医学用途

本发明总体上涉及用于预防患者的疱疹病毒再活化的抗病毒剂，其中所述患者已经接受包括自然杀伤(NK)细胞和/或NK样T细胞的疗法。另外，本发明涉及用于治疗患者的恶性疾病的自然杀伤(NK)细胞和/或NK样T细胞，其中所述用途包括用NK细胞和/或NK样T细胞疗法向所述患者施用抗病毒剂的步骤。本发明还涉及药物组合物和试剂盒。

多发性骨髓瘤(MM)是恶性新生物，其特征在于骨髓中的浆细胞的克隆性增殖。由于微小残留病(MRD)的持久性——其原因可能是在治疗之后仍然存在MM细胞，因此MM仍被认为是无法治愈的(Alici E、Bjorkstrand B、Treschow A、Aints A、Smith CI、Gahrton G、Dilber MS,针对多发性骨髓瘤进行自体干细胞移植之后对基因标记的CD34+细胞的长期随访(Long-term follow-up of gene-marked CD34+cells after autologous stem celltransplantation for multiple myeloma)《癌症基因疗法(Cancer Gene Ther.)》2007；14(3):227-32)。

自从20世纪80年代中期引入淋巴因子活化杀伤(LAK)细胞以来，已经研究了细胞免疫疗法针对癌症的用途(Grimm EA.等人,1982；Rosenberg S.,1985)。为了诱导移植物抗肿瘤效应，具有肿瘤细胞杀伤潜力的细胞毒性效应细胞的过继转移已经成为对抗癌症的有吸引力的方法。在具有潜在抗肿瘤效应的其它效应细胞群之中，自然杀伤(NK)和NK样T细胞构成相对较高的细胞毒性能力(3)。然而，这些细胞在外周血单核细胞(PBMC)和效应细胞制剂(如LAK细胞)中的低百分比表示将它们用于临床试验和用作癌症疗法的障碍。

发明人的先前研究证实，当与短期活化的自体NK细胞相比时，来自MM患者的自体NK细胞的长期离体扩增和活化可以提供针对自体肿瘤细胞的显著优越的细胞毒性活性(Alici E、Sutlu T、Bjorkstrand B、Gilljam M、Stellan B、Nahi H等人,使用符合GMP的组分从骨髓瘤患者中扩增的NK细胞的自体抗肿瘤活性(Autologous antitumor activity byNK cells expanded from myeloma patientsusing GMP-compliant components)《血液(Blood)》2008；111(6):3155-62和Sutlu T、Stellan B、Gilljam M、Quezada HC、Nahi H、Gahrton G等人,用于使用自动生物反应器进行过继免疫疗法的高活性人自然杀伤细胞的临床级、大规模、无饲养层扩增(Clinical-grade,large-scale,feeder-free expansionof highly active human natural killer cells for adoptive immunotherapy usingan automated bioreactor)《细胞疗法(Cytotherapy)》2010；12(8):1044-55)。发明人已经报告了对动物模型中的MM发展进行的有效的基于NK细胞的治疗(Alici E、KonstantinidisKV、Sutlu T、Aints A、Gahrton G、Ljunggren HG等人,实验性多发性骨髓瘤模型中的内源性和过继转移的经活化的自然杀伤细胞的抗骨髓瘤活性(Anti-myeloma activity ofendogenous and adoptively transferred activated natural killer cells inexperimental multiple myeloma model)《实验血液学(Exp Hematol)》2007；35(12):1839-46)。已经开发了使用符合临床级的符合良好制造实践(GMP)的组分在封闭式自动生物反应器中进行NK细胞扩增的程序，发明人获得了瑞典药品管理局(EudraCT：2010-022330-83)和伦理委员会(EPN：2013/490-32)的批准以启动首次人体I/II期临床试验(Sutlu T、Stellan B、Gilljam M、Quezada HC、Nahi H、Gahrton G等人,用于使用自动生物反应器进行过继免疫疗法的高活性人自然杀伤细胞的临床级、大规模、无饲养层扩增《细胞疗法》2010；12(8):1044-55和Sutlu T、Alici E.自然杀伤细胞的离体扩增：功能问题(Exvivo expansion of natural killer cells:a question of function)《细胞疗法》2011)。

非常令人惊讶的是，在临床试验期间，发明人观察到疱疹病毒(具体地，表现为带状疱疹的水痘带状疱疹病毒(VZV))在接受了NK细胞和/或NK样T细胞疗法的患者中再活化。如众所周知的，疱疹病毒再活化和/或感染引起的带状疱疹和其它病状是令人不快的病状，并且在目前的情况下大大降低已经严重不适并且接受NK细胞和/或NK样T细胞疗法的患者的生活质量。

发明人的令人惊讶的发现表明用于使用和管理NK细胞和/或NK样T细胞疗法的新方法。

因此，在第一方面，本发明提供了一种用于预防患者的疱疹病毒再活化的抗病毒剂，其中所述患者已经接受包括自然杀伤(NK)细胞和/或NK样T细胞的疗法，其中所述用途包括用所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法向所述患者施用所述抗病毒剂的步骤。

在第二方面，本发明提供了一种抗病毒剂在制造用于预防患者的疱疹病毒再活化的药物中的用途，其中所述患者已经接受包括自然杀伤(NK)细胞和/或NK样T细胞的疗法，其中所述抗病毒剂是用所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法向所述患者施用的。

在第三方面，本发明提供了一种用于预防患者的疱疹病毒再活化的方法，其中所述患者已经接受包括自然杀伤(NK)细胞和/或NK样T细胞的疗法，其中所述方法包括用所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法向所述患者施用所述抗病毒剂的步骤。

“疱疹病毒”包含被称为疱疹病毒科(或疱疹病毒)的大型DNA病毒家族。已知有九种疱疹病毒类型感染人：单纯疱疹病毒1和2(HSV-1和HSV-2)(也被称为人疱疹病毒1(HHV-1)和HHV2)、水痘带状疱疹病毒(VZV或HHV-3)、爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV或HHV-4)、人巨细胞病毒(HCMV或HHV-5)、人疱疹病毒6A和6B(HHV-6A和HHV-6B)、人疱疹病毒7(HHV-7)和卡波西氏肉瘤相关型疱疹病毒(KSHV，也被称为HHV-8)。总共有超过130种疱疹病毒(Whitley RJ.《疱疹病毒(Herpesviruses)》在以下文献中：Baron S,编辑《医学微生物学(MedicalMicrobiology)》第4版加尔维斯敦(TX):加尔维斯顿的德克萨斯大学医学分校1996.第68章)。

至少五种疱疹病毒——即HSV-1和HSV-2(两者均可能引起口唇疱疹和生殖器疱疹)、水痘带状疱疹病毒(水痘和带状疱疹的病因)、爱泼斯坦-巴尔病毒(涉及多种疾病，包含单核细胞增多症和一些癌症)和巨细胞病毒——在人之中极为普遍。超过90％的成年人已经感染这些疱疹病毒中的至少一种疱疹病毒，并且病毒的潜在形式残留于大多数人中。

术语“水痘带状疱疹病毒(VZV)”用于描述引起水痘(varicella/chickenpox)和带状疱疹(herpes zoster/shingles)的病毒。水痘由病毒原发感染引起；带状疱疹由同一病毒的二次侵入或在许多情况下可能已经潜伏多年的感染的再活化引起。

如上文和所附实例中所讨论的，发明人令人惊讶地鉴定了接受包括自然杀伤(NK)细胞和/或NK样T细胞的疗法的患者的VZV的再活化。VZV是双链DNA病毒并且其在形态学上与单纯疱疹病毒相同。其是水痘和带状疱疹两者的病原体，所述病原体的特征在于后神经根和神经节的炎性反应，伴随感觉神经受影响。水痘在最初暴露于病毒之后并且通常是伴有特征性发疹的相对轻度的、自限性的儿童疾病，但是可以变得在免疫受损儿童中传播。甚至在水痘的临床症状已经解决时，VZV在感染者的神经系统中(在三叉神经和背根神经节中)也保持休眠状态(也被称为病毒潜伏期)。

生命后期的VZV再活化会产生被称为带状疱疹的疾病。带状疱疹的严重并发症包含疱疹后神经痛(PHN)、多发性带状疱疹(zoster multiplex)、脊髓炎、眼部疱疹或无疹型带状疱疹。带状疱疹的常见并发症是疱疹后神经痛(PHN)，这是可以持续数月，甚至数年的一种慢性的、通常会使人衰弱的疼痛病状。患有带状疱疹患者发生PHN的风险为10％-18％。

疼痛和感觉异常通常是VZV感染的首发症状。直到特征性水疱疹发作，诊断可能是困难的。在症状可能发生变化的前驱期是常见的。疼痛、瘙痒和感觉异常是常见症状。

在急性疾病期间，患者可能会经历以下情况：疼痛、无助、抑郁和/或感冒样症状。最常见表现是带状疱疹水疱疹，其在疼痛和感觉异常的前驱疾病、红斑和丘疹在24小时内发展并且进展成囊泡之后最常影响胸廓皮刀。囊泡最终结痂并且溶解。疼痛和感觉丧失是通常症状，运动无力也会发生并且经常会在检查中遗漏。在严重情况下，已经报告了由于VZV臂丛神经炎引起的实际单瘫(预防带状疱疹：免疫实践咨询委员会(ACIP)的建议(Prevention of herpes zoster:recommendations of the Advisory Committee onImmunization Practices(ACIP))《发病率和死亡率周报建议和报告(MMWR Recomm Rep.)》2008；57(05):1-30)。

术语“单纯疱疹病毒”(HSV)用于描述HSV1和HSV2，它们是单纯疱疹感染的致病性病毒原。

HSV1和2具有约50％的基因组同源性，但是共享大多数其它特征。单纯疱疹病毒感染的表现包含：龈口炎、生殖器疱疹、疱疹性角膜炎和真皮甲沟炎。新生儿单纯疱疹病毒感染和单纯疱疹病毒脑炎也会发生。

病毒最初在上皮细胞中复制，从而在红斑基础上产生特征性囊泡。然后，病毒将感觉神经提升到背根神经节，在所述背根神经节处，其在复制的初始时段之后会建立潜伏期。在再活化感染期间，病毒从神经节向远侧扩散，以引发新的皮肤和/或粘膜病变。HSV1传播主要是口腔，并且单纯疱疹病毒2传播主要是生殖器。传播需要密切接触(Whitley RJ.《疱疹病毒》在以下文献中：Baron S,编辑《医学微生物学》第4版加尔维斯敦(TX):加尔维斯顿的德克萨斯大学医学分校1996.第68章)。

术语“爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)”用于描述在伯基特淋巴瘤(Burkitts lymphoma)的细胞培养物中发现的疱疹病毒。EBV是感染性单核细胞增多症以及多种其它相关病状/疾病状态(包含EBV相关型淋巴瘤)的病原体。爱泼斯坦-巴尔病毒引起典型的单核细胞增多症。在免疫受损宿主中，病毒引起淋巴增生综合征。在一些家族中，爱泼斯坦巴尔病毒引起邓肯综合症(Duncan′s syndrome)。

爱泼斯坦巴尔病毒在口咽的上皮细胞和β淋巴细胞中复制。爱泼斯坦巴尔病毒通过密切接触(具体地，通过唾液交换)传播(Whitley RJ.《疱疹病毒》在以下文献中：BaronS,编辑《医学微生物学》第4版加尔维斯敦(TX):加尔维斯顿的德克萨斯大学医学分校1996.第68章)。

术语“巨细胞病毒(CMV)”用于描述在健康人中通常不被注意但对于免疫受损人(如HIV感染者、器官移植接受者或新生婴儿)来说可能是危及生命的感染。在显著比例的人群中发现了CMV。与EBV一样，血清阳性反应会随年龄增加。抑制所有人疱疹病毒的复制的更昔洛韦(ganciclovir)通常用于治疗CMV，尤其用于治疗视网膜炎。Foscarnet在美国也获得批准。巨细胞病毒引起三种临床综合征：(1)先天性巨细胞病毒感染(当有症状时)引起肝脾肿大、视网膜炎、皮疹和中枢神经系统受累；(2)在约10％的大龄儿童和成年人中，原发性巨细胞病毒感染引起伴有发烧、不适、非典型淋巴细胞增多和咽炎的单核细胞增多症综合征；(3)免疫受损宿主(移植接受者和人免疫缺陷病毒[HIV]感染个体)可能会发展涉及肺、胃肠道、肝脏、视网膜和中枢神经系统的危及生命的播散性疾病。

巨细胞病毒主要在唾液腺和肾脏中复制并且在唾液和尿液中脱落。复制很慢，并且病毒诱导具有核内包涵体的特征性巨细胞。传播是通过与感染分泌物密切接触。巨细胞病毒感染是全球最普遍的病毒感染之一(Whitley RJ.《疱疹病毒》在以下文献中：Baron S,编辑《医学微生物学》第4版加尔维斯敦(TX):加尔维斯顿的德克萨斯大学医学分校1996.第68章)。

如众所周知的，当病毒颗粒接触在细胞表面上具有特定类型的受体分子的细胞时，病毒感染会启动。病毒包膜糖蛋白与细胞膜受体结合后，病毒粒子被内化和分解，从而允许病毒DNA迁移到细胞核。在细胞核内，病毒DNA的复制和病毒基因的转录发生。在有症状感染期间，感染细胞转录裂解病毒基因。

已知疱疹病毒潜伏地存在于宿主中，在所述宿主中，它们可以残留多年而没有明显的感染迹象。在此类细胞中，被称为潜伏期相关转录物(LAT)的少量病毒基因积累。在这种潜在的溶原性周期期间，病毒可以在邻近于脊髓的神经节(被称为背根神经节)和/或颅骨的基部中的三叉神经节中无症状地保持休眠(或潜伏)状态。通过保持休眠(潜伏和/或无活性)状态，病毒可以无限期地在细胞中(并因此在宿主中)长期存在。虽然原发感染通常伴随自限性的临床疾病时期，但是长期潜伏期是无症状的。

“疱疹病毒再活化”包含非原发感染的含义，如可能会导致疱疹病毒感染的患者体内的潜伏的和/或休眠的和/或无活性的和/或内源性的疱疹病毒的再活化。这可以包含与患者体内的潜伏的疱疹病毒感染(如带状疱疹)相关联的病状或疾病的发作。包含选自包括以下的组的疱疹病毒：水痘带状疱疹病毒(VZV)；1型和2型单纯疱疹病毒(HSV)；爱泼斯坦巴尔病毒(Epstein Barr Virus，EBV)；和巨细胞病毒(CMV)。在优选实施例中，疱疹病毒是VZV。

潜伏病毒的再活化已经涉及多种疾病(例如，带状疱疹和玫瑰糠疹)。在再活化之后，病毒基因的转录从潜伏期相关LAT转变成多个裂解基因；这些裂解基因导致增强的复制和病毒产生。通常，裂解活化导致细胞死亡。在临床上，裂解活化通常伴随如低烧、头痛、喉咙痛、不适和皮疹等非特异性症状以及如淋巴结肿大或压痛等临床体征的出现。

“患者”包含接受或旨在接受医学治疗和/或预防的受试者或需要治疗和/或预防疱疹病毒再活化的受试者的含义。患者可以是脊椎动物，如脊椎动物哺乳动物(例如，人)或非人哺乳动物，如家畜(例如，猫、狗、兔子、牛、羊、猪、大鼠或其它啮齿动物)。优选地，所述患者为人。

“抗病毒剂”包含能够预防患者的疱疹病毒的再活化的任何合成或天然分子或化合物。此类药剂可以通过例如灭活细胞外病毒颗粒和/或预防病毒附着和/或细胞进入和/或预防病毒基因组的复制和/或预防一种或多种特定病毒蛋白的合成和/或预防新的感染性病毒粒子的组装和/或释放来发挥抗病毒作用。已知的抗病毒剂的实例包含磷酸化成其三磷酸形式后的核苷类似物以及膦甲酸和膦乙酸和其类似物。

应当理解，抗病毒剂用于预防患者的疱疹病毒再活化。

在一个实例中，所述抗病毒剂是疫苗。

在一个替代性实施例中，所述抗病毒剂不是疫苗。

“预防疱疹病毒再活化”包含完全或部分预防、抑制和/或减少患者的疱疹病毒感染和/或与潜伏的疱疹病毒感染相关联的病状或疾病(如带状疱疹)的再活化。预防再活化可以包含预防在神经组织中处于休眠状态的疱疹的再活化和/或预防感染患者的症状的发生和/或降低病毒再活化或由患者的病毒再活化引起的病状或疾病的症状的严重程度或频率。

在一个实施例中，所述患者对疱疹病毒再活化易感。在另外的实施例中，所述患者对患上带状疱疹易感。

如果完全预防疱疹病毒再活化，则患者对于病毒感染将是无症状的。在一些实施例中，所述抗病毒剂可以根除潜伏病毒储存库的一部分，这导致可再活化病毒的比例降低并且因此预防、抑制和/或减少疱疹病毒再活化。如果减少和/或抑制疱疹病毒再活化，则可以缩短临床表现(例如，头痛、受影响区域中的皮肤的灼热、刺痛、麻木或瘙痒、总体不适的感觉、高温(发热)和可以发展成发痒水泡的皮疹)的持续时间。

“NK细胞和/或NK样T细胞疗法”包含出于治疗目的向患者施用NK细胞和/或NK样T细胞。患者可能患有恶性疾病(如血液癌症、实体瘤或慢性病毒感染)或是需要此种疗法的另一个患者。

应当理解，术语“NK细胞和/或NK样T细胞疗法”是指包括治疗有效量的NK细胞和/或NK样T细胞的疗法。

应当理解，NK细胞和/或NK样T细胞疗法是过继细胞转移(ACT)(即，将细胞转移到患者体内)的形式，并且两个术语可以在本文中互换地使用。在优选实施例中，所述细胞来源于患者(自体的)。在替代性实施例中，所述细胞来源于另一个个体(异源的)。术语“NK细胞和/或NK样T细胞疗法”和“CellProtect”在本文中可以互换使用。下文描述了用于制造CellProtect的方案，并且在图5中描绘了所述方案。

在优选实施例中，NK细胞和/或NK样T细胞已经离体扩增和活化并且施用于有需要的患者。在先前的公开WO 2010/110734中描述了NK细胞和/或NK样T细胞的制备，所述公开通过引用并入本文。

在一个实施例中，NK细胞和/或NK样T细胞疗法包括至少10％的表型为CD3-CD56+的NK细胞。在一个实施例中，至少30％的NK细胞是经活化的NK细胞。

NK细胞和/或NK样T细胞可以通过输注施用，例如通过中心静脉导管输注、或静脉内(IV)输注或输注到脑脊液中以使其到达中枢神经系统(CNS)。施用可以是瘤内施用(即，直接注射到肿瘤中)，例如施用到肿瘤腔中。

在优选实施例中，所述患者未经淋巴细胞清除。“患者未经淋巴细胞清除”包含尚未接受淋巴细胞清除(lymphodepletion)的患者的含义。淋巴细胞清除是清除(即，消除)淋巴细胞，如T细胞，例如调节性T细胞的非选择性方法。淋巴细胞清除可以通过本领域已知的任何手段，包含全身辐照、化疗来实现或可以是疾病过程，如白血病或HIV/AIDS的结果。可替代地，淋巴细胞清除可以通过施用与淋巴细胞特异性结合的抗体来实现。淋巴细胞减少症和淋巴细胞清除可互换地用于描述淋巴细胞数量减少的状态。在特定实施例中，如果患者的淋巴细胞数量在施用淋巴细胞清除剂之后减少至少50％，如至少60％、70％、80％或90％，则患者是经淋巴细胞清除的。

“用NK细胞和/或NK样T细胞疗法向患者施用抗病毒剂”包含在患者接受NK细胞和/或NK样T细胞疗法之前、同时或之后施用抗病毒剂。在一个实施例中，所述抗病毒剂与NK细胞和/或NK样T细胞疗法同时施用于患者。

在优选实施例中，所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法诱导和/或增加疱疹病毒感染。

“NK细胞和/或NK样T细胞疗法诱导和/或增加疱疹病毒再活化”包含以下含义：NK细胞和/或NK样T细胞疗法对患者的疱疹病毒的再活化完全或部分负责或对增加患者的疱疹病毒的再活化完全或部分负责。例如，NK细胞和/或NK样T细胞疗法可以诱导和/或增加疱疹病毒再活化比尚未接受NK细胞和/或NK样T细胞疗法的患者多至少5倍或至少10倍或至少50倍。

用于测量病毒再活化的方法在本领域是众所周知的并且包含测量病毒拷贝数。另外，疱疹病毒的抗体的定量通常用作疱疹病毒再活化的间接量度。另外，临床症状可以用于指示疱疹病毒再活化。

如所附实例中所描述的，在临床试验期间，发明人在接受NK细胞和/或NK样T细胞疗法的多个患者中观察到VZV的再活化和带状疱疹的表现。在不希望被理论束缚的情况下，发明人相信经活化的NK细胞和/或NK样T细胞在过继细胞转移时可能会攻击疱疹病毒的储存库细胞，所述储存库细胞进而可能会由于诱导应力而引起病毒再活化。

因此，在一个实施例中，疱疹病毒在背根神经节中处于休眠(潜伏)状态。

在本发明的一个实施例中，所述患者患有恶性疾病。“恶性疾病”包含其中进展迅速并且通常会在短时间内危及或导致死亡的疾病，包含但不限于癌症。包含恶性肿瘤的含义，如实体瘤、病毒性癌症和选自包括以下或由以下组成的组的癌症：结肠直肠癌；脑癌(如成神经管细胞瘤和成胶质细胞瘤)；神经母细胞瘤；骨癌；上皮细胞源性新生物形成(上皮癌)；基底细胞癌；腺癌；胃肠道癌；唇癌、口腔癌、食道癌、小肠癌；胃癌；结肠癌；肝癌；膀胱癌；胰腺癌；卵巢癌；宫颈癌；肺癌；乳腺癌；皮肤癌(如黑色素瘤)、鳞状细胞癌和基底细胞癌；前列腺癌、肾细胞癌和肉瘤(如软组织肉瘤)。

在本发明的一个实施例中，所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法用于治疗恶性疾病。

在优选实施例中，所述恶性疾病是血液癌症。“血液癌症”包含影响血液、骨髓和淋巴结的癌症类型，如选自包括以下或由以下组成的组的癌症：骨髓瘤、淋巴瘤、白血病和慢性骨髓增生性疾病。

在本发明的优选实施例中，所述血液癌症是选自由以下组成的组的血液癌症：骨髓瘤、淋巴瘤、白血病和/或慢性骨髓增生性疾病。

在优选实施例中，所述血液癌症是多发性骨髓瘤(MM)。

在一个实施例中，所述NK细胞具有表型CD3

优选地，所述NK细胞和NK样T细胞已经离体扩增。例如，扩增可以在封闭的扩增系统中(如在自动生物反应器系统内的细胞培养袋(参见实例1和图5)中)进行。不太优选地，所述NK细胞和NK样T细胞已经在组织培养烧瓶中扩增。此类方法已经在先前由发明人在WO2010/110734(参见“1：来自外周血的NK细胞和NK样T细胞的离体扩增”)中和在Alici E等人,《血液》2008；111(6):3155-62中进行了描述。

优选地，执行扩增直到细胞的总数量已经扩增至少约10倍或直到扩增的细胞群的至少约50％分别包括经活化的NK细胞和NK样T细胞。例如，扩增的细胞群的至少约50％包括表型为CD3

在一个实施例中，NK细胞和NK样T细胞已经离体活化并且变成细胞毒性的。在一个实施例中，所述NK细胞和NK样T细胞已经同时离体扩增和活化。“经活化的”包含NK细胞和/或NK样T细胞已经接收到活化信号的含义。经活化的NK细胞能够杀伤在MHC I类表达中具有缺陷的某些靶细胞。NK细胞必须接收可以以各种形式(其中最重要的是细胞因子、Fc受体或其它活化受体)出现的活化信号。细胞也可以被活化以产生细胞因子和趋化因子。

经活化的NK细胞和NK样T细胞展现出如通过体外细胞毒性测试确定的增加的细胞毒性。技术人员可以使用本领域已知的方法来确定细胞毒性。

确定细胞是否展现出增加的细胞毒性的一种方式是使用使用标准4小时

可替代地，可以使用脱粒测定。例如，对K562细胞进行脱粒测定，然后测量每个淋巴细胞亚群中的脱粒细胞的百分比。这两种测定都在WO 2010/110734中进行了描述(参见“3.细胞介导的细胞毒性的评价”)。其它体外细胞毒性测试是本领域已知的。

在一个实施例，所述抗病毒剂在所述患者已经接受所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法之前和/或同时和/或之后施用。应当理解，期望在感觉或怀疑休眠疱疹感染(其是前驱阶段)再活化之前开始施用抗病毒剂。因此，优选地，在NK细胞输注之前和/或同时施用抗病毒剂。

“在...之前施用”包含在患者接受NK细胞和/或NK样T细胞疗法之前首先施用抗病毒剂的含义。“在...同时施用”包含抗病毒剂首先与NK细胞和/或NK样T细胞疗法同时向患者施用。在另一个实施例中，所述抗病毒剂在NK细胞和/或NK样T细胞疗法之后施用。“在...之后施用”包含在患者已经接受NK细胞和/或NK样T细胞疗法之后首先施用抗病毒剂的含义。

优选地，在患者出现病毒感染的首发症状之前施用抗病毒剂。

在本发明的一个实施例中，所述抗病毒剂在所述患者接受所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法之前至少一天，如：在所述患者接受所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法之前至少两天；或之前至少三天；或之前至少四天；或之前至少五天；或之前至少六天；或之前至少七天；或之前至少八天；或之前至少九天；或之前至少十天；或之前至少20天；或之前至少30天；或之前至少一个月施用于所述患者。

在一个实施例中，所述抗病毒剂在所述患者接受所述NK细胞和/或NK细胞疗法之前一天施用于所述患者。

优选地，所述抗病毒剂在所述患者接受所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法之后至少一天，如：在所述患者接受所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法之后至少两天；或之后至少三天；或之后至少四天施用。

在一个实施例中，所述抗病毒剂在所述患者接受所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法之后至少一天，如：在所述患者接受所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法之后至少两天；或之后至少三天；或之后至少四天；或之后至少五天；或之后至少六天；或之后至少一周；或之后至少两周；或之后至少三周；或之后至少一个月施用。

向患者施用的抗病毒剂的剂量或量应当是出于预期目的(即，预防(prevention/prophylaxis))的治疗有效量和/或有效杀伤或灭活病毒的量。

在一个实施例中，以适合的剂量施用所述抗病毒剂，所述适合的剂量的范围为每天约1到约100mg/kg体重，优选地在约2到50mg/kg/天的范围内，最优选地在3到20mg/kg/天的范围中。所期望的剂量可以方便地以单个剂量提供或以适当间隔施用的分次剂量(例如，以每天两个、三个、四个或更多个亚剂量)提供。在一个实施例，500-1500mg的所述抗病毒剂在24小时时段内施用于所述患者。换句话说，在任何给定的一天中，所述患者将接受500-1500mg的所述抗病毒剂。

针对特定患者的特定治疗有效剂量将取决于多种因素，包含所治疗的病症和病症的严重程度；所采用的一种或多种具体药剂的活性；患者的年龄、体重、总体健康、性别和饮食；施用时间；施用途径；所采用的一种或多种具体药剂的排泄率；治疗的持续时间；与所采用的一种或多种具体药剂组合或同时使用的药物以及医学领域众所周知的相似因素。例如，以比实现期望治疗效果所需的剂量水平低的剂量水平开始使用药剂并且逐渐增加剂量直到期望效果得以实现完全处于本领域的技术范围内。如果需要，出于施用的目的，可以将有效的每日剂量分成多个剂量。因此，单个剂量组合物可以含有此类量或约数以组成每日剂量。

因此，在一个实施例中，所述抗病毒剂以一个或多个剂量施用于所述患者。在一个实施例中，所述抗病毒以一个、两个、三个、四个、五个或六个剂量施用于所述患者。在优选实施例中，所述抗病毒剂以两个剂量施用于所述患者。换句话说，所述患者每天两次接受所述抗病毒剂。

优选地，所述抗病毒剂在24小时时段中以250-1500mg的剂量，如：在24小时时段中以250mg的剂量；或在24小时时段中以300mg的剂量；或在24小时时段中以400mg的剂量；或在24小时时段中以500mg的剂量；或在24小时时段中以600mg的剂量；或在24小时时段中以700mg的剂量；或在24小时时段中以800mg的剂量；或在24小时时段中以900mg的剂量；或在24小时时段中以1000mg的剂量；或在24小时时段中以1100mg的剂量；或在24小时时段中以1200mg的剂量；或在24小时时段中以1300mg的剂量；或在24小时时段中以1400mg的剂量；或在24小时时段中以1500mg施用于所述患者。

优选地，所述抗病毒剂在24小时时段中以两个250-750mg的剂量施用于所述患者，优选地其中所述抗病毒剂在24小时时段中以两个500mg的剂量施用于所述患者。

应当理解，抗病毒剂的施用可以作为单个事件发生或在治疗时程内发生。例如，所述抗病毒剂中的一种或多种抗病毒剂可以每小时(例如，每一小时、每两小时、每三小时、每四小时、每五小时、每六小时等等)、每天、每天两次、每周、每两周或者每月施用。某些情况可以将预防从几天延长到几周。例如，预防可以在一周、两周或三周内延长，或者预防可以从几周延长到几个月。

因此，在一个实施例中，所述抗病毒剂施用于所述患者的持续时间为至少一个月，如：至少两个月；或至少三个月；或至少四个月；或至少五个月；或至少六个月；或至少七个月。在另外的实施例中，所述抗病毒剂施用于所述患者的持续时间为至多100天。在优选实施例中，所述抗病毒剂施用于所述患者的持续时间为至多七个月，如六个月。在另外的优选实施例中，500mg的所述抗病毒剂在24小时内两次施用于所述患者的持续时间为六个月。

应当理解，在一些情况下，施用抗病毒剂的持续时间长于七个月，如八个或九个月。

在一个实施例中，所述患者在高剂量疗法(HDT)和/或自体干细胞移植(ASCT)之后接受NK细胞和/或NK样T细胞疗法。

“高剂量疗法(HDT)”包含高剂量化疗，也被称为“强化疗法”。在患有多发性骨髓瘤的患者中，HDT包含美法仑(melphalan)(品牌名称：Alkeran)、环磷酰胺(cyclophosphamide)(品牌名称：Cytoxan)、阿霉素(doxorubicin)(品牌名称：Adriamycin)、脂质体阿霉素(品牌名称：Doxil)和/或帕比司他(panobinostat)(品牌名称：Farydak)。HDT可以包含多轮化疗。

“自体干细胞移植(ASCT)”包含包括从患者自身血液或骨髓获得的干细胞的移植。

在替代性实施例中，干细胞移植是同种异体移植，其中干细胞或骨髓是从具有匹配组织类型(例如，近亲)的供体获得的。在替代性实施例中，干细胞移植是同基因移植，其中干细胞或骨髓是从同卵双胞胎获得的。

优选地，干细胞移植是自体的(ASCT)(Gertz,M.A.和Dingli,D.(2014).我们如何管理患有多发性骨髓瘤的患者的自体干细胞移植(How we manage autologous stem celltransplantation for patients with multiple myeloma)《血液学》,124(6),882-890.访问于2018年3月25日)。

高剂量化疗之后进行自体外周血干细胞移植(ASCT)目前是针对年龄65岁和以下的患有多发性骨髓瘤的患者的标准治疗方法。

在另外的实施例中，所述患者在ASCT之后三个月与七个月之间，如ASCT之后三个月、四个月、五个月、六个月或七个月接受NK细胞和/或NK样T细胞疗法。优选地，所述患者在ASCT之后六个月接受NK细胞和/或NK样T细胞疗法。

在一个实施例中，所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法包括NK细胞和/或NK样T细胞的一次、或两次、或三次、或四次、或五次施用。优选地，患者接受NK细胞和/或NK样T细胞的三次施用。

在另外的实施例中，所述NK细胞和/或NK样T细胞以介于5×10

如上文所讨论的，在本发明的上下文中适用的抗病毒剂是靶向病毒的生命周期的阶段中的任何阶段的抗病毒剂，所述阶段选自以下中的一个或多个：附着于宿主细胞；将病毒基因和/或酶释放到宿主细胞中；使用宿主细胞机制复制病毒组分；将病毒组分组装成完整的病毒颗粒；并且释放病毒颗粒以感染新的宿主细胞。

针对疱疹病毒使用的典型抗病毒药物通过干预病毒复制、有效地减慢病毒的复制率并且为免疫应答提供更大的干预机会而起作用。

抗病毒剂可以选自包括以下的组：作用于病毒DNA聚合酶的药剂，如磷酸化成其三磷酸形式后的核苷类似物以及膦甲酸和膦乙酸和其类似物。

在一些实施例中，所述抗病毒剂是选自包括以下的组的抗病毒剂：硬脂酸伐马洛韦(valomaciclovir stearate，EPB-348)、十八烷基氧乙基西多福韦(octadecyloxyethyl-cidofovir，ODE-CDV、CMX-001)、十六烷氧基丙基西多福韦(hexadecyloxypropyl-cidofovir，HDP-CDV)、阿巴卡韦(abacavir)、阿德福韦(adefovir)、金刚烷胺(amantadine)、安普那韦(amprenavir)、阿比多尔(arbidol)、阿扎那韦(atzanavir)、立普妥(atripla)、可比韦(combivir)、地瑞那韦(darunavir)、地拉韦啶(delavirdine)、地达诺新(didanosine)、二十二烷醇、依度尿苷(edoxudine)、依非韦伦(efavirenz)、恩曲他滨(emtricitabine)、恩夫韦地(enfuvirtide)、恩替卡韦(entecavir)、进入抑制剂(抗逆转录病毒用)、福米韦生(fomivirsen)、膦沙那韦(fosamprenavir)、融合抑制剂、加德西(gardasil)、伊巴他滨(ibacitabine)、伊穆诺维尔(imunovir)、碘苷(idoxuridine)、咪喹莫特(imiquimod)、茚地那韦(indinavir)、肌苷、整合酶抑制剂、III型干扰素、II型干扰素、I型干扰素、干扰素、拉米夫定(lamivudine)、洛匹那韦(lopinavir)、洛匹那韦、洛韦肽(loviride)、MK-0518、马拉韦罗(maraviroc)、吗啉胍(moroxydine)、奈非那韦(nelfinavir)、奈韦拉平(nevirapine)、尼克萨维尔(Nexavir)、核苷类似物、奥司他韦(oseltamivir)、帕拉米韦(peramivir)、普拉康纳利(pleconaril)、鬼臼毒素(podophyllotoxin)、蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、利巴韦林(ribavirin)、金刚乙胺(rimantadine)、利托那韦(ritonavir)、沙奎那韦(saquinavir)、司坦夫定(Stavudine)、协同增强剂、替诺福韦(tenofovir)、替诺福韦双溴西(tenofovir disoproxil)、蒂普拉那韦(tipranavir)、三氟尿苷(trifluridine)、特里齐维尔(trizivir)、曲金刚胺(tromantadine)、特鲁瓦达(truvada)、伐昔洛韦(valaciclovir)、维克里维罗克(vicriviroc)、阿糖腺苷(vidarabine)、维拉米丁(viramidine)、扎西他滨(zalcitabine)、扎那米韦(zanamivir)、齐多夫定(zidovudine)、A-5021([1′S,2′R)-9[[1′2′-双(羟甲基)环丙-1′-基]-甲基]鸟嘌呤])、cyclopropavir(CPV，ZSM-I-62)、2,4-二氨基-6-R43-羟基-2(膦酰基甲氧基)丙氧基]-嘧啶(HPMPO-DaPy)、N-(4-氯苄基)-1-甲基-6-(4-吗啉基甲基)-4-氧代-1,4-二氢-3-喹啉甲酰胺(PNU-183792)、2-溴-5,6-二氯-1-(β-D-呋喃呋喃糖基)苯并咪唑(BDCRB)、1-(β-L-呋喃核糖基)-2-异丙基氨基-5,6-二氯苯并咪唑(Maribavir，1263W94)、3-羟基-2,2-二甲基-N[4-{[(5-二甲基氨基)-1-萘基-磺酰基}-氨基)苯基}丙酰胺(BAY 38-4766)、4-(2-氨基-4-噻唑基)苯基衍生物(BILS 179BS)、N45-(氨基磺酰基)-4-甲基-1,3-噻唑-2-基]-N-甲基-2-{4-(2-吡啶基)苯基}乙酰胺(BAY57-1293)、2H-3-(4-氯苯基)-3,4-二氢-1,4-苯并噻嗪-2-甲腈-1-氧化物或1,1-二氧化物和2-氯-3-吡啶-3-基-5,6,7,8-四氢吲哚嗪-1-羧酰胺(CMV423)。

因此，在一个实施例中，所述抗病毒剂包括核苷类似物，如选自由以下组成的组的核苷类似物：伐昔洛韦；阿昔洛韦(acyclovir)；泛昔洛韦(famciclovir)；和喷昔洛韦(penciclovir)或此类核苷类似物的活性代谢物、前药、盐、溶剂化物或水合物。具有抗病毒活性的其它核苷类似物可以通过本领域已知的标准方法来鉴定。在一个实施例中，所述抗病毒剂选自包括以下的组：伐昔洛韦或其前药或盐；阿昔洛韦或其前药或盐；泛昔洛韦或其前药或盐和/或喷昔洛韦或其前药或盐。

应当理解，本发明的抗病毒剂可以包括一种或多种抗病毒剂的混合物。在优选实施例中，在NK细胞和/或NK样T细胞疗法之前和期间，500mg的伐昔洛韦在24小时内以两个剂量施用于患者的持续时间为六个月。

如本文中所使用的，术语“前药”是指在体内转化以产生所公开的化合物或化合物的药学上可接受的形式的化合物。在一些实施例中，前药是可以在生理条件下或通过溶剂分解转化成如本文中所描述的生物活性化合物的化合物。因此，术语“前药”是指药学上可接受的生物活性化合物的前体。前药在向患者施用时可以是无活性的，但是然后例如通过水解(例如，在血液或组织中的水解)在体内转化成活性化合物。在某些情况下，前药相较于前药衍生自其的母体化合物具有改善的物理和/或递送特性。前药通常在哺乳动物有机体中提供可溶性、组织相容性或延迟释放的优点。

阿昔洛韦和喷昔洛韦两者是通过充当病毒DNA聚合酶的底物来抑制病毒复制的鸟苷类似物。伐昔洛韦是前药，其是阿昔洛韦的酯化版本，具有更大的口服生物利用度。泛昔洛韦是喷昔洛韦的前药形式，其具有改善的口服生物利用度。以下抗病毒剂均为无环鸟苷的类似物并且是可商购的：

具有抗病毒活性的其它核苷类似物是本领域已知的并且可以在本发明的上下文中使用。例如，溴乙烯基脱氧尿苷(溴呋啶(Brivudin))是高度有效的胸腺嘧啶核苷类似物，其对HSV-1和VZV具有选择性活性。应当理解，双环嘧啶核苷类似物(BCNA)具有抗病毒活性。

在本发明的上下文中使用的抗病毒剂还包含疫苗。

本领域技术人员应当理解，本发明的抗病毒剂也可以以其药学上可接受的盐或溶剂化物的形式来使用。抗病毒剂的药学上可接受的盐包含由药学上可接受的无机或有机酸或碱以及季铵盐形成的常规盐。适合的酸盐的更具体的实例包含盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、高氯酸、富马酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、甲酸、乳酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、棕榈酸、丙二酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、萘-2-磺酸、苯磺酸、羟基萘酸、氢碘酸、苹果酸、硬酯酸、单宁酸等。虽然如草酸等其它酸本身不是药学上可接受的但其可以用于制备在获得本发明的化合物和其药学上可接受的盐时用作中间体的盐。适合的碱性盐的更具体的实例包含钠盐、锂盐、钾盐、镁盐、铝盐、钙盐、锌盐、N,N′-二苄基乙二胺盐、氯普鲁卡因(chloroprocaine)盐、胆碱盐、二乙醇胺盐、乙二胺盐、N-甲基葡糖胺盐和普鲁卡因(procaine)盐。

抗病毒剂可以通过肠胃外施用来施用。肠胃外施用包含任何非口服的施用方式，如直接注射到身体中、绕过皮肤和粘膜。常见的肠胃外途径是肌肉内(IM)、皮下(SC)和静脉内(IV)。

在本发明的一个实施例中，所述抗病毒剂口服、静脉内、皮下、静脉内和/或肌肉内施用。

在一个实施例中，在所述患者体内存在选自包括以下的组的疱疹病毒：水痘带状疱疹病毒(VZV)；单纯疱疹病毒(HSV)；爱泼斯坦巴尔病毒(EBV)；和/或巨细胞病毒(CMV)。在一个实施例中，所述疱疹病毒处于休眠(潜伏)状态。应当理解，这个患者可以被称为“血清阳性”。

“血清阳性”包含来自患者的血清中的抗体或其它免疫标志物的存在，这指示先前暴露于特定的有机体、抗原或病毒。应当理解，患者在接受包括自然杀伤(NK)细胞和/或NK样T细胞的疗法之前可以对选自包括以下的组的疱疹病毒中的一种或多种疱疹病毒呈血清阳性：水痘带状疱疹病毒(VZV)；单纯疱疹病毒(HSV)；爱泼斯坦巴尔病毒(EBV)；和巨细胞病毒(CMV)。用于确定患者的潜伏病毒的存在的方法是本领域已知的，例如PCR(如RT-PCR)。

在一个实施例中，疱疹病毒感染引起带状疱疹。

应当理解，抗病毒剂可以用于预防已经接受包括自然杀伤(NK)细胞和/或NK样T细胞的疗法的患者的带状疱疹。应当理解，抗病毒剂也可以用于预防已经接受包括自然杀伤(NK)细胞和/或NK样T细胞的疗法的患者的带状疱疹的严重并发症，如带状疱疹相关疱疹后神经痛(PHN)、多发性带状疱疹、脊髓炎、眼部疱疹或无疹型带状疱疹。

在第四方面，本发明提供了用于治疗患者的恶性疾病的自然杀伤(NK)细胞和/或NK样T细胞，其中所述用途包括用NK细胞和/或NK样T细胞疗法向所述患者施用抗病毒剂的步骤。

在第五方面，本发明提供了一种自然杀伤(NK)细胞和/或NK样T细胞在制造用于治疗患者的恶性疾病的药物中的用途，其中所述患者用NK细胞和/或NK样T细胞疗法接受抗病毒剂。

在第六方面，本发明提供了一种用于治疗患者的恶性疾病的方法，所述方法包括施用包括自然杀伤(NK)细胞和/或NK样T细胞的疗法的步骤，并且所述方法进一步包括用所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法向所述患者施用抗病毒剂的步骤。

在本发明的一个实施例中，所述抗病毒剂预防患者的疱疹病毒感染。在本发明的一个实施例中，所述疱疹病毒感染包括疱疹病毒的再活化。应当理解，疱疹病毒可以包含上文关于本发明的第一、第二和第三方面所描述的疱疹病毒。

在本发明的一个实施例中，所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法诱导和/或增加疱疹病毒再活化。应当理解，NK细胞和/或NK样T细胞疗法包含上文关于本发明的第一、第二和第三方面所描述的NK细胞和/或NK样T细胞疗法。

在本发明的一个实施例中，所述患者在高剂量疗法(HDT)和/或自体干细胞移植(ASCT)之后接受NK细胞和/或NK样T细胞疗法。

在本发明的一个实施例中，所述抗病毒剂如上文在本发明的第一、第二和第三方面的上下文中所定义。

在第七方面，本发明提供了一种药物组合物，其包括：如上文在本发明的第一、第二和第三方面的上下文中所定义的NK细胞和/或NK样T细胞以及抗病毒剂。

在一个实施例中，所述药物组合物进一步包括药学上可接受的稀释剂、载剂或赋形剂。“药学上可接受的”包含所述组合物或调配物是无菌的且不含热原的。适合的药物载剂、稀释剂和赋形剂是药剂学领域众所周知的。在与抑制剂相容并且对其接受者无害的意义上，一种或多种载剂必须是“可接受的”。典型地，载剂将会是将是无菌的且不含热原的水或盐水；然而，可以使用其它可接受的载剂。

应当理解，药物组合物包括出于预期目的(即，预防)的治疗有效量和/或有效杀伤或灭活病毒的量的抗病毒剂。

在本发明的一个实施例中，所述药物组合物用于预防患者的疱疹病毒感染，其中所述患者已经接受包括自然杀伤(NK)细胞和/或NK样T细胞的疗法，其中所述用途包括用所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法向所述患者施用所述药物组合物的步骤。

在另外的实施例中，本发明提供了一种所述药物组合物在制造用于预防患者的疱疹病毒感染的药物中的用途，其中所述患者已经接受包括自然杀伤(NK)细胞和/或NK样T细胞的疗法，其中所述药物组合物是用所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法向所述患者施用的。

在一个实施例中，本发明提供了一种用于预防患者的疱疹病毒感染的方法，其中所述患者已经接受包括自然杀伤(NK)细胞和/或NK样T细胞的疗法，其中所述方法包括用所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法向所述患者施用所述药物组合物的步骤。

以下是根据本发明的药物调配物和/或组合物，其中活性成分是如本文中所定义的抗病毒剂。

所述调配物或组合物包含适合于口服和肠胃外(包含皮下，例如通过注射或通过长效储库片剂、皮内、鞘内、肌肉内，例如通过长效储库和静脉内)施用的调配物或组合物，尽管最适合的途径可以取决于例如病状、年龄和接受者的病症以及病毒感染或所治疗的疾病。

在一个实施例中，本发明的药物组合物或调配物用于肠胃外施用，更具体地用于静脉内或皮下施用。在优选实施例中，所述药物组合物适合于例如通过注射向患者静脉内或皮下施用。

适合于肠胃外施用的调配物或组合物包含：水性和非水性无菌注射溶液，所述溶液可以含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和提供与预期接受者的血液等渗的调配物的溶质；以及水性和非水性无菌悬浮液，所述悬浮液可以包含悬浮剂和增稠剂。

优选地，调配物可以是含有每日剂量或单位、每日亚剂量或其适当部分的活性成分的单位剂量。

所述药剂或活性成分可以以药学上可接受的剂型以包括活性成分的药物调配物的形式、任选地以无毒的有机或无机酸或碱加成盐的形式口服或通过任何肠胃外途径施用。取决于病症和待治疗的患者以及施用途径，组合物可以以不同剂量来施用。

在人疗法中，所述药剂或活性成分通常会与根据预期的施用途径和标准药学实践所选择的适合的药物赋形剂、稀释剂或载剂混合施用。

例如，所述药剂或活性成分可以以片剂、胶囊、珠粒剂(ovule)、酏剂、溶液或悬浮液的形式口服、经颊或舌下施用，其可以含有调味剂或着色剂，以用于速释、缓释或控释应用。所述活性成分也可以通过海绵体内注射施用。

适合的片剂可以含有：赋形剂，如微晶纤维素、乳糖、柠檬酸钠、碳酸钙、磷酸氢钙和甘氨酸；崩解剂，如淀粉(优选地，玉米、马铃薯或木薯淀粉)、羟乙酸淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠和某些复合硅酸盐；以及造粒结合剂，如聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羟丙基纤维素(HPC)、蔗糖、明胶和阿拉伯胶。另外，可以包含润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸、甘油二十二烷酸酯和滑石。

还可以采用类似类型的固体组合物作为明胶胶囊中的填充剂。在这方面，优选的赋形剂包含乳糖(lactose)、淀粉、纤维素、乳糖(milk sugar)或高分子量聚乙二醇。对于水性悬浮液和/或酏剂，可以将本发明的化合物与各种甜味剂或调味剂、着色剂或染料、与乳化剂和/或悬浮剂以及与如水、乙醇、丙二醇和甘油以及其组合等稀释剂组合。

所述药剂或活性成分也可以肠胃外(例如，静脉内、动脉内、腹膜内、鞘内、心室内、胸骨内、颅内、肌肉内或皮下)施用，或者它们可以通过输注技术施用。最好以无菌水溶液的形式使用所述药剂或活性成分，所述无菌水溶液可以含有其它物质(例如，足够的盐或葡萄糖)以使溶液与血液等渗。如有必要，应适当缓冲所述水溶液(优选地，缓冲到pH为3到9)。通过本领域的技术人员中众所周知的标准制药技术容易地实现在无菌条件下制备适合的肠胃外调配物。

所述调配物可以存在于单位剂量或多剂量容器(例如，密封的安瓿瓶和小瓶)中，并且可以在仅需要在使用前一刻添加无菌液体载剂(例如，注射用水)的冷冻干燥(冻干)条件下储存。可以由前述种类的无菌粉末、颗粒和片剂制备临时注射溶液和悬浮液。

对于向人患者口服和肠胃外施用，药剂、抗体或化合物的每日剂量水平通常会是每个成人1到1,000mg(即，约0.015到15mg/kg)，以单个剂量或分次剂量施用。

因此，例如，所述药剂或活性成分的片剂或胶囊可以含有1mg到1,000mg的药剂或活性剂，以视情况在某个时间时一次或两次或更多次施用。在任何情况下，医生将确定最适合于任何个体患者的实际剂量，并且所述实际剂量将随着特定患者的年龄、体重和应答而变化。上述剂量是一般情况的示例。当然，可以存在个别情况，其中更高或更低的剂量范围是理所当然的，并且此类剂量范围处于本发明的范围内。

所述药剂或活性成分还可以鼻内或通过吸入施用并且以干粉吸入器或气雾剂喷雾呈现的形式使用适合的推进剂(例如，二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、氢氟烷烃(如1,1,1,2-四氟乙烷(HFA 134A3)或1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷(HFA 227EA3))、二氧化碳或其它适合的气体)从加压容器、泵、喷雾、雾化器或喷雾器方便地递送。在加压气雾剂的情况下，剂量单位可以通过提供阀门来递送计量的量来确定。加压容器、泵、雾化器或喷雾器可以含有活性化合物(例如，使用乙醇和推进剂的混合物作为溶剂)的溶液或悬浮液，所述活性化合物可以另外含有润滑剂(例如，脱水山梨糖醇三油酸酯)。可以将用于吸入器或吹入器的胶囊和药筒(例如，由明胶构成)配置成含有活性成分和适合的粉末基质(如乳糖或淀粉)的粉末混合物。此类调配物对于治疗肺的实体瘤(例如，小细胞肺癌、非小细胞肺癌、胸膜肺母细胞瘤或类癌瘤)可能特别有用。

优选地，气雾剂或干粉调配物被布置成使得每个计量的剂量或“粉扑”含有至少1mg的抑制剂以递送给患者。应当理解，气雾剂的每日总剂量将因患者而有所不同，并且可以一整天以单个剂量或更通常地以分次剂量施用。

可替代地，所述药剂或活性成分可以以栓剂或子宫托的形式施用，特别是用于治疗或靶向结肠肿瘤、直肠肿瘤或前列腺肿瘤。

在一个实施例中，所述药剂或活性成分可以使用可注射的缓释药物递送系统来递送。这些是专门为减少注射频率而设计的。此种系统的实例是Nutropin Depot，其将重组人生长激素(rhGH)封装在可生物降解的微球中，一旦注射，所述可生物降解的微球就可以在持续的时段内缓慢释放rhGH。

所述药剂或活性成分可以通过将药物直接释放到所需部位(例如，到眼睛中以治疗眼肿瘤)的外科手术植入式装置来施用。向疾病部位的此种直接施用在没有显著的系统性副作用的情况下实现有效疗法。

用于递送药剂或活性成分的替代性方法是Regel可注射系统，其是热敏的。在体温以下，Regel是可注射液体，而在体温处，其立即形成缓慢侵蚀并且溶解成已知的、安全的、可生物降解的聚合物的凝胶储存库。随着生物聚合物溶解，活性药物随时间而递送。

多肽药物也可以口服递送。过程采用自然过程以口服摄取身体中的维生素B

可以将多核苷酸作为如下文所描述的适合的基因构建体施用并且递送给表达其的患者。通常，基因构建体中的多核苷酸可操作地连接到可以在细胞中表达化合物的启动子。本发明的基因构建体可以使用本领域众所周知的方法(例如，在Sambrook等人(2001)中)来制备。

尽管用于递送多核苷酸的基因构建体可以是DNA或RNA，但是如果它们是DNA则是优选的。

优选地，基因构建体适于递送到人细胞。将基因构建体引入细胞中的手段和方法是本领域已知的并且包含使用免疫脂质体、脂质体、病毒载体(包含牛痘、经过修饰的牛痘、慢病毒、细小病毒、逆转录病毒、腺病毒和腺相关病毒(AAV)载体)以及通过例如使用基因枪和电穿孔直接递送DNA。此外，将多核苷酸递送到患者的靶组织以进行治疗的方法也是本领域众所周知的。在替代性方法中，采用使用受体介导的内吞作用将DNA大分子携带到细胞中的高效核酸递送系统。这是通过将铁转运蛋白转铁蛋白与结合核酸的聚阳离子缀合来完成的。使用通过Cotten等人(1992)《美国国家科学院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)》89,6094-6098的方法产生的有缺陷的或化学灭活的腺病毒颗粒的内体破坏活性对本发明的DNA构建体或其它基因构建体进行的高效的受体介导的递送也可以使用。应当理解，“裸DNA”和与阳离子脂质和中性脂质复合的DNA也可以用于将本发明的DNA引入待治疗个体的细胞中。基因疗法的非病毒方法在Ledley(1995,《人基因疗法(Human Gene Therapy 6)》,1129-1144)中进行了描述。

尽管对于特定组织的癌症/肿瘤，在编码多核苷酸抑制剂的载体中使用组织特异性启动子可能是有用的，但是这并不是必需的，因为与对患有癌症/肿瘤的患者的治疗益处相比，预期活性成分在除癌症/肿瘤之外的位置处在身体中表达的风险是可容忍的。可能期望能够暂时调节多核苷酸抑制剂在细胞中的表达，尽管这也不是必需的。

可以将本发明的药剂或活性成分(即，抗病毒剂)冻干以用于储存并且在使用之前在适合的载剂中重构。可以采用任何适合的冻干方法(例如，喷雾干燥、滤饼干燥(cakedrying))和/或重构技术。本领域的技术人员应当理解，冻干和重构可能导致不同程度的蛋白质活性损失，并且可能必须向上调整使用水平以进行补偿。在一个实施例中，当再水化时，冻干的(冷冻干燥的)活性成分损失其活性(在冻干之前)的不超过约20％、或不超过约25％、或不超过约30％、或不超过约35％、或不超过约40％、或不超过约45％、或不超过约50％。

应当理解，用于预防所需的抗病毒剂的量将随所治疗的病状的性质以及患者的年龄和病状而变化，并且最终将由主治医师确定。然而，总体上，用于成年人治疗的剂量通常将在每天0.02-5000mg的范围内，优选地每天100-1500mg。所期望的剂量可以方便地以单个剂量提供或以适当间隔施用的分次剂量(例如，以每天两个、三个、四个或更多个亚剂量)提供。根据本发明的调配物可以含有介于0.1-99％之间的活性成分，方便地对于片剂和胶囊为30-95％并且对于液体制剂为3-50％。

当然，本领域的普通技术人员可以在说明书的教导内对调配物进修改，以在不会使本发明的组合物不稳定或损害其治疗活性的情况下提供用于特定施用途径的多种调配物。为了管理本发明化合物的药代动力学而对特定化合物的施用途径和剂量方案进行修改以对患者具有最大的有益效果也完全处于本领域技术人员的能力之内。

在第八方面，本发明提供了一种成套试剂盒，其包括：

(i)包括NK细胞和/或NK样T细胞的组合物，其所述NK细胞和/或NK样T细胞如本文中所定义；以及

(ii)如本文中所定义的抗病毒剂。

在一个实施例中，所述试剂盒包括药学上可接受的稀释剂、载剂或赋形剂，如上文在所述药物组合物的上下文中所描述的药学上可接受的稀释剂、载剂或赋形剂。在另外的实施例中，所述试剂盒进一步包括用于向患者施用所述NK细胞和/或NK样T细胞和/或所述抗病毒剂的说明书。

在一个实施例中并且如上文在本发明的第一、第二和第三方面的上下文中所描述的，所述抗病毒剂用于预防患者的疱疹病毒再活化。

在优选实施例中并且如上文在本发明的第一、第二和第三方面的上下文中所描述的，所述疱疹病毒感染包括疱疹病毒的再活化。

在一个实施例中并且如上文在本发明的第一、第二和第三方面的上下文中所描述的，所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法诱导和/或增加疱疹病毒再活化。

在本发明的一个实施例中，所述成套试剂盒用于预防患者的疱疹病毒感染，其中所述患者已经接受包括自然杀伤(NK)细胞和/或NK样T细胞的疗法，其中所述用途包括用所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法向所述患者施用所述成套试剂盒的组分的步骤。

在另外的实施例中，本发明提供了一种所述成套试剂盒在制造用于预防患者的疱疹病毒感染的药物中的用途，其中所述患者已经接受包括自然杀伤(NK)细胞和/或NK样T细胞的疗法，其中所述成套试剂盒的组分是用所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法向所述患者施用的。

在一个实施例中，本发明提供了一种用于预防患者的疱疹病毒感染的方法，其中所述患者已经接受包括自然杀伤(NK)细胞和/或NK样T细胞的疗法，其中所述方法包括用所述NK细胞和/或NK样T细胞疗法向所述患者施用成套试剂盒的组分的步骤。

应当理解，本发明的第四、第五、第六、第七和第八方面的特征可以是如本文关于本发明的其它方面所描述的。

本文引用的所有文件均通过引用整体并入本文。

本说明书中对显然在前公开的文件的列举或讨论不应必然地被视为是承认所述文件是现有技术的一部分或是公知常识。

现在，将参考以下附图和实例来描述本发明。

现在，将参考以下附图描述体现本发明的某些方面的优选的非限制性实例：

图1：“CellProtect”安全性研究

示意性图表：对患有多发性骨髓瘤的患者进行的“CellProtect”(自体离体扩增和活化的NK细胞产物)的安全性研究(ACP-001)。

图2：“CellProtect”治疗的临床功效

六名患者已经输注三个剂量的“CellProtect”(由箭头所指示的)。两名患者在输注时具有可测量的M成分。这两名患者的应答为：血清M成分(肿瘤负荷的生物标志物)减少至少50％。这种减少被认为是临床“应答”(Pt 103)和(Pt105)。输注后五个月，这些患者之一复发(Pt 105)。具有可检测到的M成分的一名患者在CellProtect输注后显示出改善的应答(Pt 107)。其它三名患者在输注之前没有显示出任何量的M成分(未示出)。在治疗和临床随访的过程期间，完全缓解(CR)的患者均未复发。

图3：“CellProtect”输注和再活化时间线

在先前的ASCT的背景下，对前四名患者的输注和再活化时间线进行总结。“患者1”是患者103，“患者2”是患者105，“患者3”是患者106并且“患者4”是患者107。

图4：从ASCT到NK细胞输注的时间与从NK细胞输注到HZ产生的时间之间的相关性

绘图描绘了从ASCT到NK细胞输注的时间与从NK细胞输注到HZ产生的时间之间的相关性。“患者3”是患者103，“患者4”是患者105，“患者5”是患者106并且“患者6”是患者107。

图5：“CellProtect”原料药(DS)和药物产品(DP)的制造过程

流程图描绘了CellProtect的制造过程。

介绍

用于治疗多发性骨髓瘤(MM)的新药物的开发显著提高了生存期，从之前大约3年到现在多于5年。然而，尽管有这种巨大的进步，但是实际上从未获得治愈，可能除用同种异体干细胞移植(AlloSCT)进行治疗的一部分年轻患者之外。因此，新方法是重要的。

MM是恶性新生物，其特征在于骨髓(BM)中的浆细胞的克隆性增殖。尽管进行了新的治疗和强化治疗两者，但由于微小残留病的持久性，MM仍被认为是无法治愈的(1)。先前已经显示，来自MM患者的长期离体扩增和活化的自体NK细胞在体外提供针对自体骨髓瘤细胞的细胞毒性活性，其优于短期活化的自体NK细胞的细胞毒性活性(2)。还已经显示，此类细胞可以用作对实验动物的MM的有效治疗(3)。

最近，已经优化了使用临床级的符合GMP的组分在封闭式自动生物反应器中进行NK细胞扩增的程序(4)，最终确定了所有临床前要求，获得了瑞典药品管理局(EudraCT：2010-022330-83)和伦理委员会(EPN：2013/490-32)的批准以启动首次人体I/II期临床试验。扩增的细胞完全符合新的EU ATMP指令。

对用自体干细胞移植(ASCT)进行前期治疗的患者进行的当前的I/II期研究的目的主要是研究扩增的经活化的自体NK细胞的安全性并且其次是根据国际骨髓瘤工作组(IMWG)标准分析功效参数(如单克隆免疫球蛋白、应答)并且分析在对ASCT产生应答的患者的NK细胞治疗之后的微小残留病。

先进的疗法药品(ATMP)CellProtect是基于具有恢复的细胞毒性活性的离体扩增的多克隆NK细胞的细胞悬浮液。所述产品是单独制备的并且治疗是自体的。

2014年，在胡丁格(Huddinge)的卡罗林斯卡大学医院(Hematology KarolinskaUniversity Hospital)的血液科(EudraCT号：2010-022330-83)启动了用CellProtect在新诊断的患有多发性骨髓瘤的患者中进行的首次人体I/II期治疗探索临床试验(图1)。关键的患者入选标准为：根据Greipp PR,San Miguel J,Durie BG等人(2005)诊断有MM、有资格并且愿意经历高剂量化疗和ASCT以及东部肿瘤协作组(ECOG)表现状态为0-2。

临床研究是开放的单臂三倍递增剂量/患者研究，主要研究ASCT之后的患有MM的患者的CellProtect的安全性和耐受性。次要目标是研究CellProtect对加深应答(即，进一步降低没有实现完全缓解的患者的M蛋白或在实现完全缓解的患者中达到微小残留病(MRD))的作用。

结果

六名患者已经完成研究，包含最后一次输注之后的评价和六个月随访(图1)。由于安全性数据被认为足够，临床结果的按方案中期分析正在进行最终确定并且可以选择结束研究，可替代地使其保持开放并且包含另外的六名患者。

入选研究之后，研究患者将首先捐献血液以产生CellProtect。通过定期血液捐献收集起始材料，并且将其转移到制造成品CellProtect的生产设施。将CellProtect以针对患者定制的剂量在-150℃下冷冻保存，直到首席调查员提出要求为止。由制造商将一个或多个适用的袋在液氮上运输到诊所，在所述诊所中，在输注之前不久将其解冻。

活性物质的保质期基于从CellProtect的验证批次开始进行的持续性稳定性监测程序。基于这些数据，可以得出结论，CellProtect药物产品(DP)在-150℃下可稳定至多48个月。将会收集另外的数据并且预期可以延长成品的保质期。已经确定活性物质的使用中稳定性为至少60分钟。

血液捐献之后，用3-4个周期的Cyber-D(环磷酰胺(Cyclophosphamide)、硼替佐米(Bortezomib)、地塞米松(Dexamethasone))作为诱导根据目前的临床实践对患者进行治疗，然后进行高剂量治疗(美法仑200mg/m

当患者已经从ASCT康复但处于距ASCT六个月内时，启动研究治疗。患者接受了以5×10

六(6)名患者已完成有效的按方案CellProtect治疗，并且用按方案的所要求的积累数量的经活化的NK细胞进行了三次输注。已经在第七(7)次访视时对这6名患者进行了评价，并且随后完成了六个月随访。

在诊断时将患者选入临床试验，患者人口统计学数据在表1中示出。五名患者患有IgG骨髓瘤(103、105、106、107、111)并且一名患者患有IgA骨髓瘤(110)。ASCT之后和NK细胞输注之前的应答状态在三名患者(103、105、107)中是非常好的部分缓解(VGPR)并且在三名患者(106、110、111)中是完全缓解(CR)。在启动任何MM治疗之前，在第一(1)次研究访视时通过血液捐献收集用于制造CellProtect的起始材料。

表1：患者特征研究患者人口统计学数据。

第二(2)次研究访视是在输注CellProtect之前在ASCT之后进行的检查访视。这个访视的目的是根据MM应答标准(表2)建立患者的分类以及收集有关患者的身体状况的信息以便确认患者仍有资格并且足够继续研究治疗。骨髓样品应当在获得患者同意的情况下在这个访视时采集并且构成用于评估CellProtect治疗的基线BM样品。第3次访视时的患者的给药前状态充当大多数其它评估的基线。

表2：在HDC和ASCT之后进行的检查访视时的应答。CR被定义为骨髓抽吸物中的M蛋白为0并且浆细胞低于5％

完全缓解(CR)，非常好的部分缓解(VGPR)

患者103被分类为对ASCT治疗表现出非常好的部分缓解(VGPR)并且在移植之后6-8周输注三个完全剂量的CellProtect。M成分血清水平在CellProtect输注之后从之前的8g/L降低到1g/L(降低＞80％)并且在整个研究期内，所述水平保持较低。

患者105被分类为对ASCT治疗表现出非常好的部分缓解(VGPR)并且在移植之后12-14周输注三个完全剂量的CellProtect。测量到M成分血清水平在CellProtect输注之后从5g/L降低到2g/L(大约60％)并且保持较低持续4个月。患者在CellProtect输注之后的五个月复发。患者105没有同意并且因此在第2次访视时未进行骨髓采样。

患者106被分类为对ASCT治疗表现出完全缓解(CR)并且在移植之后15-17周输注三个剂量的CellProtect。由于缺乏IMP，第三剂量减少。在临床随访内，患者保持处于完全缓解(complete remission，CR)。

患者107首先被分类为对ASCT治疗表现出非常好的部分缓解(VGPR)并且然后被分类为对所述ASCT治疗表现出确认的完全缓解(CR)。患者107在进行CellProtect输注的时间处具有可检测到的M成分水平并且在移植之后15-30周输注三个完全剂量的CellProtect。由于患者的带状疱疹的活化和带状疱疹的表现，第三剂量也是最高剂量的CellProtect延迟。107患者在CellProtect输注后显示出改善的应答。测量到M成分血清水平从1g/L降低到0g/L。在CellProtect输注期间和之后，患者的游离轻链(FLC)配额(筛选时为736)从1.6降低到0.8。在临床随访内，患者保持处于完全缓解(CR)。

患者110被分类为对ASCT治疗表现出完全缓解(CR)并且在移植之后14-16周输注三个剂量的CellProtect。由于缺乏IMP，第三剂量减少。在临床随访内，患者保持处于完全缓解(CR)。

患者111被分类为对ASCT治疗表现出完全缓解(complete response，CR)并且在移植之后17-19周输注三个完全剂量的CellProtect。在临床随访内，患者保持处于完全缓解(CR)。

表3：对CellProtect治疗的应答。

*NE＝无法评价，因为在施用CellProtect之前完全缓解

到目前为止，已经通过测量血清免疫球蛋白水平(针对疾病的建立的生物标志物)来监测CellProtect治疗的临床功效的迹象(图2)。在仍有可测量疾病的所有(3)名患者中，血清免疫球蛋白水平在施用CellProtect之后降低并且在ASCT之后处于稳定的部分应答(VGPR)或(VGPR)。六(6)名患者中的三(3)名患者处于完全缓解(CR)状态并且在CellProtect治疗时没有可测量到的血清免疫球蛋白水平。到目前为止，已经在用CellProtect进行治疗的六(6)名患者之一中测量到免疫球蛋白水平提高(图2)。

有趣的是，在这个临床试验中，在施用CellProtect的前四名患者(103、105、106和107)中观察到带状疱疹(Herpes Zoster)的活化和带状疱疹(Shingles)的表现。在CellProtect输注之前，用高剂量预防对患者110和111进行处理，以防止病毒活化。CellProtect产品的这种副作用进一步确认了细胞制剂的体内生物学活性。

没有看到严重的副作用。然而，前四名患者(103、105、106和107)在ASCT之后18-32周和第一次NK细胞输注之后3-25周产生了带状疱疹(Herpes Zoster，HZ，带状疱疹(shingles))(图3)。根据临床实践，这些患者在ASCT之后14周内每天接受250mg×2的伐昔洛韦，以预防病毒再活化。然后，药物被撤回，因此不覆盖NK细胞输注之后产生HZ的时间。

由于在前四名患者中，HZ的产生与NK细胞输注明显相关联，因此在输注之后6个月内用高剂量伐昔洛韦(500mg)对后两名患者(110和111)进行治疗，每天两次。这两名患者在预防治疗之后12个月内没有显示出任何HZ活化迹象。

在图3中对在先前的ASCT的背景下的前四名患者的输注和再活化时间线进行了总结。

讨论

结果显示，除非使用抗病毒药物进行预防，否则自体扩增和活化的NK细胞是安全的，但是会诱导HZ再活化。

似乎明显的是，NK细胞输注是HZ产生的原因。如图4中所看到的，HZ总是在NK细胞输注之后出现并且在从ASCT到NK细胞输注的时间与从NK细胞输注到HZ产生的时间之间存在负相关。

HZ产生的可能机制是在过继活化的NK细胞转移时诱导免疫级联应答。可想到的是，过继细胞转移时活化的NK细胞会攻击HZV的储存库细胞，所述储存库细胞进而可能由于诱导应力而引起病毒再活化。

考虑到HZV产生的时间分别与ASCT的时间和NK细胞输注的时间有关，ASCT本身不太可能负责HZV活化。而且，最近的报告显示，没有进行抗病毒预防的ASCT治疗的MM患者中仅有1.0-14.4％的HZV感染(8、9)，这远低于本研究中四分之四的连续患者(100％)由于ASCT而产生带状疱疹的可能性。

结论是，基于NK细胞的免疫疗法在MM中是可行的，然而，应始终与预防性抗病毒治疗相结合。

材料与方法

CellProtect药物产品是基于来自患有MM的患者的离体扩增的NK细胞的细胞悬浮液。治疗是自体的。

下文描述了用于制造CellProtect的方案，并且在图5中描绘了所述方案。

通过血液捐献收集来自患有MM的患者的外周血。根据收集方法，将一个单位(大约450ml)的全血收集到无菌的聚氯乙烯(PVC)塑料转移袋中。(Terumo或Fenwal血液收集容器)。将收集到的血液储存在室温(15-25℃)中并且制造过程在6小时内开始。

使用Ficoll-Paque通过基于密度的梯度分离淋巴细胞。在用PBS进行最终洗涤步骤之后，对细胞进行计数，并将其在补充有以下材料的800到1000mL细胞培养基中调整到0.5到1.0×10

使用控制温度到37℃和5％CO

当细胞密度达到3×10

当灌注开始时，NK细胞扩增阶段开始并且继续14到16天。

在培养期期间定期监测细胞数量和活力。进行流式细胞术分析以确定NK细胞的百分比。在用K562细胞系触发之后，通过细胞毒性CD107a的替代标志物的表达来分析经活化的NK细胞。还对在CellProtect DP的制造期间的扩增之后采集的样品进行了无菌性、内毒素和支原体测试。

下表4和5概述了CellProtect产品的规格。

表4：研究药品的组分

表5：用于常规控制CellProtect原料药的规范

CellProtect的临床批次的组合物在表6中示出。

表6：临床批次的组合物

*患者显示出M成分水平下降

**第3剂量中的细胞量异常

实例1：参考文献:

1.Alici E、Bjorkstrand B、Treschow A、Aints A、Smith CI、Gahrton G等人,针对多发性骨髓瘤进行自体干细胞移植之后对基因标记的CD34+细胞的长期随访《癌症基因疗法》2007；14(3):227-32。

2.Alici E、Sutlu T、Bjorkstrand B、Gilljam M、Stellan B、Nahi H等人,使用符合GMP的组分从骨髓瘤患者中扩增的NK细胞的自体抗肿瘤活性《血液》2008；111(6):3155-62。

3.Alici E、Konstantinidis KV、Sutlu T、Aints A、Gahrton G,Ljunggren HG等人,实验性多发性骨髓瘤模型中的内源性和过继转移的经活化的自然杀伤细胞的抗骨髓瘤活性《实验血液学》2007；35(12):1839-46。

4.Sutlu T、Stellan B、Gilljam M、Quezada HC、Nahi H、Gahrton G等人,用于使用自动生物反应器进行过继免疫疗法的高活性人自然杀伤细胞的临床级、大规模、无饲养层扩增《细胞疗法》2010；12(8):1044-55。

5.Backstrom E、Chambers BJ、Ho EL、aidenko OV、Mariotti R、Fremont DH等人,通过RAE1/NKG2D相互作用对背根神经节神经元进行的自然杀伤细胞介导的裂解(Naturalkiller cell-mediated lysis of dorsal root ganglia neurons via RAE1/NKG2Dinteractions)《欧洲免疫学期刊(European journal of immunology)》2003；33(1):92-100。

6.Backstrom E、Chambers BJ、Kristensson K、Ljunggren HG.在体外对同基因的背根神经节神经元进行的直接NK细胞介导的裂解(Direct NK cell-mediated lysis ofsyngenic dorsal root ganglia neurons in vitro)《免疫学期刊(Journal ofimmunology》2000；165(9):4895-900。

7.Hickey WF、Ueno K、Hiserodt JC、Schmidt RE.外源诱导的自然杀伤细胞介导的神经元杀伤：新型致病机制(Exogenously-induced,natural killer cell-mediatedneuronal killing:a novel pathogenetic mechanism)《实验医学杂志(The Journal ofexperimental medicine)》1992；176(3):811-7。

8.Park H、Youk J、Kim HR、Koh Y、Kwon JH、Yoon SS等人,过去十年中接受自体干细胞移植的多发性骨髓瘤的感染性并发症(Infectious complications in multiplemyeloma receiving autologous stem cell transplantation in the past 10years)《国际血液学杂志(International journal of hematology)》2017；106(6):801-10。

9.Park S、Jung CW、Jang JH、Kim SJ、Kim WS、Kim K.根据在患有多发性骨髓瘤的自体造血干细胞移植接受者中的静脉内免疫球蛋白使用的感染发病率(Incidence ofinfection according to intravenous immunoglobulin use in autologoushematopoietic stem cell transplant recipients with multiple myeloma)《移植感染病(Transpl Infect Dis.)》2015；17(5):679-87。

实例2：药物调配物

以下实例展示了活性成分是抗病毒剂的根据本发明的药物调配物。

片剂由上述成分通过湿法制粒然后压缩来制备。

实例C片剂调配物

以下调配物A和B通过以下来制备：将成分用聚维酮溶液湿法制粒，然后添加硬脂酸镁并且进行压缩。

以下调配物D和E通过直接压缩经过混合成分来制备。调配物E中使用的乳糖属于方向压缩类型(direction compression type)。

所述调配物通过以下来制备：将成分(下面的成分)用聚维酮溶液湿法制粒，然后添加硬脂酸镁并且进行压缩。

药物释放在约6-8小时的时段内发生并且在12小时之后完成。

胶囊调配物通过以下来制备：混合上述实例C中的调配物D的成分，并将其填充到两部分硬明胶胶囊中。调配物B(下文)以类似的方式来制备。

胶囊通过以下来制备：将聚乙二醇4000BP熔化，将活性成分分散在熔体中，并将熔体填充到两部分硬明胶胶囊中。

胶囊通过以下来制备：将活性成分分散在卵磷脂和花生油中，并将分散体填充到软的弹性明胶胶囊中。

以下控释胶囊调配物通过以下来制备：使用挤出机挤出成分a、b和c，然后将挤出物滚圆并进行干燥。然后将经过干燥的粒料用控释膜(d)包衣，并将其填充到两件式硬明胶胶囊中。

活性成分 0.200g

无菌的、不含热原的磷酸盐缓冲液(pH 7.0)到10ml

将活性成分溶解在大部分磷酸盐缓冲液(35-40℃)中，然后将其定容到一定体积并且通过无菌微孔过滤器过滤到无菌的10ml琥珀色玻璃小瓶(1型)中并用无菌封闭和顶封进行密封。

将活性成分溶解在糖原质中。然后添加苯甲醇并将其溶解，并将水添加到3ml。然后将混合物通过无菌微孔过滤器过滤，并密封在无菌的3ml玻璃小瓶(1型)中。

将苯甲酸钠溶解在纯净水的一部分中，并添加山梨糖醇溶液。添加活性成分并将其分散。将增稠剂(可分散纤维素)分散在甘油中。将两个分散体混合，并用纯净水定容到所需体积。按照需要，通过额外剪切悬浮液来实现进一步的增稠。

*活性成分以粉末形式使用，其中至少90％的颗粒的直径为63μm或更小。

将五分之一的Witepsol H15在最高温度为45℃的带有蒸汽夹套的盘状器皿中熔化。将活性成分通过200μm的筛子进行筛分，并在混合的情况下使用装配有切割头的silverson将其添加到熔融的基料直到得到平滑的分散体。将混合物维持在45℃下，将剩余的Witepsol H15添加到悬浮液并进行搅拌以确保均匀混合。将整个悬浮液传递通过250μm不锈钢筛网，并允许其在连续搅拌的情况下冷却到40℃。在38℃至40℃的温度下，将2.02g的混合物填充到适合的塑料模具中。允许栓剂冷却到室温。

将上述成分直接混合，并通过直接压缩所得混合物来制备子宫托。