奥替尼啶双盐酸盐在制备抗肿瘤药物中的应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，特别涉及奥替尼啶双盐酸盐在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)是一种地区性的恶性肿瘤，在美国的发病率为每100,000人有0.4例，而在大多数新病例出现在中东南亚国家。此外，鼻咽癌发病率具有一定的种族及家系遗传的聚集性，例如：婆罗洲的比达友人以及印度北部的纳加人

NPC常规的治疗方法包括放疗或化疗或两者结合。在鼻咽癌高发地区，有限的放射治疗技术和手术设施阻碍了治疗的效果，导致由局部残留肿瘤，进而产生肿瘤复发，大大降低患者总生存率。更重要的是，目前人们对于NPC发病的分子基础仍然知之甚少，鉴于鼻咽部位与脑干细胞区、主要血管和神经非常接近，手术切除通常是肿瘤晚期患者最后的选择。NPC的早期无明显症状，而发病时的一些症状类似头痛、神经性面部疼痛、颈部肿块、鼻衄或鼻塞等容易和其他疾病混淆，导致误诊，造成延误治疗。目前用于晚期鼻咽癌病人的治疗药物有顺铂、5-FU、紫杉醇和吉西他滨等

奥替尼啶二盐酸盐(Octenidine dihydrochloride,OCT)，又称奥替尼啶双盐酸盐，是用于皮肤粘膜和伤口的有效的防腐化合物，其结构式如式I所示：

据相关报道显示，OCT具有抗菌和消炎作用

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供奥替尼啶双盐酸盐在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

奥替尼啶双盐酸盐(OCT)在制备抗肿瘤药物中的应用。

所述的奥替尼啶双盐酸盐的结构式如式I所示：

所述的肿瘤包括不限于鼻咽癌、食管鳞癌、结直肠癌和肺癌等；优选为鼻咽癌。

所述的奥替尼啶双盐酸盐的有效浓度为0～5μM(不包括0)；优选为0.8～ 5μM。

所述药物含有一种或多种药学上可接受的载体或辅料。

所述的辅料为缓释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂和润滑剂中的至少一种；优选为食用油；更优选为玉米油。

所述的药物可以采用本领域的常规方法进一步制成药物制剂；包括口服给药的药物制剂，如胶囊、丸剂、片剂、口服液、颗粒剂等。

奥替尼啶双盐酸盐在制备抑制鼻咽癌细胞生长和/或增殖的药物中的应用。

所述的鼻咽癌细胞包括鼻咽癌细胞CNE-1和SUNE-1中的至少一种。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：本发明结合体外与体内实验，发现奥替尼啶双盐酸盐除了在皮肤表面具有抗炎杀菌作用外，还具有抑制鼻咽癌细胞的生长和增殖的作用，因此可将其用于肿瘤治疗方面，为癌症的辅助治疗提供一种新的药物来源。

附图说明

图1是OCT对鼻咽癌细胞增殖的影响图；其中，A为OCT对鼻咽癌细胞 CNE-1的影响；B为OCT对鼻咽癌细胞CNE-1的影响。

图2是OCT对鼻咽癌CNE-1细胞凋亡的影响图；其中，A为流式细胞检测结果；B为细胞凋亡情况。

图3是OCT对小鼠体内鼻咽癌细胞的成瘤能力的影响图；其中，A为肿瘤照片图；B为肿瘤体积；C为肿瘤重量。

图4是OCT处理小鼠后，小鼠的血清谷草转氨酶和谷丙转氨酶的检测结果图；其中，A为血清谷草转氨酶的活性情况；B为血清谷丙转氨酶的活性情况。

图5是OCT处理小鼠后，小鼠的心、肝、肺和肾组织以及肿瘤的免疫组化检测结果图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。下列实施例中未注明具体实验条件的试验方法，通常按照常规实验条件或按照制造厂所建议的实验条件。除非特别说明，本发明所用试剂和原材料均可通过市售获得。

本发明实施例中的奥替尼啶双盐酸盐(OCT)购买自Targetmol公司 (https://www.targetmol.com)。

本发明实施例中的鼻咽癌细胞CNE-1和SUNE-1购自中国科学院细胞库。

实施例1体外实验

(1)OCT对细胞增殖的影响检测：分别将细胞CNE-1和SUNE-1铺于96 孔板，每个孔铺5000个细胞，培养在37℃、CO

(2)流式细胞术检测细胞凋亡：流式细胞仪检测前用OCT处理细胞CNE-1，即将CNE-1细胞铺于六孔板中进行培养，使其细胞数量24h后达到每孔的70％，然后用不同浓度的OCT(终浓度为0、0.4、0.8、1.6μM)处理CNE-1细胞，处理时间为24h，随后用AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒(碧云天)进行处理，处理方法按照其提供的说明书进行，然后用流式细胞仪进行检测，来研究不同浓度的OCT对鼻咽癌细胞凋亡的影响。

细胞水平的实验结果如图1和2所示：图1中，鼻咽癌的细胞活性随着OCT 浓度的增加而降低；图2中，鼻咽癌CNE-1细胞的细胞凋亡水平随着OCT浓度的增加而升高。说明OCT可以抑制人鼻咽癌细胞的增殖并促进凋亡。

实施例2体内实验

(1)构建鼻咽癌小鼠模型：选取6周龄、NCG雄性小鼠(购于南京模式动物研究中心)，采用皮下注射的方式构建鼻咽癌小鼠模型，即将细胞悬液(鼻咽癌细胞CNE-1)与基质胶(Corning Matrigel Matrix)按体积比为1：1混合，每只小鼠注射2x10

(2)实验分为三组：低浓度药物处理组(5只，注射量为3mg/kg)；高浓度药物处理组(5只，注射量为6mg/kg)；对照组(5只，注射与处理组等体积的常规市售玉米油)。

(3)OCT处理：皮下注射后，肿瘤大小达到5×5mm时，开始用OCT进行处理，用灌胃的方式给药，即将OCT溶解于玉米油中，以3mg/kg和6mg/kg的浓度给药，每两天给药一次，共给药10次；对照组按同样的方式给予等体积的玉米油。3周后，将小鼠安乐死并将肿瘤取出进行观察和测量，同时将心、肝、肺、肾取出送由生物公司(湖北百奥斯生物科技有限公司(广州))做HE染色，肿瘤也送至该生物公司做免疫组化染色(Ki-67染色)。

结果如图3～5所示：图3显示小鼠体内皮下成瘤实验结果，对小鼠使用 OCT灌胃处理后，能够明显抑制鼻咽癌细胞CNE-1的生长；肿瘤体积的生长曲线和肿瘤质量统计表明裸鼠体内皮下成瘤受到OCT的明显抑制，表明OCT可以抑制鼻咽癌细胞生长；图4显示两组小鼠的血清谷草转氨酶和谷丙转氨酶检测均无太大差异；图5是小鼠病理组织切片检测结果，将实验小鼠的心、肝、肺、肾组织进行免疫组化检测，发现实验组和对照组无明显差异，证明OCT作为抗肿瘤药物的使用的安全性。体内实验结果表明OCT可以抑制小鼠体内鼻咽癌细胞移植瘤的生长。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

参考文献：

[1]Sun Z,Wang X,Wang J,Wang J,Liu X,Huang R,et al.Key radioresistanceregulation models and marker genes identified by integrated transcriptomeanalysis in nasopharyngeal carcinoma. Cancer medicine.2021.

[2]Xing X,Zhou X,Yang Y,Li Y,Hu C,Shen C.The impact of bodycomposition parameters on severe toxicities in patients with locoregionallyadvanced nasopharyngeal carcinoma undergoing neoadjuvant chemotherapy.Annalsof translational medicine.2021；9:1180.

[3]Kramer A,Dissemond J,Kim S,Willy C,Mayer D,Papke R,et al.Consensuson Wound Antisepsis:Update 2018.Skin pharmacology and physiology.2018；31:28-58.

[4]Hubner NO,Siebert J,Kramer A.Octenidine dihydrochloride,a modernantiseptic for skin, mucous membranes and wounds.Skin pharmacology andphysiology.2010；23:244-58。