一种氨基酸分析仪及氨基酸分析方法

技术领域

本发明属于氨基酸分析技术领域，具体涉及一种氨基酸分析仪及氨基酸分析方法。

背景技术

氨基酸分析是指定性定量分析营养物质或其它物质中水解和/或氨基酸的种类及含量。众所周知，氨基酸是构成营养物质-蛋白质的基本单元，是生命活动的重要元素。不同于其它物质，蛋白质水解后得到的是不同氨基酸的混合物，而氨基酸的特点是种类多且分子结构相近，其分离相对困难。因此在合理的时间内完成混和氨基酸的分离具有重要的现实意义。

氨基酸分析的国际标准和国家仲裁方法为：阳离子交换分离结合茚三酮柱后衍生和可见光检测。衍生法的要求是由于所有的氨基酸在可见光波长范围内都没有吸收，无法被检测，因此需要将氨基酸与衍生试剂反应后产生相对应的衍生物，而这些衍生物在波长570nm或440nm有最大吸光度值，可得到最佳出峰效果，得以定性定量分析。氨基酸分析的技术难点在于和氨基酸的分离过程及衍生过程。由于氨基酸样品具有种类多，结构相似的特点，因此难以分离，要达到基线或近基线分离的目的，需要通过延长分离柱(洗脱路径)的长度、降低洗脱液的流速等手段加以实现，通常18种水解氨基酸的分析时间通常需要45-60分钟，43种游离氨基酸的分析时间更是长达120-150分钟。这对于样品较多的使用者而言，时间成本偏高，分析效率偏低。

发明内容

为了克服上述缺陷，本发明提供了一种氨基酸分析仪及氨基酸分析方法。提高氨基酸分析的效率。

为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明提供一种氨基酸分析仪，所述氨基酸分析仪属于离子交换色谱仪；包括流动相单元、自动进样器和主机单元；

流动相单元包括六个第一试剂瓶，第二试剂瓶、第三试剂瓶和第四试剂瓶；

主机单元包括依次连接的在线脱气单元、流量泵、压力缓冲单元、阳离子交换柱、柱温控制单元、反应器和检测器；

第一试剂瓶连接第一液体分配阀的进液管，所述第一液体分配阀的出液管连接在线脱气单元，所述在线脱气单元连接流量泵，所述流量泵连接压力缓冲单元，所述压力缓冲单元连接自动进样器，所述自动进样器连接阳离子交换柱；所述阳离子交换柱外设有柱温控制单元；所述阳离子交换柱连接反应器；

第二试剂瓶和第三试剂瓶连接第二液体分配阀的进液管，第二液体分配阀的出液管连接在线脱气单元，所述在线脱气单元连接流量泵，所述流量泵连接压力缓冲单元，所述压力缓冲单元连接所述反应器；所述反应器连接检测器；

第四试剂瓶通过管道连接所述自动进样器单元；

六个所述第一试剂瓶、第二试剂瓶和第三试剂瓶的瓶口还连有惰性气体气源。

基于上述结构的氨基酸分析仪具有缓冲溶液、衍生试剂(或反应器清洗液)的双液路设计，通过在线脱气单元脱除液体中的空气。通过压力缓冲单元维持液路压力的稳定，防止检测基线的波动，以保证实现较高的泵速。

本发明的第二方面提供了氨基酸分析方法，通过离子交换色谱法进行分析；采用阳离子交换柱及茚三酮柱后衍生；采用缓冲溶液梯度洗脱；水解氨基酸采用的缓冲溶液为钠盐试剂，游离氨基酸采用的缓冲溶液为锂盐试剂。

作为优选的方案，水解氨基酸采用钠盐试剂梯度洗脱，钠盐试剂的配方包括：质量浓度10％的聚氧乙烯十二烷基醚3～8mL/L；钠盐试剂依次为：钠盐试剂A的钠离子的摩尔浓度为0.08～0.10mol/L，乙醇的质量浓度为3％～6％，pH值为3.3～3.4；钠盐试剂B的钠离子的摩尔浓度为0.15～0.25mol/L；pH值为3.2～3.4；钠盐试剂C的钠离子的摩尔浓度为0.25～0.35mol/L；pH值为3.8～4.2；钠盐试剂D的钠离子的摩尔浓度为0.25～0.35mol/L；pH值为10.0～11.0；钠盐试剂F的钠离子的摩尔浓度为0.15～0.25mol/L；

游离氨基酸采用锂盐试剂梯度洗脱，锂盐试剂依次为：锂盐试剂A的锂离子浓度为0.15～0.18mol/L，乙醇的质量浓度2.0％～3.5％，pH值为2.8～2.9；锂盐试剂B的锂离子浓度为0.15～0.18mol/L，乙醇的质量浓度1.5％～2.2％，pH值为3.2～3.5；锂盐试剂C的锂离子浓度为0.15～0.18mol/L，pH值为4.3～4.5；锂盐试剂D的锂离子浓度为0.30～0.40mol/L，pH值为7.0～8.0；锂盐试剂E的锂离子浓度为0.30～0.40mol/L，pH值为10.0～10.5；锂盐试剂F的锂离子浓度为0.20～0.30mol/L。

在一优选实施例中，缓冲溶液洗脱时的温度为：钠盐试剂A为55～60℃；钠盐试剂B为50～55℃；钠盐试剂C为60～65℃；钠盐试剂D为70～75℃；钠盐试剂F为70～75℃；

锂盐试剂A为30～35℃；锂盐试剂B为35～40℃；锂盐试剂C为35～40℃；锂盐试剂D为50～55℃；锂盐试剂E为70～75℃；锂盐试剂F为75～80℃。

在一优选实施例中，钠盐试剂中的钠离子由三水合乙酸钠、EDTA.2Na、氢氧化钠提供；所述锂盐试剂中的锂离子由氢氧化锂、无水四硼酸二锂提供。

在一优选实施例中，调节溶液pH值的酸为甲酸、乙酸、辛酸、盐酸、三氟乙酸、磷酸。

在一优选实施例中，所述阳离子交换柱的柱管采用不锈钢材质，柱管内的填充树脂粒径为3～5微米。

在一优选实施例中，所述阳离子交换柱的柱管长度为70～80mm。

本发明专利公开一种氨基酸分析仪及氨基酸分析方法；通过离子交换色谱法进行分析；采用阳离子交换柱及茚三酮柱后衍生；采用缓冲溶液梯度洗脱；水解氨基酸采用的缓冲溶液为钠盐试剂，游离氨基酸采用的缓冲溶液为锂盐试剂。还通过设计分离柱的构成与填装、树脂粒径，使氨基酸分析具有更高的分离度；整个装置通过计算机程序控制，可以达到快速分析的效果，18种氨基酸的分析时间能够实现30分钟以内分离；种类多达42种游离氨基酸也可在60分钟内完成分离。

与现有技术相比，本发明的优点和有益效果是：本发明提供的氨基酸分析仪是一种专业的氨基酸分析装置，提供了温度、离子浓度、pH值三个梯度的洗脱环境；根据不同色谱分离条件，系统一般在处于20～120bar的高压环境，本发明提供的结构能够实现稳定的压力控制，也是系统的基本要求；本发明配备了在线脱气单元。衍生单元需要控制的参数有流路压力、流速及反应温度，目的是确保在最短的时间内，完成衍生反应。综上，氨基酸分析的过程是一个较为复杂的系统过程，需要多个功能单元的相互配合及合理的流程布局，以降低流路的阻力和长度，减少系统的死体积，提高检测精度，缩短氨基酸达到洗脱(分离)的时间。目的是确保在最短的时间内，完成衍生反应。

附图说明

图1为本发明的衍生化反应原理图；

图2为设备结构示意图；

图中标号：10、流动相单元；20、自动进样器；30、主机单元；11、第一试剂瓶；12、第二试剂瓶；13、第三试剂瓶；14、第四试剂瓶；15、第一液体分配阀；16、第二液体分配阀；31、在线脱气单元；32、真空泵；33、流量泵；34、压力缓冲单元；35、阳离子交换柱；36、柱温控制单元；37、反应器；38、检测器；39、计算机控制单元；40、气源。

图3是本发明的氨基酸分析方法测得的钠盐体系下的水解氨基酸分析谱图。

图4是现有技术中的水解氨基酸分析谱图。

图5是本发明的氨基酸分析方法测得的锂盐体系下的游离氨基酸分析谱图。

图6是现有技术中的游离氨基酸分析谱图。

具体实施方式

为了使本技术领域的人员更好地理解本申请中的技术方案，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1：氨基酸分析仪的结构

本实施例提供氨基酸分析仪的结构如图2所示：包括流动相单元10、自动进样器20和主机单元30；

流动相单元10包括试剂瓶，试剂瓶包括六个用于装不同的缓冲溶液的第一试剂瓶11；装反应器清洗液的第二试剂瓶12、装衍生试剂的第三试剂瓶13和装反应清洗液的第四试剂瓶14。

六个第一试剂瓶11连接第一液体分配阀15的进液管，第一液体分配阀15的出液管连接主机单元30；第二试剂瓶12和第三试剂瓶13连接第二液体分配阀16的进液管，第二液体分配阀16的出液管连接主机单元30；第一试剂瓶11、第二试剂瓶12和第三试剂瓶13的瓶口还连有惰性气体气源40；

第一液体分配阀15和第二液体分配阀16上连接主机单元30；第一液体分配阀15有六组阀体，分别控制六个第一试剂瓶11内液体的输入与停止，某一进液阀组开启时，其它阀组则处于关闭状态，因此，任意时刻只有一个阀组处于开启状态，即只有一个第一试剂瓶11中的缓冲溶液可以在管路中流动。

在上述实施例中，六个第一试剂瓶11用于装缓冲溶液，第一液体分配阀15采用第一六路一通液体分配阀，构成部分缓冲溶液的流路。第二试剂瓶12和第三试剂瓶13分别装反应器清洗液或衍生试剂，第一试剂瓶11、第二试剂瓶12和第三试剂瓶13均通过接入惰性气体保护，惰性气体由惰性气体气源40通过一进八出分配接头提供。

第四试剂瓶14通过管道接入自动进样器20，用于清洗自动进样器20的流路；自动进样器20内置样品瓶，并连接主机单元30，能够实现将样品溶液的进样。

主机单元30包括两组依次连接的在线脱气单元31、流量泵33和压力缓冲单元34，其中一个在线脱气单元31的进口连接第一液体分配阀15，出口处连接流量泵33和一个压力缓冲单元34，压力缓冲单元34连接上述自动进样器20的进口；构成完整的缓冲溶液流路。自动进样器20连接阳离子交换柱35，通过自动进样器20能够实现缓冲溶液和样品溶液向阳离子交换柱35的进样。阳离子交换柱35出口连接反应器37。阳离子交换柱35外还设有柱温控制单元36。另一个在线脱气单元31的进口连接第二液体分配阀16，出口处连接流量泵33和另一个压力缓冲单元34，该压力缓冲单元34连接反应器37；构成完整的衍生试剂(或反应器清洗液)流路。在进行氨基酸分析时将衍生试剂泵入反应器37；当反应结束后，将反应器清洗液泵入反应器37对反应管路进行清洗。反应器37的一侧连接检测器38，用于吸收、检测样品给出的光学信号并转换为电信号。

在一优选实施例中，在线脱气单元31连接真空泵32。流量泵33采用双柱塞往复泵，有2个液体通道，分别连接两个在线脱气单元31；结合第一液体分配阀15和第二液体分配阀16输送缓冲溶液和衍生试剂(或反应器清洗液)。在线脱气单元31用于脱除气体，这是因为水相溶液能够溶解气体，进而导致泵压不稳定和检测基线的波动影响结果的判定，因此在一优选实施例中，通过在线脱气单元31脱除气体。具体结构包括脱气盒，脱气盒内有半透膜管路，半透膜管路的材质采用聚四氟乙烯半透膜材料，脱气盒连有真空泵32。真空泵32提供真空动力，在脱气盒内形成一个真空环境，将脱气盒内的空气排出。液体在脱气盒内的半透膜管路经过，半透膜管路具有阻挡液体、通过气体的功能，因此当含有气体的液体流经脱气盒内的真空环境时，受内外压差的作用，液体中的气体被排出管路。更优的，真空泵32是由独立的真空泵32板控制，通过第一传感器连接脱气盒内，当脱气盒内部的真空度低于设定值时，启动真空泵32；当脱气盒内的真空度达到设定标准时，真空泵32停止。

在一优选实施例中，上述缓冲单元为缓冲盘管通过附属支架固定，缓冲盘管材料为304或316不锈钢，经过特殊淬火工艺处理。缓冲盘管形状经过特殊的编织工艺，可以有效的缓冲泵的脉冲引起的压力的波动，可以获得平稳的基线。柱温控制单元36：采用铝合金传热部件，半导体加热/制冷，液体流经柱温控制单元36可实现贴合式即时传热，具有升降温速度快的特点。可实现温度梯度变温功能。

上述结构中，反应器37是衍生试剂茚三酮和样品氨基酸进行反应的场所，采用电子加热技术，升/降温速度快，温度控制稳定；反应器37内的管路由PEEK管通过特殊缠绕方式形成合理的流路。

主机单元30还设有两个压力传感器，可以设置在两个压力缓冲单元34处，分别监控两个流路中液体的压力，并可将压力信号转换为电信号，由控制软件通过主板进行控制，实现系统压力的监测、传递、反馈、控制功能。

在一优选实施例中，主机单元30还包括计算机控制单元39、数据采集及处理单元。数据采集及处理单元包括两个检测器38通过光学器件，吸收、检测样品给出的光学信号并转换为电信号，被数据采集软件采集后，经过计算获得相应的保留时间、峰面积等信息。计算机控制单元39还可以可以对泵、阀、柱温控制单元36、反应器37、进样器、压力传感等功能单元的参数进设定和读取，并通过主控板对各功能单元进行控制。数据采集及处理单元：采集、处理检测器38获得的光电转换信号，经过计算获得相应的保留时间、峰面积等信息。配套的电路单元：由主控板和脱气泵控制板组成，分别对整个系统不含脱气单元和脱气单元进行控制。主控板可以控制泵的流速设定，泵包括真空泵32和流量泵33的开启/关闭；第一液体分配阀15和第二液体分配阀16的开启和关闭；柱温箱温度加热/制冷的启动和停止；反应器37的加热功能的启动和停止；自动进样器20的任务分配和控制、试剂制冷单元制冷功能的启动和停止等。

实施例2：氨基酸分析方法

本实施例提供使用实施例结构进行氨基酸分析方法，具体氨基酸分析方法为通过离子交换色谱法进行分析；采用阳离子交换柱及茚三酮柱后衍生，衍生原理如图1所示；采用缓冲溶液梯度洗脱；水解氨基酸采用的缓冲溶液为钠盐试剂，游离氨基酸采用的缓冲溶液为锂盐试剂。

1、氨基酸分离体系

(1)阳离子交换柱

阳离子交换柱由柱管和恒压方式填充的树脂组成，柱管采用不锈钢材质，可实现温度梯度分离。柱管内径采用4.6mm或4.0mm，柱管长度控制在70～80mm之间。填充树脂为聚苯乙烯磺酸盐树脂，粒径为3～5微米。恒压方式填充的初始压力为10～12Mpa；平衡压力为8～10MPa，末段压力为0MPa，三段时长分别为0.5～1小时、2～4小时和10～12小时。

(2)缓冲溶液及配制方法

预先配制好缓冲溶液储存在250mL或500mL的第一试剂瓶中，通过外置第一液体分配阀进行分配，

a)水解氨基酸

水解氨基酸采用的缓冲溶液为钠盐试剂，质量浓度10％的聚氧乙烯十二烷基醚3～8mL/L；钠盐试剂依次为：钠盐试剂A的钠离子的摩尔浓度为0.08～0.10mol/L，乙醇的质量浓度为3％～6％，pH值为3.3～3.4；钠盐试剂B的钠离子的摩尔浓度为0.15～0.25mol/L；pH值为3.2～3.4；钠盐试剂C的钠离子的摩尔浓度为0.25～0.35mol/L；pH值为3.8～4.2；钠盐试剂D的钠离子的摩尔浓度为0.25～0.35mol/L；pH值为10.0～11.0；钠盐试剂F的钠离子的摩尔浓度为0.15～0.25mol/L。以上配方范围内均可实现水解氨基酸的快速分离，分离度满足且优于国家《氨基酸分析仪计量检定规程》JJG1064-2011规定。

缓冲溶液的配制：钠盐试剂A：三水乙酸钠的用量范围可以在12.0～13.0g之间，甲酸和乙酸之和在12～18mL之间任意组合，其中甲酸在3～8mL之间，乙酸在8～12mL之间；乙醇含量采用60mL；辛酸在0.05～0.15mL之间。聚氧乙烯十二烷基醚Brij-35(10％)在3～8mL之间；全部定容1000mL后，用三氟乙酸调节pH值在3.3～3.4之间。

钠盐试剂B：三水乙酸钠的用量范围可以在25.0～30.0g之间，甲酸和乙酸之和在12～18mL之间任意组合，其中甲酸在3～8mL之间，乙酸在8～12之间；辛酸在0.05～0.15mL之间。聚氧乙烯十二烷基醚Brij-35(10％)在3～8mL之间；全部定容1000mL后，用三氟乙酸调节pH值在3.2～3.4之间。

钠盐试剂C：三水乙酸钠的用量范围可以在40.0～43.0g之间，甲酸和乙酸之和在12～18mL之间任意组合，其中甲酸在3～8mL之间，乙酸在8～12之间；辛酸在0.05～0.15mL之间。聚氧乙烯十二烷基醚Brij-35(10％)在3～8mL之间；全部定容1000mL后，用三氟乙酸调节pH值在3.8～4.2之间。

钠盐试剂D：二水合柠檬酸三钠的用量范围可以在18.0～22.0g之间，一水合柠檬酸在0.5～1.0g之间；硼酸在5.0～7.0g之间；氢氧化钠在3.0～5.0g之间；乙二胺四乙酸二钠(EDTA.2Na)在0.25～0.75g之间；辛酸在0.05～0.15mL之间。聚氧乙烯十二烷基醚Brij-35(10％)在3～8mL之间；全部定容1000mL后，用三氟乙酸调节pH值在10.0～11.0之间。

钠盐试剂F：氢氧化钠在7.5～9.5g之间；辛酸在0.05～0.15mL之间。聚氧乙烯十二烷基醚Brij-35(10％)在3～8mL之间；全部定容1000mL。

如表1提供一种水解氨基酸缓冲溶液配方。

表1：水解氨基酸缓冲溶液配方

b)游离氨基酸

游离氨基酸采用锂盐试剂梯度洗脱，锂盐试剂依次为：锂盐试剂A的锂离子浓度为0.15～0.18mol/L，乙醇的质量浓度2.0％～3.5％，pH值为2.8～2.9；锂盐试剂B的锂离子浓度为0.15～0.18mol/L，乙醇的质量浓度1.5％～2.2％，pH值为3.2～3.5；锂盐试剂C的锂离子浓度为0.15～0.18mol/L，pH值为4.3～4.5；锂盐试剂D的锂离子浓度为0.30～0.40mol/L，pH值为7.0～8.0；锂盐试剂E的锂离子浓度为0.30～0.40mol/L，pH值为10.0～10.5；锂盐试剂F的锂离子浓度为0.20～0.30mol/L。以上配方范围内均可实现游离氨基酸的快速分离，分离度满足国家《氨基酸分析仪计量检定规程》JJG1064-2011规定。

缓冲溶液的配制：锂盐试剂A：一水氢氧化锂的用量范围可以在6.5～7.0g之间，甲酸和乙酸之和在12～18mL之间任意组合，其中甲酸在3～8mL之间，乙酸在8～12之间；乙醇采用30mL；辛酸在0.05～0.15mL之间。全部定容1000mL后，用6M盐酸调节pH值在2.8～2.9之间。

锂盐试剂B：一水氢氧化锂的用量范围可以在6.5～7.0g之间，甲酸和乙酸之和在12～18mL之间任意组合，其中甲酸在3～8mL之间，乙酸在8～12之间；乙醇含量在20mL之间；辛酸在0.05～0.15mL之间。全部定容1000mL后，用6M盐酸调节pH值在3.2～3.5之间。

锂盐试剂C：一水氢氧化锂的用量范围可以在6.5～7.0g之间，88％甲酸和乙酸之和在8.0～12.0mL之间任意组合，其中甲酸在3.0～8.0mL之间，乙酸在3.0～8.0mL之间；辛酸在0.05～0.15mL之间。全部定容1000mL后，用6M盐酸调节pH值在4.3～4.5之间。

锂盐试剂D：一水氢氧化锂的用量范围可以在12.0～13.0g之间，无水四硼酸二锂用量在3.5～4.5g之间；88％甲酸在4.0～6.0mL之间；硼酸2.5～4.0g；乙二胺四乙酸0.2～0.3g；辛酸在0.05～0.15mL之间。全部定容1000mL后，用6M盐酸调节pH值在7.0～8.0之间。

锂盐试剂E：一水氢氧化锂的用量范围可以在12.0～13.0g之间，无水四硼酸二锂用量在3.5～4.5g之间；88％甲酸在4.0～6.0mL之间；硼酸2.5～4.0g；乙二胺四乙酸0.2～0.3g；辛酸在0.05～0.15mL之间。全部定容1000mL后，用6M盐酸调节pH值在10.0～10.5之间。

锂盐试剂F：一水氢氧化锂的用量范围可以在10.0～11.0g之间；辛酸在0.05～0.15mL之间，定容1000mL。

如表1提供一种游离氨基酸缓冲溶液配方。

表：游离氨基酸缓冲溶液配方

需要说明的，本发明中用于调节溶液pH值的酸可以是甲酸、乙酸、辛酸等有机酸。也可以是盐酸、三氟乙酸、磷酸等pH值调节能力较强的无机酸，调节pH所用的酸可以是一种酸，也可以是酸的组合。水合物为市售常品，亦可以由无水产品替代，相应含量按含水量等比例增减。

(3)温度梯度

a)水解氨基酸

缓冲溶液洗脱时的温度梯度：锂盐试剂B为35～40℃；锂盐试剂C为35～40℃；锂盐试剂D为50～55℃；锂盐试剂E为70～75℃；锂盐试剂F为75～80℃。

流速：400～500μl/min；进样时间：4～5min；

衍生清洗时间设置

衍生液：0～30min；清洗液：30～35min

b)游离体系

缓冲溶液洗脱时的温度梯度：锂盐试剂A为30～35℃；锂盐试剂B为35～40℃；锂盐试剂C为35～40℃；锂盐试剂D为50～55℃；锂盐试剂E为70～75℃；锂盐试剂F为75～80℃。

流速：300～350μL/min；进样时间：4～5min

衍生清洗时间设置

衍生液：0～60min；清洗液：60～65min。

上述氨基酸分离方法在不低于《氨基酸分析仪计量检定规程》JJ1064-2011规定的以下性能指标：色谱柱(峰高)分离度：苏氨酸Thr/丝氨酸Ser≥85％；甘氨酸Gly/丙氨酸Ala≥90％；亮氨酸Leu/异亮氨酸Ile≥80％的基础上，分析结果如下：如图3，18种水解氨基酸的洗脱时间30分钟；本发明还提供了现有技术中的18种氨基酸的分离谱图(图4)，分离时间55分钟，可以看出本发明提供的氨基酸分析方法对水解氨基酸的分离度足够高、分离时间明显缩短。如图5，42种游离氨基酸酸的洗脱仅60分钟。本发明还提供了现有技术中的42种氨基酸的分离谱图(图6)，分离时间135分钟，可以看出本发明提供的氨基酸分析方法对游离氨基酸的分离度足够高、分离时间明显缩短。需要说明的是，本发明的图4和图6显示的对比数据由专利申请号CN202221259692.8所记载的本司的另一对应型号的氨基酸分析仪提供。

综上所述，通过离子交换色谱法进行分析；采用阳离子交换柱及茚三酮柱后衍生；采用缓冲溶液梯度洗脱；水解氨基酸采用的缓冲溶液为钠盐试剂，游离氨基酸采用的缓冲溶液为锂盐试剂。本发明还设计了分离柱的树脂粒径，在上述因素的作用下，使氨基酸分析具有更高的分离度；可以达到快速分析的效果，18种氨基酸的分析时间能够实现30分钟以内分离；种类多达42种游离氨基酸也可在60分钟内完成分离。

以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。