一种含活性多肽美容制品冻干海绵及其制备方法

技术领域：

本发明涉及美容制品技术领域，尤其涉及一种含活性多肽美容制品冻干海绵及其制备方法。

背景技术：

冻干海绵是经真空冷冻干燥后形成的类海绵组织固体制品，与常规的冻干海绵相比，其具有更疏松的结构，更高的吸湿保水功能，以更少的溶质即可成型的优势。

多肽是α-氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物，通常由三个或三个以上氨基酸分子脱水缩合而成的化合物都可以成为叫活性多肽，是人体重要的生理调节物，它可全面调节人体生理功能，增强和发挥人体生理活性，它具有重要的生物学功能。

重组人源胶原蛋白，是通过基因工程方式生成的其与人体胶原序列的相似度达到了100％的胶原蛋白。重组人源胶原蛋白对细胞迁移有较明显的促进作用，具有修复角质和维持角质完整的功效，在角质细胞分化、维持皮肤正常功能和皮肤更新方面起促进作用。

目前已有的胶原冻干海绵和壳聚糖冻干海绵，这些产品主要应用于医学创口修复方向，暂无活性多肽美容制品冻干海绵在美容制品中应用的案例，而活性多肽类美容制品中，主要以液体，啫喱、膏霜、冻干海绵形式出现，因剂型限制，为了达到效果，需添加较多的辅助物质(成膜剂，成型剂，防腐剂等)，增加不必要的安全风险，因此将冻干海绵应用在美容制品中是一个迫切待解决的问题。

发明内容：

为达到上述目的，本发明提供了一种含活性多肽美容制品冻干海绵，很好地兼顾修复和抑菌，由于其疏松的海绵结构和吸水性，很好地解决了创口的组织渗液同时提供透气的舒适效果。其特征在于，所述冻干海绵指按配方所配制的液体(母液)经真空冷冻干燥技术处理后所得到的类海绵组织固体制品，所述冻干海绵的液体制备配方包括积活性多肽、透明质酸钠、重组人源胶原蛋白、壳聚糖、蛋白保护剂、pH缓冲剂、水，按照重量百分数计算，活性多肽0.01-1.0％，透明质酸钠0.01-1.0％，重组人源胶原蛋白0.01-1.0％，壳聚糖0.5-3.0％，蛋白保护剂0.1-1.0％、pH缓冲剂0.1-2.0％，水91.0％-99.27％；

进一步的，所述冻干海绵的液体制备配方中的活性多肽为(包括但不限于以下活性多肽类)乙酰基六肽-8、类蛇毒肽、九肽-1、三肽-1、蜂毒肽、蝎毒肽、芋螺肽、肌肽等其中一种或多种，其质量百分数为：0.01-1.0％；

进一步的，所述冻干海绵的液体制备配方中的透明质酸钠为小分子透明质酸钠(约10000Da)，其质量百分数为：0.01-1.0％

进一步的，所述冻干海绵的液体制备配方中重组人源胶原蛋白为重组人源Ⅲ胶原蛋白，其组成质量百分数为：0.01-1.0％；

进一步的，所述冻干海绵的液体制备配方中壳聚糖为羧甲基脱乙酰壳多糖，其组成质量百分数为：0.5-3.0％；

进一步的，所述冻干海绵的液体制备配方中蛋白保护剂为甘露醇，其组成质量百分数为：0.1-1.0％；

进一步的，所述pH缓冲剂包括磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，按照重量百分数，其中磷酸氢二钠：0.05-1.0％、磷酸二氢钠：0.05-1.0％。

上述的含活性多肽美容制品冻干海绵的制备方法，包括如下步骤：

S1、将壳聚糖、蛋白保护剂、pH缓冲剂加入水中，200～500转/min搅拌溶解完全，得到混合液；

S2、将混合液灭菌冷却后，加入重组人源胶原蛋白、活性多肽和透明质酸钠，200～500转/min搅拌溶解完全，得到母液；

S3、将母液分装进西林瓶中，半加塞后进真空冷冻干燥机进行冷冻干燥得到冻干海绵。

进一步的，所述S2步骤中的灭菌具体为：将混合液在121℃下蒸汽灭菌15min。冷却至≤40℃。

进一步的，所述S2步骤中加入重组人源胶原蛋白、活性多肽和透明质酸钠的温度≤40℃。

进一步的，所述的步骤S3，冷冻干燥的步骤依次为预冻、抽真空、升温、一次干燥、解析干燥。

进一步的，冷冻干燥具体为为：设定板层温度-40～-30℃，预冻时间1～3h；预冻结束后，当后箱温度达到-50～-40℃时，开始抽真空，当真空度下降到0.6～0.8mbar后开始升温；一次干燥阶段，先设定板层温度-20～-10℃，5～8h，然后再设定板层温度-5～5℃，持续1～3h；解析干燥阶段，设定板层温度8～15℃，持续时间1～3h，再设定板层温度20～40℃，持续2～5h。

本发明的有益效果为：

本发明提供了一种应用于美容制品全新的形态冻干海绵，与常规的冻干海绵相比，其具有更疏松的结构，更高的吸湿保水功能，以更少的溶质即可成型的优势。

本发明通过合理的配比使用重组人源胶原蛋白、活性多肽和透明质酸钠、羧甲基脱乙酰壳多糖，很好地达到护理皮肤的效果。

本发明采用冻干形式，因其生产过程处于真空和低温，且制成品含水量极低，从而避免出现传统的过多添加物和失去活性的情况，产品稳定性好，降低了产品的不良反应风险。

具体实施方式：

下面对本发明所述的冻干海绵进行说明。

本发明所述的冻干海绵指按配方所配制的液体(母液)经真空冷冻干燥技术处理后所得到的类海绵组织固体制品。

所述冻干海绵的液体(母液)制备配方包括活性多肽、透明质酸钠、重组人源胶原蛋白、壳聚糖、蛋白保护剂、pH缓冲剂、水。按照重量百分数计算，活性多肽0.01-1.0％，透明质酸钠0.01-1.0％，重组人源胶原蛋白0.01-1.0％，壳聚糖0.5-3.0％，蛋白保护剂0.1-1.0％、pH缓冲剂0.1-2.0％，水91.0％-99.27％；

所述的活性多肽为乙酰基六肽-8、类蛇毒肽、九肽-1、三肽-1、蜂毒肽、蝎毒肽、芋螺肽、肌肽等其中一种或多种，其质量百分数为：0.01-1.0％；(该处的百分数是以未进行冻干前的冻干海绵液体(母液)的总量为基础进行计算)

所述的透明质酸钠为小分子透明质酸钠(约10000Da)，其质量百分数为：0.01-1.0％；(该处的百分数是以未进行冻干前的冻干海绵液体(母液)的总量为基础进行计算)

所述重组人源胶原蛋白为重组人源Ⅲ型胶原蛋白，其组成质量百分数为：0.01-1.0％；(该处的百分数是以未进行冻干前的冻干海绵液体(母液)的总量为基础进行计算)

所述壳聚糖为羧甲基脱乙酰壳多糖，其组成质量百分数为：0.5-3.0％；(该处的百分数是以未进行冻干前的冻干海绵液体的总量为基础进行计算)

所述蛋白保护剂为甘露醇，其组成质量百分数为：0.1-1.0％；(该处的百分数是以未进行冻干前的冻干海绵液体的总量为基础进行计算)

所述pH缓冲剂包括磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，按照重量百分数，其中磷酸氢二钠：0.05-1.0％、磷酸二氢钠：0.05-1.0％。(该处的百分数是以未进行冻干前的冻干海绵液体的总量为基础进行计算)

上述含活性多肽美容制品冻干海绵的制备方法，包括如下步骤：

S1、将壳聚糖、蛋白保护剂、pH缓冲剂加入水中，200～500转/min搅拌溶解完全，得到混合液；

S2、将混合液灭菌冷却后，加入重组人源胶原蛋白、活性多肽和透明质酸钠，200～500转/min搅拌溶解完全，得到母液；

本步骤灭菌具体为：将混合液在121℃下，高温蒸汽灭菌15min。灭菌后冷却至温度≤40℃。

需要注意的是，加入重组人源胶原蛋白、活性多肽和透明质酸钠的温度≤40℃。

S3、将母液分装进西林瓶中(本发明采用的是3ml的规格)，装液量为1.1ml，半加塞后进真空冷冻干燥机(型号为：GLZY-20B)进行冷冻干燥得到冻干海绵。

本步骤中，冷冻干燥的步骤为预冻->抽真空->升温->一次干燥->解析干燥。

进一步的，冷冻干燥具体为：使用真空冷冻干燥机(型号为：GLZY-20B)设定板层温度-40～-30℃，预冻时间1～3h；预冻结束后，当后箱温度达到-50～-40℃时，开始抽真空，当真空度下降到0.6～0.8mbar后开始升温；一次干燥阶段，先设定板层温度-20～-10℃，5～8h，然后再设定板层温度-5～5℃，持续1～3h；解析干燥阶段，设定板层温度8～15℃，持续时间1～3h，再设定板层温度20～40℃，持续2～5h。

以下实施列是对本发明的进一步说明，不是对本发明的限制。

实施例1：

所述冻干海绵的液体(母液)制备配方包括：活性多肽0.02％，透明质酸钠0.6％，壳聚糖0.8％，蛋白保护剂0.5％，pH缓冲剂0.5％，水96.58％，重组人源胶原蛋白1％；

所述活性多肽为乙酰基六肽-8；

所述pH缓冲剂中，磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，按照重量百分数，其中磷酸氢二钠：0.25％、磷酸二氢钠：0.25％。

含活性多肽美容制品冻干海绵的制备方法，包括如下步骤：

S1、将壳聚糖、蛋白保护剂、pH缓冲剂加入水中，300转/min搅拌溶解完全，得到混合液；

S2、将混合液灭菌冷却后，加入重组人源胶原蛋白、透明质酸钠和活性多肽，300转/min搅拌溶解完全，得到母液；

S3、将母液分装进西林瓶中，半加塞后进真空冷冻干燥机进行冷冻干燥得到冻干海绵。

所述S2步骤中的灭菌具体为：将混合液在121℃下蒸汽灭菌15min。冷却至5℃。

所述S2步骤中，是在5℃时加入重组人源胶原蛋白、透明质酸钠和活性多肽。

所述的步骤S3，冷冻干燥的步骤依次为预冻、抽真空、升温、一次干燥、解析干燥。

冷冻干燥具体为：设定板层温度-40℃，预冻时间1h；预冻结束后，当后箱温度达到-50℃时，开始抽真空，当真空度下降到0.6mbar后开始升温；一次干燥阶段，先设定板层温度-20℃，持续5h，然后再设定板层温度-5℃，持续1h；解析干燥阶段，设定板层温度8℃，持续时间1h，再设定板层温度20℃，持续2h。

实施例2：

所述冻干海绵的液体(母液)制备配方包括：活性多肽0.03％，透明质酸钠0.2％，壳聚糖0.5％，蛋白保护剂0.7％、pH缓冲剂0.5％，水97.57％，重组人源胶原蛋白0.5％；

所述活性多肽及组成质量百分数为：类蛇毒肽0.01％，乙酰基六肽-80.02％；

所述pH缓冲剂中，磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，按照重量百分数，其中磷酸氢二钠：0.1％、磷酸二氢钠：0.4％。

含活性多肽美容制品冻干海绵的制备方法，包括如下步骤:

S1、将壳聚糖、蛋白保护剂、pH缓冲剂加入水中，300转/min搅拌溶解完全，得到混合液；

S2、将混合液灭菌冷却后，加入重组人源胶原蛋白、透明质酸钠和活性多肽，300转/min搅拌溶解完全，得到母液；

S3、将母液分装进西林瓶中，半加塞后进真空冷冻干燥机进行冷冻干燥得到冻干海绵。

所述S2步骤中的灭菌具体为：将混合液在121℃下蒸汽灭菌15min。冷却至25℃。

所述S2步骤中，是在25℃时加入重组人源胶原蛋白、透明质酸钠和活性多肽。

所述的步骤S3，冷冻干燥的步骤依次为预冻、抽真空、升温、一次干燥、解析干燥。

冷冻干燥具体为为：设定板层温度-30℃，预冻时间1h；预冻结束后，当后箱温度达到-40℃时，开始抽真空，当真空度下降到0.6mbar后开始升温；一次干燥阶段，先设定板层温度-20℃，持续8h，然后再设定板层温度-5℃，持续1h；解析干燥阶段，设定板层温度8℃，持续时间1h，再设定板层温度20℃，持续2h。

实施例3：

所述冻干海绵的液体(母液)制备配方包括：活性多肽0.01％，透明质酸钠0.01％，壳聚糖0.5％，蛋白保护剂0.1％，pH缓冲剂0.1％，水99.27％，重组人源胶原蛋白0.01％；

所述活性多肽及组成质量百分数为：九肽-10.001％，三肽-10.002％，肌肽0.007％；

所述pH缓冲剂中，磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，按照重量百分数，其中磷酸氢二钠：0.04％、磷酸二氢钠：0.06％。

含活性多肽美容制品冻干海绵的制备方法，包括如下步骤：

S1、将壳聚糖、蛋白保护剂、pH缓冲剂加入水中，300转/min搅拌溶解完全，得到混合液；

S2、将混合液灭菌冷却后，加入重组人源胶原蛋白、透明质酸钠和活性多肽，300转/min搅拌溶解完全，得到母液；

S3、将母液分装进西林瓶中，半加塞后进真空冷冻干燥机进行冷冻干燥得到冻干海绵。

所述S2步骤中的灭菌具体为：将混合液在121℃下蒸汽灭菌15min。冷却至35℃。

所述S2步骤中，是在35℃时加入重组人源胶原蛋白、透明质酸钠和活性多肽。

所述的步骤S3，冷冻干燥的步骤依次为预冻、抽真空、升温、一次干燥、解析干燥。

冷冻干燥具体为为：设定板层温度-30℃，预冻时间3h；预冻结束后，当后箱温度达到-40℃时，开始抽真空，当真空度下降到0.8mbar后开始升温；一次干燥阶段，先设定板层温度-10℃，持续8h，然后再设定板层温度5℃，持续3h；解析干燥阶段，设定板层温度15℃，持续时间3h，再设定板层温度40℃，持续5h。

实施例4：

所述冻干海绵的液体(母液)制备配方包括：活性多肽0.4％，透明质酸钠0.03％，壳聚糖1.5％，蛋白保护剂1％，pH缓冲剂2％，水94.67％，重组人源胶原蛋白0.4％；

所述活性多肽及组成质量百分数为：蝎毒肽0.1％，芋螺肽0.2％，肌肽0.1％；

所述pH缓冲剂中，磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，按照重量百分数，其中磷酸氢二钠：1％、磷酸二氢钠：1％。

含活性多肽美容制品冻干海绵的制备方法，包括如下步骤：

S1、将壳聚糖、蛋白保护剂、pH缓冲剂加入水中，300转/min搅拌溶解完全，得到混合液；

S2、将混合液灭菌冷却后，加入重组人源胶原蛋白、透明质酸钠和活性多肽，300转/min搅拌溶解完全，得到母液；

S3、将母液分装进西林瓶中，半加塞后进真空冷冻干燥机进行冷冻干燥得到冻干海绵。

所述S2步骤中的灭菌具体为：将混合液在121℃下蒸汽灭菌15min。冷却至15℃。

所述S2步骤中，是在15℃时加入重组人源胶原蛋白、透明质酸钠和活性多肽。

所述的步骤S3，冷冻干燥的步骤依次为预冻、抽真空、升温、一次干燥、解析干燥。

进一步的，冷冻干燥具体为：使用真空冷冻干燥机(型号为：GLZY-20B)设定板层温度-32℃，预冻时间1.5h；预冻结束后，当后箱温度达到-42℃时，开始抽真空，当真空度下降到0.65mbar后开始升温；一次干燥阶段，先设定板层温度-13℃，持续6h，然后再设定板层温度0℃，持续2h；解析干燥阶段，设定板层温度9℃，持续时间1.2h，再设定板层温度25℃，持续2.5h。

实施例5：

所述冻干海绵的液体(母液)制备配方包括：活性多肽0.5％，透明质酸钠0.02％，壳聚糖1％，蛋白保护剂0.4％，pH缓冲剂0.1％，水97.96％，重组人源胶原蛋白0.02％；

所述活性多肽及组成质量百分数为：乙酰基六肽-80.1％，芋螺肽0.4％。

所述pH缓冲剂中，磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，按照重量百分数，其中磷酸氢二钠：0.05％、磷酸二氢钠：0.05％。

含活性多肽美容制品冻干海绵的制备方法，包括如下步骤：

S1、将壳聚糖、蛋白保护剂、pH缓冲剂加入水中，300转/min搅拌溶解完全，得到混合液；

S2、将混合液灭菌冷却后，加入重组人源胶原蛋白、透明质酸钠和活性多肽，300转/min搅拌溶解完全，得到母液；

S3、将母液分装进西林瓶中，半加塞后进真空冷冻干燥机进行冷冻干燥得到冻干海绵。

所述S2步骤中的灭菌具体为：将混合液在121℃下蒸汽灭菌15min。冷却至40℃。

所述S2步骤中，是在40℃时加入重组人源胶原蛋白、透明质酸钠和活性多肽。

所述的步骤S3，冷冻干燥的步骤依次为预冻、抽真空、升温、一次干燥、解析干燥。

进一步的，冷冻干燥具体为：使用真空冷冻干燥机(型号为：GLZY-20B)设定板层温度-35℃，预冻时间2h；预冻结束后，当后箱温度达到-45℃时，开始抽真空，当真空度下降到0.7mbar后开始升温；一次干燥阶段，先设定板层温度-15℃，持续6h，然后再设定板层温度-3℃，持续1.5h；解析干燥阶段，设定板层温度10℃，持续时间2h，再设定板层温度28℃，持续3h。

实施例6：

所述冻干海绵的液体(母液)制备配方包括：活性多肽0.7％，透明质酸钠0.8％，壳聚糖2％，蛋白保护剂0.6％，pH缓冲剂1.5％，水94.32％，重组人源胶原蛋白0.08％；

所述活性多肽及组成质量百分数为：类蛇毒肽0.4％，芋螺肽0.3％。

所述pH缓冲剂中，磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，按照重量百分数，其中磷酸氢二钠：1％、磷酸二氢钠：0.5％。

含活性多肽美容制品冻干海绵的制备方法，包括如下步骤：

S1、将壳聚糖、蛋白保护剂、pH缓冲剂加入水中，300转/min搅拌溶解完全，得到混合液；

S2、将混合液灭菌冷却后，加入重组人源胶原蛋白、透明质酸钠和活性多肽，300转/min搅拌溶解完全，得到母液；

S3、将母液分装进西林瓶中，半加塞后进真空冷冻干燥机进行冷冻干燥得到冻干海绵。

所述S2步骤中的灭菌具体为：将混合液在121℃下蒸汽灭菌15min。冷却至15℃。

所述S2步骤中，是在15℃时加入重组人源胶原蛋白、透明质酸钠和活性多肽。

所述的步骤S3，冷冻干燥的步骤依次为预冻、抽真空、升温、一次干燥、解析干燥。

进一步的，冷冻干燥具体为：使用真空冷冻干燥机(型号为：GLZY-20B)设定板层温度-36℃，预冻时间2.5h；预冻结束后，当后箱温度达到-43℃时，开始抽真空，当真空度下降到0.7mbar后开始升温；一次干燥阶段，先设定板层温度-17℃，持续7h，然后再设定板层温度4℃，持续2h；解析干燥阶段，设定板层温度12℃，持续时间2.5h，再设定板层温度30℃，持续2.5h。

实施例7：

所述冻干海绵的液体(母液)制备配方包括：活性多肽1％，透明质酸钠1％，壳聚糖3％，蛋白保护剂1％，pH缓冲剂2％，水91％，重组人源胶原蛋白1％；

所述活性多肽及组成质量百分数为：类蛇毒肽0.4％，肌肽0.6％。

所述pH缓冲剂中，磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，按照重量百分数，其中磷酸氢二钠：0.4％、磷酸二氢钠：0.6％。

含活性多肽美容制品冻干海绵的制备方法，包括如下步骤：

S1、将壳聚糖、蛋白保护剂、pH缓冲剂加入水中，300转/min搅拌溶解完全，得到混合液；

S2、将混合液灭菌冷却后，加入重组人源胶原蛋白、透明质酸钠和活性多肽，300转/min搅拌溶解完全，得到母液；

S3、将母液分装进西林瓶中，半加塞后进真空冷冻干燥机进行冷冻干燥得到冻干海绵。

所述S2步骤中的灭菌具体为：将混合液在121℃下蒸汽灭菌15min。冷却至10℃。

所述S2步骤中，是在10℃时加入重组人源胶原蛋白、透明质酸钠和活性多肽。

所述的步骤S3，冷冻干燥的步骤依次为预冻、抽真空、升温、一次干燥、解析干燥。

进一步的，冷冻干燥具体为：使用真空冷冻干燥机(型号为：GLZY-20B)设定板层温度-31℃，预冻时间3h；预冻结束后，当后箱温度达到-50～-40℃时，开始抽真空，当真空度下降到0.75mbar后开始升温；一次干燥阶段，先设定板层温度-10℃，持续7.5h，然后再设定板层温度5℃，持续3h；解析干燥阶段，设定板层温度15℃，持续时间2.5h，再设定板层温度40℃，持续4h。

下面对本发明的实验效果进行说明。

选取180名志愿者(年龄25至55)，随机分成9组。每组20人，大多数人为趋向衰老型肌肤，肌肤的组织功能减退，皮肤干燥粗糙，保湿能力下降，弹性减弱无光泽，皮下组织减少变薄，皮肤松弛下垂,皱纹多,色素增多等。

分别生理盐水1(对照组1)、现有市面上产品2(对照组2)、实施例1～7制备的冻干海绵(冻干海绵使用纯净水溶解均匀后)进行皮肤试验，受试者每天使用两次，连续28天。

试验结果显示含活性多肽美容制品冻干海绵制品能有一定的提高肌肤弹性和紧致度的功效，且根据其不同的配方比例和添加不同的活性多肽种类，可以达到不同的多种护肤美容功效。