L-精氨酸在大气污染环境下对心血管疾病的防治应用及L-精氨酸补充剂

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及L-精氨酸在室外大气污染环境下对心血管疾病的防治应用及L-精氨酸补充剂。

背景技术

高血压既是心血管疾病的一种，同时也是其他主要心血管系统疾病如心肌梗死、心衰等的发病危险因素。有研究表明，即使血压降低仅2-3mmHg，也可对心血管并发症高风险者的预后产生有益的影响。据估计，人群收缩压(Systolic blood pressure，SBP)降低3mmHg，可使中风死亡率降低8％，冠心病死亡率降低5％和全因死亡率降低4％。因此，控制血压对于降低人群心血管疾病的死亡率就有十分重要的意义。缺血性心脏病是由冠状动脉循环改变而导致心肌缺血、缺氧而引起的心脏病，在心血管疾病中，因缺血性心脏病死亡的数量最大。国内外大量流行病学研究表明，室外大气污染是心血管疾病的主要危险因素之一，对人群有短期和长期的健康危害，可以导致高血压、心律失常、心肌梗死和心力衰竭、凝血和血栓形成以及动脉粥样硬化等疾病的发病率增加，，并与人群心血管疾病的住院率和死亡率之间存在正向关联。有研究发现，大气污染是继营养因素、高血压和吸烟之后危害我国人群健康的第四大危险因素。大气污染对人体产生健康危害的主要机制包括炎症和氧化应激等，而服用营养补充剂具有抗氧化损伤、抗炎等作用。因此，可以考虑通过服用营养补充剂来改善PM

L-精氨酸(L-arginine，L-Arg)是一种非必需氨基酸，虽然人体能够自身合成，但在体内生成的速度较慢，有时需要从食物中进行补充。由于L-精氨酸是内源性合成一氧化氮(Nitric oxide，NO)的唯一底物，它在一氧化氮合酶(Nitric oxide synthase，NOS)的催化下生成NO而发挥生理效应，这一生化过程称为Arg-NO通路，在心血管系统中发挥重要作用。实验研究表明，NO作为细胞间信使及神经递质，在心血管系统和中枢神经及外周信息传递等方面发挥着极为重要的作用；内皮型NOS在血管内皮中产生的NO负责松弛平滑肌细胞，血管内皮功能的提高对于血压的降低十分关键。因此，内源性NO对机体心血管健康有着十分重要的作用。环磷酸鸟苷(Cyclic guanosine monophosphate，cGMP)是NO舒张血管通路的下游分子，可舒张血管平滑肌组织，使血流量增加，血压降低。

临床研究表明，补充L-精氨酸对于保护人体健康和对抗某些疾病均有益处。例如，有研究发现L-精氨酸能够通过增加运动状态下相关肌肉中的NO产生来促进血管舒张，通过增加底物利用和代谢物去除(如乳酸和氨)来提高力量、强度和促进肌肉的恢复。另有研究发现补充L-精氨酸有利于改善内皮功能、促进伤口愈合、增强免疫功能。还有证据表明，L-精氨酸对降低脂肪、减轻胰岛素抵抗具有良好作用。

但是，目前还未有关于L-精氨酸在预防和治疗人类心血管疾病方面的研究报道，尤其是对大气污染暴露环境下敏感人群(高血压或高血压前期个体)的影响。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供L-精氨酸在室外大气污染环境下对人体心血管疾病的防治应用及相应的L-精氨酸补充剂。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明公开了L-精氨酸在制备预防/治疗大气污染环境下心血管疾病的药物中的应用。

优选地，所述的药物为通过降低静息血压和动态血压水平改善心血管健康水平的药物。

优选地，所述的药物为通过提高血浆中L-精氨酸的水平来降低血压水平的药物。

进一步优选地，所述的药物为通过提高血浆中L-精氨酸下游代谢产物环磷酸鸟苷表达而降低血压水平的药物。

优选地，所述的药物为针对50岁以上年龄段人群的药物。

优选地，所述的药物为针对男性群体效果优于女性的药物。

优选地，所示大气污染环境中大气PM

优选地，L-精氨酸的有效剂量为3g/次，一日3次，口服干预疗程时间为至少2周。

优选地，所述的药物为L-精氨酸补充剂，由L-精氨酸添加药学上可接受的辅料制成片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂或散剂。

本发明还公开了一种用于预防/治疗大气污染环境下心血管疾病的L-精氨酸补充剂，以质量百分比计，包括：L-精氨酸75％、乳糖8％-12％、聚维酮K30 2％-5％、低取代羟丙纤维素2％-5％、共聚维酮2％-5％、交联聚维酮1％-3％、二氧化硅0.25％-0.5％、硬脂酸镁0.25％-2.0％及薄膜包衣粉2％-4％。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明首次公开了L-精氨酸能够保护在室外大气污染环境下步行中老年人心血管健康中的制药应用，本发明通过采用随机双盲安慰剂对照试验的方法，通过招募在社区医院就诊的患者为研究对象，研究了L-精氨酸改善大气污染环境下敏感人群血压水平的作用。实验结果表明，在大气PM

基于上述研究，本发明还公开了一种能够用于预防/治疗大气污染环境下心血管疾病的L-精氨酸补充剂，通过使用药学上可接受的辅料配合L-精氨酸，使L-精氨酸在摄入人体后可迅速崩解吸收：乳糖可用做补充剂的填充剂，使L-精氨酸更易于与其他成分混合；聚维酮K30、共聚维酮均是具有高效粘合性的聚合物，主要作为补充剂制作过程中的粘合剂，利于补充剂成型；低取代羟丙纤维素主要用作补充剂的崩解剂和粘合剂，由于它的粉末有较大的表面积和孔隙率，故能快速吸水膨胀，用于片剂时，使片剂快速崩解，同时它的粗糙结构与药物和颗粒之间有较大的镶嵌，可明显提高片剂硬度；交联聚维酮是非常优良的崩解剂，可迅速表现出高的毛细管活性和优异的水化能力，有利于补充剂的崩解；二氧化硅可大大改善颗粒流动性，提高松密度，使制得的片剂硬度增加，缩短崩解时限，提高药物溶出速度；硬脂酸镁可以使制成的颗粒具有很好的流动性和可压性；薄膜包衣粉喷施于片剂上而成为薄膜包衣片。实验结果表面本发明的L-精氨酸补充剂效果明确，能够有效改善室外大气污染暴露环境下敏感人群(高血压或高血压前期个体)的血压水平，因而有望应用于中老年高血压患者的药物开发。

附图说明

图1为研究对象纳入排除情况；

图2为血浆L-精氨酸研究期间的变化情况；其中，(A)L-Arg干预组与安慰剂对照组在各时间点血浆L-Arg与干预研究开始时基线浓度差值的变化描述(平均数±标准误)；(B)为血浆L-Arg两组组间差异比较；注：***p<0.001，L-Arg干预组与安慰剂对照组相比较

图3为L-Arg干预组和安慰剂对照组在外出步行2h开始后的0h，2.5h，24h后静息血压SBP、DBP和平均动脉压(mean arterial pressure，MAP)与干预研究开始时基线血压水平差值的变化描述及组间比较图；其中，(A)为L-Arg干预组与安慰剂对照组在各时间点静息血压与干预研究开始时基线血压水平差值的变化描述(平均数±标准误)；(B)为静息血压两组组间差异比较；注：*p<0.05，L-Arg干预组与安慰剂对照组相比较；

图4为L-Arg干预组和安慰剂对照组在外出步行2h期间动态血压SBP、DBP和MAP与干预研究开始时基线血压水平差值的变化描述及组间比较[组间变化量(95％CI)](N＝98)；其中，(A)为L-Arg干预组与安慰剂对照组在外出步行2h期间动态血压与干预研究开始时基线血压水平差值的变化描述(平均数±标准误)；(B)为两组组间差异比较；注：*p<0.05，**p<0.01，L-Arg干预组与安慰剂对照组相比较；

图5为L-Arg干预组和安慰剂对照组在外出步行2h开始后的0h，2.5h，24h静息血压SBP、DBP和MAP与干预研究开始时血压水平差值的组间比较[变化量(95％CI)](N＝98)；注：*p<0.05，**p<0.01，干预组与对照组相比较；

图6为L-Arg干预组和安慰剂对照组在外出步行2h开始后的0h，2.5h，24h静息血压SBP、DBP和MAP与干预研究开始时血压水平差值的组间比较[变化量(95％CI)](N＝98)；注：*p<0.05，干预组与对照组相比较。

具体实施方式

为了使本技术领域的人员更好地理解本发明方案，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分的实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。

需要说明的是，本发明的说明书和权利要求书及上述附图中的术语“第一”、“第二”等是用于区别类似的对象，而不必用于描述特定的顺序或先后次序。应该理解这样使用的数据在适当情况下可以互换，以便这里描述的本发明的实施例能够以除了在这里图示或描述的那些以外的顺序实施。此外，术语“包括”和“具有”以及他们的任何变形，意图在于覆盖不排他的包含，例如，包含了一系列步骤或单元的过程、方法、系统、产品或设备不必限于清楚地列出的那些步骤或单元，而是可包括没有清楚地列出的或对于这些过程、方法、产品或设备固有的其它步骤或单元。

下面结合附图对本发明做进一步详细描述：

1.实验目的：主要目的是探讨服用本发明的L-精氨酸补充剂后被试者的血浆L-精氨酸浓度和血压的变化。

本发明提供的一种用于预防/治疗大气污染环境下心血管疾病的L-精氨酸补充剂，该补充剂剂型为片剂，以质量百分比计，包括：L-精氨酸75％、乳糖8％-12％、聚维酮K302％-5％、低取代羟丙纤维素2％-5％、共聚维酮2％-5％、交联聚维酮1％-3％、二氧化硅0.25％-0.5％、硬脂酸镁0.25％-2.0％及薄膜包衣粉2％-4％。

注：根据需要上述L-精氨酸补充剂还可以制备成其他剂型，如丸剂、胶囊剂、颗粒剂或散剂等。

优选地，本发明的L-精氨酸补充剂，以质量百分比计，包括：精氨酸75％、乳糖10％、聚维酮K30 2％、低取代羟丙纤维素3％、共聚维酮2％、交联聚维酮2.5％、二氧化硅0.5％、硬脂酸镁2％及白色薄膜包衣粉3％。

2.实验对象和方法

2.1实验对象

本实验的受试者全部选自于中老年群体，入选标准：年龄50-75岁、基线筛查符合血压升高或1级、2级高血压(SBP水平120-160mmHg，DBP水平60-100mmHg)、不吸烟和未常规服用血管活性相关膳食补充剂。

排除标准：(1)重度高血压，临床诊断心血管疾病患者(除外高血压)，或合并其他重要慢性疾病如凝血障碍、慢性阻塞性肺病、哮喘、胃肠道疾病、癌症或精神类疾病；(2)空腹低密度脂蛋白胆固醇含量≥4.92mmol/L(190mg/dL)或总胆固醇≥6.21mmol/L(240mg/dL)或糖化血红蛋白HbA1c>9％；(3)肝、肾功能紊乱；(4)近三个月内有急性冠脉症状或不稳定临床表现；(5)患有严重过敏性疾病者或对L-精氨酸成分过敏者，或研究开始前患急病者；(6)酒精或药物成瘾；(7)乙/丙型肝炎病毒患者/携带者；(8)有器官移植史或过去一年中有重要手术史者；(9)暴露于职业性空气污染；(10)不愿意提供知情同意，或不能配合所有研究相关程序者。

参见图1，研究者依据上述纳入/排除标准招募受试者。为提高参与正式研究的受试者依从性，计划在研究对象筛选过程中进行依从性测试，即发放5天用量的安慰剂给所有符合纳入标准的研究对象进行试服试验，试验结束时检查研究对象的完成度，从中选择完成度高的研究对象纳入正式研究。

在招募到合格的研究对象后，首先将所有研究对象按性别分为男女两层，由统计专业人员在各层内再按照研究对象的年龄和收缩压进行排序，然后两两配对，在男女层内分别进行随机化，将配对的研究对象分入两组，即L-精氨酸干预组或安慰剂对照组。具体的分组信息仅由提供L-精氨酸补充剂和安慰剂的公司工作人员掌握。在课题结束之前，分组信息处于保密状态。共有118名研究对象参与本实验，平均分成两组，每组59人。

2.2实验设计

本研究使用的L-精氨酸补充剂和安慰剂两种剂型大小、形状、颜色及外包装一致，在生产阶段由厂商进行密码编码，做好外包装标记，并将密码编码与受试者分组进行关联匹配，研究开始后按关联匹配的结果进行发放。在整个实验阶段，要求研究对象和现场工作人员对研究对象服用的干预剂种类(即L-精氨酸补充剂还是安慰剂)均不知情(双盲)。待实验研究结束并完成数据分析时，由厂商进行“揭盲”，提供与受试者分组对应的片剂种类信息。

在纳入研究对象后，在随访调查期间，采用问卷调查的方式对其基础人口学信息、疾病史、吸烟史、饮食习惯、职业暴露史、药物使用情况等进行调查。利用饮食问卷收集研究对象的日常饮食摄入情况，并依据2002年中国食物成分表计算研究对象的各种食物成分的摄入量。利用Aschebrook-Kilfoy采用的方法计算研究对象饮食中硝酸盐和亚硝酸盐的摄入量。不同食物成分摄入量的计算公式如下所示：

N＝F*(P/100)*(A/100)

公式中N为某营养素摄入量，F为某食物项摄入量(克)，P为食部(每100克食物的可食用部分)，A为食部100g中该营养素的含量。

采用随机双盲安慰剂对照的干预设计方法，在干预阶段，研究对象服用L-精氨酸补充剂或安慰剂2周后(L-精氨酸补充剂的有效剂量为3g/次，一日3次，每人每天口服共计9g，口服干预时间为2周)进行个体暴露监测及系列健康指标检测。干预前及服用补充剂期间研究对象保持日常活动模式即可，在交通干道沿线步行进行个体暴露及健康监测当天停用空气净化器及口罩，使研究对象暴露于真实的大气污染浓度，以明确L-精氨酸对大气污染短期暴露心血管效应的干预作用。

片剂的管理：两种片剂(L-精氨酸补充剂及安慰剂)均按相同使用剂量封装在塑料盒中，在使用前装箱密封保存，使用航空快递方式运送到项目承担单位，由专人负责交接入库。研究开始后由片剂管理人员按厂商确定的编码关联方式进行发放，由受试者自行拆封塑料盒使用。干预研究结束时回收包装片剂的塑料盒及标签。上述过程的片剂接收、发放、回收均将做好管理记录。

在研究对象服用L-精氨酸补充剂或安慰剂13天后，在第14天(研究当天按要求正常服用补充剂)上午，配对的研究对象在9:00-11:00期间沿既定的交通干道路线步行2小时。若研究对象在第14天不能按时参加，则根据实际情况进行前后浮动范围为1-3天的调整，以保证其能完成所有研究项目。如进行调整，在调整期间，研究对象需要按时按量服用补充剂。在步行期间，研究对象携带装有暴露监测仪器的背包，所有仪器采样管的进气口尽量靠近人的呼吸带高度处，在研究对象出发时，打开所有仪器，对研究对象在外出期间的污染物暴露水平进行实时监测，同时记录研究对象的活动情况及位置信息。若每天有1对以上研究对象，则安排他们在不同的时间点出发。在研究对象2小时步行暴露结束后，持续监测研究对象对大气污染物的个体暴露水平直到24小时后回访。监测的空气污染物包括PM

2.3健康指标测量

在每次服用L-精氨酸补充剂/安慰剂前(干预研究开始第1天)、步行2h暴露前、暴露后30min及暴露后22h(即外出步行2h开始0h、2.5h和24h)四个时间点对研究对象的心血管健康指标进行测量和评价。在各个时间点每次采集5ml血液(共计4次)，以测量营养补充剂的有效成分水平。

2.3.1静息血压的测量

利用欧姆龙电子血压计(OMRON HBP-1300，Omron Healthcare Co.Ltd.，Kyoto，Japan)对研究对象的静息血压(SBP和DBP)进行测量。该仪器具有较好的测量精度，血压量程为0-299mmHg，心率的测量范围为40-180bpm，测量精度为±3mmHg。测量前30min避免激烈活动、进食及除饮用水以外的饮料，保持情绪平稳；排空膀胱，安静休息5-10min。采用坐位测量的姿势，为了保证测量结果的准确性，测量均重复进行3次，每两次测量之间间隔时间2-3min，取第二次和第三次测量值的平均值作为研究对象的平均血压值。如果第2次和第3次的血压测量值之差大于5mmHg，则继续测量，直至最后两次血压测量结果差值小于5mmHg，这种情况下，研究对象的最终血压值定义为所有有效的血压测量结果(从第2次至最后1次测量)的均数。研究对象的平均动脉压(Mean arterial pressure，MAP)值由收缩压和舒张压平均值计算得到[MAP＝(SBP+2×DBP/3)]。

2.3.2动态血压监测

每位研究对象在外出暴露开始前，佩戴动态血压计(Mobile-O-GRAPH NGVers.20，Hypertension Management Software Inc.Germany)。该仪器采用示波法进行测量，收缩压和舒张压测量范围分别为60-290mmHg和30-195mmHg，测量精度为±3mmHg，心率的测量范围为30-240bpm，每15min自动监测一次研究对象的血压。外出步行期间，研究对象以一个相对平稳的速度正常步行，但是在测量血压时，保持静止，并放松手臂，袖带与心脏水平持平。研究对象在测量期间，尽量避免剧烈运动。动态血压计监测时长为2h，外出步行2h结束后，取下仪器。通过仪器配备的软件(HMS Client-Server Version4.6.0I.E.M.GmbH)导出测量结果，本研究主要采集动态血压(Ambulatory bloodpressure，ABP)的SBP、DBP和MAP水平。

2.3.3血液生物标志物的测量

在干预研究开始前、外出步行2h开始前、外出步行2h结束后30min和外出步行2h开始后24h四个时间点分别采集研究对象的静脉血样5ml，分装入EDTA抗凝的真空采血管。血样样品经离心、分装及编号后，储存于-80℃超低温冰箱内待测。

血浆中L-精氨酸：使用液相色谱-质谱(LC/MS/MS)法同时定量分析人血浆中L-精氨酸。

a.样品处理方法：取于4度解冻的血浆10μL，L-Arginine-

b.标准溶液的制备：配置一系列浓度的标准品水溶液母液，混合后以水稀释至一系列浓度的标准溶液，测定方法同样品制备，上清液进行液质测定。采用内标法建立标准曲线。根据标准曲线计算样品的浓度。得到各化合物的标准曲线结果：

Arg：y＝0.02347x+0.01700(r＝0.99969)(浓度范围10-200μM/L)

c.色谱条件

色谱柱：Waters Xbridge色谱柱，Amide，3.5um 2.1x100mm

流动相：流速0.3mL/min，0.1％甲酸水(A)和0.1％甲酸乙腈(B)；

洗脱程序为起始B相占70％，至3分钟内降至50％，8分钟B相恢复为70％，至15分钟保持在70％洗脱。

液相：Shimadzu LC 20ADXR

柱温：40℃

上样体积：1.00μL

d.质谱条件

MS/MS分析采用的仪器和条件为：

质谱仪：AB API Qtrap 4000

源：Turbo spray

扫描类型：MRM

离子对：见下页表1描述。

表1 离子对情况描述

2.3.4结果统计

数据分析采用SAS9.4软件，采用独立样本T检验比较L-精氨酸干预组和安慰剂对照组主要基线特征(如年龄、体质指数、饮食状况等)的平衡性；采用配对T检验的方法，利用单因素重复测量设计的方差分析来评估干预前后两组各心血管系统相关指标在不同时间点的组间差异，确定干预的总体效应；使用混合效应模型来评估组间差异，以不同时间点的指标水平与2周干预研究开始时该指标水平相减的绝对变化量作为因变量，以组别、时间点及组别与时间点的交互项作为自变量，以研究对象作为随机项，分析健康指标在干预前后组内差异的变化情况，来综合评估L-精氨酸干预对心血管指标的影响。

2.4实验结果

研究对象的纳入排除情况如图1所示。在研究筛选阶段共预约505名研究对象来到社区医院参与筛查体检，其居住地址均在社区医院附近。按照研究的纳入排除标准对研究对象进行筛选，共排除387名研究对象，其中87人未按约定时间来到社区医院参加筛查体检，174人不符合研究的纳入标准，126人因时间冲突等原因拒绝参加干预研究。最终共有118名研究对象被纳入正式研究，经过5天的依从性试验，所有研究对象均能按照要求服用完发放的补充剂(安慰剂)，依从性良好，被随机分成L-Arg干预组和安慰剂对照组，每组59人。在干预研究进行中，L-Arg干预组和安慰剂对照组中分别有1名研究对象退出，分别有4人和1人仅完成了基线体检，在安慰剂对照组有1人未完成外出步行2h；在按照研究流程完成干预研究的110人中，有4对研究对象未在计划的2周内同步时间完成研究，另有4人在没有匹配的研究对象情况下完成试验。因此，共98名研究对象纳入最终的数据分析。

表2为完成随访的98名研究对象的基线特征比较。

表2 配对完成随访的研究对象基线特征(N＝98)

可以看出，在完成干预研究的98名研究对象中，男性40名，女性48名，研究对象的各项基线特征在L-精氨酸干预组和安慰剂对照组之间均衡可比(p>0.05)，两组研究对象的各项健康相关指标如静息血压、血糖、血脂及血液L-精氨酸的基线水平组间均无显著差异(p>0.05)。两组研究对象的基线SBP、DBP和MAP分别为135.4±11.4mmHg、79.7±8.1mmHg、98.3±7.8mmHg(L-精氨酸干预组)和134.9±11.0mmHg、77.3±8.3mmHg、96.5±7.8mmHg(安慰剂对照组)。

配对完成随访的98名研究对象的能量及食物成分基线摄入水平如表3所示。

表3 配对完成随访的研究对象每日能量、食物成分和营养素摄入的基线水平(N＝98)

两组研究对象的能量摄入量、三大产能营养素摄入量、主要维生素以及蔬菜和水果摄入量的基线水平在组间均无显著差异，均衡可比(p>0.05)。L-Arg干预组和安慰剂对照组的研究对象每日摄入能量分别为1809.5±460.6kcal和1743.2±502.7kcal(p＝0.50)，蛋白质每日摄入量分别为79.5±25.3g和73.7±31.5g(p＝0.32)。两组研究对象的水果和蔬菜每日摄入量分别为220.0±155.0g和245.0±165.0g(p＝0.29)和520.0±250.0g和595.0±395.0g(p＝0.47)。

参见图2，图2中(A)为血浆L-精氨酸在研究期间的变化情况，可以看出，在研究期间，与安慰剂对照组相比，干预组研究对象的血浆L-精氨酸浓度出现了显著的升高。L-精氨酸干预组和安慰剂对照组在各个时间点的血浆L-精氨酸浓度的组间差异比较结果如图2中(B)所示。由两组组间差异的比较结果可知，与安慰剂对照组相比，L-精氨酸干预组研究对象的血浆L-精氨酸的增加值要显著高于安慰剂对照组(p<0.001)。

参见图3，图3中(A)为L-精氨酸干预组与安慰剂对照组在各时间点静息血压与干预研究开始时基线血压水平差值的变化描述。由图可知，与安慰剂对照组相比，在L-精氨酸干预组，研究对象在干预研究开始后的各时间点的静息血压水平表现出了更大幅度的下降(相对于干预开始前血压值)。在L-精氨酸干预组，与干预研究开始时(第1天)的血压水平相比较，在外出步行开始时0h(即服用L-精氨酸补充剂的第14天)，研究对象的SBP、DBP和MAP分别降低3.8±12.7mmHg，2.3±7.3mmHg和2.8±8.4mmHg(p<0.05)；在外出步行开始后2.5h(即步行结束后0.5h)，研究对象的SBP、DBP和MAP分别降低10.2±13.2mmHg，6.1±8.3mmHg和7.5±9.2mmHg(p<0.05)；在外出步行开始后24h(即步行结束后22h)，研究对象的SBP、DBP和MAP分别降低4.0±11.0mmHg，3.5±7.7mmHg和3.7±8.0mmHg(p<0.05)。而在安慰剂对照组中，仅在外出步行开始后2.5h，研究对象的SBP和MAP分别显著降低4.9±10.2mmHg和3.2±6.9mmHg(p<0.05)。L-精氨酸干预组和安慰剂对照组在各个时间点的静息血压变化量的组间差异比较结果如图3中(B)所示。结果表明，与安慰剂对照组相比，L-精氨酸干预组在外出步行开始后2.5h的SBP、DBP和MAP与干预研究开始时的血压水平的差值显著降低，3个指标的组间差异分别为-5.3mmHg(95％CI：-9.9，-0.7)，和-4.3mmHg(95％CI：-7.2，-1.3)和-4.6mmHg(95％CI：-7.9，-1.3)。

L-精氨酸干预组和安慰剂对照组在各个时间点的动态血压变化量的组内变化情况及组间差异比较结果如图4所示。图4中(A)为两组研究对象在2h外出步行期间的动态血压与干预研究开始时的血压水平(第1天)的差值变化情况。结果表明，在外出步行2h期间，L-精氨酸干预组研究对象的动态血压变化量与安慰剂对照组的变化量相比，均有不同程度的降低。图4中(B)为两组研究对象在外出步行2h期间动态血压变化量组间差异比较。与安慰剂对照组相比，L-精氨酸干预组研究对象的动态血压变化量在外出步行2h期间显著降低(p<0.05)，具体表现为L-精氨酸干预组ABP-SBP在外出步行2h开始后的45min(-7.5mmHg)，75min(-9.1mmHg)，105min(-7.3mmHg)和120min(-7.4mmHg)较安慰剂对照组有显著下降；L-精氨酸干预组ABP-DBP在外出步行2h开始后45min(-7.1mmHg)，60min(-4.8mmHg)，75min(-5.7mmHg)，90min(-5.3mmHg)和120min(-7.7mmHg)较安慰剂对照组有显著下降；L-精氨酸干预组ABP-MAP在外出步行2h开始后45min(-6.1mmHg)，60min(-5.5mmHg)，75min(-6.5mmHg)，90min(-5.5mmHg)，105min(-4.7mmHg)和120min(-7.9mmHg)较安慰剂对照组有显著降低。

由图5可知，在男性研究对象中，与安慰剂对照组相比，L-精氨酸干预组在外出步行开始后2.5h的静息SBP、DBP和MAP与干预研究开始时血压水平的差值有显著的下降(p<0.05)，其中SBP在2.5h降低了11.3mmHg(95％CI：-18.5，-4.1)；DBP降低了7.0mmHg(95％CI：-12.1，-1.9)；MAP降低了8.4mmHg(95％CI：-14.0，-2.9)。与此相反，在女性研究对象中，L-精氨酸干预组和安慰剂对照组静息血压的组间差异未达到统计学意义。

由图6可知，在未服用降压药的研究对象中，与安慰剂对照组相比，L-精氨酸干预组在外出步行2h开始0h和2.5h的静息SBP、DBP和MAP与干预研究开始时的血压水平的差值有显著的下降(p<0.05)，其中SBP在0h和2.5h分别降低了6.9mmHg(95％CI：-13.2，-0.5)和7.3mmHg(95％CI：-13.7，-0.9)；DBP分别降低了3.4mmHg(95％CI：-6.6，-0.3)和5.1mmHg(95％CI：-9.1，-1.2)；MAP分别降低了4.6mmHg(95％CI：-8.3，-0.8)和5.8mmHg(95％CI：-10.4，-1.3)。与此相反，在服用降压药的研究对象中，L-精氨酸干预组和安慰剂对照组无显著的组间差异。

综上所述，本发明公开了L-精氨酸在制备保护外出步行中老年人(50岁以上)心血管健康的L-精氨酸补充剂中的应用，属于营养补充剂领域。L-精氨酸补充剂可通过增加血浆L-精氨酸的浓度来降低外出步行期间中老年人的血压水平，特别地，本研究发现L-精氨酸的作用在未服用降压药的人群中效果更为明显，能够独立于其他降压药而发生作用。L-精氨酸能够显著改善大气污染环境下的敏感人群的心血管健康水平。

以上内容仅为说明本发明的技术思想，不能以此限定本发明的保护范围，凡是按照本发明提出的技术思想，在技术方案基础上所做的任何改动，均落入本发明权利要求书的保护范围之内。