抗微生物铵-咪唑鎓低聚物及其抗真菌组合物

相关申请的交叉引用

本申请要求于2018年9月20日提交的新加坡申请号10201808210R的优先权，其公开内容通过引用并入本文。

技术领域

本发明涉及基于咪唑鎓和二铵的低聚物，特别是可以表现出抗微生物活性的低聚物。此类低聚物可与用于治疗和非治疗目的的其他已知抗微生物化合物一起用于抗微生物组合物中。

背景技术

抗微生物耐药性(antimicrobial resistance,AMR)是当今社会面临的主要全球医疗保健威胁之一。它的发展可能归因于在农业和医学等各个领域中抗生素的过度使用。抗生素耐药性的出现促使人们寻求具有新作用方式的新型抗微生物化合物。

具有抗真菌活性的化合物的开发特别受关注，因为市场上可用的有效抗真菌药物的数量仍然相当有限。迄今为止，唑类(azoles)仍然是抗真菌化合物的主要类别之一。像许多其他抗微生物药物一样，其广泛的过度使用已经导致耐药性的发作。

抗微生物肽(AMP)已经作为一类新型治疗性抗微生物药物出现，由于其针对各种微生物(包括细菌、真菌和病毒)的强效和广谱活性，它们显示出了良好的潜力。AMP的净正电荷使得AMP能够通过其他作用模式诱导细胞死亡。然而，其高昂的制造成本、可能的蛋白水解降解和体内毒性严重限制了AMP作为抗生素的开发。

最近的研究已经发现，咪唑鎓(imidazolium)和二铵合成聚合物是AMP的潜在模拟物。这些合成聚合物中的几种已经显示出有希望的体内和体外活性。尽管如此，仍然存在关于这些合成聚合物的可能临床应用的关注，特别是关于与这些高分子量化合物相关的异质性和毒性的关注。

考虑到新的抗真菌化合物的开发有限，研究者和临床医生等现在正在寻找联合疗法，作为治疗由白色念珠菌(Candida albicans)等真菌病原体引起的念珠菌病等真菌感染的替代方案。唑类抗真菌化合物最通常与抗生素和其他抗真菌剂组合使用。然而，大多数体外研究已经表现出了拮抗作用和无差异的混合结果。这些问题强调了对新型抗真菌剂或改进的治疗策略的需要。

本发明的一个目的是提供新型的可以表现出抗真菌活性的基于咪唑鎓或二铵的低聚物或聚合物。本发明的进一步目的是提供可用于治疗真菌感染的替代治疗策略。特别地，期望提供不引起耐药性的治疗替代方案。

发明内容

在本公开的一个方面，提供了一种组合物，其包括：(a)式(I)的低聚物

其中R

R

其中X在每个实例中相同或不同，并且为卤素；

L在每个实例中独立地选自由以下组成的组：任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的芳烯基，任选取代的芳炔基、任选取代的烷芳基、任选取代的烯芳基和任选取代的炔芳基；

E由2至20个碳原子组成并且独立地选自由以下组成的组：任选取代的烷基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基和任选取代的烷芳基；

n为1至10的整数；以及

(b)包含至少一个三唑基团的抗真菌剂。

有利地，已经发现本文公开的组合物对于治疗微生物感染和抑制微生物增长特别有效。具体地，已经观察到低聚物组分和抗真菌组分组合的抗微生物效应大于单独的每种组分的相加效应。这可能归因于低聚物的杀真菌性能和三唑抗真菌剂的抑真菌性能的加和效应。

在另一方面，本公开涉及本文定义的组合物的药物用途和非药物用途。在一个方面，本公开提供了本文所述的组合物在制备用于治疗微生物感染的药物中的用途。

令人惊奇地，当用作抗微生物药物时，本发明的组合物能够防止耐药性的发展。特别地，令人惊讶地发现，即使在微生物的整个生命周期中广泛使用后，可用于抗微生物感染的治疗的有效治疗浓度也不会降低。发现该组合物即使在微生物的传代数增加时也是有效的。

附图说明

图1是用浓度为62μg/ml的所选择的低聚物处理后存活的白色念珠菌菌落数的曲线图。在酵母菌霉菌肉汤(Yeast Mold broth)中生长的白色念珠菌用作对照，而用氟康唑(flu)治疗的白色念珠菌用于比较。数据表示为一式三份的平均值±标准偏差。

图2a是用不同浓度的诺氟沙星、IDPBX8以及诺氟沙星和IDPBX8的混合物(重量比为1:1)孵育24小时后金黄色葡萄球菌的百分比增长的曲线图。

图2b是用不同浓度的氟康唑、IDPBX8以及氟康唑和IDPBX8的混合物(重量比为1:1)孵育24小时后白色念珠菌的百分比增长的曲线图。基于通过酶标仪测量的细胞培养物在600nm的吸光度计算百分比增长。

图2c是用不同浓度的氟康唑、IDPBX8以及氟康唑和IDPBX8的混合物(重量比为1:1)孵育24小时后白色念珠菌的菌落形成单位数目的曲线图。如图所示，0小时时白色念珠菌的浓度为3.8×10

图3a是在单独用1μg/ml的IDPBX8、或0.5μg/ml的氟康唑、或1μg/ml IDPBX8和0.5μg/ml氟康唑的混合物(组合-1)孵育之后在不同时间间隔的白色念珠菌的菌落形成单位(CFU)的数目的曲线图。数据表示为一式三份的平均值±标准偏差。

图3b是在用2μg/ml的IDPBX8低聚物、或0.25μg/ml的氟康唑、或2μg/ml的IDPBX8低聚物和0.25μg/ml的氟康唑的混合物(组合-2)孵育之后在不同时间间隔的白色念珠菌的菌落形成单位的数目的曲线图。数据表示为一式三份的平均值±标准偏差。

图4是归一化MIC值针对白色念珠菌培养物的传代数的曲线图。这说明在1/4MIC水平的IDPBX8、氟康唑或氟康唑-IDPBX8组合存在下生长的白色念珠菌培养物获得了耐药性。组合-1是指1μg/ml的IDPBX8低聚物和0.5μg/ml氟康唑的混合物，而组合-2是指2μg/ml的IDPBX8低聚物和0.25μg/ml氟康唑的混合物。

定义

本文所用的以下词语和术语应具有所指示的含义：

在下面多个取代基的定义中，陈述“该基团可以是端基或桥连基(the group maybe a terminal group or a bridging group)”。这旨在表示该术语的使用旨在涵盖其中该基团是分子的两个其他部分之间的连接基团(linker)以及其是端基部分的情况。使用术语烷基作为实例，一些出版物将使用术语“亚烷基(alkylene)”作为桥连基，因此在这些其他出版物中，术语“烷基(alkyl)”(端基)和“亚烷基”(桥连基)之间存在区别。在本申请中，没有进行这样的区分，并且大多数基团可以是桥连基或端基基。

除非另外指明，术语“烷基”作为基团或基团的一部分是指具有但不限于1至16个碳原子，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16个碳原子的直链或支链脂肪族烃基，优选C

术语“芳基(aryl)”作为广义解释的基团或基团的一部分表示：(i)任选取代的单环或稠合多环、芳族碳环(具有环原子均为碳的环结构)，优选每个环具有5至12个原子，其中任选取代可以是二取代或三取代；芳基的实例包括苯基、萘基等；(ii)任选取代的部分饱和的双环芳族碳环部分，其中苯基和C

如本文所用，术语“芳烃(arene)”是指在形成环的碳原子之间具有σ键和离域π电子的烃。芳烃还可以指芳香烃。芳烃可以是单环或多环的。芳烃可以具有但不限于至少6个碳原子、6至20个碳原子或6至12个碳原子。芳烃的实例包括但不限于苯、甲苯、乙苯、二甲苯和二乙苯。芳烃可任选被一个或多个如下文术语“任选取代的”所定义的基团取代。

术语“烷氧基(alkyloxy或alkoxy)”是指广义解释的烷基-O-基团，其中烷基如本文所定义。该烷氧基是C

术语“烯基(alkenyl)”作为基团或基团的一部分表示含有至少一个碳-碳双键并且可以是直链或支链的脂肪族烃基，其在正链中具有但不限于至少2个碳原子、2至20个碳原子、2至10个碳原子、2至6个碳原子或落入这些范围内的任何数目的碳原子。该基团可在正链中包含多个双键，并且在适用的情况下，围绕每个双键的取向独立地为E、Z、顺式或反式。示例性的烯基基团包括但不限于乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基、庚烯基、辛烯基和壬烯基。该基团可以是端基或桥连基。烯基可任选被一个或多个如下文术语“任选取代的”所定义的基团取代。

如本文所用，术语“炔基(alkynyl)”在其含义内包括具有但不限于至少2个碳原子或2至20个碳原子并且在碳链的任何位置具有至少一个三键的不饱和脂肪族烃基。炔基的实例包括但不限于乙炔基、1-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、1-甲基-2-丁炔基、3-甲基-1-丁炔基、1-戊炔基、1-己炔基、甲基戊炔基、1-庚炔基、2-庚炔基、1-辛炔基、2-辛炔基、1-壬基、1-癸炔基等。该基团可以是端基或桥连基。炔基可任选被一个或多个如下文术语“任选取代的”所定义的基团取代。

如本文所用，术语“卤代(halo)”或“卤素(halogen)”是指氟、氯、溴和碘，而本文所用的术语“卤化物(halide)”是指氟化物、氯化物、溴化物和碘化物。

如本文所用，术语“醇(alcohol)”是指其中羟基官能团(-OH)与碳结合的化合物。该醇可具有但不限于至少1个碳原子、1至20个碳原子、1至12个碳原子、1至6个碳原子、2至6个碳原子或2至4个碳原子。醇的实例包括但不限于甲醇、乙醇、丙-1-醇、丙-2-醇、2-甲基丙-1-醇、2-甲基丙-2-醇、丁-1-醇和丁-2-醇。该醇可任选被一个或多个如下文术语“任选取代的”所定义的基团取代。

如本公开的上下文中所用，术语“任选取代的”意指该术语所提及的基团可以是未取代的，或可被一个或多个独立地选自烷基、烯基、炔基、硫代烷基、环烷基、环烷基烷基、环烯基、环烷基烯基、杂环烷基、环烷基杂烷基、环烷氧基、环烯氧基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、炔氧基、杂烷基、杂烷氧基、烷氧基、烯氧基、卤代烷氧基、卤代烯氧基、烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基芳基、烷氧基环烷基、烷氧基杂芳基、烷氧基杂环烷基、烯酰基(alkenoyl)、炔酰基、杂环、杂环烯基、杂环烷基、杂环烷基烷基、杂环烷基烯基、杂环烷基杂烷基、杂环烷氧基、杂环烯氧基(heterocycloalkenyloxy)、杂环氧基(heterocycloxy)、卤代杂环烷基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基、杂芳烯基、杂芳基杂烷基、杂芳氧基、芳烯基、芳烷基、烷芳基、烷基杂芳基、芳氧基的基团所取代。

术语“电荷密度(charge density)”可指离子化合物的电荷与其体积的比率。如本文所用，该术语可指低聚物或聚合物的离子电荷与其长度的比率。

如本文所用，术语“两亲性(amphiphilic)”是指具有包含离散的亲水性和疏水性区域的结构或构象的化合物。这些亲水和疏水区域可以以交替或顺序的方式排列。

如本文所用，术语“微生物(microorganism)”广义上指具有细胞膜的真核和原核生物，包括但不限于细菌、酵母、真菌、质粒、藻类和原生动物。

如本文所用，术语“最小抑制浓度(MIC)”是指未观察到有意义的微生物增长的抗微生物化合物或组合物的浓度。可通过细胞计数方法、显微技术，通过测量从培养基中分离的细胞的重量或通过测量培养基的浊度来检测微生物的增长。可使用浊度计或通过光谱手段，例如通过测定特定波长下培养基的光密度来测量培养基的浊度。

如本文所用，术语“MIC

如本文所用，术语“分级抑菌浓度(FIC)”是指旨在估计意图组合使用的两种或更多种化合物之间的相互作用的指数。可通过以当用作唯一治疗剂时的化合物的MIC归一化组合使用时每种化合物的MIC来确定该指数。两种治疗剂的组合的FIC可根据下式确定。可表现协同作用的组合可具有小于0.5的FIC指数，而导致无差异的组合可具有大于0.5的FIC指数。

如本文所用，术语“拮抗剂(antagonist)”是指干扰或阻断另一种治疗性化合物的活性的化合物。表现出拮抗剂活性的化合物能够降低其可能一起施用的其他治疗化合物的有效性。

如本文所用，术语“协同作用(synergistic)”是指两种或更多种化合物的相互作用或协作作用，它们共同产生的组合作用大于其单独作用之和。表现出协同作用的组合物能够比组合物的单个组分更有效地减少微生物的种群。更具体地，表现出协同作用的组合物可以表现出比它们的单个组分更低的MIC或MIC

如本文所用，术语“单体(monomer)”是指可与其他相同类型或不同类型的分子发生化学反应以形成较大分子的化合物。

如本文所用，术语“低聚物(oligomer)”是指包含至少单体的重复单元的化合物。低聚物可以含有单体的少于20个重复单元。低聚物的实例包括分别含有2、3和4个单元的一种或多种单体的二聚体、三聚体和四聚体。

如本文所用，术语“聚合物(polymer)”是指包含单体的多个重复单元的化合物。聚合物可以长于低聚物并且可以包含无限数目的单体的重复单元。聚合物具有长链重复单元并且具有高分子量。

如本文所用，术语“溶血(hemolysis)”是指红细胞破裂(裂解)并将其内含物(细胞质)释放到周围流体(如血浆)中。溶血可发生在体内或体外。

如本文所用，术语“离体(ex vivo)”是指在自然环境的改变最小的情况下在外部环境中在来自生物体的组织内或组织上进行的实验或测量。

如本文所用，术语“抑真菌作用(fungistatic)”是指化合物或组合物抑制和停止真菌生长的能力。本质上具有抑真菌作用的化合物可能仅能抑制或减慢真菌的细胞分裂而不会杀死真菌。因此，与未用任何化合物处理过的培养物相比，用抑真菌化合物处理过的真菌可能以降低的速度生长。

本文所用的术语“杀真菌作用(fungicidal)”是指化合物或组合物诱导真菌细胞或其孢子死亡的能力。杀真菌化合物可能能够抑制细胞过程或攻击细胞中的特定细胞器以诱导真菌死亡。因此，杀真菌化合物可能能够减少活真菌菌落的种群。

应当理解，包括在式(I)化合物家族中的是异构体形式，包括“E”或“Z”构型异构体或E和Z异构体的混合物中的非对映异构体、对映异构体、互变异构体和几何异构体。还应当理解，一些异构体形式如非对映异构体、对映异构体和几何异构体可以由本领域技术人员通过物理和/或化学方法分离。

所公开的实施方案中的一些化合物可以作为单一立体异构体、外消旋体和/或对映异构体和/或非对映异构体的混合物存在。所有这样的单一立体异构体、外消旋体及其混合物都在所描述和要求保护的主题范围内。

如本文所用，术语“治疗有效量(therapeutically effective amount)”或“有效量(effective amount)”是指足以实现有益的或期望的临床效果的量。有效量可以一次或多次施用。有效量通常足以减轻、改善、稳定、逆转、减缓或延迟患病状态的进展。

词语“基本上(substantially)”不排除“完全(completely)”，例如“基本上不含(substantially free)”Y的组合物可以完全不含Y。必要时，词语“基本上”可以从本发明的定义中省略。

除非另外指明，否则术语“包括(comprising、comprise)”及其语法变体旨在表示“开放式”或“包括性”语言，使得它们包括所列举的要素，但也允许包括另外的未列举的要素。

如本文所用，在制剂组分浓度的上下文中，术语“约”通常是指所述值的+/-5％，更通常是指所述值的+/-4％，更通常是指所述值的+/-3％，更通常是指所述值的+/-2％，甚至更通常是指所述值的+/-1％，甚至更通常是指所述值的+/-0.5％。。

贯穿本公开，某些实施方案可以以范围形式公开。应当理解，范围形式的描述仅仅是为了方便和简洁，而不应被解释为对所公开的范围的僵化限制。因此，应该认为范围的描述已经具体公开了所有可能的子范围以及该范围内的单个数值。例如，如1至6的范围的描述应被认为具有具体公开的子范围，如1至3、1至4、1至5、2至4、2至6、3至6等，以及该范围内的单个数字，例如1、2、3、4、5、6。无论范围的广度如何，这都适用。

在此还可以广泛地和一般性地描述某些实施方案。落入一般公开范围内的每个较窄的种类和亚类分组也形成本公开的一部分。这包括实施方案的一般性描述，其附带条件或否定限制从该类属中除去任何主题，而不管所删除的材料是否在本文中具体叙述。

具体实施方式

在本公开的一个方面，提供了包含式(I)的低聚物以及具有至少一个三唑基团的抗真菌剂的组合物。本文公开的组合物可用于治疗微生物感染。该微生物感染可以是细菌感染或真菌感染。

式(I)的低聚物的非限制性实例描述如下。提供了式(I)的低聚物的结构：

式(I)的低聚物可包含至少一个带正电荷的单元，或至少两个带正电荷的单元，R

有利地，包含2至6个带电单元的低聚物表现出更好的抗微生物活性。较高数量的带电单元可以促进低聚物与微生物细胞膜带电表面的相互作用。这种改善的相互作用可导致低聚物对细菌和真菌的抗微生物活性提高。

带正电荷的R

R

在多个实施方案中，R

R

R

在一些实施方案中，式(I)的低聚物包含至少一个为[DABCO]

有利地，与包含长直链二铵基团的低聚物相比，其中至少一个R

带正电荷的R

式(I)的低聚物可包含连接基L，其键合至带正电荷的单元R

连接基L在每个实例中可以是任选取代的烯基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基或任选取代的烷芳基连接基，其包含2至20个碳原子、或2至18个碳原子、或2至16个碳原子、或2至14个碳原子、或2至12个碳原子、或2至10个碳原子、或4至10个碳原子、或优选6至10个碳原子。在一些实施方案中，L可包含6个碳原子。在其他实施方案中，L包含8个碳原子。

连接基L在每个实例中可以是包含2个烷基取代基的芳基或包含2个烷基取代基的烯基。L可以优选独立地选自由对二甲苯基、邻二甲苯基和反式-2-丁烯基组成的组。在一些实施方案中，L在每个实例中可以是对二甲苯或邻二甲苯。在其他实施方案中，L可以是反式-2-丁烯基。对二甲苯、邻二甲苯和反式-2-丁烯基连接基L的结构如下所示：

式(I)的低聚物可以被端基E封端。端基E可以由2至20个碳原子、或2至18个碳原子、或2至16个碳原子、或2至14个碳原子、或2至12个碳原子、或4至12个碳原子、或6至12个碳原子、优选6至10个碳原子组成。在优选的实施方案中，E包含8个碳原子。

端基E可以是任选取代的脂肪族或芳族基团。E可独立地选自任选取代的烷基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基和任选取代的烷芳基。E可以是任选取代的烷基或任选取代的芳基，优选任选取代的烷基。

在多个实施方案中，E端基基团可以是任选取代的脂肪族基团，优选脂肪族烷基基团。

有利地，与包含末端芳族基团的低聚物相比，包含脂肪族E端基基团的低聚物可具有改善的抗微生物活性。不受理论的约束，认为脂肪族E端基基团能够实现与细胞壁和/或细胞膜的疏水区域更好的相互作用，从而允许低聚物进入微生物细胞。因此，这可以允许低聚物在细胞中更好地渗透和积累。

脂肪族烷基可以是直链或支链烷基。在一些实施方案中，烷基可以是包含8个碳原子的脂肪族烷基基团。在优选的实施方案中，E是正辛基基团。

式(I)的低聚物可包含n个R

式(I)的低聚物可选自由以下低聚物组成的组：

式(I)的低聚物可以表现出抗微生物活性。式(I)的低聚物的抗微生物活性可包括抗细菌活性和抗真菌活性。式(I)的低聚物可以表现出针对广谱细菌的抗细菌活性。这些细菌可包括葡萄球菌(Staphylococcus)、假单胞菌(Pseudomonas)和埃希氏杆菌(Escherichia)科中的细菌。式(I)的低聚物可作用的细菌感染的非限制性实例可包括银白色葡萄球菌(Staphylococcus argenteus)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、施韦策葡萄球菌(Staphylococcus schweitzeri)、猿猴葡萄球菌(Staphylococcus simiae)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、路邓葡萄球菌(Staphylococcuslugdunensis)、Staphylococcus scheleiferi、山羊葡萄球菌(Staphylococcus caprae)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、栖稻黄色单胞菌(Pseudomonasoryzihabitans)、变形假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)、赫氏埃希氏菌(Escherichia hermannii)和大肠杆菌(Escherichia coli)。在多个实施方案中，式(I)的低聚物可表现出针对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌的抗细菌活性。

式(I)的低聚物针对细菌的最小抑制浓度(MIC)的范围可为约1μg/ml至约1000μg/ml、或约1μg/ml至约800μg/ml、或约1μg/ml至约600μg/ml、或约1μg/ml至约500μg/ml、或约1μg/ml至约400μg/ml、或约1μg/ml至约300μg/ml、或约1μg/ml至约200μg/ml、或约1μg/ml至约100μg/ml、或约1μg/ml至约80μg/ml、或约1μg/ml至约60μg/ml、或约1μg/ml至约50μg/ml、或约1μg/ml至约40μg/ml、或约1μg/ml至约30μg/ml、或约1μg/ml至约20μg/ml、或约1μg/ml至约10μg/ml内。在多个实施方案中，式(I)的低聚物可以以约2μg/ml至8μg/ml的浓度抑制细菌的生长。

令人惊奇地，其中n可以是1或2的短链低聚物可以在低至2μg/ml至10μg/ml的浓度显示出抗微生物活性。在多个实施方案中，式(I)的低聚物(其中n＝1，其可以包含正辛基E端基)在低至约2μg/ml至4μg/ml的浓度表现出针对大肠杆菌的抗细菌活性。

式(I)的低聚物还可以表现出针对各种真菌的抗真菌活性。这些真菌可以包括来自曲霉属(Aspergillus)、隐球菌属(Cryptococcus)和念珠菌属(Candida)家族的真菌和酵母。在多个实施方案中，式(I)的低聚物可表现出针对来自念珠菌属(Candida)家族的真菌的活性。来自念珠菌属家族的真菌的非限制性实例可包括白色念珠菌(Candidaalbicans)、热带念珠菌(Candida tropicalis)、光滑念珠菌(Candida glabrata)、维斯念珠菌(Candida viswanathii)、假热带念珠菌(Candida pseudotropicalis)、季也蒙念珠菌(Candida guillierimondii)、克鲁斯念珠菌(Candida krusei)、葡萄牙念珠菌(Candidalusitaniae)、近平滑念珠菌(Candida parapsilosis)和星状念珠菌(Candidastellatoidea)。在多个实施方案中，式(I)的低聚物可表现出针对白色念珠菌的抗真菌活性。

有利地，式(I)的低聚物可以在低至8μg/ml的浓度表现出针对白色念珠菌的抗真菌活性。令人惊奇地，长链低聚物(其中n可以是3至5，其包含柔性的反式丁烯基连接基)可以在低至8μg/ml的浓度表现出针对白色念珠菌的抗真菌活性。

更有利地，本文所述的低聚物表现出针对哺乳动物细胞的低毒性。溶血研究表明，可导致10％溶血的低聚物浓度大于2mg/ml，这意味着即使在高浓度下，低聚物对哺乳动物细胞也是无毒的。这对于用于治疗目的的低聚物是特别理想的。

式(I)的低聚物可以具有可以促进低聚物的抗微生物活性的两亲性结构和/或构象。在优选的实施方案中，低聚物是杀真菌剂(fungicidal agent)。有利地，低聚物能够诱导真菌细胞死亡并减少真菌细胞种群。

式(I)的低聚物可以与已知的抗真菌剂组合使用。抗真菌剂可以是抑制真菌的抗真菌剂。抗真菌剂可包含N-杂环唑基团，优选三唑基团。抗真菌剂可包含至少一个三唑基团、或优选1至5个三唑基团、或1至4个三唑基团、或1至3个三唑基团，优选2个三唑基团。

三唑抗真菌剂可以是氟康唑、伊曲康唑、酮康唑、阿巴康唑、雷夫康唑、泊沙康唑或伏立康唑中的一种或其组合。在多个实施方案中，抗真菌剂可以是氟康唑、伊曲康唑或伏立康唑或其组合。在优选的实施方案中，组合物的抗真菌剂可以是氟康唑。氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑的结构如下：

本文所述的包含式(I)的低聚物和含有至少一个三唑环的抗真菌剂的组合物可用于治疗微生物感染、特别是真菌感染的方法中。该治疗方法可涉及向受试者施用有效量的本文所述的组合物。该组合物可以局部施用或口服施用，优选局部施用于感染区域。

本文所述的组合物可用于治疗微生物感染，特别是真菌感染。本文所述的组合物还可用于制备治疗微生物感染、特别是真菌感染的药物。该组合物或药物可以以有效治疗微生物感染的浓度施用。该组合物或药物可局部施用或口服施用有需要的受试者。该组合物或药物可优选局部施用于感染区域。

在另一方面，本文所述的组合物可用于离体杀死或抑制微生物增长的方法中。该方法可包括在感染表面上施用本文所述的组合物的步骤。无生命表面的非限制性实例可包括医疗装置的表面、医院内部表面、纺织品、食品包装、儿童玩具或电器。

可使用本文所述组合物治疗的微生物感染可以是细菌感染或真菌感染。可使用本文所述的组合物治疗的细菌感染包括由葡萄球菌属、假单胞菌属和埃希氏杆菌属细菌引起的感染。可使用本文所述的组合物治疗的细菌感染的非限制性实例可包括银白色葡萄球菌(Staphylococcus argenteus)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、施韦策葡萄球菌(Staphylococcus schweitzeri)、猿猴葡萄球菌(Staphylococcus simiae)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、路邓葡萄球菌(Staphylococcus lugdunensis)、Staphylococcus scheleiferi、山羊葡萄球菌(Staphylococcus caprae)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、栖稻黄色单胞菌(Pseudomonas oryzihabitans)、变形假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)、赫氏埃希氏菌(Escherichia hermannii)和大肠杆菌(Escherichia coli)。在多个实施方案中，包含式(I)的低聚物和抗真菌剂的组合物可表现出针对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌的抗细菌活性。

可使用本文所述的组合物治疗的真菌感染包括酵母感染。这些酵母感染包括由来自曲霉属(Aspergillus)、隐球菌属(Cryptococcus)和念珠菌属(Candida)家族的真菌和酵母菌引起的感染。在多个实施方案中，本文所述的组合物可用于治疗由来自念珠菌家族的真菌引起的感染。来自念珠菌属家族的真菌的非限制性实例可包括白色念珠菌(Candidaalbicans)、热带念珠菌(Candida tropicalis)、光滑念珠菌(Candida glabrata)、维斯念珠菌(Candida viswanathii)、假热带念珠菌(Candida pseudotropicalis)、季也蒙念珠菌(Candida guillierimondii)、克鲁斯念珠菌(Candida krusei)、葡萄牙念珠菌(Candidalusitaniae)、近平滑念珠菌(Candida parapsilosis)和星状念珠菌(Candidastellatoidea)。在多个实施方案中，组合物可用于治疗白色念珠菌感染。

用于治疗微生物感染的组合物可以以约0.2μg/ml至约150μg/ml的总浓度施用，其中该浓度是指每毫升组合物中所有活性成分的重量。在多个实施方案中，该组合物的浓度可以为约0.2μg/ml至约140μg/ml、或约0.2μg/ml至约130μg/ml、或约0.2μg/ml至约120μg/ml、或约0.2μg/ml至约110μg/ml、或约0.2μg/ml至约100μg/ml、或约μg/ml至约90μg/ml、或约0.2μg/ml至约80μg/ml、或约0.2μg/ml至约70μg/ml、或约0.2μg/ml至约60μg/ml、或约0.2μg/ml至约50μg/ml、或约0.2μg/ml至约40μg/ml、或约0.2μg/ml至约30μg/ml、或约0.2μg/ml至约20μg/ml、或约0.2μg/ml至约10μg/ml、或约0.2μg/ml至约5μg/ml、或约0.2μg/ml至约4μg/ml、或约0.3μg/ml至约4μg/ml、或约0.4μg/ml至约4μg/ml、或约0.5μg/ml至约4μg/ml、或约0.6μg/ml至约4μg/ml、或约0.7μg/ml至约4μg/ml、或约0.8μg/ml至约4μg/ml、或约0.9μg/ml至约4μg/ml、或优选地约1.0μg/ml至约4μg/ml。有利地，发现由于式(I)的低聚物和抗真菌剂之间的协同作用，在低至1.5μg/ml的浓度，组合物仍然可以有效地抑制微生物例如白色念珠菌的增长。

本文所述的组合物可包含至少一种式(I)的低聚物和至少一种抗真菌剂。抗真菌剂和式(I)的低聚物可以以约2:1至1:1500、或约1:1至1:1500、或约1:2至1:1500、或约1:4至1:1500、或约1:6至1:1500、或约1:8至1:1500、或约1:10至1:1500、或约1:15至1:1500、或约1:20至1:1500、或约1:30至1:1500、或约1:40至1:1500、或约1:50至1:1500、或约1:60至1:1500、或约1:70至1:1500、或约1:80至1:1500、或约1:90至1:1500、或约1:100至1:1500、或约1:150至1:1500、或约1:200至1:1500、或约1:250至1:1500、或约1:300至1:1500的重量比提供。在一个实施方案中，式(I)的低聚物和抗真菌剂可以以约1:333的重量比提供。

式(I)的低聚物与抗真菌剂的重量比也可以提供为1:350至1:1500、或约1:400至1:1500、或约1:450至1:1500、或约1:500至1:1500、或约1:550至1:1500、或约1:600至1:1500、或约1:650至1:1500、或约1:700至1:1500、或约1:750至1:1500、或约1:800至1:1500、或约1:850至1:1500、或约1:900至1:1500、或约1:950至1:1500、或约1:1000至1:1500、或约1:1000至1:1500、或约1:1100至1:1500、或约1:1200至1:1500、或优选为约1:1200至1:1400。在另一个实施方案中，抗真菌剂与式(I)的低聚物的重量浓度比可以为1:1333。

有利地，与单独的式(I)的低聚物相比，本文所公开的组合物显示出改善的抗微生物活性。特别地，与单独的式(I)的低聚物或单独的三唑抗真菌剂相比，该组合物表现出改善的抗真菌效果。不受理论的束缚，所描述的组合物的协同作用可能来自式(I)的低聚物的杀真菌作用与三唑抗真菌剂的抑真菌(fungistatic)作用之间的组合。

令人惊奇地，对于n值小于5的低聚物，可以观察到式(I)的低聚物和三唑抗真菌剂之间的协同作用。这些低聚物可以是n＝1-4的低聚物。这些低聚物可包含少于6个的[DABCO]

包含式(I)的低聚物(其中n小于5)的组合物的FIC值可以小于0.5、或约0.1至约0.5、或约0.1至约0.4、或优选约0.1至约0.3。

在包含基于三唑的抗真菌剂的组合物中使用时，式(I)的低聚物的MIC或MIC

在与式(I)的低聚物组合使用时，抗真菌剂的MIC值也可能会降低。在多个实施方案中，与单独使用时抗真菌剂的MIC

在一个实施方案中，包含低聚物(其中n＝3)和氟康唑的组合物的FIC指数约为0.38。表现出FIC指数为约0.38的、组合抗真菌剂的低聚物可包含正辛基末端E基团、三个[R

在其他实施方案中，包含低聚物(其中n＝3)和氟康唑的组合物的FIC指数可以为约0.19至0.25。该组合物的低聚物可包含正辛基末端E基团、三个[R

有利地，与具有中心邻二甲苯或对二甲苯连接基的相同长度的低聚物相比，具有3个[R

不受理论的约束，认为协同作用可能受抗真菌剂与式(I)的低聚物之间的相互作用的影响。可以假定，三种类型的机制可以有助于两种或更多种抗真菌剂之间的协同作用。第一种机制可能涉及在不同步骤顺序抑制共同的生物化学途径。提出的第二种机制可能是同时抑制真菌细胞壁和细胞膜靶标。第三种机制可以是第一抗真菌剂作用于细胞壁或细胞膜以增强第二抗真菌剂的渗透的同时作用。

分子动力学模拟表明，其中n小于5的低聚物可能与三唑抗真菌剂具有不稳定的相互作用；而n＝5的低聚物可与氟康唑分子强烈偶联。因此，可以假定低聚物和抗真菌剂之间不稳定的相互作用可以促进组合物的协同作用。特别地，可以提出这样的相互作可能允许低聚物攻击细胞壁和/或细胞膜，这可以促进抗真菌剂进入细胞基质。这可以改善组合物的抗真菌效果。

在本公开的另一方面，提供了制备式(I)的低聚物的方法。该方法可包括以下步骤：i)在第一组反应条件下，使式[E-R

R

R

L在每个实例中可以独立地选自：任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的芳烯基、任选取代的芳炔基、任选取代的烷芳基、任选取代的烯芳基和任选取代的炔芳基。

在多个实施方案中，L可以是任选取代的烯基、任选取代的芳基、任选取代的芳烯基或任选取代的烷芳基，优选任选取代的烷芳基。在一些实施方案中，L可以是包含2个烷基取代基的芳基或包含2个烷基取代基的烯基。在一些实施方案中，L可以是对二甲苯或邻二甲苯。在其他实施方案中，L可以是反式-2-丁烯基。

E可独立地选自由以下组成的组：任选取代的烷基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基和任选取代的烷芳基；并且长度为2至20个碳原子。在多个实施方案中，E可以是任选取代的烷基或任选取代的芳基，优选任选取代的烷基。在一些实施方案中，E端基可以为包含8个碳原子的任选取代的烷基。在优选的实施方案中，E可以是正辛基基团。

a和b的值可以独立地为0或1。

起始原料[E-R

在多个实施方案中，从步骤(i)获得的第一反应产物可以具有式[E-R

在其他实施方案中，从步骤(i)获得的第一反应产物可以具有式[E-R

制备本文所述的式(I)的低聚物的方法的步骤(i)可以在极性非质子有机溶剂中进行。这样的溶剂的非限制性实例可以包括二甲基甲酰胺、四氢呋喃、二甲亚砜、乙腈、乙酸乙酯、二氯甲烷和丙酮。在多个实施方案中，步骤(i)可以使用二甲基甲酰胺或乙腈作为溶剂进行。

制备本文所述的式(I)的低聚物的方法的步骤(i)可以在约30℃至150℃、或约30℃至140℃、或约30℃至130℃、或约30℃至120℃、或约30℃至110℃、或约30℃至100℃、或约40℃至100℃、或约50℃至100℃、或约60℃至100℃、或约70℃至100℃、或优选约80℃至100℃的温度进行。在多个实施方案中，步骤(i)可在90℃进行。

制备如本文所述的式(I)的低聚物的方法的步骤(i)可以进行至少6小时、或约6至48小时、或约6至46小时、或约6至44小时、或约6至42小时、或约6至40小时、或约6至38小时、或约6至36小时、或约8至36小时、或约10至36小时、或约12至36小时、或约14至36小时、或约16至36小时、或约18至36小时、或约20至36小时、或约22至48小时、或优选约24至48小时。

制备其中n大于1的低聚物的方法还可包括第二步骤(步骤ii)。步骤(ii)可包括在第二组反应条件下使第一反应产物与式[(R

R

R

[(R

步骤(ii)中的溶剂可以是极性质子溶剂。极性质子或溶剂的非限制性实例可包括甲醇、乙醇、异丙醇、水和甲酸。在多个实施方案中，步骤ii)可以使用甲醇进行。

步骤(ii)可以在30℃至150℃、或约30℃至140℃、或约30℃至130℃、或约30℃至120℃、或约30℃至110℃、或约30℃至100℃、或约30℃至90℃、或约30℃至80℃、或约30℃至70℃、或约30℃至60℃、或优选约30℃至50℃的温度进行。在多个实施方案中，步骤(ii)可以在40℃进行。

制备如本文所述的式(I)的低聚物的方法的步骤(ii)可以进行至少6小时、或约6至60小时、或约8至60小时、或约10至60小时、或约12至60小时、或约14至60小时、或约16至60小时、或约18至60小时、或约20至60小时、或约22至60小时、或约24至60小时、或约24至58小时、或约24至56小时、或约24至54小时、或约24至52小时、或约24至50小时、或约26至50小时、或约28至50小时、或约30至50小时、或约32至50小时、或约34至50小时、或优选约36至80小时。

实施例

实施例1——低聚物的合成

所有溶剂均购自Sigma-Aldrich，且使用时无需进一步纯化。所有其他试剂按收到的原样使用，除非在实验文本中另有说明。

THF-四氢呋喃

MeCN-乙腈

MeOH-甲醇

DMF-二甲基甲酰胺

DMSO-二甲亚砜

DABCO-1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷

TMEDA-四甲基乙二胺

eq.-摩尔当量

MHB-MH肉汤

YMB-酵母菌霉菌肉汤

CFU-菌落形成单位

ATCC-美国典型细胞培养

OD-光密度

方案1.DDB8、DDP8和DDO8的合成工艺.

在60℃，将溴辛烷(1.0eq)的THF溶液滴加至1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷(DABCO，5.0eq)的THF溶液中。24小时后，真空除去THF，且将所得白色固体用乙醚洗涤。定量获得无色液体a(产率>95％)。

将a(2.5eq)的DMF溶液与反式-1,4-二溴丁-2-烯(1.0eq)的DMF溶液混合。在60℃搅拌48小时后，真空除去DMF，且先用丙酮然后用乙醚洗涤所得白色固体。定量获得白色固体DDB8。DDP8和DDO8的合成与DDB8相似。

方案2.IDIB8、IDIP8和IDIO8的合成工艺.

将咪唑(1.0eq)和氢氧化钠(1.0eq)在DMSO中的混合物加热至90℃2小时，然后冷却至室温。向混合物中滴加1-溴辛烷(1.0eq)的DMSO溶液。在室温下搅拌3小时后，在恒定搅拌下将混合物加热至65℃持续16小时。将获得的溶液与水混合，然后用乙醚萃取数次。真空除去乙醚，得到黄色液体b。

在70℃，将b(1.0eq，1.80g，10.0mmol)的THF溶液滴加到反式-1,4-二溴丁-2-烯(2.0eq，0.12g)的THF溶液中。搅拌过夜后，从溶液中真空除去THF。将获得的液体用乙醚洗涤3次，然后真空干燥(1.15g，29％)。b-2和b-3的合成与b-1类似。

在80℃，在DMF中搅拌b-1(3.0eq)和DABCO(1.0eq)的混合物。过夜搅拌后，从溶液中真空除去DMF。将获得的液体用丙酮洗涤，然后真空干燥。IDIP8和IDIO8的合成与IDIB8类似。

方案3.化合物1、2和3的制备

将DABCO溶液(8.0eq)溶于MeCN中并加热至80℃，向其中滴加α,α′--二溴-对二甲苯(1.0eq)或反式-1,4-二溴丁-2-烯(1.0eq)的溶液。将所得溶液在90℃搅拌24小时。收集固体并用MeCN洗涤，随后用乙酸乙酯洗涤，然后用乙醚洗涤，获得白色粉末1。2和3的合成与1类似。

方案4.IDPBX8、IDPPX8和IDPOX8的合成工艺.

将1(1.0eq)溶解在MeOH中并加热至60℃。将溶于MeOH的b-2(4.0eq)加入到1的溶液中。将混合物在40℃恒定搅拌2天。然后真空除去MeOH。将所得白色固体用丙酮洗涤，然后干燥获得IDPBX8。

IDPPX8和IDPOX8的合成与IDPBX8类似。

方案5.IDPBXb和IDPPXb的合成工艺.

c的合成与b的合成类似，除了获得的c为无色晶体外。

c-1的合成与b-2的合成类似。将c(1.0eq)和α,α′--二溴-对二甲苯(5.0eq)的混合物在THF中于室温搅拌3天。通过真空除去THF浓缩混合物。将获得的固体/液体用乙醚洗涤，然后用丙酮萃取。真空除去丙酮。获得浅黄色液体c-1。

使用与IDPBX8的合成相同的工艺来合成IDPBXb和IDPPXb。

方案6.IIDPBX8和IIDPPX8的合成工艺。

d的合成以前已有报道(Riduan等人，Small，2016，12，第1928-1934页)。将d(1.0eq)的乙腈溶液滴加到反式-1,4-二溴-2-丁烯(7.0eq)的溶液中。所得混合物在80℃搅拌过夜。真空除去溶剂，且将所得固体用乙酸乙酯洗涤。获得浅黄色液体d-1。

将d-1(3.0eq)的DMF溶液与DABCO(1.0eq)的溶液混合。将所得混合物在90℃搅拌16小时。反应后，真空除去溶剂。用丙酮洗涤后，真空干燥产物。获得白色粉末IIDPBX8。

d-2的合成以前已有报道(Yuan等人，ChemMedChem，2017，12，第835-840页)。在与IIDPBX8类似的条件下合成IIDPPX8。

方案7.IIDPPBX8的合成工艺.

将1(1.0eq)在MeOH中的溶液与d-2(5.0eq)的溶液混合。将混合物在60℃恒定搅拌48小时。然后真空除去MeOH，且将所得固体用丙酮洗涤，然后用DMF洗涤。将所得固体真空干燥。获得白色固体IIDPPBX8。

实施例2——最小抑制浓度

金黄色葡萄球菌(ATCC 6538，革兰氏阳性菌)、大肠杆菌(ATCC 8739，革兰氏阴性菌)、铜绿假单胞菌(ATCC 9027，革兰氏阴性菌)和白色念珠菌(ATCC 10231，真菌)用作代表性微生物以挑战低聚物的抗微生物功能。实验前，所有细菌和真菌均在-80℃冷冻，并在37℃在Mueller Hinton肉汤(MHB，BD，新加坡)中生长过夜。真菌在酵母菌霉菌肉汤(YMB，BD，新加坡)中22℃生长过夜。将这些培养物的子样品再培养3小时并稀释示出600nm处的光密度值为0.07(OD600＝0.07)，对应于细菌为3×10

将低聚物以4mg mL

MIC取为用酶标仪(TECAN)观察到微生物生长低于50％时的低聚物浓度。仅含有微生物细胞的培养基溶液用作对照(100％微生物增长)。该测定重复进行四次，并且实验重复至少两次。

实施例3——棋盘格试验(Checkerboard Assay)

为了评估单个低聚物化合物与氟康唑组合对白色念珠菌是否表现出协同作用或无差别，如已描述的(Singh等人，Am.J.Physiol.Lung Cell Mol.Physiol.,2000,279,L799-L805)进行棋盘格试验，并略加修改。以终浓度强度(MIC的1/16至两倍)的4倍在YMB中制备了低聚物和氟康唑的两倍系列稀释液。将浓度为目标终浓度4倍的50μL各组分的等分试样在96孔板中混合。还制备了其中每种试剂单独连续稀释的行和列用于MIC试验。然后，在96孔板中，向孔板中的每种溶液接种100μL对数增长的10

表1示出了当针对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，S.A.)、铜绿假单胞菌(Psedomonas aeruginosa，P.A.)、大肠杆菌(Escherichia coli，E.C.)和白色念珠菌(Candida albicans，C.A)测试时，低聚物的MIC值。MIC是针对约10

IBN-C8

IBN-132b

表1.抗微生物活性(MIC，μg/ml)，具氟康唑的分级抑菌浓度指数(FIC)，溶血性质(HC

通过计算分级抑菌浓度指数(FIC)来确定氟康唑和低聚物之间的协同作用。FIC计算如下：FIC＝(MIC

实施例4——唑类针对白色念珠菌的协同作用

还采用棋盘格稀释法研究了所选择的低聚物与其他三唑类如伊曲康唑和伏立康唑的相互作用。为了进行比较，还研究了所选择的低聚物与非三唑类抗真菌剂诺氟沙星的相互作用。诺氟沙星的结构如下所示：

表2中显示了IDPBX8、IDPPX8和IIDPPBX8与抗真菌剂的不同组合针对白色念珠菌的MIC和FIC。

表2.根据FIC，低聚物和三唑的组合处理针对白色念珠菌增长的影响

当IDPBX8或IDPPX8与伏立康唑一起施用时也观察到协同作用。

通过使用酶标仪记录细胞培养基在600nm的吸光度，也研究了在IDPBX8和氟康唑两者以不同浓度存在下的白色念珠菌的生长。为了进行比较，还研究了IDPBX8与诺氟沙星的组合的作用。结果显示在图2a和b中。

有趣的是，IDPBX8和诺氟沙星(重量比1:1)的组合未显示出改进的功效，而IDPBX8与氟康唑的组合显示出比单独使用的每种化合物/药物更高的活性。使用营养琼脂平板进行菌落计数的结果反映了存活的白色念珠菌的浓度(图2c)。甚至当组合的总浓度为2μg/ml时，也观察到了杀灭效果。

实施例5——监测白色念珠菌的增长

以62μg/ml的浓度评估了所选择的低聚物对白色念珠菌的杀灭效力(图1)。还测量了氟康唑的抗真菌活性以进行比较。

在IDPBX8和氟康唑单独存在或组合存在的情况下，白色念珠菌的生长通过用酶标仪测量600nm处的吸光度进行监测，并使用菌落计数法进行定量。简单地说，将材料溶解在YMB中(2μg/mL至62μg/mL的连续两倍稀释液)。将100微升的每种溶液置于96孔微量板中。然后将100μg/mL的白色念珠菌悬浮液(7.6×10

氟康唑处理24小时后，存活的白色念珠菌的数目显著低于未处理对照，表明该菌株对氟康唑敏感。但是，24小时时白色念珠菌的存活量大于0小时时最初添加的白色念珠菌，这意味着氟康唑具有抑真菌作用而不是杀真菌作用。用低聚物处理24小时后，存活的白色念珠菌显着少于对照，这表明所有合成的低聚物均是抗真菌的。具体地，IDPPX8和DDB8是抑真菌的，而其他低聚物是杀真菌的。尽管IDPBX8和IIDPPPBX8都对白色念珠菌具有最低的MIC(2μg/ml至8μg/ml)，它们表现出不同的杀灭动力学。IDPBX8杀死速度更快。在24小时处理后观察到99％的杀灭效果，48小时后增加至99.99％。

实施例6——时间杀灭法

根据棋盘格试验的结果用选择的抗真菌组合进行时间杀灭实验。单独测试IDPBX8和氟康唑并在次级MIC水平(低于原始MIC值)组合测试。将混合物用白色念珠菌接种，将其调节至最终浓度为约10

与IDPBX8或氟康唑的单一物质相比，1μg/ml IDPBX8和0.5μg/ml氟康唑以及2μg/ml IDPBX8和0.25μg/ml氟康唑的组合在24小时后显示出稳定且连续的菌落计数抑制作用。

实施例7——耐药性研究

该方法是从Yuan和合著者的方法修改而来的(Yuan等人，Biomateri.Sci.，2019，7，第2317-2325页)。通过用IDPBX8、IDPBX8-氟康唑组合或氟康唑反复处理白色念珠菌可诱导耐药性。使用肉汤微量稀释法测定了针对白色念珠菌的被测化合物的最初MIC。然后，通过转移以共聚物的次级MIC(白色念珠菌该传代的MIC的1/4)生长的微生物悬浮液起始连续传代，以进行另一次MIC测定。孵育24小时后，再次转移在测试化合物的1/4-MIC生长的细胞，并测定MIC。白色念珠菌的MIC被测试了35次传代。

测试了两种IDPBX8-氟康唑组合：IDPBX8(2μg/ml)+氟康唑(0.25μg/ml；IDPBX8(1μg/ml)+氟康唑(0.5μg/ml)。通过记录标准化至第一代的MIC的MIC变化来评估耐药性行为(图4)。

如图4所示，氟康唑针对白色念珠菌的MIC在第5代增加。经过第31代，氟康唑的MIC增加到原始MIC的8倍。相反，IDPBX8的MIC在整个36代中相对稳定，表明白色念珠菌在IDPBX8连续36天处理期间未产生明显的耐药性。

实施例8——溶血研究

用PBS缓冲液稀释新鲜的小鼠红细胞(RBC)，得到RBC储备悬浮液(4体积％血细胞)。将100μL等分的RBC悬浮液与100μL各种浓度(从4mg mL

％溶血＝[OD

所有低聚物均未引起明显溶血。即使在我们测试的最高浓度2000μg/mL也未观察到溶血现象。考虑到它们的高抗微生物活性，这些低聚物还被初步认为是活性和无毒化合物，其对哺乳动物细胞内的多种致病微生物显示出高选择性。

统计分析：

数据表示为平均值±平均值的标准偏差(误差线表示S.D.)。采用学生T检验(Student’s t-test)确定各组间的显著性差异。p<0.05的差异被认为是统计学上显著的。

工业实用性

本发明组合物可用于制造抗微生物制剂和溶液。具体地，本发明组合物可用于制备治疗药物，该治疗药物可用于治疗微生物感染，特别是真菌感染。这些药物可以制备成混悬剂、溶液剂、乳剂、软膏剂、乳膏剂和药膏剂，用于局部施用于皮肤的感染区域。这些药物还可以配制为片剂、丸剂、胶囊或囊片，其可以口服给予需要的受试者。

包含如本文所公开的组合物的抗微生物制剂和溶液也可用于非治疗性应用。组合物针对细菌和真菌的广谱活性可用于表面的消毒和去污。因此，可将包含所述组合物的抗微生物溶液添加到可用于临床或家用环境的消毒剂和消毒溶液中。该溶液还可应用于可用作抗微生物擦拭物和服装的吸收性材料中。该组合物还可以添加到复合材料和纺织品中以赋予材料抗微生物性能。