枯草菌脂肽钠的用途、组合物及其使用方法

技术领域

本申请属于化工领域，具体包括日用品领域、医药领域，本申请涉及枯草菌脂肽钠在调节皮肤菌群分布中的用途、组合物及其使用方法。

背景技术

皮肤微生物群由数百万共生微生物组成，是人体第二大微生物群，通过与皮肤之间复杂的沟通维持皮肤健康，主要参与皮肤屏障的维持、免疫系统的调节和病原体的防御等环节。

其中，金黄色葡萄球菌和化脓性链球菌是皮肤的致病菌。金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，S.aureus)隶属于葡萄球菌属(Staphylococcus)，有“嗜肉菌"的别称，是革兰氏阳性菌的代表，可引起许多严重感染。皮肤感染金黄色葡萄球菌的症状，表现为在皮肤表面出现小的丘疹或者脓疱，部分皮疹抓破之后可以形成鲜红色的糜烂面。如果抓破的部位较深在可以形成浅溃疡，在糜烂和溃疡的表面有黄色的浆液性渗出或者脓性渗出，感染比较严重时渗出液有一定的异味，在感染的周围可以出现红肿、皮温升高，伴有压痛的感觉。局部淋巴结可以出现肿胀，并且可以出现全身高热、乏力、倦怠等系统表现。如果没有得到很好的控制，可能会引起菌血症或者败血症。

表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis,S.epidermidis)是正常人群皮肤表面微生物的主要成员之一，对维持皮肤的健康状态发挥着重要作用：(1)在正常生理环境下，表皮葡萄球菌通过抗菌肽参与皮肤固有免疫，其细胞壁成分脂磷壁酸有助于适应性免疫系统的发育和启动，从而调节皮肤免疫过程。(2)通过分泌鞘磷脂酶，表皮葡萄球菌可以对皮肤上的神经酰胺进行补充，同时可以增强角质形成细胞间的紧密连接，进而维护皮肤屏障稳态，更有研究建议将皮肤定殖菌作为益生菌局部应用于皮肤，由于S.epidermidis是一种天然的皮肤定殖菌，对于维持皮肤屏障的稳态发挥了重要作用。(3)表皮葡萄球菌可以和多种细菌进行交流，在皮肤抗菌防御中发挥着良性的作用，并且可以促进皮肤的再上皮化，加速伤口修复。

表皮葡萄球菌对皮肤保持正常健康的状态至关重要。表皮葡萄球菌的存在比例越高，皮肤水分也越高，面部红色值越低。敏感皮肤人群中，表皮葡萄球菌占比相对少，皮肤屏障脆弱，致使金黄色葡萄球菌容易感染。

表面活性剂是使液体的表面张力显著下降的物质，同时，一部分表面活性剂可以作为杀菌剂与细菌生物膜蛋白质发生强烈作用而使之变形或被破坏。如果过多使用具有杀菌作用的表面活性剂，对微生物屏障会造成伤害，出现过敏等不适症状。

发明内容

面对现有技术的状况，本发明人意外地发现，作为表面活性剂使用的枯草菌脂肽钠不仅具有抑制金黄色葡萄球菌等致病菌的存活，还具有维持和/或促进有益菌的存活，从而完成了本发明。

具体来说，本申请涉及如下方面：

1、枯草菌脂肽钠对有益菌存活的维持和/或促进的用途。

2、根据项1所述的用途，所述有益菌包括表皮葡萄球菌。

3.枯草菌脂肽钠在制备调节皮肤菌群分布的组合物中的用途。

4.根据项3所述的用途，所述调节皮肤菌群分布包括对致病菌存活的抑制和/或对有益菌存活的维持和/或促进。

5.根据项4所述的用途，所述致病菌包括细菌和/或真菌，

优选地，所述细菌包括金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌中的一种或两种，

所述真菌包括白色念珠菌。

6.根据项4或5所述的用途，其特征在于，所述有益菌包括表皮葡萄球菌。

7.根据项1-6任一项所述的用途，其特征在于，所述组合物中枯草菌脂肽钠的含量为0.05-15wt％。

8.根据项1-7任一项所述的用途，其特征在于，所述枯草菌脂肽钠用于维持皮肤健康，所述维持皮肤健康包括修复皮肤屏障、调节皮肤免疫力、抵抗防御致病菌和/或促进伤口愈合。

9.一种调节皮肤菌群分布的组合物，所述组合物包括枯草菌脂肽钠，所述枯草菌脂肽钠的含量为0.05-15wt％。

10.根据项9所述的组合物，所述组合物还包括辅料和/或其他功效成分。

11.一种以非治疗目的调节皮肤表面菌群分布的方法，其特征在于，所述方法将项9或10所述的组合物施用于皮肤。

本申请的有益效果

(1)枯草菌脂肽钠维持和/或促进有益菌，例如表皮葡萄球菌的存活。

(2)枯草菌脂肽钠具有抑制皮肤表面的致病菌的存活，例如金黄色葡萄球菌等的存活。

(3)枯草菌脂肽钠通过调节皮肤菌群分布，从而可以实现修复皮肤屏障、调节皮肤免疫力、抵抗防御致病菌和/或促进伤口愈合、避免出现过敏等不适症状的效果。

具体实施方式

下面结合实施例进一步说明本申请，应当理解，实施例仅用于进一步说明和阐释本申请，并非用于限制本申请。

除非另外定义，本说明书中有关技术的和科学的术语与本领域内的技术人员所通常理解的意思相同。虽然在实验或实际应用中可以应用与此间所述相似或相同的方法和材料，本文还是在下文中对材料和方法做了描述。在相冲突的情况下，以本说明书包括其中定义为准，另外，材料、方法和例子仅供说明，而不具限制性。以下结合具体实施例对本申请作进一步的说明，但不用来限制本申请的范围。

本申请提供枯草菌脂肽钠对有益菌存活的维持和/或促进的用途。

枯草菌脂肽钠由枯草芽孢杆菌菌株经过发酵产生，被称为非常高效的生物表面活性剂之一，是一种脂肽类生物表面活性剂，由肽链环组成的亲水基头和脂肪烃链两部分组成。与化学合成表面活性剂相比，生物表面活性剂具有毒性低、生物降解性好等特点，因而受到越来越广泛的关注。

在本申请中，枯草菌脂肽钠可以为通过现有技术制备得到的，也可以是商购获得的任何一种。

在一些实施方式中，所述皮肤有益菌为表皮葡萄球菌。

本领域技术人员可以理解，对于与金黄色葡萄球菌性质相似的其他致病菌，或与表皮葡萄球菌性质类似的其他皮肤常驻菌群，枯草菌脂肽钠具有相同的作用，例如可以为表皮葡萄球菌、类白喉杆菌、铜绿假单胞菌、丙酸杆菌、白假丝酵母菌、非致病性分枝杆菌。

在一些实施方式中，所述枯草菌脂肽钠使用时的含量可以根据实际需要进行选择，例如，所述枯草菌脂肽钠的含量为0.05-15wt％，例如可以为0.05wt％、0.1wt％、0.15wt％、0.2wt％、0.25wt％、0.3wt％、0.4wt％、0.5wt％、0.6wt％、0.7wt％、0.8wt％、0.9wt％、1.0wt％、1.1wt％、1.2wt％、1.3wt％、1.4wt％、1.5wt％、1.6wt％、1.7wt％、1.8wt％、1.9wt％、2.0wt％、2.1wt％、2.4wt％、2.7wt％、3.0wt％、3.3wt％、3.6wt％、3.9wt％、4.2wt％、4.5wt％、4.8wt％、5.0wt％、5.5wt％、6.0wt％、6.5wt％、7.0wt％、7.5wt％、8.0wt％、8.5wt％、9.0wt％、9.5wt％、10.0wt％、10.5wt％、11.0wt％、11.5wt％、12.0wt％、12.5wt％、13.0wt％、13.5wt％、14.0wt％、14.5wt％、15.0wt％等。

在一些实施方式中，所述枯草菌脂肽钠使用时的pH可以根据实际需要进行选择，可以为酸性、碱性或中性的任意pH，优选pH为5-10，例如可以为5、5.5、6、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10等。所述组合物的pH可以通过常规的pH调节剂来调节，比如无机酸、有机酸、无机碱、有机碱、缓冲溶液。

本申请提供枯草菌脂肽钠在制备调节皮肤菌群分布的组合物中的用途。

进一步地，所述调节皮肤菌群分布包括对致病菌存活的抑制和/或对有益菌存活的维持和/或促进。

当枯草菌脂肽钠施用于皮肤时，一方面可以很好的控制致病菌，避免由致病菌感染皮肤引起的皮肤疾病，另一方面可以不影响皮肤有益菌群的存活，甚至增加皮肤有益菌群的数量，从而维持皮肤健康，避免皮肤疾病的产生。

在一些实施方式中，所述皮肤有益菌为表皮葡萄球菌。

本领域技术人员可以理解，对于与金黄色葡萄球菌性质相似的其他致病菌，或与表皮葡萄球菌性质类似的其他皮肤常驻菌群，枯草菌脂肽钠具有相同的作用，例如可以为表皮葡萄球菌、类白喉杆菌、铜绿假单胞菌、丙酸杆菌、白假丝酵母菌、非致病性分枝杆菌。

在一些实施方式中，所述致病菌包括细菌和/或真菌，优选地，所述细菌包括金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌中的一种或多种，所述真菌包括白色念珠菌。

在一些实施方式中，所述致病菌包括金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌和/或白色念珠菌。

本领域技术人员可以理解，对于与金黄色葡萄球菌性质相似的其他致病菌，或与表皮葡萄球菌性质类似的其他皮肤常驻菌群，枯草菌脂肽钠具有相同的作用。

现有的一些普通化学表面活性剂，虽然能够抑制金黄色葡萄球菌，但是同时也会抑制表皮葡萄球菌，对皮肤的微生物屏障会造成伤害，使得皮肤出现过敏等不适症状。

在一些实施方式中，所述组合物包括日用品、药物，当其为日用品时，其可以为清洁皮肤类的产品、护理皮肤类的产品等。当其为药物时，其可以为抑制皮肤致病菌的药物或由致病菌引起的疾病的药物。

在一些实施方式中，所述组合物的pH可以根据实际需要进行选择，可以为酸性、碱性或中性的任意pH，例如，优选pH为5-10，例如可以为5、5.5、6、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10等。所述组合物的pH可以通过常规的pH调节剂来调节，比如无机酸、有机酸、无机碱、有机碱、缓冲溶液。

在一些实施方式中，所述组合物中的枯草菌脂肽钠的含量可以根据实际产品的需要进行选择，例如，所述枯草菌脂肽钠的含量为0.05-15wt％，例如可以为0.05wt％、0.1wt％、0.15wt％、0.2wt％、0.25wt％、0.3wt％、0.4wt％、0.5wt％、0.6wt％、0.7wt％、0.8wt％、0.9wt％、1.0wt％、1.1wt％、1.2wt％、1.3wt％、1.4wt％、1.5wt％、1.6wt％、1.7wt％、1.8wt％、1.9wt％、2.0wt％、2.1wt％、2.4wt％、2.7wt％、3.0wt％、3.3wt％、3.6wt％、3.9wt％、4.2wt％、4.5wt％、4.8wt％、5.0wt％、5.5wt％、6.0wt％、6.5wt％、7.0wt％、7.5wt％、8.0wt％、8.5wt％、9.0wt％、9.5wt％、10.0wt％、10.5wt％、11.0wt％、11.5wt％、12.0wt％、12.5wt％、13.0wt％、13.5wt％、14.0wt％、14.5wt％、15.0wt％等。

在一些实施方式中，所述枯草菌脂肽钠用于维持皮肤健康。

在一些实施方式中，所述维持皮肤健康包括修复皮肤屏障、调节皮肤免疫力、抵抗防御致病菌和/或促进伤口愈合。

本申请还提供了一种调节皮肤表菌群分布的组合物。

在一些实施方式中，所述组合物包括枯草菌脂肽钠。

在一些实施方式中，所述枯草菌脂肽钠的含量为0.05-15wt％，例如，如上所述的含量。

在一些实施方式中，所述组合物的pH可以根据实际需要进行选择，可以为酸性、碱性或中性的任意pH，例如，pH可以为5-10，例如，如上所述的pH值。

在一些实施方式中，所述组合物除含有枯草菌脂肽钠以外，还可以含有辅料和/或其他功效成分，这些成分是在不会影响本申请技术效果实现的情况下使用的成分。

本申请还提供一种以非治疗目的调节皮肤表面菌群分布的方法，所述方法将上述包含枯草菌脂肽钠的组合物施用于皮肤。这样的具体实例包括使用包含枯草菌脂肽钠的皮肤清洁产品、护理皮肤的产品等。

进一步地，施用所述组合物1天后，表皮葡萄球菌的存活率为100％以上，甚至高达300％以上。

本申请发现枯草菌脂肽钠对有益菌的存活有维持和/或促进的作用，可以使表皮葡萄球菌等皮肤有益菌群的存活率达到100％以上，甚至达到300％以上；同时可以有效的抑制金黄色葡萄球菌等致病菌，金黄色葡萄球菌等致病菌的存活率可低至50％以下，甚至可低至13％以下，是一款皮肤微生态友好型的生物表面活性剂，施用于皮肤时不会对微生物屏障会造成伤害，从而避免出现过敏等不适症状。

实施例

实施例1

准确称取1.5g枯草菌脂肽钠，加入95mL无菌纯化水中，混合均匀后，加入2mL盐酸溶液(盐酸溶液的浓度为0.6mol/L)调节pH值至6.5，最后用无菌纯化水定容至100mL，得到100mL的1.5％枯草菌脂肽钠溶液。

实施例2-5

实施例2-5与实施例1的区别仅在于，所得到的枯草菌脂肽钠溶液的pH值不同。

具体地，实施例2中枯草菌脂肽钠溶液的pH值为7.5。实施例3中枯草菌脂肽钠溶液的pH值为8.5。实施例4中枯草菌脂肽钠溶液的pH值为9.5。实施例5中枯草菌脂肽钠溶液的pH值为5.5。

实施例6-10

实施例6-10与实施例1的区别仅在于，所得到的枯草菌脂肽钠溶液中枯草菌脂肽钠含量不同。

具体地，实施例6中所得到的枯草菌脂肽钠溶液中枯草菌脂肽钠含量为0.3wt％。实施例7中所得到的枯草菌脂肽钠溶液中枯草菌脂肽钠含量为0.6wt％。实施例8中所得到的枯草菌脂肽钠溶液中枯草菌脂肽钠含量为5wt％。实施例9中所得到的枯草菌脂肽钠溶液中枯草菌脂肽钠含量为0.05wt％。实施例10中所得到的枯草菌脂肽钠溶液中枯草菌脂肽钠含量为10wt％。

实施例11-13

实施例11-13与实施例2的区别仅在于，所得到的枯草菌脂肽钠溶液中枯草菌脂肽钠含量不同。

具体地，实施例11中所得到的枯草菌脂肽钠溶液中枯草菌脂肽钠含量为0.3wt％。实施例12中所得到的枯草菌脂肽钠溶液中枯草菌脂肽钠含量为0.6wt％。实施例13中所得到的枯草菌脂肽钠溶液中枯草菌脂肽钠含量为5wt％。

对比例1-7

对比例1-7与实施例7的不同在于使用其他的表面活性剂代替枯草菌脂肽钠。其中，所制备得到的包含表面活性剂的溶液的pH，以及表面活性剂的含量与实施例1相同。

具体地，对比例1使用烷基醇醚硫酸盐代替枯草菌脂肽钠。对比例2使用烷基酰胺甜菜碱代替枯草菌脂肽钠。对比例3使用烷基糖苷代替枯草菌脂肽钠。对比例4使用烷基酰胺谷氨酸盐代替枯草菌脂肽钠。对比例5使用烷基酰胺肌氨酸盐代替枯草菌脂肽钠。对比例6使用烷基酰胺牛磺酸盐代替枯草菌脂肽钠。对比例7使用烷基酰胺甘氨酸盐代替枯草菌脂肽钠。

上述实施例和对比例的表面活性剂的种类，添加量等条件如表1所示。

实验例

在本实验例中，采用悬液定量法来测试实施例和对比例制备的样品的抑菌性能。

试验菌种分别为金黄色葡萄球菌ATCC6538及表皮葡萄球菌ATCC12228。制备浓度约为10

试验步骤：

1、吸取实施例和对比例的试验样品各5.0mL放入灭菌试管中，20℃恒温5分钟。

2、吸取试验菌液0.1mL加入到含5.0mL样品的试管中，迅速混匀，并立即计时。可根据抑菌成分及产品特点选择作用时间(如30分钟、1小时、1天等)。

3、作用至设定时间后，取试验菌与样品的混合液0.5mL，加入到含4.5mL经灭菌的0.03mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)中，混匀。

4、放置10分钟后，吸取1mL样液(或作适当稀释后，取其中2～3个稀释度的稀释液)置于无菌平皿内，用凉至40-45℃的胰蛋白大豆琼脂培养基作倾注，转动平皿，使其充分混合均匀，琼脂凝固后翻转平皿，在30-35℃的生化培养箱中培养2-3天后，做活菌菌落计数。

5、以灭菌的PBS代替试验样品，同时按以上步骤操作，作为对照样品。

6、实验重复3次，求其平均值。

7、存活率(％)＝II/I x100，I为对照样品菌落数，II为试验样品菌落数。

测试得到的表皮葡萄球菌存活率和金黄色葡萄球菌存活率的结果如表1所示。

表1

从表1可以看出，在施用本申请实施例的组合物1天后，可以使对表皮葡萄球菌等皮肤有益菌群的存活率达到100％以上，甚至可以高达300％以上，说明枯草菌脂肽钠对有益菌的存活有维持和/或促进的作用。同时，金黄色葡萄球菌的存活率均小于50％，甚至可以低至13％以下，说明本申请实施例的组合物能够调节皮肤菌群分布，维持皮肤健康。枯草菌脂肽钠是一款皮肤微生态友好型的生物表面活性剂，施用于皮肤时不会对微生物屏障会造成伤害，从而避免出现过敏等不适症状。