包含已去除色素的栀子提取物作为有效成分的用于预防、改善或治疗过敏性皮肤病的组合物

技术领域

本发明涉及包含已去除色素的栀子提取物作为有效成分的用于预防、改善或治疗过敏性皮肤疾病的组合物。

背景技术

过敏(allergy)是指因免疫系统的异常导致不影响普通人的物质引起某些人的皮疹、瘙痒、鼻涕或喷嚏等异常过敏反应，世界卫生组织(WHO)已将过敏性疾病列为21世纪的第七大问题性疾病。主要过敏性疾病有特应性皮炎、哮喘、鼻炎等。过敏在现代医学领域中属于接近顽症的疾病，因此至今为止尚无明确的治疗方法。虽然当前使用的抗组胺剂效果显著，但在治疗层面上并不属于过敏性疾病的基本治疗剂，而且，因使用具有许多副作用的类固醇可导致疾病进一步恶化，并持续增加患者的经济负担。

通常，特应性症状或过敏性疾病伴随着产业的发展、饮食生活的西化及便利化、严重的环境污染的发生、新房综合症等新型疾病，在进入21世纪之后呈逐渐增加的趋势。不仅在韩国，而且在西方国家，甚至在许多发展中的不发达国家中，过敏性疾病的发病趋势均很严重，因此，对这些疾病的治疗剂有望创造出全球市场需求。

特应性皮炎(atopic dermatitis)作为慢性的复发性炎症皮肤疾病，伴有严重的瘙痒症、湿疹性皮肤疾病及皮肤干燥症等，其在1930年代被Wise&Sulzberger首次发现。通常，大多数特应性皮炎发生在婴儿期或少儿期，并经过反复好转和恶化后，随着生长而自然消失，但有时也会因产生病变而持续到成年。当前在韩国，特应性皮炎患者在儿童中的患病率占10％至30％，在成年人中占1％至3％。特应性皮炎属于复杂的疾病，涉及环境要素和遗传原因，其中，最近对特应性皮炎发生率的增加产生影响的因素有大气污染、核家庭化、母乳喂养减少、家庭收入和教育水平的增加、因增加使用抗生剂引起的对抗原暴露增加、居住环境变化、因工业发展引起的新抗原物质的出现等多种因素。

另一方面，栀子是指属于茜草科(Rubiaceae)植物的栀子树(Gardeniajasminoides)的果实。众所周知，栀子可用作消炎剂、利尿剂、止血剂或用于治疗黄疸，也可在利用蜡或灰作为媒染剂来用于将布或腌萝卜染成黄色或将绿豆煎饼或煎饼染成黄色。

作为有关栀子的现有技术，韩国授权专利第1089637号公开了包括在栀子提取物中处理β-葡糖苷酶的步骤的增加抗炎症活性的栀子提取物的制备方法，并且韩国授权专利第1165716号公开了包含栀子(Gardenia jasminoides)提取物的分馏物作为有效成分的用于预防或治疗过敏性疾病的组合物，但并未公开本发明的包含已去除色素的栀子提取物作为有效成分的用于预防、改善或治疗过敏性皮肤疾病的组合物。

发明内容

技术问题

本发明根据如上所述的需求而导出，本发明提供包含已去除色素的栀子提取物作为有效成分的用于预防、改善或治疗过敏性皮肤疾病的组合物，在特应性皮炎的动物模型中，确认到作为本发明有效成分的已去除色素的栀子提取物减少抓挠次数、炎症细胞及肥大细胞，尤其与未去除色素的栀子提取物相比，确认到抓挠次数、炎症细胞及肥大细胞数量进一步在统计学上显著减少，从而完成了本发明。

技术方案

为了实现上述目的，本发明提供包含已去除色素的栀子(Gardenia jasminoides)提取物作为有效成分的用于预防、改善或治疗过敏性皮肤疾病的组合物。

并且，本发明提供包含已去除色素的栀子(Gardenia jasminoides)提取物作为有效成分的用于预防或改善过敏性疾病的准药品。

并且，本发明提供包含已去除色素的栀子(Gardenia jasminoides)提取物作为有效成分的用于预防或改善过敏性疾病的保健功能食品组合物。

发明的效果

本发明涉及包含已去除色素的栀子提取物作为有效成分的用于预防、改善或治疗过敏性皮肤疾病的组合物，相比于未去除色素的栀子提取物，上述已去除色素的栀子提取物对于过敏性皮肤疾病更加有效，因此可以非常有效地用于过敏性皮肤疾病，尤其是特应性皮炎。

附图说明

图1为示出未去除色素的栀子提取物A和本发明的已去除色素的栀子提取物B的图。

图2为示出过敏性特应性皮炎疾病动物模型中的正常组(Normal)、对照组(Control)、栀子提取物给药组(GJE 1％)、栀子脱色提取物给药组(GJE-CR 1％)、阳性对照组(他克莫司(Tacrolimus))的肉眼评价结果的图。

图3为示出过敏性特应性皮炎疾病动物模型中的正常组(Normal)、对照组(Control)、栀子提取物给药组(GJE 1％)、栀子脱色提取物给药组(GJE-CR 1％)、阳性对照组(Tacrolimus)的抓挠次数(瘙痒次数)的结果的图表。其中，***表示相比于正常组(Normal)，对照组(Control)的抓挠次数在统计学上显著增加，P＜0.001，###表示相比于对照组(Control)，栀子提取物给药组(GJE 1％)、栀子脱色提取物给药组(GJE-CR 1％)、阳性对照组(Tacrolimus)的抓挠次数在统计学上显著减少，P＜0.001。$$$表示相比于栀子提取物给药组(GJE 1％)，本发明的栀子脱色提取物给药组(GJE-CR 1％)的抓挠次数在统计学上显著减少，P＜0.001。

图4为示出从过敏性特应性皮炎疾病动物模型中的背部、耳部确认到正常组(Normal)、对照组(Control)、栀子提取物给药组(GJE 1％)、栀子脱色提取物给药组(GJE-CR 1％)、阳性对照组(Tacrolimus)的炎症细胞的结果的图表。其中，**表示相比于正常组(Normal)，对照组(Control)的炎症细胞在统计学上显著增加，P＜0.01，##、###表示相比于对照组(Control)，栀子提取物给药组(GJE 1％)、栀子脱色提取物给药组(GJE-CR 1％)、阳性对照组(Tacrolimus)的肥大细胞在统计学上显著减少，##为P＜0.01，###为P＜0.001。$、$$表示相比于栀子提取物给药组(GJE 1％)，栀子脱色提取物给药组(GJE-CR 1％)的炎症细胞在统计学上显著减少，##为p＜0.01，###为p＜0.001。

图5为示出从过敏性特应性皮炎疾病动物模型中的背部、耳部确认到正常组(Normal)、对照组(Control)、栀子提取物给药组(GJE 1％)、栀子脱色提取物给药组(GJE-CR 1％)、阳性对照组(Tacrolimus)的肥大细胞(mast cells)的图表。其中，**表示相比于正常组(Normal)，对照组(Control)的肥大细胞在统计学上显著增加，p＜0.01，##、###表示相比于对照组(Control)，栀子提取物给药组(GJE 1％)、栀子脱色提取物给药组(GJE-CR1％)、阳性对照组(Tacrolimus)的肥大细胞在统计学上显著减少，##为p＜0.01，###为p＜0.001。$$表示相比于栀子提取物给药组(GJE 1％)，栀子脱色提取物给药组(GJE-CR 1％)的肥大细胞在统计学上显著减少，P＜0.01。

图6为按日期示出在过敏性特应性皮炎疾病动物模型中作为正常组(Normal)、对照组(Control)、栀子提取物给药组(GJE)、栀子脱色提取物给药组(GJE-CR)、阳性对照组的泼尼松龙(prednisolone)的抓挠次数(瘙痒次数)的结果的图表，其中，(A)部分中给药100mg/kg药物，(B)部分中给药200mg/kg药物。***表示相比于正常组(Normal)，对照组(Control)的抓挠次数在统计学上显著增加，p＜0.001，#、##、###表示相比于对照组(Control)，栀子提取物给药组、栀子脱色提取物给药组、泼尼松龙(prednisolone)的抓挠次数在统计学上显著减少，#为p＜0.05，##为p＜0.01，###为p＜0.001。$表示相比于栀子提取物给药组(GJE)，栀子脱色提取物给药组(GJE-CR)的抓挠次数在统计学上显著减少，p＜0.05。

具体实施方式

本发明涉及包含已去除色素的栀子(Gardenia jasminoides)提取物作为有效成分的用于预防或治疗过敏性皮肤疾病的药学组合物。

优选地，上述过敏性疾病为选自特应性皮炎(atopic dermatitis)、过敏性皮炎(allergic dermatitis)、接触性皮炎、皮疹、瘙痒症、昆虫过敏、食物过敏、药物过敏、浮肿、过敏症(anaphylaxis)、过敏性鼻炎(allergic rhinitis)、哮喘(asthma)及过敏性结膜炎(allergic conjunctivitis)中的一种，但不限于此。

优选地，上述色素为藏红花素(Crocin)，但对于色素并无特别限制，只要包含于栀子提取物即可。

优选地，通过以下制备方法制备本发明的已去除色素的栀子提取物，但不限于此。

上述制备方法包括：步骤(1)，向栀子添加提取溶剂来进行第一次提取并通过过滤来获得第一次滤液；步骤(2)，从上述步骤(1)中获得第一次滤液后，向剩余残渣添加提取溶剂来获得第二次滤液；步骤(3)，混合从上述步骤(1)中获得的第一次滤液和从上述步骤(2)中获得的第二次滤液后，通过添加活性炭来使栀子提取物的色素吸附在活性炭；以及步骤(4)，经过上述步骤(3)以后，去除上述活性炭并通过过滤、浓缩及干燥来获得已去除色素的栀子提取物。

在上述步骤(3)中，对于活性炭并无特别限制，但优选地，可以为颗粒型或细粒型，更优选地，可以为细粒型(粉或粉末形态)。

优选地，上述提取溶剂为水、C

本发明的药学组合物还可包含药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。本发明的药学组合物所包含的药学上可接受的载体为制剂时通常使用的载体，包含盐水、无菌水、林格氏液、缓冲盐水、葡萄糖溶液、麦芽糖糊精溶液、甘油、乙醇、乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯胶、磷酸钙、藻酸盐、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、糖浆、甲基纤维素、甲基羟基苯甲酸酯、丙基羟基苯甲酸酯、滑石、硬脂酸镁及矿物油等，但不限于此。并且，除上述成分之外，还可包含抗氧化剂、缓冲液、静菌剂、稀释剂、表面活性剂、结合剂、润滑剂、湿润剂、甜味剂、调味剂、乳液剂、悬浮剂或保鲜剂等。本发明的药学组合物可通过口服或非口服给药，在非口服给药的情况下，可通过注射或涂敷于皮肤的方法给药。在涂敷于上述皮肤的情况下，优选地，可使用以软膏剂、贴敷剂或喷雾剂的方式制备的剂型。本发明的药学组合物的适当给药量可根据配制方法、给药方式、患者的年龄、体重、性别、病理状态、食物、给药时间、排泄速度及反应灵敏性等因素而开出多种处方。

并且，本发明涉及包含已去除色素的栀子(Gardenia jasminoides)提取物作为有效成分的用于预防或改善过敏性疾病的准药品。

优选地，上述准药品为皮肤外用剂，但不限于此。

本发明的术语“准药品”作为以治疗、减轻、处置及预防人或动物的疾病为目的而使用，对人体的作用微弱且并不按原状作用于人体，类似或不类似于非器具或非机械的物品，作为与用于预防感染的杀菌、杀虫及与此类似的用途的制剂中的一种相对应的物品，是指以诊断、治疗、减轻、处置或预防为目的而使用的物品中的非器具、非机械以及在药理学上以对人或动物的结构和功能产生影响为目的而使用的物品中的非器具、非机械或非装置之外的物品。并且，上述准药品包括皮肤外用剂及个人卫生用品。

当使用本发明的已去除色素的栀子(Gardenia jasminoides)提取物作为准药品添加物时，可以按原状添加上述提取物或与其他准药品及准药品成分一同使用，可根据常规方法适当使用。可根据使用目的适当确定有效成分的混合量。对于上述皮肤外用剂并无特别限制，优选地，可制备成软膏剂、乳液剂、喷雾剂、贴剂、霜剂、散剂、悬浮剂、凝胶剂或溶胶的形态使用。对于上述个人卫生用品并无特别限制，优选地，可以为肥皂、化妆品、湿巾、纸、洗发水、护肤霜、面霜、牙膏、口红、香水、彩妆、粉底霜、腮红、睫毛膏、眼影、防晒霜、护发产品、空气清新剂凝胶或清洗凝胶。并且，作为另一例，本发明的准药品组合物可以为消毒清洁剂、淋浴泡沫、漱口水、湿巾、洗涤肥皂、洗手液、加湿器填充剂、面膜、软膏剂或过滤器填充剂。

并且，本发明涉及包含已去除色素的栀子(Gardenia jasminoides)提取物作为有效成分的用于预防或改善过敏性疾病的保健功能食品组合物。

优选地，上述组合物可被制备成选自粉末、颗粒、丸剂、片剂、胶囊、糖果、糖浆及饮料中的一种剂型，但不限于此。

当制备本发明的保健功能食品组合物时，可按原状添加已去除色素的栀子提取物或与其他食品及食品成分一同混合制备，可根据常规方法适当制备。作为一例，能够添加上述已去除色素的栀子提取物的食品可以为选自焦糖、肉类、香肠、面包、巧克力、糖果类、快餐类、饼干类、披萨、拉面、其他面类、口香糖类、包括冰淇淋的乳制品、各种汤、饮料、茶、口服液、酒精饮料及维生素复合物中的一种形态，包含所有常规意义上的保健功能食品。即，对于上述食品的种类并无特别限制。上述保健功能食品组合物可包含多种营养剂、维生素、矿物质(电解质)、合成香料及天然香料、着色剂及增进剂(奶酪、巧克力等)、果胶酸及果胶酸盐、藻酸及藻酸盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、pH调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、酒精、碳酸饮料中使用的碳酸化剂等。并且，可包含用于制造天然果汁及蔬菜饮料的果肉。可独立或组合使用上述成分。并且，本发明的保健功能食品组合物还可包含多种调味剂或天然碳水化合物等成分，上述天然碳水化合物为如葡萄糖、果糖的单糖类，如麦芽糖、蔗糖的二糖类，如糊精、环糊精的多糖，如木糖醇、山梨糖醇、赤藓糖醇等糖醇。上述天然碳水化合物的比率并不重要，但相对于100g的本发明组合物，优选地，可包含0.01～0.04g，更优选地，可包含0.02～0.03g，但不限于此。作为甜味剂可使用如索马甜、甜菊提取物的天然甜味剂或如糖精、阿斯巴甜的合成甜味剂等。

以下，将通过实施例进一步详细说明本发明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员显而易见的是，这种实施例仅用于更加详细说明本发明，因此本发明的范围并不局限于此。

实施例1.已去除色素的栀子提取物的制备

为了解决色素残留在皮肤的问题，用活性炭吸附栀子色素来去除栀子固有的色素，从而制备去除藏红花素(Crocin)的栀子提取物。

(1)已去除色素的栀子乙醇提取物的制备

①

②

③

向混合上述第一提取液及第二提取液的150ml的70％(v/v)乙醇提取物分别添加5g的颗粒形态的活性炭和细粒形态的活性炭并搅拌20小时，从而去除色素。其结果，当使用细粒形态的活性炭时，作为指标成分的京尼平苷(geniposide)含量高，因此，本发明实施例中所使用的已去除色素的栀子提取物采用了通过细粒型活性炭去除色素的栀子提取物。

④

(2)已去除色素的栀子水提取物的制备

①

②

③

④

随后，评价从本实施例1获得的已去除色素的栀子提取物对于过敏性特应性皮炎的功效，作为比较例使用了未去除色素的栀子提取物。

实施例2.在涂敷已去除色素的栀子乙醇提取物的过敏性特应性皮炎动物模型中确认对于特应性皮炎的效果

以3～4日的间隔向8周龄的NC/Nga小鼠皮肤涂敷100mg的包含作为过敏性特应性诱发抗原的天然屋尘螨来源成分的软膏(AD Biostir，日本)并在21日内共涂敷6次来诱发过敏性特应性皮炎。诱发过敏性特应性皮炎7日后，将1mg/ml的药物(栀子提取物(GJE1％)、已去除色素的栀子提取物(GJE-CR 1％))及他克莫司(tarolimus))每日涂敷一次，共涂敷14日。

随后，以每周一次，每次20分钟的方式对诱发过敏皮炎的小鼠进行耳和背部等的抓挠次数及皮肤受损程度的评价。所有测定结果以平均(mean)和标准偏差(SD，standarddeviation)来表示，并使用单因素方差分析(one-way ANOVA)来执行对于实验组之间差异的统计分析，当p＜0.05时，判断为具有统计意义。

其结果，如图2所示，当使用已去除色素的栀子乙醇提取物进行处理时，不仅确认到诱发过敏性皮炎的小鼠皮肤状态有很大改善，而且确认到相比于诱发过敏性特应性皮肤痒的对照组(Control)，抓挠次数(瘙痒次数)显著减少，并且相比于未去除色素的栀子提取物，抓挠次数在统计学上显著减少(图3)。

实施例3.涂敷已去除色素的栀子乙醇提取物的过敏性特应性皮炎动物中的炎症细胞的变化分析

提取诱发过敏皮炎的小鼠的耳和背部皮肤组织，通过苏木素伊红(H&E，hematoxylin and eosin)染色并利用测定程序(Solution FL ver9.1)测定炎症细胞浸润变化。所有测定结果以平均(mean)和标准偏差(SD，standard deviation)表示，并使用单因素方差分析(one-way ANOVA)来执行对于实验组之间差异的统计分析，当p＜0.05时，判断为具有统计意义。

其结果，如图4所示，相比于过敏性特应性皮炎组(Control)炎症细胞的数量，确认到用本发明已去除色素的栀子乙醇提取物处理的动物模型的耳及背部皮肤组织中所测定的炎症细胞数量在统计学上显著减少，尤其，相比于未去除色素的栀子提取物，炎症细胞的减少呈现出统计学上的差异。

实施例4.在用已去除色素的栀子乙醇提取物处理的过敏性特应性皮炎动物中的肥大细胞(mast cell)数量分析

提取过敏皮炎小鼠的耳和背部皮肤组织，通过甲苯胺蓝(TB，Toluidine blue)染色并利用图像测定程序(Solution FL ver 9.1)测定肥大细胞数量。所有测定结果以平均(mean)和标准偏差(SD，standard deviation)表示，并使用单因素方差分析(one-wayANOVA)来执行对于实验组之间差异的统计分析，当p＜0.05时，判断为具有统计意义。

其结果，如图5所示，相比于过敏性特应性皮炎疾病动物模型中所测定的肥大细胞的数量，确认到用本发明已去除色素的栀子乙醇提取物处理的动物模型的耳及背部皮肤组织中所测定的肥大细胞数量在统计学上显著减少，尤其，相比于未去除色素的栀子提取物，肥大细胞数量的减少呈现出统计学上的差异。

实施例5.在口服给药已去除色素的栀子水提取物的过敏性特应性皮炎动物模型中测定瘙痒次数

以3～4日的间隔向8周龄的NC/Nga小鼠皮肤涂敷100mg的包含作为过敏性特应性诱发抗原的天然屋尘螨来源成分的软膏(AD Biostir，日本)并在21日内共涂敷6次来诱发过敏性特应性皮炎。在实验开始日涂敷150μl的4％SDS并放置1小时后，将100mg的屋尘螨抗原适用于背和双耳。诱发过敏性特应性皮炎7日后，每日一次口服给药100mg/kg或200mg/kg的药物(栀子提取物、已去除色素的栀子提取物)共给药14日。

在诱发过敏皮炎的动物模型中，为了比较根据药物的给药而引起的效果，每周一次，每次20分钟对耳和背部的瘙痒次数进行了评价。所有测定结果以平均(mean)和标准偏差(SD，standard deviation)表示，并使用单因素方差分析(one-way ANOVA)来执行对于实验组之间差异的统计分析，当p＜0.05时，判断为具有统计意义。

其结果，如图6所示，相比于正常组，诱发过敏性皮炎的小鼠的抓挠次数从诱发过敏皮炎7日后开始在统计学上显著增加。相比于诱发过敏性皮炎的组(Control)，口服给药栀子提取物、已去除色素的栀子提取物及阳性对照组的组的抓挠次数在统计学上显著减少。尤其，相比于栀子提取物，当给药本发明已去除色素的栀子水提取物时，确认到抓挠次数在统计学上进一步显著减少。