一种青海湖裸鲤成鱼饲料、制备方法及裸鲤饲养方法

技术领域

本发明涉及水产养殖技术领域，具体涉及一种青海湖裸鲤成鱼饲料、制备方法及裸鲤饲养方法。

背景技术

青海湖裸鲤俗称“湟鱼”，为高原土著鱼类，也是青海湖“水—鸟—鱼”生态链中的核心物种，2004年青海湖裸鲤被列入《中国物种红色名录》濒危物种名单中。青海湖裸鲤具有很高的生态、科研、经济价值，因此为了有效保护青海湖珍稀鱼类资源以及满足旺盛的市场需求，人工养殖方面取得了突破性的进展。但是目前针对人工青海湖裸鲤所使用的饲料还是非常有局限性，虽然已经有相关技术研究，但是目前市面上仍旧难以购买到针对青海湖裸鲤的饲料，人工养殖的饲料通常为市售的普通鱼类饲料。

青海湖裸鲤生长速度十分缓慢，而且青海湖裸鲤身体裸露无鳞，在人工淡水化养殖车间开展水产养殖时，由病原微生物、原生动物、甲壳类等引起的疾病发生，使得其存活率较低，因此不利于人工养殖的进一步发展。

发明内容

针对上述问题，本发明拟提供一种能够提高青海湖裸鲤成鱼生长速度，增强鱼体免疫力，提高成活率的饲料。

研究表明在鱼类饲料中添加一定的大蒜对鱼类具有诱食作用，还可以提高其免疫力和存活率。但大蒜的资源量少,成本高等特点抑制了大蒜在水产行业的发展。而在日常生产中对于大蒜的利用不够充分，在大蒜废弃物中仍含有多种大蒜功效成分，如大蒜素、多糖等，直接遗弃掉大蒜废弃物，会造成资源的极大浪费。

本发明通过亚临界水萃取和超临界二氧化碳萃取，提取出大蒜废弃物中功效成分，制备成饲料，实现对大蒜废弃物的二次利用。其次，通过Box-Behnken中心组合试验设计，采用响应面法评估了饲料中的基础营养成分组、大蒜提取物组与其他成分组对青海湖裸鲤体重平均增长和成活率的影响，对饲料配方进行了相应的优化，得到了对体重增长和成活率分别具有针对性的饲料配比。

为了达到上述的技术效果，本发明采取以下技术方案：

一种青海湖裸鲤成鱼饲料，它包括以下重量份的原料组成：基础营养成分组：青稞粉50～60份、蛋白粉25～35份、蕨麻粉15～25份、南极虾粉10～20份；大蒜提取物组：大蒜废弃物亚临界水萃取物干膏粉10～20份、大蒜废弃物超临界二氧化碳萃取物干膏粉10～20份；其他成分组：花生油5～10份、氨基酸3～5份、食盐3～5份、沙棘子3～5份、蜂蜜3～5份。

其中，所述南极虾粉为南极虾的干燥粉末，常用作饲料成分，对鱼类有诱食作用。

沙棘子指沙棘的果实，其具有很高的药用价值，能够在一定程度上增强鱼类抵抗力。

通过评估饲料中的基础营养成分组、大蒜提取物组与其他成分组对青海湖裸鲤体重平均增长影响，对饲料配方进行相应的优化，得到一种青海湖裸鲤成鱼饲料，是由以下重量份的原料组成：青稞粉62～63份、蛋白粉36～37份、蕨麻粉26～27份、南极虾粉20～21份；大蒜废弃物亚临界水萃取物干膏粉12～13份、大蒜废弃物超临界二氧化碳萃取物干膏粉12～13份；花生油5～6份、氨基酸2～3份、食盐2～3份、沙棘子2～3份、蜂蜜2～3份。该饲料配方主要能够针对性地提高裸鲤的增重速度。

进一步地，一种青海湖裸鲤成鱼饲料，是由以下重量份的原料组成：青稞粉62.88份、蛋白粉36.68份、蕨麻粉26.2份、南极虾粉20.96份；大蒜废弃物亚临界水萃取物干膏粉12.4份、大蒜废弃物超临界二氧化碳萃取物干膏粉12.4份；花生油5.08份、氨基酸2.54份、食盐2.54份、沙棘子2.54份、蜂蜜2.54份。

再次，通过评估饲料中的基础营养成分组、大蒜提取物组与其他成分组对青海湖裸鲤存活率的影响，对饲料配方进行相应的优化，得到一种青海湖裸鲤成鱼饲料，是由以下重量份的原料组成：青稞粉66～67份、蛋白粉38～39份、蕨麻粉27～28份、南极虾粉22～23份；大蒜废弃物亚临界水萃取物干膏粉6～7份、大蒜废弃物超临界二氧化碳萃取物干膏粉6～7份；花生油2～3份、氨基酸1～2份、食盐1～2份、沙棘子1～2份、蜂蜜1～2份。该饲料配方主要能够针对性地提高裸鲤的存活率。

进一步地，一种青海湖裸鲤成鱼饲料，是由以下重量份的原料组成：青稞粉66.6份、蛋白粉38.5份、蕨麻粉27.5份、南极虾粉22.2份、大蒜废弃物亚临界水萃取物干膏粉6.62份、大蒜废弃物超临界二氧化碳萃取物干膏粉6.62份、花生油2.48份、氨基酸1.24份、食盐1.24份、沙棘子1.24份、蜂蜜1.24份。本发明还提供一种青海湖裸鲤成鱼饲料的制备方法，包括以下过程：

(1)称取干燥至恒重的大蒜废弃物置于亚临界水萃取釜中，当系统各部分均达到120～130℃后，泵入萃取剂超纯水，萃取釜升压至5～10MPa，收集器收集萃取液，动态萃取1～1.5h，回收萃取液，药渣备用，合并提取液，干燥得大蒜废弃物亚临界水萃取物的干膏粉；

(2)取步骤(1)中的药渣于超临界二氧化碳流体萃取设备，萃取温度40～45℃、萃取压力为25～35MPa，时间为1～2h，收集提取物，过滤，合并滤液，浓缩干燥得大蒜废弃物超临界二氧化碳萃取物的干膏粉；

(3)按照组分配比称取原料，混合均匀后制颗粒，烘干。

亚临界水可用于萃取各种固体样品中的被测物和各种难萃取的天然产物，研究表明其能够有效萃取多糖多酚类物质，能够有效提取大蒜废弃物中的多糖多酚等功效成分。

超临界二氧化碳萃取技术条件具有低温处理、提取率高、对人体无害、安全稳定等特点，并且能够有效提取大蒜中的大蒜素。

本发明还提供一种青海湖裸鲤成鱼的饲养方法，包括：采用所述的青海湖裸鲤成鱼饲料进行饲养。

进一步地，所述饲养方法为采用针对性提高存活率的饲料喂食20天，再采用针对性提高增重速度的饲料喂食40天，每日投料2次、投料量为每100尾喂食5克。

与现有技术相比，本发明具有以下的有益效果：

本发明的饲料能够满足青海湖裸鲤成鱼的营养需求，可以提高青海湖裸鲤成鱼的生长速率，并且增加鱼体免疫力，降低死亡率。

本发明的青海湖裸鲤成鱼的饲养方法，技术实施简单，效果明显，饲养60天后实际体重平均增重为8.686％，裸鲤存活率为89.107％。

本发明的饲料实现了大蒜废弃物的二次利用，能够有效资源利用效率，保护环境。

具体实施方式

下面结合本发明的实施例对本发明作进一步的阐述和说明。以下各实施例中的“份”均指重量份，配方中的产品均通过市售购买所得。

以青海湖裸鲤体重平均增长和成活率为响应值，进行Box-Behnken中心组合试验设计，采用响应面法(response surface methodology，RSM)评估了基础营养成分组、大蒜提取物组与其他成分组对青海湖裸鲤体重平均增长和成活率的影响。

选取1800尾体型均匀，体色正常，生命力良好，年龄类似的青海湖裸鲤作为实验对象，其平均体重35g左右，将1800尾裸鲤随机分为36组，分别饲养到水质、地形相同的水池中，实验阶段分为两个阶段，分别对裸鲤进行检测，试验期间，实验组食用按照本发明制备方法制备的饲料，对照组采用市面购买的普通鱼类饲料，为四川斯特佳饲料有限公司生产的苗特佳生物活性饲料，饲料编号为T6。每日投料2次数、投料量90克、投料时间等均相同，饲养60天后，对裸鲤体重平均增重和成活率进行统计，具体实验结果见表1与表3。

基础营养成分组：

-1：青稞粉50份、蛋白粉25份、蕨麻粉15份、南极虾粉10份；

0:青稞粉55份、蛋白粉30份、蕨麻粉20份、南极虾粉15份；

1:青稞粉60份、蛋白粉35份、蕨麻粉25份、南极虾粉20份；

大蒜提取物组：

-1:大蒜废弃物亚临界水萃取物干膏粉10份、大蒜废弃物超临界二氧化碳萃取物的干膏粉10份；

0:大蒜废弃物亚临界水萃取物干膏粉15份、大蒜废弃物超临界二氧化碳萃取物的干膏粉15份；

1:大蒜废弃物亚临界水萃取物干膏粉20份、大蒜废弃物超临界二氧化碳萃取物的干膏粉20份；

其他成分组：

-1:花生油5份、氨基酸3份、食盐3份、沙棘子3份、蜂蜜3份；

0:花生油7.5份、氨基酸4份、食盐4份、沙棘子4份、蜂蜜4份；

1:花生油10份、氨基酸5份、食盐5份、沙棘子5份、蜂蜜5份；

(一)青海湖裸鲤成鱼增重试验

表1 Box-Behnken中心组合设计方案及裸鲤体重平均增长试验结果

表2拟合二次多项式模型的方差分析

注：P<0.01，差异极显著；P<0.05，差异显著。

由方差分析结果可知：模型的F＝171.52，P＝0.0001<0.01，说明本试验所选用的二次多项模型具有高度的显著性。因此，该模型拟合程度较好，可以用此模型来分析和预测大蒜废弃物亚临界水萃取物与超临界二氧化碳提取物用于青海湖裸鲤成鱼饲料对裸鲤体重平均增重的影响。在总的作用因素中，回归方程一次项具有较高的显著性，表明基础营养成分组、大蒜提取物组以及其他成分组对裸鲤体重平均增重有比较显著的影响。

根据DesignExpert 8.0.7.1软件对试验结果进行最优化分析，确定最佳的提取条件为：基础营养成分组0.262、大蒜提取物组0.155以及其他成分组0.127，即基础营养成分组为:青稞粉15.72份、蛋白粉9.17份、蕨麻粉6.55份、南极虾粉5.24份；大蒜提取物组：大蒜废弃物亚临界水萃取物干膏粉3.1份、大蒜废弃物超临界二氧化碳萃取物的干膏粉3.1份；其他成分组：花生油1.27份、氨基酸0.635份、食盐0.635份、沙棘子0.635份、蜂蜜0.635份；在此条件下预测裸鲤体重平均增重为8.736％(标记为饲料1)。经试验，裸鲤实际体重平均增重为8.727％，与预测结果基本一致。

(二)青海湖裸鲤成鱼存活率试验

表3 Box-Behnken中心组合设计方案及裸鲤成活率试验结果

表4拟合二次多项式模型的方差分析

注：P<0.01，差异极显著；P<0.05，差异显著。

由方差分析结果可知：模型的F＝17.75，P＝0.0005<0.01，说明本试验所选用的二次多项模型具有高度的显著性。因此，该模型拟合程度较好，可以用此模型来分析和预测大蒜废弃物亚临界水萃取物与超临界二氧化碳提取物用于青海湖裸鲤成鱼饲料对裸鲤存活率的影响。在总的作用因素中，回归方程一次项具有较高的显著性，表明基础营养成分组、大蒜提取物组以及其他成分组对裸鲤存活率有比较显著的影响。

根据DesignExpert 8.0.7.1软件对试验结果进行最优化分析，确定最佳的提取条件为：基础营养成分组1.110、大蒜提取物组0.321以及其他成分组0.248，即基础营养成分组为:青稞粉66.6份、蛋白粉38.5份、蕨麻粉27.5份、南极虾粉22.2份；大蒜提取物组：大蒜废弃物亚临界水萃取物干膏粉6.62份、大蒜废弃物超临界二氧化碳萃取物的干膏粉6.42份；其他成分组：花生油2.48份、氨基酸1.24份、食盐1.24份、沙棘子1.24份、蜂蜜1.24份(标记为饲料2)；在此条件下预测裸鲤存活率为88.434％。经试验，裸鲤存活率为89.368％，与预测结果基本一致。

(三)实施例

实施例1

一种青海湖裸鲤成鱼饲料，它是由以下重量份的原料组成：

青稞粉62.88份、蛋白粉36.68份、蕨麻粉26.2份、南极虾粉20.96份；大蒜废弃物亚临界水萃取物干膏粉12.4份、大蒜废弃物超临界二氧化碳萃取物干膏粉12.4份；花生油5.08份、氨基酸2.54份、食盐2.54份、沙棘子2.54份、蜂蜜2.54份。

饲料制备过程：

(1)称取干燥至恒重的10kg大蒜废弃物样品置于亚临界水萃取釜中，当系统各部分均达到130℃后，将萃取剂(超纯水)泵入萃取系统中，萃取釜升压至7MPa，收集器收集萃取液，动态萃取90min，回收萃取液，药渣备用，合并提取液，干燥，减压喷雾干燥即得大蒜废弃物亚临界水萃取物的干膏粉；

(2)取步骤(1)中的药渣于超临界二氧化碳流体萃取设备，以萃取温度44℃、萃取压力33MPa萃取1.6h，收集提取物，过滤，合并滤液，浓缩，干燥，减压喷雾干燥即得大蒜废弃物超临界二氧化碳萃取物的干膏粉；

(3)按照各组分配比称取所有原料，将原料混合均匀后，制颗粒，烘干，得到饲料1。

实施例2

一种青海湖裸鲤成鱼饲料，它是由以下重量份的原料组成：

青稞粉66.6份、蛋白粉38.5份、蕨麻粉27.5份、南极虾粉22.2份；大蒜废弃物亚临界水萃取物干膏粉6.62份、大蒜废弃物超临界二氧化碳萃取物的干膏粉6.62份；花生油2.48份、氨基酸1.24份、食盐1.24份、沙棘子1.24份、蜂蜜1.24份。

饲料制备过程：

(1)称取干燥至恒重的10kg大蒜废弃物样品置于亚临界水萃取釜中，当系统各部分均达到130℃后，将萃取剂(超纯水)泵入萃取系统中，萃取釜升压至7MPa，收集器收集萃取液，动态萃取90min，回收萃取液，药渣备用，合并提取液，干燥，减压喷雾干燥即得大蒜废弃物亚临界水萃取物的干膏粉；

(2)取步骤(1)中的药渣于超临界二氧化碳流体萃取设备，以萃取温度44℃、萃取压力33MPa萃取1.6h，收集提取物，过滤，合并滤液，浓缩，干燥，减压喷雾干燥即得大蒜废弃物超临界二氧化碳萃取物的干膏粉；

(3)按照各组分配比称取所有原料，将原料混合均匀后，制颗粒，烘干，得到饲料2。

选取100尾体型均匀，体色正常，生命力良好，年龄类似的青海湖裸鲤作为实验对象，其平均体重35g左右，试验期间，实验组食用按照本发明制备方法制备的饲料2喂食20天，再采用本发明制备方法制备的饲料1饲养40天，每日投料2次数、投料量5克、投料时间等均相同，对裸鲤体重平均增重和成活率进统计，结果显示裸鲤实际体重平均增重为8.686％，裸鲤存活率为89.107％。