产生耐寒的水果以实现低温检疫的方法及系统

本申请相关于并且要求2018年11月6日提交的标题为：水果检疫的系统及方法(System and Method for Fruits Quarantin)的共同拥有的美国临时专利申请第62/756,084号的权益，其以引用的方式整体并入本文。

技术领域

本发明涉及一种制备耐寒的水果，特别是耐受例如低温检疫的过程。

背景技术

水果及蔬菜统称为“农产品”，通常在一个国家或地区种植，并在另一个国家或地区消费。当此类农产品进入不同的国家或地区时，通常会进行检疫(quarantine)处理，以确保不存在于进口国或地区中的特定有害生物不会进入当地环境，并入侵进口国或地区中的农产品。为了出口新鲜的农产品，检疫处理必须根除所有有害生物，同时又不影响农产品的质量。由于大多数国家都禁止使用甲基溴，因此已经开发了几种收获后检疫处理的方法，例如辐射、热及冷处理。但是，这些处理方法有局限性：热处理可能会损害水果的感官质量，辐射相对昂贵，其应用也很复杂，冷处理可能会导致冷伤。

例如，芒果生长在有害生物众多的地区，并在世界各地消费。这些与芒果相关的有害生物一旦进入进口国或地区，对农作物的破坏就将是巨大的。来自芒果产区的有害生物包括果蝇，例如地中海果实蝇(Mediterranean fruit fly；Ceratitis capitata)，这种害虫可以破坏整个农作物。因此，芒果进入一个国家或地区后会被常规隔离，并对其果蝇进行大量检查。

芒果本身就是一种热带水果，非常容易受到冷藏(cold storage，CS)的损害及变质。因此，从未将低温检疫(cold quarantining)视为检疫方法。因此，芒果检疫主要基于热处理，如上所述，这会损害水果的感官质量。

尽管在2.2℃下进行18天的低温处理已被美国农业部(United StatesDepartment of Agriculture，USDA)接受作为对包括芒果在内的许多水果类型的果蝇检疫处理，但芒果的最佳冷藏温度为12℃。低于此温度的储存可能导致冷伤。芒果中的这些冷伤例如是水果上的褐色斑点，水果的内部果肉变灰，水果各部位的软化、软斑点以及不规则成熟。

为了延长新鲜农产品的贮藏期，许多研究都集中于提高水果对次优温度的抗性。改性气体(Modified atmosphere，MA)可以减少水分流失，并显着减少包括芒果在内的多种水果的低温。石榴及葡萄柚的打蜡也可以减轻冷伤的症状，并且当用于芒果时，可以延长贮藏期。

发明内容

本发明提供了用于制备耐寒水果的多种系统及多种方法，以维持最小限度的来自例如与低温检疫有关的冷处理的损害(如果有的话)。本发明提供了多种系统及多种方法，其结合了人工催熟、低温调节或环境适应以及改性气体，以增加水果的耐寒性。作为本发明的结果，与储存未成熟的水果，并在销售前使所述水果成熟相比，储存模式是相反的，因为水果首先成熟，然后再进行储存。因此，通常对寒冷敏感的热带水果可以进行低温检疫。

本发明的多个实施例涉及一种处理水果的方法，例如，以将所述水果准备用于冷却过程，例如低温检疫。所述方法包括：使水果成熟；使所述水果经受一改性气体中，以减缓所述水果的新陈代谢；以及通过在一预定时间量内，将所述水果的中心温度于多个预定时间段逐渐降低多个预定温度量，而调节所述水果至适于通过冷却过程进行处理，从而避免所述水果受到冷冲击。

可选地，所述方法使得所述成熟包括人工催熟。

可选地，所述方法使得所述人工催熟包括：使所述水果在一成熟室中经受约150ppm的乙烯。

可选地，所述方法使得所述改性气体包括一浓度为约4至7％的二氧化碳以及一浓度为约8至16％的氧气。

可选地，所述方法使得所述调节包括：在至少3天的一时间段内，将所述水果从约12℃的中心温度冷却到约2℃，每个时间间隔为1天，并且所述多个时间间隔之间的温差不超过7℃。

可选地，所述方法使得使所述水果经受所述改性气体包括：将所述水果包覆在一多孔性聚合物的袋体内。

可选地，所述方法使得所述多孔性聚合物的袋体包括一多孔性聚乙烯的袋体。

可选地，所述方法使得所述聚乙烯是低密度聚乙烯。

可选地，所述方法使得所述多孔性聚乙烯的袋体包括约0.5毫米直径的多个孔。

可选地，所述方法使得将所述水果包覆在所述多孔性聚合物的袋体内包括：所述袋体是封闭的。

可选地，所述方法使得将所述水果包覆在所述多孔性聚合物的袋体内包括：所述袋体是打开的。

可选地，所述方法使得使所述水果经受所述改性气体以及调节所述水果是同时进行的。

可选地，所述方法使得所述水果包括芒果。

本发明的多个实施例涉及一种处理水果的方法，例如，以将所述水果准备用于冷却过程，例如低温检疫。所述方法包括：人工催熟水果；以及通过在一预定时间量内，将所述水果的中心温度于多个预定时间段逐渐降低多个预定温度量，而调节所述水果至适于通过冷却过程进行处理，从而避免所述水果受到冷冲击。

可选地，所述方法使得使所述水果经受一改性气体，以减缓所述水果的新陈代谢。

可选地，所述方法使得所述人工催熟包括：使所述水果在一成熟室中经受约150ppm的乙烯

可选地，所述方法使得所述改性气体包括一浓度为约4至7％的二氧化碳以及一浓度为约8至16％的氧气。

可选地，所述方法使得所述调节包括：在至少3天的一时间段内，将所述水果从约12℃的中心温度冷却到约2℃，每个时间间隔为1天，并且所述多个时间间隔之间的温差不超过7℃。

可选地，所述方法使得使所述水果经受所述改性气体包括：将所述水果包覆在一多孔性聚合物的袋体内。

可选地，所述方法使得所述多孔性聚合物的袋体包括一多孔性聚乙烯的袋体。

可选地，所述方法使得所述聚乙烯是低密度聚乙烯。

可选地，所述方法使得所述多孔性聚乙烯的袋体包括约0.5毫米直径的多个孔。

可选地，所述方法使得将所述水果包覆在所述多孔性聚合物的袋体内包括：所述袋体是封闭的。

可选地，所述方法使得将所述水果包覆在所述多孔性聚合物的袋体内包括：所述袋体是打开的。

可选地，所述方法使得使所述水果经受所述改性气体以及调节所述水果是同时进行的。

可选地，所述方法使得所述水果包括芒果。

本发明的多个实施例涉及一种处理水果的方法，例如，以将所述水果准备用于冷却过程，例如低温检疫。所述方法包括：使一水果经受一改性气体，以减缓所述水果的新陈代谢；以及通过在一预定时间量内，将所述水果的中心温度于多个预定时间段逐渐降低多个预定温度量，而调节所述水果至适于通过冷却过程进行处理，从而避免所述水果受到冷冲击。

可选地，所述方法使得人工催熟所述水果。

可选地，所述方法使得所述人工催熟所述水果包括：使所述水果在一成熟室中经受约150ppm的乙烯。

可选地，所述方法使得所述改性气体包括一浓度为约4至7％的二氧化碳以及一浓度为约8至16％的氧气。

可选地，所述方法使得所述调节包括：在至少3天的一时间段内，将所述水果从约12℃的中心温度冷却到约2℃，每个时间间隔为1天，并且所述多个时间间隔之间的温差不超过7℃。

可选地，所述方法使得使所述水果经受所述改性气体包括：将所述水果包覆在一多孔性聚合物的袋体内。

可选地，所述方法使得所述多孔性聚合物的袋体包括一多孔性聚乙烯的袋体。

可选地，所述方法使得所述聚乙烯是低密度聚乙烯。

可选地，所述方法使得所述多孔性聚乙烯袋体包括约0.5毫米直径的多个孔。

可选地，所述方法使得将所述水果包覆在所述多孔性聚合物的袋体内包括：所述袋体是封闭的。

可选地，所述方法使得将所述水果包覆在所述多孔性聚合物的袋体内包括：所述袋体是打开的。

可选地，所述方法使得使所述水果经受所述改性气体以及调节所述水果是同时进行的。

可选地，所述方法使得所述水果包括芒果。

除非另有定义，否则本文中使用的所有技术及/或科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的相同含义。尽管与本文描述的那些类似或等同的方法及材料可以用于本发明的实施例的实践或测试中，但是下面描述了示例性的方法及/或材料。如有抵触，以专利说明书及其定义为准。另外，材料、方法及示例仅是说明性的，并非意图是限制性的。

附图说明

本文仅通过示例，参考附图描述了本发明的一些实施例。详细并具体地参考附图，要强调的是，所示出的细节是作为示例，并且出于对本发明的实施例的说明性讨论的目的。就此而言，结合附图进行的描述对于本领域技术人员而言显而易见的是可以如何实践本发明的实施例。

现在注意附图，其中相似的附图标记或字符指示相应或相似的组件。在附图中：

图1是成熟参数的A、B、C及D四个部分的图表；

图2是脂质过氧化的A及B两个部分的示图；

图3是释放香气挥发性化合物的A、B、C、D、E及F六个部分的图表；

图4是根据本发明的芒果的一低温检疫的一结果的图表；以及

图5是冷伤(cooling injury,CI)参数的两个部分A及B的图表。

表1及表2构成本文档的一部分。

具体实施方式

本发明提供了用于制备耐寒水果的多种系统及多种方法，以维持最小限度的来自例如与低温检疫有关的冷处理的损害(如果有的话)。本发明提供了用于产生具有耐寒性的水果以实现低温检疫的多种系统及多种方法。本发明提供了多种系统及多种方法，其结合了人工催熟(artificial ripening,AR)、低温调节(low temperature conditioning,LTC)或环境适应以及改性气体(modified atmosphere,MA)，以提高水果的耐寒性。人工催熟通过多种技术进行，包括，例如，在充满乙烯的熟化室(ripening chamber)、熟化室(ripeningroom)、熟化容器等中，使水果成熟，从而使水果开始软化，并开始从绿色变为橙黄色，这在农产品行业中是标准的。例如，将收获的水果在乙烯含量为150ppm(百万分之几)的一熟化室中进行人工催熟一段预定的时间，例如约24小时。此人工催熟可以包括在一温度受控的环境中的额外储存。

例如，芒果等水果开始变软(芒果中低于20牛顿(newton))并开始变色(从绿色变为黄色)(芒果中黄色的色度低于95)，及/或可溶性固体含量增加超过1.5％(芒果中)，并且酸度比未人工催熟之前的未成熟水果的酸度降低(表1、表2、图1)。此外，当芒果在轻微的压力下很容易成熟，并且准备好立即食用时，美国农业部(USDA)将所述芒果定义为成熟的芒果，如USDA 2006年《芒果-装运点及市场检验说明(Mangos–Shipping Point and MarketInspection Instructions)》第9页(共21页)所述。

人工催熟可以是在本发明的任何其他过程之前进行的第一过程，例如，使水果经受改性气体以及调节过程，如下所述。或者，水果可以自然成熟，也可以人工催熟与自然成熟相结合。

例如，将芒果在150ppm乙烯的环境(熟化室)中人工催熟24小时，然后在18℃下储存两天(在一储存室中)。

然后将水果置于一改性气体中，控制所述改性气体中的气体含量。在冷藏期间，所述改性气体经过预定的时间，从而减少了冷伤。此外，所述改性气体有助于降低水果中的氧气浓度，同时增加水果中的二氧化碳，从而减慢水果中的新陈代谢。这种新陈代谢的减少导致红色及黑色斑点、果皮变色、点蚀等减少，其导致水果中的腐烂及异味。

改性气体处理包括，例如，用穿孔(多孔)的袋体覆盖水果(例如，使水果在袋体内)，所述袋体例如聚合物的袋体，例如聚乙烯的袋体，包括穿孔，例如30个直径约0.5毫米的孔，并且例如可从以色列的StePac获得。聚乙烯的袋体是例如低密度聚乙烯(40微米)。在用聚乙烯的袋体覆盖水果之前，可以在覆盖的第1天将袋体保持打开状态以减少湿度。在某些情况下，袋体内的相对湿度约为97至100％，并且无凝结。袋体内的二氧化碳的浓度例如约为4至7％(占改性气体中的总气体的百分比)，而氧气的浓度例如约为8至16％(占改性气体中的总气体的百分比)。例如，袋体也可以是关闭的(例如，密封的)，或者当袋体打开及关闭时的时间段的组合。

水果还经受低温(例如，约2℃)的调节，也称为调节过程或环境适应(环境适应过程)。调节过程允许在一预定时间段内逐渐冷却至预定温度(例如，在达到2.2℃之前逐渐冷却18天，这是地中海果蝇低温检疫的标准)，避免水果受到冲击(冷冲击)。调节可以通过上文详述的人工催熟过程及/或改性气体过程中的一者或两者来执行。调节过程涉及逐渐降低水果的核心温度，以使水果不会受不适宜的寒冷冲击。调节过程包括通过在一预定时间段，例如3至5天，将大气环境温度于一预定时间间隔，例如1天(24小时)，逐渐降低例如约1至8℃的温度量，来降低水果的温度。此时间段或时间跨度允许从起始温度(例如：12℃)开始，并在一结束温度(例如：2.2℃)下结束，这是低温检疫过程的温度。在多个时间间隔之间温度量可以不同，并且多个时间间隔可以具有不同的时间长度。

调节过程，例如一低温调节过程，包括3天的时间段，其中第1天(大约24小时)的冷却包括在约80％的相对湿度下，将温度降低到约12℃，第2天(约24小时)在约82％的相对湿度下，将温度降低到约5℃，第3天(约24小时)，在约75％的相对湿度下，将温度降低到约2℃。

调节过程之后例如可以经历一温度受控或环境温度(20℃)的环境中的一储存期。

一旦人工催熟、改性气体以及调节的过程完成，就可以对水果进行附加处理。此附加处理可以包括低温检疫，例如，在大约2±0.25℃下储存18天。

人工催熟、改性气体以及调节的过程在时间上同时进行，并且可以以任何期望的顺序进行。另外，调节过程可以与人工催熟或改性气体同时进行。

示例

示例1：仪器

可以使用一电子穿透计(penetrometer)(例如，LT-Lutron FG-20kg，印度尼西亚)经由果皮在每个水果的赤道线的两个点上使用11毫米探针来测量水果的硬度(20次测量/处理)。可以使用色度计(例如：Minolta，LR-400/410)在每个水果的赤道线上的两个点来测量水果的颜色(色调)(20次测量/处理)。水果的总可溶性固形物(total soluble solids,TSS)可以通过数字折光仪(例如ATAGO PR-1，日本)来进行测量。酸浓度可以通过自动滴定仪(例如：Metrohm,719S Titrino，瑞士)来进行测量，并可以计算柠檬酸百分数。冷藏室中的温度可以通过一数据采集(Data Acquisition，DAQ)工具-双股线记录仪/数据采集控制系统(例如：来自T.M.I.Barak有限公司,以色列)来进行监控。水果的核心温度也可以使用微型数据记录仪，例如：LITE5032P-EXT-A(傅里叶技术(Fourier Technologies)，以色列)来进行监控。这可以通过将探针插入水果的花萼部或靠近花萼部来完成，大约3厘米深。

示例2：结合改性气体以及低温调节的芒果的凯特(Keitt)及Shelly品种的人工催熟

在此示例中，提供了包括人工催熟、改性气体及低温调节在内的收获后处理组合的实验结果。实验在芒果品种“Keitt”及“Shelly”上进行。在2015至2017年期间进行了实验。在这些实验中，将实验组与对照组进行比较，这些对照组不是在低温检疫(coldquarantining,CQ)之前未进行处理，就是在低温检疫之前未经人工催熟就进行了收获后处理。

低温检疫期间成熟参数的进展：

下表1及表2总结了在2015年及2016年期间进行的实验组与对照组之间比较的比较成熟参数的实验结果。图1的A至D部分的图表表示的是2017年进行的一项实验的类似结果。

可以看出，实验组的冷藏后的硬度明显降低；实验组黄化程度较高；实验组中的水果总可溶性固形物含量较高，尤其是在保质期(shelf life，SL)之前，而实验组中的酸度较低，尤其是在冷藏之前及保质期之后。

低温检疫期间的脂质过氧化：

与冷伤相关的脂质过氧化可能产生次要化合物，包括挥发性化合物，这可能导致水果异味。在图2的A部分中显示了在低温检疫后，对照组以及实验组中的芒果皮的过氧化挥发性产物(己醛、壬醛及乙醇)的气相色谱-质谱(gas chromatography–massspectrometry，GC-MS)分析结果。从A部分明显可见，实验组中挥发物的产生显着降低，即，实验组中己醛、壬醛及乙醇的浓度显着降低。

发光(Luminescence)表明在2℃低温检疫后7至10天，未处理的对照组的过氧化较高。在经历低温调节以及人工催熟的实验组中，在低温检疫19天后出现了亮度，而在经历低温调节以及人工催熟(150ppm的乙烯持续24小时)以及改性气体的实验组中，在整个实验过程中脂质过氧化的迹象非常低。在经历了低温调节、人工催熟及改性气体的实验组中出现的低亮度被认为是较低的冷伤的一预测参数。如图2的B部分所示，显示了在低温检疫中水果所测得的亮度：(1)未处理的水果的对照组(左)；(2)经历低温调节以及人工催熟(150ppm乙烯持续24小时)的水果的实验组(中间)；以及(3)经历低温调节+人工催熟及改性气体的实验组(右)。显示的是平均值加标准误差(SE)。不同的字母表示在P<0.05下有显着差异。

低温检疫对香气挥发的影响：

已知几种挥发物对芒果水果的香气有贡献。图3中的A至F部分包括低温检疫后(“保质期”前)从“Keitt”芒果果皮中释放的所期望的芳香族挥发性化合物的浓度图表。在图3中显示：A部分：α-萜品烯(Terpinen)；B部分：lR-α-蒎烯(Pinene)；C部分：β-蒎烯(Pinene)；D部分：柠烯(Limonene)；E部分：萜品油烯(Terpinolen)；以及F部分：3-蒈烯(Carene)。给出的是平均值及标准误差。不同的字母表示在P<0.05下有显着差异。从多个图表中可以明显看出，与对照组相比，实验组中所期望的芳香族挥发性化合物的浓度明显更高。

低温检疫对接受度的影响：

在水果成熟期间，酸被降解，并且糖增加，导致糖酸比更高，这是是决定消费者接受度及口感的关键参数。如图4所示，与对照组相比，低温检疫后，实验组的接受度及口感指数更高。实验组的水果的特点是在低温检疫过程中具有较低的冷伤易损性，并具有良好的品质，包括良好的口感及香气结合。

芒果水果的冷伤：

通过人工催熟以及改性气体相结合，达到了市场所需的质量水平。冷伤严重程度以黑皮斑点及点蚀(pitting)为指标，用0至10的一冷伤指数(chilling injury,CI)来进行评定，0表示无冷伤，10表示严重冷伤，如图5的A部分及B部分中各自的图表所示。在黑皮斑点的CI指数小于2以及点蚀的CI指数小于1时，考虑营销质量。根据本发明的各个方面的组合，包括人工催熟(artificial ripening，AR)、改性环境(modified environment，MA)以及低温调节(low temperature conditioning，LTC)，导致CI指数降低到了消费者可以接受的水平(图4及图5，表1及表2)。

已知冷伤与活性氧的产生增加密切相关(Cao等人，“褪黑素通过减轻氧化损伤来提高桃子采后水果的耐冷性(Melatonin increases chilling tolerance in post-harvest peach fruit by alleviating oxidative damage)”，《科学报告(ScientificReports)》，8，806,2018年)，活性氧的产生导致脂质过氧化及降解。通过体内成像系统检测水果发光可以无损地确定早期脂质过氧化(Sivankalyani等人，“芒果果皮中的转录组动力学揭示了寒冷胁迫的机制(Transcriptome dynamics in mango fruit peel revealsmechanisms of chilling stress)”，《植物科学前沿(Frontiers in Plant Science)》7,2016年，https：//doi.org/10.3389/Fpls.2016.01579)。在这些示例中，人工催熟以及改性气体的综合处理具有较低的亮度，表明脂质过氧化降低(图2，B部分)以及冷伤降低。此较低的脂质过氧化还表现为亚麻酸的降解减少以及脂蛋白C6及C9挥发物例如己醛及壬醇的减少(图2，A部分)，这与芒果水果中的脂质过氧化以及冷逆境(chilling stress)有关(Sivankalyani等人，“冷逆境上调芒果水果中α-亚麻酸的氧化途径并诱导C6及C9醛的挥发(Chilling Stress Upregulatesα-Linolenic Acid-Oxidation Pathway and InducesVolatiles of C6and C9 Aldehydes in Mango Fruit)”，《农业与食品化学学报(Journalof Agricultural and Food Chemistry)》，65，632-638,2017年)(以下简称“Sivankalyani等人(2017)”)。

芒果香气挥发物分析和消费者接受度：

人工催熟处理的水果冷藏后，对芒果的香气挥发物α-萜品烯(Terpinen)、lR-α-蒎烯(Pinene)、β-蒎烯(Pinene)、萜品油烯(Terpinolen)、以及3-蒈烯(Carene)进行气相色谱-质谱分析表明，它们的增加(图3)。此外，人工催熟处理过的水果的冷藏显示降低的冷伤，并且良好的口感产生高水平的消费者接受度。此处显示的结果表明，冷藏后，水果可以立即食用了。即食水果可以在20℃下保存长达4天，同时保持相对良好的品质及低腐烂。

材料及方法：

水果材料：在2015年8月、2017年8月(Keitt)及2016年8月(Shelly)收获了季中成熟、全尺寸以及未成熟的芒果水果(Mangifera indica L.)，并将其从Mor储藏设施运输到以色列火山中心农业研究组织(1小时，在大气环境下)。在低温检疫实验实验中，出口等级“Keitt”及“Shelly”水果(芒果)的重量在390克至450克之间，每个纸箱有9颗“Keitt”水果以及10颗“Shelly”水果。不论是否进行下文详述的收获后处理，将水果在2℃下保存19天。

收获后及低温检疫处理：

人工催熟：将收获的水果用150ppm的乙烯进行人工催熟，然后在18℃下保存2天。

改性气体：将水果装入低密度穿孔(30孔、直径0.5毫米)性聚乙烯的袋体(StePac,以色列)中，在1天后从袋体中取出以避免冷凝(相对湿度97至98％，二氧化碳4至7％)。对照组未受改性气体。

低温调节：温度在3天内逐渐降低：第1天的温度为12℃(相对湿度为74.80％)，第2天的温度为5℃(相对湿度为86.90％)，第3天的温度为2℃(相对湿度为91.80％)。未经处理的水果在2℃下储存19天(水果的核心温度为2±0.25℃)。低温检疫后，在20℃下保存4天(相对湿度为63.3％)。每个处理重复使用5个装有9颗水果(Keitt)或10颗水果(Shelly)的纸箱。室温是通过DAQ工具-双股线记录仪/数据采集控制系统(T.M.I.Barak有限公司,以色列)进行监控的。水果的核心温度是使用微型数据记录仪LITE5032P-EXT-A(傅里叶技术(Fourier Technologies)，以色列)通过将其探针插入芒果靠近芒果核的位置深3厘米处来监控的。

生理测量：

冷藏(2℃、19天)及保质期(20℃)后，检查芒果水果的冷伤症状。通过CI指数评估黑皮斑点及点蚀引起的冷伤严重程度(0至10级，0为无冷伤，10为严重冷伤)。其他生理参数按相对等级进行评分：颜色(1至10级；1＝绿色；10＝橙色)；果实硬度(1至10级；1＝柔软，10＝坚硬)；腐烂严重程度(0至10级；0＝无腐烂，10＝严重腐烂)，腐烂发生率(decayincidence)以盒子中腐烂水果的百分比表示。

其他收获后参数使用仪器进行测量。使用11毫米探针穿透计(LT Lutron FG-20kg，印度尼西亚)通过果皮在每个水果的两个点测试硬度(每个处理10个水果)。通过色度计(Minolta LR-400/410)在每个水果的两个点测量水果的颜色(色调)(每个处理10个水果)。水果的总可溶性固形物可以通过数字折光仪(ATAGO PR-1，日本)来进行测量，并以白利糖度(Brix)百分比(％TSS)表示。酸度浓度通过自动滴定仪(Metrohm，719S Titrino，瑞士)来进行测量，并基于柠檬酸百分比计算。

挥发物的鉴定及定量：

通过气相色谱仪7890A以及质谱仪5975C(安捷伦科技公司(AgilentTechnologies Inc.),美国)对香气以及脂质过氧化挥发物进行鉴定及定量。经过低温检疫处理后，从2017年的Keitt品种的3个生物重复的每个重复的5个水果中随机采集芒果皮样品(1克)。立即用2毫升NaCl(20％w/v)将样品储存在密封的20毫升深色玻璃瓶(LaPhaPack，德国)，以阻止进一步的酶活性。将S-2-辛醇(Sigma-Aldrich)为内标。在每次试验中，将不含样品的NaCl用作对照。如Sivankalyani等人(2017)所述，调整GC-MS运行的分析条件。挥发性物质的鉴定基于NIST质谱数据库版本5。鉴定的挥发性物质根据内标线性保留指数进行定量，并表示为μg/kg鲜重(FW)。

水果感官特性：

为了确定“Keitt”芒果在低温检疫后的水果的感官特性，由品评小组使用1至10的指数评估接受度及口感。这些感官特性是根据印象、甜味、酸味及异味的综合评价，分别对对照、改性气体、人工催熟以及人工催熟加改性气体来判断的。

脂质过氧化及发光：

采用临床前活体成像系统(Perkin Elmer，美国)以及高灵敏电荷耦合照相机检测脂质过氧化引起的细胞膜改变。在活体成像系统评估之前，将冷藏后的Keitt品种的水果在黑暗中重新适应2小时。在640至770nm波长下发射20分钟后记录了脂质的氧化降解，如Britic等人提出的“使用自发光子发射来成像植物组织中的脂质氧化模式(Usingspontaneous photon emission to image lipid oxidation patterns in planttissues)”，《植物学报(Plant Journal)》，67，1103-1105,2011年；以及Sivankalyani等人,2017年。记录了3次生物重复的数据，并提供了一张代表性图片，如图2所示。

统计分析：

来自三个不同实验的数据表示为平均值±标准误差(SE)。以JMP Pro 13.0统计软件，使用单因子方差分析(One-way ANOVA)来比较处理组与对照组的均值，并对数据进行邓肯的多范围检验(Duncan's multiple-range tests)。P<0.05的差异被认为是显着的。黑色斑点指数(0至10级)、点蚀指数(0至10级)、接受度指数(1至10级)、口感指数(1至10级)、硬度指数(1至10级)、黄化指数(1至10级)以及侧腐烂严重度指数(0至10级)(如上所述等级)的计算公式如下：

本发明适用于几乎所有水果，例如柑橘类水果、甜椒、石榴、桃子、李子、油桃及鳄梨。

本文提及的所有出版物、专利申请及其他参考文献通过引用整体并入本文。

本领域技术人员将理解，本发明不限于以上已经具体示出及描述的内容。相反，本发明的范围由所附权利要求书限定，并且包括本领域技术人员在阅读前述说明后将想到的上述各种特征及其变型以及修改的组合及子组合。