匹杉琼在制备卵巢癌治疗药物中的应用

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体地说，是匹杉琼在制备卵巢癌治疗药物中的应用。

背景技术

卵巢癌是一种常见的女性生殖系统恶性肿瘤，近年来，卵巢癌的发病率和死亡率呈上升趋势。由于卵巢癌常在早期没有明显症状，导致诊断的时候大部分患者已为晚期，治疗难度较大。目前，对卵巢癌的治疗主要是采用手术加化疗的综合治疗方法，随着外科手术技术的不断进步及化疗药物的不断更新，卵巢癌患者的生存率也得到了显著的提高。其中，基于铂类的联合化疗为目前卵巢癌的一线化疗方案，尽管铂类化疗对卵巢癌具有很好的疗效，但对铂类耐药或治疗后复发等问题严重影响卵巢癌患者的生存率，使得中晚期卵巢癌患者5年生存率不到30％。因此，研发治疗卵巢癌的新药刻不容缓。

匹杉琼(Pixantrone)，其分子式为C

发明内容

本发明的目的在于提供匹杉琼作为治疗卵巢癌药物的应用，既发掘了匹杉琼的新用途，又为卵巢癌的治疗提供了新的药物。

本发明的第一方面，提供匹杉琼在制备卵巢癌治疗药物中的应用。

本发明的第二方面，提供匹杉琼在制备抑制卵巢癌细胞活力的药物中的应用。

进一步地，所述的卵巢癌细胞为A2780细胞和SKOV3细胞。

本发明经研究发现，匹杉琼可明显抑制不同来源卵巢癌细胞的活力，并且可以抑制卵巢癌细胞的增殖，诱导卵巢癌细胞凋亡；证明匹杉琼具有很好的抗卵巢癌效果，有望开发成全新高效治疗卵巢癌的药物。

本发明的第三方面，提供一种抗卵巢癌的药物组合物，所述的药物组合物以匹杉琼作为主要活性成分。

进一步地，所述的药物组合物中还包括其他具有治疗效果或增强治疗效果、降低毒副作用、延长代谢时间的有效成分。

进一步地，所述的药物组合物中还可以包括其他具有治疗卵巢癌的有效成分，如顺铂、紫杉醇、PARP抑制剂等。

进一步地，所述的药物组合物中还包括药学上可接受的载体和/或辅料。

进一步地，所述的药学组合物上可接受的辅料包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、香味剂和甜味剂中的一种或两种以上。

进一步地，所述的药物组合物的剂型为片剂，粉剂，颗粒剂，胶囊剂，口服液或注射剂等多种形式，上述各剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。

本发明优点在于：

本发明经研究发现，本发明首次研究发现，匹杉琼可显著抑制卵巢癌耐药细胞株SKOV3和非耐药细胞株A2780的活力和增殖；并且可以诱导卵巢癌细胞凋亡。本发明的实验证据表明，匹杉琼具有很好的抗卵巢癌效果，有望开发成全新高效治疗卵巢癌的药物，一方面发掘了匹杉琼的新用途，另一方面又为卵巢癌的治疗提供了新的药物。

附图说明

图1.匹杉琼对卵巢癌细胞A2780和SKOV3活力的抑制作用；

图2.匹杉琼对卵巢癌细胞A2780和SKOV3增殖能力的抑制作用；

图3.匹杉琼诱导卵巢癌细胞A2780和SKOV3凋亡的作用。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明提供的具体实施方式作详细说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。下述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，下述实施中所用的实验材料，如无特殊说明，均为可通过常规的商业途径购买得到。

实施例1：匹杉琼对卵巢癌细胞活力的抑制作用

将对数生长期的卵巢癌细胞A2780和SKOV3接种于96孔板中，每孔5000个细胞，200μL RPMI-1640培养基。分别设药物处理组、对照组和空白组。其中，药物处理组为含有不同浓度匹杉琼的组别，对照组只含细胞不加药物，空白组不含细胞只含培养基。药物处理组用药物处理细胞24h和48h，处理结束前4h，每孔加入20μL CCK8溶液并继续培养4h。然后用多功能酶标仪在波长450nm处读取吸光度值，并通过吸光度值根据以下公式计算细胞活力：

细胞活力＝(药物处理组OD值-空白组OD值)/(对照组OD值-空白组OD值)×100％。其中，细胞活力半抑制溶度(IC50)用Graphpad软件计算。

结果表明匹杉琼可抑制卵巢癌细胞的活力(图1)。

实施例2：匹杉琼对卵巢癌细胞增殖能力的抑制作用

将对数生长期的卵巢癌细胞A2780和SKOV3接种于六孔板中，每孔500个细胞，200μL培养基。待细胞完全贴壁后用不同浓度的匹杉琼处理细胞9天。过程中每3天更换一次培养基。处理完成后弃去培养基，用PBS清洗2次，并用冰浴甲醇固定5min和结晶紫染色。

结果显示匹杉琼可抑制卵巢癌细胞的增殖能力(图2)。

实施例3：匹杉琼对卵巢癌细胞凋亡的诱导作用

用不同浓度的匹杉琼处理对数生长期的卵巢癌细胞A2780和SKOV3 48h后，用不含EDTA的胰蛋白酶消化2min至单个细胞，消化后2000rpm离心5min，PBS洗涤2次。然后往细胞中加入凋亡检测试剂盒工作液(500μL binding buffer，5μL Annexin V-FITC染料和5μLPI染料)，打散混匀后置于暗处反应15min。用流式细胞仪检测细胞凋亡比例。其中，AnnexinV-FITC单阳性和Annexin V-FITC/PI双阳性的细胞计为凋亡细胞。

结果表明匹杉琼可诱导卵巢癌细胞凋亡(图3)。

以上已对本发明创造的较佳实施例进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明创造精神的前提下还可做出种种的等同的变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。