇；

优选地，中间体Boc-AEEA-AEEA-R

优选地，S6中缩合反应的温度为-10～30℃，更优选为10℃；

优选地，S6的反应时间为2～6h，更优选为4h。

本发明的部分实施方案中，所述S7中，将Boc-AEEA-AEEA-L-LYS-Fmoc于酸性条件下加热反应，脱除Boc基，得到产物Fmoc-L-Lys-AEEA-AEEA；

优选地，所述酸为硫酸、盐酸、乙酸或三氟乙酸，更优选为盐酸或三氟乙酸，进一步优选为三氟乙酸；反应体系中，所述酸的质量含量40～80％，优选为60％。

优选地，S7的反应溶剂为1-4二氧六环、甲苯、二氯甲烷、四氢呋喃、乙酸乙酯、DMF中的一种或几种的混合，更优选为DCM或四氢呋喃，进一步优选为DCM。

本发明的部分实施方案中，所述S8中，中间体Fmoc-L-Lys-AEEA-AEEA盐与化合物c在碱性条件下偶联得到索马鲁肽侧链；

优选地，S8中采用的碱选自碳酸氢钠、碳酸氢钾、N,N-二异丙基乙胺、三乙胺、N-甲基吗啉、吡啶；更优选为N,N-二异丙基乙胺、三乙胺、吡啶；进一步优选为三乙胺；

优选地，S8中采用的有机溶剂为乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢味喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、水中的任意一种或几种任意比例的混合物；更优选为二氯甲烷、DMF、四氢呋喃，进一步优选为二氯甲烷；

优选地，中间体Fmoc-L-Lys-AEEA-AEEA盐、中间体c、碱摩尔比为1：0.8～1.0：1.5～2.5，更优选为1：0.9：2.0；

优选地，S8中缩合反应的温度为0～40℃，更优选为20℃，

优选地，S8中反应时间为2～8h，更优选为5h。

本发明的部分实施方案中，所述步骤S1-S8中，每个步骤还包括纯化目标化合物的步骤。

本发明的部分实施方案中，将S1的反应产物经降温析晶，过滤，烘干得到化合物a。

本发明的部分实施方案中，将S2的反应产物经加水淬灭，并用稀盐酸水溶液调节pH＝4～5，优选4N HCL，加入乙酸乙酯萃取，有机相经水洗涤，收集有机相，干燥，浓缩至干，加入乙酸乙酯降温结晶，抽滤得固体，烘干得化合物b。

本发明的部分实施方案中，将S3的反应产物经降温析晶，过滤，烘干得到化合物c。

本发明的部分实施方案中，将S4的反应产物用稀盐酸水溶液调节pH＝4-5，优选4NHCL，加入二氯甲烷萃取，水洗干燥，过滤，浓缩，得到Boc-AEEA-AEEA。

本发明的部分实施方案中，将S5的反应产物经水洗，干燥，过滤，浓缩得到Boc-AEEA-AEEA-R

本发明的部分实施方案中，将S6的反应产物经酸洗，水洗，干燥，过滤，浓缩，结晶，过滤，浓缩得到Boc-AEEA-AEEA-L-Lys-Fmoc，在结晶过程中采用的溶剂为乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢味喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、正己烷、正庚烷、甲基叔丁基醚中的任意一种或多种，优选乙酸乙酯、正庚烷，甲基叔丁基醚、正庚烷体系，进一步优选为乙酸乙酯、正庚烷。

本发明的部分实施方案中，将S8的反应产物经酸洗，水洗，干燥，过滤，浓缩，结晶，过滤，浓缩得到索马鲁肽侧链；在结晶过程中采用的溶剂为乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢味喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、正己烷、正庚烷、甲基叔丁基醚中的任意一种或多种，优选乙腈、正庚烷，乙酸乙酯、正庚烷，更优选为乙腈、正庚烷。

本发明采用的部分缩略语相对应的化学名称如下：

十八烷二酸单叔丁酯(Octadecanedioic acid mono-tert-butyl ester)：十八单

1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐：EDC.HCL

N-羟基琥珀酰亚胺：HOSu

乙酸乙酯：EA

二氯甲烷：DCM

四氢呋喃：THF

水：H

N,N'-二异丙基碳二亚胺：DIC

N,N'-二环己基碳二亚胺：DCC

L-谷氨酸-α-叔丁酯：1-OtBu-L-Glu

五氟苯酚：PFP

1-羟基苯并三氮唑：HOBt

17-氨基-10-氧代-3,6,12,15-四氧杂-9-氮杂十七烷酸：AEEA-AEEA

Fmoc-L-赖氨酸盐酸盐：Fmoc-L-Lys-OH.HCL

三氟乙酸：TFA

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明设计科学，构思巧妙，采用液相方法以合成索马鲁肽侧链，合成方法过程可行、可控、成本低、产率高，不存在柱层析纯化手段，适合于大规模生产。

本发明的合成方法工艺条件温和，不存在高温或超低温，Pb/H

本发明在整在涉及到的缩合反应中未使用DCC，DIC；不会产生其副产物DCU，DIU等基因毒性杂质，采用EDC.HCL及产生的副产物EDCU，其亲水性较好，很容除去，大大提高了索马鲁肽侧链的安全性。

本发明生产工艺简单，大部分是通过结晶手段除去杂质，反应过程易于控制，生产工艺的可重复性强。

本发明方法能严格控制片段AEEA-AEEA中的缺失肽AEEA，以及其他缺失肽的存在。

本发明大大提高了索马鲁肽侧链的质量，严格控制了其三个异构体的杂质均小于0.05％，产品纯度高达99％以上，所有单杂严格控制到0.3％以下。

附图说明

附图1为化合物a的纯度图；

附图2为化合物a的H-NMR图；

附图3为化合物b的纯度图；

附图4为化合物b的H-NMR图；

附图5为化合物c的纯度图；

附图6为化合物c的异构体检测结果图；

附图7为化合物c的H-NMR图；

附图8为Boc-AEAEA-AEEA的纯度图；

附图9为Boc-AEEA-AEEA的H-NMR图；

附图10为Boc-AEEA-AEEA-OPFP的H-NMR图；

附图12为Boc-AEEA-AEEA-Lys-Fmoc的H-NMR图；

附图11为Boc-AEEA-AEEA-L-Lys-Fmoc的纯度图；

附图13为索马鲁肽的纯度图；

附图14为索马鲁肽侧链异构体检测结果图；

附图15为索马鲁肽侧链的H-NMR图；

附图16为索马鲁肽侧链的C-NMR图；

附图17为索马鲁肽侧链LC-MS检测的LC-MS图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图，对本发明进一步详细说明。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

本实施例公开了中间体a的合成方法，具体为：

将原料5.00g十八烷二酸单叔丁酯(13.5mmol)加入100ml反应瓶中，加入25ml乙腈，在加入1.86g HOSu(16.2mmol)，控温15℃缓慢加入2.85g EDC.HCL(14.85mmol)，加毕，保温反应6h，TLC点板观察，反应完全；将反应降温至0℃，析晶6h后，过滤，烘干得到化合物a5.74g，收率91％；纯度98.41％(如附图1所示)。

1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.81(s,4H),2.64(t,J＝7.2Hz,2H),2.16(t,J＝7.3Hz,2H),1.61(p,J＝7.2Hz,2H),1.51–1.42(m,2H),1.39(s,9H),1.34(s,2H),1.24(s,22H)，如附图2所示。

实施例2

本实施例以十八烷二酸单叔丁酯、HOSu与EDC.HCL标准底物(即十八烷二酸单叔丁酯：HOSu:EDCI.HCl的摩尔比为1：1.2：1.1)，对合成化合物a的其他反应条件进行研究，结果如下表所示：

表1

其中“-”表示产率无效；对于不同溶剂做反应的对比是按照先蒸发掉其溶剂后，加入乙腈结晶。

由上表可知，当缩合剂为DIC或DCC时，生成中间体a的纯度低，其收率无意义。

实施例3

本实施例公开了中间体b的合成方法，具体为：

将5g中间体a(10.69mmol)加入100ml反应瓶中，加入甲醇25ml，在加入2.34g 1-OtBu-L-Glu(11.77mmol)，控温20℃缓慢加入1.19g N-甲基吗啉(11.77mmol)，加毕，保温反应8h，TLC点板观察，反应完全；反应产物经加水淬灭，并用稀盐酸水溶液调节pH＝4～5，加入乙酸乙酯萃取，有机相经水洗涤，收集有机相，干燥，浓缩至干，加入乙酸乙酯降温0℃析晶6h，抽滤得固体，烘干得化合物b 5.46g，收率92％，纯度98.52％，如附图3所示。

实施例4

本实施例以中间体a、1-OtBu-L-Glu、N-甲基吗啉为标准底物(即中间体a：L-谷氨酸-α-叔丁酯：碱的摩尔比为1：1.1：1.1)，对合成中间体b的其他反应条件进行研究，结果如下表所示：

表2

实施例5

本实施例公开了中间体c的合成方法，具体为：将原料5.00g中间体b(9.00mmol)加入100ml反应瓶中，加入25ml乙腈，在加入1.24g HOSu(10.80mmol)，控温15℃缓慢加入1.90g EDC.HCL(9.90mmol)，加毕，保温反应6h，TLC点板观察，反应完全；将反应降温至0℃，析晶6h后，过滤，烘干得到化合物a 5.45g，收率93％；纯度98.62％(如附图5所示)；其对应异构体杂质为0.089％见如附图6所示。

实施例6

本实施例以中间体b、化合物R

表3

其中“-”表示产率无效；对于不同溶剂做反应的对比是按照先蒸发掉其溶剂后，加入乙腈结晶。

由上表可知，当缩合剂为DCC，DIC时，生成本中间体C的纯度低，其收率无意义。

实施例7

本实施例公开了Boc-AEEA-AEEA的合成方法，具体为：

将原料5.00g AEEA-AEEA(16.23mmol)加入100ml反应瓶中，加入20ml水，5mlTHF，再加入1.68g NaHCO

实施例8

本实施例公开了Boc-AEEA-AEEA-PFP的合成方法，具体为：

将5g Boc-AEEA-AEEA(12.25mmol)加入100ml反应瓶中，加入25mlEA，再加入2.48gPFP(13.48mmol)，控温30℃缓慢加入2.82g EDC.HCL(14.71mmol)，加毕，保温反应6h，TLC点板观察，反应完全；反应产物经水洗，干燥，过滤，浓缩得到6.89gBoc-AEEA-AEEA-PFP，收率98％。

1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.65(t,J＝5.9Hz,1H),6.75(t,J＝5.7Hz,1H),4.69(s,2H),3.89(s,2H),3.77–3.70(m,2H),3.62–3.38(m,10H),3.32(q,J＝5.8Hz,2H),3.11(q,J＝6.0Hz,2H),1.39(d,J＝2.2Hz,9H)，如附图10所示。

实施例9

本实施例公开了Boc-AEEA-AEEA-L-Lys-Fmoc的合成方法，具体为：

将5g Boc-AEEA-AEEA-PFP(8.71mmol)加入100ml反应瓶中，加入甲醇5ml，DCM20ml，再加入3.87g Fmoc-L-Lys-OH.HCL(9.58mmol)，控温10℃缓慢加入1.76g三乙胺(17.42mmol)，加毕，保温反应4h，TLC点板观察，反应完全；反应产物经酸洗，水洗，干燥，过滤，浓缩，用乙酸乙酯：正庚烷质量比2：1降温至0℃析晶4h，过滤，浓缩得到6.60g Boc-AEEA-AEEA-L-Lys-Fmoc，收率95％，纯度98.66％，如附图11所示。

1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.57(s,1H),7.90(d,J＝7.5Hz,2H),7.78–7.60(m,5H),7.43(td,J＝7.5,1.1Hz,2H),7.34(td,J＝7.5,1.2Hz,2H),4.35–4.18(m,3H),3.94(ddd,J＝9.5,7.9,4.7Hz,1H),3.88(d,J＝6.4Hz,4H),3.54(dd,J＝6.4,3.4Hz,7H),3.47(t,J＝5.9Hz,2H),3.41(t,J＝6.1Hz,3H),3.31(q,J＝5.9Hz,2H),3.11(dq,J＝12.0,6.2,5.0Hz,4H),1.78–1.57(m,2H),1.45(q,J＝6.5,5.9Hz,2H),1.38(s,9H),1.36–1.31(m,2H)，如附图12所示。

实施例10

本实施例以Boc-AEEA-AEEA-R

表4

对于不同溶剂做反应的对比是按照补加双倍质量的DCM往后处理。

表4中，溶剂为DCM/甲醇时，DCM与甲醇的质量比为10：1；

溶剂为DMF/甲醇时，DMF与甲醇的质量比为10：1；

溶剂为THF/甲醇时，DMF与甲醇的质量比为10：1。

实施例11

本实施例公开了Fmoc-L-LSY-AEAE-AEEA.TFA的合成方法，具体为：

将5g Boc-AEEA-AEEA-L-Lys-Fmoc(6.59mmol)加入100ml反应瓶中，加入10g DCM，控温25℃缓慢加入15g TFA，加毕，保温反应5h，TLC点板观察，反应完全；减压蒸馏除去二氯甲烷和大量TFA，得到产物5.03gFmoc-L-LSY-AEAE-AEEA.TFA，收率99％。

实施列12

本实施例公开了式I所示的索马鲁肽侧链的合成方法，具体为：

将5g Fmoc-L-LSY-AEAE-AEEA.TFA(6.48mmol)加入100ml反应瓶中，加入25mlDCM，在加入3.80g化合物c(5.83mmol)，控温20℃缓慢加入1.31g三乙胺(12.97mmol)，加毕，保温反应5h，TLC点板观察，反应完全；反应产物经酸洗，水洗，干燥，过滤，浓缩，用乙酸乙酯：正庚烷质量比4：1降温至0℃析晶4h，过滤，浓缩得到7.75g到索马鲁肽侧链，收率85％，纯度99.21％，所有单杂均小于0.3％，其中对应三个异构体为0.02％，0.02％，0.03％，如附图13和附图14所示。

1H NMR(401MHz,DMSO-d6)δ8.03(d,J＝7.6Hz,1H),7.89(d,J＝7.3Hz,3H),7.76–7.58(m,5H),7.41(t,J＝7.5Hz,2H),7.33(t,J＝7.4Hz,2H),4.31–4.17(m,3H),3.85(s,4H),3.55(s,9H),3.42(dt,J＝16.8,6.0Hz,5H),3.28(q,J＝6.0Hz,3H),3.20(q,J＝5.8Hz,2H),3.10(q,J＝6.8Hz,2H),2.20–2.06(m,6H),1.72(s,2H),1.51–1.42(m,6H),1.38(s,20H),1.22(s,25H)(如附图15所示)；LC-MS目标[M+H

最后应说明的是：以上各实施例仅仅为本发明的较优实施例用以说明本发明的技术方案，而非对其限制，当然更不是限制本发明的专利范围；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围；也就是说，但凡在本发明的主体设计思想和精神上作出的毫无实质意义的改动或润色，其所解决的技术问题仍然与本发明一致的，均应当包含在本发明的保护范围之内；另外，将本发明的技术方案直接或间接的运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。