一种解除胰腺癌免疫抑制性微环境的方法

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地，涉及一种解除胰腺癌免疫抑制性微环境的方法。

背景技术

胰腺导管腺癌(PDAC)是全球第四大癌症相关死亡原因，受影响患者的5年生存率低于7％。80-85％的患者没有资格接受肿瘤切除或患有转移性疾病，这使得这种肿瘤类型的治疗极具挑战性。胰腺肿瘤通常表现为致密的细胞外基质，可压缩局部血管，导致灌注不足，从而限制化疗药物的释放。

现有技术中,大多数用于治疗PDAC的药物表现出较差的血浆稳定性、有限的细胞摄取以及较高的药物相关毒性和耐药性。因此，显然需要开发能够治疗PDAC和相关肿瘤类型的新型、毒性较小的治疗方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种解除胰腺癌免疫抑制性微环境的方法，利用超声介导的空化实现解除胰腺癌免疫抑制性微环境,没有毒性和副作用。

本发明要解决的技术问题：大多数用于治疗PDAC的药物表现出较差的血浆稳定性、有限的细胞摄取以及较高的药物相关毒性和耐药性。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种解除胰腺癌免疫抑制性微环境的方法，包括以下步骤：

S1、小鼠荧光素酶稳转胰腺癌Panc02细胞在DMEM中生长，添加质量分数为10％的FBS、1％的青霉素和链霉素,细胞在37℃的浓度为5％的CO

S2、将荧光素酶稳转胰腺癌Panc02细胞注射到模型小鼠胰腺中，建立原位Panc02小鼠胰腺癌模型,植入后第6天，通过在每个时间点注射荧光素并在暴露5s后通过IVIS系统成像来监测原位肿瘤生长,将出现肿瘤的小鼠分出；

S3、小鼠胰腺癌Panc02细胞在DMEM中生长，添加质量分数为10％的FBS、1％的青霉素和链霉素,细胞在37℃的浓度为5％的CO

S4、将Panc02细胞注射在上述的小鼠右侧背部，构建远处瘤模型；

S5、尾静脉注射100μL磷脂包裹的六氟化硫微泡(Sonovue

进一步的，收集不同治疗的Panc02肿瘤进行转录组分析(Novelbio Ltd.,China)，通过Illumina质量过滤器的高质量读数被保留用于序列分析并映射到GRCm38。

本发明的有益效果：

1、本发明技术方案中，超声空化能够重塑肿瘤组织的基因表达谱，下调包括Foxp3、CD274和CTLA4等多个免疫检查点分子及一些共刺激分子，解除抑制性肿瘤免疫微环境。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明一种解除胰腺癌免疫抑制性微环境的方法的治疗示意图。

图2为治疗流程图。

图3为本发明转录组测序结果小提琴图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

一种解除胰腺癌免疫抑制性微环境的方法，包括以下步骤：

S1、小鼠荧光素酶稳转胰腺癌Panc02细胞在DMEM中生长，添加质量分数为10％的FBS、1％的青霉素和链霉素,细胞在37℃的浓度为5％的CO

S2、将荧光素酶稳转胰腺癌Panc02细胞注射到模型小鼠胰腺中，建立原位Panc02小鼠胰腺癌模型,植入后第6天，通过在每个时间点注射荧光素并在暴露5s后通过IVIS系统成像来监测原位肿瘤生长,将出现肿瘤的小鼠分出；

S3、小鼠胰腺癌Panc02细胞在DMEM中生长，添加质量分数为10％的FBS、1％的青霉素和链霉素,细胞在37℃的浓度为5％的CO

S4、将Panc02细胞注射在上述的小鼠右侧背部，构建远处瘤模型；

S5、尾静脉注射100μL磷脂包裹的六氟化硫微泡(Sonovue

进一步的，收集不同治疗的Panc02肿瘤进行转录组分析(Novelbio Ltd.,China)，通过Illumina质量过滤器的高质量读数被保留用于序列分析并映射到GRCm38。

如图1-3所示,超声空化能够重塑肿瘤组织的基因表达谱，下调包括Foxp3、CD274和CTLA4等多个免疫检查点分子及一些共刺激分子，解除抑制性肿瘤免疫微环境。

在说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“示例”、“具体示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。

以上内容仅仅是对本发明的构思所作的举例和说明，所属本技术领域的技术人员对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，只要不偏离发明的构思或者超越本权利要求书所定义的范围，均应属于本发明的保护范围。