核酸微针及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于生物医学工程技术领域，具体涉及一种核酸微针及其制备方法和应用。

背景技术

经皮给药是指药物经由皮肤途径吸收、在皮肤局部或全身发挥药效的一种给药方式。相比临床上最常见的注射给药和口服给药，经皮给药能够大大降低痛感、避免肝脏首过效应和避免胃肠道代谢。但是由于皮肤最外层角质层的阻碍，亲水性或大分子量的药物难以有效透过皮肤，导致药物渗透效率低和利用率低。

微针作为一种新型的经皮给药系统，作用于皮肤时，能刺破角质层而不触及神经或血管，减轻患者疼痛，提高使用顺应性，提高药物经皮渗透效率。其中，可溶性微针以可溶解或可生物降解的聚合物或糖类为基质制备得到，刺入皮肤后能在作用部位完全溶解，同时释放药物，以起到药效。而核酸是一种来源广泛、生物相容性好、可生物降解和毒性低的生物材料，以纯核酸作为微针针体的材料，尚未有文献记载。

发明内容

针对现有技术中的不足，本发明的首要目的是提供一种核酸微针。

本发明的第二个目的是提供上述核酸微针的制备方法。

本发明的第三个目的是提供上述核酸微针的应用。

为达到上述首要目的，本发明的解决方案是：

一种核酸微针，其包括基底和基底上的针体，其中，基底的材料选自核酸、透明质酸、透明质酸钠、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠和支链淀粉中的一种以上；

针体的材料为核酸。

在本发明的优选实施例中，核酸选自天然核酸、人工核酸和交联核酸中的一种以上。

在本发明的优选实施例中，天然核酸包括动物组织、植物组织、微生物的DNA或RNA中的至少一种；人工核酸包括体外合成DNA。

在本发明的优选实施例中，交联核酸包括天然核酸之间采用交联剂合成的核酸、人工核酸之间采用交联剂合成的核酸、天然核酸和人工核酸之间采用交联剂合成的核酸。

在本发明的优选实施例中，交联剂选自二乙二醇二丙烯酸酯、聚乙二醇二丙烯酸酯、金属盐和顺铂中的一种以上。

在本发明的优选实施例中，金属盐选自硫酸锌、硝酸锌、氯化锌、溴化锌、硫酸亚铁、硝酸亚铁、氯化亚铁、溴化亚铁、硫酸亚铜、硝酸亚铜、氯化亚铜、溴化亚铜、硫酸铜、硝酸铜、氯化铜、溴化铜、硫酸镁、硝酸镁、氯化镁、溴化镁、硝酸钙、氯化钙、溴化钙、硝酸钡、氯化钡、溴化钡、硝酸锰、氯化锰和溴化锰中的一种以上。

在本发明的优选实施例中，核酸选自脱氧核糖核酸、核糖核酸和核酸类似物中的一种以上。

在本发明的优选实施例中，核酸类似物选自肽核酸和苏糖核酸中一种以上。

在本发明的优选实施例中，针体的半径为1-400μm，高度为100-3000μm，相邻针体的间距为1-2000μm。

在本发明的优选实施例中，针体的形状选自圆锥形、棱锥形、子弹头形和多角星锥形中的一种以上。

在本发明的优选实施例中，针体可装载药物，药物含量为0-1g。

在本发明的优选实施例中，药物选自顺铂、苯达莫斯汀、盐酸阿霉素、柔红霉素、吉西他滨、西达本胺、阿糖胞苷、甲氨蝶呤、培美曲塞、羟基脲、10-羟喜树碱、伊立替康、紫杉醇、长春新碱、盐酸厄洛替尼、甲苯磺酸索拉非尼、阿柔比星、盐酸表阿霉素、喜树碱、秋水鲜碱、5-氟尿嘧啶和吉西他滨中的一种以上。

为达到上述第二个目的，本发明的解决方案是：

一种如上述的核酸微针的制备方法，其包括如下步骤：

(1)、将核酸与水均匀混合制成原液凝胶；

(2)、将原液凝胶加入到微针模具内，通过抽真空或离心的方法使原液凝胶充分填充至微针模具；

(3)、干燥固化后从微针模具中揭下，即得到核酸微针。

在本发明的优选实施例中，步骤(1)中，原液凝胶中核酸的含量为0.5-60wt％。

在本发明的优选实施例中，步骤(2)中，抽真空的负压为(-120)-(-60)kPa，时间为5-60min。

在本发明的优选实施例中，步骤(2)中，离心的转速为1000-20000rpm，时间为3-30min。

在本发明的优选实施例中，步骤(3)中，微针的固化方式选自热固化和冷冻干燥固化中的一种以上。

微针的制备方法除了上述的倒模法，还包括3D打印法和热牵引法。

为达到上述第三个目的，本发明的解决方案是：

一种如上述的核酸微针在医疗美容整形、皮下肿瘤和皮肤病治疗中的应用。

其中，皮肤病包括但不限于非正常瘢痕和银屑病等。

由于采用上述方案，本发明的有益效果是：

第一、本发明的微针以核酸为基质材料，既是一种基于核酸的基因治疗手段，同时又可装载微量药物，突破皮肤角质层的阻碍，使药物在皮肤局部释放；另外，本发明利用倒模法制备得到的核酸微针，其机械性能优良，不易发生折断，能顺利刺入皮肤，从而达到无痛给药效果，进一步可用于医疗美容整形、皮下肿瘤、非正常瘢痕和银屑病等疾病治疗。

第二、本发明的微针材料优选的是天然提取的核酸、以及天然提取的核酸和人工核酸通过交联剂得到的交联核酸，微针刺入皮肤后不引起过敏反应、局部组织反应或全身毒性反应，因此该微针应具备较好的生物相容性。

附图说明

图1为本发明的核酸微针的制备流程图。

图2为本发明的实施例1中核酸微针的形貌图。

具体实施方式

本发明提供了一种核酸微针及其制备方法和应用。

<核酸微针>

本发明的核酸微针包括基底和基底上的针体，其中，基底的材料包括但不限于核酸、透明质酸、透明质酸钠、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠和支链淀粉等；针体的材料为核酸。另外，可溶性微针基质大多还可以采用海藻酸、壳聚糖和聚甲基乙烯醚-马来酸等。

实际上，核酸选自天然核酸、人工核酸和交联核酸中的一种以上。

天然核酸包括动物组织、植物组织、微生物的DNA或RNA中的至少一种；人工核酸包括体外合成DNA。

交联核酸包括天然核酸之间采用交联剂合成的核酸，人工核酸之间采用交联剂合成的核酸，天然核酸和人工核酸之间采用交联剂合成的核酸。

交联剂选自二乙二醇二丙烯酸酯(DEGDA)、聚乙二醇二丙烯酸酯(PEGDA)、金属盐和顺铂中的一种以上。

其中，金属盐包括但不限于硫酸锌、硝酸锌、氯化锌、溴化锌、硫酸亚铁、硝酸亚铁、氯化亚铁、溴化亚铁、硫酸亚铜、硝酸亚铜、氯化亚铜、溴化亚铜、硫酸铜、硝酸铜、氯化铜、溴化铜、硫酸镁、硝酸镁、氯化镁、溴化镁、硝酸钙、氯化钙、溴化钙、硝酸钡、氯化钡、溴化钡、硝酸锰、氯化锰和溴化锰等。

核酸选自脱氧核糖核酸、核糖核酸和核酸类似物中的一种以上。其中，核酸主要由磷酸、戊糖和碱基构成，戊糖为脱氧核糖的核酸被称为脱氧核糖核酸，戊糖为核糖的核酸被称为核糖核酸，核酸类似物是指用一些其他物质替代核酸中磷酸、戊糖、碱基三者的至少一种。

实际上，核酸类似物选自肽核酸和苏糖核酸中一种以上。

针体的半径可以为1-400μm，优选为10-100μm；高度可以为100-3000μm，优选为100-1000μm，更优选为700μm；相邻针体的间距可以为1-2000μm，优选为300-1000μm，更优选为900μm。

针体的形状包括但不限于圆锥形、棱锥形、子弹头形和多角星锥形等。

另外，针体可装载微量药物，药物含量为0-1g，也可以不装载药物；装载药物的核酸微针以药物与核酸配合作为治疗手段，不装载药物的核酸微针以核酸作为治疗手段。

具体地，药物包括但不限于顺铂、苯达莫斯汀、盐酸阿霉素、柔红霉素、吉西他滨、西达本胺、阿糖胞苷、甲氨蝶呤、培美曲塞、羟基脲、10-羟喜树碱、伊立替康、紫杉醇、长春新碱、盐酸厄洛替尼、甲苯磺酸索拉非尼、阿柔比星、盐酸表阿霉素、喜树碱、秋水鲜碱、5-氟尿嘧啶和吉西他滨等。

<核酸微针的制备方法>

如图1所示，本发明的核酸微针的制备方法(倒模法)包括如下步骤：

(1)、将核酸与水均匀混合制成原液凝胶；

(2)、将原液凝胶加入到微针模具内，通过抽真空或离心的方法使原液凝胶充分填充至微针模具；

(3)、干燥固化后从微针模具中揭下，即得到核酸微针。

其中，在步骤(1)中，原液凝胶中核酸的含量可以为0.5-60wt％，优选为5-30wt％。

在步骤(2)中，抽真空的负压可以为(-120)-(-60)kPa，优选为(-120)-(-80)kPa；时间可以为5-60min，优选为30-60min。

在步骤(2)中，离心的转速可以为1000-20000rpm，优选为3000-10000rpm，更优选为4000rpm；时间可以为3-30min，优选为3-20min，更优选为12min。

在步骤(3)中，微针的固化方式包括但不限于热固化和冷冻干燥固化等。

<核酸微针的应用>

本发明的核酸微针可以在医疗美容整形、皮下肿瘤和皮肤病治疗中得以应用。

具体地，皮肤病包括但不限于非正常瘢痕和银屑病等。

以下结合实施例对本发明作进一步的说明。

实施例1：

本实施例的核酸微针的制备方法包括如下步骤：

(1)、提取蓝藻的脱氧核糖核苷酸，制成粉末，称取0.24g粉末，并加入3.76mL去离子水中，搅拌均匀得到含量为6wt％的原液凝胶；

(2)、取0.2g原液凝胶加入到含10×10圆锥形孔阵列(即10×10是指圆锥形孔的阵列，有10行，每行10个，一共100个圆锥形孔)，且孔深为700μm、孔间距为900μm的聚二甲基硅氧烷的微针模具中，在4000rpm离心12min，使原液凝胶充分填充至微针模具；

(3)、在4℃环境中干燥48h，脱模，即得到核酸微针。

利用显微镜观察所制备的核酸微针的形貌，将其结果示于图2中。该微针的针体高度一致为700μm，相邻针体的间距为900μm，底部直径为300μm，且微针具有锋利的针尖，能顺利刺入实验动物(小鼠)的皮肤。

实施例2：

本实施例的核酸微针的制备方法包括如下步骤：

(1)、称取0.32g商用的鲑鱼睾丸DNA，加入3.68mL去离子水中，搅拌均匀得到含量为8wt％的原液凝胶；

(2)、取0.2g原液凝胶加入子弹头形孔阵列的聚二甲基硅氧烷的微针模具中，在4000rpm离心12min，使原液凝胶充分填充至微针模具；

(3)、在4℃环境中干燥48h，脱模，即得到核酸微针。

本实施例的核酸微针同样能够刺入皮肤形成微通道。

实施例3：

本实施例的核酸微针的制备方法包括如下步骤：

(1)、利用扩增引物，以人工合成的质粒DNA为模板，使用滚环扩增试剂盒建立反应体系，进行体外扩增。

(2)、扩增结束后，在(1)中加入无水乙醇使DNA沉淀，并干燥；

(3)、取干燥后的20mg DNA加入到去离子水中，配置成6wt％的DNA原液凝胶；

(4)、在该原液凝胶中加入10μL交联剂PEGDA，充分混匀后立刻加入到子弹头形孔阵列的聚二甲基硅氧烷的微针模具中，在4000rpm下离心12min，使原液凝胶充分填充至微针模具；

(5)、在4℃环境中干燥48h，脱模，即得到核酸微针。

其中，步骤(1)中，扩增引物的序列为：5’-ATGGCCTGAGTCTAGAGCTC-3’。

人工合成质粒DNA的序列为：

正链(5’-3’)：4756nt

CCATGCATTAGTTATTAATAGTAATCAATTACGGGGTCATTAGTTCATAGCCCATATATGGAGTTCCGCGTTACATAACTTACGGTAAATGGCCCGCCTGGCTGACCGCCCAACGACCCCCGCCCATTGACGTCAATAATGACGTATGTTCCCATAGTAACGCCAATAGGGACTTTCCATTGACGTCAATGGGTGGAGTATTTACGGTAAACTGCCCACTTGGCAGTACATCAAGTGTATCATATGCCAAGTACGCCCCCTATTGACGTCAATGACGGTAAATGGCCCGCCTGGCATTATGCCCAGTACATGACCTTATGGGACTTTCCTACTTGGCAGTACATCTACGTATTAGTCATCGCTATTACCATGGTGATGCGGTTTTGGCAGTACATCAATGGGCGTGGATAGCGGTTTGACTCACGGGGATTTCCAAGTCTCCACCCCATTGACGTCAATGGGAGTTTGTTTTGGCACCAAAATCAACGGGACTTTCCAAAATGTCGTAACAACTCCGCCCCATTGACGCAAATGGGCGGTAGGCGTGTACGGTGGGAGGTCTATATAAGCAGAGCTGGTTTAGTGAACCGTCAGATCCGCTAGCGCTACCGGACTCAGATCTCGAGCTCAAGCTTCGAATTCTGCAGTCGACGGTACCGCGGGCCCGGGATCCACCGGTCGCCACCATGGTGAGCAAGGGCGAGGAGCTGTTCACCGGGGTGGTGCCCATCCTGGTCGAGCTGGACGGCGACGTAAACGGCCACAAGTTCAGCGTGTCCGGCGAGGGCGAGGGCGATGCCACCTACGGCAAGCTGACCCTGAAGTTCATCTGCACCACCGGCAAGCTGCCCGTGCCCTGGCCCACCCTCGTGACCACCCTGACCTACGGCGTGCAGTGCTTCAGCCGCTACCCCGACCACATGAAGCAGCACGACTTCTTCAAGTCCGCCATGCCCGAAGGCTACGTCCAGGAGCGCACCATCTTCTTCAAGGACGACGGCAACTACAAGACCCGCGCCGAGGTGAAGTTCGAGGGCGACACCCTGGTGAACCGCATCGAGCTGAAGGGCATCGACTTCAAGGAGGACGGCAACATCCTGGGGCACAAGCTGGAGTACAACTACAACAGCCACAACGTCTATATCATGGCCGACAAGCAGAAGAACGGCATCAAGGTGAACTTCAAGATCCGCCACAACATCGAGGACGGCAGCGTGCAGCTCGCCGACCACTACCAGCAGAACACCCCCATCGGCGACGGCCCCGTGCTGCTGCCCGACAACCACTACCTGAGCACCCAGTCCGCCCTGAGCAAAGACCCCAACGAGAAGCGCGATCACATGGTCCTGCTGGAGTTCGTGACCGCCGCCGGGATCACTCTCGGCATGGACGAGCTGTACAAGTAAAGCGGCCGCGACTCTAGATCATAATCAGCCATACCACATTTGTAGAGGTTTTACTTGCTTTAAAAAACCTCCCACACCTCCCCCTGAACCTGAAACATAAAATGAATGCAATTGTTGTTGTTAACTTGTTTATTGCAGCTTATAATGGTTACAAATAAAGCAATAGCATCACAAATTTCACAAATAAAGCATTTTTTTCACTGCGGATCCACGCGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGACCGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTTCTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAGGGTTCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTTGGGTGATGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTGGAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTGGTTTAACACTCAGAATTCGTAATCATGGTCATAGCTGTTTCCTGTGTGAAATTGTTATCCGCTCACAATTCCACACAACATACGAGCCGGAAGCATAAAGTGTAAAGCCTGGGGTGCCTAATGAGTGAGCTAACTCACATTAATTGCGTTGCGCTCACTGCCCGCTTTCCAGTCGGGAAACCTGTCGTGCCAGCTGCATTAATGAATCGGCCAACGCGCGGGGAGAGGCGGTTTGCGTATTGGGCGCTCTTCCGCTTCCTCGCTCACTGACTCGCTGCGCTCGGTCGTTCGGCTGCGGCGAGCGGTATCAGCTCACTCAAAGGCGGTAATACGGTTATCCACAGAATCAGGGGATAACGCAGGAAAGAACATGTGAGCAAAAGGCCAGCAAAAGGCCAGGAACCGTAAAAAGGCCGCGTTGCTGGCGTTTTTCCATAGGCTCCGCCCCCCTGACGAGCATCACAAAAATCGACGCTCAAGTCAGAGGTGGCGAAACCCGACAGGACTATAAAGATACCAGGCGTTTCCCCCTGGAAGCTCCCTCGTGCGCTCTCCTGTTCCGACCCTGCCGCTTACCGGATACCTGTCCGCCTTTCTCCCTTCGGGAAGCGTGGCGCTTTCTCATAGCTCACGCTGTAGGTATCTCAGTTCGGTGTAGGTCGTTCGCTCCAAGCTGGGCTGTGTGCACGAACCCCCCGTTCAGCCCGACCGCTGCGCCTTATCCGGTAACTATCGTCTTGAGTCCAACCCGGTAAGACACGACTTATCGCCACTGGCAGCAGCCACTGGTAACAGGATTAGCAGAGCGAGGTATGTAGGCGGTGCTACAGAGTTCTTGAAGTGGTGGCCTAACTACGGCTACACTAGAAGAACAGTATTTGGTATCTGCGCTCTGCTGAAGCCAGTTACCTTCGGAAAAAGAGTTGGTAGCTCTTGATCCGGCAAACAAACCACCGCTGGTAGCGGTGGTTTTTTTGTTTGCAAGCAGCAGATTACGCGCAGAAAAAAAGGATCTCAAGAAGATCCTTTGATCTTTTCTACGGGGTCTGACGCTCAGTGGAACGAAAACTCACGTTAAGGGATTTTGGTCATGAGATTATCAAAAAGGATCTTCACCTAGATCCTTTTAAATTAAAAATGAAGTTTTAAATCAATCTAAAGTATATATGAGTAAACTTGGTCTGACAGTTACCAATGCTTAATCAGTGAGGCACCTATCTCAGCGATCTGTCTATTTCGTTCATCCATAGTTGCCTGACTCCCCGTCGTGTAGATAACTACGATACGGGAGGGCTTACCATCTGGCCCCAGTGCTGCAATGATACCGCGAGACCCACGCTCACCGGCTCCAGATTTATCAGCAATAAACCAGCCAGCCGGAAGGGCCGAGCGCAGAAGTGGTCCTGCAACTTTATCCGCCTCCATCCAGTCTATTAATTGTTGCCGGGAAGCTAGAGTAAGTAGTTCGCCAGTTAATAGTTTGCGCAACGTTGTTGCCATTGCTACAGGCATCGTGGTGTCACGCTCGTCGTTTGGTATGGCTTCATTCAGCTCCGGTTCCCAACGATCAAGGCGAGTTACATGATCCCCCATGTTGTGCAAAAAAGCGGTTAGCTCCTTCGGTCCTCCGATCGTTGTCAGAAGTAAGTTGGCCGCAGTGTTATCACTCATGGTTATGGCAGCACTGCATAATTCTCTTACTGTCATGCCATCCGTAAGATGCTTTTCTGTGACTGGTGAGTACTCAACCAAGTCATTCTGAGAATAGTGTATGCGGCGACCGAGTTGCTCTTGCCCGGCGTCAATACGGGATAATACCGCGCCACATAGCAGAACTTTAAAAGTGCTCATCATTGGAAAACGTTCTTCGGGGCGAAAACTCTCAAGGATCTTACCGCTGTTGAGATCCAGTTCGATGTAACCCACTCGTGCACCCAACTGATCTTCAGCATCTTTTACTTTCACCAGCGTTTCTGGGTGAGCAAAAACAGGAAGGCAAAATGCCGCAAAAAAGGGAATAAGGGCGACACGGAAATGTTGAATACTCATACTCTTCCTTTTTCAATATTATTGAAGCATTTATCAGGGTTATTGTCTCATGAGCGGATACATATTTGAATGTATTTAGAAAAATAAACAAATAGGGGTTCCGCGCACATTTCCCCGAAAAGTGCCACCTGACGTCTAAGAAACCATTATTATCATGACATTAACCTATAAAAATAGGCGTATCACGAGGCCCTTTCGTCTCGCGCGTTTCGGTGATGACGGTGAAAACCTCTGACACATGCAGCTCCCGGAGACGGTCACAGCTTGTCTGTAAGCGGATGCCGGGAGCAGACAAGCCCGTCAGGGCGCGTCAGCGGGTGTTGGCGGGTGTCGGGGCTGGCTTAACTATGCGGCATCAGAGCAGATTGTACTGAGAGTGCACCATATGACGCGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGACCGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTTCTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAGGGTTCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTTGGGTGATGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTGGAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTGGAACAACACTCAACCCTATCTCGGGCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGGGTA。

负链(5’-3’)：4756nt

TACCCCGAAATCGGCAAAATCCCTTATAAATCAAAAGAATAGCCCGAGATAGGGTTGAGTGTTGTTCCAGTTTGGAACAAGAGTCCACTATTAAAGAACGTGGACTCCAACGTCAAAGGGCGAAAAACCGTCTATCAGGGCGATGGCCCACTACGTGAACCATCACCCAAATCAAGTTTTTTGGGGTCGAGGTGCCGTAAAGCACTAAATCGGAACCCTAAAGGGAGCCCCCGATTTAGAGCTTGACGGGGAAAGCCGGCGAACGTGGCGAGAAAGGAAGGGAAGAAAGCGAAAGGAGCGGGCGCTAGGGCGCTGGCAAGTGTAGCGGTCACGCTGCGCGTAACCACCACACCCGCCGCGCTTAATGCGCCGCTACAGGGCGCGTCATATGGTGCACTCTCAGTACAATCTGCTCTGATGCCGCATAGTTAAGCCAGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGACGCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGTGACCGTCTCCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGGTTTTCACCGTCATCACCGAAACGCGCGAGACGAAAGGGCCTCGTGATACGCCTATTTTTATAGGTTAATGTCATGATAATAATGGTTTCTTAGACGTCAGGTGGCACTTTTCGGGGAAATGTGCGCGGAACCCCTATTTGTTTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAGACAATAACCCTGATAAATGCTTCAATAATATTGAAAAAGGAAGAGTATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCGCCCTTATTCCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAACGCTGGTGAAAGTAAAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATCGAACTGGATCTCAACAGCGGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTTTTCCAATGATGAGCACTTTTAAAGTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTATTGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGCCGCATACACTATTCTCAGAATGACTTGGTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTTACGGATGGCATGACAGTAAGAGAATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACTGCGGCCAACTTACTTCTGACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCACAACATGGGGGATCATGTAACTCGCCTTGATCGTTGGGAACCGGAGCTGAATGAAGCCATACCAAACGACGAGCGTGACACCACGATGCCTGTAGCAATGGCAACAACGTTGCGCAAACTATTAACTGGCGAACTACTTACTCTAGCTTCCCGGCAACAATTAATAGACTGGATGGAGGCGGATAAAGTTGCAGGACCACTTCTGCGCTCGGCCCTTCCGGCTGGCTGGTTTATTGCTGATAAATCTGGAGCCGGTGAGCGTGGGTCTCGCGGTATCATTGCAGCACTGGGGCCAGATGGTAAGCCCTCCCGTATCGTAGTTATCTACACGACGGGGAGTCAGGCAACTATGGATGAACGAAATAGACAGATCGCTGAGATAGGTGCCTCACTGATTAAGCATTGGTAACTGTCAGACCAAGTTTACTCATATATACTTTAGATTGATTTAAAACTTCATTTTTAATTTAAAAGGATCTAGGTGAAGATCCTTTTTGATAATCTCATGACCAAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGATCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAACAAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACTCTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTTCTTCTAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATACCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGTCTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCTGAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACTGAGATACCTACAGCGTGAGCTATGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAGGCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGCTTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTGACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAACGCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACATGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGAGTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGCGAGGAAGCGGAAGAGCGCCCAATACGCAAACCGCCTCTCCCCGCGCGTTGGCCGATTCATTAATGCAGCTGGCACGACAGGTTTCCCGACTGGAAAGCGGGCAGTGAGCGCAACGCAATTAATGTGAGTTAGCTCACTCATTAGGCACCCCAGGCTTTACACTTTATGCTTCCGGCTCGTATGTTGTGTGGAATTGTGAGCGGATAACAATTTCACACAGGAAACAGCTATGACCATGATTACGAATTCTGAGTGTTAAACCAGTTTGGAACAAGAGTCCACTATTAAAGAACGTGGACTCCAACGTCAAAGGGCGAAAAACCGTCTATCAGGGCGATGGCCCACTACGTGAACCATCACCCAAATCAAGTTTTTTGGGGTCGAGGTGCCGTAAAGCACTAAATCGGAACCCTAAAGGGAGCCCCCGATTTAGAGCTTGACGGGGAAAGCCGGCGAACGTGGCGAGAAAGGAAGGGAAGAAAGCGAAAGGAGCGGGCGCTAGGGCGCTGGCAAGTGTAGCGGTCACGCTGCGCGTAACCACCACACCCGCCGCGCTTAATGCGCCGCTACAGGGCGCGTGGATCCGCAGTGAAAAAAATGCTTTATTTGTGAAATTTGTGATGCTATTGCTTTATTTGTAACCATTATAAGCTGCAATAAACAAGTTAACAACAACAATTGCATTCATTTTATGTTTCAGGTTCAGGGGGAGGTGTGGGAGGTTTTTTAAAGCAAGTAAAACCTCTACAAATGTGGTATGGCTGATTATGATCTAGAGTCGCGGCCGCTTTACTTGTACAGCTCGTCCATGCCGAGAGTGATCCCGGCGGCGGTCACGAACTCCAGCAGGACCATGTGATCGCGCTTCTCGTTGGGGTCTTTGCTCAGGGCGGACTGGGTGCTCAGGTAGTGGTTGTCGGGCAGCAGCACGGGGCCGTCGCCGATGGGGGTGTTCTGCTGGTAGTGGTCGGCGAGCTGCACGCTGCCGTCCTCGATGTTGTGGCGGATCTTGAAGTTCACCTTGATGCCGTTCTTCTGCTTGTCGGCCATGATATAGACGTTGTGGCTGTTGTAGTTGTACTCCAGCTTGTGCCCCAGGATGTTGCCGTCCTCCTTGAAGTCGATGCCCTTCAGCTCGATGCGGTTCACCAGGGTGTCGCCCTCGAACTTCACCTCGGCGCGGGTCTTGTAGTTGCCGTCGTCCTTGAAGAAGATGGTGCGCTCCTGGACGTAGCCTTCGGGCATGGCGGACTTGAAGAAGTCGTGCTGCTTCATGTGGTCGGGGTAGCGGCTGAAGCACTGCACGCCGTAGGTCAGGGTGGTCACGAGGGTGGGCCAGGGCACGGGCAGCTTGCCGGTGGTGCAGATGAACTTCAGGGTCAGCTTGCCGTAGGTGGCATCGCCCTCGCCCTCGCCGGACACGCTGAACTTGTGGCCGTTTACGTCGCCGTCCAGCTCGACCAGGATGGGCACCACCCCGGTGAACAGCTCCTCGCCCTTGCTCACCATGGTGGCGACCGGTGGATCCCGGGCCCGCGGTACCGTCGACTGCAGAATTCGAAGCTTGAGCTCGAGATCTGAGTCCGGTAGCGCTAGCGGATCTGACGGTTCACTAAACCAGCTCTGCTTATATAGACCTCCCACCGTACACGCCTACCGCCCATTTGCGTCAATGGGGCGGAGTTGTTACGACATTTTGGAAAGTCCCGTTGATTTTGGTGCCAAAACAAACTCCCATTGACGTCAATGGGGTGGAGACTTGGAAATCCCCGTGAGTCAAACCGCTATCCACGCCCATTGATGTACTGCCAAAACCGCATCACCATGGTAATAGCGATGACTAATACGTAGATGTACTGCCAAGTAGGAAAGTCCCATAAGGTCATGTACTGGGCATAATGCCAGGCGGGCCATTTACCGTCATTGACGTCAATAGGGGGCGTACTTGGCATATGATACACTTGATGTACTGCCAAGTGGGCAGTTTACCGTAAATACTCCACCCATTGACGTCAATGGAAAGTCCCTATTGGCGTTACTATGGGAACATACGTCATTATTGACGTCAATGGGCGGGGGTCGTTGGGCGGTCAGCCAGGCGGGCCATTTACCGTAAGTTATGTAACGCGGAACTCCATATATGGGCTATGAACTAATGACCCCGTAATTGATTACTATTAATAACTAATGCATGG。

步骤(1)中反应体系的成分包含：

本实施例的核酸微针具有锋利的针尖，用拇指按压作用于小鼠背部皮肤，发现其能够刺入皮肤形成微通道。

<实验>

利用实施例1制备得到的核酸微针进行如下实验：

使用消毒酒精对实验动物(小鼠)背部区域进行擦拭消毒，将实施例1的核酸微针利用拇指按压刺入小鼠皮肤，按压持续30秒后取下，观察微针作用处小鼠皮肤的形貌及状态，可明显观察到形成了10×10微通道阵列。连续观察1小时，可发现微通道阵列自然愈合，且核酸微针作用处的皮肤未发现发红和肿胀现象。

上述对实施例的描述是为了便于该技术领域的普通技术人员能理解和使用本发明。熟悉本领域技术人员显然可以容易的对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中，而不必经过创造性的劳动。因此，本发明不限于上述实施例。本领域技术人员根据本发明的原理，不脱离本发明的范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。