药物组合物

技术领域

本发明涉及包含透明质酸衍生物的药物组合物。

背景技术

作为由关节疼痛、关节变性引起的功能障碍的骨关节炎(以下，本说明书中也称为“OA”。)是全世界最普遍的关节疾病，特别是成为使高龄者的日常生活出现问题的身体障碍的主要原因之一。另外，与OA同样地，作为关节肿胀且伴有疼痛的疾病，已知作为多发性关节炎的类风湿性关节炎(以下，本说明书中也称为“RA”。)已知。对于RA，若病状长期持续且症状得以发展，则软骨、骨受到破坏而引起变性变形，从而导致使关节活动的范围变窄等日常生活上出现问题的身体障碍。

目前，作为骨关节炎、类风湿性关节炎等关节炎的药物，使用了利用透明质酸、该衍生物的制剂。透明质酸制剂通常被制成注射剂，目的在于通过透明质酸所具有的润滑作用、冲击吸收作用、软骨代谢改善作用等改善由关节炎所致的功能障碍及抑制疼痛，直接给予至作为患部的膝盖、肩等关节。作为已产品化的透明质酸制剂，例如有包含纯化透明质酸钠作为有效成分者(例如，Artz(注册商标)、Suvenyl(注册商标))。需要以每周1次的频率连续给予3～5次该制剂。

另外，将交联透明质酸作为有效成分的制剂中，已知：有以每周1次的频率连续给予3次者(例如，Synvisc(注册商标))、以1次给予就完成治疗的单次给药用者(例如，Synvisc-One(注册商标)、Gel-One(注册商标)、MONOVISC(注册商标))。

另一方面，类固醇、非类固醇系的抗炎症化合物已知是具有速效性的试剂，也用于以缓解由OA、RA引起的关节疼痛等为目的的治疗。例如，作为类固醇的曲安奈德以类风湿性关节炎等关节疾病作为治疗对象，市售有进行关节腔内注射的药剂，治疗需要每隔1～2周进行给药。另外，非类固醇系抗炎症化合物中，例如已知含有双氯芬酸钠作为有效成分的软膏、经口给药剂，为了表现出抗炎症效果，而需要每天给予多次。

也已知将透明质酸或其衍生物与类固醇或非类固醇系抗炎症化合物的混合物或结合物作为有效成分。例如将交联透明质酸与去炎松六丙酮化合物的混合物(CINGAL(注册商标))作为单次给药用的试剂而已产品化。另外，还已知透明质酸或其衍生物与类固醇或非类固醇系抗炎症化合物连接而成的化合物。例如专利文献1和2中记载了抗炎症化合物通过间隔基而导入透明质酸中的衍生物。这些以具有速效的缓和疼痛和通过改善功能障碍而缓和长期的疼痛这两者为目标，但仍处于开发阶段，至今尚未获得许可的药上市。

另外，作为另一个例子，以具有速效的缓和疼痛和通过改善功能障碍而缓和长期的疼痛这两者为目标，进行了在透明质酸的糖链中以一定的比率导入了作为抗炎症化合物的双氯芬酸的结合体(以下有时称为“Dic-HA”。)的开发。然而，Dic-HA也仍处于开发阶段。

作为透明质酸的稳定化技术，专利文献3中，公开了将含碘还原剂和/或含硫还原剂添加至透明质酸中的方法。另外，专利文献4中，公开了包含透明质酸的水性组合物通过山梨醇而被稳定化。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第2005/066214号

专利文献2：国际公开第2015/005458号

专利文献3：日本特开平10-212303号公报

专利文献4：国际公开第2017/131130号

发明内容

由Dic-HA生成的双氯芬酸是低分子化合物，因此不易滞留在给药部位(例如，关节内的滑膜)，在早期转移至淋巴、血液中等给药部位之外。因此，从药效的长期持续性这样的观点出发，不优选在向生物体内给予之前的药物组合物中生成双氯芬酸。然而，由Dic-HA生成双氯芬酸的行为并不明确，只阻止生成在实用上是否必要，如有必要，又该如何阻止是不清楚的。

本发明人等在进行开发时确认了含Dic-HA组合物中存在Dic-HA的分解物。此外，对分解物进行了解析，结果证实了由Dic-HA生成的分子不仅以双氯芬酸的形式，还以双氯芬酸内酰胺的形式包含于组合物中。另外，证实了双氯芬酸内酰胺的蓄积量根据保存期间、加热处理等而增大。

本发明人等进行研究时发现：双氯芬酸本身为具有消炎效果的生理活性物质，但作为其内酰胺体的双氯芬酸内酰胺的Cox-2抑制活性为双氯芬酸的1/100左右，不被认为是具有生理活性的消炎性物质。由此，更加明确地发现提供抑制生理非活性的双氯芬酸内酰胺的生成以及双氯芬酸内酰胺的蓄积得到抑制的组合物的意义。

作为透明质酸的稳定化技术，专利文献3中，公开了将含碘还原剂和/或含硫还原剂添加至透明质酸中的方法，但这些还原剂用于抑制透明质酸的分子量降低，并未记载也未启示关于抑制由透明质酸结合物生成双氯芬酸。另外，专利文献4中，公开了包含透明质酸的水性组合物通过山梨醇而被稳定化的内容，但此处作为指标的是抑制该水性组合物的粘度降低，此处所谓的稳定化理解为透明质酸的分子量降低的抑制。即，既未公开也未启示有关抑制由Dic-HA那样的透明质酸结合物生成双氯芬酸成分。

如上所述，虽然有透明质酸的分子量降低抑制相关的稳定化技术的报道，但对于抑制由Dic-HA的分解所致的双氯芬酸内酰胺的生成的技术，尚不存在任何见解。本发明人发现：关于在作为药物向患者给予的前阶段抑制Dic-HA的分解(抑制双氯芬酸内酰胺的蓄积)，且在给药后的患者体内希望通过Dic-HA的缓释分解而缓释具有作为消炎剂的生理活性的双氯芬酸这样的与分解性能相关的相反课题，但现状是现有技术并未给出任何解决方针。

本发明人等发现：通过在含Dic-HA组合物中使某种化合物共存、或提高含Dic-HA水性组合物的过滤性，从而可以抑制含Dic-HA组合物中的双氯芬酸内酰胺的蓄积量。

本发明的一个方面涉及如下药物组合物，其含有下述式(1)所示的化合物，还含有成分(A)，所述成分(A)为选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

本发明的另一方面涉及如下水性组合物，其包含下述式(1)所示的化合物，且最大处理量(V

其中，式(1)中，a为0.01以上且0.7以下，a+b为1，n为25以上且25000以下的整数，各二糖结构单元的排列任选为无规或嵌段状，在各二糖结构单元中R各自独立地为羧基或羧酸盐基团。

本说明书中，也有时将上述式(1)所示的化合物表述为“透明质酸衍生物”。另外，式(1)中，将以a的比率存在的二糖结构单元称为“双氯芬酸导入二糖结构单元”，将以b的比率存在的二糖结构单元称为“透明质酸二糖结构单元”(即，N-乙酰基-D-葡糖胺与D-葡萄糖醛酸或其盐以β1,3键合的的结构)。另外，“双氯芬酸导入二糖结构单元”与“透明质酸二糖结构单元”并无特别区分，也简称为“二糖结构单元”。

本说明书中，也将成分(A)和过滤性改善剂总称为“添加成分”。

作为更具体的例子，本发明涉及以下的[1]至[23]。

[1]一种药物组合物，其为含有式(1)所示的化合物及成分(A)药物组合物，前述成分(A)为选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

[2]根据前述[1]所述的药物组合物，其用于关节疾病治疗。

[3]一种套组，其包含将前述[1]或[2]所述的药物组合物填充于注射筒内的注射器。

[4]一种套组，其包含小瓶和注射器，所述小瓶包含前述[1]或[2]所述的药物组合物。

[5]一种制造含有式(1)所示的化合物的药物组合物的方法，其包括使式(1)所示的化合物与前述成分(A)共存的工序。

[6]一种抑制由式(1)所示的化合物生成双氯芬酸内酰胺的方法，其包括使式(1)所示的化合物与前述成分(A)共存的工序。

[7]成分(A)在制造含有式(1)所示的化合物的药物组合物中的应用，其包括使前述成分(A)与前述式(1)所示的化合物共存的工序，前述药物组合物用于关节疾病治疗，前述成分(A)为抑制由式(1)所示的化合物生成双氯芬酸内酰胺的化合物。

[8]一种成分(A)，其为用于治疗人的关节疾病的成分(A)，且与式(1)所示的化合物一起用作关节疾病治疗用药物组合物的构成成分。

[9]一种人的关节疾病治疗方法，其包括将药物组合物给予至关节疾病患者的关节的工序，前述药物组合物含有有效量的式(1)所示的化合物和成分(A)。

[10]一种水性组合物，其包含式(1)所示的化合物，且最大处理量(V

算式A：

t/V＝at+b

算式B：

V

其中，上述算式A和B中，t为过滤时间(分钟)，V为单位有效过滤面积的总过滤量(g/cm

[11]根据前述[10]所述的水性组合物，其还包含过滤性改善剂。

[12]根据前述[11]所述的水性组合物，其中，前述过滤性改善剂选自由聚亚烷基二醇、C

[13]根据前述[11]或[12]所述的水性组合物，其中，在下述条件下测得的双氯芬酸内酰胺的相对量为0.9以下(例如0.8以下或0.75以下)：

分别将使式(1)所示的化合物和过滤性改善剂共存的试验组合物、及除了不含过滤性改善剂以外与上述组成相同的对照组合物在60℃的恒温槽中保存1周，然后利用高效液相色谱法测定蓄积于试验组合物和对照组合物中的双氯芬酸内酰胺的量，计算出将蓄积于对照组合物中的双氯芬酸内酰胺量设为1时的蓄积于试验组合物中的双氯芬酸内酰胺量的相对量。

[14]根据前述[11]～[13]中任一项所述的水性组合物，其中，在下述条件下测得的双氯芬酸的相对量低于1(例如0.95以下或0.9以下)：

分别将使式(1)所示的化合物和过滤性改善剂共存的试验组合物、及除了不含过滤性改善剂以外与上述组成相同的对照组合物在60℃的恒温槽中保存1周，然后利用高效液相色谱法测定蓄积于试验组合物和对照组合物中的双氯芬酸的量，计算出将蓄积于对照组合物中的双氯芬酸量设为1时的蓄积于试验组合物中的双氯芬酸量的相对量。

[15]根据前述[10]～[14]中任一项所述的水性组合物，其用于关节疾病治疗。

[16]根据前述[10]～[15]中任一项所述的水性组合物，其以0.01w/v％以上且80w/v％以下、0.1w/v％以上且10w/v％以下、0.5w/v％以上且5w/v％以下或1w/v％的浓度含有式(1)所示的化合物。

[17]根据前述[11]～[16]中任一项所述的水性组合物，其以0.01w/v％以上且60w/v％以下、0.1w/v％以上且30w/v％以下、1w/v％以上且15w/v％以下或2w/v％以上且低于10w/v％的浓度含有过滤性改善剂。

[18]根据前述[10]～[17]中任一项所述的水性组合物，其以10w/v％以上且99.98w/v％以下、60w/v％以上且99.8w/v％以下、80w/v％以上且98.5w/v％以下或超过89w/v％且为97w/v％以下的浓度含有水。

[19]一种套组，其包含将前述[10]～[18]中任一项所述的水性组合物填充于注射筒内的注射器。

[20]一种套组，其包含小瓶和注射器，所述小瓶包含前述[10]～[18]中任一项所述的水性组合物。

[21]一种制造含有式(1)所示的化合物的药物组合物的方法，其包括使式(1)所示的化合物与过滤性改善剂共存的工序。

[22]一种改善式(1)所示的化合物的过滤性的方法，其包括使式(1)所示的化合物与过滤性改善剂共存的工序。

[23]一种人的关节疾病治疗方法，其包括将前述[10]～[18]中任一项所述的水性组合物给予至关节疾病患者的关节的工序。

具体实施方式

根据本发明，提供双氯芬酸内酰胺的蓄积量得到抑制的含Dic-HA药物组合物。

以下，列举例子对用于实施本发明的方式进行说明。

本发明的一个方面涉及如下药物组合物，其含有下述式(1)所示的化合物和成分(A)，所述成分(A)为选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

(式(1)中，a为0.01以上且0.7以下，a+b为1，n为25以上且25000以下的整数，各二糖结构单元的排列任选为无规或嵌段状，在各二糖结构单元中R各自独立地为羧基或羧酸盐基团)。

本发明的另一方面为如下药物组合物，其含有式(1)所示的化合物和添加成分，且双氯芬酸的生成和/或蓄积得到了抑制。

本发明的另一方面涉及制造含有式(1)所示的化合物的药物组合物的方法，所述方法包括使式(1)所示的化合物与如下成分(A)共存的工序，所述成分(A)为选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

本发明的另一方面涉及抑制由式(1)所示的化合物生成双氯芬酸内酰胺的方法，所述方法包括使式(1)所示的化合物与选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

本发明的另一方面涉及选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

本发明的另一方面涉及用于治疗人的关节疾病的至少1种化合物，前述至少1种化合物选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

本发明的另一方面涉及人的关节疾病治疗方法，其包括将药物组合物给予至关节疾病患者的关节的工序，前述药物组合物含有有效量的式(1)所示的化合物和至少1种化合物，前述至少1种化合物选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

本发明的另一方面涉及药物组合物的保存方法，其为式(1)所示的化合物的保存方法，所述药物组合物为保存中的双氯芬酸内酰胺的生成和/或蓄积得到抑制的药物组合物，且包含选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

本发明的另一方面涉及套组，其包含药物组合物和注射器，所述药物组合物含有式(1)所示的化合物和至少1种化合物；至少1种化合物选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

根据本发明的一个方面，在含有式(1)所示的化合物的药物组合物中，通过使选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

根据本发明的一个方面，在含有式(1)所示的化合物的药物组合物中，通过使选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

根据本发明的一个方面，提供长期稳定性优异、能保存期间得到延长的药物组合物。该药物组合物可以以注射用的水性组合物的形式保存在容器(例如，小瓶、注射筒等)中，可抑制保存期间双氯芬酸内酰胺的经时蓄积。由此，可有效地供给药物组合物，减少制造/保管等的成本，作为结果成为对于需要该药物组合物的患者的福音。

本说明书中“羧酸盐基团”是羧酸根[-C(＝O)-O-]与阳离子形成盐的结构，可以是药学上允许的盐的形态。形成羧酸盐的阳离子只要能够与羧酸根[-C(＝O)-O-]形成盐就没有特别限定，例如可以示例出钠离子、钾离子、钙离子、镁离子等。在优选的一实施方式中，羧酸盐基团用-CO

本说明书中“药学上允许的盐”可以示例出钠盐、钾盐、钙盐、镁盐、钡盐那样的金属盐；铵盐；甲胺盐、二乙胺盐、乙烯二胺盐、环己胺盐、乙醇胺盐那样的胺盐；盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、磷酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐那样的无机酸盐；乙酸盐、邻苯二甲酸盐、富马酸盐、马来酸盐、草酸盐、琥珀酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、酒石酸盐、酒石酸氢盐、苹果酸盐那样的有机酸盐等，但不限定于这些。

本说明书中“双氯芬酸成分”是作为将双氯芬酸和双氯芬酸内酰胺个别或总称来使用。双氯芬酸成分量可利用使用了实施例中记载的高效液相色谱(HPLC)的方法进行测定。

本说明书中，成分(A)为选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

本说明书中，“使共存”是指使对象物质彼此处于可以接触的状态。例如，可以通过在式(1)所示的化合物中添加成分(A)来进行，也可以通过在成分(A)中添加式(1)所示的化合物来进行。另外，也可以通过将式(1)所示的化合物与成分(A)混合来进行。

用作成分(A)的盐与上述“药学上允许的盐”同样没有特别限定，例如可以示例出上述那样的药学上允许的盐等。

一实施方式中，成分(A)例如在包含式(1)所示的化合物的组合物中，具有抑制双氯芬酸内酰胺的蓄积和/或生成的功能。

在优选的一实施方式中，成分(A)在包含式(1)所示的化合物的组合物中进而采用抑制双氯芬酸的蓄积和/或生成者。

本说明书中，双氯芬酸成分的生成和蓄积的“抑制”是指减少双氯芬酸成分的生成量和/或蓄积量。

双氯芬酸成分的蓄积和/或生成可以通过如下方式求出：将使式(1)所示的化合物与成分(A)共存的水性组合物在60℃的恒温槽中保存1周后，测定蓄积于水性组合物中的双氯芬酸成分的量，从而求出。由成分(A)带来的双氯芬酸成分的蓄积抑制效果和/或生成抑制效果如实施例中更具体记载所述，除了不包含成分(A)以外，在相同条件下保存同一组成的水性组合物，以将蓄积于该水性组合物的双氯芬酸成分量设为1时的相对量的形式，计算出试验水性组合物中的双氯芬酸成分量，由此可以进行评价(该相对量小于1时，抑制了双氯芬酸成分的蓄积和/或生成。)。利用该方法，能够判定包含式(1)所示的化合物的水性组合物是否抑制了双氯芬酸成分的蓄积和/或生成。

在上述条件下计算出的双氯芬酸内酰胺的相对量优选为0.9以下，更优选为0.8以下，进一步优选为0.75以下。另外，在上述条件下计算出的双氯芬酸的相对量优选低于1，更优选为0.95以下，进一步优选为0.9以下。

组合物可以单独包含成分(A)的一种或包含两种以上。

包含两种以上时的成分(A)的组合也没有特别限定，例如可列举出将聚亚烷基二醇与非离子性表面活性剂、聚亚烷基二醇与羟基烷基化环糊精之类的两种成分(A)组合而成者；将聚亚烷基二醇、非离子性表面活性剂和羟基烷基化环糊精的三种成分(A)组合而成者。如后述的实施例所述，通过使多个成分(A)共存，从而可以期待更高的双氯芬酸成分的抑制效果。

另外，本发明的另一方面为使式(1)所示的化合物与抑制双氯芬酸成分的蓄积和/或生成的成分共存的水性组合物，其在60℃的恒温槽中保存1周后的双氯芬酸内酰胺的相对量为0.9以下，更优选为该相对量为0.75以下。其中，前述相对量是在同一条件下保存除不包含抑制双氯芬酸成分的蓄积和/或生成的该成分以外相同的水性组合物(对照组合物)，将蓄积于该对照组合物中的双氯芬酸内酰胺的量设为1时的值。

根据本发明人等的研究，明确了：成分(A)也可以用作双氯芬酸成分的生成抑制剂、组合物中的双氯芬酸内酰胺的蓄积抑制剂、或如后所述含有式(1)所示的化合物的水性组合物的过滤性改善剂。

一实施方式中，在组合物中以0.01w/v％以上且60w/v％以下、优选以0.1w/v％以上且30w/v％以下、更优选以1w/v％以上且15w/v％以下、特别优选以2w/v％以上且低于10w/v％的比率含有成分(A)。

此处，双氯芬酸具有下述的式(2)所示的结构，双氯芬酸内酰胺具有下述的式(3)所示的结构。

本说明书中，“非离子性表面活性剂”是本领域技术人员通常理解的非离子性表面活性剂。

作为非离子性表面活性剂的非限定性的例子，可以列举出聚山梨醇酯(聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯80等)、烷基酚聚氧乙烯醚(辛基酚聚氧乙烯醚(Triton(商标)X-100)、壬基酚聚氧乙烯醚等)、烷基葡萄糖苷(癸基葡萄糖苷、月桂基葡萄糖苷、辛基葡萄糖苷等)、聚氧乙二醇醚(八乙二醇单十二烷基醚、五亚乙基单十二烷基醚、聚氧乙烯十二烷基醚、聚氧乙烯十六烷基醚等)、聚氧乙二醇烷基酚醚(聚氧乙二醇辛基酚醚、聚氧乙二醇壬基酚醚等)、聚氧乙烯月桂醚、聚氧丙二醇烷基醚、甘油烷基酯、聚氧乙二醇失水山梨糖醇烷基酯、单癸酰基蔗糖、椰油酰胺、十二烷基二甲基氧化胺、及烷氧基化醇(乙氧基化醇、丙氧基化醇、乙氧基化丙氧基化醇等)、及药学上允许的它们的盐。

一实施方式中，聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、TritonX-100、辛基葡萄糖苷、及药学上允许的它们的盐作为优选的非离子性表面活性剂而使用。

本说明书中，“羟基烷基化环糊精”是本领域技术人员通常理解的经羟基烷基化的环糊精。

作为羟基烷基化环糊精的非限定性的例子，可以列举出羟基乙基-β-环糊精(HE-β-CD)、及羟基丙基-β-环糊精(HP-β-CD)。一实施方式中，HE-β-CD和HP-β-CD分别作为优选的羟基烷基化环糊精而使用。

本说明书中，“C

一实施方式中，乙醇作为优选的C

本说明书中，“C

一实施方式中，丙二醇作为优选的C

本说明书中，“C

一实施方式中，甘油、1,2,3-丁三醇及D-葡萄烯糖分别作为优选的C

本说明书中，“聚亚烷基二醇”是聚乙二醇、聚丙二醇等、亚烷基二醇的聚合物。作为聚乙二醇的非限定性的例子，可以列举出PEG100～10000(例如，PEG200、PEG300、PEG400、PEG500、PEG600、PEG4000和PEG6000)。这些例子在本发明的一实施方式中均作为优选的聚亚烷基二醇而使用。

在优选的一实施方式中，可使用重均分子量为200以上且6000以下的聚乙二醇。

在更优选的一实施方式体中，可使用重均分子量为400以上且6000以下的聚乙二醇。

本说明书中，“γ-内酯”是本领域技术人员通常理解的具有5元环的内酯。

作为γ-内酯的非限定性的例子，可以列举出D-赤酮酸内酯、异抗坏血酸钠、抗坏血酸、葡萄糖醛酸内酯、及药学上允许的它们的盐。

一实施方式中，D-赤酮酸内酯、异抗坏血酸钠、葡萄糖醛酸内酯、及药学上允许的它们的盐分别作为优选的γ-内酯而使用。

本说明书中，“绿原酸类”是绿原酸、阿魏酰奎尼酸、二咖啡酰基奎宁酸、及药学上允许的它们的盐等绿原酸或其类似化合物。

一实施方式中，绿原酸及其药学上允许的盐作为优选的绿原酸类而使用。

本说明书中，“烷基硫酸酯”是具有辛基、壬基、癸基、十二烷基等作为烷基的硫酸酯、及其药学上允许的盐。

作为代表性的烷基硫酸酯，可以列举出十二烷基硫酸钠(SDS)。

一实施方式中，SDS作为优选的烷基硫酸酯而使用。

从抑制组合物中的双氯芬酸的生成和/或蓄积这样的观点出发，在优选的一实施方式中，成分(A)可使用选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

从组合物的过滤器过滤性优异这样的观点出发，在优选的一实施方式中，成分(A)可使用选自由聚亚烷基二醇、C

本发明中，药物组合物优选用于治疗人的关节疾病。本说明书中“关节疾病”是膝关节、肩关节、颈关节、髋关节、脊椎关节、颚关节、指关节、肘关节、腕关节、踝关节等各种关节疾病。作为关节疾病，更具体而言可以示例出骨关节炎、类风湿性关节炎、关节软骨损伤、膝关节骨坏死、大腿骨坏死、肩关节炎、细菌性关节炎、病毒性关节炎、神经性关节炎等。本发明的关节疾病治疗用的组合物优选用于骨关节炎或类风湿性关节炎，更优选用于骨关节炎。

本说明书中“治疗”可以是对疾病本身的治疗(例如，治愈或改善疾病中的器质性病变的治疗)，也可以是对疾病所伴随的各种症状(例如，起因于疼痛、僵直、关节功能(例如，可以通过日常行动的困难性(以上下台阶、乘坐汽车的上下等为代表)进行评价)等关节的ADL的降低)的治疗。另外，“治疗”不仅包括完全治愈，还包括疾病的一部分或全部的症状的改善、及疾病进展的抑制(包括维持和进展速度的降低)以及预防。此处预防包括：例如虽然在关节中观察到器质性病变但未产生关节功能的障碍、疼痛和/或僵直之类的关节疾病所伴随的各种症状时，将该各种症状的发生防患于未然。另外，预防包括：例如在关节中未观察到明确的器质性病变，但产生了关节功能的障碍、疼痛和/或僵直之类的关节疾病所伴随的各种症状时，将该器质性病变的发生防患于未然，抑制该各种症状中未显著化的症状的发展。组合物优选用于改善、治愈关节疾病中的症状或抑制关节疾病的加剧，更优选用于症状的改善或治愈。一实施方式中，组合物可以适宜地用于关节痛的改善、治愈或抑制关节痛的加剧，或者用于关节功能的改善。

本说明书中“有效量”是指与合理的风险/效益比相对应、不具有过度的有害副作用(毒性、刺激性和变态反应等)而可以获得期望的应答的充分的成分的量。该“有效量”可根据成为给药对象的患者的症状、体格、年龄、性别等各种要素而变化。然而，只要是本领域技术人员，则无需对各种要素的组合分别进行各个试验，可以基于一个或多个具体的试验例的结果和技术常识来确定其它情况下的有效量。

透明质酸包含以N-乙酰基-D-葡糖胺与D-葡萄糖醛酸或其盐通过β1,3键合得到的结构作为二糖单元(透明质酸二糖结构单元)且该透明质酸二糖结构单元通过重复β1,4键合得到的基本骨架而构成的糖胺聚糖，并且是由该基本骨架构成的糖胺聚糖。另外，透明质酸可以使用动物来源、或微生物来源的纯化物、化学的合成等合成物等利用任意的方法而得到的透明质酸。

透明质酸和式(1)所示的化合物的质均分子量没有特别限定，可示例出10000以上且10000000以下，优选为500000以上且5000000以下，更优选为600000以上且3000000以下，进一步优选为600000以上且1200000以下。需要说明的是，本说明书中，透明质酸和式(1)所示的化合物的“质均分子量”是利用特性粘度法测得的值，与这些化合物的“重均分子量”含义相同。

透明质酸和式(1)所示的化合物可以是未形成盐的状态，另外也可以是形成盐的状态。作为上述的盐，可以示例出上述那样的药学上允许的盐。

式(1)所示的化合物可以通过使透明质酸与将2-溴乙胺氢溴酸盐、2-氨基乙醇等用作间隔基化合物与双氯芬酸进行共价键合而得到。

式(1)所示的化合物中，双氯芬酸与间隔基通过酯键连接，间隔基与透明质酸通过酰胺键连接。

另外，各二糖结构单元在式(1)所示的化合物中，可以分别以a和b的比率无规或嵌段状连接。即，双氯芬酸导入二糖结构单元和透明质酸二糖结构单元以无规或嵌段的形态彼此通过β1,4键连接。

式(1)所示的化合物的末端为氢原子或羟基。

式(1)中，a是双氯芬酸导入二糖结构单元的数量相对于全部二糖结构单元的数量的比率，b是透明质酸二糖结构单元的数量相对于全部二糖结构单元的数量的比率，a+b为1。式(1)中作为a示出的比率用摩尔分数表示时，将该摩尔分数的值称为本说明书中“导入率”。式(1)中，a为0.01以上且0.7以下(作为导入率，为1摩尔％以上且70摩尔％以下，b为0.3以上且0.99以下)，优选为0.1以上且0.2以下(10摩尔％以上且20摩尔％以下，b为0.8以上且0.9以下)。

对于式(1)中的a、导入率的值，在将双氯芬酸导入透明质酸中的反应工序中，可以通过改变缩合剂、缩合辅助剂、间隔基化合物的反应当量、双氯芬酸的反应当量等进行调整。

此处，本说明书中的“导入率”是利用下述算式1计算出的值，可以通过测定吸光度而求出。

算式1：

导入率(摩尔％)＝(双氯芬酸导入二糖结构单元数/全部二糖结构单元数)×100

导入率更具体而言利用咔唑吸光度法测定双氯芬酸特有的吸收度，使用预先制作的双氯芬酸的标准曲线，可以根据上式计算。

式(1)所示的化合物中，n表示全部二糖结构单元的数量，可以由下述算式2或3计算。

基于原料的透明质酸的质均分子量求n时，可以根据下述算式2来计算。

算式2：

n＝(透明质酸的质均分子量/二糖结构单元的质均分子量)

基于式(1)所示的化合物的质均分子量、以及式(1)中的a和b求n时，可以根据下述算式3来计算。

算式3：

n＝(式(1)表示的化合物的质均分子量)/((双氯芬酸导入二糖结构单元的质均分子量×a)+(透明质酸二糖结构单元的质均分子量×b))

n为25以上且25000以下的整数，优选为1250以上且12500以下的整数，更优选为1500以上且7500以下，进一步优选为1500以上且3000以下的整数。

在透明质酸中导入间隔基和双氯芬酸的方法可以在导入了间隔基的透明质酸中导入双氯芬酸，也可以使预先导入了间隔基的双氯芬酸与透明质酸反应。例如通过参照专利文献1、专利文献2等，只要是本领域技术人员则可以适宜加以实施。

一实施方式中，组合物以0.01w/v％以上且80w/v％以下的浓度含有式(1)所示的化合物。在优选的实施方式中，含有0.1w/v％以上且10w/v％以下、更优选含有0.5w/v％以上且5w/v％以下、特别优选含有1w/v％的式(1)所示的化合物。

组合物除了式(1)所示的化合物之外可以包含药学上允许的载体。作为该药学上允许的载体，可优选示例出注射用水、生理盐水、林格液等水性溶剂。一实施方式中，药物组合物为水性组合物。一实施方式中，组合物通过将该药学上允许的载体与式(1)所示的化合物混合而制备。根据需要，也可以将缓冲剂等之类的添加物添加至组合物中。另外，对于组合物，在混合各成分后，可以通过例如过滤器过滤等进行除尘、除菌、灭菌等处理。

通常将药物组合物等组合物用于生物体(哺乳动物、特别优选人)时，需要进行除尘和灭菌。水性组合物的情况，从成分的稳定性、简便性的观点出发，优选通过过滤进行除尘和灭菌工序。在通过过滤器过滤对组合物进行灭菌处理等时，可以适宜使用市售的膜滤器、经灭菌容器、经灭菌注射器/注射筒等。例如，作为膜滤器，可以使用孔径0.22μm的膜滤器。包含式(1)所示的化合物的水性组合物具有高粘性，因此根据实施方式，由于过滤性低，会有难以制备水性组合物的担心，尤其在过滤灭菌时。

此处，包含式(1)所示的化合物的水性组合物的过滤性差。专利文献1中，公开了：通过对包含Dic-HA的溶液进行碱性处理，从而可以成为具有过滤器过滤通过性的透明的溶液。然而，发明人等进行了研究，结果得知：对包含Dic-HA的水性组合物进行碱性处理时，会促进双氯芬酸成分的生成。另一方面，得知：将包含式(1)所示的化合物的水性组合物的灭菌以加热灭菌来代替过滤器灭菌时，仍然会促进双氯芬酸成分的生成。

本发明的一个方面涉及如下水性组合物，其包含式(1)所示的化合物，在以下的计算方法中最大处理量(V

最大处理量(V

算式A：

t/V＝at+b

算式B：

V

上述算式A和B中，t为过滤时间(分钟)，V为单位有效过滤面积的总过滤量(g/cm

最大处理量(V

需要说明的是，V

包含式(1)所示的化合物且最大处理量(V

一实施方式中，水性组合物还包含过滤性改善剂。本发明中，“过滤性改善剂”是只要改善包含式(1)所示的化合物的水性组合物的过滤性、即最大处理量(V

一实施方式中，过滤性改善剂选自由上述那样的聚亚烷基二醇、C

从过滤性的观点出发，在优选的一实施方式中，PEG200～6000、甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、羟基乙基-β-环糊精、及羟基丙基-β-环糊精用作过滤性改善剂。

在更优选的一实施方式中，选自由PEG400、PEG4000、乙醇和羟基丙基-β-环糊精组成的组中的化合物可以作为过滤性改善剂用于组合物。

作为一实施方式，包含PEG400时，从显著改善过滤性的方面考虑，可以特别优选地用作过滤性改善剂。

水性组合物可以单独包含一种过滤性改善剂或可以包含两种以上。

一实施方式中，在水性组合物中可以以0.01w/v％以上且60w/v％以下、优选以0.1w/v％以上且30w/v％以下、更优选以1w/v％以上且15w/v％以下、特别优选以2w/v％以上且低于10w/v％的比率含有过滤性改善剂。

本说明书中，“水性组合物”是含有10w/v％以上且99.98w/v％以下的水的组合物。水性组合物也可以是溶液、悬浮液或凝胶状。作为用于制备水性组合物的水，例如可以示例出注射用水、纯化水、蒸馏水等。水性组合物中的水的含量优选为60w/v％以上且99.8w/v％以下，更优选为80w/v％以上且98.5w/v％以下，特别优选超过89w/v％且为97w/v％以下。

一实施方式中，包含式(1)所示的化合物的水性组合物的最大处理量(V

组合物中可以包含的缓冲剂可以利用本领域技术人员公知物质。作为非限定性的例子，可列举出将柠檬酸缓冲液、乙酸缓冲液、磷酸缓冲液用作缓冲剂。

一实施方式中，柠檬酸缓冲液可示例出包含以柠檬酸计终浓度0.1mM～500mM(例如，1mM～50mM)者。此处，该柠檬酸缓冲液优选调节为pH4.5～5.5。作为更优选的柠檬酸缓冲液的pH的例子，可以列举出pH4.8～pH5.4，作为进一步的一例为pH5.1。

一实施方式中，乙酸缓冲液可示例出包含以乙酸计终浓度0.1mM～500mM(例如，1mM～50mM)者。此处，该乙酸缓冲液优选调节为pH4.5～5.5。作为更优选的乙酸缓冲液的pH的例子，可以列举出pH4.8～pH5.4，作为进一步的一例为pH5.1。

一实施方式中，磷酸缓冲液可示例出包含以磷酸计终浓度0.1mM～500mM(例如，1mM～50mM)者。此处，该磷酸缓冲液优选调节为pH6.0～7.0。作为更优选的磷酸缓冲液的pH的例子，可以列举出pH6.3～pH6.8，作为进一步的一例为pH6.5。

一实施方式中，柠檬酸缓冲液可以与作为成分(A)的选自由C

一实施方式中，乙酸缓冲液可以与作为成分(A)的选自由羟基烷基化环糊精、聚亚烷基二醇、C

一实施方式中，磷酸缓冲液可以与作为成分(A)的选自由γ-内酯、聚亚烷基二醇及C

一实施方式中，组合物通过以下那样的步骤而制备。

(工序1)将柠檬酸水合物、柠檬酸二钠水合物、及PEG400的规定量溶解于注射用水(WFI)中。

(工序2)将式(1)所示的化合物(导入率18摩尔％)的规定量溶解于工序1的溶液中。此外，将溶解后的溶液加热至70℃，进行减压加热脱气。

(工序3)用孔径0.22μm的过滤器对工序2的溶液进行过滤灭菌。

(工序4)以70℃对工序3的溶液进行加热脱气，接着冷却至10℃。

(工序5)在灭菌条件下将规定量填充至注射器中。

通过上述(工序1)～(工序5)，可制备包含透明质酸衍生物、PEG400和柠檬酸缓冲液的经灭菌药物组合物。此处，各成分的浓度可示例出透明质酸衍生物；0.5～5w/v％、PEG400；3～30w/v％、及磷酸缓冲液；3～30mM(以柠檬酸计)，但药物组合物中的各种成分的浓度不限定于前述的各范围。不用说，成分(A)不限定于PEG400，另外，缓冲液不限定于柠檬酸缓冲液。透明质酸衍生物的构成、膜滤器的孔径也是同样。

通过使水性组合物的最大处理量(V

制备后的经灭菌药物组合物可以在4℃等低温或常温下保存。为了抑制透明质酸衍生物的分解，期望在4℃那样的低温下保存。例如，相对于药物组合物中的透明质酸衍生物量，将0.5w/w％的双氯芬酸内酰胺蓄积量设定为阈值，在蓄积量超过该阈值时判断不适合作为药物的品质时，只要溶液组成是适合的条件，即使在常温(25℃)环境下经过数月至1年左右，组合物也可以在品质合格原样保存。该保存期间由下述实施例的保存试验的结果进行换算，通过使成分(A)共存而能够延长约超过1个月～3个月(该换算以通过成分(A)的共存而使双氯芬酸内酰胺的蓄积抑制10～25％为前提而进行。该抑制比率是由例如后述实施例1((1-2)的结果等)可以充分实现的水平。品质合格的保存期限为数个月的药物组合物中，若能要将其保存期限延长超过1～3个月，则明确可减少成本，减轻患者的负担，且也可实现对医疗经济的贡献。另外，制备后的经灭菌药物组合物更优选在遮光条件下保存。作为这样的条件，可列举出将经灭菌药物组合物包装的状态下保存于冰箱等中。

药物组合物的给药频率可根据患者的症状等进行适宜调整。从药效的观点出发，例如可以示例出每周1次～每52周1次的频率。作为更优选的例子，可列举出每2周1次～每26周1次或每4周1次～每13周1次的频率。以1次给药可以得到充分的缓解的情况，当然可以只给予1次。组合物的优选的制备方式为注射剂用的溶液(例如，水性组合物)。例如，以注射的形式向膝关节等患部给予时，若考虑到患者的身体负担、精神负担，则期望给药间隔较长。特别是，在用作注射剂时，该溶液性状优选为无色澄清。

一实施方式中，提供将本发明的药物组合物填充于注射筒内的注射器。一实施方式中，也可以提供包含将本发明的药物组合物填充于注射筒内的注射器的套组。该注射器具备药剂挤出用柱塞等，能将本发明的组合物挤出。一实施方式中，填充于注射器内的组合物可以以灭菌状态来提供。一实施方式中，可以在注射筒内预先填充有1次给药量的组合物。另外，该套组可以制成包含如下医疗用注射剂：将式(1)所示的化合物溶解于柠檬酸缓冲液、乙酸缓冲液、磷酸缓冲液、生理盐水或注射用水中而成的溶液填充于注射筒中，用药剂挤出用柱塞以能滑动的方式密封，而成形为医疗用注射剂。此处溶液的浸透压、粘性可以根据需要适宜调节。需要说明的是，药剂挤出用柱塞可以使用通常使用的柱塞，由橡胶或合成橡胶等弹性体形成、以能滑动的方式在密合状态下插入注射筒中。另外，套组中，也可以包括进行压入柱塞操作而用于将药剂挤出的柱塞杆、操作说明书或随附资料等。另外，一实施方式中，本发明的药物组合物可以代替如上述那样填充于注射筒内而收纳于小瓶来提供。在此情况下，小瓶有时也与包含经灭菌的空注射筒的注射器一起提供。另外，也可以以包含前述小瓶和前述注射器的套组的形式提供。

如本领域技术人员所明确，本发明的一个方面的优选的性质和特征可以各自独立，另外，也可以与本发明的另一方面组合来使用。

一实施方式中，提供抑制双氯芬酸内酰胺的生成和/或蓄积、且双氯芬酸的生成和/或蓄积得到抑制的药物组合物及其制造方法。

一实施方式中，提供最大处理量(V

一实施方式中，提供最大处理量(V

一实施方式中，提供最大处理量(V

具体的一实施方式中，提供双氯芬酸内酰胺的生成和/或蓄积得到抑制、且双氯芬酸的生成和/或蓄积得到抑制的药物组合物，所述药物组合物含有式(1)所示的化合物、及选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

具体的一实施方式中，提供双氯芬酸内酰胺的生成得到抑制、最大处理量(V

具体的一实施方式中，提供双氯芬酸的生成得到抑制、最大处理量(V

具体的一实施方式中，提供双氯芬酸内酰胺的生成和双氯芬酸的生成得到抑制、最大处理量(V

具体的一实施方式中，提供抑制由式(1)所示的化合物生成双氯芬酸内酰胺及生成双氯芬酸的方法，所述方法包括使式(1)所示的化合物与选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

具体的一实施方式中，提供抑制由式(1)所示的化合物生成双氯芬酸内酰胺、且改善式(1)所示的化合物的过滤性的方法，所述方法包括使式(1)所示的化合物与选自由聚亚烷基二醇、C

具体的一实施方式中，提供抑制由式(1)所示的化合物生成双氯芬酸、且改善式(1)所示的化合物的过滤性的方法，所述方法包括使式(1)所示的化合物与选自由C

具体的一实施方式中，提供抑制由式(1)所示的化合物生成双氯芬酸内酰胺及生成双氯芬酸、进而改善式(1)所示的化合物的过滤性的方法，所述方法包括使式(1)所示的化合物与选自由C

<实施方式>

以下示例出本发明的优选的实施方式。

[1]一种药物组合物，其含有式(1)所示的化合物和成分(A)：

成分(A)：选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

式(1)中，a为0.01以上且0.7以下，a+b为1，n为25以上且25000以下的整数，各二糖结构单元的排列任选为无规或嵌段状，在各二糖结构单元中R各自独立地为羧基或羧酸盐基团。

[2]根据前述[1]所述的药物组合物，其中，前述成分(A)选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

[3]根据前述[1]或[2]所述的药物组合物，其中，聚亚烷基二醇为聚乙二醇。

[4]根据前述[3]所述的药物组合物，其中，聚乙二醇的重均分子量为200以上且6000以下。

[5]根据前述[1]～[4]中任一项所述的药物组合物，其以0.01w/v％以上且80w/v％以下、0.1w/v％以上且10w/v％以下、0.5w/v％以上且5w/v％以下或1w/v％的浓度含有前述式(1)所示的化合物。

[6]根据前述[1]～[5]中任一项所述的药物组合物，其中，前述成分(A)的终浓度为0.01w/v％以上且60w/v％以下、0.01w/v％以上且30wt％以下、1w/v％以上且15w/v％以下或2w/v％以上且低于10w/v％。

[7]根据前述[1]～[6]中任一项所述的药物组合物，其还包含选自由磷酸缓冲液、柠檬酸缓冲液和乙酸缓冲液组成的组的缓冲液。

[8]根据前述[1]～[7]中任一项所述的药物组合物，其中，pH为4.5～7.0。

[9]根据前述[1]～[8]中任一项所述的药物组合物，其为水性组合物。

[10]根据前述[1]～[9]中任一项所述的药物组合物，其为关节疾病治疗用药物组合物。

[11]根据前述[10]所述的药物组合物，其中，关节疾病为骨关节炎或类风湿性关节炎。

[12]一种套组，其包含将前述[1]～[11]中任一项所述的药物组合物填充于注射筒内的注射器。

[13]一种套组，其包含小瓶和注射器，所述小瓶包含前述[1]～[11]中任一项所述的药物组合物。

[14]一种制造药物组合物的方法，所述药物组合物含有下述式(1)所示的化合物，所述方法包括使下述式(1)所示的化合物与成分(A)共存的工序：

成分(A)：选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

式(1)中，a为0.01以上且0.7以下，a+b为1，n为25以上且25000以下的整数，各二糖结构单元的连接任选为无规或嵌段状，在各二糖结构单元中R各自独立地为羧基或羧酸盐基团。

[15]根据前述[14]所述的方法，其中，前述成分(A)选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

[16]根据前述[14]或[15]所述的方法，其中，聚亚烷基二醇为聚乙二醇。

[17]根据前述[16]所述的方法，其中，聚乙二醇的重均分子量为200以上且6000以下。

[18]根据前述[14]～[17]中任一项所述的方法，其中，以终浓度0.01w/v％以上且80w/v％以下、0.1w/v％以上且10w/v％以下、0.5w/v％以上且5w/v％以下或1w/v％的浓度添加前述式(1)所示的化合物。

[19]根据前述[14]～[18]中任一项所述的方法，其中，以终浓度0.01w/v％以上且60w/v％以下、0.01w/v％以上且30wt％以下、1w/v％以上且15w/v％以下或2w/v％以上且低于10w/v％添加前述成分(A)。

[20]根据前述[14]～[19]中任一项所述的方法，其中，式(1)所示的化合物和/或成分(A)包含选自由磷酸缓冲液、柠檬酸缓冲液和乙酸缓冲液组成的组的缓冲液。

[21]根据前述[14]～[20]中任一项所述的方法，其中，药物组合物的pH为4.5～7.0。

[22]根据前述[14]～[21]中任一项所述的方法，其中，前述药物组合物为水性组合物。

[23]一种抑制由下述式(1)所示的化合物生成双氯芬酸内酰胺的方法，其包括使下述式(1)所示的化合物与成分(A)共存的工序：

成分(A)：选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

式(1)中，a为0.01以上且0.7以下，a+b为1，n为25以上且25000以下的整数，各二糖结构单元的排列任选为无规或嵌段状，在各二糖结构单元中R各自独立地为羧基或羧酸盐基团。

[24]根据前述[23]所述的方法，其中，前述成分(A)选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

[25]根据前述[23]或[24]所述的方法，其中，聚亚烷基二醇为聚乙二醇。

[26]根据前述[25]所述的方法，其中，聚乙二醇的重均分子量为200以上且6000以下。

[27]根据前述[23]～[26]中任一项所述的方法，其中，以终浓度0.01w/v％以上且60w/v％以下、0.01w/v％以上且30wt％以下、1w/v％以上且15w/v％以下或2w/v％以上且低于10w/v％添加前述成分(A)。

[28]根据前述[23]～[27]中任一项所述的方法，其中，前述式(1)所示的化合物和/或前述成分(A)包含选自由磷酸缓冲液、柠檬酸缓冲液和乙酸缓冲液组成的组的缓冲液。

[29]根据前述[23]～[28]中任一项所述的方法，其中，在pH为4.5～7.0的范围内进行。

[30]根据前述[23]～[29]中任一项所述的方法，其使前述式(1)所示的化合物与前述成分(A)在水性溶剂中共存。

[31]一种抑制包含下述式(1)所示的化合物的药物组合物中双氯芬酸内酰胺的蓄积的方法，所述方法包括使式(1)所示的化合物与成分(A)与共存的工序：

成分(A)：选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

式(1)中，a为0.01以上且0.7以下，a+b为1，n为25以上且25000以下的整数，各二糖结构单元的排列任选为无规或嵌段状，在各二糖结构单元中R各自独立地为羧基或羧酸盐基团。

[32]根据前述[31]所述的方法，其中，前述成分(A)选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

[33]根据前述[31]或[32]所述的方法，其中，聚亚烷基二醇为聚乙二醇。

[34]根据前述[33]所述的方法，其中，聚乙二醇的重均分子量为200以上且6000以下。

[35]根据前述[31]～[34]中任一项所述的方法，其中，前述药物组合物中以0.01w/v％以上且80w/v％以下、0.1w/v％以上且10w/v％以下、0.5w/v％以上且5w/v％以下或1w/v％的浓度含有前述式(1)所示的化合物。

[36]根据前述[31]～[35]中任一项所述的方法，其中，以终浓度0.01w/v％以上且60w/v％以下、0.01w/v％以上且30wt％以下、1w/v％以上且15w/v％以下或2w/v％以上且低于10w/v％添加前述成分(A)。

[37]根据前述[31]～[36]中任一项所述的方法，其中，前述式(1)所示的化合物和/或前述成分(A)包含选自由磷酸缓冲液、柠檬酸缓冲液和乙酸缓冲液组成的组的缓冲液。

[38]根据前述[31]～[37]中任一项所述的方法，其中，在pH为4.5～7.0的范围内进行。

[39]根据前述[31]～[38]中任一项所述的方法，其中，前述药物组合物为水性组合物。

[40]根据前述[31]～[39]中任一项所述的方法，其中，前述药物组合物为关节疾病治疗用药物组合物。

[41]根据前述[40]所述的药物组合物，其中，关节疾病为骨关节炎或类风湿性关节炎。

[42]成分(A)在制造含有下述式(1)所示的化合物的药物组合物中的应用，前述成分(A)为选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

式(1)中，a为0.01以上且0.7以下，a+b为1，n为25以上且25000以下的整数，各二糖结构单元的排列任选为无规或嵌段状，在各二糖结构单元中R各自独立地为羧基或羧酸盐基团。

[43]根据前述[42]所述的应用，其中，前述成分(A)选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

[44]根据前述[42]或[43]所述的应用，其中，聚亚烷基二醇为聚乙二醇。

[45]根据前述[44]所述的应用，其中，聚乙二醇的重均分子量为200以上且6000以下。

[46]根据前述[42]～[45]中任一项所述的应用，其中，前述药物组合物中，以0.01w/v％以上且80w/v％以下、0.1w/v％以上且10w/v％以下、0.5w/v％以上且5w/v％以下或1w/v％的浓度含有前述式(1)所示的化合物。

[47]根据前述[42]～[46]中任一项所述的应用，其以0.01w/v％以上且60w/v％以下、0.01w/v％以上且30wt％以下、1w/v％以上且15w/v％以下或2w/v％以上且低于10w/v％的终浓度添加前述成分(A)。

[48]根据前述[42]～[47]中任一项所述的应用，其中，前述药物组合物为关节疾病治疗用药物组合物。

[49]根据前述[48]所述的应用，其中，关节疾病为骨关节炎或类风湿性关节炎。

[50]一种用于治疗人的关节疾病的成分(A)，前述成分(A)为选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

式(1)中，a为0.01以上且0.7以下，a+b为1，n为25以上且25000以下的整数，各二糖结构单元的排列任选为无规或嵌段状，在各二糖结构单元中R各自独立地为羧基或羧酸盐基团。

[51]根据前述[50]所述的成分(A)，其中，前述成分(A)选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

[52]根据前述[50]或[51]所述的成分(A)，其中，聚亚烷基二醇为聚乙二醇。

[53]根据前述[52]所述的成分(A)，其中，聚乙二醇的重均分子量为200以上且6000以下。

[54]根据前述[50]～[53]中任一项所述的成分(A)，其中，前述式(1)所示的化合物在前述药物组合物中的终浓度为0.01w/v％以上且80w/v％以下、0.1w/v％以上且10w/v％以下、0.5w/v％以上且5w/v％以下或1w/v％。

[55]根据前述[50]～[54]中任一项所述的成分(A)，其中，前述成分(A)在前述药物组合物中的终浓度为0.01w/v％以上且60w/v％以下、0.01w/v％以上且30wt％以下、1w/v％以上且15w/v％以下或2w/v％以上且低于10w/v％。

[56]根据前述[50]～[55]中任一项所述的成分(A)，其中，关节疾病为骨关节炎或类风湿性关节炎。

[57]一种人的关节疾病治疗方法，其包括将药物组合物给予至关节疾病患者的关节的工序，前述药物组合物含有有效量的下述式(1)所示的化合物和成分(A)，前述成分(A)为选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

式(1)中，a为0.01以上且0.7以下，a+b为1，n为25以上且25000以下的整数，各二糖结构单元的排列任选为无规或嵌段状，在各二糖结构单元中R各自独立地为羧基或羧酸盐基团。

[58]根据前述[57]所述的方法，其中，前述成分(A)选自由非离子性表面活性剂、羟基烷基化环糊精、C

[59]根据前述[57]或[58]所述的方法，其中，聚亚烷基二醇为聚乙二醇。

[60]根据前述[59]所述的方法，其中，聚乙二醇的重均分子量为200以上且6000以下。

[61]根据前述[57]～[60]中任一项所述的方法，其中，前述式(1)所示的化合物在前述药物组合物中的浓度为0.01w/v％以上且80w/v％以下、0.1w/v％以上且10w/v％以下、0.5w/v％以上且5w/v％以下或1w/v％。

[62]根据前述[57]～[61]中任一项所述的方法，其中，前述成分(A)在前述药物组合物中的浓度为0.01w/v％以上且60w/v％以下、0.01w/v％以上且30wt％以下、1w/v％以上且15w/v％以下或2w/v％以上且低于10w/v％。

[63]根据前述[57]～[62]中任一项所述的方法，其中，关节疾病为骨关节炎或类风湿性关节炎。

实施例

以下，使用实施例对本发明的优选的实施方式进行更详细地说明，但本发明不受下述的实施例任何限定。

<合成例>

依据国际公开第2005/066214号的实施例中记载的方法，合成了透明质酸衍生物(式(1)所示的化合物)(a：0.18、n：2千、透明质酸的质均分子量：80万)。

更具体而言，利用以下的方法合成。

将2-溴乙胺氢溴酸盐2.155g(10.5mmol)溶解于二氯甲烷20mL，在冰冷下加入三乙胺1.463mL(10.5mmol)，进而加入二叔丁基二碳酸酯(Boc

对上述中得到的Boc-氨基乙基溴化物2.287g(10.2mmol)的二甲基甲酰胺(DMF)溶液5mL进行冰冷，加入双氯芬酸钠3.255g(10.2mmol)的DMF溶液6mL，在室温下搅拌一夜。在60℃下搅拌11小时，在室温下搅拌一夜。加入乙酸乙酯，依次用5重量％碳酸氢钠水溶液、水、饱和盐水进行分液清洗。用硫酸钠脱水后，减压馏去了乙酸乙酯。用硅胶柱色谱(甲苯：乙酸乙酯＝20：1(v/v)、0.5体积％三乙胺)纯化残渣，得到Boc-氨基乙醇-双氯芬酸。

将上述中得到的Boc-氨基乙醇-双氯芬酸2.108g(4.80mmol)溶解于二氯甲烷5mL，在冰冷下加入4M盐酸/乙酸乙酯20mL并搅拌2.5小时。加入二乙醚、己烷使其沉淀，对沉淀物进行减压干燥。由此，得到氨基乙醇-双氯芬酸盐酸盐。结构利用

将质均分子量80万的透明质酸500mg(1.25mmol/二糖单元)溶解于水56.3mL/二氧杂环己烷56.3mL中后，依次加入羟基琥珀酰亚胺(1mmol)/水0.5mL、水溶性碳二亚胺盐酸盐(WSCI·HCl)(0.5mmol)/水0.5mL、上述得到的氨基乙醇-双氯芬酸盐酸盐(0.5mmol)/(水：二氧杂环己烷＝1：1(v/v)、5mL)，搅拌一昼夜。向反应液中加入5重量％碳酸氢钠水溶液7.5mL，搅拌约4小时。向反应液中加入50％(v/v)乙酸水溶液215μL进行中和后，加入氯化钠2.5g进行搅拌。加入乙醇400mL使其沉淀，对于沉淀物，用85％(v/v)乙醇水溶液清洗2次、用乙醇清洗2次、用二乙醚清洗2次，在室温下减压干燥一夜，得到透明质酸衍生物(钠盐)(式(1)所示的化合物)。利用分光光度计测得的双氯芬酸的导入率为18摩尔％。

进而，根据前述合成例，制备了导入率18摩尔％的透明质酸衍生物(钠盐)的干燥物。

<试验用样品的制备>

·磷酸缓冲液的制备

以17：11的比率(体积比)混合75mM磷酸浓度的磷酸二氢钠水溶液和75mM磷酸浓度的磷酸氢二钠水溶液，制备了磷酸缓冲液。制备后的磷酸缓冲液的pH为6.5。

·柠檬酸缓冲液的制备

以27：37的比率(体积比)混合15mM柠檬酸浓度的柠檬酸水溶液和15mM柠檬酸浓度的柠檬酸三钠水溶液，制备了柠檬酸缓冲液。制备后的柠檬酸缓冲液的pH为5.1。

·乙酸缓冲液的制备

以1：3的比率(体积比)混合15mM乙酸浓度的乙酸水溶液和15mM乙酸浓度的乙酸钠水溶液，制备了乙酸缓冲液。制备后的乙酸缓冲液的pH为5.1。另外，利用同样的方法以45mM乙酸浓度制备了pH5.1的乙酸缓冲液。

·1.5重量％透明质酸衍生物溶液的制备

将上述合成例的透明质酸衍生物1.5g与上述中制备的各种缓冲液98.5g混合，在70℃热水浴中搅拌2小时而制备了1.5重量％透明质酸衍生物溶液。

·各种添加成分水溶液的制备

对于用于在透明质酸衍生物溶液中添加的添加成分水溶液，以分别成为终浓度的3倍浓度(重量％)的方式使用各种添加成分和WFI进行制备。

·试验用样品的制备

将上述中制备的1.5重量％透明质酸衍生物溶液2.0g与前述添加成分水溶液1.0g混合，制备了试验用样品(透明质酸衍生物的终浓度：1.0重量％)。另外，代替添加成分水溶液1.0g将WFI混合1.0g，由此制备了不包含前述添加成分的对照溶液。

实施例1添加成分对双氯芬酸成分的蓄积产生的影响

将包含各种缓冲液(50mM磷酸缓冲液、10mM柠檬酸缓冲液、10mM乙酸缓冲液、或30mM乙酸缓冲液)的上述中制备的试验用样品供于保存试验。

将试验用样品在60℃的恒温槽中保存1周后，利用HPLC分别测定了双氯芬酸和双氯芬酸内酰胺的蓄积量。

对于双氯芬酸量和双氯芬酸内酰胺量，计算出分别将在60℃下保存1周的对照溶液(1重量％透明质酸衍生物溶液)中存在的双氯芬酸量和双氯芬酸内酰胺量设为1时的相对值。

保存试验的更具体的步骤如下。

<保存试验>

将制备的各种试验用样品填充于螺纹小瓶(AS ONE公司、Cat No.：3-1599-01)中，在60℃下静置1周。通过HPLC定量分析了静置后的溶液中存在的双氯芬酸量、双氯芬酸内酰胺量。

HPLC条件如下。

柱：TSGgel ODS-100Z(4.6mm×150mm)

流速：1mL/分钟

温度：35℃

梯度：乙腈(B)/20mM磷酸钠(A)

B浓度.(mL/分钟)

0.40(0分钟)-0.80(30分钟)

0.80(33分钟)-0.40(35分钟)

双氯芬酸和双氯芬酸内酰胺的洗脱时间使用标准物质预先测定而确定。

需要说明的是，在60℃下保存1周相当于在25℃下保存1年。

(1-1)使用了50mM磷酸缓冲液(pH6.5)时的保存试验

作为添加成分，使用L-精氨酸盐酸盐(试验用样品中的终浓度：3重量％)、L-蛋氨酸、L-赖氨酸盐酸盐(3重量％)、α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精、烯丙基氧基-1,2-丙二醇、依地酸钠(3重量％)、甘氨酸、二甘油、硫代乙醇酸钠(3重量％)、四(4-羧苯基)卟啉(1.5重量％)、烟酰胺、丁基羟基苯甲醚、根皮苷水合物(1.5重量％)、苄醇、硼酸、聚乙烯醇(1.5重量％)、D-赤酮酸内酯、D-葡萄糖醛、PEG200、PEG4000、异抗坏血酸钠(3重量％)、及甘油。未记载浓度的添加成分均使用终浓度5重量％。

<结果>

作为添加成分，使用了L-精氨酸盐酸盐、L-蛋氨酸、L-赖氨酸盐酸盐、α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精、烯丙基氧基-1,2-丙二醇、依地酸钠、甘氨酸、二甘油、硫代乙醇酸钠、四(4-羧苯基)卟啉、烟酰胺、丁基羟基苯甲醚、根皮苷水合物、苄醇、硼酸、及聚乙烯醇时，双氯芬酸内酰胺量(相对值)均超过1。即，与未使用添加成分的对照相比，观察到双氯芬酸内酰胺的生成量增大，促进了双氯芬酸内酰胺的生成。使用了这些添加成分时，除了丁基羟基苯甲醚的例子之外，双氯芬酸量(相对值)均超过1。丁基羟基苯甲醚的情况的双氯芬酸量(相对值)为0.99，几乎未观察到作为添加成分对双氯芬酸的生成的效果。

另一方面，作为添加成分使用了D-赤酮酸内酯、D-葡萄糖醛、PEG200、PEG4000、异抗坏血酸钠、及甘油时，双氯芬酸内酰胺量(相对值)均低于1。即，与未使用添加成分的对照相比，观察到双氯芬酸内酰胺的生成量减少，抑制双氯芬酸内酰胺的生成(表1)。

由于抑制作为COX-2抑制剂实际上不具有活性的双氯芬酸内酰胺的生成，因此明确了D-赤酮酸内酯、D-葡萄糖醛、PEG200、PEG4000、异抗坏血酸钠、及甘油能够抑制双氯芬酸内酰胺的蓄积。进而，这些当中，可知：对于D-赤酮酸内酯和异抗坏血酸钠，双氯芬酸量(相对值)也低于1，也抑制双氯芬酸的蓄积。

[表1]

*Lac量；双氯芬酸内酰胺量的相对值

**Dic量；双氯芬酸量的相对值

(1-2)使用了10mM柠檬酸缓冲液(pH5.1)时的保存试验

作为添加成分，使用肌酸酐(1重量％)、脱氧胆酸钠(5重量％)、1,2,3-丁三醇(5重量％)、PEG400(6.3重量％或16.5重量％)、PEG600(10重量％)、PEG4000(10重量％)、PEG6000(10重量％)、SDS(5重量％)、TritonX-100(5重量％)、乙醇(26重量％)、辛基葡萄糖苷(5重量％)、葡萄糖醛酸内酯(0.1重量％)、绿原酸(0.1重量％)、丙二醇(10重量％)、聚山梨醇酯20(5重量％)、及聚乙烯基吡咯烷酮(5重量％)。

同样地作为添加成分使用了PEG3350(10.6重量％)和聚山梨醇酯80(3重量％)、以及PEG3350(6.0重量％)和羟基丙基-β-环糊精(10重量％)的二成分系或者PEG3350(5.5重量％)、聚山梨醇酯80(1重量％)和羟基丙基-β-环糊精(10重量％)的三成分系的添加成分。

<结果>

作为添加成分，使用了肌酸酐、及脱氧胆酸钠时，双氯芬酸内酰胺量(相对值)均超过1。即，与未使用添加成分的对照相比，观察到双氯芬酸内酰胺的生成量增大，促进双氯芬酸内酰胺的生成。使用了这些添加成分时，双氯芬酸量(相对值)也均超过1。

另一方面，作为添加成分使用了1,2,3-丁三醇、PEG400、PEG600、PEG4000、PEG6000、SDS、TritonX-100、乙醇、辛基葡萄糖苷、葡萄糖醛酸内酯、绿原酸、丙二醇、聚山梨醇酯20、及聚乙烯基吡咯烷酮时，双氯芬酸内酰胺量(相对值)均低于1。即，与未使用添加成分的对照相比，观察到双氯芬酸内酰胺的生成量减少，抑制双氯芬酸内酰胺的生成(表2)。表2也一并示出保管后的溶液性状。溶液性状大多数情况为无色澄清，即使在有着色的情况下，也仅为带有黄色的程度，即使在不澄清的情况下，也仅为有混浊的程度。另外，使用了上述二成分系或三成分系时，双氯芬酸内酰胺量(相对值)、双氯芬酸量(相对值)分别均低于1。另外，对于这些二成分系、三成分系的溶液性状均为无色澄清(表3)。

由于抑制了作为COX-2抑制剂实际上不具有活性的双氯芬酸内酰胺的生成，因此明确了1,2,3-丁三醇、PEG400、PEG600、PEG4000、PEG6000、SDS、TritonX-100、乙醇、辛基葡萄糖苷、葡萄糖醛酸内酯、绿原酸、丙二醇、聚山梨醇酯20、及聚乙烯基吡咯烷酮可以用作双氯芬酸内酰胺蓄积抑制剂。而且，在使用了这些时，双氯芬酸量(相对值)也低于1，可知也抑制双氯芬酸的蓄积。

[表2]

*Lac量；双氯芬酸内酰胺量的相对值

**Dic量；双氯芬酸量的相对值

[表3]

*Lac量；双氯芬酸内酰胺量的相对值

**Dic量；双氯芬酸量的相对值

(1-3)使用了30mM乙酸缓冲液(pH5.1)时的保存试验

作为添加成分，使用没食子酸丙酯(1.5重量％)、乳酸酐(1.5重量％)、羟基丙基纤维素(1.5重量％)、淀粉(1.5重量％)、葡聚糖(5重量％)、蔗糖(5重量％)、糖精钠二水合物(5重量％)、甘氨酸(5重量％)、天冬氨酸钠(1.5重量％)、L-亮氨酸(1.5重量％)、L-苯基丙氨酸(5重量％)、L-丝氨酸(5重量％)、D-甘露糖醇(1.5重量％)、D-山梨醇(5重量％)、羟基丙基-β-环糊精(3重量％、5重量％、10重量％或15重量％)、及乙醇(5重量％、10重量％、20重量％或26.3重量％)。

<结果>

作为添加成分，使用了没食子酸丙酯、乳酸酐、羟基丙基纤维素、淀粉、葡聚糖、蔗糖、糖精钠二水合物、甘氨酸、天冬氨酸钠、L-亮氨酸、L-苯基丙氨酸、L-丝氨酸、D-甘露糖醇及D-山梨醇时，双氯芬酸内酰胺量(相对值)均超过1。即，与未使用添加成分的对照相比，观察到双氯芬酸内酰胺的生成量增大，促进双氯芬酸内酰胺的生成。使用了这些添加成分时，双氯芬酸量(相对值)也均超过1。

另一方面，作为添加成分使用了羟基丙基-β-环糊精(HP-β-CD)、及乙醇时，双氯芬酸内酰胺量(相对值)分别低于1。即，与未使用添加成分的对照相比，观察到双氯芬酸内酰胺的蓄积量减少，抑制双氯芬酸内酰胺的蓄积(表4)。

由于作为COX-2抑制剂抑制实际上不具有活性的双氯芬酸内酰胺的生成，因此明确了羟基丙基-β-环糊精、及乙醇可以用作双氯芬酸内酰胺的蓄积抑制剂。而且，在使用了这些时，双氯芬酸量(相对值)也低于1，可知也抑制双氯芬酸的蓄积。

[表4]

*Lac量；双氯芬酸内酰胺量的相对值

**Dic量；双氯芬酸量的相对值

(1-4)使用了10mM乙酸缓冲液(pH5.1)时的保存试验

作为添加成分，使用羟基乙基-β-环糊精(5重量％)、PEG400(7.5重量％)、PEG4000(5重量％或15重量％)、乙醇(10重量％)、辛基葡萄糖苷(5重量％)、聚山梨醇酯80(5重量％或10重量％)、及聚乙烯基吡咯烷酮(5重量％)。

<结果>

作为添加成分，使用了羟基乙基-β-环糊精(HP-β-CD)、PEG400、PEG4000、乙醇、辛基葡萄糖苷、聚山梨醇酯80、及聚乙烯基吡咯烷酮时，双氯芬酸内酰胺量(相对值)均低于1。即，与未使用添加成分的对照相比，观察到双氯芬酸内酰胺的蓄积量减少，抑制双氯芬酸内酰胺的蓄积(表5)。

由于抑制了作为COX-2抑制剂实际上不具有活性的双氯芬酸内酰胺的生成，因此明确了羟基丙基-β-环糊精、PEG400、PEG4000、乙醇、辛基葡萄糖苷、聚山梨醇酯80、及聚乙烯基吡咯烷酮可以用作双氯芬酸内酰胺的蓄积抑制剂。而且，在使用了这些时，双氯芬酸量(相对值)也低于1，可知也抑制双氯芬酸的蓄积。

[表5]

*Lac量；双氯芬酸内酰胺量的相对值

**Dic量；双氯芬酸量的相对值

<结论>

通过本实施例，确认了聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、TritonX-100、辛基葡萄糖苷、羟基乙基-β-环糊精、羟基丙基-β-环糊精、乙醇、甘油、1,2,3-丁三醇、D-葡萄糖醛、PEG200、PEG400、PEG600、PEG4000、PEG6000、D-赤酮酸内酯、异抗坏血酸钠、葡萄糖醛酸内酯、聚乙烯基吡咯烷酮、绿原酸、SDS、及丙二醇具有抑制双氯芬酸内酰胺蓄积的效果。

因此，聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、TritonX-100、辛基葡萄糖苷等非离子性表面活性剂；羟基乙基-β-环糊精、羟基丙基-β-环糊精等羟基烷基化环糊精；乙醇等C

实施例2水性组合物的过滤性的评价

对于羟基丙基-β-环糊精(HP-β-CD)、乙醇、PEG400及PEG4000，研究了含有透明质酸衍生物的水性组合物的过滤。

<试验样品的制备>

·1.5重量％透明质酸衍生物溶液的制备

将上述中制备的透明质酸衍生物与上述中制备的15mM乙酸缓冲液(pH5.1)进行混合，搅拌后静置使其消泡，由此制备了1.5重量％透明质酸衍生物溶液。

·试验用样品的制备

将上述中制备的1.5重量％透明质酸衍生物溶液150.0g与添加成分水溶液75.0g进行混合，制备了试验用样品(透明质酸衍生物的终浓度：1.0重量％)。

另外，也制备了代替添加成分水溶液而将WFI混合75.0g的对照溶液。

<过滤性的试验方法>

在安装有孔径0.22μm的聚偏氟乙烯(PVDF)膜(47mm直径、有效过滤面积：13.8cm

<结果>

使用了添加成分的情况，确认了最大处理量(V

[表6]

<结论>

在过滤器过滤时，若在流量达到初始的1/10之前停止过滤，则过滤器不能有效地利用，若再使用，则过滤时间需要变长而在作业效率上不优选。以V

实施例3药物组合物的制备

成分(A)与透明质酸衍生物一起用于药物组合物的制备。作为一个例子，示出包含透明质酸衍生物、PEG400、及柠檬酸缓冲液的注射用的药物组合物的制备。

(工序1)将柠檬酸水合物、柠檬酸二钠水合物、及PEG400的规定量溶解于WFI中。

(工序2)将透明质酸衍生物(导入率18摩尔％)的规定量溶解于工序1的溶液中。此外，将溶解后的溶液加热至70℃，进行减压加热脱气。

(工序3)用孔径0.22μm的过滤器将工序2的溶液过滤灭菌。

(工序4)以70℃将工序3的溶液加热脱气，接着冷却至10℃。

(工序5)在灭菌条件下将规定量填充于注射器中。

通过上述(工序1)～(工序5)，可制备包含透明质酸衍生物、PEG400和柠檬酸缓冲液的经灭菌药物组合物。此处，各成分的浓度可示例出透明质酸衍生物；0.5～5w/v％、PEG400；3～30w/v％、及柠檬酸缓冲液；3～30mM(以柠檬酸计)，但药物组合物中的各种成分的浓度不限定于前述的各范围。

本发明例如提供生理非活性的成分双氯芬酸内酰胺的蓄积得到抑制的稳定性优异的组合物，其是对人关节疾病患者(特别是，慢性的关节疾病患者)的关节疾病具有显著的改善效果的组合物，因此在药物产业等中具有产业上的可利用性。

本发明与具体的实施例和各种实施方式相关地进行了记载，但可以在不脱离本发明的精神和范围的情况下，本说明书中记载的大多数实施方式的变更、应用对于本领域技术人员而言是容易理解的。

本申请主张基于于2018年11月16日向日本专利局申请的特愿2018-215867号的优先权，通过参照将该内容整体引入本申请中。