一种防治植物寄生线虫病害的拜氏梭菌及其应用

技术领域

本发明属于微生物农药技术领域，特别涉及一种防治植物寄生线虫病害的拜氏梭菌及其应用。

背景技术

植物寄生线虫在世界上许多国家和地区发生和为害，种类多种多样。其中以大豆胞囊线虫病和根结线虫病对农作物的危害尤为严重。大豆胞囊线虫病（Soybean CystNematode，简称SCN）是由大豆胞囊线虫(

近20年来，随着可持续农业和有机农业的发展，人们已将防治线虫病害的工作重点转向了生物防治。生物农药是21世纪世界各国农业高新技术产业化的重点项目之一，是解决现代农业可持续发展问题的关键。其最大的优势在于能克服化学农药对生态环境的污染和减少在农副产品中农药残留量，使农业实现可持续发展，因此对植物寄生线虫的生物防治研究自然成为热点问题。生物防治对环境破坏小，一般只对靶标作用，不会造成对鸟、昆虫、鱼类或哺乳动物造成危害。微生物种类繁多，资源丰富，开发潜力巨大。因此，生物防治受到越来越多的关注。植物寄生线虫的生物防治主要应用真菌、细菌、放线菌等微生物或是其代谢产物及挥发性气体。

为了丰富杀线虫微生物菌种多样性，更好地防治植物寄生线虫病害，本发明提供了一株梭菌，易于繁殖，具有很强的环境适应性和环境友好性，采用发酵液种子包衣或者灌根处理即可一定程度解决植物寄生线虫病害问题。

发明内容

为了更好地防治植物寄生线虫病害，丰富杀线虫微生物菌种多样性，本发明的目的是提供一种防治植物寄生线虫病害的拜氏梭菌及其应用，不污染土壤环境，简化了植物寄生线虫病的防治方法，具有很好的发展和应用前景。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的，一种防治植物寄生线虫病害的拜氏梭菌及其应用

所述拜氏梭菌Sneb518，具有对植物寄生线虫病的防治作用,其分类命名为拜氏梭菌(

所述一种防治植物寄生线虫病害的拜氏梭菌及其应用方法包括以下步骤。

（1）液体发酵培养

将拜氏梭菌Sneb518的菌体接种到斜面培养基上以获得试管种，在将试管种种到液体培养基中形成发酵液或发酵液制品。

上述方案中，所述的斜面培养基配方为牛肉膏蛋白胨培养基，其成分包括：牛肉浸膏2.5-3.5g，蛋白胨4.5-5.5g，葡萄糖9.5-10.5g，琼脂17-20g，蒸馏水1000mL。

上述方案中，获得试管种的方法为：拜氏梭菌Sneb518的菌体接种到斜面培养基上，在27.5-28.5℃培养2.5-3.5d获得试管种。

上述方案中，以重量百分比计，葡萄糖1%-2%，蛋白胨0.5%-0.6%，牛肉膏0.3%-0.4%，酵母膏0.1%-0.2%，余下为蒸馏水，pH为7.0-7.2，发酵温度为27.5-28.5℃，摇床转速175-185r·min-1、发酵时间2.5-3.5d。

上述方案中，包含拜氏梭菌Sneb518或拜氏梭菌发酵液或发酵液制品。

（2）包衣处理

一种作物包衣处理剂，其技术要点是，包含权利要求1所述的拜氏梭菌Sneb518或权利要求3所述的拜氏梭菌发酵液或发酵液制品。上述拜氏梭菌发酵液或发酵液制品，按1：100的比例处理包衣大豆和番茄种子，晾干后，将处理过的大豆或番茄种子正常播种。

（3）灌根处理

一种蔬菜定植灌根剂,其技术要点是，包含拜氏梭菌Sneb518或拜氏梭菌发酵液或发酵液制品。在番茄或黄瓜植株定植期，采用上述拜氏梭菌稀释10×发酵液或发酵液的制成品灌根处理，每株植株灌根20mL。

本发明的有益效果是：该防治植物寄生线虫病害的拜氏梭菌及其应用，拜氏梭菌（

具体实施方式

使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。

实施例1：

本实施例采用的一种防治植物寄生线虫病害的拜氏梭菌，保藏编号是CGMCCNo.25009，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏时间为2022年6月6日，分类命名为拜氏梭菌（

拜氏梭菌Sneb518采用稀释分离法分离于北京东城区北河沿大街皇城遗址园大树根系土壤中。本发明采用细菌发酵液包衣处理大豆和蔬菜种子后播种于线虫病害病田中，病害发病期调查发现拜氏梭菌Sneb518或其代谢物具有抗大豆胞囊线虫病和蔬菜根结线虫病的作用，一定程度上解决大豆胞囊线虫病和蔬菜根结线虫病的防控问题。

本实施例中的防治植物寄生线虫病害的拜氏梭菌发酵液，其制备方法为：

将拜氏梭菌（

本实施例利用拜氏梭菌（

表1拜氏梭菌Sneb518发酵液对植物寄生线虫的触杀效果

由表1可知，随着时间的增加，Sneb518或其代谢物对大豆胞囊线虫的触杀由78%上升至90%，对蔬菜根结线虫的触杀由83%上升至92%，效果明显。

拜氏梭菌（

使用Sneb518发酵液或发酵液的制成品，按1：100 的比例处理包衣大豆和番茄种子，晾干后，将处理过的大豆或番茄种子正常播种，大豆或番茄种子萌发出苗时可以对大豆胞囊线虫病和蔬菜根结线虫病具有很好的防控效果，对大豆胞囊线虫病的抑制率达56.34%，对蔬菜根结线虫病防治效果达62.84%（见表2，表3）。

表2 Sneb518发酵液包衣处理对大豆胞囊线虫病的抑制率

表3 Sneb518发酵液处理对蔬菜根结线虫病防治效果

利用拜氏梭菌（

在番茄植株定植期，采用10mL拜氏梭菌（

实施例2：

本实施例与实施例1的区别在于：本实施例中的防治植物寄生线虫病害的拜氏梭菌发酵液，其制备方法为：

将拜氏梭菌（

本实施例利用拜氏梭菌（

表4拜氏梭菌Sneb518发酵液对植物寄生线虫的触杀效果

由表1可知，随着时间的增加，Sneb518或其代谢物对大豆胞囊线虫的触杀由80%上升至92%，对蔬菜根结线虫的触杀由82%上升至95%，效果明显。

拜氏梭菌（

使用Sneb518发酵液或发酵液的制成品，按1：70比例处理包衣大豆和番茄种子，晾干后，将处理过的大豆或番茄种子正常播种，大豆或番茄种子萌发出苗时可以对大豆胞囊线虫病和蔬菜根结线虫病具有很好的防控效果，对大豆胞囊线虫病的抑制率达53.14%，对蔬菜根结线虫病防治效果达60.64%（见表5，表6）。

表5 Sneb518发酵液包衣处理种子对大豆胞囊线虫病的抑制率

表6 Sneb518发酵液包衣处理种子对蔬菜根结线虫病防治效果

利用拜氏梭菌（

在番茄植株定植期，采用20mL拜氏梭菌（

实施例3：

本实施例与实施例1的区别在于：本实施例中的防治植物寄生线虫病害的拜氏梭菌发酵液，其制备方法为：

将拜氏梭菌（

本实施例利用拜氏梭菌（

表7拜氏梭菌Sneb518发酵液对植物寄生线虫的触杀效果

由表1可知，随着时间的增加，Sneb518或其代谢物对大豆胞囊线虫的触杀由76%上升至93%，对蔬菜根结线虫的触杀由79%上升至90%，效果明显。

拜氏梭菌（

使用Sneb518发酵液或发酵液的制成品，按1：100的比例处理包衣大豆和番茄种子，晾干后，将处理过的大豆或番茄种子正常播种，大豆或番茄种子萌发出苗时可以对大豆胞囊线虫病和蔬菜根结线虫病具有很好的防控效果，对大豆胞囊线虫病的抑制率达57.36%，对蔬菜根结线虫病防治效果达60.76%（见表8，表9）。

表8 Sneb518发酵液包衣处理对大豆胞囊线虫病的抑制率

表9 Sneb518发酵液处理对蔬菜根结线虫病防治效果

利用拜氏梭菌（

在番茄植株定植期，采用100mL拜氏梭菌（

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。