一种紫苏提取物及其作为植物抗菌物的应用

技术领域

本发明涉及生物农药技术领域，具体涉及植物源生物农药，更具体涉及一种紫苏提取物及其作为植物抗菌物的应用。

背景技术

植物源生物农药的针对性比较强，不会对非靶标的生物造成伤害；植物源提取物成分多样化，各活性成分间还会有协同作用，不同活性成分对病害的作用靶位不同，所以相对于化学农药而言，采用植物源生物农药时，病原菌不容易对农药产生抗药性；又因植物源农药自身是来源于自然的天然产物，所以能够自然的消解，不会产生对环境具有破坏性的物质，因此开发出高效的生物农药对于保护生态环境，人畜健康都有重要的意义。

细菌性果斑病(bacterial fruit blotch，BFB)是一种在全球范围内危害西甜瓜产业的毁灭性细菌病害。传染性极强，发病迅速，危害严重，对瓜类产业具有毁灭性的影响。

细菌性软腐病(soft rot)是我国叶菜类蔬菜发生的重要病害之一，在植株整个生长期均可为害，其病原菌为胡萝卜软腐果胶杆菌，该病害在我国大部分地区广泛发生，主要通过土壤传播，发病极快，在高温多雨的天气下发病尤为严重，能够导致叶菜产量和品质大幅度下降，造成巨大的经济损失。

因此，若能开发出对上述病原细菌有抑制作用的植物源生物农药，将对西甜瓜和叶菜类蔬菜的产业经济有重大帮助。

紫苏为一年生唇形科草本植物紫苏(Perilla frutescens)。据报道，紫苏具有抗炎、抗氧化、抑菌等作用，且富含紫苏醛、柠檬醛、迷迭香酸等多种活性物质，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌和柠檬青霉均有很强的抑制效果，在植物病原菌方面对胶孢炭疽菌、尖孢镰刀菌、茶炭疽菌等植物病原真菌具有较强的抑制效果，但在对植物病原细菌的抑菌作用方面尚无报道。

有鉴于此，提出本发明。

发明内容

本发明的目的是针对上述的问题之一，提供一种紫苏提取物及其作为植物抗菌物的应用，其可以防治由胡萝卜软腐果胶杆菌导致的十字花科蔬菜软腐病和西瓜嗜酸菌导致的瓜类细菌性果斑病，提高食品安全性。

其中，一种紫苏提取物，通过如下技术方案实现：

一种紫苏提取物，其特征在于，所述紫苏提取物为醇提物，所述醇提物的提取方法为：将紫苏用水清洗烘干后粉碎，过筛得紫苏粉，称取紫苏粉50g，于10倍体积的95％乙醇中充分浸泡24h，在35℃气浴恒温振荡器中提取12h，抽滤获得提取液；采用旋转蒸发的方法将提取液浓缩，备用。

所述紫苏提取物作为植物抗菌物的应用，其特征在于，所述紫苏提取物对以下植物病害病原细菌有显著的抑菌活性，主要包括十字花科蔬菜软腐病病原细菌和/或瓜类细菌性果斑病菌。

进一步的，所述十字花科蔬菜软腐病病原细菌为胡萝卜软腐果胶杆菌；

和/或所述瓜类细菌性果斑病菌为西瓜嗜酸菌；

优选的，所述胡萝卜软腐果胶杆菌为胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种。

进一步的，所述醇提物的浓度为6.25mg/mL～100mg/mL。

进一步的，所述紫苏粉碎后过40-50目筛。

进一步的，当醇提物浓度为100mg/mL时，对胡萝卜软腐果胶杆菌和西瓜嗜酸菌的抑制率分别为54％和75％。

本发明的有益效果为：

1、本发明将紫苏提取物应用于抑制植物病原细菌领域，开拓了紫苏的新用途，以及将紫苏提取物应用于抑制胡萝卜软腐果胶杆菌和西瓜嗜酸菌活性的新思路，能够有效防治因胡萝卜软腐果胶杆菌引起的十字花科蔬菜软腐病和西瓜嗜酸菌引起的瓜类细菌性果斑病。

2、将紫苏提取物应用到抑制胡萝卜软腐果胶杆菌和西瓜嗜酸菌活性中，紫苏提取物是植物次生代谢产物，能参与自然的物质与能量代谢，施于植物或环境中，不会引起生物富集，不会造成环境污染，亦无残留。

3、本发明以紫苏为原料制得提取物，原料来源广，价格低廉，生产成本低，生产工艺简单，适用于各种规模生产。

附图说明

图1为紫苏水提取液对胡萝卜软腐果胶病菌抑菌效果；

图2为紫苏水提取液对西瓜嗜酸菌抑菌效果。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种紫苏醇提取物的提取

将紫苏用水清洗后烘干后粉碎，过40目筛得紫苏粉，称取紫苏粉50g，于10倍体积的95％乙醇中充分浸泡24h，在35℃气浴恒温振荡器中提取12h，抽滤获得提取液。采用旋转蒸发的方法将提取液浓缩至1g/mL，备用。

在后续抑菌实验中，以蒸馏水为溶剂，溶解上述提取液至所需浓度。

实施例2

一种紫苏醇提取物的提取

将紫苏用水清洗后烘干后粉碎，过50目筛得紫苏粉，称取紫苏粉50g，于10倍体积的95％乙醇中充分浸泡24h，在35℃气浴恒温振荡器中提取12h，抽滤获得提取液。采用旋转蒸发的方法将提取液浓缩至1g/mL，备用。

在后续抑菌实验中，以蒸馏水为溶剂，溶解上述提取液至所需浓度。

实施例3

检测紫苏提取物对软腐病菌的抑制效果

参见图1，用牛津杯法测定紫苏提取物对十字花科蔬菜(小白菜)软腐病菌的影响。将软腐病菌(胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种)在NA平板上划线活化，并放置于28℃培养箱中培养48h，在平板上挑取单菌落接种在NB培养基中，在摇床内28℃，180rpm振荡培养12h配制成软腐病菌菌悬液。将己溶解的NA培养基每皿15mL倒入9cm培养皿中，待培养基冷却凝固后，将软腐病菌菌悬液滴加在NA平板，用玻璃涂布棒均匀涂布，并在超净工作台内吹干，制成含菌平板。用镊子将已灭菌的牛津杯(外径8mm)均匀地放在含菌平板上，每皿放置8只牛津杯。将实施例1制得的紫苏提取物分别用无菌水配制为不同的质量浓度的液剂，质量浓度依次为100mg/mL；90mg/mL；75mg/mL；50mg/mL；30mg/mL。分别吸取每种杀菌剂各浓度200μL加入到牛津杯内，每处理重复3次。以加入清水的处理为对照。置于28℃的恒温培养箱中，48h后用测量抑菌圈直径，并计算每种药剂的抑菌率、毒力回归方程、EC

表1：不同质量浓度紫苏醇提取液对胡萝卜软腐果胶杆菌抑菌情况

实施例4

检测紫苏提取物对西瓜嗜酸菌的抑菌活性

参见图2，用牛津杯法测定紫苏提取物对西瓜嗜酸菌的影响。将西瓜嗜酸菌在NA平板上划线活化，并放置于28℃培养箱中培养48h，在平板上挑取单菌落接种在NB培养基中，在摇床内28℃，180rpm振荡培养12h配制成西瓜嗜酸菌菌悬液。将已溶解的NA培养基每皿15mL倒入9cm培养皿中，待培养基冷却凝固后，将西瓜嗜酸菌菌悬液滴加在NA平板，用玻璃涂布棒均匀涂布，并在超净工作台内吹干，制成含菌平板。用镊子将已灭菌的牛津杯(外径8mm)均匀地放在含菌平板上，每皿放置8只牛津杯。将实施例1中制得的紫苏提取物分别用无菌水配制为不同的质量浓度的液剂，分别吸取每种杀菌剂各浓度200μL加入到牛津杯内，每处理重复3次。以加入清水的处理为对照。置于28℃的恒温培养箱中，48h后用测量抑菌圈直径，并计算每种药剂的抑菌率、毒力回归方程及EC

表2：不同质量浓度紫苏水提取液对西瓜嗜酸菌抑菌情况

最终计算得到紫苏提取物对胡萝卜软腐果胶杆菌和西瓜嗜酸菌的毒力回归方程的EC

表3：紫苏提取物对胡萝卜软腐果胶杆菌和西瓜嗜酸菌的毒力