用于制备高纯度别孕烷醇酮及其中间体的方法
文献发布时间:2023-06-19 13:46:35
技术领域
本发明属于药物合成领域,并且更特别地涉及一种高效且工业上可应用的用于制备并纯化别孕烷醇酮(异孕烷醇酮/四氢孕酮)的方法及其有用的中间体。
背景技术
别孕烷醇酮[516-54-1],还称为3α-羟基-5α-孕甾烷-20-酮、5α-孕甾烷-3α-醇-20-酮或3α,5α-四氢孕酮(3α,5α-THP)以及布瑞诺龙(brexanolone)(USAN),是内源性抑制孕甾烷神经类固醇。由脑中的孕酮合成,它是γ-氨基丁酸(GABA)在GABA-A受体处的作用的有效正向别构调节物。别孕烷醇酮具有的作用类似于在GABA-A受体诸如苯二氮
用于静脉内用途的布瑞诺龙注射液(布瑞诺龙IV)是由Sage Therapeutics开发的用于治疗产后抑郁症(PPD)的新颖的产品,产后抑郁症是一种严重且可能危及生命的病症,对此当前没有专门指示药物疗法。FDA预期将于2019年3月批准布瑞诺龙IV。
在现有技术中已经公开了若干种用于合成该化合物的方法。
Purdy等人(J.Med.Chem.1990,33,1572-1581)描述了由异别孕烷醇酮直接制备别孕烷醇酮的差向异构体,结构上不同仅在于类固醇A环的碳3处的羟基基团的取向。在三苯基膦(PPh
方案1
WO 2009/108804在实施例6中公开了用于由异别孕烷醇酮(12)制备别孕烷醇酮(14)的类似程序,没有分离中间体三氟乙酸酯(方案2)。在通过二氧化硅柱纯化之后,获得92%总产率的别孕烷醇酮。
方案2
还已经提出了包括分离中间体光延酯的方法,诸如例如在WO 93/03732、WO 2012/127176和CN 103396467(分别为方案3、4和5)中。
在WO 93/03732的实施例4中,使异别孕烷醇酮与乙酸、三苯基膦(PPh
方案3
WO 2012/127176在实施例4中公开了使异别孕烷醇酮与苯甲酸、三苯基膦(PPh
方案4
CN 103396467在实施例5中公开了通过使用邻甲氧基苯甲酸连同三苯基膦(PPh
方案5
像任何合成化合物一样,别孕烷醇酮可以包含外来化合物或杂质。这些杂质可能包括未反应的起始材料、反应副产物、副反应产物和/或降解产物。别孕烷醇酮或任何活性药物成分(“API”)中的杂质是不受欢迎的,并且在极端情况下,甚至可能对用API的剂型治疗的患者有害。因此,识别制造过程中产生的API的杂质并减少/消除最终产品中杂质的存在对于商业化至关重要。
本发明人已经彻底检查了引用文件中公开的方法并且已经发现它们不可再现地产生足够纯状态的别孕烷醇酮和/或需要色谱纯化步骤。通过柱色谱法的纯化不合适,或者至少是不受欢迎的,对于大量API的工业规模制造,需要极其大量的溶剂,这使得该方法昂贵并且由于环境保护而是不利的。
因此存在需要以开发适用于以商业规模生产高度纯的别孕烷醇酮的方法。
发明内容
本发明通过提供一种简单且工业上可应用的用于制备并纯化别孕烷醇酮及其中间体的方法解决了上述需要。本发明提供的方法允许获得高度纯的别孕烷醇酮及其中间体,而没有柱色谱法辅助。本发明还提供了可用于制备别孕烷醇酮的新颖的中间体。
在广泛研究之后,本发明人已经鉴定了与现有技术中报道的用于由异别孕烷醇酮通过光延反应和随后的水解制备别孕烷醇酮的方法相关的两种重要杂质。这些不受欢迎的杂质是5α-孕甾-2-烯-20-酮(本文还称为杂质I或消除杂质)和3α-羟基-5α,17α-孕甾烷-20-酮(本文还称为杂质II或差向异构体杂质)。
本发明人已经进行了广泛实验,其中目的是减少/消除这样的杂质并获得高纯度形式的别孕烷醇酮。作为这项研究的结果,发明人已经出人意料地发现了基于以下关键特征的新方法:仔细选择要与异别孕烷醇酮反应的酸,借助于特定的非色谱程序分离和纯化中间体酯,以及仔细选择最终的水解条件。
因此,在第一方面,本发明涉及一种用于制备并纯化别孕烷醇酮的3-羧酸酯的方法,所述方法包括:
-在光延条件下使异别孕烷醇酮与强羧酸(例如,具有pka≤3的羧酸)反应;
-使所述别孕烷醇酮的3-羧酸酯在包括水和有机溶剂的溶剂体系中沉淀;以及
-在非极性溶剂中重结晶所述别孕烷醇酮的3-羧酸酯的沉淀物。
在另一方面,本发明涉及一种用于制备别孕烷醇酮的方法,所述方法包括:
-通过以上所限定的方法获得别孕烷醇酮的3-羧酸酯;以及
-在中性条件(例如用醇,而没有任何酸或碱辅助)、温和碱性条件(例如用碱,所述碱的共轭酸具有等于或小于11的pKa)或剧烈碱性条件(例如用碱,所述碱的共轭酸具有等于或大于12的pKa,持续适合于保持3α-羟基-5α,17α-孕甾烷-20-酮的水平为0.5%或更少的量的时间和温度)下,使由此获得的所述别孕烷醇酮的3-羧酸酯经受水解。
任选地,所述方法进一步包括例如通过重结晶纯化别孕烷醇酮的步骤。
在另一方面,本发明涉及别孕烷醇酮或别孕烷醇酮的3-羧酸酯,所述化合物根据一种如本文公开的方法可获得。
在另一方面,本发明涉及高纯度水平的别孕烷醇酮的3-羧酸酯,并且更特别地,包含0.5%或更少的量的5α-孕甾-2-烯-20-酮。
在另一方面,本发明涉及高纯度水平的别孕烷醇酮,并且更特别地,包含总计0.15%或更少的量的5α-孕甾-2-烯-20-酮和3α-羟基-5α,17α-孕甾烷-20-酮。
在另一方面,本发明涉及别孕烷醇酮的3-羧酸酯,其选自:
2,6-二硝基苯甲酸酯,
2,4-二硝基苯甲酸酯,
氯乙酸酯,
二氯乙酸酯,
三氯乙酸酯,
氰基乙酸酯,
氟乙酸酯,
二氟乙酸酯,以及
邻硝基苯甲酸酯。
这些方面及其优选实施方式也在下文中在详细描述和权利要求书中另外限定。
具体实施方式
本发明人已经开发了一种用于制备高度纯的别孕烷醇酮的无色谱法的方法。本发明的方法简单、廉价、可再现并且充分适合工业规模。
如本文所用,术语“约”意指指定值的轻微变化,优选在指定值的10%以内。然而,术语“约”可意指更高的变化公差,这取决于例如所使用的实验技术。技术人员理解指定值的所述变化并且所述变化在本发明的上下文内。进一步地,为了提供更简洁的描述,本文给出的一些定量表达不以术语“约”修饰。应理解,无论是否明确使用术语“约”,本文给出的每个量均意指是指实际给定值,并且还意指是指基于本领域普通技术人员将合理推断出的这样的给定值的近似值,包括由于实验和/或测量条件对这样的给定值的等效值和近似值。
“室温”或其缩写“rt”在本文中意指在没有加热或冷却的情况下进行反应或方法。一般而言,室温可理解为在约15℃与约30℃之间的温度,或更特别地在约20℃与约25℃之间的温度。
术语“有机溶剂”包括例如环状和无环醚(例如Et
术语“水溶性溶剂”是指能够与水完全混合,即以所有比例混合,或部分混合,即以一些比例混合的溶剂。水溶性溶剂包括例如在25℃的温度下5g或更多可溶于100g的水中的有机溶剂。在具体实施方式中,水溶性溶剂选自具有的在25℃下在水中的混溶性大于按重量计50%的有机溶剂。
如本文所用,术语“非极性溶剂”是指极性足够低以诱导极性化合物诸如别孕烷醇酮的3-酯的晶体形成的溶剂。考虑到本公开,合适的非极性溶剂的选择完全在技术人员的知识内。更特别地,术语“非极性溶剂”是指具有Log P>2的溶剂。非极性溶剂具有低介电常数,诸如<5。在实施方式中,非极性溶剂选自由以下组成的组:烃溶剂(例如戊烷、己烷、环己烷、庚烷)、芳族溶剂(例如甲苯、二甲苯)以及环状和无环醚(例如Et
术语“光延条件”是指适合于通过与具体羧酸反应进行将异别孕烷醇酮转化为别孕烷醇酮的3-羧酸酯的条件。用于光延条件的试剂优选为膦(通常为三苯基膦(PPh
术语“中性条件”优选是指在不添加任何酸或碱的情况下用于醇诸如MeOH、EtOH的水解反应(酯交换)。
术语“温和碱性条件”优选是指用于碱的水解反应,该碱的共轭酸具有等于或小于11的pKa。合适的碱包括但不限于碱金属和碱土金属的碳酸盐和碳酸氢盐,诸如碳酸钾、碳酸钠、碳酸钡、碳酸铯、碳酸氢钾和碳酸氢钠。
术语“剧烈碱性条件”优选是指用于碱的水解反应,该碱的共轭酸具有等于或大于12的pKa,持续短的时间和/或在低温下以避免3α-羟基-5α,17α-孕甾烷-20-酮以高于0.5%的量产生。考虑到本公开,合适的时间和温度的选择完全在技术人员的知识内。合适的碱包括但不限于碱金属和碱土金属C
除非另有说明,提及纯度可理解为HPLC纯度。
在再现现有技术中公开的条件时,本发明人注意到,待与异别孕烷醇酮反应的羧酸的适当选择是重要的,以避免/减少杂质的形成,尤其是在光延反应后的水解期间。将杂质水平保持在可接受的限度内使得可以在不依赖柱色谱法的情况下纯化中间体3-羧酸酯和别孕烷醇酮两者。还已经发现需要分离和纯化中间体酯以获得适合大规模生产高度纯的别孕烷醇酮的方法。如果中间体酯不是从某些杂质中纯化,而是以粗形式用于随后的水解反应,则最终别孕烷醇酮的有效纯化的结果是不可行的。
特别地,发明人已经发现,光延反应总是产生大量的,通常约7-17%的5α-孕甾-2-烯-20-酮(本文还称为杂质I或消除杂质):
因此消除杂质是光延反应所固有的。尝试在没有分离和纯化中间体3-酯的情况下制备别孕烷醇酮失败或提供不令人满意的结果,因为需要使最终产物经受复杂的柱色谱法,这不导致可接受的纯度程度。
本发明提供了一种用于由异别孕烷醇酮制备并纯化别孕烷醇酮的3-酯的方法,在优选实施方式中所述方法包括:
-在光延条件下用具有3或更小的pka的有机酸处理异别孕烷醇酮;
-使粗反应混合物在包括水和有机溶剂的混合物的溶剂体系中沉淀;以及
-在非极性溶剂中重结晶沉淀物。
选择具有低pka的有机酸是至关重要的,尤其是因为它使得可以随后进行别孕烷醇酮的3-酯的完全水解。例如,已发现甲酸(pka=3.75)、苯甲酸(pKa=4.20)、乙酸(pKa4.75)、原甲氧基苯甲酸(pKa=4.09)、3-硝基苯甲酸(pKa 3.46)、4-硝基苯甲酸(pKa 3.43)是不合适的。在实施方式中,具有pka≤3的羧酸选自由以下组成的组:单氟乙酸、二氟乙酸和三氟乙酸、单氯乙酸、二氯乙酸和三氯乙酸、氰基乙酸、2-硝基苯甲酸和二硝基苯甲酸(例如2,4-、2,6-和3,5-二硝基苯甲酸)。在更具体的实施方式中,羧酸是氯乙酸或二硝基苯甲酸。通常,羧酸的量为约1-4eq,更特别地约2-3eq。
合适的光延条件优选地包括膦诸如PPh
光延反应通常在有机溶剂的存在下进行,该有机溶剂例如可以选自由以下组成的组:环状和无环醚(例如Et
在实施方式中,异别孕烷醇酮用有机酸在约0-45℃(例如约15-45℃)的合适温度下处理持续足够用于酯形成的时间,通常是在约1-24h之间并且更特别地在约2-12h之间或约4-8h之间。在实施方式中,反应混合物可以在足够的时间以及合适的温度下搅拌以完成酯形成。反应之后可以是薄层色谱法(TLC或HPLC或UPLC)。
在完成后,优选地将水添加到粗反应混合物中并且可以过滤所得悬浮液以获得包含别孕烷醇酮的3-羧酸酯的湿饼。
对于不与水混溶的溶剂,必须去除溶剂,优选地通过蒸发,并用与水混溶的溶剂(水溶性溶剂)代替它,诸如1,4-二噁烷、MeOH、EtOH、IPA、ACN等,然后添加水。
别孕烷醇酮的3-酯的分离根据本发明通过在包括水和有机溶剂的溶剂体系中沉淀进行。这样的沉淀允许减少/消除极性和碱性杂质,诸如衍生自膦和偶氮二甲酸酯的副产物。
优选地,用于沉淀粗3-酯的有机溶剂为水溶性溶剂,诸如环状和无环醚(例如1,4-二噁烷)、酮(例如丙酮、甲乙酮)、腈(例如乙腈、丙腈)、酰胺(例如DMF、DMA、HMPA)、醇(例如甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇)及其混合物。更特别地,水溶性溶剂选自1,4-二噁烷、丙酮、乙腈、DMF、甲醇、乙醇、异丙醇或它们的混合物,甚至更特别地,水溶性溶剂是1,4-二噁烷、乙腈或异丙醇,并且甚至还更特别地,它是1,4-二噁烷。
可以使用不同比例的水和有机溶剂。根据一种实施方式,溶剂体系内的水与有机溶剂是比率范围是约0.1:1至1:0.1,更特别地约0.2:1至1:0.2、0.3:1至1:0.3、0.4:1至1:0.4、0.5:1至1:0.5、0.6:1至1:0.6、0.7:1至1:0.7、0.8:1至1:0.8、0.9:1至1:0.9以及约1:1。
在更特定实施方式中,可以用包括以比率约1:1的水和有机溶剂的溶剂体系方便地沉淀粗别孕烷醇酮的3-酯,其中有机溶剂是1,4-二噁烷、乙腈或异丙醇。
一旦沉淀,优选地干燥别孕烷醇酮的3-酯(例如在减压下)。
别孕烷醇酮的3-酯的纯化使用重结晶在非极性溶剂中实现。有利地,重结晶允许消除或减少5α-孕甾-2-烯-20-酮(即杂质I或消除杂质)的量至约0.5%或更低(例如约0.4%或更低、0.3%或更低、0.2%或更低、0.1%或更低)。可用于诱导晶体形成的非极性溶剂的实例包括但不限于烃溶剂(例如戊烷、己烷、环己烷、庚烷)、芳族溶剂(例如甲苯、二甲苯)以及环状和无环醚(例如Et
因此,本发明提供了高纯度水平的别孕烷醇酮的3-羧酸酯,包括不高于0.5%(例如约0.5%或更低、0.4%或更低、0.3%或更低、0.2%或更低、0.1%或更低)的量的5α-孕甾-2-烯-20-酮。
发明人已经发现某些别孕烷醇酮的3-酯(例如乙酸、甲酸、异丁酸、苯甲酸、邻甲氧基苯甲酸或3-或4-硝基苯甲酸的酯)的水解产生大量的3α-羟基-5α,17α-孕甾烷-20-酮(本文还称为杂质II或差向异构体杂质):
为了适合商业规模的纯化,在水解反应期间保持3α-羟基-5α,17α-孕甾烷-20-酮的水平不高于0.5%是方便的。这可以用衍生自具有低pka(例如3或更小的pka)的羧酸的别孕烷醇酮的3-酯成功实现,其在本发明公开的条件下容易水解。此外,如果根据上文公开的方法获得,则这样的别孕烷醇酮的3-酯还包含低量的5α-孕甾-2-烯-20-酮(≤0.5%)。
在本发明中,水解在中性条件(例如在不添加任何酸或碱的情况下在醇存在下)、温和碱性条件(例如在其共轭酸具有pKa≤11的碱存在下)或剧烈碱性条件(例如,在其共轭酸具有pKa≥12的碱存在下,持续未延长时间和/或不在高温下)下进行。
根据具体实施方式,在中性条件下采用选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、仲丁醇和叔丁醇的醇将酯水解。更特别地,醇是MeOH或EtOH。在实施方式中,将酯在醇中在足够的时间(例如约1-24h或约1-12h)以及合适的温度(例如约15-40℃或约15-25℃)下搅拌以完成水解。反应之后可以是薄层色谱法(TLC)。
根据具体实施方式,在温和碱性条件下采用选自碱金属和碱土金属的碳酸盐和碳酸氢盐诸如碳酸钾、碳酸钠、碳酸钡、碳酸铯、碳酸氢钾和碳酸氢钠的碱将酯水解。更特别地,碱是碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钾或碳酸氢钠,并且甚至更特别地,碱是碳酸钾、碳酸钠。该反应可以在醇诸如甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、仲丁醇或叔丁醇作为溶剂存在下进行。在实施方式中,醇是MeOH或EtOH。在实施方式中,将酯用任何提及的碱优选以约0.2-3eq.或约0.5-2eq.的量在约15-40℃或约15-30℃的合适温度下处理足够水解的时间,通常在约1-4h之间。在实施方式中,可以将反应混合物在足够的时间(例如约1-4h)以及合适的温度(例如约15-40℃或约15-30℃)下搅拌以完成水解。
根据具体实施方式,在剧烈碱性条件下采用选自碱金属和碱土金属C
有利地,别孕烷醇酮以高纯度获得,包括不高于0.5%(例如约0.5%或更低、0.4%或更低、0.3%或更低、0.2%或更低、0.1%或更低)的量的3α-羟基-5α,17α-孕甾烷-20-酮(本文也称为杂质II或差向异构体杂质)。
别孕烷醇酮的分离可以例如通过在包括水和有机溶剂的溶剂体系中沉淀进行。优选地,用于沉淀粗别孕烷醇酮的有机溶剂为水溶性溶剂,诸如环状和无环醚(例如1,4-二噁烷)、酮(例如丙酮、甲乙酮)、腈(例如乙腈、丙腈)、酰胺(例如DMF、DMA、HMPA)、醇(例如甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、仲丁醇、叔丁醇)及其混合物。更特别地,水溶性溶剂选自1,4-二噁烷、丙酮、乙腈、DMF、甲醇、乙醇、异丙醇或它们的混合物,甚至更特别地,水溶性溶剂是1,4-二噁烷、乙腈或甲醇,并且甚至还更特别地,它是甲醇。
可以使用不同比例的水和有机溶剂。根据一种实施方式,溶剂体系内的水与有机溶剂是比率范围是约0.1:1至1:0.1,更特别地约0.2:1至1:0.2、0.3:1至1:0.3、0.4:1至1:0.4、0.5:1至1:0.5、0.6:1至1:0.6、0.7:1至1:0.7、0.8:1至1:0.8、0.9:1至1:0.9以及约1:1。
在更特定实施方式中,可以用包括以比率约0.5:1的水和有机溶剂的溶剂体系方便地沉淀粗别孕烷醇酮,其中有机溶剂是1,4-二噁烷、乙腈或甲醇。
一旦沉淀,优选地干燥别孕烷醇酮(例如,在减压下)。
如果需要,别孕烷醇酮的进一步纯化可以例如使用重结晶实现。可用于诱导晶体形成的溶剂的实例包括但不限于烃溶剂(例如戊烷、己烷、环己烷、庚烷)、芳族溶剂(例如甲苯、二甲苯)、酮(例如丙酮、甲乙酮)、酯(例如EtOAc、iPrOAc)、腈(例如乙腈、丙腈)、醇(例如甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇)及其混合物。在具体实施方式中,非极性溶剂选自MeOH、EtOH、IPA、丙酮、ACN等,并且甚至更特别地,MeOH/水。
有利地,重结晶允许消除或减少杂质水平,以便获得高纯度水平的别孕烷醇酮,包括总计0.15%或更少的量的5α-孕甾-2-烯-20-酮和3α-羟基-5α,17α-孕甾烷-20-酮。在本发明的优选变体中,最终别孕烷醇酮中的所述两者杂质的量是至多0.10%。
本发明允许获得具有高纯度程度诸如高于98%、高于99%并且甚至高于99.5%的别孕烷醇酮,符合通常由药物产品的良好生产规范(GMP)强加的要求。在具体实施方式中,别孕烷醇酮的纯度是≥99.5%并且杂质I和II的总含量等于或低于0.15%、优选地等于或低于0.10%。
在本发明的优选实施方式中,通过包括以下步骤的方法制备别孕烷醇酮:
-在光延条件下使异别孕烷醇酮与强羧酸反应;
-使所述别孕烷醇酮的3-羧酸酯在包括水和有机溶剂的溶剂体系中沉淀;
-在非极性溶剂中重结晶所述别孕烷醇酮的3-羧酸酯的沉淀物;
-在中性条件、温和碱性条件或剧烈碱性条件下使由此获得的所述别孕烷醇酮的3-羧酸酯经受水解以得到别孕烷醇酮;以及
-沉淀并重结晶,从而获得具有的总计杂质I和II的总含量为0.15%或更低的别孕烷醇酮。
本公开提供了用于制备药物组合物的具有的杂质I和II的总含量等于或低于0.15%的别孕烷醇酮。本公开还涵盖了具有的杂质I和II的总含量等于或低于0.15%的别孕烷醇酮用于制备药物组合物的用途。本公开包括用于制备上述药物组合物的方法。这些方法包括将具有的杂质I和II的总含量等于或低于0.15%的别孕烷醇酮与至少一种药学上可接受的赋形剂组合。本公开的别孕烷醇酮和别孕烷醇酮的药物组合物可以用作药物,特别是用于治疗产后抑郁症(PPD)的药物。本公开还提供了治疗产后抑郁症(PPD)的方法,该方法包括向需要治疗的受试者给药治疗有效量的本公开的别孕烷醇酮。
在另一方面,本发明提供了以下别孕烷醇酮的3-酯:
孕甾烷-20-酮,3-(2,6-二硝基苯甲酰氧基)-,(3α,5α)-
孕甾烷-20-酮,3-(2,4-二硝基苯甲酰氧基)-,(3α,5α)-
孕甾烷-20-酮,3-(氯乙酰氧基)-,(3α,5α)-
孕甾烷-20-酮,3-(二氯乙酰氧基)-,(3α,5α)-
孕甾烷-20-酮,3-(三氯乙酰氧基)-,(3α,5α)-
孕甾烷-20-酮,3-(氰基乙酰氧基)-,(3α,5α)-
孕甾烷-20-酮,3-(氟乙酰氧基)-,(3α,5α)-
孕甾烷-20-酮,3-(二氟乙酰氧基)-,(3α,5α)-
孕甾烷-20-酮,3-(2-硝基苯甲酰氧基)-,(3α,5α)-
这些酯可以通过使异别孕烷醇酮与相应的羧酸(即2,6-二硝基苯甲酸、2,4-二硝基苯甲酸、氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸、氰基乙酸、氟乙酸、二氟乙酸或2-硝基苯甲酸)在光延条件下反应来制备。
应当理解,本公开的范围包括本文公开的实施方式的所有可能的组合。
以下实施例仅说明本发明的某些实施方式,而不能被视为以任何方式对其进行限制。
光延:异孕烷醇酮(36g,113.2mmol)、PPh
后处理和分离:在25℃下冷却后,添加水(540mL)并且将所得悬浮液搅拌30min并且然后冷却至20-25℃。将悬浮液过滤并且将湿饼用100mL的二噁烷/水1:1的混合物洗涤。在50℃下在减压下干燥产物,得到32.45g的白色固体(产率:70%;纯度:96%)。消除杂质I(5α-孕甾-2-烯-20-酮):3.5%。
重结晶:获得的干饼悬浮在庚烷(15ml/g)中并在75℃加热直至完全溶解。然后将溶液在0/10℃下冷却并且过滤出沉淀物。将固体用新鲜的庚烷(2ml/g)洗涤并在50℃下在减压下干燥。重量:29.2g;产率:90%;纯度:99.15%。消除杂质I(5α-孕甾-2-烯-20-酮):0.3%。
从在酯沉淀中获得的二噁烷/水母液中分离5α-孕甾-2-烯-20-酮:将母液用更多的水(大约3升)稀释,形成悬浮液并通过过滤分离固体。将滤液悬浮在400ml的庚烷中,在40℃下在一小时期间搅拌并再次过滤,蒸发液体还得到固体,将该固体进行色谱法并通过NMR表征:
NMR信号与文献(Tetrahedron(60)2004,11851-11860)中发现的数据匹配。
水解:氯乙酸酯-布瑞诺龙(29.2g,74.11mmol)悬浮在甲醇(300mL)中并添加碳酸钾(5g,0.5eq)。将反应混合物在30℃下搅拌1h。
后处理和分离:将150ml的水添加并在0/5℃下冷却并过滤固体。然后用60mL的甲醇/水1:0.5的混合物洗涤湿饼。在50℃下在减压下干燥产物,得到22g的粗布瑞诺龙(产率:93%;纯度:>99%)。差向异构体杂质II(3α-羟基-5α,17α-孕甾烷-20-酮):0.23%。
重结晶:获得的干饼悬浮在MeOH(15vol)中并在30℃下在30min期间搅拌,然后添加水(7.5vol)并且将所得悬浮液冷却至5-10℃并过滤,将湿饼干燥,得到20g纯的布瑞诺龙,为白色固体(纯度:>99.8%;DSC 176℃),差向异构体杂质II(3α-羟基-5α,17α-孕甾烷-20-酮):0.08%。没有检测到消除杂质I(5α-孕甾-2-烯-20-酮)。
水解:氯乙酸酯-布瑞诺龙(5g,12.7mmol,具有0.73%的消除杂质,通过HPLC)悬浮在甲醇(50mL)中并添加碳酸钾(0.85g,0.5eq)。将反应混合物在20-25℃下搅拌1h(起始材料含量:0.35%)。
后处理:将150ml的水添加并在0/5℃下冷却并过滤固体。然后用7.5mL的甲醇/水1:0.5的混合物洗涤湿饼。在50℃下在减压下干燥产物,以获得3.77g的粗布瑞诺龙(产率:93%;纯度:>98.93%)。消除杂质I(5α-孕甾-2-烯-20-酮):0.52%。
重结晶:将获得的干饼悬浮在MeOH(25vol)中并在35-40℃下溶解。将反应混合物冷却至20-25℃,并且然后缓慢添加水(12.5vol),得到被过滤的悬浮液。将湿饼干燥,得到3.3g的布瑞诺龙,为白色固体。纯度>99.7%,消除杂质I(5-α-孕甾-3-烯-20-酮):0.21%。
因此,从包含超过0.5%的消除杂质I的酯开始,不可能将其量降低到低于0.15%。
遵循实施例3中公开的方法,但使用包含0.5%的消除杂质I的α-3-氯乙酸酯作为起始材料。获得3.2g布瑞诺龙,其中纯度>98%并且消除杂质I的含量为约0.13%。
因此,从包含0.5%的消除杂质I的酯开始,可能将其量降低到低于0.15%。
水解:氯乙酸酯-布瑞诺龙(5g,12.7mmol,掺杂有0.5%的差向异构体杂质)悬浮在甲醇(50mL)中并添加碳酸钾(0.85g,0.5eq)。将反应混合物在20-25℃下搅拌1h(起始材料含量:0.30%),
后处理:将150ml的水添加并在0/5℃下冷却并过滤固体。然后用7.5mL的甲醇/水1:0.5的混合物洗涤湿饼。在50℃下在减压下干燥产物,以获得3.82g的粗布瑞诺龙(产率:94%;纯度:>99.43%)。差向异构体杂质II(3α-羟基-5α,17α-孕甾烷-20-酮):0.24%。消除杂质I(5α-孕甾-2-烯-20-酮):0.18%。
重结晶:获得的干饼悬浮在MeOH(25vol)中并在35-40℃下溶解,将反应混合物冷却至20-25℃,然后缓慢添加水(12.5vol),得到被过滤的悬浮液,将湿饼干燥,得到3.3g的布瑞诺龙,为白色固体。纯度:99.81%。差向异构体杂质II(3α-羟基-5α,17α-孕甾烷-20-酮):0.1%。消除杂质I(5α-孕甾-2-烯-20-酮):0.02%。
光延:异孕烷醇酮(14g,44mmol)、PPh
在25℃下冷却后,将反应物料(250ml)分成7个样品(每个35ml,包含约2g的酯最终产物)。使每个样品经受蒸发,将残余物再溶解在30ml的不同种类的与水混溶的溶剂(MeOH、ACN、DMF、IPA、丙酮、二噁烷)中,并用相同体积的水诱导沉淀。
光延:异孕烷醇酮(1g,3.14mmol)、PPh
后处理和沉淀:在25℃下冷却后,添加水(10mL)并且将所得悬浮液搅拌30min,然后冷却至10-15℃。将悬浮液过滤并且将湿饼用2mL的二噁烷/水1:1的混合物洗涤。在50℃下在减压下干燥产物,得到0.75的酯,消除杂质量14.6%,通过HPLC。
光延:异孕烷醇酮(1g,3.14mmol)、PPh
后处理和沉淀在25℃下冷却后,添加水(10mL)并且将所得悬浮液搅拌30min,然后冷却至10-15℃。将悬浮液过滤并且将湿饼用二噁烷/水1:1洗涤。在50℃下在减压下干燥产物,得到0.1g的>96%的酯(消除杂质0.5%)。
水解.-将苯甲酰基酯添加到70vol的MeOH和12eq的NaOH的溶液中,将反应混合物在40℃下温热30h,取出样品并通过HPLC分析,存在仅4%的布瑞诺龙最终产物和9%的差向异构体杂质连同酯起始材料。
如还可以在该实施例中以及还从实施例12理解的,布瑞诺龙的苯甲酰基酯不能提供具有可接受的纯度水平的布瑞诺龙。
将三苯基膦(1.2g/g)、氯乙酸(0.75g/g)和异孕烷醇酮装载在圆底烧瓶中,接着是甲苯(10ml/g)。将悬浮液在15℃下冷却,并且滴加DIAD(0.95ml/g)在甲苯(5ml/g)中的溶液,保持温度低于25℃。将所得黄色溶液在35℃下在4h期间加热。消耗起始材料(K1)后,添加NaHCO
如可以理解的,一锅法导致不能与布瑞诺龙分离的升高量的消除杂质(9%)。
将三苯基膦(1.2g)、三氟乙酸(0.6ml,2.5eq)、NaOBz(0.9g)和异孕烷醇酮(1g)装载在圆底烧瓶中,接着是THF(10ml)。将悬浮液在15℃下冷却,并且滴加DIAD(0.95ml)在THF(5ml)中的溶液,保持温度低于25℃。将所得反应物料在25℃下在24h期间保持搅拌。消耗起始材料后,将反应混合物在减压下蒸发至残余物。
添加MeOH(20ml)并且将混合物回流24h,蒸发溶剂,并将残余物通过柱色谱柱纯化,以获得0.69g的布瑞诺龙,纯度:97%。
如可以理解的,一锅法导致具有低纯度水平的布瑞诺龙。
将DIAD(0.46g)、乙酸(0.15ml)和异孕烷醇酮(0.5g)以及甲苯(15ml)装载在圆底烧瓶中。将反应物料在0℃下冷却并添加PPh
该实施例示出消除杂质是光延反应所固有的。
如表中可以看出,苯甲酸酯和4-硝基苯甲酸酯都不容易水解,需要非常剧烈的条件,这引起形成差向异构体(难以纯化)。然而,二硝基苯甲酸酯仅在一小时内水解而不产生差向异构体。
在圆底烧瓶中,将3-α乙酸酯-孕烷醇酮(1g)溶解在15mL的甲醇中。添加0.26g的氢氧化钠(2.4eq),并将反应物料在40℃下搅拌4h。HPLC对照示出起始材料消失。在减压下将溶剂浓缩直到5mL的体积。将混合物倾倒入水(87mL)中,并且在室温下搅拌1小时。
然后将沉淀物过滤并且将湿饼用水(10mL)洗涤,并在50℃下在真空下干燥。
固体的HPLC分析显示存在8.6%的差向异构体杂质(II)。
异孕烷醇酮(0.5g,1.57mmol)、PPh
异孕烷醇酮(0.5g,1.57mmol)、PPh
用相同程序,制备了布瑞诺龙的2-硝基苯甲酰基酯和布瑞诺龙的2,6-二硝基苯甲酰基酯。
异孕烷醇酮(5.0g,15.7mmol)、PPh
异孕烷醇酮(5.0g,15.7mmol)、PPh
- 用于制备高纯度别孕烷醇酮及其中间体的方法
- 19-去甲孕甾-4-烯-3,20-二酮-17α-醇(孕诺酮)的制备方法及其中间体