一类含有鸟嘌呤衍生物配体的三联吡啶-铂（II）新型配合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及药物化学领域，具体涉及一类含有鸟嘌呤衍生物配体的三联吡啶-铂(II)新型配合物及其制备方法和应用。

背景技术

目前，恶性肿瘤的治疗方法主要有手术、化疗、放疗、分子靶向治疗以及免疫治疗。化疗仍然是目前临床肿瘤治疗的主要手段之一。铂类药物是一类临床最常用的化疗药物之一，已被用广泛应用于肺癌、膀胱癌、卵巢癌、宫颈癌、胃癌和结直肠癌等常见恶性肿瘤的治疗。目前，临床主要使用的铂类药物有第一代顺铂，第二代卡铂和第三代奥沙利铂。尽管铂类已成为临床上治疗肿瘤的一线化疗药物，但是存在严重的耐药性问题，极大地限制了其临床应用。

肿瘤干细胞是一类具有干细胞特性的癌细胞，具有自我更新能力和分化潜能，在肿瘤的发生和发展中起着重要作用，并且与肿瘤的侵袭、转移、耐药性问题密切相关。传统的癌症治疗方案只能杀死增殖潜力有限的常见癌细胞，导致肿瘤肿块缩小，但肿瘤干细胞仍旧存活，并且经过一段时间的增殖和分化后，形成新的肿瘤，导致肿瘤的复发。肿瘤干细胞的存在是导致铂类抗肿瘤药物治疗失败的关键因素之一。

发明内容

发明目的：针对肿瘤干细胞引起的铂类药物耐药性问题，本发明旨在提供一类对恶性肿瘤细胞和肿瘤干细胞抑制增殖活性优异的含有鸟嘌呤NHC衍生物配体的三联吡啶-铂(II)配合物，该类配合物改善了鸟嘌呤溶解度差的问题，并对肿瘤细胞，尤其是目前较难治疗的三阴乳腺癌细胞及其干细胞，显示了较强的抑制活性，而对正常细胞无明显毒性。

本发明还提供含有鸟嘌呤衍生物配体的三联吡啶-铂(II)新型配合物的制备方法及其应用。

技术方案：为了实现上述目的，本发明所述通式(I)的配合物或其药学上可接受的盐：

其中：

R

X为O或S；

A为配合物的阴离子；

b为阴离子的电荷数；

y为2/b的绝对值。

作为优选，所述R

X为O；

A为配合物的阴离子；

b为阴离子的电荷数；

y为2/b的绝对值。

作为优选，所述配合物选自如下任一一种：

/>

/>

其中，所述药学上可接受的盐为上述配合物与盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、碳酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、萘磺酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、马来酸、琥珀酸、富马酸、水杨酸、苯基乙酸、杏仁酸或阿魏酸形成的盐。

本发明所述的配合物或其药学上可接受的盐的制备方法，包括如下步骤：

将化合物II和III分别与AgSO

其化学反应路线如下：

其中，R

本发明所述的配合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用。

进一步地，所述配合物或其药学上可接受的盐在制备对肿瘤细胞和肿瘤干细胞具有双重抑制作用的抗肿瘤药物中的应用。

其中，所述肿瘤为乳腺癌、胰腺癌等恶性肿瘤。

本发明所述抗肿瘤药物组合物，其包含所述的配合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。

其中，所述药物组合物是胶囊剂、散剂、片剂、颗粒剂、丸剂、注射剂、糖浆剂、口服液、吸入剂、软膏剂、栓剂或贴剂。

作为优选，由上述配合物与药学上可接受的载体形成药物组合物。具体地，药物组合物的药用制剂形式如片剂、胶囊、糖浆、悬浮剂，可以加入香料、甜味剂、液体或固体填料或稀释剂等常用药用辅料。

本发明设计了一系列配合物，具有同时抑制肿瘤细胞和肿瘤干细胞的双重活性，克服肿瘤干细胞引起的耐药性问题，提高抗肿瘤疗效。

鸟嘌呤具有重要的生理功能。然而，鸟嘌呤水溶性较差。通过合适的结构改造，可获得溶解度较好的，且具有抗肿瘤、抗病毒等重要的生物活性的鸟嘌呤衍生物。本发明通过将鸟嘌呤以N-杂环卡宾(NHC)的形式引入到具有抗肿瘤活性的三联吡啶-铂片段中，一方面，NHC配体可以跟铂离子中心形成稳定的铂-碳键，提高配合物的稳定性；另一方面，通过改变配体上的取代基可调节所形成的离子型配合物的溶解度，从而提高生物利用度，克服鸟嘌呤水溶性差的问题。

本发明通过将具有生物活性的鸟嘌呤引入到具有抗肿瘤活性的三联吡啶-铂片段，获得了溶解度较好的新型结构配合物。所得配合物不仅对人三阴乳腺癌细胞MD-MBA-231和人胰腺癌细胞SW1990的增殖具有较强的抑制活性明显优于现有铂类药物顺铂，而且对人三阴乳腺癌细胞MD-MBA-231干细胞具有较好得增殖抑制活性。另外，所得配合物对正常细胞大鼠肾细胞NRK的增殖没有明显的抑制活性。目前，具有肿瘤细胞和肿瘤干细胞双重抑制活性，而对正常细胞毒性较弱的化合物报道较少。此外，乳腺癌是目前全球发病率最高的癌症，而中国乳腺癌发病数位居全球首位。三阴性乳腺癌是一类雌激素受体、孕激素受体和人表皮生长因子2受体表达均为阴性的乳腺癌，约占整体乳腺癌的15％，对乳腺癌常规治疗不敏感，是复发率和死亡率最高的乳腺癌亚型，而三阴乳腺癌干细胞的存在也是导致治疗失败的关键因素之一。因此，研发新的可高效治疗三阴乳腺癌药物具有重要的意义。本发明的配合物对三阴乳腺癌细胞及其干细胞均具有较强的抑制活性，有望成为新一代的抗三阴乳腺癌药物。

有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下优点：

(1)本发明公开的含有鸟嘌呤衍生物配体的三联吡啶-铂(II)配合物及其药物组合物同时对肿瘤细胞和肿瘤干细胞具有抑制活性，而对正常细胞毒性不明显，可用于制备治疗各类恶性肿瘤药物，尤其是制备对现有化疗药物耐药的恶性肿瘤的药物。

(2)本发明的铂(II)配合物同时具有抑制肿瘤细胞和肿瘤干细胞的双重抗肿瘤作用的特点，克服肿瘤干细胞导致的耐药性，并可避免多药联用导致的毒副作用，提高抗肿瘤疗效。

(3)本发明的含有鸟嘌呤衍生物配体的三联吡啶-铂(II)配合物结构简单，合成路线设计巧妙，原料便宜易得，合成工艺安全、环保，易于规模化生产。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明。

实施例中所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实施例1

配合物1的制备

在50mL三颈瓶中加入氯(2,2’:6’,2”-三联吡啶)氯化铂(II)(cas60819-00-3

)(80mg,0.16mmol)和CH

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HR-MS(ESI)m/z[M]

Anal.Calcd for C

实施例2

配合物2的制备

7-甲基-9-正丁基鸟嘌呤碘化物的合成

将9-正丁基鸟嘌呤(cas93905-75-0)(1.0g,4.83mmol)，碘甲烷(3.4g,23.95mmol)，N,N-二甲基甲酰胺(7.5mL)加至45mL封管，65℃反应16h。加入氨水调节pH至9，析出黄色固体，收集固体，经甲醇和水重结晶后，得到白色固体。白色固体中加入盐酸乙酸乙酯溶液调节pH至5，干燥得0.9g淡黄色固体产物，收率53.4％。

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配合物2的合成

以氯(2,2’:6’,2”-三联吡啶)氯化铂(II)(80mg,0.16mmol)、7-甲基-9-正丁基鸟嘌呤碘化物(83mg,0.24mmol)、AgCF

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HR-MS(ESI)m/z[M]

实施例3

配合物3的制备

7-甲基-9-正己基鸟嘌呤碘化物的合成

以9-正己基鸟嘌呤(cas108776-70-1)(0.9g,3.83mmol)，碘甲烷(2.8g,19.73mmol)为原料，操作同7-甲基-9-正丁基鸟嘌呤碘化物的合成，得0.9g淡黄色固体产物，收率62.3％。

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配合物3的合成

以氯(2,2’:6’,2”-三联吡啶)氯化铂(II)(80mg,0.16mmol)、7-甲基-9-正己基鸟嘌呤碘化物(90mg,0.24mmol)、AgCF

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HR-MS(ESI)m/z[M]

实施例4

配合物4的制备

7-甲基-9-正辛基鸟嘌呤碘化物的合成

以9-正辛基鸟嘌呤(cas108870-41-3)(1.0g,3.80mmol)，碘甲烷(2.7g,19.02mmol)为原料，操作同7-甲基-9-正丁基鸟嘌呤碘化物的合成，得0.7g淡黄色固体产物，收率45.5％。

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配合物4的合成

以氯(2,2’:6’,2”-三联吡啶)氯化铂(II)(80mg,0.16mmol)、7-甲基-9-正辛基鸟嘌呤碘化物(97mg,0.24mmol)、AgCF

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HR-MS(ESI)m/z[M]

实施例5

配合物5的制备

9-环丙基甲基鸟嘌呤的合成

将2-氨基-6氯-9环丙基嘌呤(cas151370-27-3)(2.0g,8.94mmol)和0.5M盐酸的水溶液(98mL)加至250mL三颈瓶内，回流反应16h。反应液中加入10％氢氧化钠的水溶液调节pH至8，析出白色固体，抽滤收集固体，水洗，干燥得1.7g白色固体产物，收率92.7％。ESI-MS[M+H]

7-甲基-9-环丙基甲基鸟嘌呤碘化物的合成

以9-环丙基甲基鸟嘌呤(1.0g,4.87mmol)，碘甲烷(3.5g,24.66mmol)为原料，操作同7-甲基-9-正丁基鸟嘌呤碘化物的合成，得0.8g淡黄色固体产物，收率47.3％。

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配合物5的合成

以氯(2,2’:6’,2”-三联吡啶)氯化铂(II)(80mg,0.16mmol)、7-甲基-9-环丙基甲基鸟嘌呤碘化物(83mg,0.24mmol)、AgCF

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实施例6

配合物6的制备

7-甲基-9-苄基鸟嘌呤碘化物的合成

以9-苄基鸟嘌呤(cas14937-72-5)(1.0g,4.15mmol)，碘甲烷(2.9g,20.43mmol)为原料，操作同7-甲基-9-正丁基鸟嘌呤碘化物的合成，得0.8g淡黄色固体产物，收率50.3％。

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配合物6的合成

以氯(2,2’:6’,2”-三联吡啶)氯化铂(II)(80mg,0.16mmol)、7-甲基-9-苄基鸟嘌呤碘化物(92mg,0.24mmol)、AgCF

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HR-MS(ESI)m/z[M]

实施例7

配合物7的制备

7-甲基-9-(4-甲基苄基)鸟嘌呤碘化物的合成

以9-(4-甲基苄基)鸟嘌呤(cas101134-15-0)(1.0g,3.92mmol)，碘甲烷(2.8g,19.72mmol)为原料，操作同7-甲基-9-正丁基鸟嘌呤碘化物的合成，得0.9g淡黄色固体产物，收率57.8％。

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配合物7的合成

以氯(2,2’:6’,2”-三联吡啶)氯化铂(II)(80mg,0.16mmol)、7-甲基-9-(4-甲基苄基)鸟嘌呤碘化物(95mg,0.24mmol)、AgCF

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实施例8

药理学实验

本试验采用CCK8法对本发明的配合物以及临床常用铂类抗肿瘤药物进行了体外肿瘤细胞增殖抑制活性测试。

(1)实验方法

将细胞以4×10

(2)试验结果

对本发明配合物对人三阴乳腺癌细胞MDA-MB-231、人三阴乳腺癌干细胞MDA-MB-231CSCs、人胰腺癌细胞SW1990和正常大鼠肾细胞NRK的抗增殖活性数据，结果见表1，并以顺铂为阳性对照药1；

以化合物14

表1配合物对MDA-MB-231、MDA-MB-231CSCs、SW1990和NRK的抗增殖活性数据，作用时间为96小时

/>

由表1可见，配合物对恶性肿瘤细胞具有选择性抑制活性：配合物对人三阴乳腺癌细胞MDA-MB-231、人乳腺癌干细胞MDA-MB-231和人胰腺癌细胞SW1990的增殖抑制活性优于阳性药顺铂；配合物对正常大鼠肾细胞NRK没有明显的增殖抑制活性，其抑制活性明显弱于阳性药顺铂，同时对肿瘤干细胞的抑制活性本发明的配合物明显优于阳性对照药2(化合物14)。上述说明本发明的配合物并对肿瘤细胞，尤其是目前较难治疗的三阴乳腺癌细胞及其干细胞，显示了较强的抑制活性，同时对正常细胞无明显毒性，具有非常好的选择性。