用于黑色素聚合及发色变黑的多肽、方法及组合物

技术领域

本发明涉及一种用于哺乳动物中黑色素聚合及发色变黑的多肽，及其方法与组合物。

背景技术

黑色素是天然色素，可能存在于皮肤、眼睛、头发、羽毛以及鳞片中，这些地方都是黑色素负责着色。

黑色素的特征为不规则的聚合物结构，且黑色素有两大类，包含呈现棕黑色的真黑色素(eumelanin)，以及呈现红黄色的褐黑素(pheomelanin)，根据这两种色素的相对含量而决定发色。

因为黑色素为一种较小成分分子的聚集体，所以黑色素聚集体/聚合的程度及分布也会影响发色。

发明内容

在本发明中意外地发现一种与黑色素有效地相互作用的多肽，进而刺激黑色素的聚合，其中该多肽含有一7个氨基酸的模体(CRRWQWR)(SEQ ID NO:1)。

发现一种具有这种模体的多肽能够刺激黑色素聚合。于一些具体实施例中，本发明的用于刺激黑色素聚合的多肽是选自由SEQ ID NOs:4-14所组成的群组。

因此，于一方面，本发明提供一种用于增加黑色素聚合的分离的多肽。该分离的多肽含有一如SEQ ID NO:1所示的7个氨基酸的模体。于一些具体实施例中，该用于增加黑色素聚合的分离的多肽是选自由SEQ ID NOs:4-14所组成的群组。

于另一方面，本发明提供一种用于在一哺乳动物个体中使发色变黑的分离的多肽。该分离的多肽含有一如SEQ ID NO:1所示的7个氨基酸的模体。于一些具体实施例中，该用于使发色变黑的分离的多肽是选自由SEQ ID NOs:4-14所组成的群组。

于另一方面，本发明提供一种用于在一哺乳动物个体中使发色变黑的组合物。该组合物包含一有效量的分离的多肽，该分离的多肽包含一如SEQ ID NO:1所示的7个氨基酸的模体。根据本发明的某些具体实施例，该组合物可进一步包含一可接受的载体，并可被配制为一局部制剂。于一些具体实施例中，该分离的多肽是选自由SEQ ID NOs:4-14及其组合所组成的群组。

根据本发明，该局部制剂可包含一软膏、一气雾剂、一乳液、一乳霜、一凝胶、一滴剂、一喷雾剂、一液体、一贴剂、一洗发精或一润发乳。于一较佳具体实施例中，将该组合物配制为一洗发精或一润发乳。

于另一方面，本发明提供一种在一有需要的个体中使发色变黑的方法，该方法包含以一有效刺激该个体中黑色素聚合的量对该个体施用本发明的组合物。于本发明的较佳具体实施例中，该方法用于使该哺乳动物个体，较佳为一人类个体的发色变黑。于本发明的较佳具体实施例中，将该组合物局部施用于该个体。

应当理解的是，以上的一般描述与以下的详细描述皆仅为示例性与说明性的，并不限制本发明。

附图说明

当结合附图阅读时，将更佳地理解上述发明内容与以下对本发明的详细描述。为了说明本发明，于附图中显示目前较佳的具体实施例。

于图式中：

图1所示为于96孔盘中以50μM多肽处理0.025mg/ml黑色素24小时，然后于一光学显微镜下摄影的结果；

图2所示为黑色素的聚合；以50μM多肽处理0.025mg/ml黑色素24小时；数据表示为来自三个独立实验的平均值±SD；***p<0.001。

具体实施方式

除非本文另有定义，否则本文所使用的科学及技术术语具有本领域普通技术人员通常理解的含义。

如本文所用，单数形式的「一」、「一个」以及「该」包括复数指示物，除非上下文另外明确指出。因此，例如，提及「一样品」包括本领域技术人员已知的多个这样的样品及其等同物。

如本文所用，「发色变黑」或「使头发颜色变黑」等词是指使头发的外观变黑，包括，但不限于，使自然发色变黑或使由于老化(如，灰发或白发)或外部侵害(如，过度暴露于阳光或氯气中)而掉色的头发恢复原状。

「多肽」乙词在本文中以其常规含义使用，即其中单体为氨基酸且通过酰胺键连接在一起的聚合物，或称为多聚肽。当氨基酸为α-氨基酸时，可使用L-光学异构体或D-光学异构体。另外，也意指包括非天然氨基酸，例如β-丙氨酸、苯甘氨酸以及高精氨酸。本文中使用氨基酸的标准缩写。

如本文所用，「用于刺激黑色素聚合的多肽」或「用于使发色变黑的多肽」等词是指长度为7个或更多个氨基酸残基的具有实质性黑色素聚合活性的多肽。较佳地，在刺激黑色素聚合的多肽中包括至多约50个氨基酸残基或40个，或30个，或25个，或20个，或15个，或10个，或6个氨基酸的多肽。

如本文所用，「个体」乙词可为被分类为哺乳动物的任何动物，包括人类。

如本文所用，「载体」乙词是指通常用于药物或化妆品组合物制剂的材料，其用于增强稳定性、无菌性及递送性。当多肽递送系统配制为溶液或悬浮液时，该递送系统在一可接受的载体中，较佳在一水性载体中。可使用多种水性载体，例如水、缓冲液、0.8％盐水、0.3％甘氨酸、玻尿酸及其类似物。该组合物可包含近似生理条件所需的生理可接受的辅助物质，例如pH调节剂与缓冲剂、张力调节剂、润湿剂及其类似物，例如，醋酸钠、乳酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙、脱水山梨糖醇单月桂酸酯、油酸三乙醇胺等。

如本文所用，「局部」或「局部地」等词在其常规意义上是指可在身体的任何部分的中或的上的位点，包括但不限于表皮，任何其他真皮或任何其他身体组织。局部给药或施用是指将该多肽与含有黑色素产生细胞的组织如皮肤或膜直接接触。

于一些具体实施例中，本发明提供一种分离的多肽，其与黑色素有效相互作用，进而刺激黑色素的聚合，其中该多肽包含一7个氨基酸的模体(CRRWQWR)(SEQ ID NO:1)。较佳地，本发明的用于刺激黑色素聚合的多肽是选自由SEQ ID NOs:4-14及其组合所组成的群组。

于一些具体实施例中，本发明提供一种用于在一哺乳动物个体中使发色变黑的分离的多肽。该分离的多肽含有一如SEQ ID NO:1所示的7个氨基酸的模体。于一些具体实施例中，该用于使发色变黑的分离的多肽是选自由SEQ ID NOs:4-14及其组合所组成的群组。

于一些具体实施例中，本发明提供一种用于在一哺乳动物个体中使发色变黑的组合物。该组合物包含一有效量的分离的多肽，该分离的多肽包含一如SEQ ID NO:1所示的7个氨基酸的模体。根据本发明的某些具体实施例，该组合物可进一步包含一可接受的载体，且可被配制为一局部制剂。于一些具体实施例中，该分离的多肽是选自由SEQ ID NOs:4-14及其组合所组成的群组。

于一些具体实施例中，该局部制剂可包含一软膏、一气雾剂、一乳液、一乳霜、一凝胶、一滴剂、一喷雾剂、一液体、一贴剂、一洗发精或一润发乳。于一较佳具体实施例中，将该组合物配制为一洗发精或一润发乳。

于一些具体实施例中，本发明提供一种在一有此需要的个体中使发色变黑的方法，该方法包含以一有效刺激该个体中黑色素聚合的量对该个体施用本发明的组合物。于本发明的较佳具体实施例中，该方法用于使该哺乳动物个体，例如一人类个体的发色变黑。于本发明的较佳具体实施例中，将该组合物局部施用于该个体。

本发明提供该含有一如SEQ ID NO:1所示的7个氨基酸模体的分离的多肽作为一用于各种用途的活性成分的用途。于一较佳的具体实施例中，将本发明的分离的多肽与一可接受的载体组合以形成可被放置于皮肤上的一局部制剂。局部制剂可包含一软膏、乳液、糊剂、乳霜、凝胶、滴剂、栓剂、喷雾剂、液体、洗发精、润发乳、粉剂，以及穿皮贴剂。可根据需要使用增稠剂、稀释剂、乳化剂、分散助剂，或黏合剂。较佳地，该载体的一功能为增强本发明的多肽的皮肤渗透，并应能在体内条件下将该多肽递送至黑色素细胞。合适的载体为本领域普通技术人员所习知的，包括但不限于水、二甲亚砜、乙醇、脂质体、液体凡士林、凡士林二甲基甲酰胺、2-吡咯烷酮、油酸，以及

通过以下实施例进一步说明本发明，提供这些实施例是为说明而非限制。

实施例

1.样品制备

所有多肽(表1)皆由基龙米克斯生物科技股份有限公司(Genomics Bioscience&Technology Co.Ltd.，台湾，台北)合成，并通过高效液相色层分析(high performanceliquid chromatography，HPLC)与质谱仪确定这些多肽的纯度与组成。通过将10mg冻干的多肽粉溶解在1ml的双去离子水(ddH

表1.合成多肽库

2.黑色素的聚合作用

将0.025mg/ml黑色素以50μM多肽处理24小时，然后以10,000g离心5分钟。将上清液从试管中去除，仅留下黑色素沉淀物。于1M NaOH中煮沸1小时后，定量黑色素的聚合作用，并于400nm处以分光亮度计测量吸亮度。

结果

如表1所示，以含有CRRWQWR(SEQ ID NO:1)模体的50μM多肽处理的黑色素显现出明显的黑色素聚合。然而，SEQ ID NOs:2、3及15未显现出对黑色素聚合的作用(图1与图2)。

本领域技术人员将理解，可在不脱离本发明的广泛发明构思的情况下对上述具体实施例进行改变。因此，应当理解的是，本发明不限于所公开的特定具体实施例，而是目的在于涵盖由所附权利要求所限定的本发明的精神及范围内的修改。

序列表

<110> 肌活丽学创研所股份有限公司

黃, 琇琴

林, 炫

<120> 用于黑色素聚合及发色变黑的多肽、方法及组合物

<130> 0766/REN0003CN

<160> 15

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 7

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Peptide

<400> 1

Cys Arg Arg Trp Gln Trp Arg

1 5

<210> 2

<211> 13

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Peptide

<400> 2

Ala Pro Arg Lys Asn Val Arg Trp Cys Thr Ile Ser Gln

1 5 10

<210> 3

<211> 13

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Peptide

<400> 3

Cys Thr Ile Ser Gln Pro Glu Trp Phe Lys Cys Arg Arg

1 5 10

<210> 4

<211> 8

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Peptide

<400> 4

Phe Lys Cys Arg Arg Trp Gln Trp

1 5

<210> 5

<211> 9

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Peptide

<400> 5

Phe Lys Cys Arg Arg Trp Gln Trp Arg

1 5

<210> 6

<211> 11

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Peptide

<400> 6

Phe Lys Cys Arg Arg Trp Gln Trp Arg Met Lys

1 5 10

<210> 7

<211> 13

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Peptide

<400> 7

Phe Lys Cys Arg Arg Trp Gln Trp Arg Met Lys Lys Leu

1 5 10

<210> 8

<211> 18

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Peptide

<400> 8

Phe Lys Cys Arg Arg Trp Gln Trp Arg Met Lys Lys Leu Gly Ala Pro

1 5 10 15

Ser Ile

<210> 9

<211> 25

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Peptide

<400> 9

Phe Lys Cys Arg Arg Trp Gln Trp Arg Met Lys Lys Leu Gly Ala Pro

1 5 10 15

Ser Ile Thr Cys Val Arg Arg Ala Phe

20 25

<210> 10

<211> 11

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Peptide

<400> 10

Lys Cys Arg Arg Trp Gln Trp Arg Met Lys Lys

1 5 10

<210> 11

<211> 12

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Peptide

<400> 11

Lys Cys Arg Arg Trp Gln Trp Arg Met Lys Lys Leu

1 5 10

<210> 12

<211> 7

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Peptide

<400> 12

Cys Arg Arg Trp Gln Trp Arg

1 5

<210> 13

<211> 11

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Peptide

<400> 13

Cys Arg Arg Trp Gln Trp Arg Met Lys Lys Leu

1 5 10

<210> 14

<211> 10

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Peptide

<400> 14

Arg Arg Trp Gln Trp Arg Met Lys Lys Leu

1 5 10

<210> 15

<211> 10

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Peptide

<400> 15

Arg Met Lys Lys Leu Gly Ala Pro Ser Ile

1 5 10