海马制剂及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及中药海马的制剂及应用。

背景技术

海马(拉丁学名：hippocampus)为脊索动物门硬骨鱼纲海龙科海马属动物，是我国传统的名贵中药材，素有“南方人参”的美誉；性甘、咸、温，归肝、肾经，具有温肾壮阳、益精种子、止咳平喘、活血通脉、散结消肿等功效，主治肾阳不足所致诸证。《中国药典》2020版收载的海马临床主要功效是“温肾壮阳、消肿散结”。

长期以来，海马作为传统名贵海洋中药，因其价格昂贵，限制了其药理活性的探索。近年来，随着我国海马养殖技术的日渐成熟，我国福建、广东等沿海部分地区已实了现海马的规模化养殖。海马的工厂化养殖，解决了长期以来药用海马基源不清、质量难控等难点，推动了中药海马的进一步开发利用，也成功推动了海马药理活性及作用机制的研究。现代药理研究证实，海马具有性激素样作用、抗疲劳、抗氧化、提高机体免疫力、镇静安神等多种药理活性。但目前还未有关于海马针对糖脂代谢紊乱方面的报道。另外，海马临床应用通常采用晒干制品，晒干品在储存过程中容易变质影响药效，甚至产生毒性，而且不利于调剂。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供了海马制剂及其制备方法和应用。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案之一是：

一种海马制剂，包括海马冻干粉。

其中，所述海马冻干粉可以通过以下方法制备得到：对不低于10g的成熟海马宰杀、去除内脏后洗净，冷冻，完全冻实后冷冻干燥，粉碎，得到所述海马冻干粉。进一步地，还可在冷冻前，将洗净的海马完全破碎，然后进行冷冻。

进一步地，所述海马制剂中，除作为有效成分的海马冻干粉外，还可包括至少一种辅料或载体。

进一步地，所述海马制剂为口服剂型。所述口服剂型例如包括粉剂、胶囊剂、片剂、丸剂、混悬剂或颗粒剂等。

本发明中，所述海马制剂可由海马冻干粉直接通过常规方法制备成为上述剂型，例如海马冻干粉直接作为粉剂，或者将海马冻干粉灌装到胶囊壳中作为胶囊剂，或者将海马冻干粉压片形成片剂，或者将海马冻干粉捏丸形成丸剂，或者将海马冻干粉与适当的液体如带有矫味作用的液体混合形成混悬剂。当然，也可以由海马冻干粉与至少一种辅料或载体制备成为上述剂型。

本发明采用冷冻干燥等相关技术，制备了一种便于临床应用的海马冻干粉。本发明通过进一步研究还发现海马冻干粉口服给药可有效预防和改善糖脂代谢紊乱相关疾病。因此，

本发明解决其技术问题所采用的技术方案之二是：

一种海马制剂在制备预防或治疗糖脂代谢紊乱相关疾病的药物中的应用。其中，以所述海马冻干粉作为有效成分。

其中，所述糖脂代谢紊乱相关疾病包括肥胖症、2型糖尿病、脂肪肝、高脂血症、或胰岛素抵抗等。

进一步地，所述预防作用或治疗作用，尤其是治疗作用是通过降低体重、提高糖耐量、或增强胰岛素敏感性实现的。

本发明中，所述预防是指在疾病或症状未产生之前，防止产生疾病或症状。所述治疗是指在疾病或症状产生之后，可以改善或治愈疾病或症状，使其减轻或彻底消失。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案之三是：

一种海马制剂在制备健康辅助食品中的应用。其中，以所述海马冻干粉作为有效成分。

本发明中，所述健康辅助食品是指适宜于特定人群食用，具有调节机体功能，不以治疗疾病为目的，并且对人体不产生任何急性、亚急性或者慢性危害的食品。

本发明中，所述健康辅助食品可以用于辅助温肾壮阳、益精种子、止咳平喘、活血通脉、散结消肿等，也可用于辅助预防或辅助缓解糖脂代谢紊乱相关症状。

所述海马制剂可由海马冻干粉直接通过常规方法制备得到上述的健康辅助食品，或者与至少一种辅料或载体制备成为上述的健康食品。健康食品可以根据需要制成饼干、糖果、饮料等各种常见形式。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案之四是：

一种海马制剂的制备方法，所述海马冻干粉的制备方法包括：对不低于10g的成熟海马宰杀、去除内脏后洗净，冷冻，完全冻实后冷冻干燥，粉碎，得到所述海马冻干粉；以该海马冻干粉作为海马制剂。进一步地，在所述海马制剂还包括至少一种辅料或载体的情况下，所述海马制剂的制备方法还包括：将制得的海马冻干粉与至少一种辅料或载体，利用常规方法制备得到所述海马制剂。

进一步地，所述海马冻干粉的制备方法还包括：在冷冻前，将洗净的海马完全破碎，然后进行冷冻。

上述制备方法中，完全破碎可以采用组织匀浆机等，冷冻可以采用超低温冰箱或者液氮等。

本发明中，所述辅料或载体应为药学上或食品上可接受的辅料或载体。所述辅料包括但不限于稀释剂、溶剂、赋形剂、吸收剂、润湿剂、黏合剂、崩解剂、润滑剂、增溶剂、乳化剂、助悬剂、表面活性剂、成膜剂、抛射剂、抗氧剂、矫味剂、芳香剂、杀菌剂、防腐剂等；所述载体指能够担载或者能够改变化合物进入人体的方式和在体内的分布，控制释放速度达到控释或缓释，靶向输送至靶器官等作用的体系，包括但不限于脂质体、微球、微囊、固体分散体、胶束、微乳液、凝胶、缓释型载体、控释型载体、靶向型载体、纳米颗粒材料等。

本发明所涉及的设备、试剂、工艺、参数等，除有特别说明外，均为常规设备、试剂、工艺、参数等，不再作实施例。

本发明所列举的所有范围包括该范围内的所有点值。

本发明所述“大约”、“约”或“左右”等指的是所述范围或数值的±20％范围内。

本技术方案与背景技术相比，它具有如下优点：

1.本发明采用冷冻干燥等相关技术，制备了一种便于临床应用的海马冻干粉；与晒干制品相比，其特点在于良好的保存了海马中的药效及营养成分、便于储藏、方便调剂和服用。

2.本发明通过进一步研究发现海马冻干粉口服给药可有效预防和改善糖脂代谢紊乱相关疾病，包括肥胖症、2型糖尿病、脂肪肝、高脂血症、胰岛素抵抗等疾病。

3.海马作为一种传统海洋中药，在我国应用历史悠久，临床应用的安全性较高，患者认可度度高，具有非常广阔的临床应用前景。

4.本发明为中药海马临床应用增加了新的适应症，扩大了其临床应用范围，在中医药现代化与健康、医疗等领域将会产生巨大的社会效益与经济效益。

附图说明

图1用于说明本发明的海马冻干粉对糖尿病小鼠糖耐量(OGTT)受损的改善情况。其中，A用于说明OGTT相对给药时间的变化，B各组的为曲线下面积(AUC)。NC：空白对照组；MC：模型组；PC：二甲双胍组；HL：海马低剂量组；HH：海马高剂量组。与空白对照组相比，

图2用于说明本发明的海马冻干粉对糖尿病小鼠胰岛素耐量受损(IGTT)的改善情况。其中，A用于说明IGTT相对给药时间的变化，B为各组的曲线下面积(AUC)。NC：空白对照组；MC：模型组；PC：二甲双胍组；HL：海马低剂量组；HH：海马高剂量组。与空白对照组相比，

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。需要说明的是，以下实施例通过动物在体药理实验及相关制剂实验来阐述本发明，但并不代表本发明只限于该实施例。

实施例1海马冻干粉的制备

取260g鲜活养殖海马，宰杀、去除内脏后洗净、沥干水分，用绞肉机碎成适当的小块组织，用组织匀浆机将其完全破碎制备成海马组织匀浆，所得匀浆重量215g。将215g海马组织匀浆放入超低温冰箱或者液氮中快速冷冻，冻块的厚度控制在1cm左右，完全冻实后进行冷冻干燥36h，将所得冻干海马低温粉碎，得冻干粉末48g，干品收率为22.32％。

实施例2海马冻干粉的制备

取270g鲜活海马，宰杀、去除内脏后洗净、沥干水分后称重为222g，然后将其放入超低温冰箱或者液氮中快速冷冻，完全冻实后进行冷冻干燥72h，完全冻干后经低温粉碎制备冻干粉末52g，干品收率为23.42％。

实施例3海马冻干粉制剂对2型糖尿病(T2DM)小鼠体重的影响

实验动物：C57BL/6J小鼠，48只，雄性，体重20±2g，购自江苏集翠实验动物有限公司。

实验试剂、药物：可以采用上述实施例1或实施例2所述方法制备的海马冻干粉末，本实施例中主要采用实施例2制备的海马冻干粉末，临用前用蒸馏水配制成合适浓度的混悬液。

小鼠糖尿病模型复制、实验分组及给药：所有实验小鼠适应性饲养小鼠一周，随机分为空白对照组(NC)8只和造模组40只。造模组给予高热量饲料(D12492进口的脂肪含量为60％的饲料)喂养8周，空白对照组给予普通饲料(脂肪含量为正常的6％)。8周后，通过尾静脉测量造模组的空腹血糖(FBG)，选择FBG≥7.0mmol/L的小鼠作为T2DM小鼠。随机选取32只T2DM小鼠，随机分为4组(n＝8)，分别为模型组(MC)，阳性对照组(PC，盐酸二甲双胍，200mg/kg)即二甲双胍组，海马冻干粉低剂量组(HL，0.65g/kg)和海马冻干粉高剂量组(HH，2.6g/kg)。NC组小鼠每天给予蒸馏水(0.1mL/10g)灌胃，其余各组小鼠按照0.1mL/10g的给药容积灌胃给予相应药物，连续给药2周。

海马冻干粉对T2DM小鼠体重的影响：各组体重结果表明(如表1)，与空白对照组(NC)相比，模型组(MC)体重显著增加(P＜0.01)；与模型组(MC)比较，各给药组体重略有下降(P＜0.05)，表明海马冻干粉有降低模型小鼠体重增加的作用，且与二甲双胍组无显著性差异。

表1灌胃2周后海马冻干粉对T2DM小鼠体重的影响(

注：与空白对照组相比，

NC：空白对照组；MC：模型组；PC：二甲双胍组；HL：海马低剂量组；HH：海马高剂量组

实施例4海马冻干粉制剂对糖尿病小鼠口服糖耐量(OGTT)的影响

实验动物：同实施例3。

实验试剂、药物：稳豪倍优血糖仪及配套试纸(美国强生)，其余同实施例3。

小鼠糖尿病模型复制、实验分组及给药：同实施例3

OGTT试验：小鼠禁食16小时，测空腹血糖(FBG)和灌胃2.0g/kg葡萄糖后30分钟、60分钟、90分钟、120分钟血糖值，计算AUC。

海马冻干粉对T2DM小鼠的糖耐量受损的改善作用：OGTT结果表明(图1)，模型组(MC)的血糖在给药60分钟后始终保持较高水平，曲线下面积显着高于空白对照组(NC)(P＜0.01)，表明模型组(MC)的葡萄糖耐量严重受损。相比之下，各给药组的血糖和曲线下对应面积均显着低于模型组(P＜0.01)，表明不同剂量的海马冻干粉可改善糖尿病小鼠的胰腺β细胞功能，且与二甲双胍组无显著性差异。

实施例5海马冻干粉末制剂对糖尿病小鼠胰岛素耐量(ITT)的影响

实验动物：同实施例3。

实验试剂、药物：诺和诺德胰岛素注射液(丹麦诺和诺德公司)，其余同实施例4。

小鼠糖尿病模型复制、实验分组及给药：同实施例3。

ITT试验：小鼠禁食8小时，测空腹血糖(FBG)和腹腔注射0.5IU/kg胰岛素后15分钟、30分钟、90分钟、120分钟血糖值，计算AUC。

海马冻干粉对增强T2DM小鼠的胰岛素敏感性的作用：ITT结果表明(图2)，模型组(MC)的FBG和曲线下对应面积较空白对照组(NC)明显增加(P＜0.01)。相反，海马冻干粉处理后，血糖和曲线下面积降低(P＜0.01)。总体而言，海马冻干粉改善了糖尿病小鼠的胰岛素抵抗，且与二甲双胍组无显著性差异。

以上所述，仅为本发明较佳实施例而已，故不能依此限定本发明实施的范围，即依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属本发明涵盖的范围内。