一种治疗高尿酸血症的配伍组合及其制备方法

技术领域

本发明涉及中药药物制剂技术领域，具体涉及一种治疗高尿酸血症的配伍组合及其制备方法。

背景技术

高尿酸血症(hyperuricemia，HUA)是由于嘌呤代谢异常导致的以高血尿酸为特征的代谢性疾病。多由于体内黄嘌呤氧化酶的活性升高而导致尿酸生成增加，或尿酸生成正常，但肾脏尿酸相关转运体异常导致尿酸排泄减少等引起尿酸生成增加或排泄减少的因素导致高尿酸血症。痛风(gout)是在高尿酸血症基础上，血尿酸水平升高形成单钠尿酸盐结晶沉积在关节及周围组织和肾中，引起自身炎症反应和关节形态学改变的一种代谢性疾病。多表现为关节及关节周围组织出现红肿热痛症状，或关节内滑膜、滑液受到损害。

随着生活环境和饮食结构的变化，高尿酸血症作为一种影响人类生活质量的疾病之一，近年来在全球均有发病率逐年升高且复发率居高不下的趋势。高尿酸血症的发生与体力活动的多少，饮食中含嘌呤、含蛋白的量及摄入热量的情况，是否有酗酒，以及是否肥胖等密切相关。近年来研究显示，高尿酸血症不但可以通过形成尿酸盐结晶诱发痛风，也常与高血压、糖尿病、脂代谢紊乱、心血管疾病、代谢综合征等多种代谢性疾病相伴发生。所以，及时发现与治疗高尿酸血症，降低尿酸水平，对于提高生活质量具有重要意义。

临床上常用的治疗高尿酸血症、抑制尿酸生成的药物有别嘌呤醇、非布司他，以及促进尿酸排泄的药物苯溴马隆。但是这些西药存在较多的副作用，如临床使用别嘌呤醇可见胃肠反应、荨麻疹、头痛、间质性肾炎、肝坏死等症状，其中还有约2％的病人可引起过敏综合征。因此我们注意到，这些药物虽然疗效显著，但是副作用较大，显然不适合长期服用。

传统中医理论认为，高尿酸血症的病机一般归结为脾肾亏虚，痰浊湿热，瘀阻血脉，以控制饮食，健脾补肾，泄浊排毒，通经活络为主要治则。因此，在无不良反应或较小毒副作用的前提下，开发出具有较好的降尿酸、预防尿酸盐沉积、抗炎等作用的天然中草药组方尤为重要。本组方治疗高尿酸血症的新药，是在中医基础理论的指导下，结合浊毒理论和临床经验而组成的中药方剂。该方由穿山龙、山慈菇及车前子组合而成，方中穿山龙善于通络止痛，能走能守，能补能通，为君药；车前子功善利湿降浊，偏于下行；山慈菇解毒化痰，消肿散结，力佳二者共为臣药。所以，该方是从清热解毒、利湿泄浊、通络止痛等功效的角度入手，可长期服用，且副作用小，药效稳定。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种治疗高尿酸血症的配伍组合及其制备方法，具有降尿酸、抗炎功效，服用后无不良反应，长期服用毒副作用小，不仅能够降低患者的尿酸水平，还能够缓解痛风及慢性痛风性关节炎的临床症状，延缓痛风性疾病的发生。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种治疗高尿酸血症的配伍组合及其制备方法的开发，由下述中药原料制成：穿山龙、山慈菇、车前子；制备工艺：煎煮时间、煎煮次数、水倍量；由下述重量份数的中药原料制成：穿山龙10～15g、山慈菇3～10g、车前子10～15g；制备工艺范围：煎煮时间1～3h、煎煮次数1～3次、水倍量8～12倍。

优选由下述重量份数比的中药原料制成：穿山龙：山慈菇：车前子＝3：2：2；制备工艺：10倍量蒸馏水，煎煮3次，每次3h。

一种治疗高尿酸血症的配伍组合及其制备方法，包括如下步骤：

将中药原料中加入8～12倍份量的蒸馏水，浸泡0.5h，然后煎煮1～3次，每次煎煮1～3小时，滤取药液后合并，浓缩、干燥，称取干膏得量并计算出膏率；所述治疗高尿酸血症的配伍组合及其制备方法的开发还可以为颗粒剂、胶囊剂、片剂、散剂、丸剂、合剂、滴丸剂等。

优选由下述工艺制成：原料中加入10倍份量的蒸馏水，浸泡0.5h，然后煎煮3次，每次煎煮3小时，滤取药液后合并，浓缩、干燥，称取干膏得量并计算出膏率。

将中药原料穿山龙10～15g、山慈菇3～10g、车前子10～15g，加入10倍份量的蒸馏水，浸泡0.5h，然后煎煮3次，每次煎煮3小时，合并煎液，趁热过滤，浓缩至0.5g生药/mL的灌胃体积，对高尿酸血症联合痛风性关节炎的模式动物进行灌胃以行药效学考察。优选由下述重量份数比的中药原料制成：穿山龙：山慈菇：车前子＝3：2：2

其中，本发明选取的临床常用中药(穿山龙、山慈菇、车前子)配伍组成。

穿山龙祛风除湿、舒筋通络、活血止痛，归肝、肾、肺经。国内外学者对穿山龙及其所含的皂苷成分进行了深入的实验研究，发现穿山龙具有降尿酸、抗炎、镇痛等多种药理作用；穿山龙总皂苷能够干预高尿酸血症模型的肠道菌群结构组成特征与差异，发挥改善高尿酸血症的作用；同时研究还发现，穿山龙可以通过抑制炎性因子、调节溶酶体和NLRP3炎性小体等来治疗痛风性关节炎。

山慈菇清热解毒、化痰散结，归肝、脾经，为临床较常用中药。实验研究证实，山慈菇中含有的秋水仙碱等活性成分，能有效的发挥抗炎作用，用于治疗痛风性关节炎。

车前子具有清热利尿，渗湿通淋，明目，祛痰的功效，归肝、肾、小肠经。中药车前子具有抗氧化及提高机体免疫力的功效；相关实验研究证实，车前子醇提物能够降低高尿酸血症模型小鼠的血尿酸，改善高尿酸血症小鼠肾脏功能。另有研究发现，车前子提取物能够降低IL-12水平，延缓痛风性关节炎模式动物的关节炎症反应。

将以上三味中药配伍合用，以祛邪为主，兼顾通络解毒泄浊的基本治法，达到通络降浊、清热解毒的作用。

本发明的有益效果为：一种治疗高尿酸血症的配伍组合及其制备方法，以中药“君臣佐使”相互配伍，长期服用毒副作用小，不仅能够降低患者的尿酸水平，还能够缓解痛风及慢性痛风性关节炎的临床症状，延缓痛风疾病的发生；将穿山龙、山慈菇及车前子科学配伍用以降低尿酸、抗炎镇痛。该组方含有多种活性成分能够抑制尿酸生成，降低尿酸水平；能够促进尿酸排泄，发挥抗炎作用，预防体内尿酸盐沉积，预防及延缓痛风性疾病的发生，从多方面联合作用以降低尿酸水平，减少炎性介质的释放，而且性状较为温和，疗效稳定，副作用小，是一种理想的治疗高尿酸血症的配伍组合，且剂型较灵活，服用方便。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进一步说明。

实施例一

下述临床常用量份数比的中药原料穿山龙：山慈菇：车前子＝3：1：2；首先，通过单因素实验以出膏率为考察指标确定制备工艺范围，在中药原料中加入6～14倍量的蒸馏水，浸泡0.5h，煎煮1～5次，每次煎煮1～5小时，滤取药液后合并，浓缩、干燥，称取干膏得量并计算出膏率。其次，利用正交实验L

表1单因素制备工艺试验结果

通过比较发现，制备工艺以煎煮时间1～3h、煎煮次数1～3次、水倍量8～12倍的出膏率较好，确定其为制备工艺范围。

表2组方制备工艺因素水平表

表3组方制备工艺试验结果

表4组方制备工艺直观分析结果

表5组方制备工艺出膏率得量方差分析结果

试验结果可直观分析得到，以出膏率(％)为观察指标时，B因素对制备工艺过程有显著影响，通过对比考察的各因素影响主次分别为：B>C>D>A，即煎煮次数>煎煮时间>水倍量。综合考虑各因素对提取的贡献率以及能源损耗与工艺耗时等因素，最佳制备工艺组合为A

制备工艺验证准确称取3批临床常用量药材，以10倍量蒸馏水浸泡0.5h，提取3次，每次3h，滤取药液后合并，浓缩、干燥，称取干膏得量并计算出膏率，结果平均出膏率为20.38％，RSD＝0.83％，证实所选工艺稳定、可靠。

实施例二

1.实验动物：

SD雄性大鼠176只

2.实验周期：

22天

3.仪器与试剂：

生化仪，TNF-α试剂盒

4.实验药物：

中药原料中加入10倍份量的蒸馏水，浸泡0.5h，煎煮3次，每次煎煮3小时，合并煎液，趁热过滤，除去滤渣，将滤液浓缩为内含生药0.5g/mL，制成灌胃体积的药物溶液。

5.造模方法：

使用4号注射针头，将3％的尿酸氧化酶抑制剂氧嗪酸钾摇匀后，以1mL/100g行腹腔内注射，2次/d，连续注射1周后用6号注射针在大鼠右侧踝关节后侧沿跟腱内侧以30～40°方向插入至关节腔，将0.2mL尿酸钠溶液(浓度：25mg/mL)注入到关节腔内，以关节囊对侧鼓起为注入标准。饲养过程中给予10％酵母饲料喂养。

6.检测指标：

BUN(尿素氮)，BUA(血尿酸)，TNF-α(肿瘤坏死因子α)

7.星点设计试验：

在上述制备工艺试验的基础上，以穿山龙、山慈菇及车前子用量为考察因素(用A、B、C表示)，以BUN、BUA及TNF-α的总评“归一值”为效应进行2因素、5水平的星点设计(因素水平设计见表)，对检测指标采用Hassan法转化为0～1间的“归一值”，d

表6星点设计因素水平表

8.实验方法：

176只SD大鼠以每组8只分为空白组、造模组，空白组给予正常饲料，造模组给予10％酵母饲料并按上述造模方法进行造模，造模后将大鼠随机分组，即模型组，星点设计1～20给药组，给药组每天给予不同配伍组合的药物溶液，空白组和模型组每天给予等量生理盐水，共给药14天，给药结束后腹主动脉取血，4000r，4℃，15min离心得血清，测量血清中BUN、BUA、TNF-α水平。

表7药效学指标表(n＝8，

注：*表示与空白对照组比较*p<0.05，**p<0.01

表8实验设计与指标测定结果

表9方差分析及回归模型系数显著性检验

采用Design-Expert7.0.0软件对上述表9数据进行统计分析，以总评OD值为指标进行多元非线性回归拟合，通过表9模型失拟项检验可知，二项多项式模型为此软件推荐采用的模型，模型项P＜0.05，得到回归方程:

Y＝0.38+0.031A+0.029B-0.011C-0.021AB+0.021AC-0.024BC+0.086A

9.验证实验：

称取中药原料重量份数比穿山龙：山慈菇：车前子＝3：2：2，按照最佳制备工艺提取3批药物溶液，对模式大鼠灌胃行药效学观察，各指标归一值分别为：0.59、0.63、0.62，拟合预测值为0.62，试验实测值与预测值的偏差为4.8％、-1.6％、0％，说明该方法合理可行。

图1组方配伍组合对总评OD值的响应面图和等高线图。