精神疾病发病危险状态的诊断用生物标志物

技术领域

本发明涉及精神疾病发病危险状态(At Risk Mental State(危险精神状态)：ARMS)的诊断用生物标志物。另外，本发明涉及含有能够与ARMS诊断用生物标志物结合的物质的ARMS诊断用试剂盒、以及包括对生物体样品中的ARMS诊断用生物标志物的量进行检测的工序的ARMS的诊断方法。

背景技术

ARMS是指向进入到精神疾病发病的风险高的状态。ARMS患者中的大约20％～30％在几年之内会出现各种精神疾病。认为精神疾病重在早期发现和早期治疗，因此需要迅速且准确地发现ARMS。然而，ARMS存在乍看是轻症而如果不认真深入诊察则极难与普通的抑郁状态等鉴别开这样的问题。

迄今为止，已经做出大量探索用于诊断精神疾病的生物标志物的尝试(例如，专利文献1～3)。另一方面，关于ARMS的诊断几乎没有进行。因此，我们以早期发现ARMS为目标，着手于开发ARMS的新的诊断方法。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2017-215335号公报

专利文献2：日本特开2017-114855号公报

专利文献3：日本再表2015/019979号公报

非专利文献

非专利文献1：茅野分著，《诊疗科室诊疗所中的ARMS诊疗》，预防精神病学Vol.1(1)2016,p.37-47

发明内容

技术问题

本发明的目的在于，提供ARMS诊断用生物标志物、包含能够与ARMS诊断用生物标志物结合的物质的ARMS诊断用试剂盒以及包括检测生物体样品中的ARMS诊断用生物标志物的量的工序的ARMS的诊断方法。

技术方案

本发明的发明者们鉴于上述课题进行了研究。本发明的发明者们对ARMS患者和健全人中的生物体样品中的免疫物质和应激相关物质进行了比较讨论。结果，本发明的发明者们发现在ARMS患者中胆红素氧化代谢物和皮质醇与健全人相比显著增加，并且免疫球蛋白游离κ链(κFLC)和免疫球蛋白游离λ链(λFLC)与健全人相比显著降低。即，能够将从胆红素氧化代谢物、皮质醇、κFLC或其片段、以及λFLC或其片段所组成的组中选择的一种以上的生物体物质作为ARMS诊断用生物标志物使用。

因此，本发明提供一种精神疾病发病危险状态(ARMS)诊断用生物标志物，其包含从胆红素氧化代谢物、皮质醇、免疫球蛋白游离κ链(κFLC)或其片段、以及免疫球蛋白游离λ链(λFLC)或其片段所组成的组中选择的一种以上。进一步地，该ARMS诊断用生物标志物可以还包含从肌酸酐和白蛋白所组成的组中选择的一种以上。

另外，本发明提供一种精神疾病发病危险状态(ARMS)诊断用试剂盒，其包含从能够与胆红素氧化代谢物结合的物质、能够与皮质醇结合的物质、能够与免疫球蛋白游离κ链(κFLC)或其片段结合的物质、以及能够与免疫球蛋白游离λ链(λFLC)或其片段结合的物质所组成的组中选择的一种以上的物质。该ARMS诊断用试剂盒可以还包含从能够与肌酸酐结合的物质和能够与白蛋白结合的物质所组成的组中选择的一种以上的物质。在一个实施方式中，上述物质是抗体或有机化合物。在一个实施方式中，上述物质固定于固体支撑体上。

进一步地，本发明提供一种方法，该方法是用于诊断对象的精神疾病发病危险状态(ARMS)的方法或者获取用于诊断对象的ARMS的数据的方法，并且包括对从由该对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、免疫球蛋白游离κ链(κFLC)或其片段的量、以及免疫球蛋白游离λ链(λFLC)或其片段的量所组成的组中选择的一个以上的量进行检测的工序。本发明的方法可以还包括对上述生物体样品中的白蛋白的量进行检测的工序。本发明的方法可以还包括对上述生物体样品中的肌酸酐的量进行检测的工序。在一个实施方式中，本发明的方法还包括将上述量与对照物的量比较的工序。在一个实施方式中，本发明的方法还包括计算上述量的相对于上述生物体样品中的肌酸酐的量的比值的工序。在该实施方式中，本发明的方法可以还包括将上述比值与对照物的比值比较的工序。在一个实施方式中，生物体样品是尿。

技术效果

利用本发明的ARMS诊断用生物标志物能够迅速地、容易地且准确地诊断对象的ARMS。另外，本发明的ARMS诊断用生物标志物能够从对象的尿中检测。因此，本发明的方法是非侵入性的。

附图说明

图1示出在实施例2中关于存在显著性差异的四个因子的ROC(ReceiverOperating Characteristic：受试者工作特征)曲线。

图2示出在实施例2中对存在显著性差异的四个因子进行逻辑回归分析后的ROC曲线。

具体实施方式

(1.定义)

在本说明书中，术语“精神疾病”具有在本发明的技术领域中所使用的最广泛的意义。如果列举术语“精神疾病”的例子，包括但不限于精神分裂症、自闭症、阿尔茨海默症、认知异常、抑郁症、双向情感障碍(躁郁症)、脑神经发育障碍、怀孕期间由传染病导致的神经障碍引起的认知功能障碍、由免疫障碍引起的精神障碍、癫痫、脑器质性精神障碍、中毒性精神障碍、智力障碍(精神迟滞)、精神病、神经症、梅毒性精神障碍、老年性精神障碍、脑血管性精神障碍、由头部外伤造成的精神障碍、不典型内因性精神病、内分泌性精神障碍和外因反应型、以及衰退期精神障碍等。

在本说明书中，术语“精神疾病发病危险状态”具有在本发明的技术领域中所使用的最广泛的意义。例如，术语“精神疾病发病危险状态”是指进入到精神疾病的发病的风险高的状态。精神疾病发病危险状态是精神疾病的先兆状态，与精神疾病例如精神分裂症或自闭症不同。一般来说，精神疾病发病危险状态的患者中的大约20％～30％在几年之内会出现各种精神疾病。精神疾病发病危险状态的对象不是会出现某种特定的精神疾病这样的对象。精神疾病发病危险状态的对象在实际发病以前都不知道将出现哪种精神疾病。在本说明书中，术语“精神疾病发病危险状态”也称为“ARMS”(At Risk Mental State：危险精神状态)。

在本说明书中，术语“诊断”具有在本发明的技术领域中所使用的最广泛的意义。术语“精神疾病发病危险状态的诊断”、“诊断精神疾病发病危险状态”、“ARMS诊断”和“诊断ARMS”是指对例如对象是否处于ARMS、对象是否有处于ARMS的可能性、对象是否治愈或缓解ARMS、或者ARMS的预后预测进行判断。

在本说明书中，术语“精神疾病发病危险状态的诊断用生物标志物”是指能够成为ARMS诊断的指标的物质，例如能够成为ARMS诊断的指标的生物体物质。在本说明书中，术语“精神疾病发病危险状态的诊断用生物标志物”也被称为“ARMS诊断用生物标志物”。通过对由对象得到的生物体样品中ARMS诊断用生物标志物的量进行检测，并将该量与对照物的量比较，从而能够诊断该对象的ARMS。术语“精神疾病发病危险状态的诊断用生物标志物”既可以是一种也可以是多种(例如，两种、三种、四种、五种或者六种)。例如，与健全人相比，在ARMS患者中某两种以上的生物体物质增加或者减少的情况下，将该两种以上的生物体物质组合而成的物质能够成为ARMS诊断用生物标志物。另外，例如与健全人相比，虽然处于除了ARMS以外的某种疾病或状态中某两种以上的生物体物质增加或者减少，但是处于ARMS下，与健全人相比在其中的一种以上的生物体物质增加或减少而其他物质无变化的情况下，将该两种以上的生物体物质组合而成的物质也能够成为ARMS诊断用生物标志物。ARMS诊断用生物标志物为多种的情况下，能够提高ARMS诊断的可靠性。

在本说明书中，术语“生物体物质”具有在本发明的技术领域中所使用的最广泛的意义。例如，术语“生物体物质”是存在于对象的体内或者存在于由对象得到的样品中的化学物质。术语“生物体物质”包括存在于生物体样品中的小分子、大分子、肽、多肽、蛋白质或者抗体或其片段等化学物质。胆红素氧化代谢物(Biopyrrin)、皮质醇、免疫球蛋白游离κ链(κFLC)或其片段、免疫球蛋白游离λ链(λFLC)或其片段、肌酸酐以及白蛋白能够作为生物体物质。

术语“胆红素氧化代谢物”在本发明的技术领域中是公知的物质，是在生物体内胆红素与活性氧反应时产生的最终氧化产物。术语“胆红素氧化代谢物”作为尿中的氧化应激标志物而被知晓。在本说明书中，术语“胆红素氧化代谢物”包括在生物体内经过修饰的物质，例如，经磷酸化、添加糖链、酰胺化、泛素化和/或乙酰化的物质。

术语“皮质醇”在本发明的技术领域中是公知的物质，是作为肾上腺皮质激素的糖皮质激素的一种。术语“皮质醇”也作为心理应激标志物而被知晓。在本说明书中，术语“皮质醇”包括在生物体内经过修饰的物质，例如，经磷酸化、添加糖链、酰胺化、泛素化和/或乙酰化的物质。

术语“免疫球蛋白游离κ链”和术语“免疫球蛋白游离λ链”在本发明的技术领域中普遍使用，分别是指游离(Free)状态的免疫球蛋白κ链和免疫球蛋白λ链。术语“游离(Free)”是指不在IgG或B细胞等表达而单独存在。在本说明书中，将免疫球蛋白游离κ链也称为“κFLC”(kappa free light chain：κ游离轻链)，将免疫球蛋白游离λ链也称为“λFLC”(lambda free light chain：λ游离轻链)。在本说明书中，术语“免疫球蛋白游离κ链”和术语“免疫球蛋白游离λ链”包括在生物体内经过修饰的物质，例如，经磷酸化、添加糖链、酰胺化、泛素化和/或乙酰化的物质。

术语“肌酸酐”在本发明的技术领域中是公知的物质。术语“肌酸酐”也作为用于肾功能检查的物质而被知晓。在本说明书中，术语“肌酸酐”包括在生物体内经过修饰的物质，例如，经磷酸化、添加糖链、酰胺化、泛素化和/或乙酰化的物质。

术语“白蛋白”在本发明的技术领域中也是公知的物质。在本说明书中，术语“白蛋白”包括在生物体内经过修饰的物质，例如，经磷酸化、添加糖链、酰胺化、泛素化和/或乙酰化的物质。

在生物标志物的语境中，术语“片段”是指由全长蛋白质的一部分氨基酸序列组成的多肽。例如，术语“片段”是指其氨基酸残基数比全长蛋白质至少短1氨基酸残基的多肽，例如，比全长蛋白质短约1～约100、约1～约50、约1～约20、约1～约10、约1～约5氨基酸残基的多肽。例如，κFLC的片段是用其恒定区(免疫球蛋白κ链C区)或用抗体检测时能够成为抗原的部位(抗原位点)。例如，λFLC的片段是用其恒定区(免疫球蛋白λ链C区)或抗体检测时能够成为抗原的部位(抗原位点)。术语“片段”也可以是包括一种或多种的混合物。

在本申请说明书中，术语“对象”具有在本发明的技术领域中所使用的最广泛的意义。术语“对象”包括人类或者非人类动物。非人类动物包括例如大鼠(rat)、小鼠(mouse)、豚鼠、兔、猴、狗、猫或小型猪等非人类哺乳动物。在对象为人类的情况下，该对象有时也称为“受试者”或“患者”。在对象为人类的情况下，该对象可以是男性也可以是女性。在对象为人类的情况下，虽然该对象的年龄不被特别限定，但例如为新生儿、婴儿、幼儿、儿童(少年)、青年、壮年、中年或者老年。

在本说明书中，术语“生物体样品”具有在本发明的技术领域中所使用的最广泛的意义。例如，术语“生物体样品”是血液或尿等体液，或者是细胞。术语“血液”包括血清、血浆和全血。本发明的ARMS诊断用生物标志物能够存在于生物体样品中。

在本说明书中，术语“检测”具有在本发明的技术领域中所使用的最广泛的意义。在本说明书中，术语“检测”包括定量。术语“定量”包括半定量。量的单位虽然没有特别限制，但是例如为mg、μg、ng、mmol、μmol或者nmol。在本发明的ARMS诊断用生物标志物的语境中，术语“量”包括浓度。浓度的单位虽然未被限制，但是例如为mg/ml、μg/ml、ng/ml、mmol/ml、μmol/ml或nmol/ml。在本发明的ARMS诊断用生物标志物的语境中，术语“量”也可以是相对于某种特定的物质例如内标物的比。在该情况下，量的单位虽然未被限制，但是为mg/g、μg/g、ng/g、mmol/g、μmol/g或者nmol/g(相对于内标物的量的比)。

在某个实施方式中，术语“量”是与本发明的ARMS诊断用生物标志物结合的标记物等的放射线强度、荧光强度或吸光度等。在另一个实施方式中，术语“量”是与结合于本发明的ARMS诊断用生物标志物的第一抗体结合的第二抗体的量。术语“量”可以是绝对量也可以是相对量。在某个实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物的量的值用某个特定的物质的量的值修正。该特定的物质为例如肌酸酐等生物体样品中的物质。该经修正的值是被用任意的数值例如用某个基准值或者特定的物质的量的值等相加而得的值、相减而得的值、相乘而得的值、或相除而得的值(比值)。

在本说明书中，术语“对照物”具有在本发明的技术领域中所使用的最广泛的意义。例如，术语“对照物”是指利用本发明的ARMS诊断用生物标志物，使用本发明的试剂盒或者按照本发明的方法，与被诊断的对象进行比较的对象。对照物也能够按照本发明的方法检测本发明的ARMS诊断用生物标志物的量。术语“对照物”是例如正常的对象、健全人、未诊断为ARMS的对象、以前诊断为ARMS但是现在ARMS治愈或者缓解的对象、用于治疗ARMS或精神疾病的候选药物投药前或投药后的对象、或者是从前的自己本身等。对照物可以与对象是同一个人，也可以是其他人。

在本说明书中，术语“约”是指可能存在本领域技术人员能够允许的范围内的变动，是指例如存在±0.1％～20％、±0.1％～10％、±0.1％～5％、±0.1％～1.0％或±0.1％～0.5％的变动。

(2.本发明的ARMS诊断用生物标志物)

本发明的ARMS诊断用生物标志物包含从胆红素氧化代谢物、皮质醇、免疫球蛋白游离κ链(κFLC)或其片段、以及免疫球蛋白游离λ链(λFLC)或其片段所组成的组中选择的一种以上(例如，一种、两种、三种、四种、五种或者六种)。在具体的实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含从胆红素氧化代谢物、皮质醇、免疫球蛋白游离κ链(κFLC)或其片段、以及免疫球蛋白游离λ链(λFLC)或其片段所组成的组中选择的一种以上(例如，一种、两种、三种、四种、五种或者六种)。胆红素氧化代谢物、皮质醇、κFLC或其片段、和/或λFLC或其片段也可以在生物体内通过例如磷酸化、添加糖链、酰胺化、泛素化和/或乙酰化等修饰而被修饰。

在优选的实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含胆红素氧化代谢物。在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含皮质醇。另外，在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含κFLC或其片段。进一步地，在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含λFLC或其片段。

在一个实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含从胆红素氧化代谢物、皮质醇、κFLC或其片段、以及λFLC或其片段所组成的组中选择的两种以上(例如，两种、三种、四种、五种或者六种)的组合。在具体的实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含从胆红素氧化代谢物、皮质醇、κFLC或其片段、以及λFLC或其片段所组成的组中选择的两种以上(例如，两种、三种、四种、五种或者六种)的组合。通过利用从胆红素氧化代谢物、皮质醇、κFLC或其片段、以及λFLC或其片段所组成的中选择的两种以上的组合，从而能够提高ARMS诊断的可靠性。

在优选的实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含胆红素氧化代谢物并且包含从皮质醇、κFLC或其片段、以及λFLC或其片段所组成的组中选择的一种以上(例如，一种、两种、三种、四种、五种或者六种)。在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含皮质醇并且包含从胆红素氧化代谢物、κFLC或其片段、以及λFLC或其片段所组成的组中选择的一种以上(例如，一种、两种、三种、四种、五种或者六种)。另外，在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含κFLC或其片段并且包含从胆红素氧化代谢物、皮质醇、以及λFLC或其片段所组成的组中选择的一种以上(例如，一种、两种、三种、四种、五种或者六种)。进一步地，在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含λFLC或其片段并且包含从胆红素氧化代谢物、皮质醇、以及κFLC或其片段所组成的组中选择的一种以上(例如，一种、两种、三种、四种、五种或者六种)。

在一个实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含胆红素氧化代谢物和皮质醇。在优选的实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含胆红素氧化代谢物以及κFLC或其片段。在其他优选的实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含胆红素氧化代谢物以及λFLC或其片段。在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含皮质醇以及κFLC或其片段。进一步地，在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含皮质醇以及λFLC或其片段。进一步地，另外在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含κFLC或其片段以及λFLC或其片段。

在一个实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含胆红素氧化代谢物、皮质醇、以及κFLC或其片段。在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含胆红素氧化代谢物、皮质醇、以及λFLC或其片段。在优选的实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含胆红素氧化代谢物、κFLC或其片段、以及λFLC或其片段。进一步地，在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含皮质醇、κFLC或其片段、以及λFLC或其片段。进一步地，另外在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物包含胆红素氧化代谢物、皮质醇、κFLC或其片段、以及λFLC或其片段。

胆红素氧化代谢物的结构是公知的。生物体样品中的胆红素氧化代谢物能够利用公知的方法检验、检测或比较。例如，生物体样品中的胆红素氧化代谢物能够使用胆红素氧化代谢物酶联免疫(ELISA)试剂盒(梅托珍尼克斯株式会社(Metallogenics Co.,Ltd))检验、检测或比较。另外，例如生物体样品中的胆红素氧化代谢物能够使用本发明的ARMS诊断用试剂盒检验、检测或比较。在ARMS患者中，胆红素氧化代谢物的量增加。

皮质醇的结构是公知的。生物体样品中的皮质醇能够利用公知的方法检测、检测或比较。例如，生物体样品中的皮质醇能够使用DetectX皮质醇酶免疫分析试剂盒(DetectXCORTISOL Enzyme Immunoassay Kit，ARBOR ASSAYS公司)检验、检测或比较。另外，例如生物体样品中的皮质醇能够使用本发明的ARMS诊断用试剂盒检验、检测或比较。在ARMS患者中，皮质醇的量增加。

κFLC的氨基酸序列是公知的。生物体样品中的κFLC或其片段能够利用公知的方法检验、检测或比较。例如，生物体样品中的κFLC或其片段能够使用FREELITEκ链(MBL公司，编号：BS-LK016BD)检验、检测或比较。另外，例如生物体样品中的κFLC或其片段能够使用本发明的ARMS诊断用试剂盒检验、检测或比较。在ARMS患者中，κFLC或其片段的量减少。

κFLC能够含有恒定区(免疫球蛋白κ链C区)和/或抗原位点。κFLC的片段能够为κFLC的恒定区(免疫球蛋白κ链C区)或抗原位点。κFLC可以来源于人类，也可以来源于大鼠、小鼠或兔子等非人类。在一个实施方式中，κFLC包含下述的序列号：氨基酸序列1(免疫球蛋白κ链C区)(来源于人类)。

【化合物1】

优选κFLC包含下述的序列号：氨基酸序列2或3(抗原位点)(来源于人类)。

【化合物2】

在其他实施方式中，κFLC包含下述的序列号：氨基酸序列4(免疫球蛋白κ链C区)(来源于大鼠)。

【化合物3】

优选κFLC包含下述的序列号：氨基酸序列5(抗原位点)(来源于大鼠)。

【化合物4】

λFLC的氨基酸序列是公知的。生物体样品中的λFLC或其片段能够利用公知的方法检验、检测或比较。例如，生物体样品中的λFLC或其片段能够使用FREELITEλ链(MBL公司，编号：BS-LK018BD)检验、检测或比较。另外，例如生物体样品中的λFLC能够使用本发明的ARMS诊断用试剂盒检验、检测或比较。在ARMS患者中，λFLC或其片段的量减少。

λFLC可以包含恒定区(免疫球蛋白λ链C区)和/或抗原位点。λFLC的片段可以为λFLC的恒定区(免疫球蛋白κ链C区)或抗原位点。λFLC可以来源于人类，也可以来源于大鼠、小鼠或兔子等非人类。在一个实施方式中，λFLC包含下述的序列号：氨基酸序列6(免疫球蛋白λ链C区)(来源于人类)。

【化合物5】

包含来源于大鼠等非人类的氨基酸序列的κFLC和λFLC能够在ARMS模型动物中用于诊断ARMS。其特别是对ARMS模型动物的完成或品质管理等有利。

将保持κFLC或λFLC的独特性，例如表征κFLC或λFLC的氨基酸序列(例如，基序(motif)、域或框序列等)等作为条件，在κFLC或λFLC的氨基酸序列中缺失、添加、变异和/或置换的序列也包含于本发明的范围内。像那样的缺失、添加、变异和/或置换的数量只要保持κFLC或λFLC的独特性，就不被特别限定(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或者更多)。一般而言，在具有相同性质的氨基酸相互之间的变异或置换完全或者基本不会对κFLC或λFLC的功能产生影响，所以含有像那样的变异或置换的κFLC或λFLC，能够视为与原来的κFLC或λFLC(例如，由以上述序列号规定的κFLC或λFLC)等同。作为像那样的氨基酸的性质，能够举出例如如下类别：酸性氨基酸(天冬氨酸和谷氨酸)、碱性氨基酸(赖氨酸、组氨酸和精氨酸)、疏水性(脂肪族)氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸)、含硫氨基酸(蛋氨酸和半胱氨酸)、芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸)、酸性氨基酸酰胺(天冬酰胺和谷氨酰胺)或者中性氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、天冬酰胺和谷氨酰胺)。例如，序列号：氨基酸序列1中的缺失了第105号的Glu和第106号的Cys的氨基酸序列也包含于本发明的范围内。

另外，将保持κFLC或λFLC的独特性，例如表征κFLC或λFLC的氨基酸序列(例如，基序、域或框序列等)等作为条件，相对于κFLC或λFLC的氨基酸序列具有特定的序列同一性(例如，至少约70％同一性、至少约80％同一性、至少约85％同一性、至少约90％同一性、至少约95％同一性、至少约99％同一性)的氨基酸序列也包含于本发明的范围内。

本发明的ARMS诊断用生物标志物能够进一步包含从肌酸酐和白蛋白所组成的组中选择的一种以上的物质。在一个实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物进一步包含肌酸酐。在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物进一步包含白蛋白。进一步地，在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用生物标志物还包含肌酸酐和白蛋白。

由对象得到的尿有时因一日内波动而浓缩或稀释。存在胆红素氧化代谢物、皮质醇、κFLC或其片段、和/或λFLC或其片段的浓度因该一日内波动发生变化的情况。为了修正由该变化产生的影响，能够将肌酸酐用作内标物。能够将由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物、皮质醇、κFLC或其片段、和/或λFLC或其片段的量用该生物体样品中的肌酸酐的量来修正。优选将由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物、皮质醇、κFLC或其片段、和/或λFLC或其片段的浓度用该生物体样品中的肌酸酐的浓度来修正。

另外，通过用肌酸酐的量修正由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物、皮质醇、κFLC或其片段、和/或λFLC或其片段的量，从而能够得到反映了对象的肾脏功能的值。通过将该经修正的值与对照物的值比较，能够以更高的精度诊断ARMS。修正能够包括相除，即计算相对于肌酸酐的量的比值。

另外，肌酸酐和/或白蛋白能够用于判断肾脏功能是否存在异常。在肾脏功能存在异常的情况下，即使不是ARMS有时胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、κFLC或其片段的量、和/或λFLC或其片段的量也会发生变化。例如，肾脏功能存在异常的对象表现出胆红素氧化代谢物的量增加、皮质醇的量增加、κFLC或其片段的量减少、和/或λFLC或其片段的量减少，并且可能表现出肌酸酐和/或白蛋白的量变化(增加或减少)。另一方面，肾脏功能正常的ARMS患者虽然表现出胆红素氧化代谢物的量增加、皮质醇的量增加、κFLC或其片段的量减少、和/或λFLC或其片段的量减少，但是肌酸酐和/或白蛋白的量不会变化。因此，从胆红素氧化代谢物、皮质醇、κFLC或其片段、以及λFLC或其片段所组成的组中选择的一种以上与肌酸酐和/或白蛋白的组合能够作为ARMS诊断用生物标志物使用。另外，肌酸酐和/或白蛋白的量能够用于判断胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、κFLC或其片段的量、和/或λFLC或其片段的量的变化是否由肾脏功能的异常引起。例如，在白蛋白的量/肌酸酐的量的比大于约20、约25、约30、约35或约40mg/g的情况下，特别是大于约30mg/g的情况下，能够判断为胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、κFLC或其片段的量、和/或λFLC或其片段的量的变化由肾脏功能的异常引起。反之，在白蛋白的量/肌酸酐的量的比为约5、约10、约15、约20、约25、约30、约35或约40mg/g以下的情况下，特别是约30mg/g以下的情况下，能够判断为胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、κFLC或其片段的量、和/或λFLC或其片段的量的变化不是由肾脏功能的异常引起，即肾脏功能正常。

肌酸酐的结构是公知的。生物体样品中的肌酸酐能够利用公知的方法检验、检测或比较。例如，生物体样品中的肌酸酐能够使用DetectX肌酸酐检测试剂盒(DetectXCreatinine detection Kit，ARBOR ASSAYS公司)检验、检测或比较。生物体样品中的肌酸酐能够使用本发明的ARMS诊断用试剂盒检验、检测或比较。

白蛋白的结构是公知的。生物体样品中的白蛋白能够利用公知的方法检验、检测或比较。例如，生物体样品中的白蛋白能够使用白蛋白(人类)酶联免疫试剂盒(Albumin(Human)ELISA Kit，开曼化学公司(Cayman Chemical))检验、检测或比较。生物体样品中的白蛋白能够使用本发明的ARMS诊断用试剂盒检验、检测或比较。

利用本发明的ARMS诊断用生物标志物能够诊断ARMS。具体而言，通过检测由对象得到的生物体样品中的本发明的ARMS诊断用生物标志物的量，从而能够诊断对象的ARMS。ARMS的诊断能够按照本发明的ARMS的诊断方法进行。另外，利用本发明的ARMS诊断用生物标志物，能够获取用于诊断ARMS的数据。具体而言，通过检测由对象得到的生物体样品中的本发明的ARMS诊断用生物标志物的量，从而能够获取用于诊断对象的ARMS的数据。该数据的获取方法能够按照本发明的用于诊断ARMS的数据的获取方法进行。进一步地，利用本发明的ARMS诊断用生物标志物，能够制作能够与本发明的ARMS诊断用生物标志物特异性结合的物质(例如，抗体)。使用像那样的物质，能够检验或检测本发明的ARMS诊断用生物标志物。

介由本发明的利用ARMS诊断用生物标志物进行的ARMS的诊断，能够进行ARMS患者的筛选、ARMS的有效治疗方法的确立、精神疾病发病的有效预防方法的确立、对ARMS有益的候选药物的筛选以及ARMS的模型动物的开发等。

(3.本发明的ARMS诊断用试剂盒)

本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与本发明的ARMS诊断用生物标志物结合的物质。该物质与本发明的ARMS诊断用生物标志物结合，由此能够检验本发明的ARMS诊断用生物标志物，或者检测本发明的ARMS诊断用生物标志物的量。能够与本发明的ARMS诊断用生物标志物结合的物质也可以是一种或多种物质(例如，两种、三种、四种、五种或者六种)。能够与本发明的ARMS诊断用生物标志物结合的物质是能够与胆红素氧化代谢物结合的物质、能够与皮质醇结合的物质、能够与免疫球蛋白游离κ链(κFLC)或其片段结合的物质、能够与免疫球蛋白游离λ链(λFLC)或其片段结合的物质、能够与肌酸酐结合的物质、和/或能够与白蛋白结合的物质。在一个实施方式中，该物质能够与本发明的ARMS诊断用生物标志物特异性结合。使用能够与本发明的ARMS诊断用生物标志物结合的物质，能够检验生物体样品中的本发明的ARMS诊断用生物标志物，检测生物体样品中的本发明的ARMS诊断用生物标志物的量。

在一个实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒能够包含从能够与胆红素氧化代谢物结合的物质、能够与皮质醇结合的物质、能够与免疫球蛋白游离κ链(κFLC)或其片段结合的物质、以及能够与免疫球蛋白游离λ链(λFLC)或其片段结合的物质所组成的组中选择的一种以上(例如，一种、两种、三种、四种、五种或者六种)的物质。

在优选的实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与胆红素氧化代谢物结合的物质。在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与皮质醇结合的物质。另外，在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与κFLC或其片段结合的物质。进一步地，在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与λFLC或其片段结合的物质。

在优选的实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与胆红素氧化代谢物结合的物质并且包含从能够与皮质醇结合的物质、能够与κFLC或其片段结合的物质、以及能够与λFLC或其片段结合的物质所组成组中选择的一种以上(例如，一种、两种、三种、四种、五种或者六种)的物质。在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与皮质醇结合的物质并且包含从能够与胆红素氧化代谢物结合的物质、能够与κFLC或其片段结合的物质、以及能够与λFLC或其片段结合的物质所组成组中选择的一种以上(例如，一种、两种、三种、四种、五种或者六种)的物质。另外，在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与κFLC或其片段结合的物质并且包含从能够与胆红素氧化代谢物结合的物质、能够与皮质醇结合的物质、以及能够与λFLC或其片段结合的物质所组成组中选择的一种以上(例如，一种、两种、三种、四种、五种或者六种)的物质。进一步地，在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与λFLC或其片段结合的物质并且包含从能够与胆红素氧化代谢物结合的物质、能够与皮质醇结合的物质、以及能够与κFLC或其片段结合的物质所组成组中选择的一种以上(例如，一种、两种、三种、四种、五种或者六种)的物质。

在一个实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与胆红素氧化代谢物结合的物质和能够与皮质醇结合的物质。在优选的实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与胆红素氧化代谢物结合的物质以及能够与κFLC或其片段结合的物质。在其他优选的实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与胆红素氧化代谢物结合的物质以及能够与λFLC或其片段结合的物质。在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与皮质醇结合的物质以及能够与κFLC或其片段结合的物质。另外，在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与皮质醇结合的物质以及能够与λFLC或其片段结合的物质。进一步地，另外在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与κFLC或其片段结合的物质以及能够与λFLC或其片段结合的物质。

在一个实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与胆红素氧化代谢物结合的物质、能够与皮质醇结合的物质、以及能够与κFLC或其片段结合的物质。在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与胆红素氧化代谢物结合的物质、能够与皮质醇结合的物质以及能够与λFLC或其片段结合的物质。在优选的实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与胆红素氧化代谢物结合的物质、能够与κFLC或其片段结合的物质、以及能够与λFLC或其片段结合的物质。另外，在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与皮质醇结合的物质、能够与κFLC或其片段结合的物质、以及能够与λFLC或其片段结合的物质。进一步地，在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒包含能够与胆红素氧化代谢物结合的物质、能够与皮质醇结合的物质、能够与κFLC或其片段结合的物质、以及能够与λFLC或其片段结合的物质。

本发明的ARMS诊断用试剂盒可以进一步地包含从能够与肌酸酐结合的物质和能够与白蛋白结合的物质所组成组中选择的一种以上的物质。在一个实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒进一步地包含能够与肌酸酐结合的物质。在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒进一步地包含能够与白蛋白结合的物质。进一步地，在其他实施方式中，本发明的ARMS诊断用试剂盒进一步地包含能够与肌酸酐结合的物质以及能够与白蛋白结合的物质。

能够与本发明的ARMS诊断用生物标志物结合的物质包含对本发明的ARMS诊断用生物标志物具有亲和性的任意物质。在一个实施方式中，能够与本发明的ARMS诊断用生物标志物结合的物质是抗体或有机化合物。有机化合物可以为低分子或高分子。如果列举有机化合物的例子，有色素、荧光色素、染料、颜料、发色试剂、显色试剂、免疫染色试剂、酶或被标记的化合物等。显色试剂包含对本发明的ARMS诊断用生物标志物表现出显色反应的化合物。如果列举被标记的化合物的例子，虽然没有限制，但是有无机物质、色素、荧光色素、染料、颜料、发色试剂、显色试剂、免疫染色试剂、酶或被放射性同位素等被标记的化合物。在一个实施方式中，能够与胆红素氧化代谢物结合的物质、能够与皮质醇结合的物质、能够与κFLC或其片段结合的物质、能够与λFLC或其片段结合的物质、能够与肌酸酐结合的物质、和/或能够与白蛋白结合的物质是抗体或有机化合物。抗体可以包括多克隆抗体或单克隆抗体。

在一个实施方式中，能够与本发明的ARMS诊断用生物标志物结合的物质被标记物标记。在一个实施方式中，能够与胆红素氧化代谢物结合的物质、能够与皮质醇结合的物质、能够与κFLC或其片段结合的物质、能够与λFLC或其片段结合的物质、能够与肌酸酐结合的物质、和/或能够与白蛋白结合的物质被标记物标记。如果列举标记物的例子，虽然没有限制，但是有无机物质、色素、荧光色素、染料、颜料、发色试剂、显色试剂、免疫染色试剂、酶或放射性同位素等。通过检测该标记物，从而能够检验本发明的ARMS诊断用生物标志物或者检测本发明的ARMS诊断用生物标志物的量。

在能够与本发明的ARMS诊断用生物标志物结合的物质为抗体的情况下，能够使该抗体作为第一抗体与本发明的ARMS诊断用生物标志物结合，利用第二抗体检验本发明的ARMS诊断用生物标志物或者检测本发明的ARMS诊断用生物标志物的量。

在一个实施方式中，能够与本发明的ARMS诊断用生物标志物结合的物质固定于固体支撑体上。在一个实施方式中，能够与胆红素氧化代谢物结合的物质、能够与皮质醇结合的物质、能够与κFLC或其片段结合的物质、能够与λFLC或其片段结合的物质、能够与肌酸酐结合的物质、和/或能够与白蛋白结合的物质固定于固体支撑体上。该固体支撑体也可以由聚苯乙烯树脂、聚碳酸酯树脂、聚乙烯树脂或聚丙烯树脂等的塑料，或者玻璃等任意适当的材料做成。另外，该固体支撑体可以是碟状、井状(well)、条状(strip)或者晶片状(chip)等任意形状的基板。该基板的表面可以被任意地覆盖修饰。

如果列举能够与胆红素氧化代谢物结合的物质的例子，有抗胆红素氧化代谢物抗体，例如包含于胆红素氧化代谢物酶联免疫试剂盒(梅托珍尼克斯株式会社)的抗体等。另外，本领域技术人员能够容易地制作抗胆红素氧化代谢物抗体。抗胆红素氧化代谢物抗体可以来源于人类、小鼠、大鼠、兔或羊。

如果列举能够与皮质醇结合的物质的例子，有抗皮质醇抗体，例如包含于DetectX皮质醇酶免疫分析试剂盒(ARBOR ASSAYS公司)的抗体等。另外，本领域技术人员能够容易地制作抗皮质醇抗体。抗皮质醇抗体可以来源于人类、小鼠、大鼠、兔或羊。

如果列举能够与κFLC或其片段结合的物质的例子，有抗κFLC抗体，例如包含于FREELITEκ链(MBL公司，编号：BS-LK016BD)的抗体等。另外，本领域技术人员能够容易地制作抗κFLC抗体。抗κFLC抗体可以来源于人类、小鼠、大鼠、兔或羊。抗κFLC抗体也可以通过将免疫球蛋白κ链C区或其抗原位点的多肽向大鼠或兔子等哺乳动物施予来制作。抗κFLC抗体也可以通过例如将包含序列号1～5中任一个的氨基酸序列的多肽或将由序列号1～5中任一个的氨基酸序列构成的多肽向大鼠或兔子等哺乳动物施予来制作。

如果列举能够与λFLC结合的物质的例子，有抗λFLC抗体，例如包含于FREELITEλ链(MBL公司，编号：BS-LK018BD)的抗体等。另外，本领域技术人员能够容易地制作抗λFLC抗体。抗λFLC抗体可以来源于人类、小鼠、大鼠、兔或羊。抗λFLC抗体也可以将免疫球蛋白λ链C区或其抗原位点的多肽向大鼠或兔子等哺乳动物施予来制作。抗κFLC抗体也可以将例如包含序列号6的氨基酸序列的多肽或由序列号6的氨基酸序列构成的多肽向大鼠或兔子等哺乳动物施予来制作。

如果列举能够与肌酸酐结合的物质的例子，有对肌酸酐表现出显色反应的化合物，例如包含于DetectX肌酸酐检测试剂盒(ARBOR ASSAYS公司)的化合物等。

如果列举能够与白蛋白结合的物质的例子，有抗白蛋白抗体，例如包含于白蛋白(人类)酶联免疫试剂盒(开曼化学公司)的抗体等。另外，本领域技术人员能够容易地制作抗白蛋白抗体。抗白蛋白抗体可以来源于人类、小鼠、大鼠、兔或者羊。

本发明的ARMS诊断用试剂盒可以进一步地包含用于进行本发明的ARMS诊断用生物标志物的检验、本发明的ARMS诊断用生物标志物的量的检测、和/或本发明的ARMS诊断用生物标志物的量的比较的分析所用的试剂。如果列举该分析的例子，虽然没有限定，但有免疫学分析(斑点印迹检测等)、蛋白质印迹法、酶联免疫吸附检测法(ELISA)、三明治酶联免疫(ELISA)、免疫电泳法、单向放射免疫扩散法(SRID)、放射免疫检测法(RIA)、酶免疫检测法(EIA)、乳胶免疫检测法(LIA)、荧光免疫检测法(FIA)、显色反应以及比色法等。本发明的ARMS诊断用试剂盒可以进一步地包含上述分析所用的第一抗体或第二抗体。第一抗体和/或第二抗体能够用无机物质、色素、荧光色素、染料、颜料、发色试剂、显色试剂、免疫染色试剂、酶或者放射性同位素等任意的标记物标记。

本发明的ARMS诊断用试剂盒可以进一步地包含用于检测本发明的ARMS诊断用生物标志物的量的说明书和/或记载有与健全人中的本发明的ARMS诊断用生物标志物的量相关的数据的资料等。本发明的ARMS诊断用试剂盒可以进一步地包含用于从对象得到生物体样品的器具(例如，尿检杯等容器或注射器)。

使用本发明的ARMS诊断用试剂盒能够进行本发明的ARMS诊断用生物标志物的检验、本发明的ARMS诊断用生物标志物的量的检测、和/或本发明的ARMS诊断用生物标志物的量的比较。使用本发明的ARMS诊断用试剂盒，能够进行ARMS的诊断。ARMS的诊断可以按照本发明的ARMS的诊断方法进行。另外，使用本发明的ARMS诊断用试剂盒，能够获取用于诊断ARMS的数据。数据的获取方法可以按照用于诊断本发明的ARMS的数据的获取方法进行。

(4.本发明的ARMS的诊断方法以及用于诊断本发明的ARMS的数据获取方法)

使用本发明的ARMS诊断用生物标志物或本发明的ARMS诊断用试剂盒，能够诊断或检查对象的ARMS。另外，使用本发明的ARMS诊断用生物标志物或本发明的ARMS诊断用试剂盒，能够获取用于诊断或检查对象的ARMS的数据。本发明的ARMS的诊断方法和获取用于诊断本发明的ARMS的数据的方法(以下，统一称为“本发明的方法”)可以将生物体样品中的本发明的ARMS诊断用生物标志物的量作为指标使用。利用本发明的方法，能够获取ARMS或精神疾病的治疗、预防、诊断、鉴别或预后评估所需的数据。另外，本发明的方法能够提供对判定ARMS或精神疾病的发病、发病的可能性或发病后的预后预测有用的信息。进一步地，能够根据由本发明的方法得到的结果，确定对象的治疗方法或治疗计划。进一步地，能够根据由本发明的方法得到的结果，筛选或确定ARMS或精神疾病的治疗药。使用像那样的治疗药能够对ARMS或精神疾病的对象进行治疗、预防或者管理。进一步地，能够利用本发明的方法进行健康诊断等中的ARMS或精神疾病的初筛。另外，在精神科中的初诊患者中，也能够进行ARMS或精神疾病的筛选。

在一个实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的本发明的ARMS诊断用生物标志物的量进行检测的工序。在特定的实施方式中，本发明的方法包括对从由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、免疫球蛋白游离κ链(κFLC)或其片段的量、以及免疫球蛋白游离λ链(λFLC)或其片段的量所组成的组中选择的一个以上(例如，一个、两个、三个、四个、五个或者六个)的量进行检测的工序。

在优选的实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量进行检测的工序。在其他实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的皮质醇的量进行检测的工序。另外，在其他实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的κFLC或其片段的量进行检测的工序。进一步地，在其他实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的λFLC或其片段的量进行检测的工序。

在优选的实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量进行检测并且对从皮质醇的量、κFLC或其片段的量、以及λFLC或其片段的量所组成的组中选择的一个以上(例如，一个、两个、三个、四个、五个或者六个)的量进行检测的工序。在其他实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的皮质醇的量进行检测并且对从由胆红素氧化代谢物的量、κFLC或其片段的量和λFLC或其片段的量所组成的组中选择的一个以上(例如，一个、两个、三个、四个、五个或者六个)的量进行检测的工序。另外，在其他实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的κFLC或其片段的量进行检测并且对从由胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、以及λFLC或其片段的量所组成的组中选择的一个以上(例如，一个、两个、三个、四个、五个或者六个)的量进行检测的工序。进一步地，在其他实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的λFLC或其片段的量进行检测并且对从由胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、以及κFLC或其片段的量所组成的组中选择的一个以上(例如，一个、两个、三个、四个、五个或者六个)的量进行检测的工序。

在一个实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量和皮质醇的量进行检测的工序。在优选的实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量、以及κFLC或其片段的量进行检测的工序。在其他优选的实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量、以及λFLC或其片段的量进行检测的工序。在其他实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的皮质醇的量、以及κFLC或其片段的量进行检测的工序。另外，在其他实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的皮质醇的量、以及λFLC或其片段的量进行检测的工序。进一步地，另外在其他实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的κFLC或其片段的量、以及λFLC或其片段的量进行检测的工序。

在一个实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、以及κFLC或其片段的量进行检测的工序。在其他实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、以及λFLC或其片段的量进行检测的工序。在优选的实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量、κFLC或其片段的量、以及λFLC或其片段的量进行检测的工序。另外，在其他实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的皮质醇的量、κFLC或其片段的量、以及λFLC或其片段的量进行检测的工序。进一步地，在其他实施方式中，本发明的方法包括对由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、κFLC或其片段的量、以及λFLC或其片段的量进行检测的工序。

本发明的方法可以进一步地包括对从由对象得到的生物体样品中的肌酸酐的量和白蛋白的量所组成的组中选择的一个以上的量进行检测的工序。在一个实施方式中，本发明的方法进一步地包括对由对象得到的生物体样品中的肌酸酐的量进行检测的工序。在其他实施方式中，本发明的方法进一步地包括对由对象得到的生物体样品中的白蛋白的量进行检测的工序。进一步地，在其他实施方式中，本发明的方法还包括对由对象得到的生物体样品中的肌酸酐的量和白蛋白的量进行检测的工序。

检测工序能够用本发明的ARMS诊断用试剂盒进行。检测工序可以用能够与本发明的ARMS诊断用生物标志物结合的物质进行。在一个实施方式中，检测工序包括使由对象得到的生物体样品与能够与本发明的ARMS诊断用生物标志物结合的物质接触的工序。检测工序对于本领域技术人员而言可以用公知的一般的方法进行。如果列举对于本领域技术人员而言为公知的一般的方法的例子，虽然没有限制，但有免疫学分析(斑点印迹检测等)、蛋白质印迹法、酶联免疫吸附检测法(ELISA)、三明治酶联免疫(ELISA)、免疫电泳法、单向放射免疫扩散法(SRID)、放射免疫检测法(RIA)、酶免疫检测法(EIA)、乳胶免疫检测法(LIA)和荧光免疫检测法(FIA)等。或者，上述检测工序可以用市售的抗体或检测试剂盒进行。如果列举市售的抗体或检测试剂盒的例子，有胆红素氧化代谢物酶联免疫试剂盒(梅托珍尼克斯株式会社)、DetectX皮质醇酶免疫分析试剂盒(ARBOR ASSAYS公司)、FREELITEκ链(MBL公司，编号：BS-LK016BD)、FREELITEλ链(MBL公司，编号：BS-LK018BD)、DetectX肌酸酐检测试剂盒(ARBOR ASSAYS公司)等。

本发明的方法可以进一步地包括在检测工序之前由对象得到生物体样品的工序。该工序能够用对于本领域技术人员而言为公知的方法进行，不被特别限制。例如，如果生物体样品是尿，则该工序能够用尿检杯等容器进行。所得的尿也可以进一步地供浓缩或分离操作。另外，例如，如果生物体样品是血液，则该工序可以利用注射器等进行。在生物体样品为血液的情况下，本发明的方法可以进一步包括从该血液得到血清或血浆的工序。

本发明的方法可以进一步地包括将上述检测出的胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、κFLC或其片段的量、和/或λFLC或其片段的量与对照物的量比较的工序。本发明的方法可以进一步地包括将上述检测出的白蛋白的量和/或肌酸酐的量与对照物的量比较的工序。

本发明的方法可以包括将由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、κFLC或其片段的量、和/或λFLC或其片段的量用由该对象得到的生物体样品中的肌酸酐的量修正的工序。通过用肌酸酐的量修正，从而能够得到反应出对象的肾脏功能的值。通过将该经修正的值与对照物的值比较，能够以更高的精度诊断ARMS。在一个实施方式中，用肌酸酐的量修正胆红素氧化代谢物的量。在其他实施方式中，用肌酸酐的量修正皮质醇的量。另外，在其他实施方式中，用肌酸酐的量修正κFLC或其片段的量。进一步地，在其他实施方式中，用肌酸酐的量修正λFLC或其片段的量。本发明的方法可以进一步地包括将由对象得到的生物体样品中的白蛋白的量用由该对象得到的生物体样品中的肌酸酐的量修正的工序。白蛋白的量相对于肌酸酐的量的比(白蛋白/肌酸酐比)能够在判断对象的肾脏功能是否正常时使用。在一个实施方式中，该修正是相除，即计算相对于肌酸酐的量的比值。通过该修正工序，能够得到反应出对象的肾脏功能的值。本发明的方法可以进一步地包括将该经修正的值与对照物的值比较的工序。

在本发明的方法中，生物体样品优选为血液或尿，更优选为尿。在本发明的方法中，对象和对照物优选为人类。该人类的年龄优选为儿童(少年)或青年，更优选为约5岁～约25岁、约10岁～约20岁、约12岁～约18岁、或约14岁～约16岁。

在具体的实施方式中，本发明的方法包括：(a)对从由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、免疫球蛋白游离κ链(κFLC)或其片段的量、以及免疫球蛋白游离λ链(λFLC)或其片段的量所组成的组中选择的一个以上(例如，一个、两个、三个、四个、五个或者六个)的量进行检测的工序；以及(b)将在工序(a)中检测出的量与对照物的量比较的工序。

在其他具体的实施方式中，本发明的方法包括：(a)对从由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、免疫球蛋白游离κ链(κFLC)或其片段的量、以及免疫球蛋白游离λ链(λFLC)或其片段的量所组成的组中选择的一个以上(例如，一个、两个、三个、四个、五个或者六个)的量进行检测的工序；以及(b)对从该生物体样品中的肌酸酐的量和白蛋白的量所组成的组中选择的一个以上的量进行检测的工序。在该实施方式中，本发明的方法可以进一步地包括：(c)将在工序(a)和(b)中检测出的量与对照物的量比较的工序。

另外，在其他具体的实施方式中，本发明的方法包括：(a)对从由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、免疫球蛋白游离κ链(κFLC)或其片段的量、以及免疫球蛋白游离λ链(λFLC)或其片段的量所组成的组中选择的一个以上(例如，一个、两个、三个、四个、五个或者六个)的量进行检测的工序；(b)对该生物体样品中的肌酸酐的量进行检测的工序；以及(c)用通过工序(b)检测出的量修正在工序(a)中检测出的量的工序。在该实施方式中，本发明的方法可以进一步地包括：(d)将该经修正的量与对照物的量比较的工序。上述修正的工序(c)可以包括：在工序(a)中检测出的量除以通过工序(b)检测出的量的工序，即计算在工序(a)中检测出的量的相对于通过工序(b)检测出的肌酸酐的量的比值的工序。

进一步地，在其他具体的实施方式中，本发明的方法包括：(a)对从由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、免疫球蛋白游离κ链(κFLC)或其片段的量、以及免疫球蛋白游离λ链(λFLC)或其片段的量所组成的组中选择的一个以上(例如，一个、两个、三个、四个、五个或者六个)的量进行检测的工序；(b)对该生物体样品中的白蛋白的量进行检测的工序；(c)对该生物体样品中的肌酸酐的量进行检测的工序；以及(d)用通过工序(c)检测出的量修正在工序(a)和(b)中检测出的量。在该实施方式中，本发明的方法可以进一步地包括：(e)将通过工序(d)修正后的量与对照物的量比较的工序。上述修正的工序(d)可以包括：在工序(a)和工序(b)中检测出的量除以通过工序(c)检测出的量的工序，即计算在工序(a)和工序(b)中检测出的量的相对于通过工序(c)检测出的肌酸酐的量的比值的工序。

本发明的方法可以进一步地包括对对象是否为ARMS或是否存在其可能性进行判断的工序。在一个实施方式中，在由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量与对照物的量相比增加的情况下或大于对照组的中间值的情况下，能够判断为该对象为ARMS或存在其可能性。在其他实施方式中，在由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量与对照物的量相比增加的情况下或大于对照组的中间值的情况下，能够判断为该对象为ARMS或存在其可能性。另外，在其他实施方式中，在由对象得到的生物体样品中的κFLC或其片段的量与对照物的量相比减少的情况下或小于对照组的中间值的情况下，能够判断为该对象为ARMS或存在其可能性。进一步地，在其他实施方式中，在由对象得到的生物体样品中的λFLC或其片段的量与对照物的量相比减少的情况下或小于对照组的中间值的情况下，能够判断为该对象为ARMS或存在其可能性。

在一个实施方式中，在由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量和皮质醇的量与对照物的量相比增加或大于对照组的中间值的情况下，能够判断为该对象为ARMS或存在其可能性。在优选的实施方式中，在由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量与对照物的量相比增加或者大于对照组的中间值，并且由该对象得到的生物体样品中的κFLC或其片段的量与对照物的量相比减少或者小于对照组的中间值的情况下，能够判断为该对象为ARMS或存在其可能性。另外，在优选的实施方式中，在由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量与对照物的量相比增加或者大于对照组的中间值，并且由该对象得到的生物体样品中的λFLC或其片段的量与对照物的量相比减少或者小于对照组的中间值的情况下，能够判断为该对象为ARMS或存在其可能性。在其他实施方式中，在由对象得到的生物体样品中的皮质醇的量与对照物的量相比增加或大于对照组的中间值，并且由该对象得到的生物体样品中的κFLC或其片段的量与对照物的量相比减少或者小于对照组的中间值的情况下，能够判断为该对象为ARMS或存在其可能性。另外，在其他实施方式中，由对象得到的生物体样品中的皮质醇的量与对照物的量相比增加或者大于对照组的中间值，并且由该对象得到的生物体样品中的λFLC或其片段的量与对照物相比减少或小于对照组的中间值的情况下，能够判断为该对象为ARMS或存在其可能性。进一步地，在其他实施方式中，在由对象得到的生物体样品中的κFLC或其片段的量以及λFLC或其片段的量与对照物的量相比减少或小于对照组的中间值的情况下，能够判断为该对象为ARMS或存在其可能性。

在一个实施方式中，在由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量和皮质醇的量与对照物的量相比增加或者大于对照组的中间值，并且由该对象得到的生物体样品中的κFLC或其片段的量与对照物的量相比减少或者小于对照组的中间值的情况下，能够判断为该对象为ARMS或存在其可能性。在其他实施方式中，由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量和皮质醇的量与对照物的量相比增加或大于对照组的中间值，并且由该对象得到的生物体样品中的λFLC或其片段的量与对照物的量相比减少或者小于对照组的中间值的情况下，能够判断为该对象为ARMS或存在其可能性。在优选的实施方式中，由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量与对照物的量相比增加或者大于对照组的中间值，并且由该对象得到的生物体样品中的κFLC或其片段的量以及λFLC或其片段的量与对照物的量相比减少或者小于对照组的中间值的情况下，能够判断为该对象为ARMS或存在其可能性。另外，在其他实施方式中，由对象得到的生物体样品中的皮质醇的量与对照物的量相比增加或者大于对照组的中间值，并且由该对象得到的生物体样品中的κFLC或其片段的量以及λFLC或其片段的量与对照物的量相比减少或者小于对照组的中间值的情况下，能够判断为该对象为ARMS或存在其可能性。进一步地，在其他实施方式中，由对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量和皮质醇的量与对照物的量相比增加或者大于对照组的中间值，并且由该对象得到的生物体样品中的κFLC或其片段的量以及λFLC或其片段的量与对照物的量相比减少或者小于对照组的中间值的情况下，能够判断为该对象为ARMS或存在其可能性。

肾脏功能存在异常的对象会出现胆红素氧化代谢物的量增加、皮质醇的量增加、κFLC或其片段的量减少、和/或λFLC或其片段的量减少，并且可能出现肌酸酐的量和/或白蛋白的量的变化(增加或减少)。另一方面，肾脏功能正常的ARMS患者虽然会出现胆红素氧化代谢物的量增加、皮质醇的量增加、κFLC或其片段的量减少、和/或λFLC或其片段的量减少，但是肌酸酐的量和/或白蛋白的量可能不变化。因此，除了上述判断基准以外，还可以进一步地在由该对象得到的生物体样品中的肌酸酐的量和/或白蛋白的量与对照物的量相比无变化或者与对照组的中间值相比无变化的情况下，判断为该对象为ARMS。或者，除了上述判断基准以外，进一步地，在白蛋白/肌酸酐比(白蛋白的量相对于肌酸酐的量的比)与对照物的比相比无变化或者与对照组的中间值相比无变化的情况下，或者在为约5、约10、约15、约20、约25、约30、约35或约40mg/g以下的情况下，也可以判断为该对象为ARMS。

通过对由对象得到的生物体样品中的肌酸酐的量和/或白蛋白的量进行检测，从而可以判断对象的肾脏功能是否正常。例如，在由对象得到的生物体样品中的肌酸酐的量和/或白蛋白的量与对照物的量相比无变化或者与对照组的中间值相比无变化的情况下，可以判断为对象的肾脏功能正常。或者，在白蛋白/肌酸酐的比与对照物的比相比无变化或者与对照组的中间值相比无变化的情况下，或者为约5、约10、约15、约20、约25、约30、约35或约40mg/g以下的情况下，可以判断为对象的肾脏功能正常。另外，通过对由对象得到的生物体样品中的肌酸酐的量和/或白蛋白的量进行检测，从而可以用于判断胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、κFLC或其片段的量、和/或λFLC或其片段的量的变化是否由对象的肾脏功能的异常引起。例如，在由该对象得到的生物体样品中的肌酸酐的量和/或白蛋白的量与对照物的量相比无变化或者与对照组的中间值相比无变化的情况下，可以判断为胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、κFLC或其片段的量、和/或λFLC或其片段的量的变化并非由对象的肾脏功能的异常引起。或者，在白蛋白/肌酸酐的比与对照物的比相比无变化或者与对照组的中间值相比无变化的情况下，或者在为约5、约10、约15、约20、约25、约30、约35或者约40mg/g以下的情况下，可以判断为胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、κFLC或其片段的量、和/或λFLC或其片段的量的变化并非由对象的肾脏功能的异常引起。

在其他特定的实施方式中，由该对象得到的生物体样品中的胆红素氧化代谢物的量、皮质醇的量、κFLC或其片段的量、λFLC或其片段的量、和/或白蛋白的量是除以由该对象得到的生物体样品中的肌酸酐的量而得的值，即，是相对于肌酸酐的量的比值。

上述增加是指能够增加例如约1.3倍、约1.4倍、约1.5倍、约2倍、约3倍、约4倍、约5倍、约10倍、约15倍、约20倍、约30倍、约50倍、约100倍或更多。大于上述对照组的中间值是指能够比对照组的中间值大例如约1.3倍、约1.4倍、约1.5倍、约2倍、约3倍、约4倍、约5倍、约10倍、约15倍、约20倍、约30倍、约50倍、约100倍或更大。上述减少是指例如能够减少约1.3倍、约1.4倍、约1.5倍、约2倍、约3倍、约4倍、约5倍、约10倍、约15倍、约20倍、约30倍、约50倍、约100倍或更多。小于上述对照组的中间值是指能够比对照组的中间值小例如约1.3倍、约1.4倍、约1.5倍、约2倍、约3倍、约4倍、约5倍、约10倍、约15倍、约20倍、约30倍、约50倍、约100倍或更小。对象组的中间值既可以用已知的中间值，也可以用由实际检测出的对照组计算而得的值。

在本说明书中，“无变化”或者“不发生变化”，不是指完全相同的意思。也可以存在本领域技术人员能够允许的变化，例如约40％、约35％、约30％、约25％、约20％、约15％、约10％、约5％或约1％以下程度的变化。

实施例

(5.实施例)

以下记载本发明的实施例。以下实施例是为了加深对与本发明的权利要求范围相关的理解而记载的实施例，并非意图限定本发明的权利要求的范围。

(实施例1)

在岛根大学临床研究伦理委员会许可的情况下，采集被专业的精神科医生诊断为精神疾病发病危险状态(ARMS)患者和健全人的随时尿。受试者背景如下述表1所示。

【表1】

表1

(在男女比：费舍尔精确检验、年龄：T检验中检验均无显著性差异)

所采集的尿中的白蛋白、肌酸酐、胆红素氧化代谢物、皮质醇、κFLC和λFLC的量分别用如下所示的市售的检测试剂盒检测。检测按照各检测试剂盒的说明书进行。

【表2】

表2

与胆红素氧化代谢物有关的数据如下所示。

【表3】

表3

在T检验中检验*P＜0.05**P＜0.001

为了反应健全人和ARMS患者的肾脏功能，将各量用肌酸酐的量修正(相除)，并将该值进行比较。将结果示于下述表4。如表4所表明，在胆红素氧化代谢物、皮质醇、κFLC和λFLC的量观察到显著性差异。

【表4】

表4

在T检验中检验*P＜0.05**P＜0.001

对这些存在显著性差异的四个因子进行ROC曲线解析。在解析中使用统计软件EZR(EASY R)。将结果示于图1和下述表5。四因子均为AUC(AreaUnder the Curve：曲线下面积)0.7以上，作为ARMS的诊断方法示出良好的结果。其示出了胆红素氧化代谢物、皮质醇、κFLC和λFLC即使各自单独也能够作为ARMS诊断用生物标志物使用。

【表5】

表5

进一步地，通过逻辑回归分析对这些存在显著性差异的四个因子进行整合解析。在解析中使用统计软件EZR(EASYR)。结果示于图2和下述表6。对于胆红素氧化代谢物&皮质醇而言AUC为0.7以上，对于胆红素氧化代谢物&皮质醇&κFLC&λFLC、胆红素氧化代谢物&xFLC、胆红素氧化代谢物&λFLC、胆红素氧化代谢物&κFLC&λFLC而言，AUC为0.9以上。在所有情况下诊断准确率都高。也可知其中胆红素氧化代谢物与κFLC与λFLC的组合诊断准确率最高(AUC＝0.915)。

【表6】

表6

序列表自由文本

序列号：1表示κFLC的恒定区(来源于人类)的氨基酸序列。

序列号：2表示κFLC的抗原位点(来源于人类)的氨基酸序列。

序列号：3表示κFLC的抗原位点(来源于人类)的氨基酸序列。

序列号：4表示κFLC的恒定区(来源于大鼠)的氨基酸序列。

序列号：5表示κFLC的抗原位点(来源于大鼠)的氨基酸序列。

序列号：6表示λFLC的恒定区(来源于人类)的氨基酸序列。

序列表

<110> 锐思沃株式会社

<120> ARMS的诊断用生物标志物

<130> 0787002WO1

<160> 6

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 106

<212> PRT

<213> 智人

<400> 1

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln

1 5 10 15

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr

20 25 30

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser

35 40 45

Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr

50 55 60

Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys

65 70 75 80

His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro

85 90 95

Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

100 105

<210> 2

<211> 20

<212> PRT

<213> 智人

<400> 2

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

1 5 10 15

Thr Leu Thr Leu

20

<210> 3

<211> 21

<212> PRT

<213> 智人

<400> 3

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

1 5 10 15

Asn Arg Gly Glu Cys

20

<210> 4

<211> 106

<212> PRT

<213> 大鼠

<400> 4

Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Met Glu Gln

1 5 10 15

Leu Thr Ser Gly Gly Ala Thr Val Val Cys Phe Val Asn Asn Phe Tyr

20 25 30

Pro Arg Asp Ile Ser Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Gln Arg

35 40 45

Asp Gly Val Leu Asp Ser Val Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr

50 55 60

Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Ser Leu Thr Lys Val Glu Tyr Glu Arg

65 70 75 80

His Asn Leu Tyr Thr Cys Glu Val Val His Lys Thr Ser Ser Ser Pro

85 90 95

Val Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys

100 105

<210> 5

<211> 20

<212> PRT

<213> 大鼠

<400> 5

Ser Val Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu

20

<210> 6

<211> 94

<212> PRT

<213> 智人

<400> 6

Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln Ala

1 5 10 15

Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly Ala

20 25 30

Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly Val

35 40 45

Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala Ser

50 55 60

Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Lys Ser Tyr

65 70 75 80

Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr

85 90