一种黄柏甘草祛痘植物组合物及其应用

技术领域

本发明涉及化妆品技术领域，具体涉及一种黄柏甘草祛痘植物组合物及其应用。

背景技术

痤疮俗称青春痘，好发于青年男女，是一种常见的慢性炎症性皮肤病。导致痤疮发病的因素较为多样，主要是由于皮脂分泌过多、毛囊皮脂腺堵塞以及细菌感染等。其中，细菌感染为诱导痤疮发生的最重要因素。正常情况下，皮肤表层及皮脂腺毛囊中，都存在包括痤疮丙酸杆菌在内的多种微生物大量存在，这类微生物大量增殖后，产生脂酶分解皮脂形成游离脂肪酸，进而趋化炎症细胞和介质，最终诱导并加重炎症反应。

现代医学主要依赖一些诸如抗生素、激素类药物进行痤疮的治疗，虽然有效果但都存在一些耐药性及不良反应的风险。例如：

中国麻风皮肤病杂志,2019,35(9):515-519上发表了张丽媛等的《我国痤疮患者皮损中痤疮丙酸杆菌对抗生素耐药性的Meta分析》，经研究发现我国痤疮患者皮损分离的痤疮丙酸杆菌对大环内酯类及甲硝唑耐药率高，对四环素类、喹诺酮类抗生素较为敏感，其中以米诺环素敏感性最高。

北方药学，2020,17(8):136-138上发表了谢顺珍等的《盐酸米诺环素联合壬二酸凝胶治疗玫瑰痤疮的疗效观察及安全性评价》经研究发现盐酸米诺环素联合壬二酸凝胶在治疗玫瑰痤疮疗效显著，但仍然具有5.77％的用药不良反应。

许多天然植物均具备良好的抑制痤疮的功效，相比化学药物更具安全性，对皮肤更加温和友好，不仅可以很好发挥功效且耐药性和不良反应均可以得到改善。例如：

黑龙江医学,2019,43(8):937-937上发表了顾艳丽的《复方黄柏液涂剂治疗玫瑰痤疮的临床疗效观察》，经研究发现复方黄柏液涂剂治疗玫瑰痤疮安全而有效，治疗过程中均未出现严重不良反应。

亚太传统医药，2017,13(1):151-152上发表了陆方方的《甘草锌颗粒联合中药痤疮方治疗轻中度痤疮临床疗效观察》，经研究发现针对轻中度痤疮，应用甘草锌颗粒联合中药痤疮方治疗可获得显著疗效，值得临床推广。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术缺陷，提供一种黄柏甘草祛痘植物组合物，可以非常有效地抑制痤疮相关病原菌的增殖，从而达到对痤疮的治疗和防治，具有安全性高、明显抑制痤疮等优异特点，具有良好的市场价值和应用前景。

本发明的另外一个目的是提供一种黄柏甘草祛痘植物组合物的应用。

实现上述目的一种技术方案是：一种黄柏甘草祛痘植物组合物，包括以下重量份的组分：

黄柏提取物 10～90份；

甘草提取物 10～90份；

所述黄柏提取物和甘草提取物的重量份之和为100份。

上述的一种黄柏甘草祛痘植物组合物，其中，所述黄柏提取物的制备工艺如下：称取黄柏干药材，粉碎后加入纯水溶液中，回流提取1～4次后合并所得提取液，依次经减压浓缩和水浴蒸干得黄柏提取物；

每次提取时，所述黄柏干药材和纯水的料液比为1:6～1:20kg/L。

上述的一种黄柏甘草祛痘植物组合物，其中，所述黄柏提取物中小檗碱含量不低于9％，黄柏碱含量不低于3％。

上述的一种黄柏甘草祛痘植物组合物，其中，所述甘草提取物的制备工艺如下：称取甘草干药材，粉碎后加入醇/水混合液中，回流提取1～4次后合并所得提取液，依次经减压浓缩和水浴蒸干得甘草提取物；

每次提取时，所述甘草干药材和醇/水混合液的料液比为1:6～1:20kg/L；

所述醇/水混合液中的醇采用甲醇、乙醇、戊二醇和丁二醇中的一种或者多种混合；

所述醇/水混合液中的醇的体积分数为30％～95％。

上述的一种黄柏甘草祛痘植物组合物，其中，所述甘草提取物中甘草酸的质量百分含量不低于5％。

本发明还提供了一种黄柏甘草祛痘植物组合物的应用，其中，所述黄柏甘草祛痘植物组合物添加于化妆品中，且所述黄柏甘草祛痘植物组合物的质量为所述化妆品总质量的0.3～0.5％。

上述的一种黄柏甘草祛痘植物组合物的应用，其中，所述化妆品为保湿霜或润肤水。

上述的一种黄柏甘草祛痘植物组合物的应用，其中，所述保湿霜包括以下重量份的组份：丙烯酸(酯)类0.01～0.05份，聚二甲基硅氧烷0.8～1.2份，黄原胶0.01～0.03份，透明质酸钠0

所述保湿霜的各组份的重量份之和为100份。

上述的一种黄柏甘草祛痘植物组合物的应用，其中，所述润肤水包括以下重量份的组份：甘油1～5份，甘油聚醚-26 1～5份，羟乙基纤维素0.03～0.08份，透明质酸钠0.01～0.05份，β-葡聚糖0.04～0.2份，马齿苋提取物0.04～0.2份，所述黄柏甘草祛痘植物组合物0.3～0.5份，余量为水；

所述润肤水的各组份的重量份之和为100份。

本发明的黄柏甘草祛痘植物组合物，拟在通过黄柏、甘草的祛痘功效，有效降低化妆品中抗生素、激素类的用量占比从而尽可能的规避潜在安全风险。此外，通过复配以及黄柏提取物和甘草提取物中功效成分含量把控，使得最终的黄柏甘草祛痘植物组合物拥有很好的祛痘效果及潜在应用价值。

相比其他研究工作者的研究报道，本发明的黄柏甘草祛痘植物组合物及其应用主要具备以下几个优势：

(1)首次将黄柏、甘草直接复配组合成植物组合物，并首次测试该植物组合物针对痤疮相关病原菌：痤疮丙酸杆菌、表葡萄球菌、金黄色葡萄球菌的抑制作用，结果显示该植物组合物可以很好的抑制痤疮相关病原菌；

(2)为保证上述黄柏甘草祛痘植物组合物具有很好的抑制痤疮相关病原菌功效，该黄柏甘草祛痘植物组合物中，黄柏提取物的功效成分：小檗碱含量不低于9％，黄柏碱含量不低于3％；甘草提取物的功效成分：甘草酸含量不低于5％；

(3)该黄柏甘草祛痘植物组合物，加入实际配方中参照GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录C4“溶出性抗(抑)菌产品抑菌性能试验方法”进行抑菌性能测定，均是显著有效；

(4)为保证上述黄柏甘草祛痘植物组合物加入实际配方中显著有效，该植物组合物添加于化妆品中的质量为所述化妆品总质量的0.3-0.5％；

(5)本发明的一种黄柏甘草祛痘植物组合物，所用植物药材均是较易获取，除此之外，黄柏具有清热燥湿，泻火除蒸，解毒疗疮的功效，甘草清热解毒、防治肿瘤功效，具有很好的潜在应用价值。

附图说明

图1为黄柏提取物中小檗碱、黄柏碱含量标定时的HPLC图；

图2为甘草提取物中甘草酸含量标定时的HPLC图。

具体实施方式

为了使本技术领域的技术人员能更好地理解本发明的技术方案，下面结合附图对其具体实施方式进行详细地说明：

请参阅图1，对黄柏提取物中小檗碱和黄柏碱含量进行标定的方法如下：

HPLC条件，液相柱：Agilent Zorbax C18(4.6*250mm，5μm)，波长：284nm，柱温：35℃，流动相：0.1％磷酸(流动相A)、乙腈(流动相B)，梯度洗脱程序为：0-15min，流动相A：95％→65％；15-20min，流动相A：65％→95％；20-25min，流动相A：95％。

依据上述HPLC条件，以盐酸小檗碱浓度(C)为横坐标，峰面积(S)为纵坐标，得盐酸小檗碱线性方程：S＝26702C+31.758，R

请参阅图2，对甘草提取物中甘草酸含量进行标定的方法如下：

HPLC条件，液相柱：Agilent Zorbax C18(4.6*250mm，5μm)，波长：237nm，柱温：35℃，流动相：0.05％磷酸(流动相A)、乙腈(流动相B)，梯度洗脱程序为：0-30min，流动相A：80％→60％；30-40min，流动相A：60％→80％；40-45min，流动相A：80％。

依据2020版药典对甘草的相关规定，即甘草酸重量＝甘草酸铵重量/1.0207，经换算即得最终甘草提取物中甘草酸含量。依据上述HPLC条件，以甘草酸铵浓度(C)为横坐标，峰面积(S)为纵坐标，得甘草酸铵线性方程：S＝3477.9C-0.4547，R

抑菌MIC测试

为使得后续可将黄柏提取物、甘草提取物进行合理复配，需对黄柏提取物、甘草提取物以及它们的主要功效单体：小檗碱、黄柏碱、甘草酸，进行抑菌MIC的测定，具体实验方法如下：

选取复苏与痤疮相关病原菌：痤疮丙酸杆菌(ATCC 11827)、金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、表葡萄球菌(ATCC 11228)，通过计数、稀释等操作，配置特定浓度的菌悬液(OD600＝0.25左右)，配置完成后的菌悬液置于4℃贮存备用。

痤疮丙酸杆菌抑菌MIC测定：厌氧条件下，黄柏提取物通过倍半稀释方法配置成特定浓度的黄柏提取液，每一试管中加入3mL黄柏提取液及3mL脑心浸液培养基(BHI)，并加入0.3mL菌悬液，确保每一管中痤疮丙酸杆菌的浓度在1-6×10

金黄色葡萄球菌、表葡萄球菌抑菌MIC测定：常温条件下，黄柏提取物通过倍半稀释方法配置成特定浓度的黄柏提取液，每一试管中加入3mL黄柏提取液及3mL胰酪胨大豆肉汤培养基(TSB)，并加入0.3mL菌悬液，确保每一管中金黄色葡萄球菌、表葡萄球菌的浓度在1-6×10

黄柏提取物、甘草提取物、小檗碱、黄柏碱和甘草酸针对痤疮相关病原菌的抑菌MIC测定，具体实验结果如表1所示：

表1

针对上述抑菌MIC数据，黄柏提取物及其单体、甘草提取物及其单体针对痤疮相关病原菌均具有较为优异的抑菌能力，两者进行复配后抑菌能力可以得到极好的提升，为更好地阐述其复配结果，下面结合具体实施例进行进一步说明。

实施例1：

一种黄柏甘草祛痘植物组合物，包括以下重量份的组份：黄柏提取物10份；甘草提取物90份；各植物提取物重量份之和为100份。

黄柏提取物的制备工艺如下：称取适量黄柏干药材，粉碎后加入纯水溶液中，黄柏干药材与纯水的料液比为1:10kg/L，在100℃条件下回流提取2次，合并两次提取液，依次经减压浓缩和水浴蒸干得黄柏提取物。

甘草提取物的制备工艺如下：称取适量甘草干药材，粉碎后加入体积分数为50％的乙醇/水混合液中，甘草干药材与乙醇/水混合液的料液比为1:20kg/L，在75℃条件下回流提取3次，合并所得提取液，依次经减压浓缩和水浴蒸干得甘草提取物。

实施例2：

一种黄柏甘草祛痘植物组合物，包括以下重量份的组份：黄柏提取物40份；甘草提取物60份；各植物提取物重量份之和为100份。

黄柏提取物的制备工艺如下：称取适量黄柏干药材，粉碎后加入纯水溶液中，黄柏干药材与纯水的料液比为1:20kg/L，在100℃条件下回流提取3次，合并两次提取液，依次经减压浓缩和水浴蒸干得黄柏提取物。

甘草提取物的制备工艺如下：称取适量甘草干药材，粉碎后加入体积分数为70％的乙醇/水混合液中，甘草干药材与乙醇/水混合液的料液比为1:10kg/L，在75℃条件下回流提取2次，合并所得提取液，依次经减压浓缩和水浴蒸干得甘草提取物。

实施例3：

一种黄柏甘草祛痘植物组合物，包括以下重量份的组份：黄柏提取物90份；甘草提取物10份；各植物提取物重量份之和为100份。

黄柏提取物的制备工艺如下：称取适量黄柏干药材，粉碎后加入纯水溶液中，黄柏干药材与纯水的料液比为1:10kg/L，在100℃条件下回流提取2次，合并两次提取液，依次经减压浓缩和水浴蒸干得黄柏提取物。

甘草提取物的制备工艺如下：称取适量甘草干药材，粉碎后加入体积分数为40％的乙醇/水混合液中，甘草干药材与乙醇/水混合液的料液比为1:20kg/L，在75℃条件下回流提取3次，合并所得提取液，依次经减压浓缩和水浴蒸干得甘草提取物。

实施例所得植物组合物抑菌MIC测试：

为验证黄柏提取物、甘草提取物两者复合后针对痤疮相关病原菌的抑菌功效，以上述实施例1～3所得的黄柏甘草祛痘植物组合物进行痤疮相关病原菌的抑菌MIC测定，具体实验结果如表2所示：

表2

根据表2中的测试数据，可以得知，将黄柏提取物、甘草提取物两者者进行复合，针对痤疮相关病原菌的抑菌功效均有不同程度的提升。

应用例：

为更好地验证实施例1～3所得的具备抑制痤疮相关病原菌的黄柏甘草祛痘植物组合物的抑菌效果，我们将其应用于实际的保湿霜及润肤水中，黄柏甘草祛痘植物组合物的质量为化妆品总质量的0.3～0.5％，其中所用原料均为质量份。

将实施例1～3所得的黄柏甘草祛痘植物组合物应用于保湿霜，保湿霜各组分的配方如表3所示：

表3

将实施例1

表4

按照表3的配方制得本发明的黄柏甘草祛痘植物组合物应用在保湿霜中的应用例1～3。

按照表4的配方制得本发明的黄柏甘草祛痘植物组合物应用在润肤水中的应用例4～6。

上述原料的来源如表5所示：

表5

抗菌测试实验：

为验证本发明黄柏甘草祛痘植物组合物在抑制痤疮相关病原菌方面的功效，参照GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录C4“溶出性抗(抑)菌产品抑菌性能试验方法”对本发明的应用例1～6进行抑菌性能测定，具体实验方法如下：

菌悬液配置：取痤疮丙酸杆菌72h培养物用0.03mol/L磷酸盐缓冲液洗脱，制成OD600＝0.25的菌悬液(该菌悬液配置方法中将痤疮丙酸杆菌换成表葡萄球菌及金黄色葡萄球菌后依旧适用)。

分别取应用例1～6所得样品1g，加入上述菌悬液0.1mL均匀涂布混合，计时20min后，准确加入0.03mol/L磷酸盐缓冲液混合均匀，适当稀释后，取其中3个稀释度，分别取1mL置于2个平行平皿中，再加入对应培养基在37℃厌氧条件下培养24h(该方法中培养条件换成25℃有氧培养条件，即对表葡萄球菌及金黄色葡萄球菌适用)，作菌落计数。以上实验重复3次，取平均值，设置空白对照组。

抑菌率计算方法：X＝(A-B)/A×100％，其中X为抑菌率，A为对照样品平均回收菌落数，B为试验样品平均回收菌落数。

功效评价标准：(1)抑菌率≥90％为显著有效；(2)抑菌率50％～90％为有效；(3)抑菌率＜50％为无效。

通过上述实验抗菌测试，测试应用例1～6所得样品的抗菌效果，具体抗菌测试实验结果如表6所示：

表6

从表6所得抗菌测试结果可以看出，应用例1～6所得的含黄柏甘草祛痘植物组合物的化妆品均具有显著有效的抗菌能力，说明本发明黄柏甘草祛痘植物组合物，能明显的抑制痤疮相关病原菌的增值，从而达到对痤疮的治疗和防治，具有良好的市场价值及应用前景。

综上所述，本发明的一种黄柏甘草祛痘植物组合物，采用黄柏提取物、甘草提取物进行合理复配而成，具有显著有效的祛痘能力；所用植物药材均是较易获取，黄柏具有清热燥湿，泻火除蒸，解毒疗疮的功效，甘草清热解毒、防治肿瘤功效，具有很好的潜在应用价值；制得的黄柏甘草祛痘植物组合物具有安全性高、明显抑制痤疮等优异特点，可以非常有效地抑制痤疮相关病原菌的增殖，从而达到对痤疮的治疗和防治；加入实际化妆品配方中参照GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录C4“溶出性抗(抑)菌产品抑菌性能试验方法”进行抑菌性能测定，均是显著有效。

应当指出的是，对于本技术及相关领域内的技术人员而言，以上的实施例仅是用来说明本发明，而并非用作为对本发明的限定，只要在本发明的实质精神范围内，对以上所述实施例的变化、变型都将落在本发明的权利要求书范围内。