饥饿素分泌促进剂

本申请是申请日为2017年7月13日、申请号为201780043060.3、发明名称为“饥饿素分泌促进剂”的发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及饥饿素分泌促进剂。

背景技术

饥饿素是主要在胃内分泌的肽激素，被报道具有摄食亢进作用和消化道运动的调节作用、生长激素促进、能量代谢的调节作用、心功能亢进作用、抗糖尿病作用等。因此，饥饿素的分泌促进可改善食欲不振，所以促进饥饿素分泌的物质非常有用。目前为止，报道有采用乳成分、植物提取物或中药的饥饿素的分泌促进，还报道有采用乳酸菌的饥饿素的分泌促进。所以，希望不采用医药品等，通过如摄取由乳酸菌制备的通常的食品等更简便的方法来获得饥饿素分泌促进效果。

作为以往的例子，例如日本专利特表2009-524640号公报(专利文献1)中记载了使用嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)、唾液乳酸杆菌(Lactobacillussalivarius)、弯曲乳酸杆菌(Lactobacillus curvatus)等调节饥饿素的分泌。日本专利特开2015-127338号公报(专利文献2)中记载了包含乳酸杆菌属的乳酸菌和饥饿素的组合物。日本专利特开2015-205829号公报(专利文献3)和日本专利特开2015-205830号公报(专利文献4)中记载了将脱脂乳或脱脂乳粉作为有效成分的饥饿素分泌促进剂。但是，这些文献中，对于乳酸菌、特别是加氏乳酸杆菌(Lactobacillus gasseri)可促进饥饿素的分泌而改善食欲不振，没有记载或提示。

现有技术文献

专利文献

专利文献1:日本专利特表2009-524640号公报

专利文献2:日本专利特开2015-127338号公报

专利文献3:日本专利特开2015-205829号公报

专利文献4:日本专利特开2015-205830号公报

发明的概要

发明所要解决的技术问题

目前为止，为了使用饥饿素改善食欲不振，需要半强制地使其摄取(给予)饥饿素或使饥饿素分泌的公知物质，在摄取方面存在物理和/或心理的障碍。

在这样的背景下，本发明中，以提供呈易摄取的形态、可发挥存在于人体内的饥饿素分泌作用、安全且无副作用的新的饥饿素分泌促进剂为课题。

解决技术问题所采用的技术方案

为了解决上述课题，本发明人作为易于获取且可轻松摄取的食品着眼于发酵乳，对用于制备发酵乳的乳酸菌的功能性进行了详细的探讨。并且，作为其结果，发现规定的乳酸菌及使用其制备的发酵乳具有显著的饥饿素分泌效果，从而完成了本发明。

即，本发明如下所述。

[1]一种饥饿素分泌促进剂，其特征在于，含有乳酸杆菌属的乳酸菌作为有效成分。

[2]根据[1]所述的饥饿素分泌促进剂，其特征在于，所述乳酸杆菌属的乳酸菌为加氏乳酸杆菌。

[3]根据[1]或[2]所述的饥饿素分泌促进剂，其特征在于，所述乳酸杆菌属乳酸菌为加氏乳酸杆菌OLL2716(FERM BP-6999)。

[4]根据[1]～[3]中的任一项所述的饥饿素分泌促进剂，其特征在于，用于幽门螺杆菌阴性者。

[5]一种发酵乳，其中，包含[1]～[4]中的任一项所述的饥饿素分泌促进剂。

此外，本发明中还包含以下的发明。

[6]一种促进饥饿素分泌的方法，其中，包括使对象摄取使用乳酸杆菌属的乳酸菌制备的发酵乳的工序。

[7]根据[6]所述的促进饥饿素分泌的方法，其中，乳酸杆菌属的乳酸菌为加氏乳酸杆菌。

[8]根据[6]或[7]所述的促进饥饿素分泌的方法，其中，加氏乳酸杆菌为加氏乳酸杆菌OLL2716(FERM BP-6999)。

[9]乳酸杆菌属的乳酸菌在饥饿素分泌促进剂的制造中的用途。

[10]根据[9]所述的用途，其中，乳酸杆菌属的乳酸菌为加氏乳酸杆菌。

[11]根据[9]或[10]所述的用途，其中，加氏乳酸杆菌为加氏乳酸杆菌OLL2716(FERM BP-6999)。

[12]一种乳酸杆菌属的乳酸菌，其中，该乳酸菌用于饥饿素分泌促进剂的制造。

[13]一种作为乳酸杆菌属的乳酸菌的加氏乳酸杆菌OLL2716(FERM BP-6999)，其中，该乳酸菌用于饥饿素分泌促进剂的制造。

发明的效果

如果采用本发明，通过摄取规定的乳酸菌或使用其制备的发酵乳，可获得饥饿素分泌促进效果，能够显著改善食欲不振。特别是发酵乳为被广泛熟知的食品，易于获取，可轻松且安全地摄取，所以能够对食欲不振的改善有巨大的帮助。

附图的简单说明

图1是表示实施例1中将对照组与LG21酸乳酪组的血中活跃型饥饿素浓度进行比较的结果的图。竖线表示各组内的标准差。对照组与LG21酸乳酪组以低于5％的显著性水平在统计学上存在显著差异。

图2是表示实施例1中将对照组与LG21酸乳酪组的胃组织的饥饿素基因表达量进行比较的结果的图。竖线表示各组内的标准差。对照组与LG21酸乳酪组以低于5％的显著性水平在统计学上存在显著差异。

图3是表示实施例2中将对照组、给予LG21活菌1小时后、给予LG21活菌2小时后的胃组织的饥饿素基因表达量进行比较的结果的图。竖线表示各组内的标准差。对照组与给予LG21活菌2小时后、以及给予LG21活菌1小时后与给予LG21活菌2小时后以低于5％的显著性水平在统计学上存在显著差异。

实施发明的方式

本发明中，可直接使用乳酸菌。本发明中的“乳酸菌”是指分类学上被认定为乳酸菌的所有菌的总称，不受菌种或菌株等的限定。另外，乳酸菌也根据其来源分类为植物来源及动物来源，本发明的乳酸菌既可使用植物来源，也可使用动物来源。本发明中，由于在酸乳酪等发酵乳中更加被广泛熟知，较好是选自乳酸杆菌属的乳酸菌的1种或2种以上的菌株。此外，更好是乳酸杆菌属乳酸菌为加氏乳酸杆菌(Lactobacillus gasseri)，其中进一步更好是加氏乳酸杆菌OLL2716(FERM BP-6999)。

在此，“加氏乳酸杆菌OLL2716(Lactobacillus gasseri OLL2716)”于1999年5月24日(原保藏日)在独立行政法人产业技术综合研究所专利生物保藏中心(日本国邮政编码305-8566，茨城县筑波市东1丁目1番地1中央第6)以保藏编号FERM BP-6999基于布达佩斯条约进行了国际保藏。本保藏株由1999年5月24日的微工研菌寄第P-17399号的国内保藏(原保藏)于2000年1月14日移交基于布达佩斯条约的国际保藏。

如布达佩斯公布(Budapest Notification)编号282(http://www.wipo.int/treaties/en/notifications/budapest/treat y_budapest_282.html)所记载，国家高级工业科学技术学院,国际专利生物保藏中心(IPOD,NITE)从上述的独立行政法人产业技术综合研究所专利生物保藏中心(IPOD,AIST)继承了专利微生物保藏业务，因此现在保藏于国家高级工业科学技术学院,国际专利生物保藏中心(IPOD,NITE)(日本国邮政编码292-0818，千叶县木更津市上总镰足2-5-8 120号室)(FERM BP-6999)。

此外，本发明的另一种形态中，可使用乳酸菌制备发酵乳。本发明中，通过作为发酵乳摄取，与作为乳酸菌摄取的情况相比，具有发酵乳的适度的清爽酸味，可毫无压力地摄取本发明的乳酸杆菌属的乳酸菌。发酵乳的制备方法可例举例如对原料乳进行杀菌，冷却后添加乳酸菌发酵剂，以达到规定的乳酸酸度的发酵温度和发酵时间发酵的方法。作为乳酸酸度，可示例例如0.6～1.2质量％。作为发酵温度，可示例例如40～45℃。作为发酵时间，可示例例如2～12小时。

本说明书中的“发酵乳”是指使乳发酵而得的产物，包括例如由涉及乳及乳制品的成分标准等的部令(乳等部令)定义的“发酵乳”、“乳酸菌饮料”、“乳饮料”、“天然乳酪”等，但并不仅限于此。例如，发酵乳是指由乳等部令定义的“发酵乳”，即通过乳酸菌或酵母使生乳、牛乳、特别牛乳、生山羊乳、杀菌山羊乳、生绵羊乳、成分调整牛乳、低脂肪牛乳、无脂肪牛乳和加工乳等乳或包含其同等以上的无脂乳固体成分的乳等发酵而形成固体状(硬质型)、糊状(软质型)或液状(饮用型)或者将它们冻结而得的制品，但并不仅限于此。本发明的发酵乳中，无脂乳固体成分的浓度范围例如较好是4.0％～12.0％，更好是6.0％～10.0％，进一步更好是7.0％～9.0％。此外，乳脂肪成分的浓度例如较好是0.2％～4.0％，更好是0.3％～3.0％，进一步更好是0.4％～2.0％。

作为发酵乳的典型例子，可例举酸乳酪。本发明中，“酸乳酪”包括例如原味酸乳酪、硬质酸乳酪(凝固型酸乳酪)、软质酸乳酪、饮用酸乳酪等。本发明中，从食欲不振时易于饮用的观点来看，特别好是饮用酸乳酪。

本发明的发酵乳中，通过将适合于1次摄取的量制成1个包装的形态，可适当且轻松地摄取，从使用性方面来看优选。适合于1次摄取的量因要改善的食欲不振的程度等而存在个人差异和偏差，但例如无脂乳固体成分为8.0％的发酵乳的情况下，每1次较好是50mL～200mL，更好是80mL～150mL，进一步更好是100mL～120mL。或者，每1次较好是50g～200g，更好是80g～150g，进一步更好是100g～120g。

本发明中，“1个包装的形态”包含任意的形态，包括例如带盖的容器、带盖的瓶、独立袋、小袋、管等一般的包装形态。本发明中，可通过在单个包装或者包含多个的单个包装的包装上记载该制品的用途、功效、摄取方法等的说明且/或采用附加记载物的包装且/或另外公示小册子等记载物等，使其用途明确。

本发明中，对于人而言，每1天，作为其有效量(摄取量)，有效成分的乳酸菌的菌数较好是2×10

本发明的发酵乳可通过单次的摄取获得足够的效果，从提高饥饿素分泌的促进效果的观点来看，较好是以4周以上、6周以上、8周以上、10周以上、12周以上的期限持续摄取，更好是以24周以上的期限持续摄取，进一步更好是以36周以上的期限持续摄取。另外，本发明的发酵乳被广泛熟知，可安全地摄取，因此摄取期限的上限无特别限定，可永久持续，但一定要设定上限的话，例如为120周以下、100周以下、80周以下、60周以下。

此外，本发明中，可便利地使用含有本发明的实施方式中的乳酸菌的市售商品。例如加氏乳酸杆菌OLL2716(FERM BP-6999)的情况下，可便利地使用株式会社明治销售的“明治益生菌酸奶LG21(日语:明治プロビオヨーグルトLG21)”。该市售品可直接摄取，也可进一步加工。与本发明的实施方式中的乳酸菌一起摄入其他可摄取的成分的情况下，对其他可摄取的成分无限制，可优选使用例如乳性成分。乳性成分是指包含乳本身或对乳进行加工而得的乳成分的组合物，包括包含例如生乳(牛乳等)、还原乳(乳粉、奶油、黄油)、发酵乳(酸乳酪、乳酪)、乳制备品(乳清蛋白、酪蛋白、乳糖、乳清矿物质、乳清渗透物(permeate))等乳成分的全部成分，其来源和形态无特别限定。

另外，已知加氏乳酸杆菌OLL2716是人胃内的幽门螺杆菌的除菌能力高的乳酸菌(例如日本专利4509250号公报)，本发明的饥饿素分泌促进效果可与幽门螺杆菌的除菌无关地获得。因此，本发明既可用于幽门螺杆菌阳性者，又可用于幽门螺杆菌阴性者。

实施例

以下，基于实施例对本发明进行更具体的说明。另外，该实施例并不对本发明进行限定。

[实施例1]

对于12只ddy小鼠(日本SLC株式会社，4周龄，雄性)，1周驯化期间后，分成对照组和LG21酸乳酪组这2组。对于对照组，给予4周AIN-93M饲料(日本科力亚株式会社，组成:玉米淀粉46.5692％、乳酪蛋白14.0％、预糊化玉米淀粉15.5％、精白砂糖10.0％、精制大豆油4.0％、纤维素粉末5.0％、矿物质混合物(AIN-93M-MX)3.5％、维生素混合物(AIN-93VX)1.0％、L-胱氨酸0.18％、酒石酸氢胆碱0.25％、叔丁基氢醌0.0008％)。对于LG21酸乳酪组，给予4周以1.11g/天的给予量的条件混合LG21酸乳酪(株式会社明治销售的“明治益生菌酸奶LG21”，含加氏乳酸杆菌OLL2716(FERM BP-6999))的AIN-93M饲料。经过4周后，剖检，采集血液和胃组织。

血液在EDTA处理后，加入1/10量的盐酸(1mol/L)，使用活跃型饥饿素ELISA试剂盒(美迪恩斯生命科技株式会社(LSI Medience Corporation))，测定血中活跃型饥饿素浓度。此外，由采集的胃组织，使用PrimeScript RT试剂盒(宝生物株式会社)制备cDNA，使用SYBER Premix Ex TaqII(宝生物株式会社)和Thermal cycler Dice(宝生物株式会社)，测定胃组织的饥饿素基因表达量。

血中活跃型饥饿素浓度的测定结果示于图1，胃组织的饥饿素基因表达量示于图2。根据图1，LG21酸乳酪组的血中活跃型饥饿素浓度与对照组相比显著提高。此外，根据图2，胃组织的饥饿素基因表达量与对照组相比显著提高。因此，提示含有加氏乳酸杆菌OLL2716(FERM BP-6999)的LG酸乳酪具有饥饿素分泌促进效果。

[实施例2]

对于15只ICR小鼠(日本SLC株式会社，10周龄，雄性)，1周驯化期间后，分成3组。断食5小时后，1组作为对照组，给予500μL生理盐水，剖检，采集胃组织。对于其他2组，给予500μL包含2×10

结果示于图3。给予加氏乳酸杆菌OLL2716(FERM BP-6999)的活菌的2小时后，胃组织的饥饿素基因表达量与对照组相比显著提高。因此，提示加氏乳酸杆菌OLL2716(FERMBP-6999)的活菌具有饥饿素分泌促进效果。

工业上利用的可能性

如果采用本发明，通过摄取乳酸菌本身或使用其制备的发酵乳，可获得饥饿素分泌促进效果，能够显著改善食欲不振。特别是发酵乳为被广泛熟知的食品，易于获取，可轻松且安全地摄取，所以能够对食欲不振的改善有巨大的帮助。