胃肠外营养制剂

技术领域

本公开涉及胃肠外营养制剂，包括即用三元胃肠外营养制剂。更具体地，本公开涉及脂质制剂以及容纳脂质制剂、碳水化合物制剂和氨基酸制剂的多腔室容器，特别是用于儿科患者。

背景技术

医用儿科营养溶液需要考虑到早产儿、新生儿、婴儿、儿童和青少年的需求来配制。早产儿缺乏实质性能量和脂肪储备，例如，使得通过胃肠外营养提供适当的脂质摄入变得重要。已经发现，脂质，特别是长链多不饱和脂肪酸，参与生长、视觉发育、神经发育和长期健康等功能。

二十二碳六烯酸(DHA)(C22:6n-3)是从α-亚麻酸(ALA)合成的长链多不饱和脂肪酸。DHA是脑和眼睛视网膜中细胞膜的主要结构脂质，并且是心脏的关键组分。虽然使用胃肠外营养与肝脏疾病(例如肝衰竭、肝性脂肪变性、肝硬化)相关，但发现DHA对肝性脂肪变性具有有益的影响。

花生四烯酸(ARA)(C20:4n-6)是通过从亚油酸(LA)生物合成而形成的长链多不饱和脂肪酸。ARA是脑中最丰富的脂肪酸，在此它在细胞分裂、信号传导和许多基本细胞功能中发挥重要作用。

因此，需要一种针对包括早产儿、新生儿、婴儿、儿童和青少年在内的儿科患者的改良的胃肠外营养产品，所述儿科患者在口服营养和肠内营养不可能、不充分或禁忌时需要胃肠外营养。

发明内容

根据本文的公开内容，并且不以任何方式限制本发明的范围，在本公开的第一方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，一种用于胃肠外施用的多腔室容器包含存在于第一腔室中的碳水化合物制剂、存在于第二腔室中的氨基酸制剂以及存在于第三腔室中的脂质制剂。所述脂质制剂具有水相和油相，包含基于脂质制剂总重量的约5重量％至约35重量％的油相，并以水包油乳液的形式存在。此外，所述油相包含从单一细胞来源获得的二十二碳六烯酸(DHA)，所述单一细胞来源是微藻的提取物。在所述油相中，DHA存在的浓度为0.1-5.0克/100克油相。所述脂质制剂包含约70毫克或更少的植物甾醇/100克油相，并且基本不含水溶性形式的胆碱和/或花生四烯酸(ARA)。

在本公开的第二方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，DHA存在的浓度为0.25-3.0克/100克油相。

在本公开的第三方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，DHA存在的浓度为1.5-2.5克/100克油相。

在本公开的第四方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，DHA以甘油三酯形式或乙酯形式存在，优选以甘油三酯形式存在。

在本公开的第五方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含二十碳五烯酸(EPA)并且所述脂质制剂中DHA与EPA的比率为10:1至1000:1(w/w)。

在本公开的第六方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含EPA并且所述脂质制剂中DHA与EPA的比率为10:1至200:1。

在本公开的第七方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含EPA并且所述脂质制剂中DHA与EPA的比率为20:1至150:1。

在本公开的第八方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，DHA和/或EPA以甘油三酯形式或乙酯形式存在，优选以甘油三酯形式存在。

在本公开的第九方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂基本不含EPA。

在本公开的第十方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述微藻是寇氏隐甲藻(Crypthecodinium cohnii)或裂殖壶菌(Schizochytriumsp)，优选裂殖壶菌。

在本公开的第十一方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含约15毫克至约35毫克植物甾醇/100克油相，并且在一个优选实施方式中，约25毫克或更少的植物甾醇/100g油相。

在本公开的第十二方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含一种或多种选自磷脂、油酸盐及其组合的可药用表面活性剂。

在本公开的第十三方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述磷脂选自蛋磷脂和大豆卵磷脂。

在本公开的第十四方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含一种或多种可药用的等渗剂。

在本公开的第十五方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述可药用的等渗剂是甘油。

在本公开的第十六方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含一种或多种选自生育酚、抗坏血酸棕榈酸酯及其组合的可药用抗氧化剂。

在本公开的第十七方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂的pH在约6至约9的范围内，并且在一个优选实施方式中，在约7至约8的范围内。

在本公开的第十八方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述碳水化合物制剂和/或所述氨基酸制剂包含至少一种水溶性形式的胆碱，所述胆碱选自氯化胆碱、酒石酸氢胆碱、柠檬酸胆碱、葡萄糖酸胆碱、苹果酸胆碱、胆碱胞苷二磷酸胆碱(CDP)盐和甘油磷酸胆碱，优选甘油磷酸胆碱。

在本公开的第十九方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述至少一种胆碱存在的浓度为20毫克至2000毫克胆碱当量/升重构的多腔室容器，例如30毫克至1000毫克胆碱当量/升重构的多腔室容器。

在本公开的第二十方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，一种治疗当口服营养和肠内营养不可能、不充分或禁忌时需要胃肠外营养的患者的方法，包括胃肠外施用包含脂质制剂的多腔室容器的内容物。所述脂质制剂具有水相和油相，包含基于脂质制剂总重量的约5重量％至约35重量％的油相，并以水包油乳液的形式存在。此外，所述油相包含从单一细胞来源获得的二十二碳六烯酸(DHA)，所述单一细胞来源是微藻的提取物。在所述油相中，DHA存在的浓度为0.1-5.0克/100克油相。所述脂质制剂包含约70毫克或更少的植物甾醇/100克油相，并且基本不含水溶性形式的胆碱和/或花生四烯酸(ARA)。

在本公开的第二十一方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述患者是儿科患者。

在本公开的第二十二方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，一种用于胃肠外施用的脂质制剂包含水相和油相。所述脂质制剂包含基于脂质制剂总重量的约5重量％至约35重量％的油相，并以水包油乳液的形式存在。此外，所述水相包含至少一种可药用的水溶性形式的胆碱。所述油相包含二十二碳六烯酸(DHA)。所述脂质制剂包含约70毫克或更少的植物甾醇/100克油相，并且基本不含花生四烯酸(ARA)。

在本公开的第二十三方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述DHA是从单一细胞来源获得的，所述单一细胞来源是微藻的提取物。

在本公开的第二十四方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述微藻是寇氏隐甲藻或裂殖壶菌，优选裂殖壶菌。

在本公开的第二十五方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，DHA存在的浓度为0.25-3.0克/100克油相。

在本公开的第二十六方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，DHA存在的浓度为1.5-2.5克/100克油相。

在本公开的第二十七方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，DHA以甘油三酯形式或乙酯形式存在，优选以甘油三酯形式存在。

在本公开的第二十八方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含二十碳五烯酸(EPA)，并且所述脂质制剂中DHA与EPA的比率为10:1至1000:1(w/w)。

在本公开的第二十九方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含EPA，并且所述脂质制剂中DHA与EPA的比率为10:1至200:1(w/w)。

在本公开的第三十方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含EPA，并且所述脂质制剂中DHA与EPA的比率为20:1至150:1(w/w)。

在本公开的第三十一方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，DHA和/或EPA以甘油三酯形式或乙酯形式存在，优选以甘油三酯形式存在。

在本公开的第三十二方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂基本不含EPA。

在本公开的第三十三方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含15毫克至35毫克植物甾醇/100克油相，并且在一个优选实施方式中，包含约25毫克或更少的植物甾醇/100克油相。

在本公开的第三十四方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含一种或多种选自磷脂、油酸盐及其组合的可药用表面活性剂。

在本公开的第三十五方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述磷脂选自蛋磷脂和大豆卵磷脂。

在本公开的第三十六方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含一种或多种可药用的等渗剂。

在本公开的第三十七方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述可药用的等渗剂是甘油。

在本公开的第三十八方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含一种或多种选自生育酚、抗坏血酸棕榈酸酯及其组合的可药用抗氧化剂。

在本公开的第三十九方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂的pH在约6至约9的范围内，并且在一个优选实施方式中，在约7至约8的范围内。

在本公开的第四十方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述至少一种胆碱选自氯化胆碱、酒石酸氢胆碱、柠檬酸胆碱、葡萄糖酸胆碱、苹果酸胆碱、胆碱胞苷二磷酸胆碱(CDP)盐和甘油磷酸胆碱，优选甘油磷酸胆碱。

在本公开的第四十一方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述至少一种胆碱存在的浓度为0.1克至12克胆碱当量/升脂质乳液，例如，0.2克至10克胆碱当量/升脂质乳液、3克至6克胆碱当量/升脂质乳液、0.5克至4克胆碱当量/升脂质乳液、0.1克至0.5克胆碱当量/升脂质乳液、0.5克至1克胆碱当量/升脂质乳液、1克至2克胆碱当量/升脂质乳液、2克至3克胆碱当量/升脂质乳液、3克至4克胆碱当量/升脂质乳液、4克至5克胆碱当量/升脂质乳液、5克至6克胆碱当量/升脂质乳液、6克至7克胆碱当量/升脂质乳液、7克至8克胆碱当量/升脂质乳液、8克至9克胆碱当量/升脂质乳液、9克至10克胆碱当量/升脂质乳液、10克至11克胆碱当量/升脂质乳液、和/或11克至12克胆碱当量/升脂质乳液。

在本公开的第四十二方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述至少一种胆碱存在的浓度为0.2克至10克胆碱当量/升脂质乳液。

在本公开的第四十三方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述至少一种胆碱存在的浓度为3克至6克胆碱当量/升脂质乳液。

在本公开的第四十四方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，一种治疗当口服营养和肠内营养不可能、不充分或禁忌时需要胃肠外营养的患者的方法，包括胃肠外施用脂质制剂。所述脂质制剂包含水相和基于脂质制剂总重量的约5重量％至约35重量％的油相，并以水包油乳液的形式存在。此外，所述水相包含至少一种可药用的水溶性形式的胆碱。所述油相包含二十二碳六烯酸(DHA)。所述脂质制剂包含约70毫克或更少的植物甾醇/100克油相，并且基本不含花生四烯酸(ARA)。

在本公开的第四十五方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述患者是儿科患者。

在本公开的第四十六方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，一种用于胃肠外施用的多腔室容器包含存在于第一腔室中的碳水化合物制剂、存在于第二腔室中的氨基酸制剂和存在于第三腔室中的脂质制剂。所述脂质制剂包含水相和基于脂质制剂总重量的约5重量％至约35重量％的油相，并以水包油乳液的形式存在。此外，所述水相包含至少一种可药用的水溶性形式的胆碱。所述油相包含二十二碳六烯酸(DHA)。所述脂质制剂包含约70毫克或更少的植物甾醇/100克油相，并且基本不含花生四烯酸(ARA)。

在本公开的第四十七方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，一种用于胃肠外施用的脂质制剂包含水相和油相。所述脂质制剂包含基于脂质制剂总重量的约5重量％至约35重量％的油相，并以水包油乳液的形式存在。此外，所述水相包含至少一种可药用的水溶性形式的胆碱。所述油相包含二十二碳六烯酸(DHA)和花生四烯酸(ARA)，并且所述脂质制剂中DHA与ARA的比率为10:1至1:5(w/w)。所述脂质制剂包含约70毫克或更少的植物甾醇/100克油相。

在本公开的第四十八方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂中DHA与ARA的比率为1:1至1:3(w/w)。

在本公开的第四十九方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，DHA从单一细胞来源获得，其中所述单一来源是微藻的提取物。

在本公开的第五十方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述微藻是寇氏隐甲藻或裂殖壶菌，优选裂殖壶菌。

在本公开的第五十一方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，ARA从单一细胞来源获得，其中所述细胞来源是真菌。

在本公开的第五十二方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述真菌是高山被孢霉(Mortierella alpina)。

在本公开的第五十三方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，DHA和/或ARA以甘油三酯形式或乙酯形式存在，优选以甘油三酯形式存在。

在本公开的第五十四方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，ARA存在的浓度范围为0.1克至15克/100克油相。

在本公开的第五十五方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，ARA存在的浓度范围为1.5克至7.5克/100克油相。

在本公开的第五十六方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，DHA存在的浓度为0.25克至3.0克/100g油相。

在本公开的第五十七方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，DHA存在的浓度为1.5克至2.5克/100g油相。

在本公开的第五十八方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含EPA，并且其中所述脂质制剂中DHA与EPA的比率为10:1至1000:1(w/w)。

在本公开的第五十九方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含EPA，并且所述脂质制剂中DHA与EPA的比率为10:1至200:1(w/w)。

在本公开的第六十方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含EPA，并且所述脂质制剂中DHA与EPA的比率为20:1至150:1(w/w)。

在本公开的第六十一方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，DHA和/或EPA以甘油三酯形式或乙酯形式存在，优选以甘油三酯形式存在。

在本公开的第六十二方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂基本不含EPA。

在本公开的第六十三方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含15毫克至35毫克植物甾醇/100克油相，并且在一个优选实施方式中，包含约25毫克或更少的植物甾醇/100克油相。

在本公开的第六十四方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含一种或多种选自磷脂、油酸盐及其组合的可药用表面活性剂。

在本公开的第六十五方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述磷脂选自蛋磷脂和大豆卵磷脂。

在本公开的第六十六方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含一种或多种可药用的等渗剂。

在本公开的第六十七方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述可药用的等渗剂是甘油。

在本公开的第六十八方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂包含一种或多种选自生育酚、抗坏血酸棕榈酸酯及其组合的可药用抗氧化剂。

在本公开的第六十九方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述脂质制剂的pH在约6至约9的范围内，并且在一个优选实施方式中，在约7至约8的范围内。

在本公开的第七十方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述至少一种水溶性形式的胆碱选自氯化胆碱、酒石酸氢胆碱、柠檬酸胆碱、葡萄糖酸胆碱、苹果酸胆碱、胆碱胞苷二磷酸胆碱(CDP)盐和甘油磷酸胆碱。

在本公开的第七十一方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述至少一种胆碱存在的浓度为0.1克至12克胆碱当量/升脂质乳液，例如，0.2克至10克胆碱当量/升脂质乳液、3克至6克胆碱当量/升脂质乳液、0.5克至4克胆碱当量/升脂质乳液、0.1克至0.5克胆碱当量/升脂质乳液、0.5克至1克胆碱当量/升脂质乳液、1克至2克胆碱当量/升脂质乳液、2克至3克胆碱当量/升脂质乳液、3克至4克胆碱当量/升脂质乳液、4克至5克胆碱当量/升脂质乳液、5克至6克胆碱当量/升脂质乳液、6克至7克胆碱当量/升脂质乳液、7克至8克胆碱当量/升脂质乳液、8克至9克胆碱当量/升脂质乳液、9克至10克胆碱当量/升脂质乳液、10克至11克胆碱当量/升脂质乳液、和/或11克至12克胆碱当量/升脂质乳液。

在本公开的第七十二方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述至少一种胆碱存在的浓度为0.2克至10克胆碱当量/升脂质乳液。

在本公开的第七十三方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述至少一种胆碱存在的浓度为3克至6克胆碱当量/升脂质乳液。

在本公开的第七十四方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，所述胆碱存在的浓度为0.5克至4克胆碱当量/升脂质乳液。

在本公开的第七十五方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，一种治疗当口服营养和肠内营养不可能、不充分或禁忌时需要胃肠外营养的儿科患者的方法，包括胃肠外施用脂质制剂。所述脂质制剂包含水相和基于脂质制剂总重量的约5重量％至约35重量％的油相，并以水包油乳液的形式存在。此外，所述水相包含至少一种可药用的水溶性形式的胆碱。所述油相包含二十二碳六烯酸(DHA)和花生四烯酸(ARA)，并且所述脂质制剂中DHA与ARA的比率为10:1至1:5(w/w)。所述脂质制剂包含约70毫克或更少的植物甾醇/100克油相。

在本公开的第七十六方面(除非另有说明，该方面可以与本文所列的任何其它方面组合)，一种用于胃肠外施用的多腔室容器包含存在于第一腔室中的碳水化合物制剂、存在于第二腔室中的氨基酸制剂和存在于第三腔室中的脂质制剂。所述脂质制剂包含水相和基于脂质制剂总重量的约5重量％至约35重量％的油相，并以水包油乳液的形式存在。此外，所述水相包含至少一种可药用的水溶性形式的胆碱。所述油相包含二十二碳六烯酸(DHA)和花生四烯酸(ARA)，并且所述脂质制剂中DHA与ARA的比率为10:1至1:5(w/w)。所述脂质制剂包含约70毫克或更少的植物甾醇/100克油相。

根据本文阐述的公开内容和方面，因此本公开的优点是提供一种更好地满足儿科患者需求的胃肠外营养制剂。

本公开的另一个优点是提供了对视觉、躯体和/或神经发育的有益影响。

本公开的一个进一步的优点是减少胃肠外营养相关的肝病(PNALD)，其与肝衰竭、肝性脂肪变性和肝硬化有关。

本公开的又一个优点是减少非酒精性脂肪肝病(NAFLD)。

本公开的又一个进一步的优点是减少慢性肝病。

本公开的还一个进一步的优点是贫化植物甾醇。

所公开的制剂的其它特征和优点在下面的详细描述和附图中进行描述，并且将从中显而易见。本文描述的特征和优点不是包括一切的，并且特别地，鉴于附图和描述，许多其他特征和优点对于本领域的普通技术人员将是显而易见的。另外，任何特定的实施方式不一定必须具有本文列出的所有优点。而且，应注意，说明书中使用的语言主要是出于易读性和指导性目的而选择的，并不是为了限制本发明主题的范围。

附图说明

应当理解，附图仅描绘本发明的典型实施方式，而不应被认为限制本公开的范围，通过使用附图，以追加的具体性和细节对本公开进行描述和解释。

发明详述

本文所述的某些实施方式总体上涉及胃肠外营养领域。更特别地，本文所述的一些实施方式涉及用于胃肠外施用的脂质制剂，其中所述脂质制剂包含水相和油相，并且所述脂质制剂以水包油乳液的形式存在。本文所述的相关实施方式涉及用于胃肠外施用的多腔室容器，其中所述容器包含在第一腔室中的碳水化合物制剂、在第二腔室中的氨基酸制剂和在第三腔室中的脂质制剂。

如本文所用的术语“儿科的”可以指最多一个月大的新生儿，包括早产、足月和逾期分娩的新生儿；一个月和一岁之间的婴儿；一岁和最多12岁之间的儿童，以及13和最多21岁之间的青少年。

如本文所用的术语“长链多不饱和脂肪酸”可以指在分子的脂肪酸部分(即，该分子中除外任何形成酯部分的碳原子的部分)中具有至少18个碳原子的多不饱和脂肪酸，例如，分子的脂肪酸部分中至少20个碳原子、至少22个碳原子、或至少24个碳原子。

如本文所用的术语“基本不含”可以指组合物含有不超过5％的指定组分，例如，不超过3％、不超过2％、不超过1％、不超过0.5％、不超过0.1％、不超过0.05％、不超过0.02％、不超过0.01％、不超过0.005％、不超过0.002％、和/或不超过0.001％的指定组分。例如，“基本不含EPA”的组合物可以指含有不超过5％EPA的组合物，例如不超过3％、不超过2％、不超过1％、不超过0.5％、不超过0.1％、不超过0.05％、不超过0.02％、不超过0.01％、不超过0.005％、不超过0.002％、和/或不超过0.001％EPA。

表述“肝病”、“肝损伤”和“肝损害”在本文中可互换使用。该表述是指由丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性增加、组织学确定的空泡形成以及肝重对体重的比率增加来定义的肝脏状况。具体地，该表述是指可以借助于上述标志诊断的肝性脂肪变性。更具体地，它们是指NAFLD。更加具体地，它们是指由胆碱缺乏症、尤其是长期全胃肠外营养引起的胆碱缺乏症所导致的NAFLD。

脂质制剂

本公开提供了用于胃肠外施用的脂质制剂。本文公开的脂质制剂包含水相和油相，并且以水包油乳液的形式存在。通常，所述脂质制剂包含水相和基于脂质制剂总重量的约5重量％至约35重量％的油相。例如，基于脂质制剂的总重量，所述脂质制剂的油相的存在量为约10至约20重量％、约10至约15重量％、约15至约20重量％、约12至约17重量％、约11重量％、约12重量％、约13重量％、约14重量％、约15重量％、约16重量％、约17重量％、约18重量％、和/或约19重量％。

所述脂质制剂的水相包含水。在一些情况下，所述脂质制剂的水相包含至少一种水溶性形式的胆碱。如本文所用的“水溶性形式的胆碱”是指(1)含有N,N,N-三甲基乙醇铵阳离子的水溶性盐和(2)含有胆碱部分的水溶性化合物，例如胞苷二磷酸胆碱或甘油磷酸胆碱。所述水溶性形式的胆碱可以选自氯化胆碱、酒石酸氢胆碱、柠檬酸胆碱、葡萄糖酸胆碱、苹果酸胆碱、胆碱胞苷二磷酸胆碱(CDP)盐(例如钠盐、钾盐或内盐)、和甘油磷酸胆碱。在一个优选的实施方式中，所述水溶性形式的胆碱存在的浓度为0.1克至12克胆碱当量/升脂质乳液，例如，0.2克至10克胆碱当量/升脂质乳液、3克至6克胆碱当量/升脂质乳液、0.5克至4克胆碱当量/升脂质乳液、0.1克至0.5克胆碱当量/升脂质乳液、0.5克至1克胆碱当量/升脂质乳液、1克至2克胆碱当量/升脂质乳液、2克至3克胆碱当量/升脂质乳液、3克至4克胆碱当量/升脂质乳液、4克至5克胆碱当量/升脂质乳液、5克至6克胆碱当量/升脂质乳液、6克至7克胆碱当量/升脂质乳液、7克至8克胆碱当量/升脂质乳液、8克至9克胆碱当量/升脂质乳液、9克至10克胆碱当量/升脂质乳液、10克至11克胆碱当量/升脂质乳液、和/或11克至12克胆碱当量/升脂质乳液。在一个进一步优选的实施方式中，所述水溶性形式的胆碱是甘油磷酸胆碱，其浓度为0.1克至15.0克/升脂质乳液，例如，0.1克至6.0克/升脂质乳液、0.1克至2.0克/升脂质乳液、0.2克至0.9克/升脂质乳液、0.5克至6.0克/升脂质乳液、0.5克至5.0克/升脂质乳液、0.5克至4.0克/升脂质乳液、0.5克至3.0克/升脂质乳液、1.0克至12.0克/升脂质乳液、1.0克至10.0克/升脂质乳液、1.0克至5.0克/升脂质乳液、2.0克至12.0克/升脂质乳液、2.0克至9.0克/升脂质乳液、2.0克至4.0克/升脂质乳液、4.0克至11.0克/升脂质乳液、4.0克至10.0克/升脂质乳液、或5.0克至12.0克/升脂质乳液。

所述脂质制剂的油相包含多不饱和脂肪酸，例如长链多不饱和脂肪酸，其可以作为游离酸、作为游离酸的离子化或盐形式和/或以酯形式存在。所述多不饱和脂肪酸/长链多不饱和脂肪酸的合适的酯包括但不限于烷基酯(例如，甲酯、乙酯、丙酯或其组合)和甘油三酯。在一些情况下，所述长链多不饱和脂肪酸具有结构R(C＝O)OR’，其中R是具有至少17个碳原子、至少19个碳原子、至少21个碳原子或至少23个碳原子的烯基基团，并且R’是不存在、H、抗衡离子、烷基基团(例如甲基、乙基或丙基)或甘油基基团(例如，R(C＝O)OR’是甘油一酯、甘油二酯或甘油三酯)。用于本文公开的脂质制剂中的多不饱和脂肪酸包括但不限于亚油酸(LA)、花生四烯酸(ARA)、α-亚麻酸(ALA)、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、十八碳四烯酸(SDA)、γ-亚麻酸(GLA)、二高-γ-亚麻酸(DPA)和二十二碳五烯酸(DPA)，特别是DHA、ARA和EPA，其各自都可以游离酸形式、离子化或盐形式、烷基酯形式和/或甘油三酯形式存在。在一些情况下，所述多不饱和脂肪酸和/或长链脂肪酸以甘油三酯形式存在。

在一些情况下，用于所述脂质制剂的多不饱和脂肪酸(例如长链多不饱和脂肪酸)从单一来源获得。在一些情况下，所述单一来源是微藻的提取物。合适的微藻来源包括但不限于寇氏隐甲藻和和裂殖壶菌。在一些情况下，寇氏隐甲藻和和裂殖壶菌是长链多不饱和脂肪酸DHA的单一来源。在一些情况下，从裂殖壶菌分离的油中DHA的量将为约250至约700毫克/克油，例如约300至约600毫克/克油、约350至约550毫克/克油、和/或约400至约500毫克/克油。

当所述脂质制剂包括裂殖壶菌作为多不饱和脂肪酸的单一来源，则所述脂质制剂中包含的DHA的量相对大于EPA或ARA。例如，当裂殖壶菌是所述脂质制剂中多不饱和脂肪酸的单一来源时，所述脂质制剂中DHA与EPA的比率通常为至少10:1(w/w)，例如，约10:1至约1000:1(w/w)、约20:1至约1000:1(w/w)、约50:1至约1000:1(w/w)、约100:1至约1000:1(w/w)、约10:1至约200:1(w/w)、约20:1至约150:1(w/w)、至少约50:1(w/w)、至少约100:1(w/w)、至少约500:1(w/w)、和/或至少约1000:1(w/w)。此外，当裂殖壶菌是所述脂质制剂中多不饱和脂肪酸的单一来源时，所述脂质制剂中DHA与ARA的比率通常为至少20:1(w/w)，例如，约20:1至约1000:1(w/w)、约50:1至约1000:1(w/w)、约100:1至约1000:1(w/w)、至少约50:1(w/w)、至少约100:1(w/w)、至少约500:1(w/w)、和/或至少约1000:1(w/w)。

在一些情况下，所述油相包含从单细胞源获得的DHA，其中所述单一来源是微藻的提取物。在一些情况下，DHA存在的浓度为0.1-5.0克/100克油相，例如，0.25-3.0克/100克油相和/或1.5-2.5克/100克油相。在一些情况下，所述脂质制剂包含二十碳五烯酸(EPA)，并且所述脂质制剂中DHA与EPA的比率为10:1至1000:1(w/w)，例如，10:1至200:1(w/w)和/或20:1至150:1(w/w)。

在一些情况下，所述脂质制剂基本不含EPA。

在一些情况下，所述脂质制剂基本不含水溶性形式的胆碱，例如含有N,N,N-三甲基乙醇铵阳离子的水溶性盐和/或含有胆碱部分的水溶性化合物。

在一些情况下，所述脂质制剂基本不含ARA。

在一些情况下，所述油相包含源自于裂殖壶菌微藻和高山被孢霉真菌的油的掺合物。这样的掺合物中的油包括但不限于肉豆蔻酸(C14:0)、棕榈酸(C16:0)、棕榈油酸(C16:1)、硬脂酸(C18:0)、油酸(C18:1)、亚油酸(C18:2n-6)、γ-亚麻酸(C18:3，n-6)、α-亚麻酸(C18:3，n-3)、花生酸(C20:0)、ARA(C20:4，n-6)、EPA(C20:5，n-3)、山嵛酸(C22:0)、DPA(C22:5，n-3)、DHA(C22:6，n-3)、和木蜡酸(C24:0)。在一些情况下，所述掺合物包含ARA、DHA和EPA。

在一些情况下，所述脂质制剂中包含ARA。当将ARA添加到所述脂质制剂中时，所述制剂所含的ARA的量通常大于当裂殖壶菌是所述脂质制剂中多不饱和脂肪酸的单一来源时的量。在一些情况下，所述脂质制剂中DHA与ARA的比率为约10:1至约1:5(w/w)，例如，约5:1至约1:5(w/w)、约3:1to 1:3(w/w)、约1:1至约1:3(w/w)、约1:1.5至约1:2.5(w/w)，比如约1:2(w/w)。此外，当ARA添加到所述脂质制剂中时，所述脂质制剂中DHA与EPA的比率为至少10:1(w/w)，例如约10:1至约1000:1(w/w)、约20:1至约1000:1(w/w)、约50:1至约1000:1(w/w)、约100:1至约1000:1(w/w)、约10:1至约200:1(w/w)、约20:1至约150:1(w/w)、至少约50:1(w/w)、至少约100:1(w/w)、至少约500:1(w/w)、和/或至少约1000:1(w/w)。

在一些情况下，所述油相包含从单一细胞来源获得的ARA，其中所述单一细胞来源是真菌，例如真菌的提取物。在一个优选的实施方式中，所述真菌是高山被孢霉。在一些情况下，ARA存在的浓度为0.1克至15克/100克油相，例如，1.5克至7.5克/100克油相。

本文公开的脂质制剂通常包含降低的植物甾醇水平。特别是，用于所述脂质制剂中的油已经贫化了植物甾醇，通常贫化了所述油中最初存在的植物甾醇总量的至少25％的量，例如，贫化了至少40％、至少50％、至少60％和/或至少75％。在一些情况下，所述脂质制剂包含70毫克或更少的植物甾醇/100克油相，例如，约15毫克至约35毫克植物甾醇/100克油相、和/或约25毫克或更少的植物甾醇/100克油相。植物甾醇的去除或贫化可以通过例如短程蒸馏、活性炭处理继以过滤、超临界CO

本文公开的脂质制剂可进一步包含饱和、单不饱和和多不饱和的脂肪酸。在一些情况下，这些脂肪酸存在的浓度为95克至99.1克/100克油相，例如，97克至99.75/100克油相、和/或97.5克至98.5克/100克油相。在一些情况下，这些脂肪酸可从动物和/或植物来源获得。在一些情况下，这些脂肪酸可主要作为甘油三酯存在。

本文公开的脂质制剂可进一步包含另外的组分，例如表面活性剂(也称为乳化剂)、助表面活性剂、等渗剂、pH调节剂和抗氧化剂。一般而言，添加表面活性剂以通过降低油相和水相之间的界面张力来稳定乳液。表面活性剂通常包括疏水性部分和亲水性部分，并且所述制剂中包含的表面活性剂/乳化剂的量是基于达到期望的乳液稳定水平所需的量来确定的。通常，所述脂质制剂中表面活性剂的量为基于脂质制剂总重量的约0.01至约3重量％，例如、约0.01至约2.5重量％、约0.01至约2.3重量％、约0.02至约2.2重量％、约0.02至约2.1重量％、约0.02至约2重量％、约0.05至约1.8重量％、约0.1至约1.6重量％、约0.5至约1.5重量％、约0.8至约1.4重量％、约0.9至约1.3重量％、约1至约1.2重量％、和/或约1.2重量％。合适的表面活性剂和助表面活性剂包括经批准用于胃肠外使用的表面活性剂，并包括但不限于磷脂(例如蛋磷脂和大豆卵磷脂)、油酸盐及其组合。示例性的表面活性剂是卵磷脂，包括天然和合成卵磷脂，例如源自于蛋、玉米或大豆或其混合物的卵磷脂。在一些情况下，包含的卵磷脂的量为基于脂质制剂总重量的约1.2％。在一些情况下，所述脂质乳液制剂包含助表面活性剂。通常，所述脂质制剂中助表面活性剂的量少于表面活性剂的量，并且通常所述制剂中助表面活性剂的量为基于脂质制剂总重量的约0.001至约0.6重量％，例如，约0.001％至约0.55％、约0.001％至约0.525％、约0.001％至约0.5％、约0.005％至约0.5％、约0.01％至约0.4％、约0.02％至约0.3％、约0.03％至约0.2％、约0.04％至约0.1％、和/或约0.05％至约0.08％。示例性的助表面活性剂是油酸盐，例如油酸钠。在一些情况下，所述脂质制剂包含卵磷脂和油酸盐作为表面活性剂和助表面活性剂，例如，以1.2％卵磷脂和0.03％油酸盐的量。在一些情况下，包含的油酸钠的量为基于脂质制剂总重量的约0.03重量％。

等渗剂可以添加到所述脂质制剂中以将所述脂质乳液制剂的渗透克分子浓度调节至期望的水平，例如生理可接受的水平。合适的等渗剂包括但不限于甘油。通常，所述脂质乳液制剂的渗透克分子浓度为约180至约300毫渗克分子/升，例如约190至约280毫渗克分子/升、和/或约200至约250毫渗克分子/升。在一些情况下，所述脂质乳液制剂包含的等渗剂的量为基于脂质制剂总重量的约1至约10重量％，例如约1％至约5％、约1％至约4％、和/或约2％至约3％。在一些情况下，所述脂质乳液制剂包含约2至约3％重量％的甘油。

PH调节剂可以添加到所述脂质制剂中，以将pH调节到期望的水平，例如用于胃肠外使用的生理可接受的pH。合适的pH调节剂包括但不限于氢氧化钠和盐酸。通常，所述脂质乳液制剂的pH为约6至约9，例如约6.1至约8.9、约6.2至约8.8、约6.3至约8.7、约6.4至约8.6、约6.5至约8.5、约6.6至约8.4、约6.7至约8.3、约6.8至约8.2、约6.9至约8.1、约7至约8、约7.1至约7.9、约7.2至约7.8、约7.3至约7.7、约7.4至约7.6、约7、约7.5、和/或约8。

所述脂质制剂可进一步包含抗氧化剂。合适的抗氧化剂可以是可药用的抗氧化剂，并包括但不限于生育酚(例如，γ-生育酚，δ-生育酚，α-生育酚)、抗坏血酸棕榈酸酯或其组合。在一些情况下，所述脂质乳液制剂包含的抗氧化剂的量为约0至约200mg/L，例如，约10至约200mg/L、约40至约150mg/L、约50至约120mg/L、约75至约100mg/L的抗氧化剂，例如维生素E。

所有静脉内脂质乳液的水性相(或水相)必须符合使其适合注射的药典要求，即，水必须是无菌注射用水。

本公开还包括如下所述的脂质乳液，其中如果存在胆碱源(例如GPC)的话，在向患者施用之前，通过医用端口向即用脂质乳液或重构溶液例如添加所述胆碱源。所述胆碱源(例如GPC)可以按合适的溶液形式提供，例如在小瓶或合适的软质或硬质容器中的，或者可以按冻干形式提供，例如在玻璃小瓶中的，其中将所述冻干的胆碱源(例如GPC)溶解在合适的溶剂中，然后将其添加到脂质乳液或重构溶液中。所述胆碱源(例如GPC)可以在这类用于添加至脂质乳液或重构溶液中的溶液或冻干物中作为单一活性组分存在，或可以与至少一种其它活性成分例如维生素、微量元素、DHA、EPA和/或ARA组合存在。因此，根据本发明的另一个实施方式，提供了一种向患者提供胆碱源(例如GPC)的方法，其中在施用前将所述胆碱源(例如GPC)添加到来自MCB的即用脂质乳液或重构溶液中，提供胃肠外营养制剂。

本公开的第一脂质制剂包含含有从单一细胞来源获得的二十二碳六烯酸(DHA)的油相，其中所述单一细胞来源是微藻的提取物并且其中DHA以0.1-5.0克/100克油相的浓度存在。此外，为所述第一脂质制剂提供的油已经贫化了植物甾醇，使得所述脂质制剂包含约70毫克或更少的植物甾醇/100克油相。另外，所述第一脂质制剂基本不含水溶性形式的胆碱和/或花生四烯酸(ARA)。如本文中更详细地讨论的，所述第一脂质制剂包含水相和基于脂质制剂总重量的约5重量％至约35重量％的油相，并且所述脂质制剂以水包油乳液的形式存在。

本公开的第二脂质制剂包含至少一种可药用的水溶性形式的胆碱和含有二十二碳六烯酸(DHA)的油相。此外，为所述第二脂质制剂提供的油已经贫化了植物甾醇，使得所述脂质制剂包含约70毫克或更少的植物甾醇/100克油相。另外，脂质制剂基本不含花生四烯酸(ARA)。如本文中更详细地讨论的，所述第二脂质制剂包含水相和基于脂质制剂总重量的约5重量％至约35重量％的油相，并且所述脂质制剂以水包油乳液的形式存在。

本公开的第三脂质制剂包含至少一种可药用的水溶性形式的胆碱以及含有二十二碳六烯酸(DHA)和花生四烯酸(ARA)的油相。所述第三脂质制剂在脂质制剂中DHA与ARA的比率为10:1至1:5(w/w)。此外，为所述第三脂质制剂提供的油已经贫化了植物甾醇，使得所述脂质制剂包含约70毫克或更少的植物甾醇/100克油相。如本文中更详细地讨论的，所述第三脂质制剂包含水相和基于脂质制剂总重量的约5重量％至约35重量％的油相，并且所述脂质制剂以水包油乳液的形式存在。

在一些情况下，本公开的油相包含由DHA和少量EPA组成的ω-3脂肪酸，以及诸如ARA的ω-6脂肪酸。

本文公开的脂质乳液可以根据通常已知的方法制备(参见，例如，Hippalgaonkar等人，AAPS PharmSciTech 2010，11(4)，1526-1540)。一般而言，将水溶性和油溶性成分分别溶解在水相和油相中。因此，胆碱源，如果存在，是溶解在水相中。乳化剂，例如磷脂，可以分散在油相或水相中。将这两相充分加热并搅拌以分散或溶解所述成分。然后通常将脂质相在受控温度和搅拌(使用高剪切混合器)下添加到水相中，以形成均匀分散的粗乳液或预乳液。液滴尺寸小于20μm的预乳液通常产生单峰且物理稳定的细乳液。然后在优化的压力、温度和循环次数下将所述预乳液均质化(使用微射流器或高压均质器)，以进一步减小液滴尺寸并形成细乳液。诸如油相和表面活性剂的类型和浓度、操作温度、压力、循环次数等的因素在高压均质化和微射流期间可影响平均液滴尺寸。在乳液的整个保存期内，可注射的细乳液的平均液滴尺寸和PFAT5(≥5μm的脂肪球的体积加权百分比)应分别为≤500nm和≤0.05％。然后将由此产生的细乳液的pH调节至期望值，并通过1-5μm过滤器过滤所述乳液。然后将所述细乳液转移到合适的容器中。通常应避免氧气可透过和/或含有油溶性增塑剂的塑料容器。只要有可能，整个过程(过滤/粗乳液和细乳液制备)通常在氮气气氛下进行，尤其是在脂质乳液的赋形剂和特定组分对氧化敏感的情况下。所述脂质制剂的灭菌可通过终端加热灭菌或通过无菌过滤来实现。终端灭菌通常为最终产品的无菌性提供了更大的保证。然而，如果乳液的组分是不耐热的，则可以使用无菌过滤。过滤灭菌要求乳液液滴尺寸低于200nm。或者，可以采用无菌加工。然而，该过程相对设备和劳动密集，并且在监管性提交期间需要附加的过程验证数据和证明。

因此，本发明的脂质乳液可以通过以下步骤制备，所述步骤包括：

a.分别将油相和水相在搅拌下加热至约70℃至约80℃的温度；

b.向水相添加胆碱源，例如甘油磷酸胆碱；

c.通过在搅拌下将油相转移至水相来制备预乳液；

d.将所述预乳液在约40℃至60℃的温度和压力下均质化；

e.任选添加水以调节所需的体积和浓度；

f.任选将pH调节至约7.8至8.8的范围；以及

g.任选将所述脂质乳液灭菌。

灭菌可以通过本领域已知的方法、例如通过加热进行。通常，步骤(a)至(d)将在惰性气体例如N

氨基酸制剂

所述氨基酸制剂包含一种或多种氨基酸和一种或多种电解质的无菌水溶液。通常，所述氨基酸制剂包含约2克至约10克氨基酸/100毫升氨基酸制剂，例如约3克至约9克、约4克至约8克、和/或约5克至约7克/100毫升氨基酸制剂。所述氨基酸制剂通常包含异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、精氨酸、组氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸、脯氨酸、丝氨酸、酪氨酸、鸟氨酸和牛磺酸。此外，可以通过添加例如甘氨酰-酪氨酸二肽或乙酰-酪氨酸(Ac-Tyr)来增加酪氨酸的含量。然而，通常，甘氨酰-酪氨酸二肽的药代动力学比Ac-Tyr改善，其更快地被肾脏消除，导致酪氨酸在血液中的释放减少。

所述氨基酸制剂可进一步包含电解质，例如钠、钾、钙、镁/或磷酸根离子。例如，所述氨基酸制剂的每100毫升氨基酸制剂可以包含约0.1mmol至约10mmol的钠(例如，约3.75mmol至约10mmol的钠)、约0.1mmol至约10mmol的钾(例如，约3.75mmol至约6.90mmol的钾)、约0.05mmol至约1.0mmol的镁(例如，约0.05mmol至约0.11mmol和/或约0.38mmol至约0.65mmol的镁)、约0.1mmol至约10mmol的钙(例如，约1.13mmol至约5.10mmol的钙)、约0.1mmol至约10mmol的磷酸根(例如，约0.94mmol至约5.10mmol的磷酸根)和不超过10mmol的氯离子(例如，不超过5.6mmol的氯离子)。当钙和磷一起存在于同一热灭菌溶液中时，会发生不溶性磷酸钙沉淀。使用磷的有机盐例如五水甘油磷酸钠或甘油磷酸钙，可以增加钙和磷酸根的含量而不会有溶解性问题并且不会提供过量的钠或氯离子。在所述氨基酸制剂中，可以按氯化钠的形式提供钠，可以按二水氯化钙或葡萄糖酸钙的形式提供钙，可以按四水乙酸镁或氯化镁的形式提供镁，并可以按乙酸钾的形式提供钾。

所述氨基酸制剂可进一步包含水溶性形式的胆碱，所述胆碱选自氯化胆碱、酒石酸氢胆碱、柠檬酸胆碱、葡萄糖酸胆碱、苹果酸胆碱、胆碱胞苷二磷酸胆碱(CDP)盐和甘油磷酸胆碱。在一个优选的实施方式中，所述水溶性形式的胆碱存在的浓度为20毫克至2000毫克胆碱当量/升重构的多腔室容器，例如30毫克至1000毫克胆碱当量/升重构的多腔室容器。

碳水化合物制剂

所述碳水化合物制剂通常以葡萄糖的形式提供卡路里的供应。特别地，所述碳水化合物制剂提供的碳水化合物的量足以避免在接受胃肠外营养的患者中观察到的不良作用，例如高血糖症。通常，所述碳水化合物制剂包含约20至50克葡萄糖/100毫升碳水化合物制剂。

所述碳水化合物制剂可进一步包含水溶性形式的胆碱，所述胆碱选自氯化胆碱、酒石酸氢胆碱、柠檬酸胆碱、葡萄糖酸胆碱、苹果酸胆碱、胆碱胞苷二磷酸胆碱(CDP)盐和甘油磷酸胆碱。在一个优选的实施方式中，所述水溶性形式的胆碱存在的浓度为20毫克至2000毫克胆碱当量/升重构的多腔室容器，例如30毫克至1000毫克胆碱当量/升重构的多腔室容器。

多腔室容器

本公开提供了一种用于胃肠外施用营养制剂的多腔室容器。例如，所述容器可以是具有多个隔室或腔室的袋子的形式。所述容器，例如袋子，包含至少两个腔室，例如三个、四个或五个腔室，在一个优选的实施方式中，包含三个腔室。合适的容器，包括袋子，通常是无菌、无热原、一次性使用和/或即用的。所述多腔室容器对于容纳儿科和/或新生儿胃肠外营养产品特别有用，并且通常在所述容器的第一腔室中提供如本文公开的碳水化合物制剂、在第二腔室中提供如本文公开的氨基酸制剂、和在第三腔室中提供如本文公开的脂质制剂。

所述多腔室容器，例如三腔室袋，可包含竖式腔室。合适的多腔室容器在美国专利公布No.2007/0092579中公开，所述美国专利通过引用整体并入。例如，所述多腔室容器可以被构造为包含三个相邻的腔室或隔室的袋子。如果需要，使用易碎的屏障或可打开的密封(例如，剥离密封或易碎密封)来分隔所述多腔室容器的腔室。可打开的密封容许制剂分开储存并在即将施用之前混合，从而允许将不应作为混合物储存的制剂长时间储存在单个容器中。所述密封的打开允许腔室之间连通以及各个腔室的内容物混合。所述多腔室容器的外部密封是坚固的密封，其在提供用于打开腔室之间较弱的剥离密封或易碎密封的流体压力下不会打开。

所述多腔室容器可以提供说明书来说明打开剥离密封的期望顺序，从而使成分流体按期望的顺序混合。两个或更多个剥离密封的开封强度可以变化，以促进按期望的顺序打开密封。例如，首先要打开的剥离密封的开封强度可以是其次要打开的剥离密封所需的开封强度的1/3至1/2。

图1示出了本发明的多腔室容器的一个实施方式。优选地，被构造为袋子的容器10包括三个相邻的腔室或腔室12、14和16。腔室12位于侧端或侧面端18，腔室16位于相对的侧端或侧面端20。三个腔室12、14和16优选被设计成容纳水溶液和/或脂质乳液。优选地，使用易碎的屏障或可打开的密封22和24来分隔腔室。容器10优选包括端口26、28和30，以分别提供与腔室12、14和16的连通。容器10还优选提供一个悬挂部分36，在图1所示的实施方式中，其是一个瓣片，中心位置有孔38用于悬挂所述容器。瓣片36限定所有腔室12、14和16的上端的边界40。

使用方法

本公开提供了当口服营养和肠内营养不可能、不充分或禁忌时需要胃肠外营养的患者的治疗方法。所述方法涉及使用本文公开的多腔室容器和脂质制剂。特别地，所述方法涉及对患者胃肠外施用如本文公开的多腔室容器的内容物和/或脂质制剂。在一个优选的实施方式中，所述患者是儿科患者。

在一些情况下，本文公开的脂质乳液和包含它的组合物用于避免和/或治疗肝性脂肪变性。肝性脂肪变性定义为肝内脂肪占肝重的至少5％。三酰基甘油在肝中的单纯蓄积会保护肝脏；然而，长时间的肝脂质储存可能导致肝脏代谢功能障碍、炎症和晚期形态的非酒精性脂肪肝病(NAFLD)。NAFLD包括从单纯性脂肪变性到非酒精性脂肪肝(NASH)的一系列疾病，其可进展为肝硬化和肝细胞癌。从组织学上，NASH的定义是存在大泡性脂肪变性、小叶炎症和肝细胞气球样变(Kneeman，非酒精性脂肪肝病的继发原因(Secondary Causes ofnonalcoholic fatty liver disease)，Therap Adv Gastroenterol 2012；5：199-207)。长期全胃肠外营养(TPN)可能是NAFLD的众多原因之一。TPN可导致肉碱的耗竭，肉碱是将游离脂肪酸从肝细胞质传递到线粒体以进行β氧化所必需的化合物。如前所述，胆碱的细胞溶质浓度也降低，促进脂质在肝细胞中的储存。这样的脂质储存与主要的组织学发现是脂肪变性、肝内胆汁淤积和胆管重复畸形(ductular reduplication)的事实有关。因此，在TPN中胆碱补充的效果也可以通过验证肝脏的组织学特征来确定。这样的组织学分析允许通过分析空泡形成的程度来评估脂肪变性的程度。实施例3提供了在动物研究中进行的这样的组织病理学研究的结果。它表明，在PN溶液中存在甘油磷酸胆碱可以有效地解决由于甲硫氨酸和胆碱缺乏的膳食继以胃肠外营养引起的肝损伤。它还提供证据表明GPC提供了比其它胆碱衍生物(具体是氯化胆碱和CDP-胆碱)明显更好的效果。DHA和ARA的附加存在似乎具有附加的协同效益。

血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定是检测肝病最常见的实验室检验。因为人群中的酶浓度形成连续分布，所以无法清楚界定健康和患病肝脏之间的临界浓度。然而，血清丙氨酸转氨酶的正常上限平均设在40IU/l，范围为30-50IU/l(Kim等人.BMJ 2004，328:983)。在本发明的情形下，所述上限用作正常血清丙氨酸氨基转移酶(本文也称为“氨基转移酶”或“ALT”)浓度。Kim等人还描述了氨基转移酶浓度与因肝病死亡之间的相关性显著。因此，在本发明的情形下，血清氨基转移酶浓度用于确定与不含任何胆碱的脂质乳液相比，而且与其它胆碱源(包括氯化胆碱和CDP-胆碱)相比，甘油磷酸胆碱在治疗可由例如胃肠外营养引起的肝损伤中的功效。图1和2证明了GPC在降低ALT浓度上明显更好的效果。

ALT活性由国际临床化学联合会(International Federation of ClinicalChemistry，IFCC)推荐的修改方法确定，也参见实施例2。ALT催化α-酮戊二酸与L-丙氨酸反应形成L-谷氨酸和丙酮酸。在LDH的作用下，丙酮酸转化为乳酸，并且NADH转化为NAD。在340nm(次波长为700nm)处测得的NADH吸光度下降与ALT的血清活性成正比。这是一个动力学反应。一般使用血清进行分析。在收集的2小时内将血清与细胞分离，并保存在-70℃下直至测定。在动物模型中随时间监测ALT活性在本文中用作确定GPC在治疗肝病(特别是胆碱缺乏的膳食引起的肝损伤)中的功效的一种直接而确凿的方式(实施例1和2，图2和3)。

血浆游离胆碱浓度可以通过高压液相色谱法(HPLC)和气相色谱-质谱法根据本领域已知的方案来确定(Pomfret等人：使用高压液相色谱法和气相色谱-质谱法测量胆碱和胆碱代谢物的浓度(Measurement of choline and choline metabolite concentrationsusing high pressure liquid chromatography and gas chromatography-massspectrometry).Anal Biochem.1989；180:85–90)。

从油中(特别是从植物源的油，例如橄榄油或大豆油中)贫化植物甾醇的方法是已知的。例如，可以如Ostlund等人，Am J Clin Nutr 2002，75，1000-1004中所述、或如US6303803 B1中所述除去植物甾醇。

具体实施方式

实施例

实施例1：动物模型

进行动物研究以鉴定和确认用于胃肠外营养液、特别是脂质乳液中的最有效的胆碱衍生物，以避免和/或治疗和改善肝损伤，特别是肝性脂肪变性。该研究还用于鉴定被发现是最有效的胆碱衍生物与多不饱和脂肪酸(特别是DHA和ARA)之间任何潜在的代谢相互作用。

在患病动物模型中研究了GPC的效果以及DHA、ARA和GPC的组合的效果，其中将患有由胆碱和甲硫氨酸缺乏(MCD)食料(SSNIFF MCD胆碱/甲硫氨酸缺乏的颗粒食料(SSNIFF

在MCD食料下14天后开始胃肠外营养。胃肠外营养5天后进行第一次测量，接着在9和17天后进行测量。每天的脂质摄入量为2.31g/kg/d。将大鼠如下表I所示分成几个组。

两个组作为对照组，其中第一组用盐水溶液(注射用水中0.90％w/v的NaCl)处理。第二组接受在注射用水中含有精制橄榄油(80.0g/L)和精制大豆油(20.0g/L)的脂质乳液(“LE 10％”)，pH 6-8；LE 10％还含有蛋卵磷脂(6.0g/L)、甘油(11.25g/L)和油酸钠(0.15g/L)。LE 10％含有100g/L的脂质。在某些实验中，使用不同浓度的脂质乳液“LE”，例如“LE 13％”或“LE 20％”，这表明上述浓度相应地更高。

将选自氯化胆碱、甘油磷酸胆碱(GPC)和胞苷二磷酸-胆碱(CDP-胆碱)的各种胆碱衍生物分别以两种浓度(低/高)添加到LE 10％中，参见表I(步骤#2)。“低”是指浓度为15毫摩尔/升脂质乳液，“高”是指浓度为31毫摩尔/升脂质乳液。氯化胆碱((2-羟乙基)三甲基氯化铵)，药物二级标准品，购自Sigma-Aldrich(Merck KGaA，德国)。CDP-胆碱(通过发酵制备)来自TCI Europe N.V.(Antwerp，比利时)。从蛋磷脂通过皂化制备的甘油磷酸胆碱由德国Lipoid GmbH供应。DHA(来自藻类，裂殖壶菌)和ARA(来自真菌，高山被孢霉)购自德国BASF AG。维生素E购自ADM(IL，U.S.A)。

如下制备补充胆碱衍生物的“LE”脂质乳液。第一步，将生相加热。在油相的情况下，将大豆油和橄榄油、蛋磷脂、DHA和ARA油以及维生素E在步骤#3实验的情况下在不锈钢烧杯中使用Ultra Turrax连续搅拌的同时，在N

然后用Milli-Q水将所述乳液调节至所需的体积(2L)，并冷却至大约18至28℃、优选20℃至25℃的温度。用0.1N NaOH将pH调节到7.8至8.8的范围，优选调节到约8.3至8.8。将所述乳液用4.5μm过滤器过滤，并转移到100mL的袋子中，然后将其装入外袋(overpouched)，利用氧吸收剂/指示剂，供以后使用。然后将所述脂质乳液在121℃高压灭菌，以达到至少15分钟的F0。

表I：研究组和实验设置：实验使用标准“LE”脂质乳液，其中将一定量的胆碱源添加到所述脂质乳液。着重于GPC本身的效果的该测试设置另称为“步骤#2”)

表II：研究组和实验设置：实验使用如上所述的植物甾醇贫化的“LE”脂质乳液，其中按指示添加了GPC以及DHA和ARA。该测试设置另称为“步骤#3”)。

实施例2：氨基移换酶(ALT)发展

为了评估GPC对如实施例1所述测试的动物的肝脏状况的效果，在步骤#2和步骤#3设置中，均测试了胃肠外营养5天和17天后被测动物血浆中的氨基转移酶(ALT)活性。如前所述，可以通过氨基转移酶水平增加来确定肝损伤(胆汁淤积)。ALT活性用改良的ADVIA1800血液生化分析仪/IFCC修正版(Siemens)根据例如如前所述的标准方案确定。

为了总结实验结果，图2显示了被测大鼠中ALT活性的发展。从那里可以看出，用LE10％经过17天胃肠外营养后，ALT活性有预期的增加。相比之下，在脂质乳液中存在胆碱源的研究组中，ALT活性没有增加。然而，该效果在GPC的存在下最为明显，其中可以确定ALT活性明确下降。相比之下，氯化胆碱和CDP-胆碱则提供了一种稳定的状况，其中ALT活性既不显著增加也不降低。值得注意的是，LE脂质乳液中所含的磷脂酰胆碱似乎没有任何效果，证实了身体不能利用脂质乳液中以磷脂酰胆碱形式提供的胆碱。

在鉴定GPC为降低ALT活性并从而降低肝损伤的惊人有效的胆碱衍生物后，另一项实验着重于GPC与PUFA DHA和ARA之间的协同作用。如表III中进一步所示，使用如实施例1中所述的脂质乳液。

图3根据相对于正常值活性的变化总结了ALT活性的结果。该测试包括一个用组合物做的实验，所述组合物中根据步骤#3设置如图3所示降低了脂质乳液中的植物甾醇含量。结果还表明，盐水溶液以及没有胆碱源且植物甾醇含量正常的脂质乳液(“LE”)都导致ALT活性增加，证明了肝脏的进行性恶化。相反，两种具有GPC(40mmol/L)的脂质乳液，无论植物甾醇含量如何，均导致ALT活性显著降低。图3中显示了植物甾醇剂量。LE 13％脂质乳液中所含的植物甾醇的浓度为40μg/mL至120μg/L。值得注意的是，在此使用的脂质乳液中所含的磷脂酰胆碱似乎没有任何效果，证实了身体不能利用脂质乳液中以磷脂酰胆碱形式提供的胆碱。

实施例3：组织病理学等级的确定

实施例3.1：组织学薄片的制备

将肝脏的一部分保存

缓冲的福尔马林中，并根据适用的RITA指南(Ruehl-Fehlert等人，Exp ToxicPathol 2003；55，91-106)修剪输注部位和取样的宏观病变，包埋在石蜡中，切成约4微米的厚度，并用苏木精-曙红染色。将冷冻的肝脏样品冷冻切片为约5微米的薄片，并用油红O染色。在Citoxlab France进行组织处理。

实施例3.2：显微镜检查

对该研究的所有动物的肝脏、输注部位和宏观病变的两个薄片(苏木精曙红和油红O)均进行了显微镜检查。对来自高剂量组的至少30％的动物和来自被鉴定的目标器官的足够数量的薄片进行同行评审，以确认由研究病理学者记录的发现结果是一致且准确的。病理学同行评审完成后，所有组织薄片均返回Citoxlab France进行存档。在显微镜检查期间，由病理学者斟酌决定制作代表性照片。

实施例3.3：平均组织学空泡形成

如上所述检查分别在8天和15天后采集的肝脏样品，并将其归属到肝细胞空泡形成的五个等级。对于5级，空泡形成通常是弥漫的并累及所有区域。对于较低等级，门脉周区域受影响较少并且空泡尺寸较小。根据以下定义归属等级：

1级＝轻微/很少/很小的空泡，散在。

2级＝轻度/少数/小的空泡，小叶中心到中带。

3级＝中度/中等数量/中等大小的空泡，小叶中心到中带。4级＝明显/很多/大的空泡，小叶中心到门脉周。

5级＝重度/很多/大的空泡，弥漫，累及所有肝区。

图6显示了每个等级的示例性照片。所显示的组织学薄片用苏木精-曙红(HE)染色。

8天后，根据5级的空泡形成，施用盐水溶液导致4只动物中的4只显示出肝损伤迹象(参见表IV)。用LE 13％在DHA和ARA存在的情况下进行胃肠外营养已经对肝脏组织病理学产生了积极的效果。在五只动物中，有两只仍显示5级空泡形成。然而，这五只动物中三只的肝脏可以归属到4级。在DHA和ARA之外还存在GPC的情况下，肝脏的空泡形成更加改善。五只动物中只有一只显示出5级肝损伤迹象，而另两只大鼠显示出4级症状和两只3级症状。最后，如果向脂质乳液仅添加GPC，则五只大鼠均未显示出5级肝损伤。三个显示4级，一个显示3级，一个甚至显示2级空泡形成。

表IV：8天后肝脏的显微镜变化

经过15天的胃肠外营养后，上述效果更加明显。尽管接受盐水溶液的那些动物的肝脏状况仍然像可预期的那样严重，但是脂质乳液中GPC的存在以及DHA、ARA和GPC的全部存在导致动物的肝脏状态明确而显著的改善。除了GPC外还存在一定浓度范围内的DHA和ARA甚至导致协同改善结果，在15天后也变得明显。图4B根据以上定义的等级，总结了DHA、ARA和GPC对肝脏空泡形成的进展的效果。该图显示了在所有DHA、ARA和GPC的存在下肝脏状况的显著好转，其中在脂质乳液中已经有益地存在DHA和ARA的情况下，GPC似乎具有额外的令人惊讶的影响。

进行相同的组织病理学测试以比较胆碱衍生物单独的效果，即在没有DHA和ARA的情况下。图4A总结了动物研究组的肝脏的组织病理学检查结果。在高(31mmol/L)和低(15mmol/L)GPC浓度下，GPC的效果都明显更好。CDP-胆碱(低浓度，15mmol/L)也有效果。高浓度(31mmol/L)的CDP-胆碱组无法归属任何等级。接受氯化胆碱作为脂质乳液的一部分的组(高浓度和低浓度)的情况好于仅用盐水或没有任何胆碱衍生物的脂质乳液的组。然而，用所述补充氯化胆碱的脂质乳液不能在任何相关程度上解决所述肝损伤。

表V：15天后肝脏的显微镜变化

实施例4：肝脏比体重的发展

进一步评价如实施例1所述的研究组关于肝重对体重的发展。如前所述，肝重增加与体重增加不成比例对肝损伤(特别是脂肪变性)的发展而言是典型的。图5同样对接受仅盐水溶液、LE 10％、以及添加了前述浓度(“高”：31mmol/L)的胆碱衍生物的相同脂质乳液的那些动物组显示了肝脏与体重的百分比比率结果。可以看出，单独施用脂质乳液导致所述比率增加，表明由于肝损伤(脂肪变性)导致肝重增加。添加氯化胆碱或CDP-胆碱均导致该比率降低，从而改善肝脏状态。然而，用GPC再次实现了该比率的最明显降低。同样，脂质乳液中所含的磷脂酰胆碱似乎没有任何效果。

实施例5：脂质乳液在胆碱衍生物存在下的稳定性

除了研究胆碱衍生物在解决肝损伤中的功效外，进一步评估了如实施例1所述制备的脂质乳液在灭菌后它们各自的稳定性(参见表VI)。发现与氯化胆碱或CDP-胆碱相比，在GPC存在下脂质乳液的稳定性得到改善。实际上，发现氯化胆碱和CDP-胆碱在灭菌(加热)期间使脂质乳液不稳定。含有氯化胆碱或CDP-胆碱的脂质乳液在灭菌期间导致脂质乳液的相分离。在GPC存在下，脂质乳液保持稳定。

表VI：在不同胆碱衍生物存在下脂质乳液在灭菌时的稳定性