一种基于活性硒和单分子水的口腔喷雾及其制备方法

技术领域

本发明涉及口腔喷雾剂领域，具体涉及一种基于活性硒和单分子水的口腔喷雾及其制备方法。

背景技术

喷雾剂以其独特的给药方式，极大地方便了患者的口腔、皮肤及腔道黏膜用药。口腔喷雾是将药物或与适宜辅料置于密闭容器内，使用时借助手动泵等方式将内容物呈雾状物释出，喷至腔道黏膜等部位的药物制剂。硒是人所必需的微量元素，摄入足够含量的硒元素可以治疗或预防愈多疾病，通过在口腔喷雾中添加补硒剂，可制备出含活性硒的口腔喷雾。

目前常用有机硒化合物作为补硒剂，其中多糖类有机物合成的硒多糖因具有较好的生物活性被广泛使用，但是，常用的多糖与硒试剂反应时硒化效率差，生成的硒多糖的硒含量较低，另外，多糖的溶解性能差导致喷雾剂的黏度高，使口腔喷雾的触发压力大、出雾角度小，从而影响口腔喷雾的使用效果，因此，需要一种基于活性硒和单分子水的口腔喷雾及其制备方法，制备出硒含量高和溶解性能好的硒多糖口腔喷雾，来解决以上问题。

发明内容

鉴于上述现有技术的不足，本发明的目的在于提一种基于活性硒和单分子水的口腔喷雾及其制备方法。

S1：原料提取物的预处理

称取玄参地上部分提取物20-23质量份，杜仲叶提取物9-12质量份，于40-50℃干燥，过0.42-0.55mm孔径筛，得玄参粉末和杜仲叶粉末，装入干燥器中备用；

S2：原料粉末的超声波溶解

将玄参粉末和杜仲叶粉末分别加入到30-40％的乙醇溶液中，搅拌混匀后，在超声波发生器中振荡溶解，3000-4000r/min高速离心，过滤，滤渣再用相同体积分数的乙醇溶液超声波溶解，过滤合并滤液，合并以上两种溶液，放置过夜，过滤，弃去沉淀，得原料药液；

S3：脱乙酰壳聚糖的制备

将甲壳素粉碎，过筛，超微粉碎，加入氢氧化钠溶液，进行脱乙酰反应，用酸碱滴定检测生成壳聚糖的脱乙酰基度，用蒸馏水中止反应，抽滤，洗涤，烘干，得脱乙酰壳聚糖；

S4：壳聚糖的离子凝胶微粒化处理

将脱乙酰壳聚糖用醋酸溶液溶解，滴加三聚磷酸钠溶液和果胶溶液，搅拌混合，离心，取沉淀冷冻干燥，得壳聚糖微粒；

S5：壳聚糖硒的制备

将壳聚糖微粒溶解于醋酸，加入亚硒酸钠溶液，调节pH，搅拌混合，离心，取上清液，加入乙醇，静置，离心，取沉淀洗涤，烘干，得壳聚糖硒；

S6：活性硒口腔喷雾的配置

将氨基酸离子液体水溶液和壳聚糖硒混合溶解，离心，过筛，加入矫味剂、矫嗅剂和壳聚糖硒溶液，加入乙醇溶液，分装于塑料喷雾瓶中，得活性硒口腔喷雾。

进一步地，步骤S3脱乙酰壳聚糖的制备，具体包括以下步骤：

S3.1：将甲壳素粗粉碎，过50-60目筛，置于碾磨式超微粉碎机中，进行超微粉碎，转速30-40r/min，碾磨15-60min，得甲壳素细粉；

S3.2：称取4-6份甲壳素细粉加入反应容器中，再向反应容器中加入浓度为40-50％的氢氧化钠溶液，甲壳素细粉和氢氧化钠溶液的料液比为1：(8-10)，均匀分散后，置于90-100℃油浴中，进行脱乙酰反应，反应1-3h；

S3.3：当计时器达到设定阈值，控制器打开真空泵，反应液通过取样管流至样品瓶中，微型流量计达到设定阈值，控制器关闭真空泵，打开泄压泵，泄压阀检测压力恢复正常，关闭泄压阀，颜色探测器检测到样品瓶溶液颜色发生变化，打开碱液阀门，缓慢滴加碱液，直至颜色探测器检测到颜色再次变化，控制器关闭碱液阀门，人工向样品瓶中滴加2-3滴指示剂；

S3.4：取出反应物倒入150-200体积份蒸馏水中，中止反应，抽滤，固体物用蒸馏水和无水乙醇洗涤，50-60℃烘干，得脱乙酰壳聚糖。

进一步地，步骤S4壳聚糖的离子凝胶微粒化处理，具体包括以下步骤：

S4.1：称取1-3质量份脱乙酰基度为85-90％的壳聚糖，溶解于100-150体积份的0.2-0.5％醋酸溶液中，磁力搅拌10-12h，得壳聚糖溶液；

S4.2：取20-30体积份壳聚糖溶液，磁力搅拌下缓慢滴加10-15体积份0.1-0.4％三聚磷酸钠溶液和4-6体积份质量分数为0.04-0.06％果胶溶液，50-60℃搅拌30-40min；

S4.3：4-6℃离心20-30min，取沉淀冷冻干燥10-12h，得壳聚糖微粒。

进一步地，步骤S5壳聚糖硒的制备，具体包括以下步骤：

S5.1：称取1-3质量份壳聚糖微粒，溶于100-120体积份1-3％醋酸，搅拌至溶液澄清，缓慢加入10-12体积份0.15-0.35g/mL亚硒酸钠溶液，调节pH值为4-6，搅拌6-10h；

S5.2：2000-3000r/min离心10-12min，取上清液，加入上清液2-3倍体积量的85-95％乙醇，静置12-16h；

S5.3：离心，取沉淀洗涤，再次离心，洗涤沉淀，低温烘干，得壳聚糖硒。

进一步地，步骤S6活性硒口腔喷雾的配置，具体包括以下步骤：

S6.1：取30-40体积份2-3％的氨基酸离子液体水溶液，磁力搅拌下加入0.1-0.3质量份壳聚糖硒，搅拌溶解5-6h，高速离心，过350-400目滤网，得壳聚糖硒溶液；

S6.2：往壳聚糖硒溶液中缓慢加入8-10体积份矫味剂和0.3-0.5质量份矫嗅剂，边加边搅拌，加入壳聚糖硒溶液，搅拌混合；

S6.3：补充30-40％乙醇溶液至100-120体积份，摇匀，分装于20-30体积份的塑料喷雾瓶中，得活性硒口腔喷雾。

进一步地，步骤S3.3样品瓶中的溶液为20-30mL0.01-0.03mol/L盐酸溶液，指示剂为体积比1：2-3的甲基橙-苯胺蓝混合指示剂，碱液为0.01-0.03mol/L氢氧化钠溶液；系统根据消耗的氢氧化钠溶液的滴定量计算出反应生成壳聚糖的脱乙酰度，若结果未到达设定数值范围，发送信号给控制器打开短时计时器，当短时计时器达到设定时长，重复上述滴定操作，直至系统检测到壳聚糖的脱乙酰度达到设定范围，关闭系统。

进一步地，步骤S6.1中的氨基酸离子液体水溶液为甘氨酸盐酸盐离子液体水溶液。

进一步地，步骤S6.2中的矫味剂为单糖浆，矫嗅剂为薄荷脑的少量乙醇溶液。

一种基于活性硒和单分子水的口腔喷雾，其由上述的基于活性硒和单分子水的口腔喷雾的制备方法制备得到。

有益效果是：

1、本发明使用壳聚糖为有机多糖原料，通过与亚硒酸钠化学配合反应制备壳聚糖硒，硒离子的空轨道与氮原子的孤对电子配合形成共价键，从而生成硒含量高的壳聚糖硒，壳聚糖分子中含有氨基和羟基的活性基团，会形成分子间氢键，导致溶解性能差，硒和壳聚糖的配合能够削弱分子间氢键，引进亲水基团，以提高壳聚糖硒的溶解性能，降低喷雾剂黏度，改善口腔喷雾的使用效果，提升口腔喷雾的生物和药理活性。

2、本发明设置自动取样检测脱乙酰基度系统，通过定时器控制取样滴定检测，以及颜色探测器控制滴定过程，以实现对脱乙酰反应过程的定时检测，结合系统计算出壳聚糖的脱乙酰基度，以调节检测次数，能够控制生成壳聚糖的脱乙酰基度，有利于高硒含量的壳聚糖硒的生成。

3、本发明通过三聚磷酸钠对壳聚糖微粒化处理，能够减小壳聚糖粉末的平均粒径，从而增大表面接触面积，能够改善壳聚糖得溶解性，通过冷冻干燥，可以增加壳聚糖的疏松孔径结构，有助于壳聚糖与硒的结合。

4、本发明使用氨基酸离子溶液溶解壳聚糖硒，氨基酸分子结构中的羧基能够与壳聚糖分子中的氨基和羟基形成氢键，降低壳聚糖分子间或分子内的氢键作用，从而提高对壳聚糖的溶解性能，氨基酸离子溶液能够代替有毒害性溶剂的使用，绿色环保，同时离子液体以单分子水为溶剂，能够提高壳聚糖内的强极性基团与水溶液的结合力，进一步增强壳聚糖的溶解性能。

5、本发明使用超声辅助溶解药材提取物，利用超声波的空化效应强化溶解药材提取物，能够加速溶解进程以及降低溶液黏度，促进粉料与溶剂的传质，有助于溶剂小分子渗入大分子团空隙，使溶液分布均匀，提高药物的溶解度。

6、本发明通过对甲壳素超微粉碎处理，能够降低甲壳素粒度和结晶度，利用超微粉碎细粉良好的化学反应活性，从而提高甲壳素脱乙酰反应的效率，减少反应过程中碱的用量，简化脱乙酰壳聚糖的制备流程，避免有机物的使用。

附图说明

图1为本发明的实施例所采用的基于活性硒和单分子水的口腔喷雾的制备方法流程图。

图2为本发明的对比例1的硒含量检测的结果表格图。

图3为本发明的对比例2的溶液黏度检测的结果表格图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种基于活性硒和单分子水的口腔喷雾及其制备方法，如图1-图2所示，具体包括以下步骤：

S1：原料提取物的预处理

称取玄参地上部分提取物20质量份，杜仲叶提取物9质量份，于40℃干燥，过0.42mm孔径筛，得玄参粉末和杜仲叶粉末，装入干燥器中备用；

S2：原料粉末的超声波溶解

将玄参粉末和杜仲叶粉末分别加入到30％的乙醇溶液中，搅拌混匀后，在超声波发生器中振荡溶解，3000r/min高速离心，过滤，滤渣再用相同体积分数的乙醇溶液超声波溶解，过滤合并滤液，合并以上两种溶液，放置过夜，过滤，弃去沉淀，得原料药液；

S3：脱乙酰壳聚糖的制备

将甲壳素粗粉碎，过50目筛，置于碾磨式超微粉碎机中，进行超微粉碎，转速30r/min，碾磨15min，得甲壳素细粉；

称取5份甲壳素细粉加入反应容器中，按照料液比1：8加入40％氢氧化钠溶液，均匀分散后，置于90℃油浴中，进行脱乙酰反应，反应1.5h；

当计时器达到设定阈值，控制器打开真空泵，反应液通过取样管流至样品瓶中，样品瓶中的溶液为30mL0.01mol/L盐酸溶液，指示剂为体积比1：2的甲基橙-苯胺蓝混合指示剂，微型流量计达到设定阈值，控制器关闭真空泵，打开泄压泵，泄压阀检测压力恢复正常，关闭泄压阀，颜色探测器检测到样品瓶溶液颜色发生变化，打开碱液阀门，缓慢滴加0.01mol/L氢氧化钠溶液，直至颜色探测器检测到颜色再次变化，控制器关闭碱液阀门，人工向样品瓶中滴加2滴指示剂，系统根据消耗的氢氧化钠溶液的滴定量计算出反应生成壳聚糖的脱乙酰度，若结果未达到85-90％，发送信号给控制器打开短时计时器，当短时计时器到达5min，重复上述滴定操作，直至系统检测到壳聚糖的脱乙酰度达到设定范围，关闭系统；

取出反应物倒入150体积份蒸馏水中，中止反应，抽滤，固体物用蒸馏水和无水乙醇洗涤，50℃烘干，得脱乙酰壳聚糖；

S4：壳聚糖的离子凝胶微粒化处理

称取1质量份脱乙酰基度为85％的壳聚糖，溶解于100体积份的0.2％醋酸溶液中，磁力搅拌10h，得壳聚糖溶液；

取20体积份壳聚糖溶液，磁力搅拌下缓慢滴加10体积份0.1％三聚磷酸钠溶液和4体积份质量分数为0.04％果胶溶液，50℃搅拌30min；

4℃离心20min，取沉淀冷冻干燥10h，得壳聚糖微粒；

S5：壳聚糖硒的制备

称取1质量份壳聚糖微粒，溶于100体积份1％醋酸，搅拌至溶液澄清，缓慢加入10体积份0.2g/mL亚硒酸钠溶液，调节pH值为4，搅拌6h；

2000r/min离心10min，取上清液，加入上清液2倍体积量的85％乙醇，静置12h；

离心，取沉淀洗涤，再次离心，洗涤沉淀，低温烘干，得壳聚糖硒；

S6：活性硒口腔喷雾的配置

取30体积份2％的甘氨酸盐酸盐离子液体水溶液，磁力搅拌下加入0.1质量份壳聚糖硒，搅拌溶解5h，高速离心，过350目滤网，得壳聚糖硒溶液；

往壳聚糖硒溶液中缓慢加入8体积份单糖浆和0.3质量份薄荷脑的少量乙醇溶液，边加边搅拌，加入壳聚糖硒溶液，搅拌混合；

补充30％乙醇溶液至100体积份，摇匀，分装于20体积份的塑料喷雾瓶中，得活性硒口腔喷雾。

实施例2

一种基于活性硒和单分子水的口腔喷雾及其制备方法，如图1-图2所示，具体包括以下步骤：

S1：原料提取物的预处理

称取玄参地上部分提取物22质量份，杜仲叶提取物11质量份，于40℃干燥，过0.42mm孔径筛，得玄参粉末和杜仲叶粉末，装入干燥器中备用；

S2：原料粉末的超声波溶解

将玄参粉末和杜仲叶粉末分别加入到35％的乙醇溶液中，搅拌混匀后，在超声波发生器中振荡溶解，3000r/min高速离心，过滤，滤渣再用相同体积分数的乙醇溶液超声波溶解，过滤合并滤液，合并以上两种溶液，放置过夜，过滤，弃去沉淀，得原料药液；

S3：脱乙酰壳聚糖的制备

将甲壳素粗粉碎，过50目筛，置于碾磨式超微粉碎机中，进行超微粉碎，转速30r/min，碾磨15min，得甲壳素细粉；

称取6份甲壳素细粉加入反应容器中，按照料液比1：9加入45％氢氧化钠溶液，均匀分散后，置于90℃油浴中，进行脱乙酰反应，反应1.5h；

当计时器达到设定阈值，控制器打开真空泵，反应液通过取样管流至样品瓶中，样品瓶中的溶液为25mL0.02mol/L盐酸溶液，指示剂为体积比1：3的甲基橙-苯胺蓝混合指示剂，微型流量计达到设定阈值，控制器关闭真空泵，打开泄压泵，泄压阀检测压力恢复正常，关闭泄压阀，颜色探测器检测到样品瓶溶液颜色发生变化，打开碱液阀门，缓慢滴加0.02mol/L氢氧化钠溶液，直至颜色探测器检测到颜色再次变化，控制器关闭碱液阀门，人工向样品瓶中滴加2滴指示剂，系统根据消耗的氢氧化钠溶液的滴定量计算出反应生成壳聚糖的脱乙酰度，若结果未达到85-90％，发送信号给控制器打开短时计时器，当短时计时器到达6min，重复上述滴定操作，直至系统检测到壳聚糖的脱乙酰度达到设定范围，关闭系统；

取出反应物倒入180体积份蒸馏水中，中止反应，抽滤，固体物用蒸馏水和无水乙醇洗涤，50℃烘干，得脱乙酰壳聚糖；

S4：壳聚糖的离子凝胶微粒化处理

称取2质量份脱乙酰基度为90％的壳聚糖，溶解于120体积份的0.3％醋酸溶液中，磁力搅拌10h，得壳聚糖溶液；

取25体积份壳聚糖溶液，磁力搅拌下缓慢滴加12体积份0.2％三聚磷酸钠溶液和5体积份质量分数为0.05％果胶溶液，50℃搅拌30min；

4℃离心20min，取沉淀冷冻干燥10h，得壳聚糖微粒；

S5：壳聚糖硒的制备

称取2质量份壳聚糖微粒，溶于120体积份2％醋酸，搅拌至溶液澄清，缓慢加入12体积份0.3g/mL亚硒酸钠溶液，调节pH值为5，搅拌6h；

2000r/min离心10min，取上清液，加入上清液3倍体积量的90％乙醇，静置12h；

离心，取沉淀洗涤，再次离心，洗涤沉淀，低温烘干，得壳聚糖硒；

S6：活性硒口腔喷雾的配置

取35体积份3％的甘氨酸盐酸盐离子液体水溶液，磁力搅拌下加入0.2质量份壳聚糖硒，搅拌溶解5h，高速离心，过350目滤网，得壳聚糖硒溶液；

往壳聚糖硒溶液中缓慢加入9体积份单糖浆和0.4质量份薄荷脑的少量乙醇溶液，边加边搅拌，加入壳聚糖硒溶液，搅拌混合；

补充35％乙醇溶液至120体积份，摇匀，分装于25体积份的塑料喷雾瓶中，得活性硒口腔喷雾。

实施例3

一种基于活性硒和单分子水的口腔喷雾及其制备方法，如图1-图2所示，具体包括以下步骤：

S1：原料提取物的预处理

称取玄参地上部分提取物20质量份，杜仲叶提取物9质量份，于45℃干燥，过0.48mm孔径筛，得玄参粉末和杜仲叶粉末，装入干燥器中备用；

S2：原料粉末的超声波溶解

将玄参粉末和杜仲叶粉末分别加入到30％的乙醇溶液中，搅拌混匀后，在超声波发生器中振荡溶解，3500r/min高速离心，过滤，滤渣再用相同体积分数的乙醇溶液超声波溶解，过滤合并滤液，合并以上两种溶液，放置过夜，过滤，弃去沉淀，得原料药液；

S3：脱乙酰壳聚糖的制备

将甲壳素粗粉碎，过55目筛，置于碾磨式超微粉碎机中，进行超微粉碎，转速35r/min，碾磨30min，得甲壳素细粉；

称取5份甲壳素细粉加入反应容器中，按照料液比1：8加入40％氢氧化钠溶液，均匀分散后，置于95℃油浴中，进行脱乙酰反应，反应2h；

当计时器达到设定阈值，控制器打开真空泵，反应液通过取样管流至样品瓶中，样品瓶中的溶液为30mL0.01mol/L盐酸溶液，指示剂为体积比1：2的甲基橙-苯胺蓝混合指示剂，微型流量计达到设定阈值，控制器关闭真空泵，打开泄压泵，泄压阀检测压力恢复正常，关闭泄压阀，颜色探测器检测到样品瓶溶液颜色发生变化，打开碱液阀门，缓慢滴加0.01mol/L氢氧化钠溶液，直至颜色探测器检测到颜色再次变化，控制器关闭碱液阀门，人工向样品瓶中滴加2滴指示剂，系统根据消耗的氢氧化钠溶液的滴定量计算出反应生成壳聚糖的脱乙酰度，若结果未达到85-90％，发送信号给控制器打开短时计时器，当短时计时器到达5min，重复上述滴定操作，直至系统检测到壳聚糖的脱乙酰度达到设定范围，关闭系统；

取出反应物倒入150体积份蒸馏水中，中止反应，抽滤，固体物用蒸馏水和无水乙醇洗涤，55℃烘干，得脱乙酰壳聚糖；

S4：壳聚糖的离子凝胶微粒化处理

称取1-3质量份脱乙酰基度为85％的壳聚糖，溶解于100体积份的0.2％醋酸溶液中，磁力搅拌12h，得壳聚糖溶液；

取20体积份壳聚糖溶液，磁力搅拌下缓慢滴加10体积份0.1％三聚磷酸钠溶液和4体积份质量分数为0.04％果胶溶液，55℃搅拌35min；

5℃离心25min，取沉淀冷冻干燥11h，得壳聚糖微粒；

S5：壳聚糖硒的制备

称取1质量份壳聚糖微粒，溶于100体积份1％醋酸，搅拌至溶液澄清，缓慢加入10体积份0.2g/mL亚硒酸钠溶液，调节pH值为4，搅拌8h；

2500r/min离心12min，取上清液，加入上清液2倍体积量的85％乙醇，静置14h；

离心，取沉淀洗涤，再次离心，洗涤沉淀，低温烘干，得壳聚糖硒；

S6：活性硒口腔喷雾的配置

取30体积份2％的甘氨酸盐酸盐离子液体水溶液，磁力搅拌下加入0.1质量份壳聚糖硒，搅拌溶解6h，高速离心，过400目滤网，得壳聚糖硒溶液；

往壳聚糖硒溶液中缓慢加入8体积份单糖浆和0.3质量份薄荷脑的少量乙醇溶液，边加边搅拌，加入壳聚糖硒溶液，搅拌混合；

补充30％乙醇溶液至100体积份，摇匀，分装于20体积份的塑料喷雾瓶中，得活性硒口腔喷雾。

对比例1

与实施例1相比，本对比例采用蕨麻多糖制备出蕨麻多糖硒。具体制备步骤为：将精制蕨麻多糖边用甲酰胺充分溶解，加入亚硒酸固体，蕨麻多糖：亚硒酸投料比为1：0.81，于78℃搅拌反应2h，加入乙醇，静置，离心，取沉淀洗涤，烘干得蕨麻多糖硒，进行硒含量测定，测定结果记为对比例1。

将实施例1、实施例2和实施例3中步骤S5中得到的壳聚糖硒分别进行硒含量测定，测定结果分别记为实施例1-3；

称取20g多糖硒置于锥形瓶中，加入2mL体积比1：1：4的高氯酸+硫酸+硝酸的混酸，消化至溶液澄清时冷却，转移至10mL容量瓶中，定容，测定吸光度，于λ＝334nm处的吸收度记为A

计算公式：硒含量(mg/g)＝1000*A

如图2所示，可得壳聚糖硒比蕨麻多糖硒的硒含量高。

对比例2

与实施例1相比，本对比例采用壳聚糖制备口腔喷雾。具体制备工艺如下：将甘氨酸盐酸盐离子液体水溶液与壳聚糖混合，搅拌溶解6h，高速离心，过400目滤网，得壳聚糖溶液，进行特性粘度测定，测定结果记为对比例2。

将甘氨酸盐酸盐离子液体水溶液分别与实施例1-3的步骤S5得到的壳聚糖硒混合，搅拌溶解6h，高速离心，过400目滤网，得壳聚糖硒溶液，进行特性粘度测定，测定结果记为实施例1-3；

特性粘度测定：用NDJ-5s数显黏度计在室温下测定溶液的黏度。

如图3所示，壳聚糖硒溶液的粘度比壳聚糖溶液粘度小，可得壳聚糖硒的溶解性能比壳聚糖好。

上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。