一种快速鉴别多潘立酮片真伪的近红外光谱分析方法

技术领域

本发明属于医药检测技术领域，具体涉及一种快速鉴别多潘立酮片真伪的近红外光谱分析方法。

背景技术

多潘立酮(domperidone)，化学名为5-氯-1[1-[3-(2-氧-1-苯并咪唑啉基)丙基]-4-哌啶基]-2-苯并咪唑啉酮，分子式C

近年来，近红外检测技术由于其高效、快速、准确、样品无需处理等分析特点，已广泛应用于食品、农业、医药、烟草、石油、化工、化妆品等行业。近红外光谱分析技术可利用有机化学物质在近红外光谱区的光学特性快速估测样品中的一项或多项化学成分含量，具有快速、方便、准确，可同时分析多组分的优点。由于近红外分析只是取得样品的光谱信号，有时甚至可以在原容器中进行测定，不需要其他试剂，因此，测试过程中不会产生任何污染，属于绿色环保的检测方法。近红外光谱分析技术是一种快捷的质量控制方法，对品牌产品建立近红外鉴别检验模型，可以快速鉴别药品的真伪，满足药品监督快速筛查需要，对有效保护品牌产品、维护企业合法权益及保障人民用药安全具有重要意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种快速鉴别多潘立酮片真伪的近红外光谱分析方法，利用近红外光谱仪建立三种不同类型近红外鉴别检测模型的数据库，将待检测样品的检测模型与数据库比较，快速鉴别多潘立酮片的真伪。

为了解决上述技术问题，本发明采用的一种技术方案是：一种快速鉴别多潘立酮片真伪的近红外光谱分析方法，具体步骤包括：

步骤一、建立数据库：

采集正品多潘立酮片原始光谱和假冒品多潘立酮片原始光谱，将正品多潘立酮片的原始图谱和假冒品多潘立酮片的原始图谱建立数据库，导入数据库的原始图谱包括图谱图像信息、药品成分信息、正品或假冒品信息以及特征峰信息；所述特征峰信息由原始图谱中提取特征谱段的吸光度信息构成；

步骤二、建立三种近红外检测模型：

(1)将正品多潘立酮片和假冒品的原始图谱通过二阶导数法进行处理；

(2)选择特征谱段分别建立一致性检验模型、特征图谱相关系数模型和定性鉴别模型；通过建立一致性检验模型，设定CI限值；通过特征图谱相关系数模型设定相关匹配系数为95％；

步骤三、多潘立酮片的快速检测：

(1)收集多潘立酮片原始平均图谱，导入已建立的一致性检验模型，检测值若超出设定CI限值，则为假冒品；

(2)收集多潘立酮片原始平均图谱，导入已建立的特征图谱相关系数模型，特征图谱相关系数小于95.0％，则为假冒品；

(3)收集多潘立酮片假冒品原始平均图谱，导入定性鉴别模型中，未通过定性鉴别模型，则为假冒品；

步骤四、多潘立酮片假冒品的分类；

(1)多潘立酮片假冒品经步骤三的三种近红外快速检测模型鉴别为假冒品后，提取该假冒品原始图谱中特征谱段的特征峰信息，包括9000～8000cm-1谱段、7500～4500cm-1谱段、7500～5500cm-1谱段、5500～4500cm-1谱段、7000～6000cm-1谱段、10500cm-1处、4500cm-1处、7200cm-1处；

(2)将特征谱段的特征峰信息与数据库中假药的特征峰信息进行比对，区配出数据库与当前检测假冒品特征峰信息一致或相近的假药类别。

进一步地，所述正品多潘立酮片原始光谱的采集方式为：收集正品多潘立酮片，在恒温恒湿的条件下，利用近红外光谱分析仪分别采集近红外漫反射光谱，光谱扫描范围为12000cm-1～4000cm-1,分辨率为8cm-1，扫描次数为32次，每份样品测定6次，样品采用无损检测，隔铝塑测定采集原始的平均图谱。

进一步地，所述假冒品多潘立酮片原始光谱的采集方式为：收集假冒品多潘立酮片，在恒温恒湿的条件下，利用近红外光谱分析仪分别采集近红外漫反射光谱，光谱扫描范围为12000cm-1～4000cm-1,分辨率为8cm-1，扫描次数为32次，每份样品测定3次，样品采用无损检测，隔铝塑测定采集原始的平均图谱。

进一步地，所述一致性检验模型的建立采用以下方法：

(1)将多潘立酮片光谱采用二阶导数法进行预处理；

(2)选用谱段为9000～7500cm-1、6900～5600cm-1和5000～4250cm-1，平滑点为13，建立一致性检验模型，设定CI限值；

(3)另外提供正品多潘立酮片的原始图谱作为验证图谱，验证模型的CI限值的可行性，验证通过后，将用于验证的正品多潘立酮片图谱全部纳入校正集，建立最终的一致性检验模型。

进一步地，所述特征图谱相关系数模型的建立采用以下方法：光谱预处理方法为二阶导数法，选取谱段为12500～4000cm-1，平滑点13，设定相关匹配系数；再选择1批多潘立酮片正品的平均图谱作为验证图谱，导入特征图谱相关系数模型中。

进一步地，所述定性鉴别模型的建立采用以下方法：取正品多潘立酮片的近红外原始图谱分别进行平均，取25张平均图谱作为参考图谱，选择特征谱段为7500～7000cm-1，6500～4000cm-1，光谱预处理方法为二阶导数法和矢量归一法，平滑点为13，建立定性鉴别模型；并另选择1批多潘立酮片正品的平均图谱作为验证图谱，导入定性鉴别模型中。

进一步地，所述鉴别过程中产生的新的假冒品数据库也一并导入数据库中。

本发明的优点具体如下：

本发明一种近红外光谱分析方法快速鉴别多潘立酮片的真伪，该方法具有快速、准确、对样品无破坏的检测特性，建立样品的数据库和近红外快速鉴别模型，不仅便于生产企业在线监控产品质量参数，同时药品监管部门利用“离线”模型开展监督排查，品牌打假。采用本发明的方法对多潘立酮片(吗丁啉)进行鉴别，可实现对大批量样品的快速筛查，大大降低检测成本，减少工作量，且既可快速鉴别药品的真伪，满足药品监督快速筛查需要，对有效保护品牌产品、维护企业合法权益具有重要意义。本发明建立假药信息的数据库，在使用中不断扩充数据库的信息，能够在市场鉴别打假过程中快速确定假药成分，帮助确定制假源头。

附图说明

图1为多潘立酮片正品及假冒品的典型原始图谱，横坐标为扫描范围，单位为cm-1；纵坐标为吸光度。

图2多潘立酮片典型正品原始图谱经二阶导数法预处理后的光谱图，横坐标为扫描范围，单位为cm-1；纵坐标为吸光度。

图3a-3d为4批多潘立酮片假冒品原始图谱经二阶导数法处理后的光谱图，横坐标为扫描范围，单位为cm-1；纵坐标为吸光度。

图4为多潘立酮片的一致性检验模型效果图。

图5多潘立酮片代表性图谱经特征图谱相关系数模型验证结果图。

图6多潘立酮片的一致性检验模型检测结果图。

图7a-7d为4批多潘立酮片假冒品经特征图谱相关系数模型检测结果图。

具体实施方式

为了使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合具体附图对本发明的具体实施方式作进一步的说明。

在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施例，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。

本发明所用仪器：Matrix F傅里叶变换近红外光谱仪(Bruker公司，德国)，配有光纤测定仪，OPUS 5.0光谱分析软件。

实施例：

一种快速鉴别多潘立酮片真伪的近红外光谱分析方法，具体步骤包括：

步骤一、建立数据库：

(1)采集正品多潘立酮片原始光谱及预处理：收集由西安杨森制药有限公司生产的29批正品多潘立酮片，在恒温恒湿的条件下，利用近红外光谱分析仪分别采集近红外漫反射光谱，光谱扫描范围为12000cm

(2)采集假冒品多潘立酮片原始光谱：将多批多潘立酮片假冒品以上述同样方法测定，每份样品测定3次，取平均图谱。以其中4批的假冒品为例，原始NIR图谱见图1中曲线2-5；

(3)将正品多潘立酮片的原始图谱和假冒品多潘立酮片的原始图谱建立数据库，在后续鉴别过程中产生的新的假冒品数据库也一并导入该数据库中；导入数据库的原始图谱包括图谱图像信息、药品成分信息、正品或假冒品信息以及特征峰信息；所述特征峰信息由原始图谱中提取特征谱段的吸光度信息构成。

步骤二、建立三种近红外检测模型：

(1)从图1可见，正品多潘立酮片和假冒品原始图谱有少许差异，因此借助化学计量学方法进行光谱预处理，将正品多潘立酮片和假冒品的原始图谱通过二阶导数法进行处理；正品多潘立酮片通过二阶导数法处理后如图2所示，假冒品的二阶导数法处理图见图3a-3d。

(2)一致性检验模型的建立；

取经二阶导数法预处理后的正品光谱图，利用OPUS软件选用谱段为9000～7500cm

在一致性检验模型中，提供另外4批正品多潘立酮片的原始图谱作为验证图谱，验证模型的CI限值的可行性，验证通过后(检测值为2.4～4.7)，将4批正品多潘立酮片图谱全部纳入校正集，建立最终的一致性检验模型(29批校正集)；多潘立酮片一致性检验模型的模型效果如图4所示。

(3)特征图谱相关系数模型的建立；

取具有代表性的5批正品多潘立酮片共30张近红外原始图谱进行平均，取其平均光谱作为参考光谱，光谱预处理方法为二阶导数法，平滑点13，利用OPUS软件选取谱段为12500～4000cm

相关系数法是指在选定的谱段范围内将待测光谱与参考光谱进行比较，得到相关系数，以此来判断未知样品与参考样品在某种性质上是否相一致，相似度越高，r值越接近1。计算公式如下：r＝Cov(y1(k)，y2(k))/(σy1·σy2)，r为y1(k)和y2(k)的协方差(Cov)除以两张光谱标准偏差(σ)的乘积。在近红外图谱分析上，相关系数r是未知光谱与参比光谱变化趋势的一致性，其取值在-1和+1之间，两张完全相同的光谱相似系数为1，将相似系数以百分比标示，反映两张光谱的相似度。在OPUS工作软件中，通过测定的阈值r与设定的阈值进行比较，当r大于设定的某一阈值，判定为通过，小于设定的某一阈值时，判定为未通过。

选择1批代表性多潘立酮片正品的平均图谱作为验证图谱，导入特征图谱相关系数模型中，验证图谱的匹配系数大于95.0％(匹配系数98.67％)；验证结果见图5。建立相关系数模型时，仅选择一张质量可靠的光谱作为参考光谱(Reference Spectra)即可，并将其他光谱作为检验光谱(Test Spectra)，计算得到的相关系数应在阈值限度内，方可认为模型通过了验证。

(4)定性鉴别模型的建立；

取25批正品多潘立酮片的近红外原始图谱分别进行平均，取25张平均图谱作为参考图谱，选择特征谱段为7500～7000cm

表1近红外定性鉴别模型统计值

选择1批代表性多潘立酮片正品的平均图谱作为验证图谱，导入定性鉴别模型中，验证图谱的定性结果如表1所示。

步骤三、多潘立酮片的快速检测：

(1)收集多潘立酮片原始平均图谱，导入已建立的一致性检验模型，检测值若超出设定CI限值(检测值10.1～75.1)，则为假冒品。如图6所示，为4批假冒品多潘立酮片的一致性检验模型检测结果；

(2)收集多潘立酮片原始平均图谱，导入已建立的特征图谱相关系数模型，特征图谱相关系数小于95.0％，范围为50.72～83.40％，判定为未通过，为假冒品。4批多潘立酮片假冒品经特征图谱相关系数模型检测结果见图7a-7d。

(3)收集4批多潘立酮片假冒品原始平均图谱，导入定性鉴别模型中，4批多潘立酮片假冒品检测定性结果如图表2所示，均为未通过。

表2多潘立酮片假冒品检测定性结果

步骤四、多潘立酮片假冒品的分类；

(1)多潘立酮片假冒品经步骤三的三种近红外快速检测模型鉴别为假冒品后，提取该假冒品原始图谱中特征谱段的特征峰信息，如9000～8000cm

(2)将特征谱段的特征峰信息与数据库中假药的特征峰信息进行比对，区配出数据库与当前检测假冒品特征峰信息一致或相近的假药类别。

以上对本申请所提供的一种快速鉴别多潘立酮片真伪的近红外光谱分析方法进行了详细介绍，本文中应用了具体个例对本申请的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本申请的方法及其核心思想；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本申请的思想，在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处，综上所述，本说明书内容不应理解为对本申请的限制。