螺环2,3-二氢-7-氮杂吲哚化合物及其用途

相关专利申请的交叉引用

本申请要求于2018年9月19日提交的国际专利申请号PCT/CN2018/106536的权益，其全部内容通过引用合并于此。

背景技术

肿瘤科医生治疗癌症的主要方式是手术切除、放疗和经典的化疗药物。遗憾的是，对于许多肿瘤或许多类型的癌症，手术切除并非可行的选择。此外，放疗和化疗药物不仅仅靶向患病的细胞，因此最终损伤健康细胞。人们正在利用抗原的肿瘤特异性表达或肿瘤细胞内特定蛋白的不适当的过表达或激活，开发更特异性地靶向肿瘤细胞的疗法，但是肿瘤细胞易于突变，并且可能对专门靶向肿瘤细胞的药物产生耐药性。

一种新型癌症治疗范例已经出现，其利用患者自身的免疫系统来克服许多癌症所用的免疫逃避策略并且增强抗肿瘤免疫力。一种此类策略是抑制免疫应答的负调节剂，这些负调节剂通常起到维持外周免疫耐受的作用，从而使肿瘤抗原被识别为非自身实体。

造血祖细胞激酶1(HPK1)是树突状细胞活化以及T细胞和B细胞应答的负调节剂，可用于增强抗肿瘤免疫力。HPK1主要由造血细胞(包括早期祖细胞)表达。在T细胞中，据信HPK1通过使Ser376处的SLP76(Di Bartolo等人(2007)JEM 204:681-691)和Thr254处的Gads发生磷酸化来降低信号传导微簇的持久性对T细胞活化进行负调控，从而募集与磷酸化SLP76和Gads结合的14-3-3蛋白，从包含LAT的微簇中释放出SLP76-Gads-14-3-3复合物(Lasserre等人(2011)J Cell Biol 195(5):839-853)。HPK1还可响应于通常由肿瘤分泌的前列腺素E2而被激活，从而促使肿瘤细胞从免疫系统中逃逸。

发明内容

本发明公开了作为HPK1抑制剂的螺环2,3-二氢-7-氮杂吲哚化合物、包含这些化合物的组合物以及用于增强免疫应答和治疗HPK1依赖性疾患诸如癌症的方法。

在一个方面，提供了式(I)化合物或该化合物的任何变体或该化合物的盐(例如，该化合物的药用盐)，如本文所详述。还提供了一种药物组合物，该药物组合物包含：式(I)化合物或本文所详述的该化合物的任何变体，或该化合物的药用盐；以及药用载体或赋形剂。

在另一方面，提供了一种用于抑制HPK1的方法，该方法包括使受试者体内的HPK1与有效量的式(I)化合物或本文所详述的该化合物的任何变体或该化合物的药用盐接触。还提供了一种用于增强有此需要的受试者的免疫应答的方法，该方法包括向受试者施用有效量的式(I)化合物或本文所详述的该化合物的任何变体或该化合物的药用盐。

进一步提供了一种用于治疗HPK1依赖性疾患的方法，该方法包括向有此需要的受试者施用有效量的式(I)化合物或本文所详述的该化合物的任何变体或该化合物的药用盐。在一些实施例中，受试者是人。在一些实施例中，HPK1依赖性疾患为癌症，例如结直肠癌、黑素瘤、非小细胞肺癌、卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌、血液学恶性肿瘤和肾细胞癌。在一些实施例中，该方法进一步包括向受试者施用化疗剂。

还提供了式(I)化合物或本文所详述的该化合物的任何变体或该化合物的药用盐，其用于抑制HPK1、增强免疫应答或治疗HPK1依赖性疾患诸如癌症的方法中。

还提供了式(I)化合物或本文所详述的该化合物的任何变体或该化合物的药用盐在本文所详述的方法(例如，治疗HPK1依赖性疾患诸如癌症)中的用途。

还提供了式(I)化合物或本文所详述的该化合物的任何变体或该化合物的药用盐在生产用于本文所详述的方法(例如，治疗HPK1依赖性疾患诸如癌症)中的药物中的用途。

还提供了一种用于治疗HPK1依赖性疾患的试剂盒，该试剂盒包含：药物组合物，该药物组合物包含式(I)化合物或本文所详述的该化合物的任何变体或该化合物的药用盐；以及使用说明书。

在另一方面，提供了一种制备式(I)化合物或其任何变体的方法。还提供了可用于合成式(I)化合物或其任何变体的化合物中间体。

具体实施方式

本文公开了式(I)化合物或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)及其药物组合物，这些药物组合物为HPK1(造血祖细胞激酶1)的抑制剂或调节剂。因此，这些化合物和组合物可用于治疗由HPK1介导的疾病和疾患。一个治疗方法的实例是针对患有癌症的受试者。这些化合物不仅可用于抗击癌症，还可有利地用于增强有此需要的受试者的免疫应答。

现在将在下文中更全面地描述本发明所公开的主题。但是，本发明所公开的主题所涉及的领域的技术人员受益于前述说明书中给出的教导内容，将想到本文所述的本发明所公开的主题的许多修改和其他实施例。因此，应当理解，本发明所公开的主题不限于所公开的具体实施例，并且修改形式和其他实施例旨在涵盖于所附权利要求书的范围内。换言之，本文所述的主题涵盖所有替换、修改和等同形式。如果并入的文献、专利和类似材料中的一项或多项与本申请有所不同或矛盾，包括但不限于定义的术语、术语用法、描述的技术等，则以本申请为准。除非另有定义，否则本文所用的所有科学技术术语具有本领域的普通技术人员通常理解的相同意义。本文提及的所有出版物、专利申请、专利及其他参考文献的全文均以引用方式并入本文。

定义

如本文所用的“烷基”是指具有指定碳原子数(即C

如本文所用的“烯基”是指具有至少一个烯属不饱和位点(即，具有式C＝C的至少一部分)并且具有指定碳原子数(即，C

如本文所用的“炔基”是指具有至少一个炔属不饱和位点(即，具有至少一个式C≡C部分)并且具有指定碳原子数(即，C

如本文所用的“亚烷基”是指与烷基相同但具有二价的残基。特定的亚烷基基团为具有1至6个碳原子(“C

如本文所用，“亚烷基”是指与烷基相同的残基，但是在连接点具有双价并且通过双键连接至母体结构。特定的亚烷基基团为具有1至6个碳原子(“C

如本文所用的“环烷基”是指具有指定碳原子数(即C

如本文所用的“芳基”是指具有单个环(例如，苯基)或多个稠环(例如，萘基或蒽基)的不饱和芳族碳环基团，这些稠环可以是或不是芳族环。特定的芳基基团为具有6至14个环状(即，环)碳原子的基团(“C

如本文所用的“杂芳基”是指具有1至14个环状(即，环)碳原子和至少一个环状杂原子(包括但不限于杂原子诸如氮、磷、氧和硫)的不饱和芳族环状基团。杂芳基基团可具有单个环(例如，吡啶基、呋喃基)或多个稠环(例如，吲哚嗪基、苯并噻吩基)，这些稠环可以是芳香环，也可以不是芳香环。特定的杂芳基基团为：具有1至12个环状(即，环)碳原子和1至6个独立地选自氮、磷、氧和硫的环状(即，环)杂原子的5元至14元环；具有1至8个环状碳原子和1至4个独立地选自氮、磷、氧和硫的环状杂原子的5元至10元环；以及具有1至5个环状碳原子和1至4个独立地选自氮、氧和硫的环状杂原子的5元、6元或7元环。在一个变体中，杂芳基包括具有1至6个环状碳原子和1至4个独立地选自氮、氧和硫的环状杂原子的单环芳族5元、6元或7元环。在另一个变体中，杂芳基包括具有1至12个环状碳原子和1至6个独立地选自氮、磷、氧和硫的环状杂原子的多环芳香环。具有多于一个环(其中至少一个环非芳香环)的杂芳基基团可在芳香环位置或非芳香环位置连接至母结构。在一个变体中，具有多于一个环(其中至少一个环非芳香环)的杂芳基基团在芳香环位置连接至母结构。

如本文所用的“杂环”、“杂环的”或“杂环基”是指具有单个环或多个稠环并且具有1至14个环状(即，环)碳原子和1至6个环状(即，环)杂原子诸如氮、磷、硫或氧等的饱和或不饱和的非芳族环状基团。包含多于一个环的杂环可为稠合、螺环或桥接基团或其任意组合。在稠环体系中，一个或多个稠环可为环烷基。特定的杂环基基团为：具有1至13个环状碳原子和1至6个独立地选自氮、磷、硫的环状杂原子的3元至14元环；具有1至11个环状碳原子和1至6个独立地选自氮、磷、硫的环状杂原子的3元至12元环；具有1至9个环状碳原子和1至4个独立地选自氮、磷、硫的环状杂原子的3元至10元环；具有1至7个环状碳原子和1至4个独立地选自氮、磷、硫的环状杂原子的3元至8元环；以及具有1至5个环状碳原子和1至4个独立地选自氮、磷、硫的环状杂原子的3元至6元环。在一个变体中，杂环基包括具有1至2个、1至3个、1至4个、1至5个或1至6个环状碳原子和1至2个、1至3个或1至4个独立地选自氮、磷、硫的环状杂原子的单环3元、4元、5元、6元或7元环。在另一个变体中，杂环基包括具有1至12个环状碳原子和1至6个独立地选自氮、磷、硫的环状杂原子的多环非芳香环。

“卤代”或“卤素”是指氟、氯、溴和/或碘。“卤代烷基”是指被一个或多个可以相同或不同的卤素取代的烷基基团。在残基被多于一个卤素取代的情况下，可通过使用与连接的卤素部分的数量相对应的前缀来指代该残基，例如，二卤代芳基、二卤代烷基、三卤代芳基等是指被两个(“二”)或三个(“三”)卤代基团取代的芳基和烷基，这些卤代基团可以是但不一定是相同的卤代基团；因此，4-氯-3-氟苯基在二卤代芳基的范围内。其中每个氢被卤代基团取代的烷基基团称为“全卤代烷基”。一种优选的全卤代烷基基团为三氟烷基(-CF

“羰基”是指基团C＝O。

“氧代”是指部分＝O。

“偕”是指连接至同一原子的两个部分之间的关系。例如，在残基-CH

“邻近”是指连接至相邻原子的两个部分之间的关系。例如，在残基-CHR

除非另外指明，否则“任选取代的”是指基团可以是未取代的或被一个或多个(例如，1个、2个、3个、4个或5个)针对该基团列出的取代基取代，其中取代基可以相同或不同。在一个实施例中，任选取代的基团具有一个取代基。在另一个实施例中，任选取代的基团具有两个取代基。在另一个实施例中，任选取代的基团具有三个取代基。在另一个实施例中，任选取代的基团具有四个取代基。在一些实施例中，任选取代的基团具有1至2个、1至3个、1至4个或1至5个取代基。

本文中使用的“抑制剂”一词意指抑制HPK1活性的分子。本文中的“抑制”是指靶酶的活性与不存在抑制剂的情况下的活性相比有所降低。在一些实施例中，术语“抑制”意指HPK1活性降低至少约5％、至少约10％、至少约20％、至少约25％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％或至少约95％。在其他实施例中，“抑制”意指HPK1活性降低约5％至约25％、约25％至约50％、约50％至约75％或约75％至100％。在一些实施例中，“抑制”意指HPK1活性降低约95％至100％，例如，活性降低95％、96％、97％、98％、99％或100％。此类降低可使用本领域的技术人员公认的各种技术来测量，包括体外激酶测定。

如本文所用，“HPK1拮抗剂”或“HPK1抑制剂”是降低、抑制或以其他方式削弱HPK1的生物学活性中的一种或多种(例如，丝氨酸/苏氨酸激酶活性、在TCR激活时募集TCR复合物、与蛋白质结合伴侣诸如SLP76相互作用)。使用HPK1拮抗剂的拮抗作用不一定表明HPK1活性被完全消除。相反，活性可降低具有统计学意义的量，包括例如HPK1的活性相比于适当的对照降低至少约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、95％或100％。在一些实施例中，HPK1拮抗剂降低、抑制或以其他方式削弱HPK1的丝氨酸/苏氨酸激酶活性。在其中一些实施例中，HPK1拮抗剂降低、抑制或以其他方式削弱HPK1介导的SLP76和/或Gads的磷酸化。本发明所公开的化合物直接与HPK1结合并且抑制其激酶活性。

“特异性拮抗剂”是指降低、抑制或以其他方式削弱确定的靶点活性的幅度大于无关靶点的试剂。例如，HPK1特异性拮抗剂降低HPK1的至少一种生物学活性的量在统计学上大于该拮抗剂对任何其他蛋白质(例如，其他丝氨酸/苏氨酸激酶)的抑制作用。在一些实施例中，拮抗剂对靶点的IC

如本文所用，“疗法”或“治疗”是用于获得有益或期望的结果(包括临床结果)的方法。出于本发明的目的，有益或期望的临床结果包括但不限于以下结果中的一种或多种：减少由疾病引起的一种或多种症状，降低疾病的程度，稳定疾病(例如，预防或延缓疾病的恶化)，预防或延缓疾病的传播(例如，转移)，延缓或减慢疾病进展，改善疾病状态，(部分或全部)缓解疾病，减少治疗疾病所需的一种或多种药物的剂量，增强其他药物的作用，延缓疾病进展，提高生活质量，和/或延长存活期。“治疗”还包括减少癌症的病理学结果。本发明的方法设想了这些治疗方面中的任何一个或多个。

如本文所用，“延缓”癌症的发展意指延迟、阻碍、减慢、减缓、稳定和/或推迟疾病的发展。这种延迟可以具有不同的时间长度，这取决于病史和/或待治疗的受试者。对于本领域技术人员显而易见的是，充分或显著延迟实际上可以涵盖预防，因为受试者不会患该病。“延迟”癌症发展的方法是与不使用该方法相比，在给定时间范围内降低疾病发展的可能性和/或在给定时间范围内减小疾病程度的方法。此类比较通常基于使用具有统计学意义的数量的受试者的临床研究。癌症发展可使用标准方法诸如常规体检、乳房X线摄影术、成像或活检进行检测。发展也可以指最初可能无法检测到的疾病进展，并且包括发生、复发和发作。

如本文所用，“有风险的”受试者是具有罹患癌症的风险的受试者。在接受本文所述的治疗方法治疗之前，“有风险的”受试者可能患有或不患有可检测的疾病，并且可能表现出或不表现出可检测的疾病。“有风险的”表示受试者具有一种或多种所谓的风险因素，这些风险因素是与癌症的发展相关的可测量参数，如本文所述。具有这些风险因素中的一种或多种的受试者罹患癌症的可能性高于不具有这些风险因素的受试者。

如本文所用，“联合治疗”意指包括两种或更多种不同化合物的疗法。因此，在一个方面，提供了包含本文所详述的化合物与另一种化合物的联合疗法。在一些变体中，联合疗法任选地包括一种或多种药用载体或赋形剂、无药学活性的化合物和/或惰性物质。

如本文所用，术语“有效量”意指本发明化合物的结合其功效和毒性参数的量，其在给定的治疗形式下应当有效。如本领域所理解的，有效量可以在一次或多次给药中，即，可能需要单次给药或多次给药才能达到所需的治疗终点。可以在施用一种或多种治疗剂的情况下考虑“有效量”，并且如果与一种或多种其他试剂结合可以获得或实现预期或有益的结果，则可以考虑给予有效量的单一药剂。由于化合物的联合效应(例如，累加或协同效应)，可任选地降低任何联合施用的化合物的合适的剂量。在各种实施例中，有效量的组合物或疗法可以(i)减少癌细胞的数量；(ii)减小肿瘤大小；(iii)在一定程度上抑制、延迟、减慢并且优选地阻止癌细胞浸润到周围器官中；(iv)抑制(例如，在一定程度上减慢并且优选地停止)肿瘤转移；(v)抑制肿瘤生长；(vi)预防或延迟肿瘤的发生和/或复发；和/或(vii)在一定程度上缓解与癌症相关联的症状中的一种或多种。在各种实施例中，施用的量足以缓解、减轻、降低和/或延迟癌症症状中的一种或多种。

如本领域所理解的，“有效量”可以在一次或多次给药中，即，可能需要单次给药或多次给药才能达到所需的治疗终点。可以在施用一种或多种治疗剂的情况下考虑“有效量”，并且如果与一种或多种其他试剂结合可以获得或实现预期或有益的结果，则可以考虑给予有效量的治疗剂和化合物或其药用盐。

“治疗有效量”是指足以产生所需的疗效的化合物或其盐的量(例如，降低癌症症状中的一种或多种的严重程度或持续时间、稳定其严重程度或将其消除)。出于治疗用途，有益或所需的结果包括例如：减少由疾病引起的一种或多种症状(生化、组织学和/或行为，包括其并发症以及疾病发展期间出现的中间病理表型)，改善罹患该疾病的患者的生活质量，减小治疗该疾病所需的其他药物的剂量，增强另一种药物的效应，延缓疾病的进展，和/或延长患者的生存期。

“预防有效量”是指施用于易患癌症和/或可能罹患癌症的受试者时足以预防或减轻癌症的一种或多种将来的症状的严重程度的化合物或其药用盐的量。对于预防用途、有益或所需的结果包括例如消除或降低风险、减轻将来的严重程度或延迟疾病发作(包括延迟疾病的生化、组织学和/或行为症状、其并发症以及在将来的疾病发展过程中出现的中间病理表型)。

应当理解，可在辅助疗法中向受试者施用有效量的化合物或其药用盐，该辅助疗法是指受试者具有癌症史并且通常(但不一定)对治疗有反应的临床疗法，该治疗包括但不限于手术(例如手术切除)、放疗和化疗。但是，由于其癌症病史，这些受试者被认为有罹患癌症的风险。“辅助疗法”中的治疗或施用是指随后的治疗方式。

如本文所用，“单位剂型”是指物理上分离的单位，其适合作为单位剂量，每个单位包含经计算可产生所需疗效的预定量的活性成分以及所需的药物载体或赋形剂。单位剂型可包含单一疗法或联合疗法。

如本文所用，术语“受控释放”是指不立即释放药物的含药制剂或其部分，即，对于“受控释放”制剂，施用后药物不会立即释放到吸收池中。该术语包括旨在在较长时间内逐渐释放药物化合物的贮库制剂。受控释放制剂可包括多种药物输送系统，其通常包括将药物化合物与具有所需的释放特性(例如，pH依赖性或非pH依赖性溶解度、不同程度的水溶性等)的载体、聚合物或其他化合物混合并且根据所需的递送途径配制混合物(例如，带包衣的胶囊、可植入的储库、包含可生物降解的胶囊的注射液等)。

如本文所用，“药用的”或“药理学上可接受的”意指并非生物学上或以其他方式不可取的物料，例如，该物料可掺入施用于患者的药物组合物中，而不引起任何显著的不良生物学效应或以有害的方式与包含该组分的制剂的任何其他组分相互作用。药用载体或赋形剂优选地符合所需的毒理学和生产测试标准，并且/或者包含在美国食品药品监督管理局编写的《非活性成分指南》中。

在一些实施例中，本发明的化合物的盐是药用盐。“药用盐”是指那些保留了游离(非盐)化合物的生物活性的至少一部分并且可作为药物或药剂施用于受试者的盐。此类盐例如包括：(1)与无机酸诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等形成或与有机酸诸如乙酸、草酸、丙酸、琥珀酸、马来酸、酒石酸等形成的酸加成盐；(2)当母体化合物中存在的酸性质子被金属离子(例如，碱金属离子、碱土金属离子或铝离子)替代或与有机碱配位时形成的盐。可接受的有机碱包括乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺等。可接受的无机碱包括氢氧化铝、氢氧化钙、氢氧化钾、碳酸钠、氢氧化钠等。药用盐可在生产过程中原位制备，或通过使本发明的纯化的游离酸或碱形式的化合物分别与合适的有机或无机碱或酸反应并且分离出在后续纯化过程中形成的盐来制备。

如本文所用，术语“赋形剂”意指可用于药物或药剂(诸如包含本发明的化合物作为活性成分的片剂)中的惰性或非活性物质。术语“赋形剂”可涵盖各种物质，包括但不限于用作粘结剂、崩解剂、包衣、压缩/包囊助剂、乳霜或洗液、润滑剂、肠胃外给药溶液、可咀嚼片剂的材料、甜味剂或调味剂、悬浮剂/胶凝剂或湿法制粒剂的任何物质。粘结剂包括例如卡波姆、聚维酮、黄原胶等；包衣包括例如乙酸邻苯二甲酸纤维素、乙基纤维素、结冷胶、麦芽糖糊精、肠溶衣等；压缩/包囊助剂包括例如碳酸钙、葡聚糖、果糖dc(dc–“可直接压缩”)、蜂蜜dc、乳糖(无水或一水合物；任选地与阿斯巴甜、纤维素或微晶纤维素结合使用)、淀粉dc、蔗糖等；崩解剂包括例如交联羧甲基纤维素钠、结冷胶、羟乙酸淀粉钠等；乳霜或洗液包括麦芽糖糊精、角叉菜胶等；润滑剂包括例如硬脂酸镁、硬脂酸、硬脂酰富马酸钠等；用于咀嚼片剂的物料包括例如葡聚糖、果糖dc、乳糖(一水合物，任选地与阿斯巴甜或纤维素结合)等；悬浮剂/胶凝剂包括例如角叉菜胶、淀粉羟乙酸钠、黄原胶等；甜味剂包括例如阿斯巴甜、葡聚糖、果糖dc、山梨糖醇、蔗糖dc等；并且湿法制粒剂包括例如碳酸钙、麦芽糖糊精、微晶纤维素等。在某些情况下，术语“赋形剂”和“载体”可互换使用。

术语“受试者”或“患者”是指动物诸如哺乳动物，包括但不限于灵长类动物(例如人)、牛、绵羊、山羊、马、犬、猫、兔、大鼠、小鼠等。在某些实施例中，受试者是人或人类患者。

在本申请中，术语“异常细胞生长”、“不受调控的细胞生长”和“过度增殖疾患”可互换使用。除非另有说明，否则如本文所用的“异常细胞生长”是指独立于正常调节机制(例如接触抑制的丧失)的细胞生长。

术语“癌症”是指受试者中特征在于不受调控的细胞生长的病症，其中癌细胞能够局部侵袭和/或转移至非相邻部位。如本文所用，“癌细胞”、“癌性细胞”或“肿瘤细胞”是指特征在于该不受调控的细胞生长和侵袭特性的细胞。术语“癌症”涵盖所有类型的癌症，包括但不限于所有形式的癌、黑素瘤、胚细胞瘤、肉瘤、淋巴瘤和白血病，包括但不限于膀胱癌、膀胱肿瘤、脑瘤、乳腺癌、宫颈癌、结直肠癌、食道癌、子宫内膜癌、肝细胞癌、喉癌、肺癌、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肾癌和甲状腺癌、急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞性白血病、室管膜瘤、尤文肉瘤、胶质母细胞瘤、髓母细胞瘤、神经母细胞瘤、骨肉瘤、横纹肌肉瘤、横纹肌癌和肾母细胞瘤(Wilm瘤)。

“化疗剂”是可用于治疗癌症的化学化合物或生物制剂。化疗剂的实例包括：烷化剂，例如噻替哌和环磷酰胺

化疗剂的其他实例包括抗激素剂，其用来调节、减少、阻断或抑制可促进癌症的生长激素的作用，并且通常采用系统性或全身治疗的形式。它们本身可能是激素。实例包括抗雌激素和选择性雌激素受体调节剂(SERM)，包括例如他莫昔芬(包括

“化疗剂”的定义中还包括：(i)抗激素剂，其用来调节或抑制对肿瘤的激素作用诸如抗雌激素和选择性雌激素受体调节剂(SERM)，包括例如他莫昔芬(包括

在一些实施例中，化疗剂为免疫治疗剂。如本文所用，“免疫治疗剂”是增强免疫系统以帮助特异性或非特异性地抗击癌症的化合物。免疫治疗剂包括单克隆抗体和增强免疫系统的非特异性免疫治疗剂，诸如细胞因子、白细胞介素(例如，IL-2、IL-7、IL-12、IL-15、IL-21)、干扰素(例如，IFN-α、IFN-β、IFN-γ)、GM-CSF、沙利度胺(

化合物

本文所公开的化合物为式(I)化合物或这些化合物的盐(例如，药用盐)、溶剂化物(例如，水合物)、前药、代谢物或衍生物。这些化合物可用作HPK1的抑制剂。

在一个方面，提供了一种式(I)化合物：

或该化合物的盐(例如，药用盐)、溶剂化物(例如，水合物)、前药、代谢物或衍生物，其中：

R

A为C

R

R

R

R

每个R

每个R

每个R

每个R

每个R

每个R

或者R

每个R

每个R

每个R

或者R

每个R

每个R

每个R

每个R

或者R

每个R

每个R

每个R

或者R

每个R

每个R

每个R

每个R

或者R

每个R

每个R

每个R

或者R

每个R

在一些实施例中，化合物并非表1X中的化合物及其盐。在一些实施例中，本文所述的化合物诸如式(I)化合物并非选自表1X中的化合物1x-4x中的一种或多种。在一些实施例中，本公开的化合物以及使用本文所详述的化合物的方法包括具有式(I)的任何化合物，其包括表1X所列的那些化合物及其盐。

表1X

在一个方面，提供了一种式(I)化合物或其盐(例如，药用盐)、溶剂化物(例如，水合物)、前药、代谢物或衍生物，其中R

在一个方面，提供了一种式(IA)化合物：

或其盐(例如，药用盐)，其中：

G

n为0、1、2、3、4或5；

每个R

A、R

在一个变体中，化合物并非选自表1X中的化合物1x至4x及其盐中的一种或多种的化合物。在一个变体中，R

在一个方面，提供了一种式(IB)化合物：

或盐(例如，药用盐)，其中n为0、1、2、3、4或5；每个R

在一个方面，提供了一种式(IC)化合物：

或其盐(例如，药用盐)，其中：

Q为C或N，Z

n为0、1、2、3或4；

每个R

A、R

在一些实施例中，化合物为式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其盐(例如，药用盐)，其中R

在一些实施例中，化合物为式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其盐(例如，药用盐)，其中R

在一些实施例中，R

在一些实施例中，化合物为式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其盐(例如，药用盐)，其中R

应当理解，针对式(I)、(IA)、(IB)或(IC)所述的R

在一些实施例中，化合物为式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其盐(例如，药用盐)，其中A为C

在一些实施例中，A为

其中*表示连接点；

i为0、1、2或3；

J为1、2或3；

k为1或2；

每个q独立地为0、1、2、3、4或5；并且

每个R

在一些实施例中，A为：

其中*表示连接点，每个q独立地为0、1、2、3或4；并且每个R

在其中一些实施例中，q为0。上述的A环结构为未取代的。

在其中一些实施例中，每个R

在其中一些实施例中，每个q独立地为1、2、3或4；并且至少一个R

在其中一些实施例中，每个q独立地为1、2、3或4；并且至少一个R

在其中一些实施例中，每个q独立地为1、2或3；并且每个R

在一些实施例中，A选自由以下组成的组：

其各自任选地被1个、2个、3个、4个或5个独立地选自R

应当理解，针对式(I)、(IA)、(IB)或(IC)所述的R

在一些实施方例中，所述化合物为式(I)化合物或其盐(例如，药用盐)，其中R

在一些实施例中，化合物为式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其盐(例如，药用盐)，每个R

在其中一些实施例中，n为1、2、3或4；并且至少一个R

在其中一些实施例中，n为1、2、3或4；并且至少一个R

在其中一些实施例中，n为1、2、3或4；并且至少一个R

在其中一些实施例中，n为1、2、3或4；并且至少一个R

应当预期和理解，对于式(I)、(IA)、(IB)或(IC)所描述的R

在一些实施例中，化合物为式(I)或(适用情况下)其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其盐(例如，药用盐)，每个R

在式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)(在适用的情况下)化合物或其盐(例如，药用盐)的一些实施例中，每个R

在一个变体中，R

在一个变体中，R

在一个变体中，R

在一个变体中，R

在一个变体中，R

在一个变体中，R

在一个变体中，R

在一个变体中，R

在一个变体中，R

在一个变体中，R

在一个变体中，R

在一个变体中，R

在一个变体中，R

在一个变体中，每个R

在一个变体中，每个R

在一个变体中，R

在一个变体中，R

在一个变体中，R

在一些实施例中，每个R

在一些实施例中，每个R

在一些实施例中，每个R

在一些实施例中，每个R

在一些实施例中，每个R

在一些实施例中，每个R

在一个变体中，每个R

在一个变体中，R

在一个变体中，R

在一个变体中，R

在一个变体中，R

在一些实施例中，每个R

在一些实施例中，每个R

在一些实施例中，每个R

在一些实施例中，每个R

在一些实施例中，每个R

在一些实施例中，每个R

在一个变体中，每个R

在一个变体中，R

在一个变体中，R

在一些实施例中，每个R

在一些实施例中，每个R

在一些实施例中，每个R

在一些实施例中，每个R

在一些实施例中，每个R

在一些实施例中，每个R

在一个变体中，每个R

在一个变体中，R

代表性化合物列于表1中。应当理解，下表中按化合物编号和化合物名称列出各个对映异构体和非对映异构体，并且它们相应的结构可易于从中确定。在一些例子中，对映异构体或非对映异构体通过其各自的特性(例如在手性HPLC上的保留时间或其生物学活性)来鉴定，并且任意指定手性中心的绝对立体构型。

表1

在一些实施例中，提供了选自表1中的化合物编号1至345中的化合物或其盐(例如，药用盐)。在一些实施例中，提供选自表1中以下编号的化合物：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、17a、17b、18、19、20、21、22、23、23a、23b、24、24a、24b、25、25a、25b、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、38a、38b、38c、38d、39、39a、39b、39c、39d、40、40a、40b、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、61a、61b、61c、61d、62、63、64、65、66、67、68、68a、68b、68c、68d、69、69a、69b、70、71、72、73、73a、73b、74、75、76、77、77a、77b、78、78a、78b、79、79a、79b、80、80a、80b、81、81a、81b、81c、81d、82、82a、82b、82c、82d、83、83a、83b、83c、83d、84、84a、84b、84c、84d、85、85a、85b、85c、85d、86、86a、86b、86c、86d、87、87a、87b、88、88a、88b、89、89a、89b、89c、89d、90、90a、90b、90c、90d、91、91a、91b、91c、91d、92、92a、92b、93、94、94a、94b、95、95a、95b、96、96a、96b、97、97a、97b、98、98a、98b、98c、98d、99、99a、99b、99c、99d、100、100a 100b、100c 100d、101、101a、101b、102、102a、102b、103、104、104a、104b、104c、104d、105、105a、105b、105c、105d、106、106a、106b、106c、106d、107、107a、107b、107c、107d、108、108a、108b、108c、108d、109、109a、109b、109c、109d、110、110a、110b、110c、110d、111、111a、111b、112、112a、112b、113、113a、113b、114、114a、114b、114c、114d、115、115a、115b、115c、115d、116、116a、116b、116c、116d、117、117a、117b、117c、117d、118、118a、118b、118c、118d、119、119a、119b、119c、119d、120、120a、120b、120c、120d、121、121a、121b、121c、121d、122、122a、122b、123、123a、123b、124、124a、124b、124c、124d、125、125a、125b、125c、125d、126、126a、126b、126c、126d、127、127a、127b、127c、127d、128、128a、128b、129、129a、129b、129c、129d、130、130a、130b、130c、130d、131、131a、131b、131c、131d、132、132a、132b、132c、132d、133、133a、133b、133c、133d、134、134a、134b、134c、134d、135、135a、135b、135c、135d、136、137、138、139、140、140a、140b、140c、140d、140e、140f、140g、140h、141、142、143、143a、143b、143c、143d、144、144a、144b、145、145a、145b、145c、145d、146、146a、146b、146c、146d、146e、146f、146g、146h、147、148、148a、148b、149、150、150a、150b、150c、150d、151、151a、151b、151c、151d、152、152a、152b、152c、152d、153、153a、153b、153c、153d、154、154a、154b、155、155a、155b、155c、155d、156、156a、156b、156c、156d、157、157a、157b、157c、157d、158、158a、158b、158c、158d、159、159a、159b、159c、159d、160、160a、160b、160c、160d、161、161a、161b、161c、161d、162、162a、162b、162c、162d、163、163a、163b、163c、163d、164、164a、164b、165、165a、165b、166、167、167a、167b、167c、167d、168、168a、168b、168c、168d、169、169a、169b、169c、169d、170、170a、170b、170c、170d、171、171a、171b、171c、171d、172、173、173a、173b、173c、173d、174、174a、174b、175、175a、175b、176、177、177a、177b、177c、177d、178、178a、178b、178c、178d、179、179a、179b、179c、179d、180、180a、180b、180c、180d、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、191a、191b、192、193、193a、193b、193c、193d、194、194a、194b、195、195a、195b、195c、195d、196、196a、196b、196c、196d、197、197a、197b、197c、197d、198、198a、198b、198c、198d、199、199a、199b、199c、199d、200、201、201a、201b、201c、201d、202、202a、202b、202c、202d、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、217a、217b、217c、217d、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、228a、228b、228c、228d、229、229a、229b、230、231、232、233、234、234a、234b、234c、234d、235、235a、235b、236、237、238、239、239a、239b、240、240a、240b、241、241a、241b、242、243、243a、243b、243c、243d、244、244a、244b、245、245a、245b、245c、245d、246、246a、246b、246c、246d、247、248、248a、248b、249、250、250a、250b、251、252、253、253a、253b、253c、253d、254、254a、254b、254c、254d、255、255a、255b、256、256a、256b、257、258、258a、258b、259、259a、259b、259c、259d、260、261、261a、261b、261c、261d、262、263、264、264a、264b、265、266、266a、266b、266c、266d、267、267a、267b、267c、267d、268、269、270、271、271a、271b、271c、271d、272、272a、272b、272c、272d、273、273a、273b、274、274a、274b、274c、274d、275、275a、275b、275c、275d、276、277、278、278a、278b、279、279a、279b、280、280a、280b、281、281a、281b、282、282a、282b、283、283a、283b、284、285、286、287、288、288a、288b、288c、288d、289、290、290a、290b、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、300a、300b、300c、300d、301、302、303、304、304a、304b、304c、304d、305、305a、305b、305c、305d、306、306a、306b、306c、306d、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、325a、325b、326、327、328、329、330、330a、330b、330c、330d、331、332、333、334、335、336、337、337a、337b、337c、337d、338、339、340、341、342、343、344和345，或其盐(例如药用盐)。在一些实施例中，提供选自表1中以下编号的化合物：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、17a、17b、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232、233、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327、328、329、330、331、332、333、334、335、336、337、338、339、340、341、342、343、344和345，或其盐(例如药用盐)。在一些实施例中，提供选自表1中以下编号的化合物：23a、23b、24a、24b、25a、25b、38a、38b、38c、38d、39a、39b、39c、39d、40a、40b、61a、61b、61c、61d、68a、68b、68c、68d、69a、69b、73a、73b、77a、77b、78a、78b、79a、79b、80a、80b、81a、81b、81c、81d、82a、82b、82c、82d、83a、83b、83c、83d、84a、84b、84c、84d、85a、85b、85c、85d、86a、86b、86c、86d、87a、87b、88a、88b、89a、89b、89c、89d、90a、90b、90c、90d、91a、91b、91c、91d、92a、92b、94a、94b、95a、95b、96a、96b、97a、97b、98a、98b、98c、98d、99a、99b、99c、99d、100a 100b、100c 100d、101a、101b、102a、102b、104a、104b、104c、104d、105a、105b、105c、105d、106a、106b、106c、106d、107a、107b、107c、107d、108a、108b、108c、108d、109a、109b、109c、109d、110a、110b、110c、110d、111a、111b、112a、112b、113a、113b、114a、114b、114c、114d、115a、115b、115c、115d、116a、116b、116c、116d、117a、117b、117c、117d、118a、118b、118c、118d、119a、119b、119c、119d、120a、120b、120c、120d、121a、121b、121c、121d、122a、122b、123a、123b、124a、124b、124c、124d、125a、125b、125c、125d、126a、126b、126c、126d、127a、127b、127c、127d、128a、128b、129a、129b、129c、129d、130a、130b、130c、130d、131a、131b、131c、131d、132a、132b、132c、132d、133a、133b、133c、133d、134a、134b、134c、134d、135a、135b、135c、135d、140a、140b、140c、140d、140e、140f、140g、140h、143a、143b、143c、143d、144a、144b、145a、145b、145c、145d、146a、146b、146c、146d、146e、146f、146g、146h、148a、148b、150a、150b、150c、150d、151a、151b、151c、151d、152a、152b、152c、152d、153a、153b、153c、153d、154a、154b、155a、155b、155c、155d、156a、156b、156c、156d、157a、157b、157c、157d、158a、158b、158c、158d、159a、159b、159c、159d、160a、160b、160c、160d、161a、161b、161c、161d、162a、162b、162c、162d、163a、163b、163c、163d、164a、164b、165a、165b、167a、167b、167c、167d、168a、168b、168c、168d、169a、169b、169c、169d、170a、170b、170c、170d、171a、171b、171c、171d、173a、173b、173c、173d、174a、174b、175a、175b、177a、177b、177c、177d、178a、178b、178c、178d、179a、179b、179c、179d、180a、180b、180c、180d、191a、191b、193a、193b、193c、193d、194a、194b、195a、195b、195c、195d、196a、196b、196c、196d、197a、197b、197c、197d、198a、198b、198c、198d、199a、199b、199c、199d、201a、201b、201c、201d、202a、202b、202c、202d、217a、217b、217c、217d、228a、228b、228c、228d、229a、229b、234a、234b、234c、234d、235a、235b、239a、239b、240a、240b、241a、241b、243a、243b、243c、243d、244a、244b、245a、245b、245c、245d、246a、246b、246c、246d、248a、248b、250a、250b、253a、253b、253c、253d、254a、254b、254c、254d、255a、255b、256a、256b、258a、258b、259a、259b、259c、259d、261a、261b、261c、261d、264a、264b、266a、266b、266c、266d、267a、267b、267c、267d、271a、271b、271c、271d、272a、272b、272c、272d、273a、273b、274a、274b、274c、274d、275a、275b、275c、275d、278a、278b、279a、279b、280a、280b、281a、281b、282a、282b、283a、283b、288a、288b、288c、288d、290a、290b、300a、300b、300c、300d、304a、304b、304c、304d、305a、305b、305c、305d、306a、306b、306c、306d、325a、325b、330a、330b、330c、330d、337a、337b、337c和337d，或其盐(例如药用盐)。

本文所述的式(I)化合物或其盐可能以立体异构体形式存在(例如，它含有一个或多个不对称碳原子)。各种立体异构体(对映异构体和非对映异构体)及其混合物包括在本文所公开的主题范围内。同样，应当理解，式(I)化合物或盐可以除式中所示的结构以外的互变异构形式存在，并且也包括在本文所公开的主题范围内。应当理解，本文所公开的主题包括本文所述的特定组的组合和子集。本文所公开的主题范围包括立体异构体的混合物以及纯化的对映异构体或对映体/非对映体富集的混合物。应当理解，本文所公开的主题包括本文所定义的特定组的组合和子集。

本文所公开的主题还包括本文所述的化合物的同位素标记的形式，但事实上，一个或多个原子被原子质量或质量数不同于自然界中通常发现的原子质量或质量数的原子所取代。可掺入本文所述的化合物及其药用盐的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、碘和氯的同位素，诸如

本文所公开的主题包括式(I)化合物的前药、代谢物、衍生物和药用盐。式(I)化合物的代谢物包括通过使式(I)化合物与哺乳动物接触足以生成其代谢物的时间段而产生的化合物。

如果式(I)化合物为碱，则所需的药用盐可通过本领域可用的任何合适的方法进行制备，例如，用无机酸(诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、甲磺酸、磷酸等)或用有机酸(诸如乙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水杨酸、吡喃葡糖苷酸诸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸、α-羟基酸诸如柠檬酸或酒石酸、氨基酸诸如天冬氨酸或谷氨酸、芳香酸诸如苯甲酸或肉桂酸、磺酸诸如对甲苯磺酸或乙磺酸等)处理游离碱。

如果式(I)化合物为酸，则所需的药用盐可通过任何合适的方法进行制备，例如用无机碱或有机碱(诸如伯胺、仲胺或叔胺、碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物等)处理游离酸。合适的盐的例示性实例包括但不限于衍生自氨基酸(诸如甘氨酸和精氨酸)、氨、伯胺、仲胺和叔胺以及环状胺(诸如哌啶、吗啉和哌嗪)的有机盐以及衍生自钠、钙、钾、镁、锰、铁、铜、锌、铝和锂的无机盐。

式(I)化合物可为“前药”形式，其包括可在体内代谢的部分的化合物。通常，前药在体内通过酯酶或其他机制代谢为活性药物。前药的实例及其用途在本领域中众所周知(参见例如：Berge等人(1977)“Pharmaceutical Salts”，J.Pharm.Sci.66:1-19)。前药可在化合物的最终分离和纯化过程中原位制备，或通过使纯化的游离酸形式的化合物或羟基与合适的酯化剂分别反应来制备。羟基基团可通过用羧酸处理转化为酯。前药部分的实例包括取代和未取代的、支链或直链的低级烷基酯部分(例如丙酸酯)、低级烯基酯、二低级烷基-氨基低级烷基酯(例如，二甲基氨基乙基酯)、酰基氨基低级烷基酯(例如，乙酰氧基甲基酯)、酰氧基低级烷基酯(例如，新戊酰氧基甲基酯)、芳基酯(苯酯)、芳基-低级烷基酯(例如，苄基酯)、取代的(例如，用甲基、卤代或甲氧基取代基取代)芳基和芳基-低级烷基酯、酰胺、低级烷基酰胺、二低级烷基酰胺和羟基酰胺。还包括通过体内其他机制转化为活性形式的前药。在一些方面，本发明的化合物是本文中任何式的前药。

式(I)化合物可通过一般合成方法、本文所述实例、以及本领域已知方法中描述的程序来制备。

药物组合物和制剂

本发明所公开的化合物可与药用载体或赋形剂一起配制为药物组合物。

式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物可根据标准药学实践配制为药物组合物。根据这一方面，提供了一种包含式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物以及药用赋形剂、稀释剂或载体的药物组合物。

典型制剂通过混合式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物与载体、稀释剂或赋形剂来制备。合适的载体、稀释剂和赋形剂是本领域技术人员众所周知的，并且包括诸如碳水化合物、蜡、水溶性和/或可溶胀聚合物的材料、亲水或疏水材料、明胶、油、溶剂，水等。所使用的特定载体、稀释剂或赋形剂将取决于式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物的应用方式和目的。通常基于本领域技术人员公认对哺乳动物施用安全的溶剂(GRAS)来选择溶剂。通常，安全溶剂是无毒的水性溶剂，例如水和其他可溶于水或与水混溶的无毒溶剂。合适的水性溶剂包括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如PEG 400、PEG 300)等及其混合物。制剂还可包含一种或多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、悬浮剂、防腐剂、抗氧化剂、不透明剂、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、加香剂、调味剂和其他已知的添加剂，以提供美观的药物(即，式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药物组合物)展示或有助于药物产品(例如，药物)的制备。

可使用常规的溶解和混合程序来制备制剂。例如，在上述一种或多种赋形剂的存在下，将原料药(即，式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或稳定形式的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物(例如，与环糊精衍生物或其他已知的络合剂的复合物))溶于合适的溶剂中。通常将式(I)化合物配制成药物剂型，以提供易于控制的药物剂量并使患者能够遵循处方。

根据用于施用药物的方法，可以以多种方式包装用于施用的药物组合物(或制剂)。一般来讲，用于分配的制品包括以适当形式沉积药物制剂的容器。合适的容器是本领域技术人员熟知的，并且包括诸如瓶(塑料和玻璃)、小袋、安瓿、塑料袋、金属圆筒等之类的材料。容器还可以包括干预防护组件，以防止不慎接触包装的内容物。另外，容器上贴有描述容器内容物的标签。标签上还可能包括适当的警告。

可针对各种给药途径和类型制备药物制剂。例如，可任选地将具有所需纯度的式(I)化合物与药用稀释剂、载体、赋形剂或稳定剂混合(Osol,A.主编，Remington'sPharmaceutical Sciences，第16版，1980年)为冻干制剂、研磨粉或水溶液的形式。可通过在环境温度下和适当的pH值和所需的纯度下与生理学上可接受的赋形剂或载体(即在所用剂量和浓度下对接受者无毒的赋形剂或载体)混合来进行配制。制剂的pH主要取决于化合物的具体用途和浓度，但是可在约3至约8的范围内。在pH 5的乙酸盐缓冲液中的制剂是合适的实施例。

式(I)化合物可为无菌化合物。特别地，待用于体内施用的制剂应为无菌的。此类灭菌通过无菌过滤膜过滤很容易实现。

化合物通常可作为固体组合物、冻干制剂或作为水溶液储存。

包含式(I)化合物的药物组合物可按照良好医学实践进行配制、计量和施用(即，施用的量、浓度、计划、疗程、载体和途径)。在这种情况下需要考虑的因素包括所治疗的特定病症、所治疗的特定哺乳动物、个体患者的临床病况、病症的原因、药剂的递送部位、施用方法、施用的时间安排，以及执业医师已知的其他因素。待施用的化合物的“治疗有效量”将受此类考虑因素的约束，并且是预防、改善或治疗凝血因子介导的疾患所需的最小量。在一些实施例中，该量低于对宿主有毒或使宿主更易出血的量。

可接受的稀释剂、载体、赋形剂和稳定剂在使用的剂量和浓度下对接受体无毒，包括缓冲液，诸如磷酸盐、柠檬酸盐和其他有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸和蛋氨酸；防腐剂(诸如十八烷基二甲基苄基氯化铵；氯化六甲双铵；苯扎氯铵；苄索氯铵；苯酚、丁醇或苄醇；对羟基苯甲酸烷基酯，诸如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯；儿茶酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇；间甲酚)；低分子量(少于约10个残基)多肽；蛋白质，诸如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，诸如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，诸如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖和其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，诸如EDTA；糖，诸如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨糖醇；成盐抗衡离子，诸如钠；金属络合物(例如，锌蛋白络合物)；和/或非离子表面活性剂，诸如TWEEN

可以制备式(I)化合物的缓释制剂。缓释制剂的合适实例包括含有式(I)或Ia化合物的固态疏水聚合物的半透性基质，这些基质是例如膜或微胶囊等成型制品的形式。缓释基质的实例包括聚酯、水凝胶(例如，聚(2-甲基丙烯酸羟乙酯)或聚(乙烯醇))、聚丙交酯(US 3773919)、L-谷氨酸和γ-乙基-L-谷氨酸的共聚物、不可降解的乙烯-乙酸乙烯酯、可降解的乳酸-乙醇酸共聚物，诸如LUPRON DEPOT

该制剂包括适合于本文详述的施用途径的制剂。该制剂可方便地以单位剂量的形式存在，并且可通过药学领域公知的任何方法制备。技术和配方通常可以见于Remington'sPharmaceutical Sciences(Mack Publishing Co.,Easton,PA)。此类方法包括使活性成分与构成一种或多种辅助成分的载体或赋形剂缔合的步骤。通常，通过将活性成分与液体赋形剂或载体或细分的固体赋形剂或载体或两者均匀和紧密地缔合，然后在必要时使产品成型来制备制剂。

适合口服施用的式(I)化合物的制剂可制成离散的单位，例如丸剂、胶囊剂、扁囊剂或片剂，每个单位均包含预定量的式(I)或Ia化合物。

可通过在合适的机器中将自由流动形式(例如粉末或颗粒，任选地与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂混合)的活性成分压缩来制备压制的片剂。模制片剂可通过在合适的机器中模制用惰性液体稀释剂润湿的粉状活性成分的混合物来制备。片剂可任选地被包衣或刻痕，并且可任选地被配制以提供活性成分从其中的缓慢或受控释放。

可制备片剂、口含片、锭剂、水性或油性悬浮液、可分散的粉剂或颗粒剂、乳剂、硬胶囊或软胶囊，例如明胶胶囊、糖浆或酏剂用于口服。用于口服的式(I)化合物的制剂可根据本领域已知的用于制备药物组合物的任何方法来制备，并且这种组合物可包含一种或多种制剂，包括甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂以提供适口的制剂。包含活性成分与适合于制备片剂的无毒药用赋形剂混合的片剂是可接受的。这些赋形剂可为例如惰性稀释剂，例如碳酸钙或碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；制粒和崩解剂，例如玉米淀粉或海藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶或阿拉伯胶；润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。片剂可不包衣，也可通过包括微囊化在内的已知技术进行包衣，以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，从而在更长的时间内提供持续的作用。例如，可使用延时材料，例如单独或与蜡一起使用的单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。

为了治疗眼睛或其他外部组织(例如口腔和皮肤)，该制剂优选以局部软膏或乳膏剂的形式施用，其含有例如0.075％w/w至20％w/w含量的活性成分。当配制成软膏时，活性成分可与石蜡或与水混溶的软膏剂基质一起使用。另选地，可将活性成分与水包油乳膏基质一起配制成乳膏。

如果需要，乳膏基质的水相可包括多元醇，即具有两个或更多个羟基基团的醇，例如丙二醇、1,3-丁二醇、甘露醇、山梨糖醇、甘油和聚乙二醇(包括PEG 400)及其混合物。局部制剂可期望地包括增强活性成分通过皮肤或其他受影响区域的吸收或渗透的化合物。这种皮肤渗透促进剂的实例包括二甲基亚砜和相关类似物。

乳液的油相可由已知成分以已知方式构成。尽管该相可以仅包含乳化剂，但是还可包含至少一种乳化剂与脂肪或油或与脂肪和油两者的混合物。亲水性乳化剂与亲脂性乳化剂可一起用作稳定剂。具有或不具有稳定剂的乳化剂一起构成所谓的乳化蜡，并且蜡与油和脂肪一起构成所谓的乳化软膏基质，形成乳膏制剂的油性分散相。适用于制剂的乳化剂和乳液稳定剂包括

式(I)化合物的水性悬浮液包含与适合制造水性悬浮液的赋形剂混合的活性物质。这样的赋形剂包括悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠、交联羧甲基纤维素、聚维酮、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄芪胶和阿拉伯胶，以及分散剂或湿润剂，例如天然存在的磷脂(例如卵磷脂)、环氧烷与脂肪酸的缩合产物(例如，聚氧乙烯硬脂酸酯)、环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物(例如，十七烷乙烯氧基鲸醇)、环氧乙烷与衍生自脂肪的偏酯和己糖醇酐的缩合产物(例如，聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯)。水性悬浮液还可包含一种或多种防腐剂(诸如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯)、一种或多种着色剂、一种或多种调味剂和一种或多种甜味剂(诸如蔗糖或糖精)。

式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物的药物组合物可以呈无菌可注射制剂(诸如无菌可注射的水性或油性悬浮液)的形式。该悬浮液可根据已知技术使用上面已经提到的那些合适的分散剂或湿润剂和悬浮剂来配制。无菌可注射制剂也可以是无菌注射液或悬浮液，其处于非毒性的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂(诸如1,3-丁二醇)中。无菌可注射制剂也可以制成冻干粉。可采用的可接受的溶媒和溶剂包括水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。此外，无菌不挥发油常规上可用作溶剂或悬浮介质。为此，可使用任何温和的不挥发性油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸诸如油酸同样可以用于注射剂的制备中。

可与赋形剂或载体材料组合以产生单一剂型的活性成分的量将根据所治疗的宿主和特定的施用方式而变化。例如，用于人口服施用的延时释放制剂可含有约1至1000mg与适当和方便量的赋形剂或载体物质复配的活性物质，该载体物质可占总组合物的约5％至约95％(重量:重量)。可以制备药物组合物以提供易于测量的施用量。例如，用于静脉内输注的水溶液可每毫升溶液包含约3μg至500μg活性成分，以便可以约30mL/h的速率输注合适的体积。

适于肠胃外施用的制剂包括水性和非水性无菌注射溶液，其可以包含抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和溶质，从而使制剂与预期接受者的血液等渗，以及水性和非水性无菌悬浮液，其可以包括悬浮剂和增稠剂。

适用于局部施用于眼睛的制剂还包括滴眼剂，其中活性成分溶解或悬浮在合适的赋形剂或载体中，尤其是活性成分的水性溶剂中。活性成分优选以约0.5％w/w至20％w/w，例如约0.5％w/w至10％w/w，例如约1.5％w/w的浓度存在于此类制剂中。

适于在口腔内局部施用的制剂包括在调味基料(通常是蔗糖和阿拉伯胶或黄芪胶)中包含活性成分的锭剂；在惰性基料(例如明胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯胶)中包含活性成分的含片；以及在合适的液体赋形剂或载体中包含活性成分的漱口水。

直肠施用的制剂可以用包含例如可可脂或水杨酸酯的合适的基质呈现为栓剂。

适于肺内或鼻腔施用的制剂具有例如在0.1至500微米的范围内的粒径(包括以0.5微米、1微米、30微米、35微米等增量在0.1微米至500微米的范围内的粒径)，可通过鼻腔快速吸入或通过嘴部吸入达到肺泡囊。合适的制剂包括活性成分的水性或油性溶液。适于气雾剂或干粉剂施用的制剂可根据常规方法制备，并且可与其他治疗剂，例如迄今为止如下所述用于治疗或预防疾患的化合物一起递送。

适于阴道施用的制剂可以呈阴道栓、卫生棉条、乳膏、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾剂的形式，其中除活性成分以外还包含本领域中已知的合适的赋形剂或载体。

制剂可包装在单位剂量或多剂量容器中，例如密封的安瓿瓶和小瓶中，并且可在冷冻干燥(冻干)条件下储存，仅需要在使用前添加注射用无菌液体赋形剂或载体(例如水)。临时注射溶液和悬浮液由前述类型的无菌粉末、颗粒和片剂制备。优选的单位剂量制剂是含有如本文上文所述的每日剂量或单位每日亚剂量的，或其适当分数的活性成分的那些。

本发明的主题进一步提供了兽用组合物，其包含至少一种如上定义的活性成分以及兽用赋形剂或载体。兽用赋形剂或载体是可用于施用组合物的材料，并且可以是固体、液体或气体材料，其在兽医领域是惰性的或可接受的并且与活性成分相容。这些兽用组合物可以肠胃外、口服或通过任何其他预期途径施用。

在特定实施例中，包含本发明所公开的化合物的药物组合物进一步包含化疗剂。在其中一些实施例中，化疗剂为免疫治疗剂。

使用方法

本发明所公开的化合物可用于抑制酶HPK1的活性。HPK1也称为丝裂原活化蛋白激酶1或MAP4K1，是Ste20相关丝氨酸/苏氨酸激酶的偕中心激酶亚家族的成员。HPK1用作MAP4K，通过磷酸化和激活MAP3K蛋白(包括MEKK1、MLK3和TAK1)，导致MAPK Jnk的激活。

在一个实施例中，本文所公开的主题涉及抑制HPK1的方法，该方法包括使HPK1与有效量的本文所述的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)或药物组合物接触。

在一个实施例中，本文所公开的主题涉及增强有此需要的受试者体内的免疫应答的方法，其中该方法包括向所述受试者施用有效量的本文所述的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或药物组合物。在该实施例的某些方面，相对于施用化合物或药物组合物之前，受试者体内的T细胞具有增强的引发、增强的活化、增强的迁移、增强的增殖、增强的存活期和增强的细胞溶解活性中的至少一种。在该实施例的某些方面，T细胞活化的特征在于相对于施用化合物或药物组合物之前，γ-IFN+CD8 T细胞的频率升高、γ-IFN+CD4 T细胞的频率升高或T细胞产生的IL-2或颗粒酶B的水平升高。在该实施例的某些方面，相对于施用化合物或药物组合物之前，T细胞的数量增加。在该实施例的某些方面，T细胞为抗原特异性CD8T细胞。在该实施例的某些方面，T细胞为抗原特异性CD4 T细胞。在该实施例的某些方面，相对于施用化合物或药物组合物之前，受试者体内的抗原呈递细胞的成熟和活化增强。在该实施例的某些方面，抗原呈递细胞为树突状细胞。在该实施例的某些方面，抗原呈递细胞的成熟特征在于CD83+树突状细胞的频率升高。在该实施例的某些方面，抗原呈递细胞的活化的特征在于树突状细胞上CD80和CD86的表达升高。在一些方面，式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药物组合物提供了对肿瘤或病毒的免疫应答的通用引发作用(即，疫苗)以增强/产生抗病毒/肿瘤免疫力。

在本文所述的方法中，向患有本文其他地方所述的癌症的受试者施用式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药物组合物。

在一个实施例中，本文所公开的主题涉及治疗HPK1依赖性疾患的方法，该方法包括向有此需要的受试者施用有效量的本文所述的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或药物组合物。在该实施例的某些方面，HPK1依赖性疾患为癌症。在该实施例的某些方面，癌症包括选自由以下项组成的组中的至少一种癌症：结直肠癌、黑素瘤、非小细胞肺癌、卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌、血液学恶性肿瘤和肾细胞癌。在该实施例的某些方面，癌症具有升高的T细胞浸润水平。在该实施例的某些方面，相对于施用化合物或组合物之前，受试者体内的癌细胞选择性地具有升高的I类MHC抗原表达水平。

在本文所述的方法中，该方法可进一步包括向所述受试者施用化疗剂。在该实施例的某些方面，向受试者同时施用化疗剂与本文所述的化合物或组合物。在该实施例的某些方面，在施用本文所述的化合物或组合物之前，向受试者施用化疗剂。在该实施例的某些方面，在施用本文所述的化合物或所述组合物之后，向受试者施用化疗剂。

HPK1多核苷酸和多肽是本领域已知的(Hu等人(1996)Genes Dev.10:2251-2264，该文献全文以引用方式并入本文)。某些HPK1多核苷酸和包含人HPK1多核苷酸的多肽是可获得的，并且其序列是已知的，例如GenBank登录号NM_007181.5的核苷酸141-2642和编码的人HPK1多肽(登录号NP_009112.1)；以及GenBank登录号NM_001042600.2的核苷酸141-2606和编码的人HPK1多肽(登录号NP_001036065.1)。

HPK1多肽包含各种保守的结构基序。HPK1多肽包含氨基末端Ste20样激酶结构域，该结构域包括ATP结合位点。激酶结构域之后为四个富含脯氨酸(PR)的基序，这些基序是含SH3的蛋白质诸如CrkL、Grb2、HIP-55、Gads、Nck和Crk的结合位点。HPK1响应于TCR或BCR刺激而发生磷酸化并且被激活。TCR和BCR诱导的PR1和PR2之间的酪氨酸残基的磷酸化通过SLP-76或BLNK SH2结构域介导与T细胞中的SLP-76或B细胞中的BLNK结合，并且激酶活化所必需的。在HPK1的C端发现的Citron同源结构域可能是一个调节域，并且可能参与了大分子相互作用。

本发明所公开的化合物直接与HPK1结合并且抑制其激酶活性。在一些实施例中，本发明所公开的化合物降低、抑制或以其他方式削弱HPK1介导的SLP76和/或Gads的磷酸化。

本发明所公开的化合物可以是也可以不是特异性HPK1拮抗剂。特异性HPK1拮抗剂降低HPK1的生物学活性的量在统计学上大于该拮抗剂对任何其他蛋白质(例如，其他丝氨酸/苏氨酸激酶)的抑制作用。在某些实施例中，本发明所公开的化合物特异性抑制HPK1的丝氨酸/苏氨酸激酶活性。在其中一些实施例中，HPK1拮抗剂对HPK1的IC

本发明所公开的化合物可用于抑制HPK1的方法中。此类方法包括使HPK1与有效量的本发明所公开的化合物接触。“接触”是指使化合物与分离的HPK1酶或表达HPK1的细胞(例如，T细胞、B细胞、树突状细胞)足够接近，使得该化合物能够结合至HPK1并且抑制其活性。可使该化合物在体外与HPK1接触，或通过向受试者施用化合物，使该化合物在体内与HPK1接触。

可使用本领域中已知的可用于测定HPK1激酶活性的任何方法来确定HPK1是否受到抑制，这些方法包括体外激酶测定、使用对HPK1磷酸化靶点具有特异性的抗体(诸如SLP76和Gads)进行免疫印迹检测或测量HPK1激酶活性的下游生物学效应(诸如将14-3-3蛋白募集到磷酸化的SLP7和Gads、从包含LAT的微簇释放出SLP76-Gads-14-3-3复合物或者T细胞或B细胞活化)。

本发明所公开的化合物可用于治疗HPK1依赖性疾患。如本文所用，“HPK1依赖性疾患”是指以下病理状态，其中HPK1活性对于该病理状态的发生或维持是必需的。在一些实施例中，HPK1依赖性疾患为癌症。

本发明所公开的化合物还可用于增强有此需要的受试者的免疫应答。此类方法包括施用有效量的本发明所公开的化合物(即，式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐、前药、代谢物或衍生物)。

如本文所用，“增强免疫应答”是指对抗原的任何免疫原性应答的改善。对抗原的免疫原性应答的改善的非限制性实例包括树突状细胞的成熟或迁移的增强、T细胞(例如，CD4 T细胞、CD8 T细胞)活化增强、T细胞(例如，CD4 T细胞、CD8 T细胞)增殖增强，B细胞增殖增强、T细胞和/或B细胞的存活期延长、抗原呈递细胞(例如树突状细胞)的抗原呈递改善、抗原清除率改善、T细胞产生的细胞因子(例如，白细胞介素-2)增加、对前列腺素E2诱导的免疫抑制的抵抗力增强以及CD8 T细胞的引发和/或细胞溶解活性提高。

在一些实施例中，相对于施用式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐、前药、代谢物或衍生物之前，受试者体内的CD8 T细胞具有增强的引发、活化、增殖和/或细胞溶解活性。在一些实施例中，CD8 T细胞引发的特征在于CD8 T细胞中CD44表达水平升高和/或细胞溶解活性增强。在一些实施例中，CD8 T细胞活化的特征在于γ-IFN

在一些实施例中，相对于施用式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐、前药、代谢物或衍生物之前，受试者体内的CD4 T细胞具有增强的引发、活化、增殖和/或细胞溶解活性。在一些实施例中，CD4 T细胞引发的特征在于CD4 T细胞中CD44表达水平升高和/或细胞溶解活性增强。在一些实施例中，CD4 T细胞活化的特征在于γ-IFN

在一些实施例中，相对于施用式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐、前药、代谢物或衍生物之前，受试者体内的抗原呈递细胞具有增强的成熟和活化作用。在一些实施例中，抗原呈递细胞为树突状细胞。在一些实施例中，抗原呈递细胞的成熟特征在于CD83

在一些实施例中，相对于施用式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐、前药、代谢物或衍生物之前，受试者体内的血清细胞因子IL-10和/或趋化因子IL-8(鼠KC的人同源物)的血清水平下降。

TCR的参与导致HPK1活化，其用作TCR诱导的AP-1应答途径的负调节剂。据信HPK1通过使Ser376处的SLP76(Di Bartolo等人(2007)JEM 204:681-691)和Thr254处的Gads发生磷酸化来降低信号传导微簇的持久性对T细胞活化进行负调控，从而募集与磷酸化SLP76和Gads结合的14-3-3蛋白，从包含LAT的微簇中释放出SLP76-Gads-14-3-3复合物，其导致T细胞功能紊乱(包括细胞无能和细胞耗竭)(Lasserre等人(2011)J Cell Biol 195(5):839-853)。

在免疫功能紊乱的上下文中，术语“功能紊乱”是指对抗原刺激的免疫应答下降的状态。该术语包括可能发生抗原识别的耗竭和/或无能的常见要素，但随后的免疫应答对控制感染或肿瘤生长无效。

如本文所用，术语“功能紊乱的”还包括难以实现抗原识别或对抗原识别无反应，具体地，将抗原识别转化为下游T细胞效应子功能(诸如增殖、细胞因子产生(例如，IL-2、γ-IFN)和/或靶细胞杀伤)的功能受损。

术语“无能”是指通过T细胞受体传递的信号不完全或不充分而引起的对抗原刺激的无反应状态(例如，在不存在ras激活的情况下细胞内Ca

术语“耗竭”是指T细胞耗竭，是由于许多慢性感染和癌症期间持续发生的TCR信号传导所引起的T细胞功能紊乱状态。它与“无能”的不同之处在于，并非由不完全或不充分的信号产生，而是由持续的信号传导产生。它是指效应子功能不佳、抑制性受体的持续表达以及不同于功能性效应子或记忆T细胞的转录状态。细胞耗竭阻碍了对感染和肿瘤的最佳控制。耗竭可能源于外在的负调控途径(例如，免疫调节性细胞因子)以及细胞内在负调控(协同刺激)途径(PD-1、B7-H3、B7-H4等)。

在一些实施例中，向受试者施用式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐、前药、代谢物或衍生物导致T细胞功能增强。在一些实施例中，施用本文所述的HPK1抑制剂可增强/更新/重新激活免疫应答或激活新的免疫应答。

“增强T细胞功能”是指诱导、引起或刺激T细胞具有持续或放大的生物学功能或更新或重新激活耗竭或失活的T细胞。增强T细胞功能的实例包括：相对于干预前的此类水平，细胞因子(例如，-干扰素、IL-2、IL-12和TNFα)分泌增加、增殖增加、抗原反应(例如，病毒、病原体或肿瘤清除率)增加，以及CD8 T细胞或CD4 T细胞产生的效应颗粒诸如颗粒酶B增加。在一个实施例中，增强水平为至少50％或者60％、70％、80％、90％、100％、120％、150％、200％。测量该增强效应的方式是本领域的普通技术人员已知的。

因此，本发明所公开的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐、前药、代谢物或衍生物可用于治疗T细胞功能失调的疾患。“T细胞功能失调的疾患”是指特征在于对抗原刺激的应答下降的T细胞疾患或病症。在一个特定的实施例中，T细胞功能失调的疾患是与HPK1的激酶活性升高明确相关联的疾患。在另一个实施例中，T细胞功能失调的疾患是其中T细胞无能或分泌细胞因子、增殖或执行细胞溶解活性的能力下降的疾患。在一个具体方面，反应下降导致无法有效控制表达免疫原的病原体或肿瘤。特征在于T细胞功能失调的T细胞功能失调的疾患的实例包括无法消退的急性感染、慢性感染和肿瘤免疫。

因此，本发明所公开的化合物可用于治疗需要增强免疫原性的病症，诸如提高肿瘤免疫原性以治疗癌症。

“免疫原性”是指特定物质引起免疫应答的能力。肿瘤具有免疫原性，并且增强免疫原性有助于通过免疫应答清除肿瘤细胞。病毒也可能具有免疫原性，并且增强/激活免疫原性可有助于通过免疫应答清除病毒颗粒。

“肿瘤免疫”是指肿瘤逃避免疫识别和清除的过程。因此，作为治疗概念，当此类逃避行为减弱时，肿瘤免疫得到“治疗”，并且肿瘤被免疫系统识别并且攻击。肿瘤识别的实例包括肿瘤结合、肿瘤缩小和肿瘤清除。

在一个方面，本文提供了一种用于治疗有此需要的受试者的癌症的方法，该方法包括向受试者施用有效量的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐、前药、代谢物或衍生物。在一些实施例中，受试者患有黑素瘤。黑素瘤可处于早期或晚期。在一些实施例中，受试者患有结直肠癌。结直肠癌可处于早期或晚期。在一些实施例中，受试者患有非小细胞肺癌。非小细胞肺癌可处于早期或晚期。在一些实施例中，受试者患有胰腺癌。胰腺癌可处于早期或晚期。在一些实施例中，受试者患有血液学恶性肿瘤。血液学恶性肿瘤可处于早期或晚期。在一些实施例中，受试者患有卵巢癌。卵巢癌可处于早期或晚期。在一些实施例中，受试者患有乳腺癌。乳腺癌可处于早期或晚期。在一些实施例中，受试者患有肾细胞癌。肾细胞癌可处于早期或晚期。在一些实施例中，癌症具有升高的T细胞浸润水平。

在一个方面，提供了一种用于治疗有此需要的受试者的病毒感染的方法，该方法包括向受试者施用有效量的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐、前药、代谢物或衍生物。在一个方面，提供了用于增强或促进有此需要的受试者对疫苗(诸如癌症疫苗或个性化癌症疫苗(PCV))或CAR-T细胞疗法的反应的方法，该方法包括向受试者施用有效量的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐、前药、代谢物或衍生物。

本发明所公开的化合物可通过本领域中已知的任何合适的方式来施用。在一些实施例中，式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐、前药、代谢物或衍生物经静脉内、肌内、皮下、局部、经口、经皮、腹膜内、经眶内、通过植入、通过吸入、鞘内、心室内、肿瘤内或鼻内施用。

在一些实施例中，连续施用HPK1拮抗剂。在其他实施例中，间歇地施用HPK1拮抗剂。此外，施用有效量的HPK1拮抗剂治疗受试者可包括单次治疗或者可包括一系列治疗。

应当理解，适当剂量的活性化合物取决于本领域普通技术水平的医师或兽医的知识范围内的的许多因素。活性化合物的剂量可以变化，例如，取决于受试者的年龄、体重、总体健康状况、性别和饮食、施用时间、施用途径、排泄率以及任何药物组合。

还应当理解，用于治疗的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐、前药、代谢物或衍生物的有效剂量在特定治疗过程中可能增加或减少。剂量的变化可能由诊断测定的结果引起并且从诊断测定的结果中变得显而易见。

在一些实施例中，向受试者施用剂量介于约0.001μg/kg和约1000mg/kg之间(包括但不限于约0.001μg/kg、约0.01μg/kg、约0.05μg/kg、约0.1μg/kg、约0.5μg/kg、约1μg/kg、约10μg/kg、约25μg/kg、约50μg/kg、约100μg/kg、约250μg/kg、约500μg/kg、约1mg/kg、约5mg/kg、约10mg/kg、约25mg/kg、约50mg/kg、约100mg/kg和约200mg/kg)的HPK1拮抗剂。

在一些实施例中，提供了一种用于治疗有此需要的受试者的癌症的方法，该方法包括向受试者施用有效量的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐、前药、代谢物或衍生物，其进一步包括施用附加疗法。附加疗法可以是放疗、手术(例如，乳房肿瘤切除术和乳房切除术)、化疗、基因疗法、DNA疗法、病毒疗法、RNA疗法、免疫疗法、骨髓移植、纳米疗法、单克隆抗体疗法或前述疗法的组合。附加疗法可以是辅助疗法或新辅助疗法的形式。在一些实施例中，附加疗法为施用抗转移剂。在一些实施例中，附加疗法为施用副作用限制剂(例如，旨在减轻治疗副作用的发生和/或减轻其严重程度的药物，例如止吐剂等)。在一些实施例中，附加疗法为放疗。在一些实施例中，附加疗法为手术。在一些实施例中，附加疗法为放疗与手术的组合。在一些实施例中，附加疗法为伽玛辐照。在一些实施例中，附加疗法为靶向PI3K/AKT/mTOR通路的疗法、HSP90抑制剂、微管蛋白抑制剂、细胞凋亡抑制剂和/或化学预防试剂。

附加疗法可为化疗剂中的一种或多种。因此，治疗癌症的方法可包括与至少一种化疗剂联合施用本发明所公开的HPK1拮抗剂。

如本文所用，“与……联合”是指在一种治疗方式以外还施用另一种治疗方式。因此，“与……联合”是指在向受试者施用一种治疗方式之前、施用过程中或施用之后施用另一种治疗方式。

例如，HPK1拮抗剂和化疗剂可依次(在不同时间)或同时(在同一时间)施用。HPK1拮抗剂和化疗剂可通过相同的施用途径或不同的施用途径来施用。

在某些实施例中，HPK1拮抗剂与另一种免疫疗法联合施用。例如，HPK1拮抗剂可与靶向PD-L1/PD-1通路的化疗剂或生物制剂联合施用。已知的抑制检查点通路涉及通过PD-1受体的信号传导。程序性死亡1(PD-1)受体及其配体PD-L1和PD-L2与CTLA-4属于同一共调节分子家族。-更多信息参见：http://www.onclive.com/web-exclusives/the-role-of-anti-pd-l1-immunotherapy-in-cancer/2#sthash.cGfYa1T1.dpuf。阻断PD-L1与PD-1和CD80结合的化疗剂或生物制剂可防止PD-L1介导的T细胞活化的抑制/压制。程序性细胞死亡配体-1(PD-L1)在抗原呈递细胞(APC)及其他免疫细胞上广泛表达。它在各种人类癌症的肿瘤细胞中上调，并且与抑制抗肿瘤T细胞免疫有关。PD-L1是一种细胞表面蛋白，与活化的T细胞、B细胞和其他骨髓细胞上的受体PD-1和CD80结合。已发现PD-L1与活化T细胞上的PD-1结合以干扰T细胞增殖并且抑制免疫应答。PD-L1在癌细胞上的过表达可能使这些细胞避免免疫检测和清除。PD-L1在肿瘤细胞上的高表达水平与肿瘤侵袭性增加和预后不良相关联。阻断PD-L1与PD-1结合的化疗剂或生物制剂包括抗PD-L1抗体，诸如德瓦鲁单抗、纳武单抗、pidlizumab、MPDL3280A、MK-3475和BMS-936559等。在一些实施例中，HPK1拮抗剂与PD-1拮抗剂(诸如抗PD-1抗体)、PD-L1拮抗剂(诸如抗PD-L1抗体)和/或PD-L2拮抗剂(诸如抗PD-L2抗体)联合施用。抗PD-L1抗体的实例包括但不限于阿维单抗、阿特珠单抗(也称为MPDL3280A)、派姆单抗(也称为MK-3475)、LY3300054(Eli Lilly)、STI-A1014(Sorrento)、KN035(Suzhou Alphamab)和BMS-936559(Bristol Myers Squibb)。抗PD-1抗体的实例包括但不限于纳武单抗、pidlizumab、PDR001(Novartis)、REGN2810(Regeneron)、BGB-108(BeiGene)、BGB-A317(BeiGene)、JS-001(Shanghai Junshi)、STI-A1110(Sorrento)、INCSHR-1210(Incyte)、PF-06801591(Pfizer)、TSR-042(也称为ANB011；Tesaro/AnaptysBio)、AM0001(ARMO Biosciences)和ENUM 244C8(Enumeral BiomedicalHoldings)。

在另一个实例中，HPK1拮抗剂可与靶向OX40及其配体OX40L(TNF超家族的成员)的化疗剂或生物制剂组合。OX40在活化的CD4(+)和CD8(+)T细胞以及许多其他淋巴样细胞和非淋巴样细胞上表达。从OX40到常规T细胞的协同刺激信号促进分裂和存活，从而增加效应子和记忆群在产生抗原时的克隆扩增。OX40还抑制T调节细胞的分化和活性，进一步放大这一过程。OX40和OX40L还调节T细胞、抗原呈递细胞、自然杀伤细胞和自然杀伤T细胞的细胞因子产生，并且调节细胞因子受体信号传导。作为已知控制T细胞的最重要的协同刺激分子之一，刺激OX40已被证明是针对癌症的治疗免疫策略的目标。某些OX40激动剂包括GBR 830以及Linch等人在Frontiers in Oncology第5卷第1-10页(2015年)中公开的那些，该文献全文以引用方式并入本文。

在其他实例中，HPK1拮抗剂可与靶向CD28、OX40、GITR、CD137、CD27、CD40、ICOS、HVEM、NKG2D、MICA、2B4、IL-2、IL-12、IFNγ、IFNα、TNFα、IL-1、CDN、HMGB1、TLR、PD-L1轴、CTLA-4、TIM-3、BTLA、VISTA、LAG-3、B7H4、CD96、CD226、前列腺素、VEGF、内皮素B、IDO、精氨酸酶、MICA/MICB、TIM-3、IL-10、IL-4、IL-13、TIGIT或TGFβ的化疗剂或生物制剂组合。在其他实例中，HPK1拮抗剂可与包含PD-L1轴、CTLA-4、TIM-3、BTLA、VISTA、LAG-3、B7H4、CD96、TIGIT、CD226、前列腺素、VEGF、内皮素B、IDO、精氨酸酶、MICA/MICB、TIM-3、IL-10、IL-4或IL-13拮抗剂的免疫疗法组合。在其他实例中，HPK1拮抗剂可与包含CD28、OX40、GITR、CD137、CD27、CD40、ICOS、HVEM、NKG2D、MICA、2B4、IL-2、IL-12、IFNγ、IFNα、TNFα、IL-1、CDN、HMGB1或TLR拮抗剂的免疫疗法组合。

在另一个实例中，HPK1拮抗剂可与PCV组合。在另一个实例中，HPK1拮抗剂过继性T细胞治疗组合。

提供了一种抑制HPK1的方法，所述方法包括使受试者体内的HPK1与有效量的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐或者包含式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐的药物组合物接触。

一种用于增强有此需要的受试者的免疫应答的方法，其中该方法包括向所述受试者施用有效量的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐或者包含式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐的药物组合物接触。

在一些实施例中，所述受试者患有癌症。

还提供了一种用于治疗HPK1依赖性疾患的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐或者包含式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或其药用盐的药物组合物接触。

在一些实施例中，所述HPK1依赖性疾患为癌症。

在一些实施例中，其中癌症包括选自由以下项组成的组中的至少一种癌症：结直肠癌、黑素瘤、非小细胞肺癌、卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌、血液学恶性肿瘤和肾细胞癌。

在一些实施例中，所述方法进一步包括向所述受试者施用化疗剂。

在一些实施例中，本发明还提供了本文所述的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或本文所述的药物组合物，其用于如本文所述的抑制HPK1的方法中、用于如本文所述的增强有此需要的受试者的免疫应答的方法中和/或用于如本文所述的治疗HPK1依赖性疾患的方法中。

在一些实施例中，本发明还提供了本文所述的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或本文所述的药物组合物，其用于如本文所述的抑制HPK1的方法中。

在一些实施例中，本发明还提供了本文所述的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或本文所述的药物组合物，其用于如本文所述的增强有此需要的受试者的免疫应答的方法中。

在一些实施例中，本发明还提供了本文所述的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或本文所述的药物组合物，其用于如本文所述的治疗HPK1依赖性疾患的方法中。

在一些实施例中，本发明还提供了本文所述的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或本文所述的药物组合物在生产用于抑制HPK1的药物、用于增强有此需要的受试者的免疫应答的药物和/或用于治疗HPK1依赖性疾患的药物中的用途。

在一些实施例中，本发明还提供了本文所述的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或本文所述的药物组合物在生产用于抑制HPK1的药物中的用途。

在一些实施例中，本发明还提供了本文所述的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或本文所述的药物组合物在生产用于增强有此需要的受试者的免疫应答的药物中的用途。

在一些实施例中，本发明还提供了本文所述的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或本文所述的药物组合物在生产用于治疗HPK1依赖性疾患的药物中的用途。

在一些实施例中，本发明还提供了本文所述的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或本文所述的药物组合物在用于如本文所述的抑制HPK1的方法中、用于如本文所述的增强有此需要的受试者的免疫应答的方法中和/或用于如本文所述的治疗HPK1依赖性疾患的方法中的用途。

在一些实施例中，本发明还提供了本文所述的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或本文所述的药物组合物在用于如本文所述的抑制HPK1的方法中的用途。

在一些实施例中，本发明还提供了本文所述的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或本文所述的药物组合物在用于如本文所述的增强有此需要的受试者的免疫应答的方法中的用途。

在一些实施例中，本发明还提供了本文所述的式(I)或其变体诸如式(IA)、(IB)和(IC)化合物或本文所述的药物组合物在用于如本文所述的治疗HPK1依赖性疾患的方法中的用途。

在一些实施例中，治疗导致受试者在停止治疗后产生持续缓解。“持续缓解”是指停止治疗后减少肿瘤生长的持续作用。例如，与施用阶段开始时的肿瘤大小相比，肿瘤大小可保持相同或减小。在一些实施例中，持续缓解的持续时间至少与治疗持续时间相同，或为治疗持续时间的1.5倍、2.0倍、2.5倍或3.0倍。

本文所公开的治疗方法可能导致部分或完全缓解。如本文所用，“完全缓解”或“CR”是指所有靶病灶消失；“局部缓解”或“PR”是指靶病灶的最长直径(SLD)之和以基线SLD作为参考减小至少30％；并且“疾病稳定”或“SD”是指以治疗开始以来的最小SLD作为参考，靶病灶既未充分缩小以达到PR的要求，也未充分增加以达到PD的要求。如本文所用，“总体缓解率”(ORR)是指完全缓解(CR)率与部分缓解(PR)率之和。

本文所公开的治疗方法可导致被施用HPK1拮抗剂的受试者的无进展生存期和总生存期延长。如本文所用，“无进展生存期”(PFS)是指治疗期间和治疗后被治疗的疾病(例如，癌症)不恶化的时长。无进展生存期可包括患者发生完全缓解或部分缓解的时间以及患者发生疾病稳定的时间。

如本文所用，“总生存期”是指一组受试者中在特定时间段之后可能存活的百分比。

在一些实施例中，接受HPK1拮抗剂给药的受试者为哺乳动物，诸如驯养的动物(例如，牛、绵羊、猫、犬和马)、灵长类动物(例如，人和非人灵长类动物诸如猴)、兔以及啮齿类动物(例如，小鼠和大鼠)。在一些实施例中，接受治疗的受试者是人。

需要治疗癌症的受试者可能是表现出癌症症状的人、已诊断出患有癌症的受试者、处于癌症缓解期的受试者或罹患癌症的风险高的受试者(例如，遗传易感性、某些饮食或环境暴露)。

在本文所述的任何方法中，在一方面，受试者是人，诸如需要该方法的人。受试者可能是已诊断出或疑似患有HPK1依赖性疾患诸如癌症的人。个体可能是无可检测的疾病但具有一种或多种患癌风险因素的人。

进一步提供了用于执行本文详述的方法的试剂盒，其包含本文所述的一种或多种化合物或包含本文所述的化合物的药物组合物。试剂盒可采用本文所公开的任何化合物。在一个变体中，试剂盒采用本文所述的化合物或其药用盐。试剂盒可用于本文所述的任何一种或多种用途，因此可包含用于治疗HPK1依赖性疾患诸如癌症的说明书。在一些实施例中，试剂盒包含治疗癌症的使用说明书。

试剂盒通常包含合适的包装。试剂盒可包含一个或多个包含本文所述的任何化合物的容器。各种组分(如果存在多于一种组分)可包装在单独的容器中，或者某些组分可在交叉反应性和有效期允许的情况下组合在一个容器中。试剂盒中的一种或多种组分可以是无菌的和/或可以容纳于无菌包装中。

试剂盒可以是单位剂型、大包装(例如，多剂量包装)或亚单位剂量。例如，可提供包含足够剂量的本文所公开的化合物(例如，治疗有效量)和/或可用于HPK1依赖性疾患(例如，癌症)的第二药物活性化合物的试剂盒，为个体提供长时间(诸如一周、2周、3周、4周、6周、8周、3个月、4个月、5个月、7个月、8个月、9个月或更长时间)的有效治疗。试剂盒还可包括多个单位剂量的化合物和使用说明书，并且包装的数量足以在药房(例如，医院药房和复配药房)中储存和使用。

试剂盒可任选地包括一组说明书，通常为书面说明书，但包含说明书的电子存储介质(例如，磁盘或光盘)也是可接受的，其中涉及本发明的方法的组分的使用。试剂盒随附的说明书通常包括有关组分及其施用于受试者的信息。

下列实例以举例的方式而非限制性的方式给出。

实例

缩写

通用手性纯化方案

使用Waters Thar Prep100制备SFC系统或Waters Thar Investigator半制备系统，使用超临界流体色谱法(SFC)纯化化合物。

使用适当的色谱柱(选自YMC Amylose-C、YMC Cellulose-C、YMC Cellulose-SC、Phenomenex LUX Cellulose-3和Phenomenex LUX Cellulose-40)纯化化合物。

基于甲醇、乙醇或异丙醇溶剂体系，在未改性或碱性条件下，选择适当的等度方法。所使用的标准方法为改性剂/CO

收集的馏分通过SFC(带有Waters SQD的Waters/Thar SFC系统或带有Waters QDa的Waters UPCC)进行分析。通过真空离心浓缩包含所需产物的馏分。

所有样品均通过非手性系统进行预纯化，并在SFC手性纯化之前检查其纯度。

通用色谱法和分析方法

表和实验部分中参考的LCMS方法的说明：

方法A：使用反相色谱柱(Acquity UPLC BEH C

方法B：使用反相色谱柱(Acquity UPLC BEH C

方法C：使用反相色谱柱(XBridge Prep C18 5um OBD，19x250mm，色谱柱为室温)在Agilent Technologies 1260 Infinity纯化系统和Agilent 6120系列单四极杆质谱仪上进行实验。检测紫外线，二极管阵列200-500nm。用溶剂A洗脱：0.1％氨水；溶剂B：在乙腈中的0.1％氨。梯度：经22min10％-95％B。

方法D：使用反相色谱柱(XSelect Prep C18 5um OBD，19x250mm，色谱柱为室温)在Agilent Technologies 1260Infinity纯化系统和Agilent 6120系列单四极杆质谱仪上进行实验。检测紫外线，二极管阵列200-500nm。用溶剂A洗脱：在水中的0.1％甲酸；溶剂B：在乙腈中的0.1％甲酸。梯度：经22min 10％-95％B。

合成实例

以下为制备用于制备通用方法和表中所述化合物的中间体的程序。当化合物中手性中心的绝对立体构型(R)-或(S)-未确定或任意指定时，该化合物名称中的立体构型可以指定为(RS)-或(SR)-。在存在两个手性中心的化合物中，相对立体化学可以用名称指定，尽管每个手性中心的绝对立体构型是不确定的或任意分配的。例如，在化合物名称包含(1RS,3RS)-名称的情况下，化合物可以为(1R,3R)-和/或(1S,3S)-；如果化合物名称包含(1RS,3SR)-名称，则该化合物可以为(1R,3S)-和/或(1S,3R)-。

实例1

5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮

步骤1：5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶

在0℃，向5-溴-4-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(50g，216mmol)在无水DMF(500mL)中的溶液加入氢化钠(在油中60％，17.3g，432mmol)。将反应混合物在室温搅拌45min，然后冷却至-78℃。加入2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯(54g，324mmol)，并将混合物在室温搅拌16h。将反应混合物倒入冰水(200mL)中，然后用EtOAc(3x300mL)萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

步骤2：3,3,5-三溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮

将5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(70.0g，193.5mmol)和NBS(103.3g，580mmol)在叔丁醇(1.5L)中的混合物在室温搅拌3h。将反应混合物真空浓缩，得到标题化合物(67g，65％)，为黄色油。LCMS(ESI)[M+H]

步骤3：5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮

将3,3,5-三溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮(55g，102.7mmol)和锌粉(137.5g，2.1mol)的THF(1L)和饱和氯化铵(1L)中的混合物在室温搅拌20min。将反应混合物过滤，并将滤液倒入水(500mL)中，并用EtOAc(3x 1L)萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

实例2

5-溴-4-甲氧基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮

以类似于针对5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮所描述的方式制备标题化合物。LCMS[M+Na]

实例3

5-溴-4-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮

以类似于以上针对5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮所描述的方式制备标题化合物。LCMS[M+Na]+379.0/381.0。

实例4

5'-溴-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

步骤1：螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

在-78℃，向7-氮杂噁唑(507mg，3.8mmol)在THF(25mL)中的浆液中滴加正丁基锂(2.5N己烷，3.0mL，7.86mmol)和TMEDA(1.1mL，7.6mmol)。将反应混合物在-78℃搅拌1h，然后用1,4-二碘丁烷(0.5mL，3.8mmol)处理。将反应混合物搅拌18h，同时使温度升至室温。用饱和氯化铵水溶液淬灭反应，并用EtOAc进行萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

步骤2：5'-溴螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

将螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(137mg，0.73mmol)和NBS(130mg，0.73mmol)在DMF(1.5mL)中的溶液在室温搅拌16h。将反应混合物用水稀释，并且用EtOAc进行萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

步骤3：5'-溴-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

向5'-溴螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(149mg，0.56mmol)在THF(1mL)中的溶液加入硼烷(在THF中1N，2mL，2mmol)。将反应混合物在室温搅拌16h。加入另一部分的硼烷(在THF中1N，2mL，2mmol)，并将反应混合物在室温搅拌16h。将反应用MeOH淬灭并浓缩。将残余物在Hcl(1.25N，20mL)中稀释，并回流2h，然后在室温搅拌2天。将混合物浓缩，并将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在DCM中的1-10％MeOH.NH

实例5

5'-氯-1',2'-二氢螺[吡咯烷-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5-酮

步骤1：5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-酮肟

将盐酸羟胺(720mg，10.36mmol)添加至5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-酮(340mg，1.036mmol)在吡啶(10mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后在Et

步骤2：5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[吡咯烷-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5-酮

将甲磺酰氯(0.088mL，1.143mmol)滴加到5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-酮肟(263mg，0.762mmol)和三乙胺(0.16mL，1.143mmol)在无水MeCN中的溶液。将反应混合物在室温搅拌3h。加入另外的三乙胺(0.16mL，1.143mmol)和甲磺酰氯(0.088mL，1.143mmol)，并继续搅拌另外2h。将混合物在EtOAc和水(15mL)之间分配。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤3：5'-氯-1',2'-二氢螺[吡咯烷-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5-酮

将5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[吡咯烷-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5-酮(110mg，0.32mmol)的在TFA/水(95:5；2mL)中的溶液在密封管中于80℃加热18小时。将冷却的混合物真空干燥，并与DCM(2x5mL)共沸。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度在环己烷中的0-10％MeOH.NH

实例6

5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯

步骤1：3,3-二烯丙基-5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮

将烯丙基溴(1.90mL，22.0mmol)滴加至5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮(3.78g，10.0mmol)和碳酸铯(8.15g，25.0mmol)在DMF(30mL)中的搅拌混合物。将反应混合物在室温搅拌3小时，然后在EtOAc和水之间分配。将有机萃取物用水(x2)、盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：5'-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-2'(1'H)-酮

将3,3-二烯丙基-5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮(3.95g，8.63mmol)和Grubbs II催化剂(100mg)在DCM中的溶液在室温搅拌18h。将混合物浓缩。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度在环己烷中的0-20％EtOAc)得到标题化合物(3.78g，定量)，为浅黄色油。LCMS(ESI)[M+H-CH

步骤3：5'-溴-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-2'(1'H)-酮

将5'-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-2'(1'H)-酮(8.63mmol)在TFA(12mL)和DCM(36mL)中的溶液在室温搅拌1h。将反应混合物在DCM和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。将有机萃取物浓缩，并吸收在MeOH.NH

步骤4：5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯

在0℃，向5'-溴-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-2'(1'H)-酮(1.35g，4.51mmol)在DCM(33mL)中搅拌的悬浮液滴加DIBAL(在DCM中1M，21.0mL，21.0mmol)。将反应混合物在0℃搅拌5min，然后使其升温至室温，并搅拌18h。将反应冷却至0℃，在剧烈搅拌下小心加入水(7mL)，并使所得的凝胶状混合物温热至室温。加入EtOAc(约30mL)和碳酸氢钠(约7g)。将所得悬浮液通过硅藻土(celite)过滤，并用DCM/EtOAc洗涤。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在环己烷中的0-100％EtOAc)得到标题化合物(0.91g，71％)，为黄色固体。

实例7

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇和(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

步骤1：5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯

将氢化钠(油中60％，0.84g，21mmol)分批添加到5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯(5.0g，17.51mmol)在THF(90mL)中的冰冷却溶液。10min后，加入1-(溴甲基)-4-甲氧基苯(3.09mL，22.76mmol)和15-冠醚-5(100mg，0.45mmol)，并将混合物在室温搅拌3h。在冰浴中冷却后，加入饱和氯化铵水溶液，并将混合物用EtOAc萃取两次。将有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇和(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

经5min将硼烷二甲基硫醚络合物(1.6mL，16.9mmol)添加到5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯(4.57g，11.26mmol)在THF(60mL)中的冰冷却溶液。将混合物在室温搅拌45min，然后在冰浴中重新冷却。首先非常小心地加入NaOH(1N水溶液，16.9mL，16.9mmol)，然后加入过氧化氢(30％，3.34mL，29.5mmol)，并将混合物在室温搅拌16h。加入EtOAc和饱和氯化铵水溶液。将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物用10％的焦亚硫酸钠水溶液洗涤，然后盐水洗涤，干燥(Na

步骤3：(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基苯甲酸甲酯

经5min，向(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇(1.54g，3.63mmol)，苯甲酸(0.53g，4.36mmol)和三苯基膦(1.14g，4.36mmol)在THF(24mL)中的冰冷却溶液滴加偶氮二甲酸二异丙酯(0.86mL，4.36mmol)。将混合物在室温搅拌1h。蒸发溶剂，并将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度在环己烷中的0-10％EtOAc)，得到标题化合物(1.92g，100％)，为无色固体。LCMS(ESI)[M+H]

步骤4：(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

向(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基苯甲酸甲酯(1.91g，3.62mmol)在THF(15mL)和MeOH(5mL)中的溶液，加入氢氧化锂水合物(0.311g，7.4mmol)在水(15mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌16h，然后加入HCl(1N水溶液，8mL)。将混合物浓缩，并将残余物在EtOAc与碳酸氢钠水溶液之间分配。然后将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例8

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇和(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

将硼烷二甲基硫醚复合物(0.115mL，1.21mmol)滴加到5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯(230mg，0.805mmol)在THF(4mL)中的冰冷却溶液。将混合物在0℃搅拌1h，然后在室温搅拌2h，然后在冰浴中重新冷却。首先非常小心地加入NaOH(1N水溶液，1mL，1mmol)，然后加入过氧化氢(30％，0.2mL，2mmol)，并将混合物在室温搅拌16h。加入EtOAc和饱和氯化铵水溶液。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用10％焦亚硫酸钠水溶液洗涤，然后用盐水洗涤，干燥(Na

实例9

(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯

经5min将甲磺酰氯(0.35mL，4.53mmol)添加至(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇(1.279g，3.02mmol)和三乙胺(0.84mL，6.04mmol)在DCM(25mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌2h，然后用DCM稀释并用碳酸氢钠水溶液洗涤。然后将水相用DCM萃取，并将合并的有机萃取物干燥(Na

实例10

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈

将氰化钠(0.342g，6.97mmol)添加到(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯(0.70g，1.39mmol)和15-冠醚-5(0.083mL，0.42mmol)在DMSO(10mL)中的溶液。将混合物在80℃搅拌1.5h。将冷却的反应混合物在EtOAc和水之间分配。然后将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物先后用水和盐水洗涤，干燥(Na

实例11

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈和(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酰胺

将(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈(0.408g，0.944mmol)，苯甲醚(1mL)和TFA(10mL)的混合物在80℃搅拌20h。将冷却的反应混合物蒸发。加入甲苯并蒸发。将残留物溶于MeOH/H

实例12

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酸

将(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈(0.216g，0.50mmol)在HCl(12N水溶液,25mL)中的溶液在90℃加热1.5h。将冷却的混合物在减压下蒸发。加入甲苯，并将混合物浓缩(2x)，得到标题化合物(749mg，假定为定量的)，为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]

实例13

5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-酮

将5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇(2.38g，5.62mmol)在DCM(20mL)中的溶液用Dess-Martin高碘烷(2.86g，6.74mmol)处理。在室温搅拌1.5h后，将反应混合物在水和DCM之间分配。将水层用更多的DCM进行萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

实例14

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯

经5min将甲磺酰氯(0.53mL，6.89mmol)添加至(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇(1.945g，4.59mmol)和三乙胺(1.28mL，9.18mmol)在DCM(30mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌30min，然后用DCM稀释并用碳酸氢钠水溶液洗涤。然后将水相用DCM萃取，并将合并的有机萃取物干燥(Na

实例15

(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈

将氰化钠(1.07g，6.97mmol)添加到(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯(2.19g，4.37mmol)和15-冠醚-5(0.26mL，1.31mmol)在DMSO(35mL)中的溶液。将混合物在60℃搅拌1h，然后在80℃搅拌1h。将冷却的反应混合物在EtOAc和水之间分配。将水相用更多EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用水、盐水洗涤，干燥(Na

实例16

(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酸

将(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈(0.216g，0.50mmol)，二噁烷(1mL)和HCl(6N水溶液，4mL)的混合物在微波辐射下于130℃加热1.5h。将冷却的混合物在减压下蒸发。将残余物在SCX-2管柱上纯化(用MeCN水溶液，MeCN，在MeCN中的10％NH

实例17

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈和(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈

将(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈(0.40g，0.92mmol)和碘甲烷(0.075mL，1.2mmol)在THF(5mL)中的溶液冷却至-78℃，并经5min添加双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂溶液(在THF中1M，1.02mL，1.02mmol)。将混合物在-78℃搅拌30min，然后用饱和氯化铵水溶液淬灭，温热至室温，用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例18

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-甲基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈和(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-甲基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酰胺

将(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈(0.337g，0.75mmol)，苯甲醚(0.5mL)和TFA(5mL)的混合物在80℃搅拌22h。将冷却的反应混合物蒸发。加入甲苯并蒸发。将残余物在SCX-2管柱上纯化(先后用MeOH、1N MeOH.NH

实例19

(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-3-甲基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈和(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-3-甲基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酰胺

以类似于针对(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-甲基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈和(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-甲基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酰胺所描述的方式制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例20

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-乙基-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈

将(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈(0.291g，0.67mmol)和碘乙烷(0.108mL，1.34mmol)在THF(5mL)中的溶液冷却至-78℃，并经5min添加双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂溶液(在THF中1M，0.81mL，0.81mmol)。将混合物在-78℃搅拌1h，然后用饱和氯化铵水溶液淬灭，温热至室温，用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例21

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-乙基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈和(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-乙基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酰胺

将(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-乙基-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈(0.221g，0.48mmol)，苯甲醚(0.35mL)和TFA(3.5mL)的混合物在80℃搅拌22h。将冷却的反应混合物蒸发。加入甲苯并蒸发。将残余物在SCX-2管柱上纯化(先后用MeOH、1NMeOH.NH

实例22

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-甲基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酸

将(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-甲基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈(0.132g，0.40mmol)和HCl(12N,5mL)的混合物在100℃搅拌1.25h。将冷却的反应混合物在减压下蒸发。加入甲苯并蒸发(2x)，得到标题化合物，为盐酸盐(163mg，假定为定量的)，为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]

实例23

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-甲氧基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]和(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-3-甲氧基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

步骤1：(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-甲氧基-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]和(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-3-甲氧基-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

将氢化钠(油中60％，13.5mg，0.34mmol)添加到(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇和(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇(0.130g，0.306mmol)，碘甲烷(0.038mL，0.612mmol)和15-冠醚-5(0.02mL)在THF(3mL)中的冰冷溶液。将混合物在室温搅拌30min，然后加入更多的氢化钠(在油中60％，5mg，0.13mmol)和碘甲烷(0.015mL，0.24mmol)。继续搅拌16h。加入饱和氯化铵水溶液，并将混合物用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用水、盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-甲氧基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]和(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-3-甲氧基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

将(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-甲氧基-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]和(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-3-甲氧基-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶](0.0864g，0.20mmol)在TFA(4.3mL)和水(0.23mL)中的混合物在80℃搅拌16h。加入甲苯并蒸发(2x)。将残余物在SCX-2管柱上纯化(先后用MeOH和1N MeOH.NH

实例24

(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酸甲酯

将浓硫酸(1mL)添加到(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酸(0.165g，0.50mmol)在MeOH(10mL)中的悬浮液。将得到的溶液在室温搅拌2h，然后减压下浓缩。将残余物在EtOAc与碳酸氢钠水溶液之间分配。将水相用的EtOAc萃取，并将合并的萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例25

((1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)甲醇

经2min，将DIBAL(在DCM中1N，0.89mL，0.89mmol)添加到(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酸甲酯(0.103g，0.30mmol)在DCM(2mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌30min，然后依次用水(0.035mL)，15％NaOH(0.035mL)和水(0.09mL)处理。将混合物搅拌1.5h，然后加入硅藻土和Na

实例26

((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)甲醇

以类似于针对((1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)甲醇所描述的方法，从(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例27

(5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)甲胺

将硼烷二甲硫醚络合物(0.1mL，1.07mmol)添加到(1'S,3R)-5-溴-4-氯-螺[1,2-二氢吡咯并[2,3-b]吡啶-3,3'-环戊烷]-1'-甲酰胺(177mg，0.540mmol)在THF(5mL)中的悬浮液中。将混合物在70℃搅拌4h。加入TFA(0.5mL)，并将混合物搅拌15min。蒸发溶剂至干，将残余物通过SCX-2管柱(先后用MeOH和MeOH.NH

实例28

5'-溴-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

将氢化钠(油中60％，1.68g，42mmol)分批添加到5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯(10.0g，35mmol)在THF(60mL)中的冰冷却溶液。10min后，加入二碳酸二叔丁酯(11.46g，52.53mmol)在THF(40mL)中的溶液，并将混合物在室温搅拌6h。在冰浴中冷却后，用饱和氯化铵水溶液洗涤，并将混合物用EtOAc萃取两次。加入10％的柠檬酸水溶液，然后用EtOAc进一步萃取。将有机层用盐水洗涤，干燥(Na

实例29

(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-3-羟基螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯和(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-羟基螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

经5min将硼烷二甲基硫醚络合物(1mL，10.53mmol)添加到5'-溴-4'-叔氯叔螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(2.8g，7.26mmol)在THF(30mL)中的冰冷却溶液。将混合物在室温搅拌1h，然后在冰浴中重新冷却。加入另一部分的硼烷二甲基硫醚络合物(0.15mL，1.58mmol)。将混合物在室温搅拌20min，然后在冰浴中重新冷却。首先非常小心地加入氢氧化钠(1N水溶液，10.7mL，10.7mmol)，然后加入过氧化氢(30％，2.14mL，20.93mmol)，并将混合物在室温搅拌18h。加入EtOAc和饱和氯化铵水溶液。将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物用10％的焦亚硫酸钠水溶液洗涤，然后盐水洗涤，干燥(MgSO

实例30

5'-溴-4'-氯-3-氧代螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

将Dess-Martin高碘烷(832mg，1.96mmol)添加到(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-3-羟基螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯和(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-羟基螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(660mg，1.63mmol)在DCM(9mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌18h，然后用DCM稀释并用水洗涤。将水相用DCM萃取，并将合并的有机萃取物干燥(MgSO

实例31

(1RS,3SR)-3,5'-二溴-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯和(1RS,3RS)-3,5'-二溴-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

将(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-3-羟基螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(523.mg，1.3mmol)在THF(8mL)中的溶液用三苯基膦(441mg，1.68mmol)处理，然后用四溴化碳(558mg，1.68mmol)处理。将混合物在室温搅拌2h，然后用EtOAc和水稀释。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO

实例32

(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-3-((甲磺酰基)氧基)螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

经5min将甲磺酰氯(0.03mL，0.41mmol)添加到(1R,3S)-5'-溴-4'-氯-3-羟基螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(111.mg，0.27mmol)和三乙胺(0.08mL，0.55mmol)在DCM(5mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌1h，然后用DCM稀释并用碳酸氢钠水溶液洗涤。然后将水相用DCM萃取，并将合并的有机萃取物干燥(Na

实例33

5'-溴-4'-氯-3-甲基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

在-50℃，向5'-溴-4'-氯-3-氧代螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(274mg，0.68mmol)在THF(3mL)中的溶液加入甲基溴化镁(在Et

实例34

5'-溴-4'-氯-3-(三氟甲基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

步骤1：5'-溴-4'-氯-3-羟基-3-(三氟甲基)螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

在0℃，向5'-溴-4'-氯-3-氧代螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(430mg，1.07mmol)和氟化铯(10mg，0.066mmol)在THF(3mL)中的溶液加入三氟甲基三甲基硅烷(180mg，1.28mmol)在THF(1mL)中的溶液。使反应混合物温热至室温，并在室温搅拌16h。再加入三氟甲基三甲基硅烷(90mg，0.633mmol)和氟化铯(30mg，0.19mmol)，并将反应混合物搅拌16h。浓缩混合物，并将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在环己烷中的0-20％EtOAc)，得到标题化合物(197mg，39％)，为白色固体。

步骤2：5'-溴-4'-氯-3-(三氟甲基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

将5'-溴-4'-氯-3-羟基-3-(三氟甲基)螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(193mg，0.41mmol)在TFA/DCM(1:2,3mL)中的溶液在室温搅拌2h，然后用DCM稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。将有机萃取物干燥(MgSO

实例35

(2RS,3'SR)-5”-溴-4”-氯-1”-(4-甲氧基苄基)-1”,2”-二氢二螺[环氧乙烷-2,1'-环戊烷-3',3”-吡咯并[2,3-b]吡啶]和(2RS,3'RS)-5”-溴-4”-氯-1”-(4-甲氧基苄基)-1”,2”-二氢二螺[环氧乙烷-2,1'-环戊烷-3',3”-吡咯并[2,3-b]吡啶]

将氢化钠(60％油，91mg，2.28mmol)在DMSO(1.5mL)中的悬浮液在70℃预热30min，然后冷却至室温，加入三甲基碘化亚砜(0.6g，2.73mmol)。将反应混合物搅拌20min，并冷却至0℃。添加5-溴-4-氯-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]螺[2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3,3'-环戊烷]-1'-酮(0.32g，0.76mmol)在THF(3mL)中的溶液，并将混合物在室温搅拌16h。将反应混合物浓缩，然后用EtOAc和水稀释。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

实例36

5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)甲磺酸甲酯

步骤1：(5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)甲醇

在室温，向5”-溴-4”-氯-1”-(4-甲氧基苄基)-1”,2”-二氢二螺并[环氧乙烷-2,1'-环戊烷-3',3'-吡咯并[2,3-b]吡啶](1.08g，2.48mmol)在THF(20mL)中的溶液添加氰基硼氢化钠(0.38g，6.2mmol)，然后添加作为在THF(5mL)中的溶液的三氟化硼乙醚(0.31mL，2.48mmol)。将反应混合物搅拌2h，然后用EtOAc和盐水稀释。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

步骤2：5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)甲磺酸甲酯

向(5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)甲醇(390mg，0.90mmol)和三乙胺(0.25mL，1.8mmol)在DCM(15mL)中的溶液，添加作为在DCM(3mL)中的溶液的甲磺酰氯(0.1mL，1.35mmol)。将反应混合物在室温搅拌20min，然后用DCM和饱和碳酸氢钠水溶稀释。将水层用另外的DCM进行萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

实例37

2-(-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)乙腈

步骤1：2-(5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)乙腈

将氰化钠(90mg，1.81mmol)添加到5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯(310mg，0.60mmol)和15-冠醚-5(0.04mL，0.18mmol)在DMSO(3mL)中的溶液。将反应混合物在90℃加热2h。将反应混合物用EtOAc和水稀释反应混合物。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

将2-(5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)乙腈(90mg，0.21mmol)在TFA/水(20:1,2.1mL)中的溶液在密封管中于80℃加热1.5h。将反应混合物浓缩，然后用DCM和饱和碳酸氢钠水溶稀释。将水层用另外的DCM进行萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

实例38

2-(5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)乙酰胺

将2-(5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)乙腈(128mg，0.287mmol)在TFA/水(10:1,2.2mL)中的溶液在密封管中于80℃加热16h。将反应混合物浓缩，然后用DCM和饱和碳酸氢钠水溶稀释。将水层用另外的DCM进行萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

实例39

2-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-羟基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)乙腈

步骤1：2-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-羟基-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)乙腈和2-((1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-3-羟基-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)乙腈

在-78℃，将正丁基锂(1.6N，0.39mL，0.63mmol)添加到MeCN(在THF中1N，0.63mL，0.63mmol)在THF(3mL)中的溶液。将反应混合物搅拌15分钟，然后添加5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-酮(0.22g，0.52mmol)在THF(2mL)中的溶液。将反应混合物在-78℃搅拌1h，然后通过加入饱和氯化铵水溶液淬灭。将混合物在EtOAc和水之间分配。将合并的有机萃取物干燥(Na

步骤2：2-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-羟基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)乙腈

将2-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-羟基-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)乙腈(78mg，0.169mmol)在TFA/水(20:1,2.1mL)中的溶液在密封管中于80℃加热3h。将反应混合物浓缩，然后用DCM和饱和碳酸氢钠水溶稀释。将水层用另外的DCM进行萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

实例40

2-((1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-3-羟基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)乙腈

将2-((1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-3-羟基-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)乙腈(70mg，0.140mmol)在TFA/水(20:1,2.1mL)中的溶液在密封管中于80℃加热3h。将反应混合物浓缩，然后用DCM和饱和碳酸氢钠水溶稀释。将水层用另外的DCM进行萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

实例41

5'-溴-4'-氯-3-((甲基磺酰基)亚甲基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

步骤1：5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-3-((甲基磺酰基)亚甲基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

在-78℃，向(甲基磺酰基甲基)膦酸二乙酯(84mg，0.36mmol)在THF(2mL)中的溶液，加入正丁基锂(1.6N，0.23mL，0.36mmol)。将反应混合物在-78℃搅拌30min，然后添加5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-酮(153mg，0.36mmol)在THF(2mL)中的溶液。使反应混合物温热至室温，搅拌16h，然后用EtOAc和饱和氯化铵水溶液稀释。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

步骤2：5'-溴-4'-氯-3-((甲基磺酰基)亚甲基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

将5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-3-((甲基磺酰基)亚甲基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶](130mg，0.26mmol)在TFA/水(20:1,2.1mL)中的溶液在密封管中于80℃加热5h，然后在室温加热3天。将反应混合物浓缩，然后用DCM和饱和碳酸氢钠水溶稀释。将水层用另外的DCM进行萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

实例42

2-(5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-亚烷基)乙腈

步骤1：2-(5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-亚烷基)乙腈

在室温，向氰基甲基膦酸二乙酯(250mg，1.52mmol)在THF(5mL)中的溶液加入叔丁醇钾(在THF中1M，1.4mL，1.4mmol)。将反应混合物在-78℃搅拌30min，然后添加5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-酮(535mg，1.27mmol)在THF(3mL)中的溶液。使反应混合物温热至室温，搅拌2h，然后用EtOAc和饱和氯化铵水溶液稀释。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

实例43

步骤2：2-(5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-亚烷基)乙腈

将2-(5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-亚烷基)乙腈(452mg，1.0mmol)在TFA(3mL)中的溶液在密封管中于70℃加热8h，然后在室温加热16h。将反应混合物浓缩，然后用DCM和饱和碳酸氢钠水溶稀释。将水层用另外的DCM进行萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

实例44

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-(1H-1,2,4-三唑-5-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

将(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酰胺(75mg，0.227mmol)和N,N-二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛(1.25mL)的混合物在60℃搅拌1h。加入甲苯并蒸发(2x)。向残余物中加入乙酸(2mL)和水合肼(0.5mL)。将混合物在90℃搅拌2h，然后蒸发。将残余物在EtOAc与碳酸氢钠水溶液之间分配。然后将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物先后用水和盐水洗涤，并蒸发。将残余物通过二氧化硅色谱法纯化(溶剂梯度，在DCM中的2-12％MeOH.NH

实例45

5-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-3-甲基-1,2,4-噁二唑

向(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酸的HCl盐(89mg，0.27mmol)和N'-羟基乙脒(24mg，0.32mmol)在DMF(1mL)中的溶液，加入DIPEA(0.19mL，1.07mmol)。经5min，分批加入HATU(0.153g，0.40mmol)。将混合物在室温搅拌20min，然后在EtOAc和碳酸氢钠水溶液之间分配。然后将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物先后用水和盐水洗涤，并蒸发。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在DCM中的2-10％MeOH.NH

实例46

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-N-甲基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酰胺

将(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈(80mg，0.256mmol)和HCl(6M水溶液，6mL)的混合物在密封管中于90℃加热1.25h。将冷却的混合物蒸发至干。加入甲苯并蒸发(2x)，得到(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酸，为HCl盐。向该盐中加入甲胺盐酸盐(26mg，0.384mmol)，DMF(1mL)和DIPEA(0.266mL，1.54mmol)。经5min，分批加入HATU(0.195g，0.512mmol)。将混合物在室温搅拌30min，然后在EtOAc和碳酸氢钠水溶液之间分配。然后将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物先后用水和盐水洗涤，并蒸发。将残余物通过二氧化硅色谱法纯化(溶剂梯度，在DCM中的2-20％MeOH.NH

实例47

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-N,N-二甲基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酰胺

向(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酸的HCl盐(80mg，0.24mmol)在DMF(0.75mL)中的溶液，加入DIPEA(0.25mL，1.45mmol)和二甲胺盐酸盐(29.5mg，0.36mmol)。经5min，分批加入HATU(0.183g，0.48mmol)。将混合物在室温搅拌20min，然后在EtOAc和碳酸氢钠水溶液之间分配。然后将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物先后用水和盐水洗涤，并蒸发。将残余物通过二氧化硅色谱法纯化(溶剂梯度，在DCM中的2-10％MeOH.NH

实例48

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-N-(2-羟基乙基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酰胺

将(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-氰基螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(0.746g，1.81mmol)和HCl(6M水溶液，25mL)的混合物在密封管中于90℃搅拌1.5h。将冷却的混合物蒸发至干。加入甲苯并蒸发(2x)，得到(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酸，为HCl盐(0.749g)。向该酸(85.2mg，0.26mmol)中加入DMF(0.75mL)，DIPEA(0.18mL，1.03mmol)和2-氨基乙醇(0.023mL，0.39mmol)。经5min，分批加入HATU(0.195g，0.512mmol)。将混合物在室温搅拌20min，然后在EtOAc和碳酸氢钠水溶液之间分配。然后将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物先后用水和盐水洗涤，并蒸发。将残余物通过二氧化硅色谱法纯化(溶剂梯度，在DCM中的2-12％MeOH.NH

实例49

1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)咪唑啉-2-酮

步骤1：N-1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)乙烷-1,2-二胺

将(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶基]-3-基甲磺酸酯(0.125g，0.25mmol)和乙二胺(0.5mL，7.48mmol)的混合物在70℃搅拌45min。加入甲苯并蒸发(2x)，并将残余物在氯仿和水之间分配。将水相用更多氯仿萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

步骤2：1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)咪唑啉-2-酮

在室温，将1,1'-羰基二咪唑(0.068g，0.42mmol)添加到N-1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)乙烷-1,2-二胺(0.13g，0.28mmol)在MeCN(2mL)中的溶液。将混合物在60℃搅拌1.5h，然后冷却至室温，并在氯仿和水之间分配。然后将水相用更多的氯仿萃取，并将合并的有机萃取物干燥(Na

步骤3：1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)咪唑啉-2-酮

将1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)咪唑啉-2-酮(0.1125g，0.23mmol)在TFA(2.5mL)和苯甲醚(0.25mL)中的混合物在70℃搅拌16h。加入甲苯并蒸发(2x)。将残余物在SCX-2管柱上纯化(先后用MeOH和MeOH.NH

实例50

3-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)噁唑烷-2-酮

步骤1：2-(((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)氨基)乙-1-醇

将(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯(142mg，0.28mmol)和2-氨基乙醇(0.75mL，12.4mmol)的混合物在80℃搅拌2h。将冷却的反应混合物在EtOAc和碳酸氢钠水溶液之间分配。将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物先后用水和盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：3-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)噁唑烷-2-酮

向2-(((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)氨基)乙-1-醇(125.5mg，0.27mmol)在甲苯(0.5mL)中的冰冷却溶液加入12.5％的氢氧化钾水溶液(0.6mL，1.34mmol)。经5min，滴加光气溶液(在甲苯中20％，0.27mL，0.54mmol)。将混合物在冰浴中搅拌另外的15min，然后在EtOAc和碳酸氢钠水溶液之间分配。将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物先后用水和盐水洗涤，干燥(Na

步骤3：3-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)噁唑烷-2-酮

将3-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)噁唑烷-2-酮(107mg，0.22mmol)在TFA(3mL)和苯甲醚(0.3mL)中的混合物在70℃搅拌16h。加入甲苯并蒸发(2x)。将残余物在SCX-2管柱上纯化(先后用MeOH和MeOH.NH

实例51

5-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-甲基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-3-甲基-1,2,4-噁二唑

向(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-甲基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酸HCl盐(0.14g，0.41mmol)和N'-羟基乙脒(45mg，0.61mmol)在DMF(2mL)中的冰冷却溶液，加入DIPEA(0.35mL，2.03mmol)。经5min，分批加入HATU(0.231g，0.61mmol)。将混合物在室温搅拌20min，然后在EtOAc和碳酸氢钠水溶液之间分配。然后将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物先后用水和盐水洗涤，并蒸发。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在DCM中的2-10％MeOH.NH

实例52

(1RS,3RS,4RS)-5'-溴-4'-氯-4-甲氧基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇和(1RS,3SR,4SR)-5'-溴-4'-氯-4-甲氧基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

步骤1：5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢-6-氧杂螺[双环[3.1.0]己烷-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

将TFA(1.52mL，19.72mmol)添加到5-溴-4-氯-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]螺[2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3,4'-环戊烯](4g，9.86mmol)在DCM(30mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌5min，然后加入3-氯过苯甲酸(4.84g，19.63mmol)，并将混合物搅拌3h。将混合物用DCM(50mL)稀释，并用碳酸钠水溶液(2x50mL)洗涤。将合并的有机相用水(50mL)洗涤，干燥(Na

步骤2：(1RS,3RS,4RS)-5'-溴-4'-氯-4-甲氧基-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇和(1RS,3SR,4SR)-5'-溴-4'-氯-4-甲氧基-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

将5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢-6-氧杂螺[双环[3.1.0]己烷-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶](200mg，0.470mmol)和硫酸(4.7mg，0.05mmol)在MeOH(3mL)中的混合物在22℃搅拌3天，然后在80℃的微波辐射下加热10min。蒸发溶剂，并将残余物在EtOAc和碳酸氢钠饱和水溶液(20mL)之间分配。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水(15mL)洗涤，并干燥(Na

步骤3：(1RS,3RS,4RS)-5'-溴-4'-氯-4-甲氧基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇和(1RS,3SR,4SR)-5'-溴-4'-氯-4-甲氧基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

将(1RS,3RS,4RS)-5'-溴-4'-氯-4-甲氧基-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇和(1RS,3SR,4SR)-5'-溴-4'-氯-4-甲氧基-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇(208mg，0.46mmol)在TFA(0.5mL)中的溶液在密封管中于80℃加热18h。蒸发溶剂，并将残余物通过SCX-2管柱(先后用MeOH和MeOH.NH

实例53

(1RS,3RS,4RS)-5'-溴-4'-氯-4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇和(1RS,3SR,4SR)-5'-溴-4'-氯-4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

步骤1：(1RS,3RS,4RS)-3-叠氮基-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇和(1RS,3SR,4SR)-3-叠氮基-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇

将5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢-6-氧杂螺[双环[3.1.0]己烷-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶](1.037g，2.46mmol)和叠氮化钠(0.48g，7.38mmol)在乙醇(20mL)和水(2.5mL)中的混合物在密封的小瓶中于120℃加热2天。蒸发冷却的混合物，并将残余物在水(20mL)和EtOAc之间分配。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水(30mL)洗涤，干燥(Na

步骤2：(1RS,3RS,4RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-4-(4-(三甲基甲硅烷基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇和(1RS,3SR,4SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-4-(4-(三甲基甲硅烷基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

将(1RS,3RS,4RS)-3-叠氮基-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇和(1RS,3SR,4SR)-3-叠氮基-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇(200mg，0.43mmol)和三甲基甲硅烷基乙炔(0.3mL，2.15mmol)在甲苯(2mL)中的混合物在密封小瓶中于115℃加热18h，导致无色固体沉淀。过滤冷却的混合物。将固体用Et

步骤3：(1RS,3RS,4RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇和(1RS,3SR,4SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

在室温，将TBAF(在THF中1N，1.28mL，1.29mmol)添加到(1RS,3RS,4RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-4-(4-(三甲基甲硅烷基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇和(1RS,3SR,4SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-4-(4-(三甲基甲硅烷基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇(181mg，0.32mmol)在THF(3mL)中的混合物。将反应混合物在室温搅拌18h，然后在50℃搅拌18h。蒸发溶剂，将残余物不经进一步纯化直接用于步骤4。LCMS(ESI)[M+H]

步骤4：(1RS,3RS,4RS)-5'-溴-4'-氯-4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇和(1RS,3SR,4SR)-5'-溴-4'-氯-4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

将(1RS,3RS,4RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇和(1RS,3SR,4SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇(157mg，0.32mmol)在TFA(2mL)中的混合物在密封管中于75℃加热18h。将冷却的混合物真空浓缩，并将残余物通过SCX-2管柱(先后用MeOH和MeOH.NH

实例54

3-乙酰氨基-5'-溴-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

步骤1：3-叠氮基-5'-溴-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

向5'-溴-4'-氯-3-羟基螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(81mg，0.2mmol)和三苯基膦(66mg，0.25mmol)在THF(2mL)中的溶液加入偶氮二甲酸二异丙酯(0.053mL，0.27mmoL)，5min后，加入叠氮化二苯基磷酰基(0.06mL，0.28mmol)。将反应混合物在室温搅拌24h，然后浓缩。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在环己烷中的0-50％EtOAc)得到标题化合物(41mg，48％)，为浅黄色油。LCMS(ESI)[M+H-tBu]

步骤2：3-氨基-5'-溴-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

向3-叠氮基-5'-溴-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(41mg，0.096mmol)和三苯基膦(26mg，0.1mmol)在THF/水(6:1,3.5mL)中的溶液加入KOH(1N水溶液，0.1mL，0.1mmol)。将反应混合物在室温搅拌20h，然后用MeOH稀释。在SCX-2管柱上纯化(先后用MeOH和MeOH.NH

步骤3：3-乙酰氨基-5'-溴-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

向3-氨基-5'-溴-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(37mg，0.092mmol)和三乙胺(0.038mL，0.276mmol)在DCM(2mL)中的溶液加入乙酸酐(0.009mL，0.092mmol)。将反应混合物在室温搅拌19h，然后用DCM稀释并用水洗涤。将有机萃取物干燥(MgSO

实例55

3-((2-氨基-2-氧代乙基)(甲基)氨基)-5'-溴-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

将肌氨酸酰胺盐酸盐(32mg，0.26mmol)通过SCX-2管柱(先后用MeOH和MeOH.NH

实例56

5'-溴-4'-氯-3-(吡啶-3-基)螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2-烯-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

步骤1：5'-溴-4'-氯-3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2-烯-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

在氮气下于-78℃，向5'-溴-4'-氯-3-氧代螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(656mg，1.63mmol)在THF(11mL)中的溶液加入双(三甲基甲硅烷基)氨基锂溶液(在THF中1N，1.99mL，1.99mmol)。将反应混合物在0℃搅拌30min，然后用2-[N,N-双(三氟甲磺酰基)氨基]吡啶(761mg，2.13mmol)在THF(3mL)中的溶液处理。将反应混合物缓慢放置至室温，然后搅拌3h。通过加入饱和氯化铵水溶液淬灭反应，并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO

步骤2：5'-溴-4'-氯-3-(吡啶-3-基)螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2-烯-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

将包含5'-溴-4'-氯-3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2-烯-1'(2'H)-甲酸叔丁酯和5'-溴-4'-氯-3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(250mg，0.47mmol)，吡啶-3-硼酸(86mg，0.70mmol)，与DCM复合的1,1-[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(18.6mg，0.03mmol)，碳酸钠(2N水溶液，0.45mL，0.90mmol)在THF(4mL)和水(1mL)中的脱气混合物的密封管在室温搅拌4天。将反应混合物用EtOAc稀释，并用水洗涤。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

实例57

5'-溴-4'-氯-3-(吡啶-3-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

将双(环辛二烯)镍(0)(29mg，0.11mmol)，红菲咯啉(71mg，0.21mmol)，叔丁醇钾(120mg，1.07mmol)，吡啶-3-硼酸(99mg，0.80mmol)在无水异丁醇(2mL)中的溶液在室温搅拌10min。向所得深紫色混合物中加入(1R,3R)-3,5'-二溴-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(250mg，0.54mmol)。将混合物脱气，置于氩气下，并在60℃加热2h。将混合物用EtOAc稀释，并用水洗涤。将有机萃取物干燥(MgSO

实例58

4'-氯-5'-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

将双(频哪醇)二硼(2.47g，9.71mmol)，5'-溴-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(2.14g，5.55mmol)，与DCM复合的[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(226mg，0.28mmol)和乙酸钾(1.38g，13.87mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的脱气混合物在100℃搅拌20h。将反应混合物用水稀释，并且用EtOAc进行萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

实例59

1-(3-(1'-(叔丁氧基羰基)-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-5'-基)苯基)环丙烷-1-甲酸

将4'-氯-5'-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(200mg，0.46mmol)，1-(3-溴苯基)环丙烷甲酸(145mg，0.60mmol)，四(三苯基膦)钯(0)(22mg，0.02mmol)，碳酸铯(0.92mL，0.92mmol)在1,4-二噁烷(1.5mL)中的脱气混合物在微波中于125℃照射20min。将反应混合物在EtOAc和水之间分配。将水层酸化并用EtOAc(x2)萃取。将合并的有机层干燥(MgSO

实例60

1-(3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-5'-基)苯基)环丙烷-1-甲酸

将1-(3-(1'-(叔丁氧基羰基)-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-5'-基)苯基)环丙烷-1-甲酸(90mg，0.19mmol)在DCM(0.8mL)中的溶液用TFA(0.5mL)处理。将反应混合物在室温搅拌4h。通过吹入氮气除去挥发物，然后将残余物与NH

实例61

5'-溴-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

步骤1：螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

在-78℃，将正丁基锂(在己烷中1.6N；9.3mL，14.9mmol)滴加到1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮(1g，7.50mmol)在无水THF(50mL)中的溶液。然后加入TMEDA(2.2mL，15mmol)，并将混合物在-78℃搅拌1h。分批加入1,3-二溴丙烷(0.76mL，7.5mmol)，并将混合物温热至室温过夜。将混合物用氯化铵水溶液(100mL)淬灭，然后用EtOAc(2x50mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL)洗涤，干燥(Na

步骤2：5'-溴螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

将NBS(338mg，1.90mmol)分批添加到螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(304mg，1.90mmol)在无水DMF(3mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌18h。加入另外的NBS(85mg，0.475mmol)，并将混合物搅拌4h。将混合物在EtOAc和水(30mL)之间分配。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤3：5'-溴-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

将硼烷THF复合物(THF中1.0M，5mL，5.0mmol)加入到5'-溴螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(271mg，1.07mmol)在THF(5mL)中的悬浮液。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后用MeOH(1mL)淬灭。加入HCl(1.25N水溶液，2mL)。将混合物加热回流2小时，然后真空干燥。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在DCM中的MeOH.NH

实例62

5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-酮

步骤1：N-(3-溴-5-氯吡啶-2-基)-N-(4-甲氧基苄基)-3-氧代环丁烷-1-甲酰胺

将3-氧代环丁烷-1-羰基氯(1.62g，12.2mmol)滴加至3-溴-5-氯-N-(4-甲氧基苄基)吡啶-2-胺(2g，6.10mmol)和DIPEA(3.2mL，18.3mmol)在无水THF(15mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌64h。再加入3-氧代环丁烷-1-羰基氯(2.0g，15.1mmol)，将混合物搅拌18h，然后蒸发至干。将残余物在EtOAc和碳酸氢钠水溶液(8％，50ml)之间分配。将水层用EtOAc萃取。将有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：N-(3-溴-5-氯吡啶-2-基)-3,3-二甲氧基-N-(4-甲氧基苄基)环丁烷-1-甲酰胺

将N-(3-溴-5-氯吡啶-2-基)-N-(4-甲氧基苄基)-3-氧代环丁烷-1-甲酰胺(2.58g，6.08mmol)，原甲酸三甲酯(15mL，137mmol)和4-甲苯磺酸(10mg)在甲醇(30mL)中的溶液在75℃加热18h。将混合物真空干燥，并将残余物在EtOAc和碳酸氢钠水溶液(8％，100mL)之间分配。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤3：5'-氯-3,3-二甲氧基-1'-(4-甲氧基苄基)螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

将N-(3-溴-5-氯吡啶-2-基)-3,3-二甲氧基-N-(4-甲氧基苄基)环丁烷-1-甲酰胺(1.52g，3.236mmol)，[1,3-双(2,6-二异丙基苯基)咪唑-2-亚烷基](3-氯吡啶基)二氯化钯(II)(PEPPSI-iPr；220mg，0.324mmol)和叔丁醇钠(932mg，9.71mmol)在无水甲苯(20mL)中的脱气混合物在密封管中于115℃加热2.5h。蒸发溶剂，并将残余物在EtOAc和水(30mL)之间分配。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水(30mL)洗涤，干燥(Na

步骤4：5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-酮

在室温，将硼烷-二甲基硫醚复合物(0.29mL，3.055mmol)滴加到5'-氯-3,3-二甲氧基-1'-(4-甲氧基苄基)螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(594mg，1.528mmol)在无水THF(15mL)中的溶液。将混合物在75℃加热3h，冷却至0℃，并小心地滴加MeOH(ca 5mL)。将反应混合物搅拌30min，然后过滤并蒸发，得到无色胶，将其溶于DCM(1mL)中。加入TFA/水(95:5；1mL)，并将混合物搅拌过夜。将混合物浓缩并将残余物在EtOAc与碳酸氢钠水溶液(8％；15mL)之间分配。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水(30mL)洗涤，干燥(Na

实例63

5'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

步骤1：5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

将硼氢化钠(49mg，1.288mmol)分批添加到5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-酮(384mg，1.17mmol)在MeOH/DCM(1:1,8mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌3h，然后小心地用水(2mL)淬灭，并在DCM和水(20mL)之间分配。将水层用DCM萃取。将合并的有机萃取物用水(20mL)洗涤，干燥(Na

步骤2：5'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

将5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇(330mg，1.00mmol)的在TFA/水(95:5；3mL)中的溶液在密封管中于70℃加热18h。蒸发混合物，并将残余物悬浮在MeOH(10mL)中。加入NaOH(2N水溶液，2mL)，并将混合物剧烈搅拌1h。将混合物在EtOAc和水(15mL)之间分配。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤(15mL)，干燥(Na

实例64

5'-氯-3-甲氧基-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

步骤1：N-(3-溴-5-氯吡啶-2-基)-3-甲氧基-N-(4-甲氧基苄基)环丁烷-1-甲酰胺

在0℃，向草酰溴(0.35mL，6.9mmol)在DCM(5mL)中的溶液滴加3-甲氧基-环丁烷甲酸(1.5g，4.6mmol)的DCM(5mL)中的溶液，该溶液包含一滴DMF。将反应混合物在0℃搅拌30min，然后在室温搅拌30min。将反应混合物冷却至0℃，并用5-氯-N-(4-甲氧基苄基)吡啶-2-胺(0.9g，6.9mmol)和DIPEA(3.8mL，22.7mmol)在DCM(10mL)中的溶液处理。使反应物升温至室温，并搅拌16h。将混合物在DCM和水之间分配。将水层用另外的DCM进行萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

步骤2：5'-氯-3-甲氧基-1'-(4-甲氧基苄基)螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

以类似于针对5'-氯-3,3-二甲氧基-1'-(4-甲氧基苄基)螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮所描述的方式，从N-(3-溴-5-氯吡啶-2-基)-3-甲氧基-N-(4-甲氧基苄基)环丁烷-1-甲酰胺开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

步骤3：5'-氯-3-甲氧基-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

在室温，将硼烷-二甲基硫醚复合物(0.3mL，3.22mmol)滴加到5'-氯-3-甲氧基-1'-(4-甲氧基苄基)螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(580mg，1.61mmol)在无水THF(10mL)中的溶液。将混合物在70℃加热2h，然后冷却至室温。蒸发混合物，将其溶于TFA(2mL)中，并在80℃搅拌过夜。将混合物浓缩，并将残余物在DCM与饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。将水层用另外的DCM进行萃取。将合并的有机萃取物用盐水(30mL)洗涤，干燥(Na

实例65

(1r,3r)-5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯

在0℃，向5'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇(1.5g，4.5mmol)和三乙胺(1.6mL，11.6mmol)在DCM(15mL)中的溶液，添加甲磺酰氯(0.45mL，5.8mmol)。将反应混合物在0℃搅拌1h，然后用水稀释。将有机萃取物干燥(Na

实例66

(1s,3s)-5'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈和(1s,3s)-5'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酰胺

步骤1：(1s,3s)-5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈

将(1r,3r)-5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯(609mg，1.5mmol)、氰化钾(487mg，7.5mmol)和18-冠醚-6(396mg，1.5mmol)在DMSO(1.5mL)中的溶液在90℃搅拌1h，然后在100℃搅拌3h。将反应混合物用水稀释，并将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

步骤2：(1s,3s)-5'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈和(1s,3s)-5'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酰胺

将(1s,3s)-5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈(367mg，1.08mmol)在具有2滴苯甲醚的TFA(2mL)中的溶液在密封管中于65℃加热6h。将反应混合物用DCM稀释，通过SCX-2管柱(先后用MeOH和MeOH.NH

实例67

(R)-1-(5'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)吡咯烷-3-醇

步骤1：(R)-1-(5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)吡咯烷-3-醇

向5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-酮(132mg，0.402mmol)，(R)-吡咯烷醇(46mg，0.523mmol)和乙酸(0.04mL)在无水THF(1mL)中的混合物，加入氰基硼氢化钠(33mg，0.523mmol)。将反应混合物在室温搅拌1h，然后在水(15mL)和EtOAc之间分配。将水层进一步EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤(20mL)，干燥(Na

步骤2：(R)-1-(5'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)吡咯烷-3-醇

将(R)-1-(5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)吡咯烷-3-醇(168mg，0.42mmol)在含有水(0.1mL)的TFA(2mL)中的溶液在密封管中于80℃加热18h。将冷却的混合物蒸发，然后通过SCX-2管柱(先后用MeOH和MeOH.NH

实例68

(1s,3s)-5'-氯-3-甲基-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

步骤1：(1s,3s)-5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇和(1r,3r)-5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

在-20℃，将甲基溴化镁(在THF中1.4N，1.74mL，2.432mmol)滴加到5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-酮(400mg，1.216mmol)在无水THF(5mL)中的溶液。将反应混合物搅拌30min，然后经1h升温至室温，再冷却至-10℃，并用饱和氯化铵(约5mL)水溶液淬灭。将混合物用盐水(15mL)在EtOAc和水(15mL)之间分配。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：(1s,3s)-5'-氯-3-甲基-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

将在TFA/水(95:5,0.5mL)中的(1s,3s)-5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇(87mg，0.252mmol)在密封管中于70℃加热18h。蒸发冷却的混合物，并将残余物通过SCX-2纯化(先后用MeOH和MeOH.NH

实例69

(1r,3r)-5'-氯-3-(三氟甲基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

步骤1：(1r,3r)-5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-3-(三氟甲基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

在0℃，向5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-酮(500mg，1.5mmol)和氟化铯(9mg，0.06mmol)在THF(3mL)中的溶液加入三氟甲基三甲基硅烷(260mg，1.8mmol)在THF(2mL)中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌16h，然后浓缩。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在环己烷中的0-30％EtOAc)，得到标题化合物(230mg，38％)。LCMS(ESI)[M+H]

步骤2：(1r,3r)-5'-氯-3-(三氟甲基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

将(1r,3r)-5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-3-(三氟甲基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇(230mg，0.57mmol)在含有1滴水的TFA(2mL)中的溶液在85℃搅拌16h。将溶液在SCX-2管柱上纯化(先后用MeOH和MeOH.NH

实例70

2-(5'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-亚烷基)乙腈

步骤1：2-(5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-亚烷基)乙腈

将叔丁醇钾(187mg，1.663mmol)分批加入到氰基甲基膦酸二乙酯(284mg，1.742mmol)在无水THF(7mL)中的溶液，并将混合物搅拌15min。然后加入5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-酮(521mg，1.584mmol)，并将混合物搅拌3h。蒸发溶剂，并将残余物在EtOAc(3x10mL)和饱和氯化铵水溶液(15mL)之间分配。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水(20mL)洗涤，干燥(Na

实例71

步骤2：2-(5'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-亚烷基)乙腈

将2-(5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-亚烷基)乙腈(444mg，1.265mmol)的在TFA(0.5mL)中的溶液在70℃加热2h。蒸发冷却的混合物，并将残余物通过SCX-2纯化(先后用MeOH和MeOH.NH

实例72

2-(5'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-亚烷基)乙酰胺

将2-(5'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-亚烷基)乙腈(184mg，0.794mmol)在TFA(1.0mL)和水(0.25mL)中的溶液在85℃加热18h。蒸发冷却的混合物，并将残余物通过SCX-2纯化(先后用MeOH和MeOH.NH

实例73

1-(5'-氯-1',2'-二氢螺[氮杂环丁烷-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1-基)乙-1-酮

步骤1：3-((3-溴-5-氯吡啶-2-基)(4-甲氧基苄基)氨基甲酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

将甲醇钠(540mg，10.0mmol)分批添加至1-(叔丁氧基羰基)氮杂环丁烷-3-甲酸(2.0g，10.0mmol)在无水THF(20mL)中的悬浮液。将反应混合物在室温搅拌1h。蒸发溶剂，并将残余物溶解在DCM(20mL)中。加入DMF(1滴)，然后滴加草酰氯(0.85mL，10.0mmol)。当气体逸出平息后，加入3-溴-5-氯-N-(4-甲氧基苄基)吡啶-2-胺(1.0g，1.96mmol)，并将混合物搅拌过夜。将混合物用水(15mL)淬灭，并用DCM(3x15mL)进行萃取。将合并的有机萃取物通过PTFE管柱，并浓缩。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在环己烷中的0-40％EtOAc)，得到标题化合物(1.2g，66％)。LCMS(ESI)[M+Na]

实例74

步骤2：5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-2'-氧代-1',2'-二氢螺[氮杂环丁烷-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1-甲酸叔丁酯

将3-((3-溴-5-氯吡啶-2-基)(4-甲氧基苄基)氨基甲酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(944mg，1.848mmol)，[1,3-双(2,6-二异丙基苯基)咪唑-2-亚烷基](3-氯吡啶基)二氯化钯(II)(PEPPSI-iPr；125mg，0.185mmol)和叔丁醇钠(533mg，5.544mmol)在无水甲苯(15mL)中的脱气混合物在密封管中于115℃加热4h。蒸发溶剂，并将残余物在EtOAc和水(20mL)之间分配。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水(20mL)洗涤，干燥(Na

步骤3：5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)螺[氮杂环丁烷-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

将TFA(0.5mL)添加到5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-2'-氧代-1',2'-二氢螺[氮杂环丁烷-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1-甲酸叔丁酯(248mg，0.577mmol)在无水DCM(5mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌3h，然后蒸发。将残余物通过SCX-2纯化(先后用MeOH和MeOH.NH

步骤4：5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[氮杂环丁烷-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

在室温，将硼烷-二甲基硫醚复合物(0.092mL，0.973mmol)滴加到5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)螺[氮杂环丁烷-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(160mg，0.486mmol)在无水THF(5mL)中的溶液。将混合物在75℃加热2h，然后冷却至0℃。小心地滴加MeOH(ca3mL)，然后将反应物搅拌30min。蒸发混合物，得到无色胶，将其溶于DCM(5mL)和TFA(0.5mL)。将混合物在搅拌1h，然后浓缩。将残余物通过SCX-2纯化(先后用MeOH和MeOH.NH

步骤5：1-(5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[氮杂环丁烷-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1-基)乙-1-酮

将乙酸酐(0.025mL，0.266mmol)添加到5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[氮杂环丁烷-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶](70mg，0.222mmol)和DIPEA(0.114mL，0.666mmol)在无水DCM(1mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌2h。真空蒸发溶剂，得到标题化合物的沉淀(79mg，100％)，将其过滤，为无色固体。LCMS(ESI)[M+H]

步骤6：1-(5'-氯-1',2'-二氢螺[氮杂环丁烷-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1-基)乙-1-酮

将在TFA(0.5mL)中的1-(5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[氮杂环丁烷-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1-基)乙-1-酮(79mg，0.221mmol)在密封管中于70℃加热3h。蒸发冷却的混合物，并将残余物通过SCX-2纯化(先后用MeOH和MeOH.NH

实例75

3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟苯甲酸

步骤1：3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟苯甲酸乙酯

根据通用方法L(参见下文)，从(2-氟-3-(乙氧基羰基)苯基)硼酸和5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]开始制备标题化合物。

步骤2：3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟苯甲酸

向3-(4'-氯-1'，2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟苯甲酸甲酯(850mg，2.45mmol)在THF/IMS(1:1,20mL)中的溶液添加氢氧化锂(1N水溶液，3mL，3mmol)。将反应混合物在室温搅拌16h，然后浓缩。将残余物溶水(2mL)，并用乙酸(0.2mL)研磨。通过过滤收集沉淀物，并且干燥，以得到标题化合物(906mg、96％)，为米色固体。

实例76

1-(3-溴苯基)咪唑啉-2-酮

步骤1：1-(3-溴苯基)-3-(2-氯乙基)脲

向冰冷却的3-溴苯胺(2.0g，11.63mmol)在甲苯(20mL)中的溶液，加入2-氯乙基异氰酸酯(1.84g，17.44mmol)在甲苯(5mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌64h。通过过滤收集所得固体，用甲苯洗涤并真空干燥，得到标题化合物(2.9g，90％)，为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]

步骤2：1-(3-溴苯基)咪唑啉-2-酮

经10min将在THF(7.5mL)中的1-(3-溴苯基)-3-(2-氯乙基)脲(1.0g，3.6mmol)加入到冰冷却的氢化钠在THF(5mL)中的悬浮液(在油中60％，0.288g，7.2mmol)。将混合物在室温搅拌2h，然后用MeOH淬灭。真空浓缩后，将残余物在DCM和HCl水溶液之间分配。然后将水相用更多的DCM萃取，并将合并的有机萃取物用水洗涤，干燥(Na

实例77

1-(3-溴苯基)四氢嘧啶-2(1H)-酮

步骤1：1-(3-溴苯基)-3-(3-氯丙基)脲

向冰冷却的3-溴苯胺(1.637g，9.52mmol)在甲苯(15mL)中的溶液，加入3-氯丙基异氰酸酯(1.48g，12.37mmol)在甲苯(5mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌10天。通过过滤收集所得固体，用甲苯洗涤并真空干燥，得到标题化合物(2.68g，97％)，为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]

步骤2：1-(3-溴苯基)四氢嘧啶-2(1H)-酮

经10min将在THF(7.5mL)中的1-(3-溴苯基)-3-(3-氯丙基)脲(1g，3.4mmol)加入到冰冷却的氢化钠在THF(5mL)中的悬浮液(在油中60％，0.274g，6.86mmol)。将混合物在室温搅拌2h，然后用MeOH淬灭。真空浓缩后，将残余物在DCM和HCl水溶液之间分配。然后将水相用更多的DCM萃取，并将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

1-(3-溴苯基)哌啶-2-酮

经5min向3-溴苯胺(2.0g，11.63mmol)和三乙胺(2.27mL，16.3mmol)在DCM(45mL)中的冰冷却溶液添加5-溴戊酰氯(2.78g，14.0mmol)在DCM(5mL)中的溶液。将混合物在冰浴中搅拌1.5h。将反应混合物用DCM稀释，相继用10％的柠檬酸水溶液，碳酸氢钠水溶液和水洗涤，然后干燥(Na

实例78

4-(3-溴苯基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯

将3-溴碘苯(849mg，3.00mmol)，3-氧杂哌嗪-1-甲酸叔丁酯(660mg，3.30mmol)，乙酸铜(109mg，0.60mmol)，3,4,7,8-四甲基-1,10-菲咯啉(212mg，0.90mmol)，碳酸铯(1.95g，6.00mmol)和1,4-二噁烷(10mL)的脱气混合物在密封管中于100℃搅拌18h。将冷却的反应混合物通过硅藻土垫过滤，用EtOAc洗脱。将滤液用水、盐水洗涤，干燥(Na

实例79

(R)-1-(3-溴苯基)-5-甲基咪唑啉-2-酮

将3-溴碘苯(0.60g，2.12mmol)，(R)-3-氨基丁酸(0.218g，2.12mmol)，碘化铜(I)(0.080g，0.42mmol)，磷酸钾(1.8g，8.48mmol)和DMSO(3.5mL)在密封管中于120℃搅拌2.5h。将冷却的反应混合物用DCM(70mL)稀释，并上样到25g二氧化硅管柱上(溶剂梯度，在DCM中的5-50％MeOH.NH

实例80

(S)-1-(3-溴苯基)-5-甲基咪唑啉-2-酮

以类似于针对(R)-1-(3-溴苯基)-5-甲基咪唑啉-2-酮所描述的方法，从(S)-3-氨基丁酸制备(S)-1-(3-溴苯基)-5-甲基咪唑啉-2-酮。LCMS(ESI)[M+H]

实例81

3-(3-溴苯基)哌啶-2-酮

经2min将2-(3-溴苯基)乙酸甲酯(0.58g，2.53mmol)在DMSO(1.5mL)中的溶液加入到氢化钠在DMSO(0.5mL)中的悬浮液(在油中60％，102mg，2.54mmol)。将混合物在室温搅拌5min，然后加入(3-溴丙基)氨基甲酸叔丁酯(0.50g，2.10mmol)在DMSO(1.5mL)中的溶液。将混合物在50℃搅拌1h。将冷却的反应混合物在EtOAc和氯化铵水溶液之间分配。将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物先后用水和盐水洗涤，干燥(Na

实例82

3-(3-溴苯基)吡咯烷-2-酮

步骤1：2-(3-溴苯基)-3-氰基丙酸甲酯

在-40℃，将正丁基锂(在己烷中2.5N，1.75mL，4.36mmol)添加到二异丙胺(0.68mL，1.8mmol)在THF(10mL)中的溶液。经15min将混合物温热至-20℃，然后当经5min加入2-(3-溴苯基)乙酸甲酯(1.0g，4.36mmol)在THF(4mL)中的溶液时冷却至-78℃。将混合物在-78℃搅拌1h，然后经5min加入溴乙腈(0.574g，4.8mmol)在THF(2mL)中的溶液。将混合物在-78℃搅拌1h，然后再经1.5h温热至5℃。加入饱和氯化铵水溶液，并将混合物用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：3-(3-溴苯基)吡咯烷-2-酮

将Raney镍(0.1g)加入2-(3-溴苯基)-3-氰基丙酸甲酯(0.50g，1.865mmol)在MeOH(15mL)和浓缩氨水溶液(5mL)中的溶液。将混合物在1个大气压的氢气下搅拌5.5h，然后通过硅藻土过滤。蒸发滤液，并将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在EtOAc中的2-10％MeOH)，得到标题化合物(0.165g，37％)，为无色固体。LCMS(ESI)[M+H]

实例83

1-(6-溴吡啶-2-基)咪唑啉-2-酮

步骤1：1-(6-溴吡啶-2-基)-3-(2-氯乙基)脲

将2-氨基-6-溴吡啶(1.10g，6.358mmol)和2-氯乙基异氰酸酯(1.0g，9.54mmol)在甲苯(10mL)中的溶液在室温搅拌12天。通过过滤收集所得固体，用甲苯洗涤并真空干燥，得到标题化合物(1.73g，98％)，为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]

步骤2：1-(6-溴吡啶-2-基)咪唑啉-2-酮

经5min将1-(6-溴吡啶-2-基)-3-(2-氯乙基)脲(0.50g，1.8mmol)在THF(4mL)中的加入到冰冷却的氢化钠在THF(3mL)中的悬浮液(在油中60％，0.144g，3.6mmol)。将混合物在室温搅拌3h，然后用MeOH淬灭。真空浓缩后将残余物在碳酸氢钠水溶液和DCM之间分配。然后将水相用更多的DCM萃取，并将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例84

1-(6-溴吡啶-2-基)四氢嘧啶-2(1H)-酮

步骤1：1-(6-溴吡啶-2-基)-3-(3-氯丙基)脲

将2-氨基-6-溴吡啶(880mg，5.09mmol)和3-氯丙基异氰酸酯(730mg，6.1mmol)在甲苯(8mL)中的溶液在室温搅拌9天。通过过滤收集所得固体，用甲苯洗涤并真空干燥，得到标题化合物(795mg，53％)，为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]

步骤2：1-(6-溴吡啶-2-基)四氢嘧啶-2(1H)-酮

经5min将1-(6-溴吡啶-2-基)-3-(3-氯丙基)脲(0.78g，2.67mmol)在THF(5mL)中的加入到冰冷却的氢化钠在THF(3mL)中的悬浮液(在油中60％，0.144g，3.6mmol)。将混合物在室温搅拌2h，然后在40℃搅拌另外的16h。将反应混合物用MeOH淬灭。真空浓缩后将残余物在碳酸氢钠水溶液和DCM之间分配。然后将水相用更多的DCM萃取，并将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例85

3-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-2-酮

步骤1：N-(2-氨基-4-溴苯基)-2-氧吡咯烷-3-甲酰胺

向2-氧吡咯烷-3-甲酸乙酯(0.50g，3.18mmol)在MeOH(10mL)中的溶液加入1MNaOH(5mL)。将混合物在室温搅拌1h，然后加入HCl(1N水溶液，5mL)，并蒸发至干。加入DMF(3mL)并蒸发，得到2-氧吡咯烷-3-甲酸。向该酸中添加DMF(10mL)，4-溴苯-1,2-二胺(0.595g，3.18mmol)和DIPEA(2.2mL，12.7mmol)。将混合物在冰浴中冷却，并经10min加入HATU(2.42g，6.36mmol)。将混合物在室温搅拌30min，然后在EtOAc和水之间分配。将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物先后用水和盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：3-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-2-酮

将N-(2-氨基-4-溴苯基)-2-氧吡咯烷-3-甲酰胺(0.65g，2.18mmol)在乙酸(10mL)中的溶液在90℃搅拌1h。将冷却的混合物蒸发。加入甲苯并蒸发。将残余物在碳酸氢钠水溶液与EtOAc之间分配。将有机相用盐水洗涤，干燥(Na

实例86

3-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6,7-二氢-[1,2,3]三唑[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸叔丁酯

步骤1：3-(3-氨基苯基)-6,7-二氢-[1,2,3]三唑[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸叔丁酯

将3-溴-6,7-二氢-[1,2,3]三唑并[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸叔丁酯(120mg，0.396mmol)，(3-氨基苯基)硼酸(65mg，0.475mmol)四(三苯基膦)钯(0)(46mg，0.039mmol)和碳酸钾(1.8N水溶液，0.5mL)在1,4-二噁烷(3mL)中的脱气溶液在100℃加热18h。将反应混合物用EtOAc稀释，用盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：3-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6,7-二氢-[1,2,3]三唑[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸叔丁酯

向3-(3-氨基苯基)-6,7-二氢-[1,2,3]三唑[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸叔丁酯(33mg，0.105mmol)在冷却至0℃的MeOH(1mL)中的悬浮液，依次加入HCl(1N，0.314mL，0.314mmol)和亚硝酸钠(8mg，0.115mmol)的水(0.05mL)。将反应混合物在0℃搅拌30min，然后用双(频哪醇)二硼(80mg，0.314mmol)在MeOH(0.5mL)中的溶液处理。将反应混合物在0℃搅拌30min，然后使其升温至室温，并搅拌另外的18h。将混合物用DCM稀释，并用水洗涤。将有机萃取物干燥(Na

实例87

(2-(3-溴苯基)吡啶-3-基)甲醇

步骤1：(2-溴吡啶-3-基)甲醇

在0℃，向2-溴烟酰胺醛(1.86g，10mmol)在MeOH(20mL)中的溶液，经10min分批添加硼氢化钠(380mg，10mmol)。将反应混合物在0℃搅拌另外1h。用水淬灭反应，并将挥发物真空蒸发。将残余的悬浮液用EtOAc稀释。将有机溶液用水、盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：(2-(3-氨基苯基)吡啶-3-基)甲醇

将(2-溴吡啶-3-基)甲醇(940mg，5.00mmol)，(3-氨基苯基)硼酸(822mg，6.0mmol)，四(三苯基膦)钯(0)(289mg，0.25mmol)，碳酸铯(3.26g，10.00mmol)在1,4-二噁烷(15mL)和水(5mL)中的脱气溶液在80℃加热18h。将反应混合物在EtOAc和水之间分配。将有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤3：(2-(3-溴苯基)吡啶-3-基)甲醇

在0℃，向溴化铜(II)(536mg，2.4mmol)在MeCN(3mL)中的悬浮液，依次加入在MeCN(4mL)中的亚硝酸叔丁酯(0.357mL，3.00mmol)和(2-(3-氨基苯基)吡啶-3-基)甲醇(400mg，2.00mmol)。将反应混合物在0℃搅拌3h，然后在EtOAc和水之间分配。将有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例88

2-(1-(3-溴苯基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基)乙腈

步骤1：(1-(3-溴苯基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基)甲磺酸甲酯

在0℃，向[1-(3-溴苯基)-5-甲基吡唑-3-基]甲醇(804mg，3.01mmol)和三乙胺(0.55mL，3.91mmol)在DCM(10mL)中的溶液添加甲磺酰氯(0.28mL，3.61mmol)。将反应混合物在0℃搅拌10min，然后用水稀释并用DCM萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

步骤2：2-(1-(3-溴苯基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基)乙腈

向[1-(3-溴苯基)-5-甲基-吡唑-3-基]甲磺酸甲酯(1.04g，3.01mmol)在DMF(10mL)中的溶液，加入氰化钠(221mg，4.52mmol)。将反应混合物在60℃搅拌48h，然后用水稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

实例89

2-(3-甲基-2-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)吡啶-4-基)乙腈

步骤1：2-(2-氯-3-甲基吡啶-4-基)-2-氰基乙酸叔丁酯

将碘化铜(I)(30mg，0.16mmol)、氰基乙酸叔丁酯(4.51mL，31.56mmol)、2-氯-4-碘-3-甲基吡啶(4g，15.78mmol)和碳酸钾(8.72g，63.12mmol)在DMF(35mL)中的脱气混合物在120℃加热48h。将反应混合物用水稀释，并用10％柠檬酸水溶液酸化。将产物用EtOAc萃取。将合并的有机馏分用盐水洗涤，干燥(MgSO

步骤2：2-(2-氯-3-甲基吡啶-4-基)乙腈

将2-(2-氯-3-甲基吡啶-4-基)-2-氰基乙酸叔丁酯(2.37g，8.89mmol)和TFA(5mL)在DCM(5mL)中的溶液在40℃搅拌3.5h。将反应混合物真空浓缩，将残余物溶于DCM，并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。将合并的有机馏分用盐水洗涤，干燥(MgSO

步骤3：2-(2-(3-氯苯基)-3-甲基吡啶-4-基)乙腈

将2-(2-氯-3-甲基吡啶-4-基)乙腈(250mg，1.5mmol)、3-氯苯基硼酸(469mg，3.0mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(104mg，0.09mmol)和碳酸钾(2N水溶液，3.75mL，7.5mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的脱气混合物在100℃加热30min。将反应混合物用水稀释，并且用EtOAc进行萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

步骤4：2-(3-甲基-2-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)吡啶-4-基)乙腈

将2-(2-(3-氯苯基)-3-甲基吡啶-4-基)乙腈(280mg，1.15mmol)，双(频哪醇)二硼(380mg，1.5mmol)，Xphos-Pd-G2(91mg，0.12mmol)和乙酸钾(343mg，3mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的脱气混合物在100℃加热8h。将反应混合物用水稀释，并且用EtOAc进行萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

实例90

1-(3-溴苯基)-N,N-二甲基环丙烷-1-甲酰胺

向1-(3-溴苯基)环丙烷甲酸(480mg，1.99mmol)在DCM(10mL)中的溶液加入草酰氯(0.51mL，5.97mmol)，观察到立即泡腾。将反应混合物搅拌1h，然后蒸发并与甲苯共沸以除去过量的草酰氯。将粗产物重新溶解于DCM(5mL)，并加入二甲胺(在THF中2M，2.99mL，5.97mmol)。将混合物搅拌1h，然后用DCM和水稀释。分离有机层，并通过PTFE过滤器干燥。除去溶剂，并将所得的粗残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在环己烷中的0-50％EtOAc)得到标题化合物(400mg 75％)，为浅黄色油。LCMS(ESI)[M+H]

实例91

3-氨基-N,N-二甲基-6-(三丁基锡烷基)吡啶甲酰胺

步骤1：3-氨基-6-溴-N,N-二甲基吡啶甲酰胺

在室温，将NBS(0.44g，2.46mmol)分批加入到3-氨基-N,N-二甲基-吡啶-2-甲酰胺(4.51g，8.19mmol)在氯仿(100mL)中的溶液。将反应混合物搅拌5min，然后用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)洗涤。将水相用DCM(3x50mL)进行萃取。将合并的有机萃取物用水(20mL)洗涤，干燥(Na

步骤2：3-氨基-N,N-二甲基-6-(三丁基锡烷基)吡啶甲酰胺

将3-氨基-6-溴-N,N-二甲基吡啶甲酰胺(371mg，1.52mmol)，六丁基二锡(0.77mL，1.52mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(175mg，0.150mmol)在1,4-二噁烷(2mL)中的脱气混合物在密封管中于115℃在微波照射下照射5h。蒸发溶剂，并将残余物通过二氧化硅色谱法纯化(溶剂梯度，在DCM中的0-3％MeOH.NH

实例92

2-(2-(3-氨基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-3-甲基吡啶-4-基)乙腈

步骤1：2-(2-(3-氯-5-硝基苯基)-3-甲基吡啶-4-基)乙腈

将2-(2-氯-3-甲基吡啶-4-基)乙腈(350mg，2.1mmol)，2-(3-氯-5-硝基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(700mg，2.47mmol)，四(三苯基膦)钯(0)(145mg，0.13mmol)和碳酸钾(1.45g，10.5mmol)在1,4-二噁烷(6mL)中的脱气混合物在100℃加热3h。将反应混合物用水稀释，并且用EtOAc进行萃取。将合并的有机馏分用盐水洗涤，干燥(MgSO

步骤2：2-(2-(3-氨基-5-氯苯基)-3-甲基吡啶-4-基)乙腈

向2-(2-(3-氯-5-硝基苯基)-3-甲基吡啶-4-基)乙腈(604mg，2.1mmol)在MeOH(5mL)和水(0.5mL)中的溶液中加入铁粉(234mg，4.2mmol)和氯化铵(224mg，4.2mmol)。将反应混合物加热回流5h，然后通过硅藻土过滤并真空浓缩。将残余物通过二氧化硅色谱法纯化(溶剂梯度，在EtOAc中的0-5％MeOH.NH

步骤3：2-(2-(3-氨基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-3-甲基吡啶-4-基)乙腈

将2-(2-(3-氨基-5-氯苯基)-3-甲基吡啶-4-基)乙腈(369mg，1.43mmol)，双(频哪醇)二硼(545mg，2.15mmol)，Xphos-Pd-G2(112mg，0.14mmol)和乙酸钾(426mg，4.3mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的脱气混合物在100℃加热1.5h，然后用水稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机馏分用盐水洗涤，干燥(MgSO

实例93

1-(3-溴-2-氟苯基)环丙烷-1-甲酰胺

步骤1：1-(3-溴-2-氟苯基)环丙烷-1-甲腈

在0℃，向2-(3-溴-2-氟-苯基)乙腈(1g，4.67mmol)在DMF(8mL)中的溶液中依次加入氢化钠(在油中60％，0.22g，5.61mmol)和1,2-二溴乙烷(0.48mL，5.61mmol)。将反应混合物在0℃搅拌1h，然后在室温搅拌1h。将反应混合物再次冷却至0℃，并进一步用氢化钠(在油中60％，0.22g，5.61mmol)处理。将混合物在室温搅拌10min，然后用水淬灭并用EtOAc稀释。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

步骤2：1-(3-溴-2-氟苯基)环丙烷-1-甲酰胺

将1-(3-溴-2-氟苯基)环丙烷-1-甲腈(239mg，1mmol)和氢氧化钾(167mg，2.99mmol)在IMS(0.5mL)和水(1.5mL)中的溶液在90℃加热2h。将反应混合物浓缩，然后在水和EtOAc之间分配。将有机萃取物干燥(MgSO

实例94

2-氟-N,N-二甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺

向2-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酸(300mg，1.13mmol)在DCM(5mL)中的溶液添加草酰氯(0.15mL，1.69mmol)，然后加入1滴DMF。将反应混合物在室温搅拌30min直至所有的泡腾消退，然后用甲苯稀释并共蒸发(x2)。将所得油溶于DCM中，冷却至0℃，并用二甲胺(THF中的2N，1.69mL，3.38mmol)逐滴处理。将反应混合物搅拌1h，然后用DCM稀释并用水洗涤。通过PTFE过滤器分离DCM萃取物，浓缩，得到标题化合物(300mg，91％)，为澄清油。

实例95

3-溴-2-氟-N-(2-羟基乙基)-N-甲基苯甲酰胺

向3-溴-2-氟苯甲酸(438mg，2.00mmol)和2-(甲基氨基)乙醇(240μL，3.0mmol)在DCM(6mL)中的悬浮液加入DIPEA(1mL，6.00mmol)，然后加入HATU(1.15g，3.00mmol)。将反应混合物在室温搅拌18h，然后在DCM和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。用更多的DCM萃取水相，并将合并的有机萃取物通过疏水性过滤器，并真空蒸发。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在环己烷中的0-80％EtOAc)得到标题化合物(602mg，>100％)，为无色油。LCMS(ESI)[M+H]

实例96

1-(2-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰基)哌啶-2-甲腈

将哌啶-2-甲腈草酸盐(660.mg，2.13mmol)溶于水并用甲醇稀释。使混合物通过SCX管柱(20g)(用甲醇预洗涤)碱化；管柱用甲醇和化合物彻底洗涤，因为游离碱用MeOH.NH

实例97

(2-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)(2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)哌啶-1-基)甲酮

向2-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酸(1.05g，3.93mmol)在DCM(15mL)中的溶液滴加草酰氯(0.51mL，5.9mmol)滴，然后加入1滴DMF。将反应混合物搅拌30min，直到所有气体停止逸出为止。将该溶液用甲苯稀释，蒸发并真空干燥。将所得残余物溶于DCM(15mL)，冷却至0℃，并用三乙胺(0.82mL，5.9mmol)和2-(1-甲基吡唑-4-基)哌啶(650mg，3.93mmol)在DCM(2mL)中的溶液处理。将所得混合物搅拌30min，然后用水稀释，通过PTFE过滤器过滤并浓缩。将残余物通过二氧化硅色谱法纯化(溶剂梯度，在环己烷中的0-100％EtOAc)，然后从Et

实例98

2-(2-(2-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-3-甲基吡啶-4-基)乙腈

步骤1：2-(2-(3-氯-2-氟苯基)-3-甲基吡啶-4-基)乙腈

将2-(2-氯-3-甲基吡啶-4-基)乙腈(336mg，2.02mmol)，3-氯-2-氟苯基硼酸(703mg，4.03mmol)，四(三苯基膦)钯(0)(139mg，0.12mmol)和碳酸钾(2N水溶液，5.04mL，10.08mmol)在1,4-二噁烷(6mL)中的脱气混合物在100℃加热45min。将反应混合物用水稀释，并且用EtOAc进行萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

步骤2：2-(2-(2-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-3-甲基吡啶-4-基)乙腈

将2-[2-(3-氯-2-氟苯基)-3-甲基-4-吡啶基]乙腈(350mg，1.34mmol)，双(频哪醇)二硼(443mg，1.75mmol)，Xphos-Pd-G2(105mg，0.13mmol)和乙酸钾(399mg，4.03mmol)在1,4-二噁烷(6mL)中的脱气混合物在100℃加热1h。将反应混合物用水稀释，并且用EtOAc进行萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

实例99

N-(氰甲基)-2-(2-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)异烟酰胺

步骤1：2-(3-氯-2-氟苯基)异烟酸甲酯

将2-氯吡啶-4-甲酸甲酯(500mg，2.91mmol)，3-氯-2-氟苯基硼酸(1.01g，5.83mmol)，四(三苯基膦)钯(0)(202mg，0.17mmol)和碳酸钾(2.01g，14.57mmol)在1,4-二噁烷(8mL)中的脱气混合物在100℃加热1h。将反应混合物用水稀释，并且用EtOAc进行萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

步骤2：2-(3-氯-2-氟苯基)异烟酸

向2-(3-氯-2-氟苯基)异烟酸甲酯(704mg，2.65mmol)在MeOH(5mL)和水(0.5mL)中的悬浮液添加一水合氢氧化锂(13 0mg，3.18mmol)。将反应混合物在室温搅拌16h，然后用水稀释并真空浓缩。用1N HCl将悬浮液酸化至约pH3，导致形成浓稠的白色沉淀物。通过过滤收集所得沉淀物，并且真空干燥，得到标题化合物(630mg,94％)，为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]

步骤3：2-(3-氯-2-氟苯基)-N-(氰基甲基)异烟酰胺

向2-(3-氯-2-氟苯基)异烟酸(630mg，2.5mmol)，氨基乙腈盐酸盐(301mg，3.25mmol)和三乙胺(0.87mL，6.26mmol)在DMF(10mL)中的悬浮液加入HATU(1.33g，3.51mmol)。将反应混合物在室温搅拌15min，然后用水稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

步骤4：N-(氰甲基)-2-(2-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)异烟酰胺

将2-(3-氯-2-氟苯基)-N-(氰甲基)异烟酰胺(760mg，2.62mmol)，双(频哪醇)二硼(732mg，2.89mmol)，Xphos-Pd-G2(206mg，0.26mmol)和乙酸钾(780mg，7.87mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的脱气混合物在100℃加热1h。将反应混合物用水稀释，并且用EtOAc进行萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

实例100

3-溴-N-((1-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺

步骤1：N-((1H-吡唑-4-基)甲基)-3-溴-2-氟-N-甲基苯甲酰胺

向3-溴-2-氟苯甲酸(678mg，3.1mmol)，N-甲基-1-(1H-吡唑-4-基)甲胺二盐酸盐(600mg，3.26mmol)和三乙胺(1.59mL，11.41mmol)在DMF(15mL)中的悬浮液加入HATU(1.48g，3.91mmol)。将反应混合物在室温搅拌30min，然后用水稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

步骤2：3-溴-N-((1-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺

向N-((1H-吡唑-4-基)甲基)-3-溴-2-氟-N-甲基苯甲酰胺(100mg，0.32mmol)和(2-溴乙氧基)-叔丁基二甲基硅烷(0.1mL，0.48mmol)在DMF(3mL)中的溶液加入碳酸铯(189mg，0.58mmol)。将反应混合物在室温搅拌16h，然后用水稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

实例101

3-(4-((3-溴-2-氟-N-甲基苯甲酰胺基)甲基)-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

将N-((1H-吡唑-4-基)甲基)-3-溴-2-氟-N-甲基苯甲酰胺(100mg，0.32mmol)，3-溴吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(120mg，0.48mmol)和碳酸铯(189mg，0.58mmol)在DMF(2mL)中的溶液在室温搅拌72h。加入另外的3-溴吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(120mg，0.48mmol)，并将反应物搅拌另外24h。将反应混合物用水稀释，并且用EtOAc进行萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

实例102

6-氨基-2-氟-N,N-二甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺

步骤1：6-氨基-3-溴-2-氟苯甲酸

在冰中冷却的2-氨基-6-氟苯甲酸(6g，38.7mmol)在氯仿(80mL)中的悬浮液。滴加溴(2.19mL，42.6mmol)，并将混合物在0℃搅拌0.5h，然后在室温搅拌16h。通过过滤分离固体，用少量DCM洗涤，并在40℃真空干燥，得到标题化合物(12.29g)。通过LCMS分析显示，除了作为主要组分的所需产物(约80％纯度)外，还有一些残余的起始原料、二溴产物和次要的溴代异构体。LCMS(ESI)[MH-H

步骤2：6-氨基-3-溴-2-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺

将N,N-二异丙基乙胺(16.4mL，96mmol)加入到得自步骤1的粗产物(10.28g)在无水DCM(100mL)中的悬浮液，得到溶液。加入HATU(18.2g，48mmol)，将混合物搅拌5min，然后加入二甲胺(在THF中2M，24.0mL，48mmol)，在冷水浴中缓慢冷却。将混合物在室温搅拌3h，然后用1M氢氧化钠和盐水洗涤。将水相用DCM再萃取两次。将合并的有机相干燥(Na2SO4)并蒸发。将残余物通过在300g二氧化硅上的色谱纯化，用0-50％乙酸乙酯/环己烷洗脱，得到不纯的固体。将该物质通过色谱再次纯化(200g二氧化硅，0-50％乙酸乙酯/环己烷)，得到标题化合物和未溴化类似物的1.5:1混合物(3.55g)。LCMS(酸性)：标题化合物(ESI)[MH]

步骤3：6-氨基-2-氟-N,N-二甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺

将来自步骤2的产物(3.47g)，双(频哪醇)二硼(6.76g，26.6mmol)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(DCM复合物，1.09g，1.33mmol)和乙酸钾(3.86g，39.9mmol)在DMF(25mL)中的混合物用氩气吹扫并在100℃加热3h。冷却的混合物通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯洗涤并蒸发至小体积。将残余物溶解于乙酸乙酯和水，再次通过硅藻土过滤并分离相。将水相用乙酸乙酯(3x)萃取。将有机馏分干燥(Na

实例103

6-氨基-N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2-氟-N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺

以类似于针对6-氨基-2-氟-N,N-二甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺的方式，制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例104

3-溴-N,N-二甲基-1H-吲哚-7-甲酰胺

向1H-吲哚-7-甲酸(2.0g，12.4mmol)在DCM(50mL)中的悬浮液加入DIPEA(10.75mL，62mmol)和HATU(9.43g，24.8mmol)。将反应混合物在室温搅拌5min，然后加入二甲胺盐酸盐(1.518g，18.6mmol)。搅拌1h。将混合物用DCM稀释，用碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥(Na

实例105

3-溴-N,N-二甲基-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-7-甲酰胺

经10min将氢化钠(0.082g，在油中60％，2.06mmol)加入到3-溴-N,N-二甲基-1H-吲哚-7-甲酰胺(0.50g，1.87mmol)和甲苯磺酰氯(0.375g，1.96mmol)在THF(10mL)中的冰冷却的溶液。使混合物温热至室温过夜。加入饱和氯化铵水溶液，并将混合物用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

2-(3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-7-基)-N,N-二甲基乙酰胺

步骤1：2-(1H-吲哚-7-基)-N,N-二甲基乙酰胺

向2-(1H-吲哚-7-基)乙酸(109mg，0.622mmol)在DMF(2.5mL)中的溶液加入二甲胺盐酸盐(101mg，1.24mmol)和DIPEA(0.54mL，3.11mmol)。将反应混合物冷却至15℃，用HATU(476mg，1.24mmol)处理，然后在室温搅拌30min。将混合物用EtOAc和HCl(1N)稀释。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用水、盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：2-(3-溴-1H-吲哚-7-基)-N,N-二甲基乙酰胺

将NBS(111mg，0.622mmol)分批添加到2-(1H-吲哚-7-基)-N,N-二甲基乙酰胺(126mg，0.622mmol)在DCM(10mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌30min，然后用亚硫酸氢钠水溶液、水洗涤，干燥(Na

步骤3：2-(3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-7-基)-N,N-二甲基乙酰胺

在0℃，将氢化钠(油中60％，18.6mg，0.464mmol)分批添加至2-(3-溴-1H-吲哚-7-基)-N,N-二甲基乙酰胺(119mg，0.422mmol)和4-甲苯磺酰氯(84.5mg，0.443mmol)在THF(3mL)中的溶液。将混合物搅拌30min，用氯化铵水溶液淬灭并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例106

3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-甲腈

步骤1：3-溴-1H-吲哚-5-甲腈

在室温，将NBS(689mg，3.87mmol)分批添加到5-氰基吲哚(500mg，3.52mmol)在DMF(10mL)中的溶液，立即产生深紫色。将混合物搅拌1h，然后在NaOH溶液(1M,10mL)和EtOAc(3x15mL)之间分配。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-甲腈

在0℃，将氢化钠(在油中60％，116mg，2.90mmol)分批添加至3-溴-1H-吲哚-5-甲腈的溶液(535mg，2.42mmol)。将混合物搅拌5min，然后添加4-甲苯磺酰氯(507mg，2.66mmol)。移去冰浴，将混合物温热至室温，搅拌1h。将冷却的混合物用氯化铵水溶液淬灭，并且用EtOAc进行萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例107

3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-甲酸

在0℃，向3-溴-1H-吲哚-5-甲酸(2.4g，10mmol)在DMF(30mL)中的溶液添加氢化钠(在油中60％，999mg，25mmol)。将反应混合物在0℃搅拌15min，然后加入对甲苯磺酰氯(2.09g，11mmol)。将反应混合物在0℃搅拌30min，然后用水稀释，用1N HCl酸化并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

实例108

3-溴-N,N-二甲基-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-甲酰胺

向3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-甲酸(335mg，0.85mmol)，二甲胺盐酸盐(208mg，2.55mmol)，三乙胺(0.59mL，4.25mmol)和4-二甲基氨基吡啶(21mg，0.17mmol)在DCM(8.5mL)中的溶液，加入N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(195mg，1.02mmol)。将反应混合物在室温搅拌2天。加入其他部分的二甲胺盐酸盐(69mg，0.85mmol)，N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(97mg，0.51mmol)，三乙胺(0.19mL，1.41mmol)和4-二甲基氨基吡啶(21mg，0.17mmol)，并进行搅拌24h。将反应混合物倒入1N HCl中，并将该混合物用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用饱和碳酸氢钠水溶液、盐水洗涤，干燥(Na

实例109

(3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-基)(亚氨基)(甲基)-λ

步骤1：5-(甲硫基)-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚

在0℃，将氢化钠(油中60％，294mg，7.35mmol)分批添加至5-甲基硫烷基-1H-吲哚(1.0g，6.13mmol)在DMF(15mL)中的溶液。将反应混合物搅拌5min，然后在0℃加入4-甲苯磺酰氯(1.28g，6.74mmol)。移去冰浴，将混合物温热至室温，搅拌1h。将冷却的混合物用氯化铵水溶液淬灭，并且用EtOAc进行萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：亚氨基(甲基)(1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-基)-λ

将氨基甲酸铵(197mg，2.52mmol)添加到5-(甲硫基)-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚(200mg，0.63mmol)和碘苯二乙酸酯(406mg，1.26mmol)在MeOH(15mL)中的混合物。将混合物在室温搅拌1h。蒸发溶剂物，并将残余物在水(20mL)和EtOAc之间分配。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤3：(3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-基)(亚氨基)(甲基)-λ

将溴化铜(II)(460mg，2.04mmol)分批添加至亚氨基(甲基)(1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-基)-λ

实例110

3-溴-5-环丙基-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚

步骤1：3-溴-5-环丙基-1H-吲哚

将NBS(623mg，3.5mmol)分批添加至5-环丙基-1H-吲哚(500mg，3.18mmol)在DMF(7mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌1h，然后在NaOH溶液(1N,20mL)和EtOAc(3x15mL)之间分配。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：3-溴-5-环丙基-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚

在0℃，将氢化钠(在油中60％，139mg，3.48mmol)分批添加至3-溴-5-环丙基-1H-吲哚(685mg，2.9mmol)在DMF(12mL)中的溶液。将反应混合物搅拌5min，然后在0℃加入4-甲苯磺酰氯(608mg，3.19mmol)。移去冰浴，将混合物温热至室温并搅拌1h。将冷却的混合物用氯化铵水溶液淬灭，然后用EtOAc(3x15mL)进行萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

2-(3-溴-1H-吲哚-5-基)乙腈

将NBS(251mg，1.41mmol)分批添加至2-(1H-吲哚-5-基)乙腈(200mg，1.28mmol)在DMF(5mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌0.25h，然后在水和EtOAc之间分配。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例111

3-溴-5-(4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚和2-(3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-基)-1,3,4-噁二唑

步骤1：3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-碳酰肼

将3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-甲酸(1g，2.54mmol)，EDCI.HCl(583mg，3.04mmol)和HOBT水合物(466.14mg，3.04mmol)悬浮在DMF(15mL)。将反应物在室温搅拌30min，在此期间固体溶解。加入水合肼(25mL，25.37mmol)，并将反应在室温搅拌15min。将反应混合物倒入水(约100mL)中，通过过滤收集沉淀的固体，并在40℃真空干燥过夜，得到标题产物(891mg，86％)，为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]

步骤2：(E)-N'-(3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-羰基)-N,N-二甲基甲酰肼

将3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-碳酰肼(500mg，1.22mmol)和N,N-二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛(0.33mL，2.45mmol)在MeCN(6mL)中的悬浮液加热30min，在此期间固体溶解。将反应混合物真空浓缩，得到产物，为灰白色固体。(567mg,100％)

步骤3：3-溴-5-(4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚和2-(3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-基)-1,3,4-噁二唑

将(E)-N'-(3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-羰基)-N,N-二甲基甲酰肼酰胺(1.6g，3.48mmol)和甲胺(在THF中2N，17.4mL，34.77mmol)溶解在乙酸(16mL)中，并在65℃加热1.5h。将反应混合物用水稀释，并且用EtOAc进行萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

实例112

3-溴-5-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-1-甲酸叔丁酯

步骤1：3-溴-5-碘-1H-吲哚-1-甲酸叔丁酯

在0℃，向5-碘吲哚-1-甲酸叔丁酯(2g，5.83mmol)在DCM(20mL)中的溶液加入NBS(1.24g，6.99mmol)。将反应混合物在0℃至室温搅拌48h，然后用水稀释并用DCM萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

步骤2：3-溴-5-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-1-甲酸叔丁酯

将3-溴-5-碘代吲哚-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.18mmol)，3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(320mg，1.54mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(137mg，0.12mmol)和碳酸铯(582mg，1.78mmol)在1,4-二噁烷(9mL)和水(1mL)中的脱气混合物在100℃加热3h。将反应混合物用水稀释，并且用EtOAc进行萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

实例113

5-氰基-3-碘-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-甲酸叔丁酯

步骤1：1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-5-甲腈

将5-氯-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶(225mg，1.47mmol)，无水DMA(13.5mL)，氰化锌(0.29mL，3.39mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(170mg，0.15mmol)的脱气混合物在微波辐射下于145℃加热3h。然后将冷却的反应混合物通过SCX-2管柱(先后用DCM/MeOH 1:1和MeOH.NH

步骤2：5-氰基-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-甲酸叔丁酯

向1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-5-甲腈(210mg，1.47mmol)在MeCN(6.5mL)和DMF(5mL)中的溶液中加入4-二甲基氨基吡啶(18mg，0.15mmol)和碳酸二叔丁酯(368mg，1.69mmol)。将混合物搅拌1h。真空除去溶剂，并将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在环己烷中的0-20％EtOAc)，得到标题化合物(160mg，44.7％)，为白色固体。LCMS(ESI)[M+H-tBu]

步骤3：5-氰基-3-碘-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-甲酸叔丁酯

向1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-5-甲腈(84mg，0.59mmol)在DMF(2.5mL)中的溶液中加入碘(298mg，1.17mmol)和氢氧化钾(99mg，1.76mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。然后真空去除溶剂。将残余物溶解于THF(5mL)，并用碳酸二叔丁酯(153.5mg，0.70mmol)和4-二甲基氨基吡啶(14mg，0.12mmol)处理。将混合物搅拌1h。将反应混合物用EtOAc稀释，然后倒入具有10％焦亚硫酸钠水溶液的冰上。将有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例114

1-(3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-7-基)哌啶-2-酮

步骤1：5-溴-N-(1H-吲哚-7-基)戊酰胺

经15min将5-溴戊酰氯(0.906g，4.54mmol)在DCM(5mL)中的溶液添加到1H-吲哚-7-胺(0.50g，3.78mmol)和三乙胺(0.74mL，5.3)在DCM(15mL)中的溶液。将混合物在搅拌1h，然后用碳酸氢钠水溶液、水洗涤，干燥(Na

步骤2：1-(1H-吲哚-7-基)哌啶-2-酮

经5min向5-溴-N-(1H-吲哚-7-基)戊酰胺(0.90g，3.05mmol)在THF(10mL)中的冰冷却溶液，分批加入叔丁醇钾(0.41g，3.65mmol)。将混合物在冰浴中搅拌30min，然后在饱和氯化铵水溶液和EtOAc之间分配。然后将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤3：1-(3-溴-1H-吲哚-7-基)哌啶-2-酮

将1-(1H-吲哚-7-基)哌啶-2-酮(0.676g，3.15mmol)溶解在DCM(25mL)中，并经5min加入NBS(0.562g，3.15mmol)。将混合物在室温搅拌10min，然后先后用10％焦亚硫酸钠水溶液、水洗涤，干燥(Na

步骤4：1-(3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-7-基)哌啶-2-酮

经5min将氢化钠(在油中60％，0.075g，1.88mmol)加入到1-(3-溴-1H-吲哚-7-基)哌啶-2-酮(0.50g，1.7mmol)和甲苯磺酰氯(0.341g，1.79mmol)在THF(10mL)中的冰冷却的溶液。使混合物温热至室温过夜。加入饱和氯化铵水溶液，并将混合物用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例115

4-(3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-7-基)吗啉-3-酮

步骤1：2-(2-氯乙氧基)-N-(1H-吲哚-7-基)乙酰胺

向1H-吲哚-7-胺(0.10g，0.756mmol)和(2-氯乙氧基)乙酸(0.115g，0.832mmol)在DMF(2.5mL)中的溶液液加入DIPEA(0.524mL，3.03mmol)和HATU(0.575g，1.51mmol)。将反应混合物在室温搅拌1h，然后在EtOAc和碳酸氢钠水溶液之间分配。然后将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物用水洗涤，干燥(Na

步骤2：4-(1H-吲哚-7-基)吗啉-3-酮

经5min，向2-(2-氯乙氧基)-N-(1H-吲哚-7-基)乙酰胺(0.177g，0.70mmol)在THF(5mL)中的冰冷却溶液，分批加入叔丁醇钾(0.094g，0.84mmol)混合物。将混合物在室温搅拌1h，然后在饱和氯化铵水溶液和EtOAc之间分配。然后将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤3：4-(3-溴-1H-吲哚-7-基)吗啉-3-酮

将4-(1H-吲哚-7-基)吗啉-3-酮(0.144g，0.666mmol)溶解在DCM(20mL)中，并经5min加入NBS(0.118g，0.666mmol)。将反应混合物在室温搅拌15min，然后用10％焦亚硫酸钠水溶液、水洗涤，干燥(Na

步骤4：4-(3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-7-基)吗啉-3-酮

经5min将氢化钠(在油中60％，27mg，0.67mmol)加入到4-(3-溴-1H-吲哚-7-基)吗啉-3-酮(180mg，0.61mmol)和甲苯磺酰氯(122mg，0.64mmol)在THF(4mL)中的冰冷却的溶液。将混合物在室温搅拌1.5h。加入饱和氯化铵水溶液，并将混合物用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例116

4-(3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-7-基)-3-氧杂哌嗪-1-甲酸叔丁酯

步骤1：2-溴-N-(1H-吲哚-7-基)乙酰胺

向1H-吲哚-7-胺(0.20g，1.51mmol)和三乙胺(0.316mL，2.27mmol)在THF(9mL)中的冰冷却的溶液，添加溴乙酰溴(0.145mL，1.66mmol)在THF(1mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌1.5h。将反应混合物用DCM稀释，先后用1N HCl、碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥(Na

步骤2：2-((2-羟基乙基)氨基)-N-(1H-吲哚-7-基)乙酰胺

将2-溴-N-(1H-吲哚-7-基)乙酰胺(0.237g，0.936mmol)和乙醇胺(0.20mL，3.34mmol)在EtOAc(10mL)中的混合物在60℃搅拌45min。将冷却的反应混合物用EtOAc稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液、盐水洗涤，干燥(Na

步骤3：1-(1H-吲哚-7-基)哌嗪-2-酮

在0℃，将三丁基膦添加到2-((2-羟乙基)氨基)-N-(1H-吲哚-7-基)乙酰胺(0.204g，0.87mmol)在EtOAc(6mL)中的悬浮液。经30min分批加入偶氮二甲酸二叔丁酯(0.20g，0.87mmol)。再过30min后，将反应混合物在40℃加热1h。将反应混合物在冰浴中冷却，然后用EtOH(2mL)和二噁烷(4M,0.5mL)中的HCl处理。将反应混合物在0℃搅拌20min，然后在室温搅拌30min，然后蒸发至干。将残余物溶解于MeOH(0.2mL)，水(20mL)和1N HCl(3mL)的混合物中，并通过C18二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在0.025M HCl水溶液中的1-20％MeOH)。将残余物通过SCX-2管柱(先后用MeOH和MeOH.NH

步骤4：4-(1H-吲哚-7-基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯

经3min将二碳酸二叔丁酯(0.149g，0.685mmol)在DCM(2mL)中的溶液添加到1-(1H-吲哚-7-基)哌嗪-2-酮(0.134g，0.622mmol)和三乙胺(0.13mL，0.934mmol)在DCM(8mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌1h，然后加入更多的二碳酸二叔丁酯(0.015g，0.069mmol)在DCM(0.5mL)中的溶液，并继续搅拌15min。将混合物用环己烷(10mL)稀释，并通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在环己烷中的20-80％EtOAc)，得到标题化合物(0.17g，87％)，为无色胶。LCMS(ESI)[M+H]

步骤5：4-(3-溴-1H-吲哚-7-基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯

将4-(1H-吲哚-7-基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.169g，0.536mmol)溶解在DCM(15mL)中，并经5min加入NBS(0.095g，0.536mmol)。将反应混合物在室温搅拌15min，然后用10％焦亚硫酸钠水溶液、水洗涤，干燥(Na

步骤6：4-(3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-7-基)-3-氧杂哌嗪-1-甲酸叔丁酯

将氢化钠(在油中60％，21mg，0.518mmol)加入到4-(3-溴-1H-吲哚-7-基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.185g，0.47mmol)和甲苯磺酰氯(0.094g，0.49mmol)在THF(4mL)中的冰冷却的溶液。将混合物在室温搅拌5h。加入饱和氯化铵水溶液，并将混合物用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例117

1-(3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-7-基)-4-甲基哌嗪-2-酮

步骤1：2-((2-羟基乙基)(甲基)氨基)-N-(1H-吲哚-7-基)乙酰胺

将2-(甲基氨基)乙醇(0.69mL，8.53mmol)加入到2-溴-N-(1H-吲哚-7-基)乙酰胺(617mg，2.44mmol)在EtOAc(20mL)中的悬浮液。将反应混合物在60℃加热20min，然后用EtOAc(20mL)稀释。将溶液用饱和碳酸氢钠(2x20mL)洗涤，干燥(Na

步骤2：1-(1H-吲哚-7-基)-4-甲基哌嗪-2-酮

在0℃经5min，将偶氮二甲酸二叔丁酯(397mg，1.72mmol)分批添加到2-[2-羟乙基(甲基)氨基]-N-(1H-吲哚-7-基)乙酰胺(426mg，1.72mmol)和三丁基膦(0.43mL，1.72mmol)在EtOAc(10mL)中的悬浮液。移去冰浴，使均匀的混合物经1h温热至室温，导致无色固体沉淀。将混合物真空浓缩。将残余物用Et

步骤3：1-(3-溴-1H-吲哚-7-基)-4-甲基哌嗪-2-酮

将NBS(223mg，1.25mmol)分批添加到1-(1H-吲哚-7-基)-4-甲基哌嗪-2-酮(287mg，1.25mmol)在DCM(15mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌20min，并用DCM(20mL)稀释。将溶液用碳酸氢钠水溶液(20mL)和焦亚硫酸钠(1M,30mL)洗涤，干燥(Na

步骤4：1-(3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-7-基)-4-甲基哌嗪-2-酮

在0℃，将氢化钠(油中60％，39mg，0.970mmol)分批添加至1-(3-溴-1H-吲哚-7-基)-4-甲基哌嗪-2-酮(250mg，0.810)的溶液。将混合物搅拌5min，然后在0℃加入对甲苯磺酰氯(170mg，0.890mmol)。移去冰浴，使混合物温热至室温，搅拌1h。将冷却的混合物用氯化铵水溶液淬灭，并用EtOAc(3x15mL)进行萃取。将合并的有机萃取物用盐水(20mL)洗涤，干燥(Na

实例118

1-(3-溴-5-氯-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-7-基)-4-甲基哌嗪-2-酮

步骤1：2-溴-N-(5-氯-1H-吲哚-7-基)乙酰胺

在0℃，将溴乙酰溴(0.63mL，7.2mmol)滴加至5-氯-1H-吲哚-7-胺(1.0g，6.0mmol)和三乙胺(1.0mL，7.2mmol)在DCM(25mL)中的溶液。除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌1h，然后用DCM(30mL)稀释，并依次用1N HCl(30mL)和碳酸氢钠水溶液(30mL)洗涤。将有机萃取物干燥(Na

步骤2：N-(5-氯-1H-吲哚-7-基)-2-((2-羟基乙基)(甲基)氨基)乙酰胺

将2-(甲基氨基)乙醇(1.18mL，14.73mmol)加入到2-溴-N-(5-氯-1H-吲哚-7-基)乙酰胺(1.21g，4.21mmol)在EtOAc(50mL)中的悬浮液。将反应混合物在22℃搅拌20min，然后用EtOAc(20mL)稀释，用碳酸氢钠水溶液(2x20mL)洗涤，干燥(Na

步骤3：1-(5-氯-1H-吲哚-7-基)-4-甲基哌嗪-2-酮

在0℃，将偶氮二甲酸二叔丁酯(0.92g，3.98mmol)分批添加到N-(5-氯-1H-吲哚-7-基)-2-[2-羟基乙基(甲基)氨基]乙酰胺(1.12g，3.98mmol)和三丁基膦(0.99mL，3.98mmol)在EtOAc(30mL)中的悬浮液。移去冰浴，并使均匀的混合物在经1h温热至室温，导致无色固体沉淀。将混合物真空浓缩。将残余物在Et

步骤4：1-(3-溴-5-氯-1H-吲哚-7-基)-4-甲基哌嗪-2-酮

将NBS(319mg，1.79mmol)分批添加到1-(5-氯-1H-吲哚-7-基)-4-甲基哌嗪-2-酮(430mg，1.63mmol)在氯仿(25mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌20min，用DCM(20mL)稀释，并用碳酸氢钠水溶液(20mL)洗涤。将有机萃取物干燥(Na

步骤5：1-(3-溴-5-氯-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-7-基)-4-甲基哌嗪-2-酮

在0℃，将氢化钠(在油中60％，37mg，0.930mmol)分批添加至1-(3-溴-5-氯-1H-吲哚-7-基)-4-甲基哌嗪-2-酮的溶液(265mg，0.770mmol)。将混合物搅拌5min，然后添加4-甲苯磺酰氯(162mg，0.850mmol)。移去冰浴，将混合物温热至室温，搅拌1h。将冷却的混合物用氯化铵水溶液淬灭，用EtOAc(3x15mL)进行萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例119

3-溴-7-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-甲腈

步骤1：7-氨基-1H-吲哚-5-甲腈

在室温，将三甲基膦(在甲苯中1N，13mL，12.62mmol)滴加到1H-吡咯-3-甲醛(1.0g，10.52mmol)和(E)-丁-2-烯二腈(1.03g，13.14mmol)在THF(15mL)中的溶液[稍微放热至30℃，需要冷却]。将混合物在室温搅拌5h。将混合物真空蒸发，并将残余物溶解在DCE(10mL)中。然后加入三氟化硼乙醚(3.3mL，26.29mmol)，并将混合物在90℃加热过夜。将冷却的混合物在碳酸氢钠水溶液(30mL)和EtOAc(3x50mL)之间分配。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：2-溴-N-(5-氰基-1H-吲哚-7-基)乙酰胺

在0℃，经5min将溴乙酰溴(0.64mL，7.37mmol)滴加至7-氨基-1H-吲哚-5-甲腈(965mg，6.14mmol)和三乙胺(1.03mL，7.37mmol)在DCM(15mL)中的溶液。移去冰浴，并将混合物搅拌1h。将混合物用DCM(30mL)稀释，并用1N HCl(30mL)洗涤，然后用碳酸氢钠水溶液(30mL)洗涤。将有机萃取物干燥(Na

步骤3：N-(5-氰基-1H-吲哚-7-基)-2-((2-羟基乙基)(甲基)氨基)乙酰胺

将2-(甲基氨基)乙醇(0.96mL，11.99mmol)加入到2-溴-N-(5-氰基-1H-吲哚-7-基)乙酰胺(953mg，3.43mmol)在EtOAc(15mL)中的悬浮液。将反应混合物在室温搅拌20min，然后用EtOAc(20mL)稀释，用碳酸氢钠水溶液(2x20mL)洗涤，干燥(Na

步骤4：7-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)-1H-吲哚-5-甲腈

在0℃经5min，将偶氮二甲酸二叔丁酯(744mg，3.23mmol)分批添加到N-(5-氰基-1H-吲哚-7-基)-2-[2-羟基乙基(甲基)氨基]乙酰胺(800mg，2.94mmol)和三丁基膦(0.81mL，3.23mmol)在EtOAc(15mL)中的悬浮液。移去冰浴，使均匀的混合物经1h温热至室温，然后真空浓缩。将残余物通过二氧化硅色谱法纯化(溶剂梯度，在DCM中的0-15％MeOH.NH

步骤5：3-溴-7-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)-1H-吲哚-5-甲腈

在室温，将NBS(558mg，3.14mmol)分批添加至7-(4-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-1H-吲哚-5-甲腈(725mg，2.85mmol)在DMF(15mL)中的溶液。将反应混合物搅拌1h，然后在NaOH水溶液(1N,20mL)和EtOAc(3x15mL)之间分配。将合并的有机萃取物用盐水(20mL)洗涤，干燥(Na

步骤6：3-溴-7-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-甲腈

将氢化钠(在油中60％，74mg，1.84mmol)分批添加至3-溴-7-(4-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-1H-吲哚-5-甲腈(512mg，1.54mmol)的溶液。将混合物在室温搅拌5min，然后加入4-甲苯磺酰氯(322mg，1.69mmol)。将反应混合物搅拌1h，然后将反应用氯化铵水溶液淬灭，并用EtOAc(3x15mL)进行萃取。将合并的有机萃取物用盐水(20mL)洗涤，干燥(Na

实例120

N-(3-溴-5-氰基-1-甲基-1H-吲哚-7-基)乙酰胺

步骤1：N-(5-氰基-1H-吲哚-7-基)乙酰胺

将乙酰氯(0.11mL，1.53mmol)滴加至7-氨基-1H-吲哚-5-甲腈(200mg，1.27mmol)和三乙胺(0.53mL，3.82mmol)在DCM(5mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌10min，然后在水(10mL)和DCM之间分配。将水层用另外的DCM进行萃取。将合并的有机萃取物用水(2x10mL)洗涤，干燥(Na

步骤2：N-(5-氰基-1-甲基-1H-吲哚-7-基)乙酰胺和N-(5-氰基-1-甲基-1H-吲哚-7-基)-N-甲基乙酰胺

将碘甲烷(0.06mL，0.99mmol)滴加到N-(5-氰基-1H-吲哚-7-基)乙酰胺(198mg，0.990mmol)和碳酸钾(137mg，0.990mmol)在DMF(0.5mL)中的混合物。将反应混合物在室温搅拌3h，然后在水(10mL)和EtOAc之间分配。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水(20mL)洗涤，干燥(Na

步骤3：N-(3-溴-5-氰基-1-甲基-1H-吲哚-7-基)乙酰胺

将NBS(37mg，0.210mmol)加入到N-(5-氰基-1-甲基-吲哚-7-基)乙酰胺(40mg，0.190mmol)在DMF(2mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌30min。将水(ca 5mL)加入到剧烈搅拌的混合物中，导致形成沉淀。过滤得到标题化合物(54mg，98％)，为无色固体。LCMS(ESI)[M+H]

实例121

N-(3-溴-5-氰基-1H-吲哚-7-基)-N-甲基甲磺酰胺和N-(3-溴-5-氰基-1-甲基-1H-吲哚-7-基)-N-甲基甲磺酰胺

步骤1：N-(5-氰基-1H-吲哚-7-基)甲磺酰胺

将甲磺酰氯(0.12mL，1.53mmol)滴加至7-氨基-1H-吲哚-5-甲腈(200mg，1.27mmol)和三乙胺(0.2mL，1.53mmol)在DCM(3mL)中的混合物。将反应混合物在室温搅拌2h。加入另外的三乙胺(0.2mL，1.53mmol)和甲磺酰氯(0.12mL，1.53mmol)，并搅拌15min。将反应混合物用DCM(15mL)稀释并过滤，得到标题化合物(163mg，54％)，为浅黄色固体。将滤液用水(2x15mL)洗涤，干燥(Na

步骤2：N-(5-氰基-1H-吲哚-7-基)-N-甲基甲磺酰胺和N-(5-氰基-1-甲基-1H-吲哚-7-基)-N-甲基甲磺酰胺

将碘甲烷(0.05mL，0.830mmol)滴加到N-(5-氰基-1H-吲哚-7-基)甲磺酰胺(163mg，0.690mmol)和碳酸钾(287mg，2.08mmol)在DMF(2mL)中的混合物。将反应混合物在室温搅拌18h，然后在水(20mL)和EtOAc之间分配。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用水(2x15mL)洗涤，干燥(Na

步骤3：N-(3-溴-5-氰基-1H-吲哚-7-基)-N-甲基甲磺酰胺和N-(3-溴-5-氰基-1-甲基-1H-吲哚-7-基)-N-甲基甲磺酰胺

将NBS(44mg，0.25mmol)分批添加到N-(5-氰基-1H-吲哚-7-基)-N-甲基甲磺酰胺和N-(5-氰基-1-甲基-1H-吲哚-7-基)-N-甲基甲磺酰胺(124mg，0.50mmol)的混合物在DMF(1.5mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌1h，然后在水(10mL)和EtOAc(3x10mL)之间分配。将合并的有机萃取物用盐水(30mL)洗涤，干燥(Na

实例122

6-氟-3-碘-1H-吲哚-5-甲腈

向6-氟-1H-吲哚-5-甲腈(250mg，1.56mmol)在MeOH(5.5mL)中的溶液加入在水(0.27mL)的氢氧化钠(62mg，1.56mmol)，碘(396mg，1.56mmol)和在水(80μL)中的碘化钾(261mg，1.56mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h，然后倒在具有10％焦亚硫酸钠水溶液的冰上。收集沉淀物并用水洗涤，然后与甲苯共蒸发，得到标题化合物(421ng，91％)，为棕色粉末。LCMS(ESI)[M-H]

实例123

5-溴-3-碘-6-甲基-1H-吲哚

向5-溴-6-甲基-1H-吲哚(200mg，0.95mmol)在MeOH(3mL)中的溶液加入在水(0.5mL)的氢氧化钠(38mg，0.95mmol)，碘(242mg，0.95mmol)和在水(1mL)中的碘化钾(159mg，0.95mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后倒在具有10％焦亚硫酸钠水溶液的冰上。收集沉淀物并用水洗涤，然后与甲苯共蒸发，得到标题化合物(320mg，100％)，为棕色粉末。

实例124

5'-(5-溴-6-甲基-1H-吲哚-3-基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

将(1'-(叔丁氧基羰基)-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)硼酸(80mg，0.28mmol)、与二氯甲烷复合的[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(11mg，0.01mmol)、碳酸铯(1N水溶液，0.55mL，0.55mmol)、5-溴-3-碘-6-甲基-1H-吲哚(93mg，0.28mmol)在1,4-二噁烷(2.5mL)和水(0.5mL)中的脱气混合物在50℃加热2h。将反应混合物用EtOAc稀释，并用水洗涤。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO

实例125

5'-溴-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

步骤1：5'-溴螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

在-30℃经35min，向5-溴-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮(10g，50mmol)和二异丙胺(14.2mL，100mmol)在THF(200mL)中的溶液滴加正丁基锂(2.5N，80mL，200mmol)。将反应混合物在-30℃搅拌10min，然后温热至0℃，并用1,2-二溴乙烷(12.8mL，150mmol)处理。使反应混合物温热至室温，然后搅拌16h。将混合物用EtOAc和水稀释。将有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：5'-溴-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

在0℃经45min，向5'-溴螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(4.34g，18.1mmol)在DCM(90mL)中的悬浮液滴加DIBAL(DCM中1N，90mL，90mmol)，使反应混合物温热至室温，搅拌16h，然后冷却至0℃。将水(30mL)滴加到该混合物中，然后加入EtOAc和固体碳酸氢钠。将混合物过滤并浓缩。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在DCM中的1-4％MeOH，得到标题化合物(2.94g，72％)，为灰白色固体。

实例126

5'-溴螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

向5'-溴-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶](1.63g，7.24mmol)在THF(20mL)中的溶液加入DIPEA(1.7mL，9.78mmol)，4-二甲基氨基吡啶(0.88g，7.24mmol)和二碳酸二叔丁酯(2.51g，11.5mmol)。将混合物加热至65℃持续1.5h，然后用EtOAc稀释并用水洗涤。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO

实例127

(1RS,2RS)-5'-氯-2-甲基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

步骤1：3-溴-5-氯-N-(4-甲氧基苄基)吡啶-2-胺

将2-氟-3-溴-5-氯吡啶(5.74g；27 28mmol)，4-甲氧基苄胺(7.1mL，54.34mmol)和DIPEA(5.6mL，43.92mmol)在2-丙醇(30mL)中的混合物在微波中于150℃加热1h。将冷却的混合物在EtOAc(200mL)和碳酸氢钠水溶液(8％；150mL)之间分配。将有机萃取物用盐水(150mL)洗涤，干燥(Na

步骤2：N-(3-溴-5-氯吡啶-2-基)-N-(4-甲氧基苄基)-2-甲基环丙烷-1-甲酰胺

向草酰溴(0.28mL，3mmol)在DCM(1.5mL)中的溶液加入2-甲基环丙烷-1-甲酸(0.292mL，3mmol)。将反应混合物在室温搅拌1.25h，然后用3-溴-5-氯-N-(4-甲氧基苄基)吡啶-2-胺(354mg，2mmol)和DIPEA(0.68mL，4mmol)在DCM(1.5mL)中的溶液处理。将反应混合物在室温搅拌18h，然后用DCM和水稀释。将水层用另外的DCM进行萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO

步骤3：(1RS,2RS)-5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-2-甲基螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮和(1RS,2SR)-5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-2-甲基螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

将N-(3-溴-5-氯吡啶-2-基)-N-(4-甲氧基苄基)-2-甲基环丙烷-1-甲酰胺(120mg，0.287mmol)，三环己基膦(8mg，0.058mmol)，乙酸钯(II)(6.5mg，0.028mmol)，磷酸银(40mg，0.096mmol)和碳酸钾(79mg，0.574mmol)在甲苯(0.7mL)中的脱气混合物在密封管中于130℃加热3.5h。将反应混合物用EtOAc和水稀释反应混合物。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO

步骤4：(1RS,2RS)-5'-氯-2-甲基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

将(1RS,2RS)-5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-2-甲基螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(470mg，1.43mmol)和硼烷二甲基硫醚复合物(0.271mL，2.88mmol)在THF(3mL)中的溶液在70℃加热5h。对反应混合物浓缩。将残余物溶解在TFA(3mL)和水(1滴)中，并将反应混合物在密封的小瓶中在80℃加热18h。将反应混合物用EtOAc和饱和碳酸氢钠水溶液稀释。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO

实例128

(1RS,2SR)-5'-氯-2-甲基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

以针对(1RS,2RS)-5'-氯-2-甲基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶](上述步骤4)所描述的相似的方式，从(1RS,2SR)-5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-2-甲基螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例129

5'-溴-2,2-二甲基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

步骤1：3-(丙-2-亚烷基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮

将1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮(1.0g，7.5mmol)，哌啶(4mL，40.5mmol)和丙酮(10mL)在MeOH(10mL)中的混合物在40℃搅拌3h。蒸发混合物，并将残余物与甲苯共沸。将残余物在高真空下干燥，得到标题化合物(1.3g，100％)。LCMS(ESI)[M+H]

步骤2：2,2-二甲基螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

将氢化钠(在油中60％，388mg，9.7mmol)分批添加至三甲基碘化亚砜(1.8g，8.2mmol)在DMSO(20mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌30min，经5min分批添加3-(丙-2-亚基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮(1.3g，7.5mmol)，并将混合物搅拌18h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(150mL)淬灭，并且用EtOAc(2x100mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(30mL)洗涤，干燥(Na

步骤3：5'-溴-2,2-二甲基螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

将NBS(1.11g，6.2mmol)分批添加到2,2-二甲基螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(1.17g，6.2mmol)在无水DMF(19mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌64h，然后在EtOAc和水(200mL)之间分配。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL)洗涤，干燥(Na

步骤4：5'-溴-2,2-二甲基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

在0℃，将DIBAL(在DCM中1N；2.8mL，2.8mmol)滴加到5'-溴-2,2-二甲基螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(150mg，0.56mmol)在无水DCM(2.8mL)中的悬浮液。将反应混合物在室温搅拌5h，然后用罗谢尔盐水溶液(25mL)淬灭，并用DCM(25mL)萃取。将有机萃取物干燥(Na

实例130

5'-氯-2'-甲基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

步骤1：2-(5-氯-2-(三甲基甲硅烷基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙-1-醇

将5-氯-3-碘吡啶-2-胺(3.11g，12.24mmol)，4-(三甲基甲硅烷基)丁-3-炔-1-醇(7.72mL，36.79mmol)，与DCM复合的[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(503mg，0.62mmol)，氯化锂(520mg，12.4mmol)和碳酸钠(2.6g，24.4mmol)在DMF(90mL)中的脱气混合物在100℃加热18h。将冷却的反应混合物浓缩，然后用EtOAc和水稀释。将水层进一步EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：2-(5-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙-1-醇

将2-(5-氯-2-(三甲基甲硅烷基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙-1-醇(3.35g，10.8mmol)在TBAF(在THF中1N，30mL，30mmol)中的溶液在室温搅拌18h。蒸发溶剂，并将残余物用EtOAc和水稀释。将水层进一步EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤3：3-(2-溴乙基)-5-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶

向2-(5-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙-1-醇(1.1g，5.61mmol)在冷却至0℃的DCM(30mL)中的溶液，加入三苯基膦(1.62g，6.17mmol)和四溴化碳(2.04g，6.17mmol)。将反应混合物在0℃搅拌3.5h，然后在室温搅拌3h，并浓缩。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在环己烷中的0-50％EtOAc)，得到标题化合物(1.25g，86％)。LCMS(ESI)[M+H]

步骤4：5'-氯螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

向3-(2-溴乙基)-5-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(942mg，3.67mmol)在MeCN/THF(1:1,30mL)中的溶液，添加2-叔丁基丁氨基-2-二乙氨基-1,3-二甲基过氢-1,3,2-二氮杂磷杂苯-聚合物-结合物(1.88g，4.14mmol)。将反应混合物在室温搅拌3.5h，然后通过硅藻土过滤，用MeCN/THF(1:1)洗涤并浓缩。将残余物在真空干燥，得到标题化合物(678mg，100％)。LCMS(ESI)[M+H+H

步骤5：5'-氯-2'-甲基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

向5'-氯螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶](470mg，2.64mmol)在甲苯(10mL)中的溶液(事先与

实例131

(1'-(叔丁氧基羰基)-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)硼酸

将5'-溴螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(500mg，1.54mmol)、双(频哪醇)二硼(683mg，2.69mmol)、乙酸钾(0.24mL，3.84mmol)以及与二氯甲烷复合的[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(125mg，0.15mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的脱气混合物在密封管中于80℃加热20h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，并真空蒸发溶剂。将残余物通过色谱在C18管柱纯化(溶剂梯度，在水中的5-80％CH

实例132

(1r,4r)-5'-溴-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇和(1s,4s)-5'-溴-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇

步骤1：5'-溴螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2',4(1'H)-二酮

将叔丁醇钾(14.2mg，0.126mmol)添加到5-溴-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮(0.408g，1.92mmol)在DMSO(2mL)中的悬浮液。在室温搅拌10min后，将混合物加热至45℃，并经1h滴加丙烯酸甲酯(0.535mL，5.94mmol)。在45℃继续搅拌1h，然后在45℃经30min分批加入叔丁醇钾(0.666g，5.94mmol)。然后将混合物在100℃加热20min，然后冷却至20℃。加入水(10mL)，并将混合物在85℃搅拌30min。冷却至室温后，将反应混合物在EtOAc和水之间分配。将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物用水、盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：(1r,4r)-5'-溴-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇和(1s,4s)-5'-溴-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇

经5min，向5'-溴螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2',4(1'H)-二酮(0.25g，0.85mmol)在DCM(3mL)中的冰冷却的悬浮液添加DIBAL(DCM中1M，5.93mL，5.93mmol)。将混合物在冰浴中搅拌20min，然后在室温搅拌3h。加入更多的DIBAL(在DCM中1M，2.0mL，2.0mmol)，并在室温继续搅拌1h。将反应混合物在冰浴中冷却，并滴加MeOH(3mL)。将混合物用DCM稀释，先后用饱和酒石酸钾钠水溶液、水洗涤，干燥(Na

实例133

5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

步骤1：5'-溴-4'-氯-1'-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

经5min，将氢化钠(在油中60％，0.0617g，1.54mmol)滴加至5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮(0.265g，0.70mmol)和1,5-二溴戊烷(0.11mL，0.84mmol)在DMF(3mL)中的冰冷却溶液。将混合物在室温搅拌5h，然后用饱和氯化铵水溶液淬灭。将混合物用水稀释，并且用EtOAc萃取两次。将合并的有机萃取物用水、盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：5'-溴-4'-氯螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

向5'-溴-4'-氯-1'-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(0.186g，0.42mmol)在DCM(5mL)中的溶液加入TFA(3mL)。将混合物在室温搅拌16h，然后加入甲苯并蒸发(2x)。将残余物溶解于MeOH(2mL)中，并添加在MeOH(5mL)中的2N NH

步骤3：5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

经15min将DIBAL(DCM中1M，2.94mL，2.94mmol)添加到5'-溴-4'-氯螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(0.116g，0.37mmol)在DCM(3mL)中的冰冷却悬浮液。将混合物在室温搅拌2h，然后在冰浴中冷却。依次添加水(0.11mL)，15％NaOH(0.11mL)和水(0.3mL)。将混合物在室温搅拌1h。然后加入硅藻土和Na

实例134

5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酸

步骤1：5-溴-4-氯-3,3-双(2-羟基乙基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯

在-78℃，将臭氧通入5'-溴-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(3.0g，7.78mmol)在DCM(20mL)和MeOH(65mL)中的溶液，持续1.5h。然后将空气、氮气通过溶液。然后在-78℃经10min分批加入硼氢化钠(1.47g，38.9mmol)。当加入更多的硼氢化钠(0.3g，7.9mmol)时，使反应混合物温热至-15℃。当添加更多的硼氢化钠(0.3g，7.9mmol)时，继续温热至室温。在室温继续搅拌另外30min。将反应混合物在冰浴和饱和碳酸钠水溶液(55mL水中50g)中冷却。将混合物在室温搅拌10min，然后浓缩。将残余的悬浮液用EtOAc(2x)萃取。将合并的萃取物用水、盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：5-溴-4-氯-3,3-双(2-碘乙基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯

经15min将甲磺酰氯(1.11mL，14.36mmol)加入到5-溴-4-氯-3,3-双(2-羟基乙基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.75g，6.53mmol)和三乙胺(2.18mL，15.67mmol)在DCM(50mL)中的冰冷却的混合物。将混合物在室温搅拌1.5h，然后用DCM稀释，依次用1M HCl、水和碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥(Na

步骤3：5'-溴-4'-氯-4-氰基螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1',4(2'H)-二甲酸二叔丁酯

向5-溴-4-氯-3,3-双(2-碘乙基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.544g，2.41mmol)在DMF(15mL)中的悬浮液添加氰基乙酸叔丁酯(0.407g，2.89mmol)。经15min，分批加入氢化钠(在油中60％，0.211g，5.3mmol)。将混合物在室温搅拌1h，然后倒入EtOAc和氯化铵水溶液中。将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的萃取物先后用水和盐水洗涤，干燥(Na

步骤4：5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酸

将5'-溴-4'-氯-4-氰基螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1',4(2'H)-二甲酸二叔丁酯(0.974g，1.85mmol)、二噁烷(4mL)和HCl(6M水溶液，14mL)的混合物在加热板上于100℃搅拌20min，然后在微波辐射下于150℃加热1h。蒸发冷却的反应混合物，并将残余物在SCX-2管柱上(用MeCN，MeCN，MeCN中的5％NH

实例135

(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酰胺和(1s,4s)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酰胺

向5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酸(0.291g，0.84mmol)在DMF(3mL)中的溶液，加入氯化铵(0.09g，1.68mmol)和DIPEA(0.73mL，4.21mmol)。经5min，分批加入HATU(0.48g，1.26mmol)。将混合物在室温搅拌20min，然后在EtOAc和碳酸氢钠水溶液之间分配。然后将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物先后用水和盐水洗涤，并蒸发。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在DCM中的2-20％MeOH.NH

实例136

(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4--甲腈

向(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1'，2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酰胺(0.10g，0.29mmol)在DCM(7mL)中的悬浮液，加入三乙胺(0.2mL，1.45mmol)。将混合物冷却至-20℃，并经5min加入三氟乙酸酐(0.1mL，0.72mmol)。使所得溶液经30min温热至5℃，然后用DCM稀释，用水洗涤，干燥((Na

实例137

(1s,4s)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲腈

以类似于针对(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲腈所描述的方式，从(1s,4s)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酰胺开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例138

(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-甲基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲腈和(1s,4s)-5'-溴-4'-氯-4-甲基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲腈

步骤1：(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-氰基螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

将氢化钠(油中60％，13.2mg，0.33mmol)添加到(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲腈(90mg，0.27mmol)和二碳酸二叔丁酯(78mg，0.36mmol)在THF(2mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌2天，然后在EtOAc和10％柠檬酸水溶液之间分配。将有机相用水、盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-氰基-4-甲基螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯和(1s,4s)-5'-溴-4'-氯-4-氰基-4-甲基螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

将(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-氰基螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(0.0805g，0.567mmol)和碘甲烷(0.035mL，0.57mmol)在THF(2mL)中的溶液冷却至-78℃，并加入双(三甲基甲硅烷基)氨基锂溶液(在THF中1M，0.34mL，0.34mmol)。将混合物在-78℃搅拌20min，然后用饱和氯化铵水溶液淬灭，温热至室温，并用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤3：(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-甲基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲腈和(1s,4s)-5'-溴-4'-氯-4-甲基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲腈

将TFA(1mL)添加到(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-氰基-4-甲基螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯和(1s,4s)-5'-溴-4'-氯-4-氰基-4-甲基螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(0.058g，0.13mmol)在DCM(2mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌1h，然后加入更多的TFA(1mL)。在室温继续搅拌另外1.5h。加入甲苯并蒸发混合物(2x)。将残余物溶解在MeOH中，并在SCX-2管柱上纯化(先后用MeOH和1NMeOH.NH

实例139

(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酸甲酯和(1s,4s)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酸甲酯

将硫酸(0.5mL)添加到5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酸(0.125mg，0.36mmol)在MeOH(12mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌4h。减压浓缩后，将残余物在EtOAc和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例140

((1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-基)甲醇和((1s,4s)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-基)甲醇

将DIBAL(在DCM中1M，0.54mL，0.54mmol)添加到(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酸甲酯和(1s,4s)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酸甲酯(0.065g，0.18mmol)在DCM(2mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌30min，然后依次用水(0.02mL)，15％NaOH水溶液(0.02mL)和水(0.05mL)处理。将混合物搅拌1h，然后用DCM稀释。加入硅藻土和Na

实例141

(1s,4s)-5'-溴-4'-氯螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1',4(2'H)-二甲酸1'-叔丁4-甲酯和(1r,4r)-5'-溴-4'-氯螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1',4(2'H)-二甲酸1'-叔丁4-甲酯

将氢化钠(油中60％，53.1mg，1.33mmol)添加到(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酸甲酯和(1s,4s)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酸甲酯(0.319g，0.886mmol)和二碳酸二叔丁酯(0.967g，4.43mmol)在THF(3mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌3天，然后用饱和氯化铵水溶液淬灭，并用EtOAc(2x)萃取。将合并的萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例142

(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酸甲酯和2-((1s,4s)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-基)丙-2-醇

经5min向(1s,4s)-5'-溴-4'-氯螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1',4(2'H)-二甲酸1'-叔丁4-甲酯和(1r,4r)-5'-溴-4'-氯螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1',4(2'H)-二甲酸1'-叔丁4-甲酯(0.0927g，0.20mmol)在THF(2mL)中冷却至-78℃的溶液添加甲基氯化镁(在THF中3M，0.54mL，1.62mmol)。将混合物在-78℃搅拌10min，然后经1h温热至0℃。用饱和氯化铵水溶液淬灭反应，然后用EtOAc萃取两次。将合并的萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例143

2-((1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-基)丙-2-醇

向(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1'，2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酸甲酯(0.054g，0.15mmol)在THF(2mL)中的冰冷却溶液，加入甲基氯化镁(在THF中3M，0.4mL，1.2mmol)。将混合物在室温搅拌1h，然后加入另外的甲基氯化镁(在THF中3M，0.4mL，1.2mmol)，并将混合物搅拌4h。用饱和氯化铵水溶液淬灭反应，然后用EtOAc萃取两次。将合并的萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例144

(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-甲基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酸甲酯

步骤1：(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-甲基螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-

1',4(2'H)-二甲酸1'-叔丁4-甲酯

将(1s,4s)-5'-溴-4'-氯螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1',4(2'H)-二甲酸1'-叔丁4-甲酯和(1r,4r)-5'-溴-4'-氯螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1',4(2'H)-二甲酸1'-叔丁4-甲酯(0.145g，0.315mmol)和碘甲烷(0.137mL，2.21mmol)在THF(2mL)中的溶液冷却至-78℃。经5min添加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂溶液(在THF中1M，1.58mL，1.58mmol)。将混合物在-78℃搅拌10min，然后经30min温热至0℃。在0℃搅拌30min后，将反应用饱和氯化铵水溶液淬灭，用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-甲基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酸甲酯

将TFA(1.5mL)添加至(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-甲基螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1',4(2'H)-二甲酸1'-叔丁4-甲酯(0.0864g，0.18mmol)在DCM(1.5mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌2h。加入甲苯并蒸发(2x)。将残余物在SCX-2管柱上纯化(先后用MeOH和1N MeOH.NH

实例145

((1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-甲基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-基)甲醇

将DIBAL(在DCM中1M，0.45mL，0.45mmol)添加到(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-甲基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酸甲酯(0.0555g，0.15mmol)在DCM(2.5mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌30min，然后依次用水(0.018mL)，15％NaOH(0.018mL)和水(0.045mL)处理，并搅拌1h。将混合物用DCM稀释。添加硅藻土和Na

实例146

5'-溴-4'-氯螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2',4(1'H)-二酮

步骤1：3,3'-(5-溴-4-氯-2-氧代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3,3-二基)二丙酸二甲酯

将叔丁醇钾(39mg，0.35mmol)添加到5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮(2.0g，5.29mmol)在DMSO(8mL)中的悬浮液。在室温搅拌10min后，将混合物加热至45℃，并经10min滴加丙烯酸甲酯(1.48mL，16.4mmol)。将反应混合物在45℃搅拌1h，然后在EtOAc和水之间分配。将水相用更多EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用水、盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：3,3'-(5-溴-4-氯-2-氧代-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3,3-二基)二丙酸二甲酯

向3,3'-(5-溴-4-氯-2-氧代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3,3-二基)二丙酸二甲酯(2.56g，4.66mmol)在DCM(40mL)中的冰冷却溶液添加TFA(12mL)。将混合物在室温搅拌1h，然后加入甲苯并蒸发(2x)。将残余物溶解在MeOH(10mL)，在冰浴中冷却并添加MeOH.NH

步骤3：5'-溴-4'-氯-2',4-二氧代-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酸甲酯

经20min将叔丁醇钠(在THF中2M，4.45mL，8.9mmol)添加到3,3'-(5-溴-4-氯-2-氧代-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3,3-二基)二丙酸二甲酯(1.21g，2.87mmol)在DMSO(12mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌10min，然后在EtOAc和饱和氯化铵水溶液之间分配。将水相用更多EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用水、盐水洗涤，干燥(Na

步骤4：5'-溴-4'-氯螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2',4(1'H)-二酮

将5'-溴-4'-氯-2',4-二氧代-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酸甲酯(1.01g，2.61mmol)，HCl(3N水溶液，50mL)，MeOH(5mL)和1,4-二噁烷(10mL)的混合物在100℃搅拌1h。冷却至室温并减压浓缩后，加入EtOAc。将混合物通过添加饱和碳酸氢钠水溶液来中和。然后将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇和(1s,4s)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇

经15min，向5'-溴-4'-氯螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2',4(1'H)-二酮(0.651g，1.98mmol)在DCM(10mL)中的冰冷却的悬浮液添加DIBAL(DCM中1M，19.8mL，19.8mmol)。将混合物在室温搅拌16h，然后在冰浴中冷却。依次添加水(0.8mL)，15％NaOH(0.8mL)和水(2.0mL)。将混合物在室温搅拌15min。添加硅藻土和Na

实例147

(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-基甲磺酸酯

步骤1：(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-基苯甲酸酯

将偶氮二甲酸二异丙酯(0.14mL，0.70mmol)添加到(1s,4s)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇(0.148g，0.47mmol)，苯甲酸(0.0854g，0.70mmol)和三苯基膦(0.183g，0.70mmol)在THF(5mL)中的冰冷却溶液。将混合物在室温搅拌1h，然后在减压下浓缩。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在甲苯中的0-100％EtOAc)，得到标题化合物，其被三苯基氧化膦污染(0.391g，假定为定量的)。LCMS(ESI)[M+H]

步骤2：(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-基苯甲酸酯

经5min将氢化钠(油中60％，22.3mg，0.56mmol)添加到不纯的(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-基苯甲酸酯(假设为0.46mmol)，4-甲氧基苄氯(0.082mL，0.604mmol)和15-冠醚-5(0.01mL，0.05mmol)在THF(5mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌4h，然后加入更多的氢化钠(在油中60％，22.3mg，0.56mmol)和4-甲氧基苄氯(0.082mL，0.604mmol)。在室温继续搅拌另外2h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液淬灭，并用EtOAc(2x)进行萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤3：(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇

向(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-基苯甲酸酯(0.151mg，0.28mmol)在THF(2mL)和MeOH(1mL)中的溶液，加入氢氧化锂一水合物(0.024g，0.56mmol)在水(1mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌16h。添加另一部分在水(1mL)中的氢氧化锂一水合物(0.024g，0.56mmol)，并继续搅拌6.5h。将反应混合物在碳酸氢钠水溶液和EtOAc之间分配。将水相用更多EtOAc萃取。将合并的萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤4：(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-基甲磺酸酯

经2min将甲磺酰氯(0.023mL，0.30mmol)添加至(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇(0.0865g，0.20mmol)和三乙胺(0.055mL，0.40mmol)在DCM(3mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌2h，然后用DCM稀释并用碳酸氢钠水溶液洗涤。将水相用更多DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

实例148

(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-甲基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇

步骤1：(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-羟基-4-甲基螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮和(1s,4s)-5'-溴-4'-氯-4-羟基-4-甲基螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

经5min，向5'-溴-4'-氯螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2',4(1'H)-二酮(0.115g，0.35mmol)在THF(3mL)中的冰冷却的溶液添加甲基氯化镁(在THF中3M，0.5mL，1.5mmol)。将混合物在0℃搅拌30min，然后用饱和氯化铵水溶液淬灭，并用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-甲基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇

经5min，向(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-羟基-4-甲基螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(0.0319g，0.092mmol)在DCM(2mL)中的冰冷却的悬浮液添加DIBAL(DCM中1.0M，0.65mL，0.65mmol)。将混合物在冰浴中搅拌10min，然后在室温搅拌16h。加入更多的DIBAL(DCM中1M，0.65mL，0.65mmol)。将反应混合物在室温搅拌另外的3h，然后在冰浴中冷却。小心地添加水(0.052mL)，然后添加15％NaOH(0.052mL)和水(0.13mL)。在室温搅拌1h。添加硅藻土和Na

实例149

(1s,4s)-5'-溴-4'-氯-4-甲基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇

类似于针对(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-甲基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇所描述的方法，制备标题化合物(0.0223g，43％)。LCMS(ESI)[M+H]

实例150

(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-(甲基磺酰基)-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

步骤1：5'-溴-4'-氯-4-(甲基磺酰基)螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1',4(2'H)-二甲酸二叔丁酯

向5-溴-4-氯-3,3-双(2-碘乙基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.268g，0.42mmol)在DMF(2.5mL)中的悬浮液添加碳酸钾(0.144g，1.04mmol)和2-(甲基磺酰基)乙酸叔丁酯(0.097g，0.50mmol)。将混合物在60℃搅拌6.5h，然后倒入EtOAc和水中。将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的萃取物先后用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并蒸发。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在环己烷中20-40％EtOAc)得到标题化合物，为异构体混合物，为无色固体(0.238g，98％)。LCMS(ESI)[M+Na]+601/603/605。

步骤2：5'-溴-4'-氯-4-(甲基磺酰基)-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酸

将5'-溴-4'-氯-4-(甲基磺酰基)螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1',4(2'H)-二甲酸二叔丁酯(0.238g，0.41mmol)，DCM(3mL)和TFA(3mL)的混合物在室温搅拌16h，然后蒸发，并将在MeCN中的残余物上样到2g SCX管柱上，用MeCN洗涤。使MeCN中的10％浓NH

步骤3：(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-(甲基磺酰基)-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

将5'-溴-4'-氯-4-(甲基磺酰基)-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-甲酸(0.10g，0.235mmol)，DMSO(2.2mL)，水(1.1mL)和饱和盐水(1.1mL)的混合物回流(130℃浴)16h，然后倒入EtOAc和水中。将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的萃取物先后用水和盐水洗涤，干燥(Na

实例151

5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[哌啶-4,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2-酮和5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[哌啶-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-6-酮

步骤1：5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-酮肟

将羟胺盐酸盐(873mg，12.57mmol)添加到5-溴-4-氯-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]螺[2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3,3'-环戊烷]-1'-酮(530mg，1.26mmol)在吡啶(5mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌1h，然后将其溶于Et

步骤2：5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-酮对甲苯磺酰基肟

将4-甲苯磺酰氯(478.42mg，2.51mmol)添加到5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-酮肟(548mg，1.25mmol)和碳酸钠(633mg，5.02mmol)在丙酮(20mL)和水(20mL)中的混合物。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后在水(20mL)和EtOAc之间分配。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水(30mL)洗涤，干燥(Na

步骤3：5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[哌啶-4,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2-酮和5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[哌啶-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-6-酮

将在水(7mL)中的碳酸钠(326mg，2.59mmol)添加至5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-酮对甲苯磺酰基肟(382mg，0.65mmol)在丙酮(7mL)中的溶液。将反应混合物剧烈搅拌并在70℃加热18h。将冷却的混合物在水(20mL)和EtOAc之间分配。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤4：5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[哌啶-4,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2-酮和5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[哌啶-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-6-酮

将5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[哌啶-4,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2-酮和5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[哌啶-3,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-6-酮(232mg，0.530mmol)在TFA(1mL)中的混合物在密封管中于75℃加热18h。将冷却的混合物真空干燥，并将残余物通过SCX-2管柱(先后用MeOH和MeOH.NH

实例152

(1r,4r)-5'-溴-4'-甲氧基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇和(1s,4s)-5'-溴-4'-甲氧基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇

步骤1：3,3'-(5-溴-4-甲氧基-2-氧代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3,3-二基)二丙酸二甲酯

以类似于针对3,3'-(5-溴-4-氯-2-氧代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3,3-二基)二丙酸二甲酯所描述的方式制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+Na]

步骤2：3,3'-(5-溴-4-甲氧基-2-氧代-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3,3-二基)二丙酸二甲酯

以类似于针对3,3'-(5-溴-4-氯-2-氧代-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3,3-二基)二丙酸二甲酯所描述的方法制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+Na]

步骤3：5'-溴-4'-甲氧基螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2',4(1'H)-二酮

将叔丁醇钾(0.614g，5.47mmol)添加到3,3'-(5-溴-4-甲氧基-2-氧代-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3,3-二基)二丙酸二甲酯(0.733g，1.77mmol)在DMSO(3mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌30min，然后加热至80℃持续10min。再冷却至室温后，加入水(15mL)，并将混合物在85℃搅拌30min。将冷却的混合物在EtOAc和水之间分配。将水相用更多EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用水、盐水洗涤，干燥(Na

步骤4：(1r,4r)-5'-溴-4'-甲氧基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇和(1s,4s)-5'-溴-4'-甲氧基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇

经15min，向5'-溴-4'-甲氧基螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2',4(1'H)-二酮(0.282g，0.87mmol)在DCM(4mL)中的冰冷却的悬浮液添加DIBAL(DCM中1N，8.67mL，8.67mmol)。将混合物在室温搅拌16h。在冰浴中冷却后，滴加MeOH(3mL)。将混合物用DCM稀释，然后通过二氧化硅管柱过滤(用在DCM中的2-15％MeOH洗脱)。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在EtOAc中的0-100％MeOAc，然后在MeOAc中的0-5％MeOH)，得到(1r,4r)-5'-溴'-4'-甲氧基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-醇(0.064g，24％)，为无色胶。LCMS(ESI)[M+H]

实例153：通用方法E

5'-溴-4'-氯-2-丙基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

步骤1：5'-溴-4'-氯-2-丙基-1'-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

将5-溴-4-氯-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-3H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮(1g，2.65mmol)，三甲基碘化亚砜(640mg，2.91mmol)，1,3,4,6,7,8-六氢-1-甲基-2H-嘧啶并[1,2-a]嘧啶(0.76mL，5.29mmol)和丁醛(0.36mL，3.97mmol)在MeCN(9mL)中的混合物在密封管中在氩气下搅拌。添加1-甲基哌嗪(0.03mL，0.26mmol)，并将反应物在室温搅拌30min，然后在60℃搅拌1.5h。将反应混合物用水稀释，并且用EtOAc进行萃取。将合并的有机馏分用盐水洗涤，干燥(MgSO

步骤2：5'-溴-4'-氯-2-丙基螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

向5'-溴-4'-氯-2-丙基-1'-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(630mg，1.41mmol)在DCM(3mL)中的溶液加入TFA(2mL)。将反应混合物在室温搅拌1h，然后真空浓缩。将残余物与甲苯(x3)共沸，溶于2NMeOH.NH

步骤3：5'-溴-4'-氯-2-丙基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

在0℃，向5'-溴-4'-氯-2-丙基螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(1.41mmol)在DCM(5mL)中的悬浮液缓慢加入在DCM中的1M DIBAL(15.81mL，15.81mmol)，使固体溶解并发生泡腾。将黄色溶液在室温搅拌16h。将反应冷却至0℃，并小心加入水(0.7mL)，然后加入15％NaOH水溶液(0.7mL)和水(1mL)。将反应物在室温搅拌30min，然后加入MgSO

使用方法E中所述的步骤制备以下中间体：

实例153b

5'-溴-2-乙基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法E，从5-溴-1,3-二氢-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮和丙醛开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例153c

(1RS,2SR)-5'-溴-2-丙基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]和(1RS,2RS)-5'-溴-2-丙基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法E，从5-溴-1,3-二氢-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮和丁醛开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例153d

(1RS,2RS)-5'-溴-2-异丙基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]和(1RS,2SR)-5'-溴-2-异丙基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法E，从5-溴-1,3-二氢-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮和异丁醛开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例153e

(1RS,2SR)-5'-溴-4'-氯-2-甲基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法E，从5-溴-4-氯-1-(2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基)-3H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮和乙醛开始制备标题化合物。

实例153f

(1RS,2SR)-5'-溴-4'-氯-2-乙基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]和(1RS,2RS)-5'-溴-4'-氯-2-乙基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法E，从5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮和丙醛开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例153g

(1RS,2RS)-5'-溴-4'-氯-2-异丙基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法E，从5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮和异丁醛开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+Na]

实例153h

(1RS,2SR)-5'-溴-4'-甲氧基-2-甲基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法E，从5-溴-4-甲氧基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮和乙醛开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例154：通用方法F

(1RS,2RS)-5'-溴-4'-氯-2-苯基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

步骤1：(Z)-3-苯亚甲基-5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮

将5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮(600mg，1.59mmol)，苯甲醛(0.32mL，3.18mmol)和1-甲基哌嗪(0.07mL，0.64mmol)在甲苯(10mL)中的溶液在室温搅拌2天。将反应混合物真空浓缩，并将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在环己烷中的0-30％EtOAc)得到标题化合物。

步骤2：(1RS,2RS)-5'-溴-4'-氯-2-苯基-1'-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

向三甲基碘化亚砜(358mg，1.63mmol)在DMF(8mL)中的溶液添加氢化钠(在油中60％，77mg，1.93mmol)。将反应混合物在室温搅拌20min，然后冷却至0℃。添加((Z)-3-苯亚甲基-5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮(690mg，1.48mmol)在THF(16mL)中的溶液，导致形成沉淀。将反应混合物在0℃搅拌10min，然后用水稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

步骤3：(1RS,2RS)-5'-溴-4'-氯-2-苯基螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

向(1RS,2RS)-5'-溴-4'-氯-2-苯基-1'-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(1.01g，2.1mmol)在DCM(10mL)中的溶液添加TFA(2mL)。将反应混合物在室温搅拌30min，然后真空浓缩。将残余物与甲苯共沸，溶于MeOH.NH

步骤4：(1RS,2RS)-5'-溴-4'-氯-2-苯基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

在0℃，向(1RS,2RS)-5'-溴-4'-氯-2-苯基螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(315mg，0.90mmol)在DCM(10mL)中的悬浮液添加DIBAL(在DCM中1M，9.01mL，9.01mmol)。搅拌反应混合物，同时经16h从0℃温热至室温，然后冷却至0℃，用Et

使用方法F中所述的步骤制备以下中间体：

实例154b

(1RS,2RS)-5'-溴-4'-氯-2-(吡啶-4-基)-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法F，从5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮和异烟醛开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155：通用方法G

1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-1H-1,2,4-三唑-5-胺和1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-1H-1,2,4-三唑-3-胺

步骤1:1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-1H-1,2,4-三唑-5-胺和1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-1H-1,2,4-三唑-3-胺

将氢化钠(在油中60％，19.6mg，0.49mmol)加入1H-1,2,4-三唑-5-胺(41mg，0.49mmol)在DMF(1mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌15min，然后添加(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯(0.123g，0.25mmol)在DMF(1mL)中的溶液。将混合物在100℃加热1h，然后冷却并在EtOAc和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物先后用水和盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-1H-1,2,4-三唑-5-胺和1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-1H-1,2,4-三唑-3-胺

将1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-1H-1,2,4-三唑-5-胺和1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-1H-1,2,4-三唑-3-胺(0.16g，0.33mmol)在TFA(3mL)和苯甲醚(0.3mL)中的混合物在80℃搅拌16h。加入甲苯并蒸发(2x)。将残余物通过SCX-2管柱(先后用MeOH和MeOH.NH

实例155b

(1s,3s)-5'-氯-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法G，从(1r,3r)-5'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶基]-3-基甲磺酸酯和1,2,4-三唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155c

3-((1H-1,2,4-三唑-1-基)甲基)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法G，从5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)甲磺酸甲酯和1,2,4-三唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155d

(1RS,3SR)-3-((1H-1,2,4-三唑-1-基)甲基)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

根据通用方法G，从(2RS,3'SR)-5”-溴-4”-氯-1”-(4-甲氧基苄基)-1”,2”-二氢二螺[环氧乙烷-2,1'-环戊烷-3',3”-吡咯并[2,3-b]吡啶]和1,2,4-三唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155e

(1RS,3RS)-3-((1H-1,2,4-三唑-1-基)甲基)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

根据通用方法G，从(2RS,3'RR)-5”-溴-4”-氯-1”-(4-甲氧基苄基)-1”,2”-二氢二螺[环氧乙烷-2,1'-环戊烷-3',3”-吡咯并[2,3-b]吡啶]和1,2,4-三唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155f

(1RS,3SR)-3-((1H-咪唑-1-基)甲基)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-醇

根据通用方法G，从(2RS,3'SR)-5”-溴-4”-氯-1”-(4-甲氧基苄基)-1”,2”-二氢二螺[环氧乙烷-2,1'-环戊烷-3',3”-吡咯并[2,3-b]吡啶]和Boc-咪唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155g

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法G，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和1,2,4-三唑开始制备化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155h

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-(2H-1,2,3-三唑-2-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]，(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-3-(2H-1,2,3-三唑-2-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]，(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-(1H-1,2,3-三唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]和(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-3-(1H-1,2,3-三唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法G，从5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和1H-1,2,3-三唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155i

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-(4-甲基-2H-1,2,3-三唑-2-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法G，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和4-甲基1H-1,2,3-三唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155j

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法G，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和4-甲基吡唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155k

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-(1H-吡唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法G，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和吡唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155l

1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-1H-吡唑-3-胺和1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-1H-吡唑-5-胺

根据通用方法G，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和3-氨基吡唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155m

1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)吡咯烷-2-酮

根据通用方法G，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和2-吡咯烷酮开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155n

1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-胺和1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-5-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-胺

根据通用方法G，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和3-甲基-1,2,4-三唑-5-胺开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155o

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-(3-甲基-1H-吡唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]和(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-(5-甲基-1H-吡唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法G，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和3-甲基吡唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155p

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-(3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法G，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和3,5-二甲基-1H-吡唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155q

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-(4-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法G，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和4-(三氟甲基)-1H-吡唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155r

1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲腈和1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-5-甲基-1H-吡唑-3-甲腈

根据通用方法G，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-3-((甲基磺酰基)氧基)螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯和3-氰基-5-甲基吡唑开始制备标题化合物。第二步骤在室温于DCM中的25％TFA中进行3h。LCMS(ESI)[M+H]

实例155s

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-(2-甲基-1H-咪唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法G，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和2-甲基咪唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155t

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-(3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]和(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-(5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法G，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和3-(三氟甲基)-吡唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155u

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-(4-乙基-1H-吡唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法G，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和4-乙基吡唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155v

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-(4-氯-1H-吡唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法G，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和4-氯吡唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155w

1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-4-甲基-1H-吡唑-3-胺和1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-4-甲基-1H-吡唑-5-胺

根据通用方法G，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和3-氨基-4-甲基吡唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155x

1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺

根据通用方法G，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和1H-吡唑-4-甲酰胺开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例155y

(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-4-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法G，从(1r,4r)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-4-基甲磺酸酯和4-甲基吡唑开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例156：通用方法H

4-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)吗啉

步骤1：4-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)吗啉

将(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶基]-3-基甲磺酸酯(0.10g，0.20mmol)和吗啉(0.5mL，5.7mmol)的混合物在70℃搅拌45min，然后在110℃加热1.5h。加入甲苯并蒸发(2x)。将残余物在EtOAc与碳酸氢钠水溶液之间分配。然后将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：4-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)吗啉

将4-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)吗啉(61.5mg，0.12mmol)在TFA(2.5mL)和苯甲醚(0.25mL)中的混合物在80℃搅拌16h。加入甲苯并蒸发(2x)。将残余物溶解在MeOH中，然后通过SCX-2管柱(先后用MeOH和MeOH.NH

实例156b

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-(吡啶-2-基氧基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法H，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和2-羟基吡啶开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例156c

1-((1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基)吡啶-2(1H)-酮

根据通用方法H，从(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和2-羟基吡啶开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例156d

(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-(吡咯-1-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法H，使用(1RS,3RS)-5'-溴-4'-氯-1'-(4-甲氧基苄基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-基甲磺酸酯和吡咯烷制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例157：通用方法J

5'-溴-4'-甲基-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

步骤1：5'-溴-4'-甲基-1'-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

经5min将氢化钠(在油中60％，0.672g，16.8mmol)滴加至5-溴-4-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮(2.0g，5.6mmol)在DMF(37mL)中的冰冷却溶液。搅拌20min之后，加入1,3-二碘丙烷(2.15g，7.28mmol)在DMF(3mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌1.5h，然后用饱和氯化铵水溶液淬灭。将混合物用水稀释，并且用EtOAc萃取两次。将合并的有机萃取物用水、盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：5'-溴-4'-甲基螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮

向5'-溴-4'-甲基-1'-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1'H)-酮(1.18g，2.97mmol)在DCM(20mL)中的冰冷却溶液加入TFA(5mL)。将混合物在室温搅拌1.5h，然后加入甲苯并蒸发(2x)。将残余物在EtOAc与饱和碳酸氢钠之间分配。将水相用更多的EtOAc萃取，并将合并的萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤3：5'-溴-4'-甲基-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

经10min将DIBAL(DCM中1M，11.2mL，11.2mmol)添加到5'-溴-4'-甲基螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2'(1’H)-酮(0.60g，2.246mmol)在DCM(20mL)中的冰冷却悬浮液。将混合物在室温搅拌4h，然后在冰浴中冷却并小心的添加MeOH(7mL)。将混合物通过二氧化硅柱，用在DCM中的10-20％MeOH洗脱，并将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在环己烷中的20-60％EtOAc)，得到标题化合物(0.288g，51％)，为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]

实例157b

5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法J，从5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮和1-氯-2-碘乙烷开始，并在步骤1中使用碳酸铯作为碱制备标题化合物。

实例157c

((1RS,2RS)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2-基)甲醇和((1RS,2SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-2-基)甲醇

根据通用方法J，从5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶和2,3-二溴丙酸甲酯开始，并在步骤1中使用碳酸铯作为碱制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例157d

5'-溴-4'-甲氧基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法J，从5-溴-4-甲氧基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮和1-氯-2-碘乙烷开始，并在步骤1中使用碳酸铯作为碱制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例157e

5'-溴-4'-甲基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法J，从5-溴-4-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮和1-氯-2-碘乙烷开始，并在步骤1中使用碳酸铯作为碱制备标题化合物。

实例157f

5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法J，从5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮和1,3-二碘丙烷开始，并在步骤1中使用氢化钠作为碱制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例157g

5'-溴-4'-甲氧基-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法J，从5-溴-4-甲氧基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮和1,3-二碘丙烷开始，并在步骤1中使用氢化钠作为碱制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例157h

5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法J，从5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮和1,4-二碘丁烷开始，并在步骤1中使用碳酸铯作为碱制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例157i

(RS)-5'-溴-4'-氯-1',2',5,7-四氢螺[环戊烷[c]吡啶-6,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法J，从5-溴-4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮和3,4-双(氯甲基)吡啶盐酸盐开始，并在步骤1中使用碳酸铯作为碱制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例157j

5'-溴-4'-甲基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

根据通用方法J，从5-溴-4-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3-二氢-2H吡咯并[2,3-b]吡啶-2-酮和1,5-二碘戊烷开始，并在步骤1中使用氢化钠作为碱制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例158：通用方法K

3-氧代-4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯

将4-(3-溴苯基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(529mg，1.5mmol)、双(频哪醇)二硼(457mg，1.8mmol)、与DCM复合的[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(61mg，0.075mmol)、乙酸钾(300mg，3mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的脱气混合物在密封小瓶中于110℃加热16h。将反应混合物用DCM稀释并过滤。将滤液浓缩，然后通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在环己烷中的0-50％EtOAc)得到标题化合物(650mg，100％)，为无色油，将其静置固化。LCMS(ESI)[M+H]

实例158b

1-甲基-3-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)吡啶-2(1H)-酮

步骤1：3-(3-溴苯基)-1-甲基吡啶-2(1H)-酮

将3-溴-1-甲基吡啶-2(1H)-酮(800mg，4.25mmol)，(3-溴苯基)硼酸(854mg，4.27mmol)，四(三苯基膦)钯(0)(230mg，0.2mmol)，碳酸钠(2.6g，8mmol)在1,4-二噁烷/水(5:1,12mL)中的脱气混合物在100℃的微波中照射45min。将冷却的混合物蒸发。将残余物在水和EtOAc之间分配。将有机相用盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：1-甲基-3-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)吡啶-2(1H)-酮

根据通用方法K，从3-(3-溴苯基)-1-甲基吡啶-2(1H)-酮开始制备标题化合物。

实例158c

(2-氨基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)(7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-基)甲酮

步骤1：(2-氨基-5-溴苯基)(7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-基)甲酮

向2-氨基-5-溴苯甲酸(430mg，2.00mmol)和7-氮杂双环[2.2.1]庚烷盐酸盐(300mg，2.24mmol)在DCM(5.0mL)中的悬浮液加入DIPEA(1.75mL，10.0mmol)，然后加入HATU(800mg，2.10mmol)。将反应混合物在室温搅拌1h，然后在DCM和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。用更多的DCM萃取水相，并将合并的有机萃取物通过疏水性过滤器，并真空蒸发。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在DCM中的0-40％EtOAc)，得到标题化合物(528mg，89％)，为灰白色固体。LCMS(ESI)[M+H]

步骤2：(2-氨基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)(7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-基)甲酮

根据通用方法K，从(2-氨基-5-溴苯基)(7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-基)甲酮开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例158d

(2-(3-氨基-5-溴苯基)吡啶-3-基)甲醇

步骤1：3-溴-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯胺

将3,5-二溴苯胺(28g，0.11mol)，双(频哪醇)二硼(16.5g，65.0mmol)，乙酸钾(19.0g，0.19mol)和与DCM复合的[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(2.4g，0.30mmol)在1,4-二噁烷(300mL)中的脱气混合物在90℃加热16h。过滤反应混合物，并且将滤液真空浓缩。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在环己烷中的0-100％DCM)得到标题产物(9.92g，30％)，为在静置时结晶的油。

步骤2：(2-(3-氨基-5-溴苯基)吡啶-3-基)甲醇

将3-溴-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯胺(25g，83.0mmol)，(2-溴吡啶-3-基)甲醇(17.3g，92.1mmol)，四(三苯基膦)钯(0)(4.7g，4.2mmol)，和碳酸铯(54g，166mmol)在1,4-二噁烷(300mL)和水(100mL)中的脱气混合物在90℃加热2h。将反应混合物在真空下浓缩。将残余物溶解在EtOAc中，用盐水洗涤，干燥(MgSO

实例158e

(2-(3-氨基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)吡啶-3-基)甲醇

根据通用方法K，从(2-(3-氨基-5-溴苯基)吡啶-3-基)甲醇(288mg，1.03mmol)开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

4-(3-溴-2-氟苯基)吗啉-3-酮

步骤1：4-(3-氨基-2-氟苯基)吗啉-3-酮

将3-溴-2-氟苯胺(1.9g，10mmol)，吗啉-3-酮(847mg，11mmol)，碘化亚铜(476mg，2.5mmol)，反式-N,N'-二甲基-1,2-环己二胺(710mg，5mmol)，磷酸钾(3.2g，15mmol)在1,4-二噁烷(50mL)中的脱气混合物在100℃搅拌16h。过滤冷却的反应混合物并浓缩。将残余物在EtOAc和水之间分配。将有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：4-(3-溴-2-氟苯基)吗啉-3-酮

在0℃，向溴化铜(II)(892mg，4mmol)和亚硝酸叔丁酯(0.512mL，4.8mmol)在MeCN(16mL)中的溶液中添加4-(3-氨基-2-氟苯基)吗啉-3-酮(630mg，3mmol)在MeCN(16mL)中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌4h，然后用1N HCl淬灭，用水稀释，并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经Na

实例158f

4-(2-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)吗啉-3-酮

根据通用方法K，从4-(3-溴-2-氟-苯基)吗啉-3-酮开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例158g

(6-氨基-2-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)(2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)哌啶-1-基)甲酮

步骤1：(6-氨基-3-溴-2-氟苯基)(2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)哌啶-1-基)甲酮

向6-氨基-3-溴-2-氟苯甲酸(364mg，1.56mmol)，HATU(650mg，1.71mmol)和三乙胺(0.3mL，2.18mmol)在DMF(10mL)中的溶液加入2-(1-甲基吡唑-4-基)哌啶(283mg，1.71mmol)。将反应混合物在室温搅拌30min，然后在水(100mL)和EtOAc之间分配。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：(6-氨基-2-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)(2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)哌啶-1-基)甲酮

根据通用方法K，从(6-氨基-3-溴-2-氟苯基)(2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)哌啶-1-基)甲酮开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例158h

6-氨基-2-氟-N-甲基-N-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺

步骤1：6-氨基-3-溴-2-氟-N-甲基-N-[(1-甲基吡唑-4-基)甲基]苯甲酰胺

在室温，将在DMF(0.5mL)中的N-甲基-1-(1-甲基吡唑-4-基)甲胺(294mg，2.35mmol)加入到6-氨基-3-溴-2-氟苯甲酸(500mg，2.14mmol)，HATU(894mg，2.35mmol)和三乙胺(0.42mL，2.99mmol)在DMF(15mL)中的溶液。将反应混合物搅拌30min，然后在水(50mL)和EtOAc之间分配。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：6-氨基-2-氟-N-甲基-N-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺

根据通用方法K，从6-氨基-3-溴-2-氟-N-甲基-N-[(1-甲基吡唑-4-基)甲基]苯甲酰胺开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例158i

6-氨基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-氟-N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺

步骤1：6-氨基-3-溴-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺

经5min向6-氨基-3-溴-2-氟苯甲酸(200mg，0.8500mmol)，DIPEA(0.45mL，2.56mmol)和N,N,N′-三甲基乙二胺(0.13mL，1.03mmol)DMF(2.5mL)中的冰冷却溶液分批加入HATU(487mg，1.28mmol)。将反应混合物在室温搅拌10min，然后在EtOAc和水之间分配。将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用水、盐水洗涤，干燥(Na

步骤2：6-氨基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-氟-N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺

根据通用方法K，从6-氨基-3-溴-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例158j

6-氨基-2-氟-N-甲基-N-(2-吗啉基乙基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺

以类似于以上针对6-氨基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-氟-N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺所描述的方式，在步骤1中使用吗啉代替N,N,N′-三甲基乙二胺制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

实例159：通用方法L

2-氨基-5-(1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-N,N-二甲基苯甲酰胺(化合物1)

将5'-溴-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶](59mg，0.23mmol)，2-氨基-N,N-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺(68mg，0.23mmol)，X-Phos(7mg，0.014mmol)，X-Phos Pd G2(11mg，0.014mmol)，磷酸三钾(99mg，0.47mmol)在1,4-二噁烷(1.7mL)和水(0.3mL)中的脱气混合物在密封管中于100℃加热16h。将冷却的混合物浓缩，然后通过SCX-2管柱(先后用MeOH和NH

实例160：通用方法M

4-(3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟苯基)吗啉-3-酮(化合物9)

将5'-溴-1'，2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶](112mg，0.5mmol)，XPhos-Pd-G2(4mg，0.005mmol)，Xphos(5mg，0.01mmol)，乙酸钾(147mg，1.5mmol)和四羟基二硼(135mg，1.5mmol)在IMS(5mL)中的脱气溶液在80℃加热2h。加入4-(3-溴-2-氟苯基)吗啉-3-酮(137mg，0.5mmol)和碳酸钾(1.8M水溶液，0.83mL，1.5mmol)，并将反应物在80℃搅拌16h。将反应混合物用水稀释，并且用EtOAc进行萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤，干燥(Na

实例161：通用方法N

1-(3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)苯基)四氢嘧啶-2(1H)-酮(化合物67)

将5'-溴-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶](120mg，0.533mmol)，双(频哪醇)二硼(187mg，0.736mmol)，乙酸钾(0.157g，1.60mmol)，与DCM复合的[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(44mg，0.053mmol)和DME(2.5mL)的脱气混合物在密封小瓶中在氮气下于110℃加热2.25h。将冷却的反应混合物添加至1-(6-溴吡啶-2-基)四氢嘧啶-2(1H)-酮(113mg，0.444mmol)，XPhos(21mg，0.044mmol)，XPhos Pd G2(0.0352g.0.044mmol)和二噁烷(1mL)的混合物。添加K

实例162：通用方法P

3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-1H-吲哚-5-甲腈(化合物307)

步骤1：3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-甲腈

将3-溴-1-(对甲苯磺酰基)吲哚-5-甲腈(167mg，0.45mmol)，双(频哪醇)二硼(135mg，0.53mmol)，乙酸钾(132mg，1.34mmol)和与DCM复合的[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(33mg，0.040mmol)在DME(2mL)中的脱气混合物在密封管中于110℃加热1.5h。反应混合物未经处理或纯化即用于步骤2。LCMS(ESI)[2M+Na]

步骤2：3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-甲腈

向来自步骤1的冷却的反应混合物中，添加5-溴螺[1,2-二氢吡咯并[2,3-b]吡啶-3,1'-环丙烷](45mg，0.20mmol)，X-Phos(9.5mg，0.020mmol)，X-Phos Pd G2(16mg，0.020mmol)，磷酸钾(94mg，0.44mmol)和水(1mL)的1,4-二噁烷(2mL)中的溶液。将混合物脱气(真空/氩气×3)，然后在密封管中于100℃加热3h。将冷却的混合物浓缩，然后通过SCX-2管柱(先后用MeOH和MeOH.NH

步骤3：3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-1H-吲哚-5-甲腈

在室温将在THF中的1.0M TBAF(1.63mL，1.63mmol)滴加至1-(对甲苯磺酰基)-3-螺[1,2-二氢吡咯并[2,3-b]吡啶-3,1'-环丙烷]-5-基-吲哚-5-甲腈(144.mg，0.3300mmol)和哌啶(0.16mL，1.63mmol)在THF(5mL)中的溶液。将混合物搅拌4h，然后真空浓缩，并通过SCX-2管柱(先后用MeOH和MeOH.NH

实例163：通用方法Q

(1RS,3SR)-4'-氯-5'-(7-(2-氧代哌嗪-1-基)-1H-吲哚-3-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酰胺(化合物305a)

步骤1：3-氧代-4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-7-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

将4-[3-溴-1-(对甲苯磺酰基)吲哚-7-基]-3-氧-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(190mg，0.35mmol)，双(频哪醇)二硼(132mg，0.520mmol)，乙酸钾(103mg，1.04mmol)以及与DCM复合的[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(26mg，0.030mmol)在DME(1.5mL)中的脱气混合物在密封管中于110℃加热1.5h。将该混合物冷却至室温，无需进一步纯化即可用于步骤2。LCMS(ESI)[M+Na]

步骤2：4-(3-((1RS,3SR)-3-氨基甲酰基-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-7-基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯

向来自步骤1的冷却的反应混合物中添加(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酰胺(114.5mg，0.35mmol)，2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基联苯(16.5mg，0.030mmol)，X-Phos Pd G2(28mg，0.030mmol)，磷酸三钾(1N，0.06mL，0.690mmol)，1,4-二噁烷(1mL)和水(0.1mL)。将混合物脱气(真空/氩气×3)，并在密封管中于100℃加热3.5h。将冷却的混合物真空浓缩，然后通过SCX-2管柱(先后用MeOH和MeOH.NH

步骤3：4-(3-((1RS,3SR)-3-氨基甲酰基-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-1H-吲哚-7-基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯

在室温，将TBAF(在THF中1N，0.23mL，0.2300mmol)滴加到4-[3-[(1RS,3SR)-3'-氨基甲酰基-4-氯-螺基[1,2-二氢吡咯并[2,3-b]吡啶-3,1'-环戊烷]-5-基]-1-(对甲苯磺酰基)吲哚-7-基]-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(33.4mg，0.050mmol)和哌啶(0.02mL，0.2300mmol)在THF(0.5mL)中的溶液。将混合物搅拌18h，然后浓缩并通过SCX-2管柱(先后用MeOH和MeOH.NH

步骤4：(1RS,3SR)-4'-氯-5'-(7-(2-氧代哌嗪-1-基)-1H-吲哚-3-基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲酰胺

将4-[3-[(1RS,3SR)-3'-氨基甲酰基-4-氯-螺基[1,2-二氢吡咯并[2,3-b]吡啶-3,1'-环戊烷]-5-基]-1H-吲哚-7-基]-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(90mg，0.160mmol)和TFA(0.18mL)在DCM(2mL)中的溶液在室温搅拌16h。将反应混合物干燥，并使残余物通过SCX-2管柱(先后用MeOH和MeOH.NH

实例164：通用方法R

3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N-(2-羟基乙基)-N-甲基苯甲酰胺(化合物45)

向3-(4'-氯-1'，2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-I]吡啶]-5'-基)-2-氟苯甲酸甲酯(130mg，0.4mmol)在DCM(5mL)中的悬浮液添加DIPEA(0.21mL，1.2mmol)和HATU(190mg，0.5mmol)。将反应混合物在室温搅拌10min，然后添加2-(甲基氨基)乙-1-醇(36mg，0.48mmol)。将反应混合物在室温搅拌16h，然后用DCM稀释并用盐水洗涤。将有机萃取物干燥(MgSO

实例165：通用方法S

5-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-3-基)螺[1,2-二氢吡咯并[2,3-b]吡啶-3,1'-环丙烷](化合物333)

步骤1：5'-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-3-基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

将(1'-(叔丁氧羰基)-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)硼酸(50mg，0.17mmol)，X-Phos-Pd G2(13.6mg，0.017mmol)，X-Phos(8.2mg，0.017mmol)，3-溴-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶(41mg，0.21mmol)，磷酸三钾(1N水溶液，0.38mL，0.38mmol)和1,4-二噁烷(2.4mL)的脱气混合物在100℃加热1h。将反应混合物用EtOAc稀释，并用水洗涤。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

步骤2：5-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-3-基)螺[1,2-二氢吡咯并[2,3-b]吡啶-3,1'-环丙烷]

将5-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-3-基)螺[2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3,1'-环丙烷]-1-甲酸叔丁酯(37mg，0.10mmol)用TFA/DCM(1/4,1mL)处理，并通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在DCM中的0-10％MeOH.NH

实例166：通用方法T

5'-(3-(4,5,6,7-四氢-[1,2,3]三唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)苯基)-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶](化合物72)

步骤1：3-(3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)苯基)-6,7-二氢-[1,2,3]三唑[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸叔丁酯

根据通用方法L，使用5'-溴-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]和3-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6,7-二氢-[1,2,3]三唑[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸叔丁酯制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

向3-(3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)苯基)-6,7-二氢-[1,2,3]三唑[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸叔丁酯(38mg，0.085mmol)在DCM(1mL)中的溶液添加TFA(1mL)。将反应混合物在室温搅拌1h，然后在Isolute SCX-2管柱(先后用MeOH和MeOH.NH

实例167：通用方法V

(3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟苯基)(哌嗪-1-基)甲酮(化合物48)

根据通用方法R，从3-(4'-氯-1',2'-二氢螺环[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟苯甲酸酯和哌嗪-1-甲酸叔丁酯开始制备标题化合物，然后用TFA/DCM处理，并通过方法C进行纯化。

实例168：通用方法W

6-氨基-3-((1s,4s)-4-(氨基甲基)-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺(化合物258b)

将6-氨基-3-((1s,4s)-4'-氯-4-氰基-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺(0.111g，0.26mmol)溶解于乙醇(8mL)中。加入HCl(在二噁烷中4M，0.39mL，1.55mmol)和氧化铂(IV)(20mg)，并将混合物在1大气压的氢气下于室温搅拌2天。添加水，并将混合物通过硅藻土过滤。将滤液在减压下蒸发。将残余物在C18柱上纯化(用在水和0.5％TFA中的2-14％MeCN洗脱)。将残余物通过SCX-2管柱(先后用MeOH和1N MeOH.NH

实例169

6-氨基-3-((1r,4r)-4-(氨基甲基)-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺(化合物258a)

以类似于针对6-氨基-3-((1s,4s)-4-(氨基甲基)-4'-氯-1',2'-二氢螺[环己烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺所描述的方法制备标题化合物。

实例170

1-(3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)苯基)哌嗪-2-酮(化合物41)

根据通用方法M，从5'-溴-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]和4-(3-溴苯基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯开始制备标题化合物，然后用TFA/DCM处理，并通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在DCM中的5-6％MeOH.NH

实例171

6-氨基-3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N-(2-羟基乙基)-N-甲基苯甲酰胺(化合物36)

步骤1：6-氨基-N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺

根据通用方法L，从2-氨基-N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-6-氟-N-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺和5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

步骤2：6-氨基-3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N-(2-羟基乙基)-N-甲基苯甲酰胺

向6-氨基-N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺(150mg，0.3mmol)在THF(3mL)中的溶液添加TBAF(在THF中1N,2mL)。将反应混合物在室温搅拌16h，然后用水稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例172

5'-(5-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-3-基)-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶](化合物326)

步骤1：3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-5-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-1-甲酸叔丁酯

将3-溴-5-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-1-甲酸叔丁酯(180mg，0.48mmol)，双(频哪醇)二硼(146mg，0.58mmol)，乙酸钾(0.1mL，1.6mmol)和与DCM复合的[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(39mg，0.05mmol)在DME(2mL)中的脱气混合物于100℃加热1.5h。向反应中加入磷酸三钾(1N水溶液，0.98mL，0.98mmol)，5-溴螺[1,2-二氢吡咯并[2,3-b]吡啶-3,1'-环丙烷](100mg，0.44)，Xphos(21mg，0.04mmol)和Xphos Pd G2(35mg，0.04mmol)。将反应混合物在100℃加热1h，然后用水稀释并用EtOAc萃取。合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

步骤2：5'-(5-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-3-基)-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

向3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-5-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-1-甲酸叔丁酯(60mg，0.14mmol)在MeOH(1mL)中的溶液添加HCl(在二噁烷中4N,3mL,12mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h，然后真空浓缩，并将残余物根据方法D纯化，得到标题化合物(12mg，26％)，为白色固体。

实例173

5'-(5-(4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)-1H-吲哚-3-基)-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶](化合物335)

步骤1：5'-(5-(4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-3-基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

根据通用方法N，使用3-溴-5-(4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚和(1'-(叔丁氧羰基)-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)硼酸制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

步骤2：5'-(5-(4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)-1H-吲哚-3-基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

向5'-(5-(4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-3-基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(61mg，0.10mmol)在THF(1mL)中的溶液加入TBAF(在THF中1N，0.51mL，0.51mmol)和哌啶(0.05mL，0.51mmol)。将反应混合物在室温搅拌4天，然后用水稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO

步骤3：5'-(5-(4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)-1H-吲哚-3-基)-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]

将5'-(5-(4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)-1H-吲哚-3-基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(0.10mmol)溶于HCl(在二噁烷中4N，1mL，4mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h，然后真空浓缩。将残余物通过方法C纯化，得到标题化合物(26mg，74％)。

实例174

2-(3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-1H-吲哚-5-基)-1,3,4-噁二唑甲酸盐(化合物334)

如以上针对2-(3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-1H-吲哚-5-基)-1,3,4-噁二唑(步骤1-3)所描述的方式，从2-(3-溴-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-5-基)-1,3,4-噁二唑代替步骤1中的3-溴-5-(4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚开始制备标题化合物。

实例175

3-氨基-6-(4'-甲氧基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-N,N-二甲基吡啶甲酰胺(化合物309)

将3-氨基-N,N-二甲基-6-(三丁基锡烷基)吡啶甲酰胺(163mg，0.36mmol)，5'-溴-4'-甲氧基-1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶](91mg，0.360mmol)，碘化铜(I)(21mg，0.11mmol)，氯化锂(76mg，1.79mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(41.5mg，0.040mmol)在1,4-二噁烷(1.5mL)中的脱气混合物在密封管中于115℃在微波照射下照射4h。将冷却的混合物通过SCX-2管柱(先后用MeOH和MeOH.NH

实例176

3-氨基-6-((1R,3S)-4'-氯-3-氰基-3-甲基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-N,N-二甲基吡啶甲酰胺(化合物288)

将3-氨基-N,N-二甲基-6-(三丁基锡烷基)吡啶甲酰胺(166mg，0.37mmol)，(1RS,3SR)-5'-溴-4'-氯-3-甲基-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-甲腈(100mg，0.31mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(35mg，0.03mmol)在1,4-二噁烷(2mL)中的混合物用氩气脱气，并将反应混合物在100℃加热16h。将反应混合物真空浓缩，并将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在EtOAc中的0-6％MeOH.NH

实例177

1-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-1H-吲哚-6-甲腈(化合物344)

将5'-溴螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(100mg，0.31mmol)，5-氰基吲哚(52mg，0.37mmol)，碘化铜(2.9mg，0.02mmol)，(±)-反式-1,2-二氨基环己烷(7mg，0.06mmol)和磷酸钾(137mg，0.65mmol)在DMF(1mL)中的脱气混合物在密封小瓶中于130℃加热16h。将冷却的混合物通过硅藻土塞，用EtOAc洗脱，并浓缩。将残余物吸收在DCM(2mL)中，并在室温与TFA(2mL)一起搅拌16h。将混合物浓缩并通过方法C纯化，得到标题化合物(22mg，25％)，为白色固体。

实例178

5-(苯并三唑-1-基)螺[1,2-二氢吡咯并[2,3-b]吡啶-3,1'-环丙烷](化合物332)

在剧烈搅拌下将5-溴螺[2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3,1'-环丙烷]-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.31mmol)，苯并三唑(44mg，0.37mmol)，碘化铜(2.9mg，0.02mmol)，磷酸钾(137mg，0.65mmol)和(±)-反式-1,2-二氨基环己烷(7mg，0.06mmol)在DMF(2mL)中的脱气混合物加热至130℃持续16h，然后冷却并通过二氧化硅管柱(用EtOAc洗脱)。将相关的合并的馏分用5％LiCl水溶液洗涤。将有机萃取物干燥(Na

实例179

5-(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)螺[1,2-二氢吡咯并[2,3-b]吡啶-3,1'-环丙烷](化合物329)

步骤1：3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-甲酸叔丁酯

根据通用方法N，使用5-溴螺[1,2-二氢吡咯并[2,3-b]吡啶-3,1'-环丙烷]和3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡咯并[3,2-c]吡啶-1-甲酸叔丁酯制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

步骤2：5-(1H-)吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)螺[1,2-二氢吡咯并[2,3-b]吡啶-3,1'-环丙烷]

将3-螺[1,2-二氢吡咯并[2,3-b]吡啶-3,1'-环丙烷]-5-基吡咯并[3,2-c]吡啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.28mmol)在三氟乙醇(7.7mL)中的溶液于140℃在微波照射下加热1h。真空除去溶剂，并将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在DCM中的0-8％MeOH.NH

实例180

3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-6-氟-1H-吲哚-5-甲腈](化合物348)

步骤1：5'-(5-氰基-6-氟-1H-吲哚-3-基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

将(1-叔丁氧基羰基螺基[2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3,1'-环丙烷]-5-基)硼酸(142mg，0.49mmol)，与二氯甲烷复合的[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(26mg，0.03mmol)，碳酸铯(298mg，0.91mmol)，6-溴-3-碘-1H-吲哚-5-甲腈(130mg，0.45mmol)在1,4-二噁烷(4.3mL)和水(0.85mL)中的脱气混合物在100℃加热1.5h。将反应混合物用EtOAc稀释，并用水洗涤。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

步骤2：3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-6-氟-1H-吲哚-5-甲腈]

将5-(5-氰基-6-氟-1H-吲哚-3-基)螺[2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3,1'-环丙烷]-1-甲酸叔丁酯(54mg，0.13mmol)在三氟乙醇(2mL)中的溶液于140℃在微波照射下加热1h。真空除去溶剂，并将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在DCM中的0-5％MeOH.NH

实例181

3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-N-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-6-胺(化合物345)

步骤1：5'-(6-溴-1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

将(1-叔丁氧基羰基螺基[2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3,1'-环丙烷]-5-基)硼酸(35mg，1.21mmol)，与DCM复合的[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(69mg，0.08mmol)，碳酸铯(796mg，2.43mmol)，1-(苯磺酰基)-6-溴-3-碘-吲哚(561mg，1.21mmol)在1,4-二噁烷(2.8mL)和水(0.56mL)中的脱气混合物在50℃加热1h。将反应混合物用EtOAc稀释，并用水洗涤。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na

步骤2：5'-(6-((1-甲基-1H--吡唑-4-基)氨基)-1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

将5'-(6-溴-1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(360mg，0.62mmol)，三(二苄基内酯)二钯(0)(40mg，0.04mmol)，XantPhos(50mg，0.09mmol)，碳酸铯(813mg，2.48mmol)，1-甲基吡唑-4-胺(78mg，0.80mmol)和1,4-二噁烷(10.5mL)的脱气混合物在100℃加热1h。使反应混合物冷却至室温，并过滤至硅藻土

步骤3：5'-(6-((1-甲基-1H--吡唑-4-基)氨基苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

在室温向5'-(6-((1-甲基-1H--吡唑-4-基)氨基)-1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(77mg，0.13mmol)在THF(0.61mL)中的溶液一次加入哌啶(0.07mL，0.68mmol)和TBAF(在THF中1N，0.645mL，0.65mmol)。将反应混合物加热至70℃持续18h，然后用另外的哌啶(10当量)和四丁基氟化铵(10当量)处理。在70℃再搅拌6h后，将混合物冷却至室温，并加入水/盐水/EtOAc的混合物。然后将水相用另外的EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤4：3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-N-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-6-胺

将5'-(6-((1-甲基-1H--吡唑-4-基)氨基苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(14mg，0.03mmol)用TFA/DCM处理，并通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在DCM中的0-10％MeOH.NH

实例182

3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-N-甲基-N-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-6-胺(化合物343)

步骤1：5'-(6-(甲基(1-甲基-1H--吡唑-4-基)氨基)-1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

在0℃，将氢化钠(在油中60％，9.7mg，0.24mmol)添加到5-[1-(苯磺酰基)-6-[(1-甲基吡唑-4-基)氨基]吲哚-3-基]螺[2H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3,1'-环丙烷]-1-甲酸叔丁酯(131mg，0.22mmol)在THF(3.8mL)中的溶液。然后滴加碘甲烷(0.016mL，0.25mmol)，并将反应混合物在室温搅拌1h。在0℃，加入另外的氢化钠(1当量)和碘甲烷(1当量)。将反应物在室温搅拌1.5h。在0℃，加入另外的氢化钠(1当量)和碘甲烷(1当量)。将反应物在室温搅拌18h。小心加入水，然后加入EtOAc。将水相进一步EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用饱和氯化钠水溶液洗涤，干燥(Na

步骤2：5'-(6-(甲基(1-甲基-1H--吡唑-4-基)氨基苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

将5'-(6-(甲基(1-甲基-1H--吡唑-4-基)氨基)-1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(78mg，0.13mmol)在TBAF(在THF中1N，1.92mL，1.92mmol)中的溶液加热至60℃持续18h。将混合物冷却至室温，并加入水/盐水/EtOAc的混合物。然后将水相用EtOAc萃取，并将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

步骤3：3-(1',2'-二氢螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-N-甲基-N-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲哚-6-胺

将5'-(6-(甲基(1-甲基-1H--吡唑-4-基)氨基苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)螺[环丙烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(44mg，0.09mmol)用TFA/DCM处理，并通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在DCM中的0-10％MeOH.NH

实例183

6-氨基-3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N-(2-羟基乙基)-N-甲基苯甲酰胺(化合物44)

步骤1：6-氨基-N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺

根据通用方法L，从5'-溴-4'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]和6-氨基-N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2-氟-N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

步骤2：6-氨基-3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N-(2-羟基乙基)-N-甲基苯甲酰胺

将TBAF(在THF中1.0N，0.34mL，0.34mmol)滴加到6-氨基-N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺(146mg，0.282mmol)在THF(1mL)中的悬浮液。将混合物在室温搅拌2h，然后在冰水(15mL)和EtOAc(3x15mL)之间分配。将合并的有机萃取物用盐水(20mL)洗涤，干燥(Na

实例184

6-氨基-2-氟-N-(2-羟基乙基)-3-(4'-甲氧基-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-N-甲基苯甲酰胺(化合物52)

步骤1：6-氨基-N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2-氟-3-(4'-甲氧基-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-N-甲基苯甲酰胺

根据通用方法L，从5'-溴-4'-甲氧基-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]和6-氨基-N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2-氟-N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

步骤2：6-氨基-2-氟-N-(2-羟基乙基)-3-(4'-甲氧基-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-N-甲基苯甲酰胺

将TBAF(在THF中1.0N，0.43mL，0.43mmol)滴加到6-氨基-N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2-氟-3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-N-甲基苯甲酰胺(146mg，0.282mmol)在THF(2mL)中的悬浮液。将混合物在室温搅拌2h，然后在冰水(15mL)和EtOAc(3x15mL)之间分配。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na

实例185

6-氨基-3-((1r,3r)-3-(氰基甲基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺(化合物95)

步骤1：6-氨基-3-(3-(氰基亚甲基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺

根据通用方法L，从2-(5'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-亚烷基)乙腈和6-氨基-2-氟-N,N-二甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

步骤2：6-氨基-3-((1r,3r)-3-(氰基甲基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺

将6-氨基-3-(3-(氰基亚甲基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺(110mg，0.291mmol)在EtOAc/MeOH(1:1,2mL)中的溶液的在室温在钯(在碳上10％)上氢化4h。滤出催化剂，并蒸发滤液。将残余物通过HPLC纯化(溶剂梯度，在H

实例186

6-氨基-3-((1r,3r)-3-(2-氨基-2-氧代乙基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺(化合物102a)

步骤1：6-氨基-3-(3-(2-氨基-2-氧代次乙基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺

根据通用方法L，从2-(5'-氯-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-亚烷基)乙酰胺和6-氨基-2-氟-N,N-二甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

将6-氨基-3-(3-(2-氨基-2-氧代次乙基)-1',2'-二氢螺[环丁烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺(193mg，0.489mmol)在EtOAc/MeOH(1:1,4mL)中的溶液的在室温在钯(在碳上10％)上氢化18h。滤出催化剂，并蒸发滤液。将残余物通过二氧化硅色谱纯化(溶剂梯度，在DCM中的0-10％MeOH.NH

实例187

6-氨基-3-(3-((2-氨基-2-氧代乙基)氨基)-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺(化合物76)

步骤1：5'-(4-氨基-3-(二甲基氨基甲酰基)-2-氟苯基)-4'-氯-3-氧代螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

根据通用方法L，从5'-溴-4'-氯-3-氧代螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯和6-氨基-2-氟-N,N-二甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

步骤2：3-((2-氨基-2-氧代乙基)氨基)-5'-(4-氨基-3-(二甲基氨基甲酰基)-2-氟苯基)-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

向5'-(4-氨基-3-(二甲基氨基甲酰基)-2-氟苯基)-4'-氯-3-氧代螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(72mg，0.143mmol)在MeOH(2mL)中的溶液依次添加甘氨酰胺、HCl(21mg，0.186mmol)和氰基硼氢化钠(10.8mg，0.172mmol)。将反应混合物在室温搅拌18h，然后浓缩。将残余物通过二氧化硅色谱法纯化(溶剂梯度，在DCM中的0-10％MeOH.NH

步骤3：6-氨基-3-(3-((2-氨基-2-氧代乙基)氨基)-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺

向3-((2-氨基-2-氧代乙基)氨基)-5'-(4-氨基-3-(二甲基氨基甲酰基)-2-氟苯基)-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(50mg，0.089mmol)在DCM(3mL)中的溶液添加TFA(1mL)。将反应混合物在室温搅拌1h，然后在SCX-2管柱(先后用MeOH和MeOH.NH

实例188

3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-5'-基)-2-氟-N-((1-(2-羟基乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)-N-甲基苯甲酰胺(化合物262)

步骤1：5'-(3-(((1-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)(甲基)氨基甲酰基)-2-氟苯基)-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

根据通用方法N，使用3-溴-N-((1-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺和4'-氯-5'-(4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧戊环-2-基)螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-1'(2'H)-甲酸叔丁酯制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

步骤2：3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-5'-基)-2-氟-N-((1-(2-羟基乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)-N-甲基苯甲酰胺

向5'-(3-(((1-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)(甲基)氨基甲酰基)-2-氟苯基)-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(53mg，0.08mmol)在MeOH(1mL)中溶液添加HCl(在二噁烷中4N，1mL，4mmol)。将反应混合物在室温搅拌3天，然后将反应混合物真空浓缩。将残余物通过方法C纯化(18mg，49％)。

实例189

3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-5'-基)-2-氟-N-甲基-N-((1-(吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)苯甲酰胺(化合物260)

步骤1：5'-(3-(((1-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)(甲基)氨基甲酰基)-2-氟苯基)-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-1'(2'H)-甲酸叔丁酯

根据通用方法M，从3-(4-((3-溴-2-氟-N-甲基苯甲酰胺基)甲基)-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯和4'-氯-5'-(4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧戊环-2-基)螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-1'(2'H)-甲酸叔丁酯开始制备标题化合物。LCMS(ESI)[M+H]

步骤2：3-(4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-5'-基)-2-氟-N-甲基-N-((1-(吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)苯甲酰胺

向5'-(3-(((1-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)(甲基)氨基甲酰基)-2-氟苯基)-4'-氯螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-3-烯-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(226mg，0.32mmol)在MeOH(2mL)中的溶液添加HCl(在二噁烷中4N，2mL，8mmol)。将反应混合物在室温搅拌1h，然后真空浓缩，并将残余物通过方法C纯化。

实例190

6-氨基-3-(3-(2-氨基-2-氧代次乙基)-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺(化合物110)

步骤1：(3-(3-(2-氨基-2-氧代次乙基)-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N,N-二甲基-6-(2,2,2-三氟乙酰氨基)苯甲酰胺

将6-氨基-3-(4'-氯-3-(氰基亚甲基)-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺(0.12g，0.28mmol)溶解在TFA(1mL)中，并在密封管中于80℃加热7h。将反应混合物真空浓缩，并将残余物在DCM与碳酸氢钠水溶液之间分配。将合并的有机萃取物干燥(Na

步骤2：6-氨基-3-(3-(2-氨基-2-氧代次乙基)-4'-氯-1',2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺

将(3-(3-(2-氨基-2-氧代次乙基)-4'-氯-1'，2'-二氢螺[环戊烷-1,3'-吡咯并[2,3-b]吡啶]-5'-基)-2-氟-N,N-二甲基-6-(2,2,2-三氟乙酰氨基)苯甲酰胺(0.11g，0.19mmol)和碳酸钾(0.08g，0.58mmol)在MeOH(2mL)和水(0.2mL)中的混合物在50℃加热17h。将反应混合物在DCM和盐水之间分配。将合并的有机萃取物干燥(Na

实例191

根据本文所述的一般合成方法以及类似于上文所述的类似程序合成其他化合物。化学分析数据(LC/MS和NMR)在表A1中提供。

表A1

生物学实例

测试示例性式(I)化合物以评估化合物对HPK-1的抑制率。测定各种示例性化合物的K

实例B1：HPK1-FL HTRF酶测定(“HTRF”)

测定原理：

HPK-FL酶在1mM ATP和不同浓度的供试化合物存在下使Biotin-SLP-76底物磷酸化。使用Eu-anti-pSLP76 Ab和SA-XL665通过FRET检测产物。另请参见www.cisbio.com/HTRF以了解更多HTRF技术信息。

仪器：

Echo555化合物分配器

Agilent Bravo

Perkin Elmer Envision

最终测定条件：

材料：

测定板：白色ProxiPlate 384F(PerkinElmer目录号6008289)

激酶：HPK全长双突变体

底物：Biotin-SLP76

ATP：100mM ATP

BSG：2％BSG

DMSO:DMSO(Sigma目录号34869-100ML)

反应缓冲液：H

检测混合物：Eu-anti-pSLP76/SA-XL665(Cisbio,#610SAXAC)

测定程序Ki测定：

向包含80nL化合物或DMSO斑点的384孔Proxiplate中加入4μL/孔激酶混合物。将混合物预孵育30分钟，然后加入4μL/孔底物混合物。将该溶液孵育60min，然后加入4μL/孔的检测混合物。将该溶液再孵育60min。然后将板加载到Perkin Elmer Envision上，并且在615nm和665nm下测量TR-FRET信号。利用665/620的比率计算各种浓度的化合物的％活性。

实例B2：HPK1 Lantha结合测定(“Lanth”)

材料：

程序：

I.化合物稀释：

使用Bravo液体处理平台在第2列和第13列中制备12.5μL/孔的5mM化合物(100X)并且在第3-12列、第14-23列以及化合物板的孔A1-H1和I24-P24中制备10μL/孔的DMSO，对待测化合物进行稀释。对于参比化合物，最高浓度为1mM。向板的孔J1-P1和A24-H24中加入10μL 2mM星形孢菌素。使用Bravo液体处理平台进行11点5倍化合物系列稀释。从板中将2.5μL溶液从第2列和第13列转移至第3列和第14列的10μLDMSO中，依此类推。将化合物板在2500rpm下离心1min。使用Echo液体处理器系统将80nL化合物从化合物板转移至测定板中。一个化合物板可制成两个测定板。将每个测定板密封并且储存于N

Ⅱ.测定条件：

使用以下测定浓度和时间：2nM HPK1、2nM Eu-Anti-GST Ab和15nM Tracer222，孵育时间60min。

III.HPK Lantha结合测定：

在结合测定中，使用Multidrop试剂分配器将4μL 2X HPK1和Eu-anti-GST抗体加入测定板的各个孔中。将溶液在23C培养箱中孵育1h。使用Multidrop试剂分配器向测定板的每个孔中加入4μL 2X Tracer-222。将溶液再次在23C培养箱中孵育1h。使用Envision读板仪读取测定结果，该读板仪采用以下参数：TR_FRET、340ex/615和665em；延迟时间：100微秒；积分时间：200微秒。

IV.分析：

在XL-fit中使用Morrison ki拟合模型分析化合物Ki

a.拟合＝(1-((((E+x)+(Ki*(1+(S/Kd))))-(((((E+x)+(Ki*(1+(S/Kd))))^2)-((4*E)*x))^0.5))/(2*E)))

res＝(y拟合)

b.参数：

E＝酶浓度

S＝Tracer222浓度，Kd＝Tracer222 Kd

报告的所有测量结果均使用相同的单位(μM)

在结合测定中对示例性化合物进行测试。测得的Ki值列于表B1中。

表B1

实例B3：人T细胞IL2诱导测定

测定原理：

抗CD3和抗CD28激活原代人泛T细胞中的TCR信号传导导致IL-2启动子诱导。使用针对IL-2的捕获抗体和标记有SULFO标记的抗IL-2抗体，通过电化学发光检测细胞培养上清液中的分泌IL-2。

文献：

参见www.mesoscale.com以了解有关更多化学发光技术的信息。

测定程序：

在加湿培养箱中，在37℃和5％CO

材料：

冷冻原代人泛T细胞(StemCell Technologies#70024)

抗人CD3(OKT3克隆)(eBioscience#16-0037-81)

抗人CD28(CD28.2克隆)(BD#555725)

96孔人IL-2组织培养试剂盒(MSD#K151AHB-4)

仪器：

用于液体处理的Biomek FX(Beckman Coulter)

MSD SECTOR S 600(Meso Scale Discovery)

在人T细胞IL-2诱导测定中测试示例性式(I)化合物。表B2中提供了某些化合物相对于未经处理的细胞、经供试化合物处理的细胞中IL-2的增加百分比。

表B2

应注意的是，术语“一个/一种”(a/an)实体是指该实体中的一个或多个；例如，“一种多肽”被理解为代表一种或多种多肽。因此，术语“一个”(或一种)、“一个/种或多个/种”和“至少一个/种”可以在本文中互换使用。

本文使用的所有技术和科学术语具有相同的含义。已努力确保所使用的数字(例如，量、温度等)的准确性，但应考虑到一些实验误差和偏差。

在本说明书和权利要求书中，除非上下文另有要求，否则“包括”、“包含”和“含有”这些词是在非排他性意义上使用的。应理解的是，本文描述的实施例包括“由实施例组成”和/或“基本上由实施例组成”。

如本文所用的术语“约”，当指的是数值时，是指包括从指定量起的变化，在一些实施例中为±50％，在一些实施例中为±20％，在一些实施例中为±10％，在一些实施例中为±5％，在一些实施例中为±1％，在一些实施例中为±0.5％，在一些实施例中为±0.1％，因为此类变化适于执行所公开的方法或采用所公开的组合物。

在提供数值范围的情况下，除非上下文另外明确规定，否则应理解为，介于该范围上限与下限之间的每个中间值的每十分之一以及所指定范围内的任何其他指定值或中间值，为本发明所涵盖。这些小范围的上限和下限可独立地包括在该较小范围内，并且也为本发明所涵盖，以所指定范围内任何明确排除的限制为准。在规定范围包括一个或两个限制的情况下，本发明还包括排除那些包括的限制中的一个或两个的范围。

对于本发明所涉及的本领域技术人员而言，在受益于上文的描述和相关附图中所提出的教导的情况下，将想到本文阐述的本发明的许多变型例和其他实施例。因此，应当理解的是，本发明不限于所公开的具体实施例，并且变型例和其他实施例旨在包括在所附权利要求的范围内。尽管本文采用了特定的术语，但这些术语仅在通用和描述性的意义上使用，而非出于限制的目的。