一种克服土壤连作障碍的专用微生物菌剂及其应用

技术领域

本发明涉及土壤修复技术领域，具体是涉及一种克服土壤连作障碍的专用微生物菌剂及其应用。

背景技术

连作障碍，是指连续在同一土壤上栽培同种作物或近缘作物引起的作物生长发育异常。症状一般为生长发育不良，产量、品质下降，极端情况下，局部死苗，不发苗或发苗不旺；多数受害植物根系发生褐变、分支减少，活力低下，分布范围狭小，导致吸收水分、养分的能力下降。障碍一般以生长初期明显，后期常可不同程度地恢复。连作障碍在植物科属间存在显著的差异，易发生连作障碍的作物集中在茄科、豆科、十字花科、葫芦科和蔷薇科，而多种禾本科粮食作物如麦类、水稻和玉米，连作障碍不明显。连作障碍的发生有多种原因，包括养分过度消耗、土壤理化性质恶化、病虫害增加和有毒物质(包括化感物质等)的累积等。它的发生受各种环境条件的影响，连作的次数(一般连作次数越多，年限越长，连作障碍越重)、土壤性质(通常黏土重于砂土，保护地栽培多于露地栽培)及后作水肥管理不当都会加重障碍。

1、作物自毒作用

某些作物可通过地上部淋溶、根系分泌和作物残茬腐解等途径释放一些物质，对同茬或下茬同种或同科作物生长发育产生抑制作用，这种现象叫自毒作用。多年连作，势必引起的自毒作用越来越明显，连作障碍就会出现，连作时间越长，障碍越严重。

2、土壤有益微生物减少、有害微生物增加，导致土传病害加重(土壤有害微生物的积累是最主要的原因)

由于连作，形成了特殊的土壤环境，使固氮菌、根瘤菌、光合菌、放线菌、硝化细菌、氨化细菌、菌根真菌等有益微生物的生长繁殖受到抑制，而有害微生物大量滋生，土壤的微生物区系发生变化。特别是保护地蔬菜和复种指数最高，一年四季不歇地，病虫害源不断积累，导致土传病害发生较重，而且发现很多新的病源菌导致的病害发生，形成了近年来的“用药不治病”的现象。

3、土壤性质变坏，次生盐渍化及土壤酸化严重

在片面地追求高产的诱惑下，大量施入高含量的化学肥料和未经腐熟的动物粪便、人粪尿等，导致土壤中盐分过量。因为这些盐分不能被充分淋溶，所以大量积聚在土壤耕层中，就产生了土壤次生盐渍化及酸化，从而降低了PH值，影响了土壤养分的有效性，引发生理性病害。

4、线虫

线虫是作物寄生虫，主要破坏作物的根系，影响作物的正常生长。连作会引起线虫的大发生。如大姜，连作几年后，就会因为线虫而引起严重的姜癞病。

市面上的克服土壤连作障碍的菌剂大多数针对某一种农作物的使用效果较好，但是不具有普遍适用性，且单纯的菌剂不能克服土壤逐渐贫瘠，土壤环境恶化的问题，因此需要一种能够适用性广且能够恢复土壤生态，促进土壤自我修复的专用微生物菌剂。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供了一种克服土壤连作障碍的专用微生物菌剂及其应用。

本发明的技术方案是：一种克服土壤连作障碍的专用微生物菌剂，所述专用微生物菌剂包括微生物菌剂和土壤改良剂，所述微生物菌剂与所述土壤改良剂按质量比1：5-7配合使用；

所述微生物菌剂由以下重量份的成分组成：菌剂基液10-20份、复合枯草芽孢杆菌菌液8-11份、酵母菌-乳酸菌复合菌液10-13份、放线菌菌液1-3份、发酵液4-8份；

所述土壤改良剂由以下重量份的成分组成：生物质炭20-40份、发酵物10-12份、土壤消毒剂1-3份、复合肥料2-4份、土壤pH调节剂0.5-1份。

进一步地，所述复合枯草芽孢杆菌由以下质量百分比的成分组成：10-15％枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CS30菌株、7-12％株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S9菌株、6-11％枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CZ162菌株、8-10％枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis(Cohen))B-903菌株、9-13％枯草芽孢杆菌T10菌株、6-9％枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)TH_2菌株、7-14％枯草芽孢杆菌K-268菌株、余量为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis HMB19198菌株，Bacillus subtilis CS30菌株具有抑制植物病原真菌水稻稻瘟病菌，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S9菌株可有效地控制立枯丝核菌(R.solani)引起的番茄苗期病害，枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CZ162菌株，枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CZ162菌株可产生多种抗菌物质,有抑制金黄色葡萄球菌,稻瘟病菌,棉花黄霉菌等致病菌，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Cohen))B-903菌株可有效防治棉炭疽病等棉苗病害,并促进棉苗生长发育，防治苹果轮纹病和叶斑病的效果好，枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌T10菌株对小麦纹枯病的防治效果，枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)TH_2菌株对茄科的青枯病病菌有抑制作用，枯草芽孢杆菌K-268菌株对稻瘟病菌抑制效果较好，枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis HMB19198菌株能有效防治番茄灰霉病。

进一步地，所述微生物菌剂的制备方法包括以下步骤：

S1、培养种子液：

将复合枯草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、放线菌放入培养皿中在20-30℃的环境温度下进行解冻，解冻时长为1-24h，解冻完成后将草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、放线菌分别接种至种子罐中进行培养，培养完成后分别得到复合枯草芽孢杆菌种子液、酵母菌种子液、乳酸菌种子液、放线菌种子液；

S2、复合菌培养：

将复合枯草芽孢杆菌种子液接种至枯草芽孢杆菌培养基上进行发酵培养，培养伴随搅拌，搅拌的转速为110-180r/min，种子培养的温度为30-35℃，时间9-24h，将酵母菌种子液和乳酸菌种子液接种至发酵罐中的共用培养基上进行培养，将放线菌种子液接种至放线菌培养基上进行培养，培养温度为25-30℃，培养时长为24-48h，分别得到复合枯草芽孢杆菌液、酵母菌-乳酸菌复合菌液、放线菌菌液；

S3、配制菌剂：

将黄豆粉、玉米淀粉、麸皮按、葡糖糖粉按质量比1：2：1：0.5混合研磨，研磨速度为180-200r/min，研磨时长为3-8h，研磨完成后得到复合粉，将复合粉放入锅中，加入无菌水，无菌水与复合粉的质量比为2：1，得到菌剂基液，再将发酵液与菌剂基液按上述重量份混合搅拌30-40min后，搅拌速度120-150r/min，得到混合液，将步骤S3中得到的复合枯草芽孢杆菌液、酵母菌-乳酸菌复合菌液、放线菌菌液按上述重量份加入混合液中继续搅拌10-20min，搅拌速度80-100r/min，得到微生物菌剂；

上述方法制备微生物菌剂的效率高，且微生物菌的活性高。

进一步地，所述酵母菌种子液和乳酸菌种子液在共用培养基上的培养方法为先将酵母菌种子液接种至共用培养基上进行有氧培养，共用培养基的搅拌速度为80-100r/min，共用培养基的培养温度为25-34℃，培养2-8h后接种乳酸菌种子液，然后缺氧培养9-13h后得到酵母菌-乳酸菌复合菌液，这样可以对酵母菌和乳酸菌同时培养。

进一步地，所述枯草芽孢杆菌培养基由玉米粉、淀粉酶、葡萄糖按质量3：1：1混合配制而成；所述共用培养基由谷精草粉、山药粉、面粉按质量比1：1：2混合配制而成；所述放线菌培养基由碎米和豆粕、麦麸、蔗糖按质量比8：10：3制成，上述培养基培养相对应的菌种，菌种繁殖速度快，效率高。

进一步地，所述土壤改良剂的制备方法包括以下步骤：

a、生物质炭制备：

将秸秆在太阳下晒干至秸秆内含水率≤3％，然后放入破碎机中进行破碎，破碎完成后秸秆的粒度为3-5mm，再将秸秆放入热解装置内进行热解，热解温度为400-600℃，热解时长为8-10min，热解完成后得到生物质炭；

b、发酵物制备：

将秸秆、牛粪、纯净水按质量比1：1：2混合，混合完成后导入厌氧发酵罐中进行发酵，发酵温度35-40℃，发酵时长3-5天，发酵完成后进行固液分离，分离出的发酵液作为制备微生物菌剂的原料，得到的固体发酵物，进行高温蒸煮，高温蒸煮温度100-120℃，蒸煮时长为30-60min，经过高温蒸煮后进行烘干，烘干温度60-80℃得到发酵物；

c、土壤改良剂制备：

将步骤a中得到的生物质炭和步骤b中得到的发酵物以及土壤消毒剂、复合肥料、土壤pH调节剂按上述重量份依次放入混料机中进行混合，混料机的转速为80-100r/min，混料时长为1-2h，混料完成后得到土壤改良剂；

上述土壤改良剂含有土壤必须的无机肥和有机肥，同时能够丰富土壤微生物的种类，促进微生物系统的健康发展，有利于有益菌的再次繁殖，提高农作物的产量。

进一步地，所述土壤pH调节剂由草木灰、熟石灰、柠檬酸、草酸按质量比1：0.5：1：0.5混合制成，对土壤的酸碱性进行自动调节，使土壤的pH值适宜植物生长。

进一步地，所述土壤消毒剂由以下质量百分比的成分组成：15-20％氯化磷酸三钠、8-18％双乙酸钠、7-13％亚氯酸盐、5-9％阿维菌素原药、余量为七水硫酸亚铁，上述土壤消毒剂能对土壤中的有害病菌进行消杀，土壤消毒剂对土壤原本菌种进行消杀后再次接入有益菌，能够促进有益菌的繁殖。

进一步地，所述复合肥料由以下下质量百分比的成分组成：10-16％过磷酸钙、11-18％尿素、7-11％钙镁磷肥、5-8％碳酸氢铵、4-8％磷酸氢二钾、10-15％聚丙烯酰胺、7-10％蓖麻油渣、余量为花生油渣，复合肥料能有效提高土壤肥力，且能长期保持土壤养分的充足。

进一步地，将上述专用微生物菌剂应用于克服土壤连作障碍中，应用方法为：将上述土壤改良剂撒于土壤表面，撒入量为500-1000g/m

本发明的有益效果是：

本发明提供的克服土壤连作障碍的专用微生物菌剂包括土壤改良剂和微生物菌剂，两者配合使用，土壤改良剂的保存和运输要求较低，因此将用于改善土壤养分的土壤改良剂与微生物菌剂分来运输可降低运输成本，其次土壤改良剂为微生物菌剂提供养分，可使微生物菌剂中的微生物在土壤中大量繁殖，丰富微生物种类，能够抑制各类农作物病菌的繁殖，促进农作物抗病变能力，提高农作物产量，其次土壤改良剂作为土壤养料，促进农田生态健康发展。

附图说明

图1是本发明微生物菌剂的制备流程图。

图2是本发明土壤改良剂的制备流程图。

具体实施方式

实施例1：

一种克服土壤连作障碍的专用微生物菌剂，专用微生物菌剂包括微生物菌剂和土壤改良剂，微生物菌剂与土壤改良剂按质量比1：5配合使用；

微生物菌剂由以下重量份的成分组成：菌剂基液10份、复合枯草芽孢杆菌菌液8份、酵母菌-乳酸菌复合菌液10份、放线菌菌液1份、发酵液4份；

土壤改良剂由以下重量份的成分组成：生物质炭20份、发酵物10份、土壤消毒剂1份、复合肥料2份、土壤pH调节剂0.5份。

复合枯草芽孢杆菌由以下质量百分比的成分组成：10％枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis CS30菌株、7％株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S9菌株、6％枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CZ162菌株、8％枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Cohen))B-903菌株、9％枯草芽孢杆菌T10菌株、6％枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)TH_2菌株、7％枯草芽孢杆菌K-268菌株、余量为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis HMB19198菌株，Bacillussubtilis CS30菌株具有抑制植物病原真菌水稻稻瘟病菌，枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)S9菌株可有效地控制立枯丝核菌(R.solani)引起的番茄苗期病害，枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CZ162菌株，枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CZ162菌株可产生多种抗菌物质,有抑制金黄色葡萄球菌,稻瘟病菌,棉花黄霉菌等致病菌，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Cohen))B-903菌株可有效防治棉炭疽病等棉苗病害,并促进棉苗生长发育，防治苹果轮纹病和叶斑病的效果好，枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌T10菌株对小麦纹枯病的防治效果，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)TH_2菌株对茄科的青枯病病菌有抑制作用，枯草芽孢杆菌K-268菌株对稻瘟病菌抑制效果较好，枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis HMB19198菌株能有效防治番茄灰霉病。

土壤pH调节剂由草木灰、熟石灰、柠檬酸、草酸按质量比1：0.5：1：0.5混合制成，对土壤的酸碱性进行自动调节，使土壤的pH值适宜植物生长。

土壤消毒剂由以下质量百分比的成分组成：15％氯化磷酸三钠、8％双乙酸钠、7％亚氯酸盐、5％阿维菌素原药、余量为七水硫酸亚铁，上述土壤消毒剂能对土壤中的有害病菌进行消杀，土壤消毒剂对土壤原本菌种进行消杀后再次接入有益菌，能够促进有益菌的繁殖。

复合肥料由以下下质量百分比的成分组成：10％过磷酸钙、11％尿素、7％钙镁磷肥、5％碳酸氢铵、4％磷酸氢二钾、10％聚丙烯酰胺、7％蓖麻油渣、余量为花生油渣，复合肥料能有效提高土壤肥力，且能长期保持土壤养分的充足。

实施例2：

一种克服土壤连作障碍的专用微生物菌剂，专用微生物菌剂包括微生物菌剂和土壤改良剂，微生物菌剂与土壤改良剂按质量比1：6配合使用；

微生物菌剂由以下重量份的成分组成：菌剂基液15份、复合枯草芽孢杆菌菌液10份、酵母菌-乳酸菌复合菌液12份、放线菌菌液2份、发酵液7份；

土壤改良剂由以下重量份的成分组成：生物质炭30份、发酵物11份、土壤消毒剂2份、复合肥料3份、土壤pH调节剂0.8份。

复合枯草芽孢杆菌由以下质量百分比的成分组成：14％枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis CS30菌株、10％株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S9菌株、9％枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CZ162菌株、9％枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Cohen))B-903菌株、10％枯草芽孢杆菌T10菌株、8％枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)TH_2菌株、10％枯草芽孢杆菌K-268菌株、余量为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis HMB19198菌株，Bacillussubtilis CS30菌株具有抑制植物病原真菌水稻稻瘟病菌，枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)S9菌株可有效地控制立枯丝核菌(R.solani)引起的番茄苗期病害，枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CZ162菌株，枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CZ162菌株可产生多种抗菌物质,有抑制金黄色葡萄球菌,稻瘟病菌,棉花黄霉菌等致病菌，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Cohen))B-903菌株可有效防治棉炭疽病等棉苗病害,并促进棉苗生长发育，防治苹果轮纹病和叶斑病的效果好，枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌T10菌株对小麦纹枯病的防治效果，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)TH_2菌株对茄科的青枯病病菌有抑制作用，枯草芽孢杆菌K-268菌株对稻瘟病菌抑制效果较好，枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis HMB19198菌株能有效防治番茄灰霉病。

土壤pH调节剂由草木灰、熟石灰、柠檬酸、草酸按质量比1：0.5：1：0.5混合制成，对土壤的酸碱性进行自动调节，使土壤的pH值适宜植物生长。

土壤消毒剂由以下质量百分比的成分组成：18％氯化磷酸三钠、10％双乙酸钠、10％亚氯酸盐、8％阿维菌素原药、余量为七水硫酸亚铁，上述土壤消毒剂能对土壤中的有害病菌进行消杀，土壤消毒剂对土壤原本菌种进行消杀后再次接入有益菌，能够促进有益菌的繁殖。

复合肥料由以下下质量百分比的成分组成：14％过磷酸钙、16％尿素、10％钙镁磷肥、7％碳酸氢铵、6％磷酸氢二钾、13％聚丙烯酰胺、8％蓖麻油渣、余量为花生油渣，复合肥料能有效提高土壤肥力，且能长期保持土壤养分的充足。

实施例3：

一种克服土壤连作障碍的专用微生物菌剂，专用微生物菌剂包括微生物菌剂和土壤改良剂，微生物菌剂与土壤改良剂按质量比1：7配合使用；

微生物菌剂由以下重量份的成分组成：菌剂基液20份、复合枯草芽孢杆菌菌液11份、酵母菌-乳酸菌复合菌液13份、放线菌菌液3份、发酵液8份；

土壤改良剂由以下重量份的成分组成：生物质炭40份、发酵物12份、土壤消毒剂3份、复合肥料4份、土壤pH调节剂1份。

复合枯草芽孢杆菌由以下质量百分比的成分组成：15％枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis CS30菌株、12％株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S9菌株、11％枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CZ162菌株、10％枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Cohen))B-903菌株、13％枯草芽孢杆菌T10菌株、9％枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)TH_2菌株、14％枯草芽孢杆菌K-268菌株、余量为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis HMB19198菌株，Bacillus subtilis CS30菌株具有抑制植物病原真菌水稻稻瘟病菌，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S9菌株可有效地控制立枯丝核菌(R.solani)引起的番茄苗期病害，枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CZ162菌株，枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CZ162菌株可产生多种抗菌物质,有抑制金黄色葡萄球菌,稻瘟病菌,棉花黄霉菌等致病菌，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Cohen))B-903菌株可有效防治棉炭疽病等棉苗病害,并促进棉苗生长发育，防治苹果轮纹病和叶斑病的效果好，枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌T10菌株对小麦纹枯病的防治效果，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)TH_2菌株对茄科的青枯病病菌有抑制作用，枯草芽孢杆菌K-268菌株对稻瘟病菌抑制效果较好，枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis HMB19198菌株能有效防治番茄灰霉病。

土壤pH调节剂由草木灰、熟石灰、柠檬酸、草酸按质量比1：0.5：1：0.5混合制成，对土壤的酸碱性进行自动调节，使土壤的pH值适宜植物生长。

土壤消毒剂由以下质量百分比的成分组成：20％氯化磷酸三钠、18％双乙酸钠、13％亚氯酸盐、9％阿维菌素原药、余量为七水硫酸亚铁，上述土壤消毒剂能对土壤中的有害病菌进行消杀，土壤消毒剂对土壤原本菌种进行消杀后再次接入有益菌，能够促进有益菌的繁殖。

复合肥料由以下下质量百分比的成分组成：16％过磷酸钙、18％尿素、11％钙镁磷肥、8％碳酸氢铵、8％磷酸氢二钾、15％聚丙烯酰胺、10％蓖麻油渣、余量为花生油渣，复合肥料能有效提高土壤肥力，且能长期保持土壤养分的充足。

对比实施例1-实施例3，实施例3的在克服土壤连作障碍时的使用效果最好，因此实施例3最优。

实施例4：

如图1所示，在实施例3的基础上，本实施例提供了上述微生物菌剂的制备方法包括以下步骤：

S1、培养种子液：

将复合枯草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、放线菌放入培养皿中在20℃的环境温度下进行解冻，解冻时长为1h，解冻完成后将草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、放线菌分别接种至种子罐中进行培养，培养完成后分别得到复合枯草芽孢杆菌种子液、酵母菌种子液、乳酸菌种子液、放线菌种子液；

S2、复合菌培养：

将复合枯草芽孢杆菌种子液接种至枯草芽孢杆菌培养基上进行发酵培养，培养伴随搅拌，搅拌的转速为110r/min，种子培养的温度为30℃，时间9h，将酵母菌种子液和乳酸菌种子液接种至发酵罐中的共用培养基上进行培养，将放线菌种子液接种至放线菌培养基上进行培养，培养温度为25℃，培养时长为24h，分别得到复合枯草芽孢杆菌液、酵母菌-乳酸菌复合菌液、放线菌菌液；

S3、配制菌剂：

将黄豆粉、玉米淀粉、麸皮按、葡糖糖粉按质量比1：2：1：0.5混合研磨，研磨速度为180r/min，研磨时长为3h，研磨完成后得到复合粉，将复合粉放入锅中，加入无菌水，无菌水与复合粉的质量比为2：1，得到菌剂基液，再将发酵液与菌剂基液按上述重量份混合搅拌30min后，搅拌速度120r/min，得到混合液，将步骤S3中得到的复合枯草芽孢杆菌液、酵母菌-乳酸菌复合菌液、放线菌菌液按上述重量份加入混合液中继续搅拌10-20min，搅拌速度80r/min，得到微生物菌剂；

上述方法制备微生物菌剂的效率高，且微生物菌的活性高。

酵母菌种子液和乳酸菌种子液在共用培养基上的培养方法为先将酵母菌种子液接种至共用培养基上进行有氧培养，共用培养基的搅拌速度为80r/min，共用培养基的培养温度为25℃，培养2h后接种乳酸菌种子液，然后缺氧培养9h后得到酵母菌-乳酸菌复合菌液，这样可以对酵母菌和乳酸菌同时培养。

枯草芽孢杆菌培养基由玉米粉、淀粉酶、葡萄糖按质量3：1：1混合配制而成；共用培养基由谷精草粉、山药粉、面粉按质量比1：1：2混合配制而成；放线菌培养基由碎米和豆粕、麦麸、蔗糖按质量比8：10：3制成，上述培养基培养相对应的菌种，菌种繁殖速度快，效率高。

实施例5：

如图1所示，在实施例3的基础上，本实施例提供了上述微生物菌剂的制备方法包括以下步骤：

S1、培养种子液：

将复合枯草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、放线菌放入培养皿中在25℃的环境温度下进行解冻，解冻时长为12h，解冻完成后将草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、放线菌分别接种至种子罐中进行培养，培养完成后分别得到复合枯草芽孢杆菌种子液、酵母菌种子液、乳酸菌种子液、放线菌种子液；

S2、复合菌培养：

将复合枯草芽孢杆菌种子液接种至枯草芽孢杆菌培养基上进行发酵培养，培养伴随搅拌，搅拌的转速为150r/min，种子培养的温度为32℃，时间12h，将酵母菌种子液和乳酸菌种子液接种至发酵罐中的共用培养基上进行培养，将放线菌种子液接种至放线菌培养基上进行培养，培养温度为28℃，培养时长为36h，分别得到复合枯草芽孢杆菌液、酵母菌-乳酸菌复合菌液、放线菌菌液；

S3、配制菌剂：

将黄豆粉、玉米淀粉、麸皮按、葡糖糖粉按质量比1：2：1：0.5混合研磨，研磨速度为190r/min，研磨时长为5h，研磨完成后得到复合粉，将复合粉放入锅中，加入无菌水，无菌水与复合粉的质量比为2：1，得到菌剂基液，再将发酵液与菌剂基液按上述重量份混合搅拌35min后，搅拌速度140r/min，得到混合液，将步骤S3中得到的复合枯草芽孢杆菌液、酵母菌-乳酸菌复合菌液、放线菌菌液按上述重量份加入混合液中继续搅拌15min，搅拌速度90r/min，得到微生物菌剂；

上述方法制备微生物菌剂的效率高，且微生物菌的活性高。

酵母菌种子液和乳酸菌种子液在共用培养基上的培养方法为先将酵母菌种子液接种至共用培养基上进行有氧培养，共用培养基的搅拌速度为90r/min，共用培养基的培养温度为30℃，培养5h后接种乳酸菌种子液，然后缺氧培养10h后得到酵母菌-乳酸菌复合菌液，这样可以对酵母菌和乳酸菌同时培养。

枯草芽孢杆菌培养基由玉米粉、淀粉酶、葡萄糖按质量3：1：1混合配制而成；共用培养基由谷精草粉、山药粉、面粉按质量比1：1：2混合配制而成；放线菌培养基由碎米和豆粕、麦麸、蔗糖按质量比8：10：3制成，上述培养基培养相对应的菌种，菌种繁殖速度快，效率高。

实施例6：

如图1所示，在实施例3的基础上，本实施例提供了上述微生物菌剂的制备方法包括以下步骤：

S1、培养种子液：

将复合枯草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、放线菌放入培养皿中在30℃的环境温度下进行解冻，解冻时长为24h，解冻完成后将草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、放线菌分别接种至种子罐中进行培养，培养完成后分别得到复合枯草芽孢杆菌种子液、酵母菌种子液、乳酸菌种子液、放线菌种子液；

S2、复合菌培养：

将复合枯草芽孢杆菌种子液接种至枯草芽孢杆菌培养基上进行发酵培养，培养伴随搅拌，搅拌的转速为180r/min，种子培养的温度为35℃，时间24h，将酵母菌种子液和乳酸菌种子液接种至发酵罐中的共用培养基上进行培养，将放线菌种子液接种至放线菌培养基上进行培养，培养温度为30℃，培养时长为48h，分别得到复合枯草芽孢杆菌液、酵母菌-乳酸菌复合菌液、放线菌菌液；

S3、配制菌剂：

将黄豆粉、玉米淀粉、麸皮按、葡糖糖粉按质量比1：2：1：0.5混合研磨，研磨速度为200r/min，研磨时长为8h，研磨完成后得到复合粉，将复合粉放入锅中，加入无菌水，无菌水与复合粉的质量比为2：1，得到菌剂基液，再将发酵液与菌剂基液按上述重量份混合搅拌40min后，搅拌速度150r/min，得到混合液，将步骤S3中得到的复合枯草芽孢杆菌液、酵母菌-乳酸菌复合菌液、放线菌菌液按上述重量份加入混合液中继续搅拌20min，搅拌速度100r/min，得到微生物菌剂；

上述方法制备微生物菌剂的效率高，且微生物菌的活性高。

酵母菌种子液和乳酸菌种子液在共用培养基上的培养方法为先将酵母菌种子液接种至共用培养基上进行有氧培养，共用培养基的搅拌速度为100r/min，共用培养基的培养温度为34℃，培养8h后接种乳酸菌种子液，然后缺氧培养13h后得到酵母菌-乳酸菌复合菌液，这样可以对酵母菌和乳酸菌同时培养。

枯草芽孢杆菌培养基由玉米粉、淀粉酶、葡萄糖按质量3：1：1混合配制而成；共用培养基由谷精草粉、山药粉、面粉按质量比1：1：2混合配制而成；放线菌培养基由碎米和豆粕、麦麸、蔗糖按质量比8：10：3制成，上述培养基培养相对应的菌种，菌种繁殖速度快，效率高。

对比实施例4-实施例6，实施例6制备的微生物菌剂使用效果最好，因此实施例6为最优实施例。

实施例7：

如图2所示，在实施例6的基础上，本实施例提供了上述土壤改良剂的制备方法包括以下步骤：

a、生物质炭制备：

将秸秆在太阳下晒干至秸秆内含水率达3％，然后放入破碎机中进行破碎，破碎完成后秸秆的粒度为3mm，再将秸秆放入热解装置内进行热解，热解温度为400℃，热解时长为8min，热解完成后得到生物质炭；

b、发酵物制备：

将秸秆、牛粪、纯净水按质量比1：1：2混合，混合完成后导入厌氧发酵罐中进行发酵，发酵温度35℃，发酵时长3天，发酵完成后进行固液分离，分离出的发酵液作为制备微生物菌剂的原料，得到的固体发酵物，进行高温蒸煮，高温蒸煮温度100℃，蒸煮时长为30min，经过高温蒸煮后进行烘干，烘干温度60℃得到发酵物；

c、土壤改良剂制备：

将步骤a中得到的生物质炭和步骤b中得到的发酵物以及土壤消毒剂、复合肥料、土壤pH调节剂按上述重量份依次放入混料机中进行混合，混料机的转速为80r/min，混料时长为1h，混料完成后得到土壤改良剂；

上述土壤改良剂含有土壤必须的无机肥和有机肥，同时能够丰富土壤微生物的种类，促进微生物系统的健康发展，有利于有益菌的再次繁殖，提高农作物的产量。

实施例8：

如图2所示，在实施例6的基础上，本实施例提供了上述土壤改良剂的制备方法包括以下步骤：

a、生物质炭制备：

将秸秆在太阳下晒干至秸秆内含水率达2％，然后放入破碎机中进行破碎，破碎完成后秸秆的粒度为4mm，再将秸秆放入热解装置内进行热解，热解温度为500℃，热解时长为9min，热解完成后得到生物质炭；

b、发酵物制备：

将秸秆、牛粪、纯净水按质量比1：1：2混合，混合完成后导入厌氧发酵罐中进行发酵，发酵温度38℃，发酵时长4天，发酵完成后进行固液分离，分离出的发酵液作为制备微生物菌剂的原料，得到的固体发酵物，进行高温蒸煮，高温蒸煮温度110℃，蒸煮时长为50min，经过高温蒸煮后进行烘干，烘干温度70℃得到发酵物；

c、土壤改良剂制备：

将步骤a中得到的生物质炭和步骤b中得到的发酵物以及土壤消毒剂、复合肥料、土壤pH调节剂按上述重量份依次放入混料机中进行混合，混料机的转速为90r/min，混料时长为1.5h，混料完成后得到土壤改良剂；

上述土壤改良剂含有土壤必须的无机肥和有机肥，同时能够丰富土壤微生物的种类，促进微生物系统的健康发展，有利于有益菌的再次繁殖，提高农作物的产量。

实施例9：

如图2所示，在实施例6的基础上，本实施例提供了上述土壤改良剂的制备方法包括以下步骤：

a、生物质炭制备：

将秸秆在太阳下晒干至秸秆内含水率达1％，然后放入破碎机中进行破碎，破碎完成后秸秆的粒度为5mm，再将秸秆放入热解装置内进行热解，热解温度为600℃，热解时长为10min，热解完成后得到生物质炭；

b、发酵物制备：

将秸秆、牛粪、纯净水按质量比1：1：2混合，混合完成后导入厌氧发酵罐中进行发酵，发酵温度40℃，发酵时长5天，发酵完成后进行固液分离，分离出的发酵液作为制备微生物菌剂的原料，得到的固体发酵物，进行高温蒸煮，高温蒸煮温度120℃，蒸煮时长为60min，经过高温蒸煮后进行烘干，烘干温度80℃得到发酵物；

c、土壤改良剂制备：

将步骤a中得到的生物质炭和步骤b中得到的发酵物以及土壤消毒剂、复合肥料、土壤pH调节剂按上述重量份依次放入混料机中进行混合，混料机的转速为100r/min，混料时长为2h，混料完成后得到土壤改良剂；

上述土壤改良剂含有土壤必须的无机肥和有机肥，同时能够丰富土壤微生物的种类，促进微生物系统的健康发展，有利于有益菌的再次繁殖，提高农作物的产量。

对比实施例7-实施例9，实施例9所制备的土壤改良剂使用效果最佳，因此实施例9为最佳实施例。

实施例10：

在实施例9的基础上，本实施例将上述专用微生物菌剂应用于克服土壤连作障碍中，应用方法为：将上述土壤改良剂撒于土壤表面，撒入量为500g/m

实施例11：

在实施例9的基础上，本实施例将上述专用微生物菌剂应用于克服土壤连作障碍中，应用方法为：将上述土壤改良剂撒于土壤表面，撒入量为800g/m

实施例12：

在实施例9的基础上，本实施例将上述专用微生物菌剂应用于克服土壤连作障碍中，应用方法为：将上述土壤改良剂撒于土壤表面，撒入量为1000g/m

对比实施例10-实施例12，实施例12的应用效果最佳，因此实施例12为最佳实施例。