一种用于检测监控不同莲中莲碱含量的系统及方法

技术领域

本发明属于化学领域，具体涉及一种用于检测监控不同莲中莲碱含量的系统及方法。

背景技术

莲属(Nelumbo)植物既可药用也可食用，其中荷叶、藕节、莲子、莲子心、莲房和莲须等皆可入药，但药效各不相同。现有研究显示，荷叶中具有生理活性的物质主要为生物碱和黄酮类物质。截至目前，从干燥荷叶和荷叶汁液中发现的生物碱单体共27种，按照生源途径结合化学结构类型分类，可将它们归为苯丙氨酸和酪氨酸系生物碱中的异喹啉类，根据异喹啉或四氢异喹啉母核上连接基团的不同，又可将其细分为原阿朴啡类、阿朴啡类、氧化阿朴啡类、去氢阿朴啡类、单苄基异喹啉类、双苄基异喹啉类和其他类。其中，莲碱(Roemerine)属于阿朴啡类，其系统命名为(7aR)-7-甲基-6,7,8,7a,8-四氢-5H-[1,3]二甲氧基苯并[6,5,4-de]苯并[g]喹啉，分子式为C

现有研究认为，不同莲品种中的生物碱及其代谢物存在显著差异。文献资料《基于代谢组学和转录组学挖掘荷叶生物碱合成途径关键基因》(2022年)提到，目前对荷叶生物碱的研究尚不深入，其相关途径的关键基因及功能也不清楚。包括前荷叶碱、N-甲基乌药碱、荷叶碱、莲碱等在内的多种生物碱是不同莲中差异显著的荷叶生物碱。因此，从不同莲品种中分离提取特定生物碱往往需要用不同的分离提取方法来尝试，且提取结果不可预期。

文献资料《荷叶总生物碱的制备方法研究》(2022年)公开了一种利用基于大孔吸附树脂-分散固相萃取法的荷叶总生物碱的制备方法。该文献资料提到荷叶中含有的生物碱类成分含量较低、提取纯化方法操作繁琐，因此该文献方法采用乙醇加热回流从荷叶中提取生物碱，然后采用大孔吸附树脂法对荷叶提取物进行纯化，再采用PCX分散固相萃取技术对大孔吸附树脂纯化物进一步纯化，最终得到荷叶总生物碱纯化物。经测量，该纯化物中荷叶碱的含量为27.66％～30.12％；其中包括含量为9.93％～11.36％的的O-去甲基荷叶碱、1.96％～2.99％的N-去甲基荷叶碱和2.17％～2.67％的莲碱。但该方法仅是将单批次荷叶中的3种生物碱提取出来，然而不同莲品种不同莲部位中的生物碱及其代谢物的种类和含量差异巨大，因此该方法得到的结果不具有系统性的指导意义。可见，现有技术中缺少对不同批次、不同品种、不同部位的莲中生物碱检测结果进行系统性的追踪和分析，从而缺少从宏观上对莲属植物中特定生物碱进行质量监控的手段。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种用于检测和监控不同莲中莲碱含量的系统及方法，具体技术方案如下。

一种用于检测监控不同莲中莲碱含量的方法，所述方法基于一种检测结果实时反馈系统实施，所述系统包括原料收集与评估模块、检测分析模块和数据收集与分析模块，所述检测分析模块包括清洁单元、分离提纯单元、分析验证单元和结果判定单元，所述方法步骤包括：

S1：所述原料收集与评估模块收集枯萎莲作为原材料，筛选去掉明显腐坏部分后，判断无其他杂质即用于后续检测分析；

S2：所述原材料在所述清洁单元中进行简单清洗，然后在分离提取单元加入有机试剂用索氏提取法进行一级提取，得到含有莲碱的粗提物，在分析验证单元对所述粗提物中莲碱的含量进行检测然后将结果反馈到结果判定单元进行判定，并将判定结果发送到数据收集与分析模块：当含量为2-5％时判定为停止提取，当含量为大于5％时判定为进行二级提取；

S3：继续在分离提取单元用pH-区带高速逆流色谱法对S2得到的粗提物进行二级提取，得到含有莲碱的精制物，在分析验证单元对所述精制物中莲碱的含量进行检测然后将结果反馈到结果判定单元进行判定，并将判定结果发送到数据收集与分析模块：当含量为80-95％时判定为停止提取，当含量大于95％时判定为进行三级提取；

S4：继续在分离提取单元用反相C18制备液相色谱柱对S3得到的精制物进行三级提取，得到莲碱纯品，在分析验证单元对所述纯品的纯度和杂质进行检测然后将结果反馈到结果判定单元，并将结果数据发送到数据收集与分析模块；

S5：数据收集与分析模块将S2-S4中莲碱的含量或杂质数据与原材料莲的特征进行匹配，最后将匹配结果发送到所述原料收集与评估模块。

可以理解的是，本发明所述的“莲”是指整个莲属植物。

进一步，S1中用于后续检测的莲的部分可选地包括荷叶、花瓣、花托、莲房、莲子、花柄或叶柄中的一种或多种。

进一步，所述S2中以枯萎莲与有机试剂按照1:5～1:10的料液比进行索氏法提取，反应时间3h～8h，反应终点可以通过观察提取液的消耗来判断，得到含有莲碱的粗提物，所述有机溶剂为乙醇或二氯甲烷。

进一步，所述S3中用pH-区带高速逆流色谱法对所述精提物进行分离，溶剂系统为石油醚–乙酸乙酯–甲醇–水，上相加入三乙胺为固定相，下相加入盐酸为流动相，得到含有莲碱的精制物。

进一步，所述石油醚–乙酸乙酯–甲醇–水的体积比为5：5：2：8；上相为10mM的三乙胺，下相为10mM的盐酸。

进一步，所述S4中用反相C18制备液相色谱柱法对所述精制物进行提取，以乙腈–0.1％三乙胺水溶液(64：36，v/v)为流动相，流速为3.0mL/min，紫外检测器检测波长为270nm，收集纯度大于99％的莲碱色谱峰，得到莲碱纯品。

进一步，所述原料收集与评估模块收集枯萎莲后，对所述莲的特征进行记录，并将特征数据发送给数据收集与分析模块。

进一步，所述原材料莲的特征包括莲的品种、地域、生长周期、枯萎时长、检测部位和/或叶片颜色中的一种或多种。可以理解的是，不同品种、地域、检测部位(例如荷叶和花瓣)的莲中莲碱含量不同。可以理解的是，不同生长周期(例如生长初期和成熟期)的莲中莲碱的含量或有不同，或者提取工艺难度不同。还可以理解的是，不同枯萎时长(例如枯萎1-3天和枯萎5天以上)的莲中莲碱的提取工艺难度不同。

进一步，所述原料收集与评估模块可选地根据所述数据收集与分析模块发送的莲碱含量或杂质数据与原材料莲特征的匹配结果，为未检测的莲批次分配一种提取和检测方案。

进一步，所述的含量或杂质数据包括测得的含量数据、纯度数据、检测的图谱或结构鉴定的数据及相关图谱。

进一步，所述分离提取单元包括反应池、过滤装置、索氏提取装置、加热蒸发装置、浓缩装置、烘干装置、液相色谱仪、质谱仪或高速逆流色谱仪。

进一步，所述分析验证单元包括色谱仪、质谱仪、数字熔点仪、紫外可见分光光度计、红外光谱仪、核磁共振谱仪、四极杆飞行时间高分辨质谱仪、或自动旋光仪。

有益技术效果

本发明提供了一种用于检测监控不同莲中莲碱含量的系统及方法，为不同批次、不同品种、不同产地的莲或莲中不同检测部位的莲碱含量结果进行系统性的追踪和分析提供了一个平台，从而可以从宏观上以大数据的方式对莲属植物中莲碱含量进行长期质量监控。具体来说，本发明系统及方法的优势包括以下。

1)本发明采用枯萎的莲作为原材料，实现了农业废弃物的再利用，降低了整个系统运行的成本。

2)目标化合物莲碱的性质是一种碱，因此提取方法中需要进行pH值的调控才能实现有效分离。本发明提出用pH-区带高速逆流色谱法对目标化合物中的莲碱进行高效提取，不仅提取出高纯度的莲碱标准品，进一步通过多种手段交叉验证证明该莲碱标准品结构正确，因此具有巨大的经济价值。

3)本发明根据莲的品质或检测部位的不同，配套了多级分离提取和检测方法。特别是，本发明系统中设置了结果判定单元，该单元模块能够根据每级分离提取后化合物中莲碱的含量结果来判定该化合物是直接用于商业应用(例如作为工业原料、作为作为食品、保健品、化妆品等的添加剂、作为对照品或标品等)，还是继续进行分离提取。由于原料中目标化合物莲碱的含量很低，因此提取难度很大，进而提取成本很高，每提取出1g纯品，往往需要约1吨的原料。本发明这么做的好处是能够优化原材料的使用，同时节约提取分离的成本和时间。例如，当原材料品质很好或检测部位中莲碱的含量比较丰富时，经过系统判定后将该批次原材料直接用于高级提取，可以得到含量纯度较高的莲碱提取物甚至是纯品；而当原材料品质较差或检测部位中莲碱的含量比较低时，经过一级提取后判定无需再进行下级提取，而一级提取后的粗提物可以作为工业原料进行售卖。因此，这种方法可以极大的实现经济和效率的优化设置。

4)由于本发明配套的多级分离提取和检测方法涉及到的仪器设备配置也会相应的不同，因此本发明系统还为原材料分析检测指派不同层级的检测单位和科研机构提供了一种选择，可以做到资源的灵活调配。例如，在环境条件比较差的农业地区，在紧邻荷塘的地方配备设置一级提取单元，其提取出的产物经过系统判定后直接作为工业原料售卖或发送到上一级单位进行继续提取，进一步起到了精准助农的目的。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍。显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。

图1为本发明检测结果实时反馈系统的工作流程图；

图2为本发明检测监控方法的过程示意图；

图3为其中一个实施例中含有莲碱的粗提物的高效液相色谱-紫外法检测的图谱示例；

图4为其中一个实施例中pH-区带逆流色谱分离莲碱的图谱示例；

图5为其中一个实施例中莲碱精制品的高效液相色谱-紫外法检测的图谱示例；

图6为其中一个实施例中制备液相色谱法制备莲碱纯品的图谱示例；

图7为其中一个实施例中莲碱纯品的高效液相色谱-紫外法检测的图谱示例；

图8为其中一个实施例中莲碱纯品恒定洗脱高效液相色谱-二极管阵列法检测的三维图谱示例；

图9为其中一个实施例中莲碱纯品Agilent Zorbax SB-C18色谱柱洗脱高效液相色谱-二极管阵列法检测的三维图谱示例；

图10为其中一个实施例中展开剂I薄层色谱图示例(a:碘熏、b：荧光254nm)；

图11为其中一个实施例中莲碱正负离子模式下总离子流图示例(a:正离子、b:负离子)；

图12为其中一个实施例中莲碱标准样品的热重测试曲线示例；

图13为其中一个实施例中莲碱的紫外光谱图示例；

图14为其中一个实施例中莲碱的红外光谱图示例；

图15为其中一个实施例中莲碱正离子模式下质谱图示例；

图16为其中一个实施例中莲碱的核磁氢谱(

图17为其中一个实施例中莲碱的核磁碳谱(

图18为其中一个实施例中莲碱的氢的异核单量子关系核磁谱(HMQC)图谱示例；

图19为其中一个实施例中莲碱的氢的异核多键相关核磁谱(HMBC)示例；

图20为其中一个实施例中莲碱的关联性磁振频谱(

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

需要说明的是，在本文中，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者装置不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者装置所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个......”限定的要素，并不排除在包括该要素的过程、方法、物品或者装置中还存在另外的相同要素。

如在本说明书中使用的，术语“大约”，典型地表示为所述值的+/-5％，更典型的是所述值的+/-4％，更典型的是所述值的+/-3％，更典型的是所述值的+/-2％，甚至更典型的是所述值的+/-1％，甚至更典型的是所述值的+/-0.5％。

在本说明书中，某些实施方式可能以一种处于某个范围的格式公开。应该理解，这种“处于某个范围”的描述仅仅是为了方便和简洁，且不应该被解释为对所公开范围的僵化限制。因此，范围的描述应该被认为是已经具体地公开了所有可能的子范围以及在此范围内的独立数字值。例如，范围

实施例1

本实施例提供一种检测结果实时反馈系统

一种检测结果实时反馈系统，包括原料收集与评估模块10、检测分析模块20和数据收集与分析模块30；所述检测分析模块20包括清洁单元21、分离提取单元22、分析验证单元23和结果判定单元24；所述原料收集与评估模块10用于收集原材料莲并对其品质做出初步判定，筛选去除明显腐坏部分后，观察无其他杂质，便可用于后续检测；所述检测分析模块20主要用于对莲进行分离提取，并对提取物含量或杂质进行检测和鉴定，并根据检测结果来判定每次分离提取后的结果化合物是继续用于分离提取，还是直接用于商业使用，最后将每次检测的结果数据发送给数据收集与分析模块30；所述数据收集与分析模块30主要用于收集莲提取物的检测和(杂质)鉴定结果，并将该结果与原材料莲的特征进行匹配，然后将匹配结果再反馈给所述原料收集与评估模块10，见图1。

可以理解的是，所述原料收集与评估模块10还可以用于将原材料莲的原始特征数据(包括但不限于莲的品种、地域、枯萎时长、检测部位、枯萎季节和/或叶片颜色中的一种或多种)发送给数据收集与分析模块30。

可以理解的是，所述数据收集与分析模块30将莲提取物(莲碱)的含量和杂质数据与该批次的原材料莲的特征进行匹配以后，将匹配结果发送给所述原料收集与评估模块10，进而所述原料收集与评估模块10记录有不同批次、不同品种或不同枯萎时间的莲中目标提取物的含量或杂质数据。因此当新进一批待检测的莲原材料时，所述原料收集与评估模块10可根据该批次莲的原始特征为其精准分配一套提取与检测方案。

可以理解的是，本实施例所述的“实时反馈”是指结果判定单元24将每次从分析验证单元23得到的检测数据和基于所述检测数据的判定结果发送给数据收集与分析模块30。

所述原料收集与评估模块10包括电脑系统，所述电脑系统具备识别功能、数据提取功能、数据检索功能和数据保存功能。

所述数据收集与分析模块30包括电脑系统，所述电脑系统具备数据提取功能、数据处理功能、数据运算功能和数据保存功能。

所述分离提取单元22包括反应池、过滤装置、索氏提取装置、加热蒸发装置、浓缩装置、烘干装置、液相色谱仪、质谱仪或高速逆流色谱仪。

所述分析验证单元23包括色谱仪、质谱仪、数字熔点仪、紫外可见分光光度计、红外光谱仪、核磁共振谱仪、四极杆飞行时间高分辨质谱仪、或自动旋光仪。

所述清洁单元包括清洗机、纯水仪或操作台。

实施例2

本实施例提供一种用于检测监控不同莲中莲碱含量的方法，该方法基于实施例1所述的检测结果实时反馈系统实施，所述方法步骤包括：

S1：所述原料收集与评估模块10收集枯萎莲作为原材料，筛选去掉明显腐坏部分后，判断无其他杂质即用于后续检测分析；

S2：所述原材料在所述清洁单元中进行简单清洗，然后加入有机试剂用索氏提取法进行一级提取，得到含有莲碱的粗提物，在分析验证单元23对所述粗提物中莲碱的含量进行检测然后将结果反馈到结果判定单元24进行判定，并将判定结果发送到数据收集与分析模块30：当含量为2-5％时判定为停止提取，当含量为大于5％时判定为进行二级提取；

S3：继续在分离提取单元22用pH-区带高速逆流色谱法对S2得到的粗提物进行二级提取，得到含有莲碱的精制物，在分析验证单元23对所述精制物中莲碱的含量进行检测然后将结果反馈到结果判定单元24进行判定，并将判定结果发送到数据收集与分析模块30：当含量为80-95％时判定为停止提取，当含量大于95％时判定为进行四级提取；

S4：继续在分离提取单元22用反相C18制备液相色谱柱对S3得到的精制物进行三级提取，得到莲碱纯品，在分析验证单元23对所述纯品的纯度和杂质进行检测然后将结果反馈到结果判定单元24，并将结果数据发送到数据收集与分析模块30；

S5：数据收集与分析模块30将S2-S4中莲碱的含量或杂质数据与原材料莲的特征进行匹配，最后将匹配结果发送到所述原料收集与评估模块10。

可以理解的是，S2-S4中，当结果判定为停止提取时，对应步骤下提取的化合物可直接用于实际用途，见图2，用途如下表1所示。

表1本发明提取的莲碱用途

实施例3

本实施例提供多种分离提取方法和检测方法或组合

方法一：

取枯萎莲作为起始物料，以乙醇或二氯甲烷为提取溶剂，优选二氯甲烷为提取溶剂，经索氏提取法得到莲生物碱粗提物，其中，起始物料与二氯甲烷的料液比为1:5～1:10，反应时间3h～8h，反应终点可以通过观察提取液的消耗来判断。

提取结果用高效液相色谱-紫外法进行分析，见图3。本实施例分离提取的粗提物中莲碱含量约为3.7％。

方法二：

采用pH-区带高速逆流色谱，对莲碱粗提物进行分离，溶剂系统为石油醚–乙酸乙酯–甲醇–水(5:5:2:8，v/v)，上相加入10mM三乙胺为固定相，下相加入10mM盐酸为流动相。pH-区带逆流色谱分离图见图4，其中峰II为富集得到的莲碱精制产物。提取结果用HPLC进行分析，见图5。

本实施例分离提取到的精制品种莲碱含量为94.5％。

方法三：

采用反相C18制备液相色谱柱(10mm×250mm,10μm)，，以乙腈–0.1％三乙胺水溶液(64：36，v/v)为流动相，流速为3.0mL/min，紫外检测器检测波长为270nm，对莲碱精制产物进行分离制备(图6)。将以上纯度大于99％的莲碱色谱峰(图7)旋蒸，分别经恒温减压干燥后，得莲碱单体(纯品)。

本实施例分离提取到的莲碱纯度为99.86％。

实施例4

纯度分析

可以理解的是，本发明系统和方法还包括多种检测分析方法对莲碱提取物的含量进行多重交叉检测验证。

1.高效液相色谱-紫外法进行纯度分析

1.1恒定洗脱

仪器：Waters ACQUITY高效液相色谱仪，二极管阵列检测器(PDA)。分析条件：色谱柱：Waters Symmetry C18(250mm×4.6mm,5μm)。采用流动相：乙腈–0.1％三乙胺水＝64﹕36(v/v)；流速：1.0mL/min；检测波长：270nm；柱温：25℃；运行时间：30min；样品浓度1.0mg/mL；进样量：10μL。

结果：扣除溶剂色谱峰后，对样品色谱峰进行面积归一化法定量，经积分，莲碱样品纯度为99.86％，未发现明显的杂质峰存在，见图8。

1.2梯度洗脱

仪器：Waters ACQUITY高效液相色谱仪，二极管阵列检测器(PDA)。

分析条件：Waters Symmetry C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱。流动相：乙腈(A)–0.1％三乙胺水(B)；梯度洗脱：0–30min，64％A；30–40min，64％–100％A；40–45min，100％–64％A；45–50min，64％A。流速：1.0mL/min。检测波长：270nm。柱温：25℃。运行时间：50min。样品浓度1.0mg/mL。进样量：10μL。

结果：扣除溶剂色谱峰后，对样品色谱峰进行面积归一法定量，经积分，莲碱样品纯度为99.84％，未发现明显的杂质峰存在。

1.3其它色谱条件

仪器：Waters ACQUITY高效液相色谱仪，二极管阵列检测器(PDA)。

分析条件：Agilent Zorbax SB-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱；流动相：乙腈–0.1％三乙胺水＝64：36(v/v)。流速：1.0mL/min；柱温：25℃；运行时间：30min；样品浓度1.0mg/mL；进样量：10μL。

结果：扣除溶剂色谱峰后，对样品色谱峰进行面积归一法定量，经积分，莲碱的纯度为99.85％，见图9。

2.薄层色谱法进行鉴别

2.1展开剂I薄层色谱图

采用两种展开体系进行检测，梯度点样1μg、5μg、10μg、15μg、20μg，薄层板为GF254硅胶板。显色方法：碘熏和紫外灯检测(254nm)。

展开剂I薄层彩色图图(碘熏)，条件：二氯甲烷:甲醇＝20:1，R

2.2展开剂II薄层色谱图

展开剂II薄层彩色图谱(碘熏)，条件：乙酸乙酯:无水乙醇＝20:1，R

3.高效液相色谱-质谱法进行纯度分析

分析条件：色谱柱：Waters Symmetry C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱；流动相：乙腈：0.1％氨水＝64：36(v/v)；流速：1.0mL/min；柱温：25℃；运行时间：30min。

质谱条件：采集模式为正/负离子检测模式，ESI离子源，质荷数(m/z)扫描范围为50～1500，其中干燥气体积流量为8L/min，干燥气温度为200℃，其中正离子模式下毛细管电压为3500V；负离子模式下毛细管电压为3000V。

结果：样品在正离子模式下的总离子流图中未发现明显杂质峰存在，但在负离子模式下没有响应，见图11。

4.热重分析

温度在30～185.0℃范围内，TG曲线平稳，表明测试样品中基本不含有吸附水和易挥发物质，热稳定性好。当温度增加超过185.0℃时，样品开始分解，见图12。

5.水分含量分析

依据GB606-2003《化学试剂水分测定通用方法卡尔·费休法》，使用卡尔·费休法测定水分含量，采用高精度电子天平测量，进样量为15mg，水分测量结果见表2。经过测定，水分含量平均值为0.4182％，标准偏差为0.034％。

表2水分测量结果

6.灰分含量测定

采用热重分析仪对标准样品的灰分进行测定，升温速率：40℃/min，设定温度：从25℃升至800℃，保持时间60min。称取10mg样品于三氧化二铝坩埚内，装入TGA仪器样品皿中，开始试验。灰分测量结果见表3。经过测定，莲碱灰分的平均含量为0.22％，标准偏差为0.028％。

表3灰分测量结果

实施例5

结构确证

可以理解的是，本发明系统和方法还包括多种检测分析方法对莲碱纯品的结构和杂质进行多重交叉检测验证

仪器：WRS-1B数字熔点仪，上海仪电物理光学仪器有限公司；UV-2550型紫外可见分光光度计，日本岛津公司；布鲁克核磁共振波谱仪(400MHz)，德国布鲁克公司；布鲁克impact II四极杆飞行时间高分辨质谱仪，德国布鲁克公司；vario EL全自动元素分析仪III，德国ELEMENTAR公司；Vertex 70红外光谱仪，德国布鲁克公司；

方法：根据标准方法，分别用熔点、元素分析、比旋光度、紫外可见光谱、红外广谱、高分辨质谱、核磁共振等方式验证分离提取的物质结构。

1.熔点测定

T熔点为100.5±0.5℃，与文献报道数据一致。

2.元素分析

根据YJT017-1996元素分析仪方法通则进行测试。

元素分析测定值：C 77.59％，H 6.09％，N 4.95％；元素分析计算值：C 77.40％，H6.13％，N5.01％，C元素的绝对误差值为0.19％，H元素的绝对误差值为0.04％，N元素的绝对误差为0.06％。

3.比旋光度分析

取样品适量，精密称定，用氯仿溶解，定容至0.55g/100mL，在25℃时测定，根据公式[α]tλ＝100α/l×c计算得到比旋光度值[α]25D＝–65.8°，与文献报道一致。

4.紫外可见光谱法分析

本品除末端吸收外，在270nm和315nm有特征紫外吸收，符合莲碱的紫外吸收光谱，见图13。

5.红外光谱法分析

采用溴化钾(KBr)压片法对样品的红外光谱进行测定。IR(cm

6.高分辨质谱分析

高分辨质谱图显示实测值是m/z＝280.1337[M+H]

7.核磁共振波谱分析

T莲碱样品溶于CDCl

结构确证结论：提取出的莲碱纯品为白色粉末，IR(KBr)：3003～2732(ν

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综合

T表4莲碱核磁共振氢谱、碳谱归属数据

上面结合附图对本发明的实施例进行了描述，但是本发明并不局限于上述的具体实施方式，上述的具体实施方式仅仅是示意性的，而不是限制性的，本领域的普通技术人员在本发明的启示下，在不脱离本发明宗旨和权利要求所保护的范围情况下，还可做出很多形式，这些均属于本发明的保护之内。