用于检测样品中的不同分析物的多重方法

技术领域

本文提供的技术涉及用于平行检测样品中的不同分析物的多重方法和试剂盒，其通过对所述分析物进行顺序信号编码来进行，以及用于筛选、鉴定和/或测试物质和/或药物的体外方法和用于诊断疾病的体外方法，以及光学复用系统。

背景技术

生物和非生物样品中的少量分析物的分析和检测已成为临床和分析环境中的常规实践。为此目的已经建立了许多分析方法。其中一些使用编码技术，其将特定的可读代码分配给特定的第一分析物，该代码不同于分配给特定的第二分析物的代码。

该领域的现有技术之一是所谓的‘单分子荧光原位杂交’(smFISH)，其主要开发用于检测样品中的mRNA分子。在Lubeck et al.(2014),Single-cell in situ RNAprofiling by sequential hybridization,Nat.Methods 11(4),p.360-361中，经由特异性的直接标记的探针组来检测目的mRNA。在一轮杂交和检测后，将mRNA特异性探针组从mRNA上洗脱下来，并且将具有其他(或相同)荧光标记的同一探针组用于下一轮的杂交和成像，以在几轮中生成基因特异性颜色代码方案。该技术需要每个转录物几个不同标记的探针组，并且需要在每轮检测后使这些探针组变性。

该技术的进一步发展不使用直接标记的探针组。取而代之，探针组的寡核苷酸提供用作杂交链式反应(HCR)(能够实现信号放大的技术)的引发剂的核酸序列；参见Shah etal.(2016),In situ transcription profiling of single cells reveals spatialorganization of cells in the mouse hippocampus,Neuron 92(2),p.342-357。

Chen et al.(2015),RNA imaging.Spatially resolved,highly multiplexedRNA profiling in single cells,Science 348(6233):aaa6090中描述了称为‘多重抗误差荧光原位杂交’(multiplexed error robust fluorescence in situ hybridization,merFISH)的另一种技术。其中，经由特异性探针组来检测目的mRNA，该特异性探针组为荧光标记的寡核苷酸的后续特异性杂交提供额外的序列元件。每个探针组提供总共16种序列元件中的四种不同的序列元件。在特异性探针组与目的mRNA杂交后，进行所谓的读出杂交。在每次读出杂交中，与序列元件之一互补的16种荧光标记的寡核苷酸中的一种杂交。所有读出寡核苷酸都使用相同的荧光颜色。成像后，经由照明破坏荧光信号，并且在无需变性步骤下进行下一轮读出杂交。结果，为每个mRNA种类生成二进制代码。16轮中4种信号的独特信号特征仅使用用于将特异性探针组与目的mRNA结合的单轮杂交来产生，随后对由单一荧光颜色标记的读出寡核苷酸进行16轮杂交。

该技术的进一步发展通过以下来提高通量：使用两种不同的荧光颜色、经由读出寡核苷酸和荧光标记之间的二硫键切割消除信号以及替代杂交缓冲液；参见Moffitt etal.(2016),High-throughput single-cell gene-expression profiling withmultiplexed error-robust fluorescence in situ hybridization,Proc.Natl.Acad.Sci.U S A.113(39),p.11046-11051。

以下中描述了称为‘内含子seqFISH’的技术：Shah et al.(2018),Dynamics andspatial genomics of the nascent transcriptome by intron seqFISH,Cell 117(2),p.363-376。其中，经由特异性探针组来检测目的mRNA，该特异性探针组为荧光标记的寡核苷酸的后续特异性杂交提供额外的序列元件。每个探针组在每轮颜色编码中提供12种可能的序列元件(代表使用的12种“伪颜色”)中的一种。每轮颜色编码由四个系列杂交组成。在这些系列杂交的每一个中，三个读出探针(每个都用不同的荧光团标记)与mRNA特异性探针组的相应元件杂交。成像后，通过55％甲酰胺缓冲液剥离读出探针，并且随后进行下一次杂交。在5轮颜色编码(每轮具有4个系列杂交)之后，完成颜色编码。

EP 0 611 828公开了使用桥接元件将信号生成元件募集到特异性结合分析物的探针。更具体的陈述描述了经由募集桥接核酸分子的特异性探针来检测核酸。这种桥接核酸最终会募集信号生成核酸。该文件还描述了使用具有用于信号生成元件的多于一个结合位点用于信号放大的桥接元件，如分支DNA。

Player et al.(2001),Single-copy gene detection using branched DNA(bDNA)in situ hybridization,J.Histochem.Cytochem.49(5),p.603-611描述了一种方法，其中经由提供额外序列元件的特异性探针组来检测目的核酸。在第二步骤中，预放大物(preamplifier)寡核苷酸与该序列元件杂交。该预放大物寡核苷酸包括用于在后续步骤中杂交的放大物(amplifier)寡核苷酸的多个结合位点。这些放大物寡核苷酸为标记的寡核苷酸提供多个序列元件。这样就建立了导致信号放大的分支的寡核苷酸树。

以下中描述了对这种提及的方法的进一步发展：Wang et al.(2012),RNAscope:anovel in situ RNA analysis platform for formalin-fixed,paraffin-embeddedtissues,J.Mol.Diagn.14(1),p.22-29，其使用mRNA特异性探针的另一种设计。其中，两个mRNA特异性寡核苷酸必须非常接近地杂交，以提供可以募集预放大物寡核苷酸的序列。这样，通过降低假阳性信号的数量提高了方法的特异性。

Choi et al.(2010),Programmable in situ amplification for multiplexedimaging of mRNA expression,Nat.Biotechnol.28(11),p.1208-1212公开了称为‘HCR-杂交链式反应’的方法。经由提供额外序列元件的特异性探针组来检测目的mRNA。额外的序列元件是启动杂交链式反应的起始序列。基本上，杂交链式反应基于亚稳态寡核苷酸发夹，在经由起始序列打开第一个发夹后，该亚稳态寡核苷酸发夹自组装成聚合物。

该技术的进一步发展使用所谓的分裂起始探针，该探针必须非常接近地杂交以形成用于HCR的起始序列，类似于RNAscope技术，这降低了假阳性信号的数量；参见Choi etal.(2018),Third-generation in situ hybridization chain reaction:multiplexed,quantitative,sensitive,versatile,robust.Development 145(12)。

Mateo et al.(2019),Visualizing DNA folding and RNA in embryos atsingle-cell resolution,Nature Vol,568,p.49ff.,公开了称为‘染色质结构的光学重建(ORCA)’的方法。该方法旨在使染色体线可见。

EP 2 992 115 B1描述了顺序单分子杂交的方法，并提供了通过顺序条形码化来检测和/或量化细胞、组织、器官或生物中的核酸的技术。

然而，本领域已知的方法具有许多缺点。尤其，它们不灵活、昂贵、复杂、耗时并且经常提供不准确的结果。尤其，现有方法的编码能力较低，并且不符合现代分子生物学和医学的要求。

在此背景下，本公开的目的是提供方法，通过该方法可以降低或甚至避免现有技术方法的缺点。

发明内容

本公开涉及用于平行检测样品中的不同分析物的新型多重方法和试剂盒，其通过所述分析物的顺序信号编码来进行。

在第一方面，本公开的实施方式尤其涉及一种用于检测样品中的不同分析物的多重方法，所述方法通过对所述分析物进行顺序信号编码来进行，所述方法包括：

(A)使所述样品与用于编码至少20种不同分析物的至少二十(20)个不同的分析物特异性探针组接触，每个分析物特异性探针组与不同的分析物相互作用，其中，如果所述分析物是核酸，则每个分析物特异性探针组包括与相同分析物的不同亚结构特异性相互作用的至少五(5)种分析物特异性探针，每种分析物特异性探针包括

(aa)结合元件(S)，与待编码的不同分析物之一特异性相互作用，以及

(bb)标识符元件(T)，包括对于待编码的分析物唯一的核苷酸序列(唯一标识符序列)，

其中，特定分析物特异性探针组的分析物特异性探针与另一分析物特异性探针组的分析物特异性探针在所述标识符元件(T)的核苷酸序列方面不同，

其中，每个分析物特异性探针组中的所述分析物特异性探针与相同的分析物结合并且包括对于所述分析物唯一的标识符元件(T)的相同核苷酸序列；以及

(B)使所述样品与每种分析物的至少一个解码寡核苷酸组接触，其中，在用于个体分析物的每个解码寡核苷酸组中，每个解码寡核苷酸包括：

(aa)标识符连接物(connector)元件(t)，包括与相应分析物特异性探针组的标识符元件(T)的唯一标识符序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，以及

(bb)翻译物(translator)元件(c)，包括允许信号寡核苷酸特异性杂交的核苷酸序列；

其中，用于个体分析物的一组解码寡核苷酸与用于不同分析物的另一组解码寡核苷酸在第一连接元件(t)方面不同；以及

(C)使所述样品与至少一个信号寡核苷酸组接触，每个信号寡核苷酸包括：

(aa)翻译物连接物元件(C)，包括与解码寡核苷酸中包括的翻译物元件(c)的核苷酸序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，以及

(bb)信号元件。

(D)检测由所述信号元件引起的信号；

(E)从所述样品中选择性地除去所述解码寡核苷酸和信号寡核苷酸，从而基本上保持所述分析物特异性探针与所述待编码的分析物的特异性结合；

(F)执行包括步骤B)到E)的至少三(3)个另外的循环，以生成具有每种分析物的码字的编码方案，其中尤其最后一个循环可以在步骤(D)处停止。

在第二方面，本公开的实施方式涉及用于多重分析物编码的试剂盒，所述试剂盒包括：

(A)用于编码至少20种不同分析物的至少二十(20)个不同的分析物特异性探针组，每个分析物特异性探针组与不同的分析物相互作用，其中，如果所述分析物是核酸，则每个分析物特异性探针组包括与相同分析物的不同亚结构特异性相互作用的至少五(5)种分析物特异性探针，每种分析物特异性探针包括

(aa)结合元件(S)，与待编码的不同分析物之一特异性相互作用，以及

(bb)标识符元件(T)，包括对于待编码的分析物唯一的核苷酸序列(唯一标识符序列)，

其中，特定分析物特异性探针组的分析物特异性探针与另一分析物特异性探针组的分析物特异性探针在所述标识符元件(T)的核苷酸序列方面不同，

其中，每个分析物特异性探针组中的所述分析物特异性探针与相同的分析物结合并且包括对于所述分析物唯一的标识符元件(T)的相同核苷酸序列；以及

(B)每种分析物的至少一个解码寡核苷酸组，其中，在用于个体分析物的每个解码寡核苷酸组中，每个解码寡核苷酸包括：

(aa)标识符连接物元件(t)，包括与相应分析物特异性探针组的标识符元件(T)的唯一标识符序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，以及

(bb)翻译物元件(c)，包括允许信号寡核苷酸特异性杂交的核苷酸序列；

其中，用于个体分析物的一组解码寡核苷酸与用于不同分析物的另一组解码寡核苷酸在标识符连接元件(t)方面不同；以及

(C)信号寡核苷酸组，每个信号寡核苷酸包括：

(aa)翻译物连接物元件(C)，包括与解码寡核苷酸中包括的翻译物元件(c)的核苷酸序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，以及

(bb)信号元件。

在第三方面，本公开的实施方式涉及用于诊断疾病的体外方法，所述疾病选自包括以下项的组：癌症、神经元疾病、心血管疾病、炎性疾病、自身免疫疾病、由于病毒或细菌感染引起的疾病、皮肤疾病、骨骼肌疾病、牙齿疾病和产前疾病，所述方法包括使用根据本公开的多重方法。

在第四方面，本公开的实施方式提供用于诊断植物疾病的体外方法，所述植物疾病选自包括以下项的组：由生物胁迫引起的疾病，优选由感染和/或寄生虫来源引起的疾病，或由非生物胁迫引起的疾病，优选由营养缺乏和/或不利环境引起的疾病，所述方法包括使用根据本公开的多重方法。

在第五方面，本公开的一些实施方式涉及适用于根据本公开的方法的光学复用系统，至少包括：

-至少一个反应容器，所述反应容器用于容纳根据权利要求1至25中任一项所述的试剂盒或试剂盒的一部分；

-检测单元，所述检测单元包括显微镜、尤其是荧光显微镜

-摄像头

-液体处理装置。

此外，一些实施方式涉及用于多重分析物编码的试剂盒，包括

(A)任选地用于编码至少20种不同分析物的至少二十(20)个不同的分析物特异性探针组，每个分析物特异性探针组与不同的分析物相互作用，其中，如果所述分析物是核酸，则每个分析物特异性探针组包括与相同分析物的不同亚结构特异性相互作用的至少五(5)种分析物特异性探针，每种分析物特异性探针包括

(aa)结合元件(S)，与待编码的不同分析物之一特异性相互作用，以及

(bb)标识符元件(T)，包括对于待编码的分析物唯一的核苷酸序列(唯一标识符序列)，

其中，特定分析物特异性探针组的分析物特异性探针与另一分析物特异性探针组的分析物特异性探针在所述标识符元件(T)的核苷酸序列方面不同，

其中，每个分析物特异性探针组中的分析物特异性探针与相同的分析物结合并且包括对所述分析物唯一的标识符元件(T)的相同核苷酸序列；以及

(B)每种分析物的至少一个解码寡核苷酸组，其中，在用于个体分析物的每个解码寡核苷酸组中，每个解码寡核苷酸包括：

(aa)标识符连接物元件(t)，包括与相应分析物特异性探针组的标识符元件(T)的唯一标识符序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，以及

(bb)翻译物元件(c)，包括允许信号寡核苷酸特异性杂交的核苷酸序列；

其中，用于个体分析物的一组解码寡核苷酸与用于不同分析物的另一组解码寡核苷酸在标识符连接元件(t)方面不同；以及

(C)信号寡核苷酸组，每个信号寡核苷酸包括：

(aa)翻译物连接物元件(C)，包括与解码寡核苷酸中包括的翻译物元件(c)的核苷酸序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，以及

(bb)信号元件。

在第六方面，一些实施方式提供了用于筛选、鉴定和/或测试物质和/或药物的体外方法，包括：

(a)使包括样品的测试样品与物质和/或药物接触

(b)通过使用根据本公开的方法对所述分析物进行顺序信号编码来检测样品中的不同分析物。

根据本公开，每个靶标(例如一个单一基因的mRNA)或靶标组使用唯一标签(标识符)。可以形成组以指示某种身份、过程、生物功能或疾病(例如：细胞类型、炎症、信号处理、癌症)。

出人意料地，根据本公开的方法和试剂盒导致复杂性降低。具有不同结合序列的许多不同探针共享相同的(每个靶标一个)唯一标签。这些标签降低了序列复杂性(至每个靶标一个)，并且还具有预定的恒定特性(例如热力学稳定性)。

根据本公开的方法和试剂盒的优点是：

a)确定标签身份的过程具有完全的灵活性，例如使用更多或更少的信号和/或轮次、不同数量的荧光团、每个标签的总信号数量→与大量靶标(例如100，这些需要8轮才能获得相同水平的置信度)相比，可以在更少轮次(例如4轮)中以高置信度识别更少的靶标数量(例如20)，即使在两种情况下都使用完全相同的唯一标签。

b)在许多连续杂交轮次中使用(再循环)所有唯一标签，并且所有初级探针在每一轮鉴定中贡献(提供关于其身份的信息)。

c)所有标签共享相同的预定义特性(例如，允许选择性变性的热力学稳定性)。

在一些有利实施方式中，将唯一标签设计如下：

-在过程中的所有寡核苷酸(探针、解码物(decoder)、读出(readout))之间没有交叉杂交，因此所有标签序列都可以一起使用(兼容)

-不同唯一标签的连接物元件(桥)之间没有交叉杂交

-唯一标签的杂交稳定性应在窄范围内：尽可能稳定(快速杂交，即短循环时间)，但与初级探针(用于差异变性，不除去初级探针)相比显著不同(在这种情况下不太稳定)

因此，本说明书尤其涉及使用标记的和未标记的核酸序列组用于经由特异性杂交平行地对不同分析物进行特异性定量和/或空间检测。与可用的不同检测信号相比，该技术允许区分更多不同的分析物。区分是经由分析物的顺序信号编码来实现的，这些信号编码是通过几个循环的特异性杂交、信号检测和杂交核酸序列的选择性洗脱来实现的。与其他最先进的方法相比，提供可检测信号的寡核苷酸不直接与样品特异性核酸序列相互作用，而是由所谓的“解码寡核苷酸”介导。这种机制解耦了分析物特异性寡核苷酸和信号寡核苷酸之间的依赖性。解码寡核苷酸的使用允许更高的灵活性，同时显著减少所需的不同信号寡核苷酸的数量，这反过来又增加了通过一定数量的检测轮次实现的编码能力。解码寡核苷酸的使用导致了顺序信号编码技术，例如比其他方法更灵活、更便宜、更简单、更快速和/或更准确。

此外，本公开涉及使用改善的解码寡核苷酸来提高编码方案的效率。所谓的“多解码物”允许募集不止仅一种信号寡核苷酸，并且因此可以通过利用两种或更多种不同信号寡核苷酸的组合来生成新的信号类型，而不会降低信号的亮度。

在详细描述本公开之前，应当理解，本公开不限于所描述的本方法的步骤的特定组成部分。还应当理解，本文使用的术语仅用于描述特定实施方式的目的，并且不旨在是限制性的。必须注意，除非上下文另有明确规定，否则如在说明书和所附权利要求中使用的，单数形式“一个(a)”“一种(an)和“该/所述(the)”包括单数和/或复数引用。此外应理解，在给出由数值界定的参数范围的情况下，该范围被认为包括这些限制值。

附图说明

图1：其中分析物是核酸并且探针组包括与分析物特异性结合的寡核苷酸的实施方式。探针包括允许解码寡核苷酸杂交的唯一标识符序列。

图2：其中分析物是蛋白质并且探针组包括与分析物特异性结合的蛋白质(这里：抗体)的实施方式。探针包括允许解码寡核苷酸杂交的唯一标识符序列。

图3：根据本公开的方法的流程图。

图4：解码和信号寡核苷酸应用的替代选择。

图5：通过两种不同信号类型和三轮检测对三种不同核酸序列进行信号编码的实例；在此实例中，编码方案包括错误检测。

图6：生成的码字的数量(对数标度)针对于检测循环的数量。

图7：基于单步效率计算的5轮编码方案的总效率。

图8：不同实验之间相对转录物丰度的比较。

图9：不同实验之间相对转录物丰度的相关性。

图10：细胞间信号分布的比较。

图11：细胞内信号分布的比较。

图12：不同细胞周期依赖性转录物的分布模式。

图13：使用具有2个标签(A和B)和没有标签(-)的8轮代码检测多个靶标。表示靶标1、2、3、4、5、20和n。表示编码方案的第1、2、3和8轮。这里，空白是代码的一部分。

图14：可以通过使用可检测标志物的编码方案执行多个靶标的检测。结束方案还可以包括“0”作为标志物。这意指在特定位置未检测到转录物。因此，编码方案可以由仅使用两种基因特异性探针的以下构建体表示：

1)具有可检测标记F：成像期间可检测

2)具有可检测标记F和淬灭剂Q：成像期间不可检测

3)具有淬灭剂Q：成像期间不可检测

4)没有标记F：成像期间不可检测

5)没有信号寡核苷酸：成像期间不可检测

6)具有不能募集信号寡核苷酸的解码物寡核苷酸

7)没有解码物寡核苷酸：成像期间不可检测

图15：多解码物的可能结构。数字描述了实例。(A)是唯一标识符序列，(a)是解码寡核苷酸或多解码物的相应序列，以及(c1)至(c3)是不同的序列元件，它们与不同的信号寡核苷酸特异性结合。实例2至5示出了多解码物的不同版本。不同序列元件的顺序以及信号寡核苷酸结合元件的数量是不固定的。实例1示出了正常的解码寡核苷酸，因为只有一个信号寡核苷酸结合元件(c1)。

图16：通过使用多解码物和产生三种不同信号类型的两种不同的信号寡核苷酸和三轮检测对三种不同的核酸序列进行信号编码的实例。在该实例中，编码方案包括错误检测和纠正。

图17：生成的码字的数量(对数标度)针对于检测循环的数量。merFISH的码字数量不会随着检测循环的数量呈指数增长，但随着每个增加的轮次而变得不那么有效。相比之下，对于内含子SeqFISH、不使用多解码物的本公开的方法、具有多解码物的方法，码字数量呈指数增长。使用多解码物的方法的曲线斜率远高于在先发明的曲线斜率，导致在20轮检测后可用的码字超过20 000 000倍。

具体实施方式

本文公开了用于检测样品中的不同分析物的新型多重方法和试剂盒，其通过所述分析物的顺序信号编码来进行。

本公开描述了使用标记的和未标记的核酸序列组用于经由特异性杂交平行地对不同分析物进行特异性定量和/或空间检测。与可用的不同检测信号相比，该技术允许区分更多不同的分析物。可以经由分析物的顺序信号编码来实现区分，这些信号编码是通过几个循环的特异性杂交、信号检测和杂交核酸序列的选择性洗脱来实现的。

与其他最先进的方法相比，提供可检测信号的寡核苷酸不直接与样品特异性核酸序列相互作用，而是由所谓的“解码寡核苷酸”介导。这种机制解耦了分析物特异性寡核苷酸和信号寡核苷酸之间的依赖性。解码寡核苷酸的使用允许更高的灵活性，同时显著减少所需的不同信号寡核苷酸的数量，这反过来又增加了通过一定数量的检测轮次实现的编码能力。

解码寡核苷酸的使用导致了顺序信号编码技术，它比其他方法更灵活、更便宜、更简单、更快速和/或更准确。

A.定义

根据本公开，“分析物”是被特异性检测为存在或不存在于样品中并且在其存在的情况下对其进行编码的对象。其可以为任何种类的实体，包括目的蛋白质、多肽、蛋白质或核酸分子(例如RNA、PNA或DNA)。分析物提供用于与分析物特异性探针特异性结合的至少一个位点。有时在本文中术语“分析物”由“靶标”代替。根据本公开的“分析物”包括对象(例如至少两个个体核酸、蛋白质或肽分子)的复合物。在本公开的实施方式中，“分析物”不包括染色体。在本公开的另一实施方式中，“分析物”不包括DNA。

在一些实施方式中，分析物可以是“编码序列(coding sequence)”、“编码序列(encoding sequence)”、“结构核苷酸序列”或“结构核酸分子”，其是指当处于适当调控序列的控制下时通常经由mRNA被翻译成多肽的核苷酸序列。编码序列的边界由5'-末端的翻译起始密码子和3'-末端的翻译终止密码子决定。编码序列可以包括但不限于基因组DNA、cDNA、EST和重组核苷酸序列。

如本文所指的“样品”是怀疑包括待编码的分析物的呈液体或固体形式的组合物。尤其，样品是生物样品，优选包括生物组织，进一步优选包括生物细胞和/或提取物和/或细胞的部分。例如，细胞是原核细胞或真核细胞，尤其是哺乳动物细胞，尤其是人细胞。在一些实施方式中，生物组织、生物细胞、提取物和/或细胞的部分是固定的。尤其特，分析物固定在透化样品，诸如包含细胞的样品中。

如在本公开中使用的，“细胞”、“细胞系”和“细胞培养物”可以互换使用，并且所有这些名称都包括后代。因此，词语“转化体”或“转化细胞”包括原代对象细胞和由其衍生的培养物，而不考虑转移次数。还可以理解，由于有意或无意的突变，所有后代的DNA含量可能并不完全相同。包括与在最初转化的细胞中筛选的具有相同功能的突变后代。

“编码方案”可以描述与待检测的分析物相关联的码字组。每个码字涉及分析物之一，并且可以与所有其他码字区分开来。码字在此是由方法的检测循环提供的符号序列。码字内的符号是可检测的信号或不存在信号。码字不需要包括在方法中使用的所有不同信号。码字中符号的数量由检测循环的数量定义。

如本文所用，“寡核苷酸”是指短核酸分子，诸如DNA、PNA、LNA或RNA。取决于连续序列元件的数量，寡核苷酸的长度在4-200个核苷酸(nt)、优选6-80nt、更优选8-60nt、更优选10-50nt、更优选12至35nt的范围内。核酸分子可以是完全或部分单链的。寡核苷酸可以是线性的或可以包括发夹或环结构。寡核苷酸可以包括修饰，诸如生物素、标记部分、封闭部分或其他修饰。

“分析物特异性探针”由至少两个元件组成，即与分析物之一特异性相互作用的所谓结合元件(S)，以及包括‘唯一标识符序列’的所谓标识符元件(T)。结合元件(S)可以是核酸诸如杂交序列或适配体，或肽结构诸如抗体。

“探针”也由至少两个元件组成，即与分析物之一特异性相互作用的所谓结合元件(S)，以及包括‘唯一标识符序列’的所谓标识符元件(T)。结合元件(S)可以是核酸诸如杂交序列或适配体，或肽结构诸如抗体。

尤其，在一些实施方式中，结合元件(S)包括以下部分，该部分是来自亲和物质的亲和部分或是亲和物质整体,该亲和物质选自由以下项组成的组：抗体、抗体片段、受体配体、酶底物、凝集素、细胞因子、淋巴因子、白介素、血管生成或毒力因子、变应原、肽变应原、重组变应原、变应原独特型抗体、自身免疫引发结构、组织排斥诱导结构、免疫球蛋白恒定区及其衍生物、突变体或其组合。在另外有利的实施方式中，抗体片段是Fab、scFv；单个结构域或其片段、双scFv、Fab2、Fab3、微型抗体、巨型抗体、双抗体、三抗体、四抗体或tandab，尤其是单链可变区片段(scFv)。

与其他唯一标识符相比，分析物特异性探针所包括的“唯一标识符序列”在其序列中是唯一的。在本上下文中，“唯一”意指它仅特异性识别一种分析物，诸如周期蛋白A、周期蛋白D、周期蛋白E等，或替代地，它仅特异性识别分析物组，而不依赖于分析物组是否包括基因家族。因此，待由该唯一标识符编码的分析物或分析物组可以基于标识符元件(T)的唯一标识符序列与待编码的所有其他分析物或分析物组区分开来。或者，换句话说，对于特定分析物或分析物组只有一个“唯一标识符序列”，但不超过一个，即甚至不是两个。由于唯一标识符序列的唯一性，标识符元件(T)与恰好一种类型的解码寡核苷酸杂交。唯一标识符序列的长度在8-60nt、优选12-40nt、更优选14-20nt的范围内，这取决于平行编码的分析物的数量和所需的相互作用的稳定性。唯一标识符可以是分析物特异性探针的序列元件，直接或通过接头、共价键或高亲和力结合模式来附接，例如抗体-抗原相互作用、链霉亲和素-生物素相互作用等。应当理解，术语“分析物特异性探针”包括多个探针，其可能以以下方式在其结合元件(S)方面不同：每个探针结合相同的分析物但可能结合其不同的部分，譬如待编码的核酸分子所包括的核苷酸序列的不同(例如相邻)或重叠部分。然而，多个探针中的每一个都包括相同的标识符元件(T)。

“二分标记探针”包括能够与分析物杂交的结合序列以及能够结合可检测信号分子如荧光团或包括荧光团的核酸序列的结合探针序列。

“解码寡核苷酸”或“衔接子”或“衔接子区段”由至少两个序列元件组成。可以特异性结合唯一标识符序列的一个序列元件，称为“标识符连接物元件”(t)或“第一连接物元件”(t)，以及特异性结合信号寡核苷酸的第二序列元件，称为“翻译物元件”(c)。序列元件的长度在8-60nt、优选12-40nt、更优选14-20nt的范围内，这取决于待平行编码的分析物的数量、所需相互作用的稳定性以及使用的不同信号寡核苷酸的数量。两个序列元件的长度可以相同或可以不同。

在一些有利的实施方式中，本公开的试剂盒和/或方法中的解码寡核苷酸可以是“多解码物”。“多解码物”是由至少三个序列元件组成的解码寡核苷酸。一个序列元件(标识符连接物元件(t))可以特异性结合唯一标识符序列(标识符元件(T))，以及至少两个其他序列元件(翻译物元件(c))特异性结合不同的信号寡核苷酸(这些序列元件中的每一个特异性结合信号寡核苷酸，该信号寡核苷酸不同于由多解码物的其他元件募集的所有其他信号寡核苷酸)。序列元件的长度在8-60nt、优选12-40nt、更优选14-20nt的范围内，这取决于平行检测的分析物的数量、所需的稳定性和使用的不同信号寡核苷酸的数量。序列元件的长度可以相同或可以不同。

因此，在一些有利的实施方式中，解码寡核苷酸是包括以下项的多解码物：

-标识符连接物元件(t)，包括与相应分析物特异性探针组的标识符元件(T)的唯一标识符序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，以及

-至少两个翻译物元件(c)，其各自包括允许不同信号寡核苷酸特异性杂交的核苷酸序列。

因此，第一翻译物元件与第二翻译物元件结合不同的信号寡核苷酸。尤其，信号寡核苷酸的不同之处在于信号寡核苷酸中包括的信号元件，例如荧光团的种类。

如本文所用的“信号寡核苷酸”或“报告子(reporter)”包括至少两个元件，即所谓的“翻译物连接物元件”(C)或“第二连接物元件”(C)，其具有可与解码寡核苷酸的翻译物元件(c)的核苷酸序列的至少一部分特异性杂交的核苷酸序列，以及提供可检测信号的“信号元件”。该元件可以主动生成可检测信号或经由操纵(例如荧光激发)提供这样的信号。典型的信号元件是例如催化可检测反应的酶、荧光团、放射性元素或染料。

“组”是指多个部分或对象，例如分析物特异性探针或解码寡核苷酸，无论所述多个的个体成员是否彼此相同或不同。在分析物特异性探针组中，分析物特异性探针在标识符元件(T)中是相同的，但可以包括不同的结合元件(S)，用于与相同分析物特异性相互作用但用于与待编码的相同分析物的不同亚结构特异性相互作用。

“选择性变性”可以是以下项的过程：以最高效率去除结合的解码寡核苷酸和信号寡核苷酸，同时靶标特异性探针必须以最高效率保持杂交。这两个组合事件的总效率可以至少为：两个检测循环为0.22、三个检测循环为0.37、四个检测循环为0.47、五个检测循环为0.55、六个检测循环为0.61、七个检测循环为0.65、八个检测循环为0.69，九个检测循环为0.72和10个检测循环为0.74、11个检测循环为0.76、以及12个检测循环为0.78。

在本公开的实施方式中，单组是指多个寡核苷酸。

“分析物特异性探针组”是指多个部分或对象(例如分析物特异性探针)，其彼此不同并与分析物的独立区域结合。单个分析物特异性探针组的特征还在于相同的唯一标识符。

“解码寡核苷酸组”是指对独立于码字长度实现编码所需的某个特定唯一标识符特异的多个解码寡核苷酸。“解码寡核苷酸组”中包括的每个解码寡核苷酸和所有解码寡核苷酸结合分析物特异性探针的相同唯一标识符元件(T)。

在某些实施方式中，解码寡核苷酸的这种结合或杂交模式可以转化为“码字”。例如，对于分析物，码字也可以是“101”和“110”，其中值1表示结合，以及值0表示没有结合。在其他实施方式中，码字也可以具有更长的长度(见图13)。码字可以与分析物特异性探针的特异性唯一标识符序列直接相关。因此，不同的分析物特异性探针可以匹配某些码字，然后可以基于解码寡核苷酸的结合模式来用于识别分析物特异性探针的不同分析物。然而，如果没有明显的结合，那么在本实例中码字将是“000”。

在一些实施方式中，每个码字中的值也可以以不同的方式分配。例如，值0可以表示结合，而值1表示没有结合。类似地，值1可以表示二级核酸探针与一种类型的信号实体的结合，而值0可以表示二级核酸探针与另一种类型的可区分的信号实体的结合。例如，可以经由荧光的不同颜色来区分这些信号实体。在一些情况下，码字中的值不必局限于0和1。这些值也可以从较大的字母中提取，诸如三元(例如，0、1和2)或四元(例如，0、1、2、和3)系统。例如，每个不同的值可以由不同的可区分信号实体来表示，包括(在某些情况下)可以由信号的缺失来表示的一个值。

用于每种分析物的码字可以按顺序分配，也可以随机分配。譬如，第一分析物可以分配至101，而第二核酸靶标可以分配至110。另外，在一些实施方式中，可以使用错误检测系统或错误纠正系统，诸如汉明系统(Hamming system)、戈莱码(Golay code)或扩展汉明系统(或SECDED系统，即单错误纠正、双错误检测)来分配码字。一般而言，这样的系统可用于识别发生错误的位置，并且在一些情况下，这样的系统系统还可用于纠正错误并确定正确的码字应该是什么。例如，诸如001的码字可以被检测为无效并且使用这样的系统将其纠正为101，例如，如果001之前没有被分配给不同的靶序列。可以使用多种不同的错误纠正码，其中许多以前已开发用于计算机行业；然而，这样的错误纠正系统通常没有在生物系统中使用。这样的错误纠正码的额外实例在下文更详细讨论。

“基本上互补”是指，当提及两个核苷酸序列时，两个序列可以在严格条件下彼此特异性杂交，从而形成具有经由氢键(沃森-克里克(Watson-and-Crick)碱基对)相互连接的正义链和反义链的杂交核酸分子。“基本上互补”不仅包括沿整个链的完美碱基配对，即完美互补序列，还包括不完美互补序列，然而，其在严格条件下仍具有相互杂交的能力。在专家中，公知的是“基本上互补”序列与完全或完美互补序列具有至少88％的序列同一性。

“百分比序列同一性”或“百分比同一性”继而意指，在将待比较的序列(“比较序列”)与描述的或要求保护的序列(“参考序列”)比对之后，将序列与要求保护的或描述的序列进行比较。然后根据下式确定百分比同一性：百分比同一性＝100[1-(C/R)]

其中，C是在参考序列和比较序列之间的比对长度上参考序列和比较序列之间的差异数，其中

(i)在比较序列中没有对应的比对碱基或氨基酸的参考序列中的每个碱基或氨基酸，以及

(ii)参考序列中的每个缺空位(gap)以及

(iii)与比较序列中的比对碱基或氨基酸不同的参考序列中的每个比对碱基或氨基酸构成差异，以及(iiii)比对必须从比对序列的位置1开始；

并且R是在与比较序列比对的整个长度上参考序列中碱基或氨基酸的数量，参考序列中产生的任何空位也被计为碱基或氨基酸。

如果存在于比较序列和参考序列之间的比对如上计算的百分比同一性约等于或大于指定的最小百分比同一性，则比较序列与参考序列具有指定的最小百分比同一性，即使比对可能存在其中上面计算的同一性百分比小于指定的同一性百分比的地方。

在如本文所理解的“温育”步骤中，在技术人员熟知的允许特异性结合或杂交反应的条件，例如pH、温度、盐条件等下，使各自部分或对象诸如探针或寡核苷酸彼此接触。因此，这些步骤可以优选在液体环境诸如本领域公知的缓冲系统中实施。

根据本公开的“除去”步骤可以包括通过如本领域已知的某些条件，例如pH、温度、盐条件等，将待除去的部分或对象诸如探针或寡核苷酸洗去。

应当理解，在根据本公开的方法的实施方式中，可以平行编码多种分析物。这需要在步骤(1)中使用不同的分析物特异性探针组。特定组的分析物特异性探针不同于另一组的分析物特异性探针。这意指组1的分析物特异性探针与分析物1结合，组2的分析物特异性探针与分析物2结合，组3的分析物特异性探针与分析物3结合等。在该实施方式中，在根据本公开的方法中还需要使用不同的解码寡核苷酸组。

特定组的解码寡核苷酸不同于另一组的解码寡核苷酸。这意指，组1的解码寡核苷酸与上述分析物特异性探针组1的分析物特异性探针结合，组2的解码寡核苷酸与上述分析物特异性探针组2的分析物特异性探针结合，组3的解码寡核苷酸与上述分析物特异性探针组3的分析物特异性探针结合等。

在其中多种分析物待平行编码的该实施方式中，不同的分析物特异性探针组可以作为不同的分析物特异性探针组的预混合物提供和/或不同的解码寡核苷酸组可以作为不同的解码寡核苷酸组的预混合提供。每种混合物可以包含在单个小瓶中。替代地，不同的分析物特异性探针组和/或不同的解码寡核苷酸组可在步骤中单独提供。

“试剂盒”是可用于实施本公开的用途和/或方法的个体元件的组合，其中这些元件优化在方法中一起使用。试剂盒还可以包含额外的试剂、化学品、缓冲液、反应小瓶等，它们可用于实施根据本公开的方法。这样的试剂盒统一了根据本公开的方法工作所需的所有基本要素，因此使错误风险最小化。因此，这样的试剂盒还允许半熟练的实验室工作人员执行根据本公开的方法。

术语“猝灭剂”或“猝灭剂染料”或“猝灭剂分子”是指够降低荧光报告染料或供体染料的荧光的染料或等效分子，诸如核苷鸟苷(G)或2'-脱氧鸟苷(dG)。猝灭剂染料可以是荧光染料或非荧光染料。当猝灭剂是荧光染料时，其荧光波长通常与报告染料的波长显著不同，并且在测定期间通常不监测猝灭剂荧光。本公开的一些实施方式公开了包括猝灭剂和/或猝灭剂与信号元件的组合的信号寡核苷酸(参见图14)，并且因此在成像期间信号寡核苷酸不可检测。

在本公开的实施方式中，样品是生物样品，优选包括生物组织，进一步优选包括生物细胞。生物样品可以来源于器官、类器官、细胞培养物、干细胞、细胞悬液、原代细胞、被病毒、细菌或真菌感染的样品、真核或原核样品、涂片、疾病样品、组织切片。

该方法特别适用于编码、鉴定、检测、计数或量化生物样品中的分析物或单个分析物分子，即诸如包含核酸或蛋白质作为所述分析物的样品。应当理解，生物样品可以是其在其自然环境中的形式(即，液体、半液体、固体等)，或者是经过加工的，例如，作为装置表面上的干燥薄膜，其可以在实施该方法之前重新液化。

在本公开的另一实施方式中，在步骤(2)之前，将生物组织和/或生物细胞固定。例如，在一些实施方式中，在引入探针之前将细胞和/或组织固定，例如以保持分析物如核酸在细胞内的位置。用于固定细胞的技术是本领域普通技术人员已知的。作为非限制性实例，可以使用化学品诸如甲醛、多聚甲醛、戊二醛、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸等来固定细胞。在一种实施方式中，可以使用Hepes-谷氨酸缓冲液介导的有机溶剂(HOPE)来固定细胞。

这种措施具有的优点是待编码的分析物例如核酸或蛋白质是固定的并且不能逃逸。在这样做时，分析物然后准备好通过根据本公开的方法进行更好的检测或编码。

在分析物特异性探针组内的又另外的实施方式中，个体分析物特异性探针包括与待编码的分析物之一的不同亚结构特异性相互作用的结合元件(S1、S2、S3、S4、S5)。

通过这种措施，该方法变得更加稳健和可靠，因为分别在方法或循环结束时获得的信号强度增加了。应当理解，一组中的个体探针在与相同分析物结合时在它们在分析物处或分析物上的结合位置或结合位点不同。第一、第二、第三、第四、第五等分析物特异性探针的结合元件S1、S2、S3、S4、S5等因此结合到或结合在不同的位置上，然而，该位置可以重叠或可以不重叠。

在有利的实施方式中，本公开涉及用于多重分析物编码的试剂盒，其包括：

(A)用于编码至少20种不同分析物的至少二十(20)个不同的分析物特异性探针组，每个分析物特异性探针组与不同的分析物相互作用，其中，如果分析物是核酸，则每个分析物特异性探针组包括与相同分析物的不同亚结构特异性相互作用的至少五(5)种分析物特异性探针，每种分析物特异性探针包括

(aa)结合元件(S)，与待编码的不同分析物之一特异性相互作用，以及

(bb)标识符元件(T)，包括对于待编码的分析物唯一的核苷酸序列(唯一标识符序列)，

其中，特定分析物特异性探针组的分析物特异性探针与另一分析物特异性探针组的分析物特异性探针在标识符元件(T)的核苷酸序列方面不同，

其中，每个分析物特异性探针组中的分析物特异性探针与相同的分析物结合并且包括对于所述分析物唯一的标识符元件(T)的相同核苷酸序列；以及

(B)每种分析物的至少一个解码寡核苷酸组，其中，在用于个体分析物的每个解码寡核苷酸组中，每个解码寡核苷酸包括：

(aa)标识符连接物元件(t)，包括与相应分析物特异性探针组的标识符元件(T)的唯一标识符序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，以及

(bb)翻译物元件(c)，包括允许信号寡核苷酸特异性杂交的核苷酸序列；

其中，用于个体分析物的一组解码寡核苷酸与用于不同分析物的另一组解码寡核苷酸在标识符连接元件(t)方面不同；以及

(C)信号寡核苷酸组，每个信号寡核苷酸包括：

(aa)翻译物连接物元件(C)，包括与解码寡核苷酸中包括的翻译物元件(c)的核苷酸序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，以及

(bb)信号元件。

多重方法或测定允许同时测量多种分析物。根据本公开，其可以用于确定样品中多种预定(已知)分析物(如核酸靶序列)的存在或不存在。分析物可以是“预定”的，因为它的序列是已知的以设计成与该靶标结合的探针。

在根据本公开的一些有利的实施方式中，平行地检测和/或量化样品中的至少20种、尤其至少25种、尤其至少30种不同的分析物。例如，可以有至少5个、至少10个、至少20个、至少50个、至少75个、至少100个、至少300个、至少1,000个、至少3,000个、至少10,000个或至少30,000个施用于样品(例如同时或依次)的可区分的分析物特异性探针。

在用于多重化的一些有利实施方式中，需要二十(20)个或更多个不同的分析物特异性探针组用于编码至少20种或更多种不同的分析物，尤其多于50种、多于100种或多于200种。本公开的多重方法中，尤其靶向至少20个不同的分析物(例如mRNA分子)，即标签组。

在一些有利的实施方式中，实施至少4轮来收集用于识别分析物的信息，其中，多次读出提高了识别的准确性并避免了假阳性。唯一标签可以通过各种技术来识别，包括例如利用标记的探针直接或间接杂交，或通过测序(通过合成、连接)。尤其，标签的身份可以用一个单一信号(二进制代码)、两个或更多个信号编码，其中，信号可以是荧光标记(例如与寡核苷酸附接的)。

在根据本公开的一些有利实施方式中，试剂盒不包含如A)项下定义的分析物特异性探针组。

优选地，如果根据本公开的试剂盒或方法中的分析物是核酸，则每个分析物特异性探针组包括至少五(10)种分析物特异性探针，尤其至少十五(15)种分析物特异性探针，尤其至少二十(20)种分析物特异性探针，其与相同分析物的不同亚结构特异性相互作用。核酸分析物包括特定的DNA分子，例如基因组DNA、核DNA、线粒体DNA、病毒DNA、细菌DNA、细胞外或细胞内DNA等，以及特定的mRNA分子，例如hnRNA、miRNA、病毒RNA、细菌RNA、细胞外或细胞内RNA等。

优选地，如果根据本公开的试剂盒或方法中的分析物是肽、多肽或蛋白质，则每个分析物特异性探针组包括至少两(2)种分析物特异性探针，尤其至少三(3)种分析物特异性探针，尤其至少四(4)种分析物特异性探针，其与相同分析物的不同亚结构特异性相互作用。

在根据本公开的一些有利实施方式中，试剂盒包括至少两个不同的信号寡核苷酸组，其中，每组中的信号寡核苷酸包括不同的信号元件并且包括不同的连接物元件(C)。

尤其，试剂盒可以包括每种分析物的至少两个不同的解码寡核苷酸组，其中，包括在这些不同组中的解码寡核苷酸包括相同的标识符连接物元件(t)，该标识符连接物元件包括与相应分析物特异性探针组的标识符元件(T)的唯一标识符序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，并且其中，每种分析物的不同组的解码寡核苷酸在翻译物元件(c)方面不同，该翻译物元件(c)包括允许信号寡核苷酸特异性杂交的核苷酸序列。

在一些实施方式中，试剂盒可以包含每种分析物的至少两个不同的解码寡核苷酸组，其中包含在这些不同组中的解码寡核苷酸包含相同的标识符连接物元件(t)，该标识符连接物元件(t)包含与相应分析物特异性探针组的标识符元件(T)的唯一标识符序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，并且其中用于至少一种分析物的不同组的解码寡核苷酸在翻译物元件(c)方面不同，该翻译物元件(c)包括允许信号寡核苷酸特异性杂交的核苷酸序列。

在一些有利的实施方式中，包括不同翻译物元件(c)的每种分析物的不同的解码寡核苷酸组的数量对应于包括不同连接物元件(C)的不同的信号寡核苷酸组的数量。然而，特定解码寡核苷酸组中的解码寡核苷酸与对于特定分析物唯一的相同标识符元件(T)相互作用。尤其，用于不同分析物的所有解码寡核苷酸组可以包括一种或多种相同类型的一个或多个翻译物元件(c)。

在另一方面，本公开总体上涉及包括以下动作的方法：将样品暴露于多种分析物特异性探针；对于每种分析物特异性探针，确定样品内分析物特异性探针的结合；基于分析物特异性探针、解码寡核苷酸和信号寡核苷酸的结合产生码字；并且对于至少一些码字，将码字与有效码字匹配。在某些实施方式中，分析物特异性探针、解码寡核苷酸和信号寡核苷酸的这种结合或杂交模式可以转化为“码字”。例如，譬如，对于第一分析物和第二分析物，码字可以分别为“101”和“110”，其中值1表示以下项的结合，以及值0表示以下项没有结合：解码寡核苷酸的结合和/或信号寡核苷酸的结合，没有和/或淬灭信号元件。因此，检测轮次/循环中的分析物在成像期间是不可检测的。

为了在个体分析物的码字中产生这样的零(0)，试剂盒可以包括：

(D)用于与分析物特异性探针的特定标识符元件(T)结合的至少一个非信号解码寡核苷酸组，其中，在相同非信号解码寡核苷酸组中的解码寡核苷酸与相同的不同标识符元件(T)相互作用,

其中，每个非信号解码寡核苷酸包括标识符连接物元件(t)，该标识符连接物元件包括与唯一标识符序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，并且每个非信号解码寡核苷酸不包括含有允许信号寡核苷酸特异性杂交的核苷酸序列的翻译物元件(c)。

为了在个体分析物的码字中产生这样的零(0)，试剂盒可以包括：

(D)用于与分析物特异性探针的特定标识符元件(T)结合的至少一个非信号解码寡核苷酸组，其中，在相同非信号解码寡核苷酸组中的解码寡核苷酸与相同的不同标识符元件(T)相互作用,

其中，每个非信号解码寡核苷酸包括标识符连接物元件(t)，该标识符连接物元件包括与唯一标识符序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，并且包括由于不稳定的结合序列和/或由于翻译物元件太短而不与信号寡核苷酸相互作用/结合的翻译物元件(c)，该翻译物元件(c)包括允许信号寡核苷酸特异性杂交的核苷酸序列。

在一些有利的实施方式中，试剂盒包括：

(D)用于与分析物特异性探针的至少两种不同的标识符元件(T)结合的至少两(2)个不同的非信号解码寡核苷酸组，每个非信号解码寡核苷酸组与不同的标识符元件(T)相互作用，

其中，每个非信号解码寡核苷酸包括标识符连接物元件(t)，该标识符连接物元件包括与唯一标识符序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，并且每个非信号解码寡核苷酸不包括含有允许信号寡核苷酸特异性杂交的核苷酸序列的翻译物元件(c)。

在一些有利的实施方式中，不同的非信号解码寡核苷酸组可以包括在不同的非信号解码寡核苷酸组的预混合物中或分开存在。

此外，在一些有利的实施方式中，试剂盒可以包括：

(E)非信号寡核苷酸组，每个非信号寡核苷酸包括：

(aa)翻译物连接物元件(C)，其包括与翻译物元件(c)的核苷酸序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，以及

(bb)猝灭剂(Q)，信号元件和猝灭剂(Q)，或不包括信号元件。

在一些有利的实施方式中，试剂盒包括：

(E)至少两个非信号寡核苷酸组，每个非信号寡核苷酸包括：

(aa)翻译物连接物元件(C)，其包括与翻译物元件(c)的核苷酸序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，以及

(bb)猝灭剂(Q)，信号元件和猝灭剂(Q)，或不包括信号元件。

在一些有利的实施方式中，不同的非信号寡核苷酸组可以包括在不同的非信号寡核苷酸组的预混合物中或分开存在。

此外，在一些实施方式中，特定解码寡核苷酸组中的解码寡核苷酸与对于特定分析物唯一的相同标识符元件(T)相互作用。

在一些有利的实施方式中，不同的解码寡核苷酸组可以包括在不同的解码寡核苷酸组的预混合物中或分开存在。在一些有利的实施方式中，不同的分析物特异性探针组可以包括在不同的分析物特异性探针组的预混合物中或分开存在。在一些有利的实施方式中，不同的信号寡核苷酸组可以包括在不同的信号寡核苷酸组的预混合物中或分开存在。

在一些有利的实施方式中，提供了与探针组的唯一标识符序列特异性杂交的解码寡核苷酸和/或多解码物的混合物。在一些实施方式中，解码寡核苷酸包括至少两个序列元件，与相应探针组的唯一标识符序列互补的第一元件以及提供用于信号寡核苷酸的特异性杂交的序列的第二序列元件(翻译物元件)，翻译物元件定义了募集到解码寡核苷酸的信号类型。在一些实施方式中，使用包括至少三个序列元件的多解码物，与相应探针组的唯一标识符序列互补的第一元件，以及提供用于至少两种不同信号寡核苷酸的特异性杂交的序列的至少额外的序列元件(翻译物元件)。翻译物元件定义了募集到多解码物的信号的类型。在图15中可以看到多解码物的不同可能结构。由于多解码物确实为每个翻译物元件募集了完整的信号寡核苷酸，每个通道中的信号亮度不低于解码寡核苷酸的信号亮度。

多解码物的使用进一步提高了编码方案的效率。图16示出了使用多解码物的可能编码方案，其基于用于实例的相同条件，利用具有两个序列元件的解码寡核苷酸。可以清楚地看到，利用与图5的实例中使用的相同数量的轮次和相同数量的不同信号寡核苷酸，基于多解码物的编码方案可以产生更高的汉明距离。

如上所述，待编码的分析物可以是核酸，优选DNA、PNA或RNA，尤其是mRNA、肽、多肽、蛋白质和/或其混合物。

在一些有利的实施方式中，结合元件(S)包括允许与待编码的分析物特异性结合的氨基酸序列。结合元件(S)可以包括以下部分，该部分是来自亲和物质的亲和部分或是亲和物质整体,该亲和物质选自由以下项组成的组：抗体、抗体片段、anticalin蛋白质、受体配体、酶底物、凝集素、细胞因子、淋巴因子、白介素、血管生成或毒力因子、变应原、肽变应原、重组变应原、变应原独特型抗体、自身免疫引发结构、组织排斥诱导结构、免疫球蛋白恒定区及其组合。

在一些有利的实施方式中，结合元件(S)可以包括选自由以下项组成的组的抗体或抗体片段或者是选自由以下项组成的组的抗体或抗体片段：Fab、scFv；单结构域或其片段、双scFv、F(ab)2、F(ab)3、微型抗体、双抗体、三抗体、四抗体和tandab。

本公开尤其涉及一种用于检测样品中的不同分析物的多重方法，该方法通过对所述分析物进行顺序信号编码来进行，该方法包括以下步骤：

(A)使样品与用于编码至少20种不同分析物的至少二十(20)个不同的分析物特异性探针组接触，每个分析物特异性探针组与不同的分析物相互作用，其中，如果分析物是核酸，则每个分析物特异性探针组包括与相同分析物的不同亚结构特异性相互作用的至少五(5)种分析物特异性探针，每种分析物特异性探针包括

(aa)结合元件(S)，与待编码的不同分析物之一特异性相互作用，以及

(bb)标识符元件(T)，包括对于待编码的分析物唯一的核苷酸序列(唯一标识符序列)，

其中，特定分析物特异性探针组的分析物特异性探针与另一分析物特异性探针组的分析物特异性探针在标识符元件(T)的核苷酸序列方面不同，

其中，每个分析物特异性探针组中的分析物特异性探针与相同的分析物结合并且包括对于所述分析物唯一的标识符元件(T)的相同核苷酸序列；以及

(B)使样品与每种分析物的至少一个解码寡核苷酸组接触，其中，在用于个体分析物的每个解码寡核苷酸组中，每个解码寡核苷酸包括：

(aa)标识符连接物元件(t)，包括与相应分析物特异性探针组的标识符元件(T)的唯一标识符序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，以及

(bb)翻译物元件(c)，包括允许信号寡核苷酸特异性杂交的核苷酸序列；

其中，用于个体分析物的一组解码寡核苷酸与用于不同分析物的另一组解码寡核苷酸在第一连接元件(t)方面不同；以及

(C)使样品与至少一个信号寡核苷酸组接触，每个信号寡核苷酸包括：

(aa)翻译物连接物元件(C)，包括与解码寡核苷酸中包括的翻译物元件(c)的核苷酸序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，以及

(bb)信号元件。

(D)检测由信号元件引起的信号；

(E)从样品中选择性地除去解码寡核苷酸和信号寡核苷酸，从而基本上保持分析物特异性探针与待编码的分析物的特异性结合；

(F)执行包括步骤B)至E)的至少三(3)个另外的循环，以生成具有每种分析物的码字的编码方案，其中尤其最后一个循环可以在步骤(D)处停止。

如上所述，根据本公开的方法包括从样品中选择性地除去解码寡核苷酸和信号寡核苷酸，从而基本上保持分析物特异性探针与待编码的分析物的特异性结合。尤其所有步骤都按顺序进行。然而，一些步骤可以同时进行，尤其是接触步骤A)至C)，尤其是B)和C)。

通过这种措施，建立了将另外的解码寡核苷酸与相同的分析物特异性探针结合的另一轮/循环的要求，从而最终产生包括多于一个信号的代码或编码方案。该步骤通过应用技术人员熟知的条件和因素来实现，例如pH、温度、盐条件、寡核苷酸浓度、聚合物等。

在本公开的另一实施方式中，该方法可以包括重复步骤(B)-(E)至少三次以生成编码方案。使用这种措施，在由用户实施的四个循环/轮次的情况下，四个信号的代码，其中‘n’为表示轮数的整数。取决于分析物的性质和操作者的需要，根据本公开的方法的编码能力因此增加。在本公开的实施方式中，所述编码方案是预定的并且分配给待编码的分析物。

然而，该措施能够通过提供所采用的解码和信号寡核苷酸的适当顺序实现精确的实验设置，因此，允许将特定分析物正确分配到相应的编码方案。在重复的步骤(B)-(D2)中使用的解码寡核苷酸可以包括与先前步骤(B)-(E)中使用的解码寡核苷酸的翻译物元件(c1)相同的翻译物元件(c2)。在本公开的另一实施方式中，在重复的步骤(B)-(E)中使用解码寡核苷酸包括与先前步骤(B)-(E)中使用的解码寡核苷酸的翻译物元件(c1)不同的翻译物元件(c2)。应当理解，解码元件可以或可以不逐轮(即在包括翻译物元件c2的第二轮(B)-(E)中，在包括翻译物元件c3的第三轮(B)-(E)中，在包括翻译物元件c4的第四轮(B)-(E)中等)改变，其中‘n’为表示轮数的整数。

重复步骤(B)-(E)中使用的信号寡核苷酸可包括与先前步骤(B)-(E)中使用的解码寡核苷酸的信号元件相同的信号元件。在本公开的另外实施方式中，在重复的步骤(B)-(E)中使用信号寡核苷包括与先前步骤(B)-(E)中使用的解码寡核苷酸的信号元件不同的信号元件。在一些实施方式中，使用用于个体分析物的非信号寡核苷酸和/或非信号解码寡核苷酸，导致该循环/位置的码字中的值0。在一些实施方式中，在重复循环中，个体分析物的解码寡核苷酸不与样品接触，这也产生了该循环/位置的码字中的值0。

通过这种措施，每一轮都提供相同或不同的信号，从而产生以由许多不同信号组成的信号序列为特征的编码方案。该措施允许产生与编码方案的所有其他码字不同的唯一代码或码字。在本公开的另一实施方式中，分析物特异性探针的结合元件(S)包括含有以下核苷酸序列的核酸，该核苷酸序列允许与待编码的分析物特异性结合、优选与待编码的分析物特异性杂交。

在一些有利的实施方式中，所有步骤都是自动化的，尤其其中，步骤B)至F)是自动化的，尤其是通过使用根据本公开的机器人系统和/或光学复用系统。在一些实例中，步骤可以在流体系统中执行。

如上所述，利用根据本公开的方法，生成具有每种分析物的码字的编码方案。因此，每种分析物可以与特定码字相关联，其中，所述码字包括多个位置，并且其中，每个位置对应于一个循环，从而产生具有多个码字的多个可区分的编码方案。尤其，所述编码方案可以是预定的并分配给待编码的分析物。

在一些有利的实施方式中，在所执行的循环中对于个体分析物获得的码字包括检测到的信号以及对应于未检测到的信号的额外至少一个元件，如0、1或0、1、2等(也参见图13和图14)。尤其，如果使用根据图14的2至4号的非信号探针或如图14的5号所示出的非信号解码寡核苷酸，或者如果在一个循环中没有解码寡核苷酸与包括在与样品中的相应分析物相互作用的分析物特异性探针中的相应标识符序列接触，则在至少一个循环内没有检测到至少一种分析物的信号。在此循环中，位置具有的值为零(0)。

在一些有利的实施方式中，至少对于一种个体分析物，码字的位置为零(0)。尤其，码字零(0)是通过不使用具有标识符连接物元件(t)的解码寡核苷酸生成的，该标识符连接物元件包括与个体分析物的相应分析物特异性探针的标识符元件(T)的唯一标识符序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列。如上所述，在一些实施方式中，如果在该循环中至少对于一种个体分析物，码字的位置为零(0)，则不使用具有标识符连接物元件(t)的相应解码寡核苷酸，该标识符连接物元件包括与个体分析物的相应分析物特异性探针的标识符元件(T)的唯一标识符序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列。

此外，在一些有利的实施方式中，使样品与至少两个不同的信号寡核苷酸组接触，其中每组中的信号寡核苷酸包括不同的信号元件并且包括不同的连接物元件(C)。

在更特定的实施方式中，使样品与每种分析物至少两个不同的解码寡核苷酸组接触，

其中，这些不同组中包括的解码寡核苷酸包括相同的标识符连接物元件(t)，该标识符连接物元件包括与相应分析物特异性探针组的标识符元件(T)的唯一标识符序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，以及

其中，每种分析物的不同组的解码寡核苷酸在翻译物元件(c)方面不同，该翻译物元件包括允许信号寡核苷酸特异性杂交的核苷酸序列。

在更特定的实施方式中，使样品与每种分析物至少两个不同的解码寡核苷酸组接触，

其中，这些不同组中包括的解码寡核苷酸包括相同的标识符连接物元件(t)，该标识符连接物元件包括与相应分析物特异性探针组的标识符元件(T)的唯一标识符序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，以及

其中，每种分析物的不同组的解码寡核苷酸在翻译物元件(c)方面不同，该翻译物元件包括允许信号寡核苷酸特异性杂交的核苷酸序列；

其中，每个循环仅使用每种分析物的一个解码寡核苷酸组，和/或其中，在不同循环中使用不同的解码寡核苷酸组，同一循环中使用相应信号寡核苷酸组。

在一些有利的实施方式中，包括不同翻译物元件(c)的每种分析物的不同的解码寡核苷酸组的数量对应于包括不同连接物元件(C)的不同的信号寡核苷酸组的数量。用于不同分析物的所有解码寡核苷酸组可以包括一种或多种相同类型的一个或多个翻译物元件(c)。

在根据本公开的方法的一些有利的实施方式中，样品与用于结合分析物特异性探针的特定标识符元件(T)的至少一个非信号解码寡核苷酸组接触，其中，在相同非信号解码寡核苷酸组中的解码寡核苷酸与相同的不同标识符元件(T)相互作用，其中，每个非信号解码寡核苷酸包括标识符连接物元件(t)，该标识符连接物元件包括与唯一标识符序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，并且每个非信号解码寡核苷酸不包括含有允许信号寡核苷酸特异性杂交的核苷酸序列的翻译物元件(c)。

如上所述，样品可以与用于结合分析物特异性探针的至少两种不同的标识符元件(T)的至少两(2)个不同的非信号解码寡核苷酸组接触，每个非信号解码寡核苷酸组与不同标识符元件(T)相互作用，其中，每个非信号解码寡核苷酸包括标识符连接物元件(t)，该标识符连接物元件包括与唯一标识符序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，并且每个非信号解码寡核苷酸不包括含有允许信号寡核苷酸特异性杂交的核苷酸序列的翻译物元件(c)。

在根据本公开的方法的一些有利的实施方式中，不同的非信号解码寡核苷酸组可以包括在不同的非信号解码寡核苷酸组的预混合物中或分开存在。

此外，在根据本公开的方法的一些有利实施方式中，样品与非信号寡核苷酸组接触，每个非信号寡核苷酸包括：

(aa)翻译物连接物元件(C)，其包括与翻译物元件(c)的核苷酸序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，以及

(bb)猝灭剂(Q)，信号元件和猝灭剂(Q)，或不包括信号元件。

在另外的实施方式中，样品可以接触：

至少两个非信号寡核苷酸组，每个非信号寡核苷酸包括：

(aa)翻译物连接物元件(C)，其包括与翻译物元件(c)的核苷酸序列的至少一部分基本上互补的核苷酸序列，以及

(bb)猝灭剂(Q)，信号元件和猝灭剂(Q)，或不包括信号元件。

如上所述，不同的非信号寡核苷酸组可以包括在不同的非信号寡核苷酸组的预混合物中或分开存在。

在另外的实施方式中，特定解码寡核苷酸组中的解码寡核苷酸与对于特定分析物唯一的相同标识符元件(T)相互作用。

如上所述，不同的解码寡核苷酸组可以包括在不同的解码寡核苷酸组的预混合物中或分开存在，以及不同的分析物特异性探针组可以包括在不同的分析物特异性探针组的预混合物中或分开存在，以及不同的信号寡核苷酸组可以包括在不同的信号寡核苷酸组的预混合物中或分开存在。

在根据本公开的方法的一些有利实施方式中，结合元件(S)包括含有以下核苷酸序列的核酸，该核苷酸序列允许与待编码的分析物特异性结合、优选与待编码的分析物特异性杂交。

在根据本公开的方法的一些有利的实施方式中，在步骤A)之后并且步骤B)之前，可以除去未结合的分析物特异性探针，尤其是通过洗涤，另外在步骤B)之后并且步骤C)之前，可以除去未结合的解码寡核苷酸，尤其通过洗涤，另外在步骤C)之后并且步骤D)之前，可以除去未结合的信号寡核苷酸，尤其通过洗涤。

在根据本公开的方法的一些有利实施方式中，分析物特异性探针可以与样品一起温育，从而允许分析物特异性探针与待编码的分析物特异性结合，此外，解码寡核苷酸可以与样品一起温育，从而允许解码寡核苷酸与各自分析物特异性探针的标识符元件(T)特异性杂交，此外，信号寡核苷酸可以与样品一起温育，从而允许信号寡核苷酸与各自解码寡核苷酸的翻译物元件(T)特异性杂交。

如上所述，待编码的分析物可以是核酸，优选DNA、PNA或RNA，尤其mRNA、肽、多肽、蛋白质或其组合。因此，结合元件(S)可以包括允许与待编码的分析物特异性结合的氨基酸序列。结合元件(S)的实例是以下部分，该部分是来自亲和物质的亲和部分或是亲和物质整体,亲和物质选自由以下项组成的组：抗体、抗体片段、anticalin蛋白质、受体配体、酶底物、凝集素、细胞因子、淋巴因子、白介素、血管生成或毒力因子、变应原、肽变应原、重组变应原、变应原独特型抗体、自身免疫引发结构、组织排斥诱导结构、免疫球蛋白恒定区及其组合。尤其，结合元件(S)是选自由以下项组成的组的抗体或抗体片段：Fab、scFv；单结构域或其片段、双scFv、Fab 2、Fab 3、微型抗体、双抗体、三抗体、四抗体和tandab。

通过这种措施，该方法另外发展到这样的程度，即编码的分析物可以通过适于使信号元件可视化的任何手段来检测。可检测的物理特征的实例包括例如光、化学反应、分子质量、放射性等。

在一些有利的实施方式中，由信号元件引起的信号，因此尤其是由信号寡核苷酸与同结合到各自分析物的相应分析物探针相互作用的解码寡核苷酸的结合引起的信号通过以下来确定：

(a)对样品的至少一部分进行成像；和/或

(b)使用光学成像技术；和/或

(c)使用荧光成像技术；和/或

(d)多色荧光成像技术；和/或

(e)超分辨率荧光成像技术。

根据本公开的试剂盒和方法可以理想地用于诊断疾病的体外方法，该疾病选自包括以下项的组：癌症、神经元疾病、心血管疾病、炎性疾病、自身免疫疾病、由于病毒或细菌感染引起的疾病、皮肤疾病、骨骼肌疾病、牙齿疾病和产前疾病。

此外，根据本公开的试剂盒和方法还可以理想地用于诊断植物疾病的体外方法，该植物疾病选自包括以下项的组：由生物胁迫引起的疾病，优选由感染和/或寄生虫来源引起的疾病，或由非生物胁迫引起的疾病，优选由营养缺乏和/或不利环境引起的疾病。

此外，根据本公开的试剂盒和方法还可以理想地用于筛选、鉴定和/或测试物质和/或药物的体外方法，该方法包括：

(a)使包括样品的测试样品与物质和/或药物接触

(b)通过使用根据本公开的方法对所述分析物进行顺序信号编码来检测样品中的不同分析物。

一种适用于根据本公开的方法的光学复用系统，其至少包括：

-反应容器，该反应容器用于容纳根据本公开的试剂盒或试剂盒的一部分；

-检测单元，该检测单元包括显微镜、尤其是荧光显微镜

-摄像头；

-液体处理装置。

在一些实施方式中，光学复用系统可以进一步包括加热和冷却装置和/或机器人系统。

在一些实施方式中，根据本公开的方法编码核酸分析物，诸如mRNA，例如编码特定蛋白质的mRNA。

在一些有利的实施方式中，本文所述的方法用于平行地特异性检测许多不同的分析物。该技术允许区分比可用的不同信号更多数量的分析物。该过程包括至少连续四轮的特异性结合、信号检测和选择性变性(如果需要下一轮)，最终产生信号代码。为了解耦分析物特异性结合与提供可检测信号的寡核苷酸之间的依赖性，引入了所谓的“解码”寡核苷酸。解码寡核苷酸将分析物特异性探针组的信息转录为信号寡核苷酸。

在特定的实施方式中，该方法可以包括以下步骤：1.提供一个或多个分析物特异性探针组，该分析物特异性探针组由一个或多个不同的探针组成，每个探针在与分析物特异性相互作用的结合部分方面不同，单个探针组的所有探针都与一个序列元件(唯一标识符)相连，该序列元件对于单个探针组是唯一的并允许解码寡核苷酸的特异性杂交，2.探针组与分析物的其靶结合位点的特异性结合，3.去除未结合的探针(例如通过洗涤步骤)，4.提供与探针组的唯一标识符序列特异性杂交的解码寡核苷酸的混合物，解码寡核苷酸包括至少两个序列元件，与相应探针组的唯一标识符序列互补的第一元件和提供用于信号寡核苷酸的特异性杂交的序列的第二序列元件(翻译物元件)，翻译物元件定义了募集到解码寡核苷酸的信号的类型，5.解码寡核苷酸与通过结合的探针组提供的唯一标识符序列的特异性杂交，6.去除非结合的解码寡核苷酸(例如通过洗涤步骤)，7.提供信号寡核苷酸的混合物，该信号寡核苷酸包括可被检测的信号以及与前一杂交步骤中使用的解码寡核苷酸之一的翻译物元件特异性杂交的核酸序列，8.信号寡核苷酸的特异性杂交，9.去除未结合的信号寡核苷酸，10.信号的检测，11.选择性释放解码寡核苷酸和信号寡核苷酸，同时特异性探针组与分析物的结合几乎或完全不受影响，12.去除释放的解码寡核苷酸和信号寡核苷酸(例如通过洗涤步骤)，同时特异性探针组与分析物的结合几乎或完全不受影响，重复步骤4至12至少三次，直到检测到足够数量的信号为每种不同的目的分析物生成编码方案。

应当理解，前述特征和以下将要提及的特征不仅可以用于各自情况中指示的组合，还可以用于其他组合或单独使用，而不脱离本公开的范围。

现在通过导致本公开的额外特征、特性和优点的实施方式另外解释本公开。实施方式具有纯粹的说明性性质并且不限制本公开的范畴或范围。特定实施方式中所提及的特征是本公开的一般特征，它们不仅适用于该特定实施方式，而且独立地适用于本公开的任何实施方式的上下文中。

本文公开的方法用于平行地特异性检测许多不同的分析物。该技术允许区分比可用的不同信号更多数量的分析物。该过程优选包括至少连续两轮的特异性结合、信号检测和选择性变性(如果需要下一轮)，最终产生信号代码。为了解耦分析物特异性结合与提供可检测信号的寡核苷酸之间的依赖性，引入了所谓的“解码”寡核苷酸。解码寡核苷酸将分析物特异性探针组的信息转录为信号寡核苷酸。

本公开进一步涉及检测分析物的方法，其包括：

-将多种分析物特异性探针与分析物附接，其中，分析物特异性探针独立地与分析物附接，并且其中，分析物特异性探针共享共同标识符区段(T)；

-将多个第一解码寡核苷酸与分析物特异性探针退火，其中，第一解码寡核苷酸共享第二共同区域以及与共同标识符片区段反向互补的第一共同区域；

-将第一信号寡核苷酸与多个第一解码寡核苷酸中的至少一个退火，使得与第一信号寡核苷酸连接的寡核苷酸与第二共同区域反向互补；

-检测第一信号寡核苷酸；

-除去多个第一解码寡核苷酸；

-将多个第二解码寡核苷酸与分析物特异性探针退火，其中，第二解码寡核苷酸共享与共同标识符区段反向互补的第一共同区域以及不同于第一解码的第二共同区域的第二解码寡核苷酸第二共同区域；

-将第二信号寡核苷酸与多个第二解码寡核苷酸中的至少一个退火，使得与信号寡核苷酸连接的寡核苷酸与第二解码寡核苷酸第二共同区域反向互补；以及检测第二信号寡核苷酸。

尤其，在上述实施方式中，多个第一解码寡核苷酸的第二等分样品与分析物特异性探针退火。此外，多个第一解码寡核苷酸的第一等分样品与分析物特异性探针退火。

在一些实施方式中，没有第二信号寡核苷酸与多个第一解码寡核苷酸中的至少一个退火。尤其，没有第三信号寡核苷酸与多个第一解码寡核苷酸中的至少一个退火。

在一些另外的有利实施方式中，本公开涉及将分析物分配给图像中的位置的方法，包括将荧光图案分配给分析物，观察图像中的位置处的荧光图案，以及将分析物分配给位置，尤其其中，观察荧光图案包括重复以下步骤：使用从可重新接近的池中提取的荧光团标记的寡核苷酸标记位置，在图像中的位置处执行单次激发，以及使分析物与变性剂接触，尤其其中，观察荧光图案包括重复以下步骤：使用从可重新接近的池中提取的荧光团标签募集桥接寡核苷酸标记位置，在图像中的位置处执行单次激发，以及使分析物与变性剂接触。

在一些另外有利的实施方式中，本公开涉及组合物，其包括分布在其中的具有核酸的细胞，其中第一核酸由第一多个探针标记，该第一多个探针靶向第一核酸的相邻区段并且共享共同的第一系链区段；第二核酸由第二多个探针标记，该第二多个探针靶向第二核酸的相邻区段并且共享共同的第二系链区段；并且第三核酸由第三多个探针标记，该第三多个探针靶向第三核酸的相邻区段并且共享共同的第三系链区段；第一衔接子群体，第一衔接子群体包括具有第一系链反向互补区和第一荧光团衔接子系链的分子；第二衔接子群体，第二衔接子群体包括具有第二系链反向互补区和第二荧光团衔接子系链的分子；第三衔接子群体，第三衔接子群体包括具有第三系链反向互补区和第一荧光团衔接子系链的分子；具有第一系链反向互补区的第一荧光团的群体；以及具有第二系链反向互补区的第二荧光团的群体。

在一些另外有利的实施方式中，本公开涉及将编码的荧光图案分配给细胞中的多个靶分析物的方法，其包括：使细胞经受多轮检测，每轮检测检测包括：使细胞与相同的标记荧光部分的至少两个群体的代表接触，以及在单个激发事件后除去荧光部分，尤其

-其中可检测图案的数量随检测轮数呈指数增长，

-其中荧光部分未用对靶核酸特异的核酸标签进行标记，并且

-其中共同标记的荧光部分的单独等分样品用于多轮检测。

尤其，使用上述方法，可以实现至少30％的总解码效率。

在一些另外有利的实施方式中，本公开涉及将编码的荧光图案分配给细胞中的多个靶分析物的方法，包括：使靶标与二分标记探针接触，该二分标记探针包括靶特异性部分和荧光团指定部分；使二分标记探针与包括不超过两个荧光团群体的荧光团储库(reservoir)的第一等分样品接触；替换二分探针中的荧光团指定部分，以及使二分标记探针与包括相同不超过两个群体的荧光团储库的第二等分样品接触。

在上述方法的一些实施方式中，替换二分探针中的荧光团指定部分包括在使荧光团的与荧光团结合的二分标记探针经受激发能量之后使靶特异性部分和荧光团指定部分之间的结合变性。尤其，替换二分探针中的荧光团指定部分包括从不超过两个荧光团指定部分储库之一中提取。

在一些另外有利的实施方式中，本公开涉及检测分析物的方法，包括：

-将多个探针与分析物，尤其是核酸附接，其中，探针独立地与分析物附接/退火，并且其中，探针共享共同标识符区段；

-将多个第一衔接子区段与探针退火，其中，第一衔接子区段共享与共同标识符区段反向互补的第一共同区域以及第二共同区域，尤其被配置为容纳单个报告子/选自不超过两个报告子类别；

-将第一报告子与多个第一衔接子区段中的至少一个退火，使得与第一报告子连接的寡核苷酸与第二共同区域反向互补；检测第一报告子；

-除去多个第一衔接子区段，尤其不使第二报告子与多个第一衔接子区段中的至少一个退火；

-将多个第二衔接子区段与探针退火，其中第二衔接子区段共享与共同标识符区段反向互补的第一共同区域以及不同于第一衔接子区段的第二共同区域的第二衔接子第二共同区域，尤其被配置为容纳单个报告子/选自不超过两个报告子类别；

-将第二报告子与多个第二衔接子区段中的至少一个退火，使得与第二报告子连接的寡核苷酸与第二衔接子第二共同区域反向互补；以及检测第二报告子，尤其不将第三报告子与多个第一衔接子区段中的至少一个退火。

方法和实施例

在应用变体中，分析物或靶标是核酸，例如DNA或RNA，并且探针组包括与待检测的核酸序列的整个序列或子序列部分或完全互补的寡核苷酸(图1)。核酸序列特异性寡核苷酸探针组包括分析物特异性探针(1)，该分析物特异性探针包括与待检测的靶核酸序列特异性杂交的结合元件(S)，以及含有对于所述分析物特异性探针组来说唯一的核苷酸序列(唯一标识符序列)的标识符元件(T)。

在另外的应用变体中，分析物或靶标是蛋白质并且探针组包括一种或多种蛋白质，例如抗体(图2)。蛋白质特异性探针组包括分析物特异性探针(1)，该分析物特异性探针包括与待检测的靶蛋白特异性相互作用的结合元件(T)诸如抗体的(高)可变区，以及标识符元件(T)。

在另外的应用变体中，至少一种分析物是核酸并且至少第二分析物是蛋白质，并且至少第一探针组与核酸序列结合并且至少第二探针组与蛋白质分析物特异性结合。其他组合也是可能的。

本公开的一般方法的实施方式可以是：

步骤1：应用至少20个分析物或靶标特异性探针组。将靶核酸序列与由具有与靶核酸互补的序列的寡核苷酸组成的探针组一起温育。在该实施例中，示出了5个不同探针的探针组，每个探针包括与靶核酸序列的单个子序列互补的序列元件(S1至S5)。在此实施例中，区域不重叠。靶向相同核酸序列的寡核苷酸的每一个分别包括标识符元件或唯一标识符序列(T)。

步骤2：探针组的杂交。在允许特异性杂交的条件下使探针组与靶核酸序列杂交。温育后，探针与其相应的靶序列杂交，并提供用于下一步骤的标识符元件(T)。

步骤3：去除未结合探针。杂交后，去除未结合的寡核苷酸，例如通过洗涤步骤。

步骤4：应用解码寡核苷酸。应用由至少两个序列元件(t)和(c)组成的解码寡核苷酸。虽然序列元件(t)与唯一标识符序列(T)互补，但序列元件(c)提供了用于随后的信号寡核苷酸杂交的区域(翻译物元件)。

步骤5：解码寡核苷酸的杂交。解码寡核苷酸经由其互补的第一序列元件(t)与探针的唯一标识符序列(T)杂交。温育后，解码寡核苷酸提供了用于随后的杂交步骤的翻译物序列元件(c)。

步骤6：去除多余的解码寡核苷酸。杂交后，去除未结合的解码寡核苷酸，例如通过洗涤步骤。

步骤7：应用信号寡核苷酸。信号寡核苷酸被应用。信号寡核苷酸包括与翻译物序列元件(c)基本上互补的至少一个第二连接物元件(C)以及提供可检测信号(F)的至少一个信号元件。

步骤8：信号寡核苷酸的杂交。信号寡核苷酸经由互补序列连接物元件(C)与解码寡核苷酸的翻译物元件(c)杂交。温育后，信号寡核苷酸与其相应的解码寡核苷酸杂交并提供可检测的信号(F)。

步骤9：去除多余的信号寡核苷酸。杂交后，去除未结合的信号寡核苷酸，例如通过洗涤步骤。

步骤10：信号检测。检测由信号寡核苷酸提供的信号。

最后一轮检测不需要以下步骤(步骤11和12)。

步骤11：选择性变性。使唯一标识符序列(T)和解码寡核苷酸的第一序列元件(t)之间的杂交溶解。去稳定可以经由技术人员熟知的不同机制来实现，例如：升高的温度、变性剂等。靶标特异性探针或分析物特异性探针不受此步骤的影响。

步骤12：去除变性的解码寡核苷酸。去除变性的解码寡核苷酸和信号寡核苷酸(例如通过洗涤步骤)，留下具有游离唯一标识符序列的特异性探针组，可在下一轮杂交和检测(步骤4至10)中重复使用。该检测循环(步骤4至12)重复至少四次，直到计划的编码方案完成。

使用多解码物的本公开的一般方法的另一实施方式可以是(图16)：

步骤1：靶核酸：在本实施例中，必须通过仅使用两种不同类型的信号寡核苷酸来检测和区分三种不同的靶核酸(A)、(B)和(C)。在开始实验之前，设置了一定的编码方案。在本实施例中，三种不同的核酸序列由具有三种不同信号类型(1)、(2)和(1/2)的三轮检测编码，并且产生的汉明距离为3以允许错误检测。计划的码字为：

序列A：(1)–(1)–(2)

序列B：(2)–(2)–(1/2)

序列C：(1/2)–(1/2)–(1)

步骤2：探针组的杂交：对于每种靶核酸，应用自己的探针组，其与相应的目的核酸序列特异性杂交。每个探针组提供唯一标识符序列(T1)、(T2)或(T3)。这样，每种不同的靶核酸都被唯一标记。在本实施例中，序列(A)用(T1)标记，序列(B)用(T2)标记，并且序列(C)用(T3)标记。图16中的图示总结了图3的步骤1至3。

步骤3：解码寡核苷酸和多解码物的杂交：对于存在的每个唯一标识符，应用通过其第一序列元件与相应的唯一标识符序列特异性杂交(此处为(t1)与(T1)，(t2)与(T2)和(t3)与(T3))的某个解码寡核苷酸或多解码物。解码寡核苷酸或多解码物中的每一个提供定义了信号寡核苷酸杂交后将产生的信号的一个翻译物或两个翻译物元件。这里核酸序列(A)用(c1)标记，(B)用(c2)标记，并且(C)用翻译物元件(c1)和(c2)标记产生信号(1/2)。图16中的图示总结了图3的步骤4至6。

步骤4：信号寡核苷酸的杂交：对于每种类型的翻译物元件，应用具有可与其他信号寡核苷酸的信号区分开的特定信号的信号寡核苷酸。信号寡核苷酸可以与相应的翻译物元件特异性杂交。图16中的图示总结了图3的步骤7至9。

步骤5：用于编码方案的信号检测：检测不同的信号。应注意，在本实施例中，核酸(A)、(B)和(C)在第一轮检测后已经可以区分。这与图5的步骤5形成对比，图5的步骤5由可以通过多解码物实现的额外信号类型(1/2)解释。尽管已经可以区分核酸序列，但额外的轮次有助于计划的汉明距离为3。图16中的图示对应于图3的步骤10。

步骤6：选择性变性：如图3的步骤11和12中将待检测的所有核酸序列的解码(和信号)寡核苷酸和/或多解码物选择性地变性和去除。之后，不同探针组的唯一标识符序列可以用于下一轮杂交和检测。

步骤7：第二轮检测：下一轮杂交和检测如步骤3至5中所述进行。应注意，在新一轮中，不同解码寡核苷酸和多解码物的混合发生了变化。例如，第一轮中使用的核酸序列(A)的解码寡核苷酸包括序列元件(t1)和(c1)，而第二轮新的多解码物包括序列元件(t1)、(c1)和(c2)。应注意，现在在2轮后已经给出了2的汉明距离，这是3轮后图3中的实施例的最终结果。

步骤8：第三轮检测：再次使用解码寡核苷酸和/或多解码物的新组合，从而产生新的信号组合。在信号检测之后，三个不同核酸序列的所得码字不仅是唯一的并且因此是可区分的，而且包括与其他码字的汉明距离为3。由于该汉明距离，信号检测(信号交换)中的错误不会产生有效码字，并且因此可以被检测到，并且由于汉明距离3也被纠正，与图3的编码方案相反。这样，可以在三轮检测中用两种不同的信号区分三种不同的核酸，从而允许错误检测和纠正。

应注意，在每一轮检测中，特定唯一标识符提供的信号类型由特定解码寡核苷酸的使用控制。结果，在检测循环中应用的解码寡核苷酸序列将探针组的结合特异性转录成独特的信号序列。

解码寡核苷酸杂交(步骤4至6)和信号寡核苷酸杂交(步骤7至9)的步骤也可以以两种替代方式组合，如图4中示出。

选择：1:同时杂交。替代图3的步骤4至9，解码寡核苷酸和信号寡核苷酸的特异性杂交也可以同时进行，在去除多余的解码寡核苷酸和信号寡核苷酸后，导致与图3的步骤9所示相同的结果。

选择：2:预温育。除了图3的选择1之外，解码寡核苷酸和信号寡核苷酸可以在单独的反应中预温育，然后应用于具有已经结合的特异性探针组的靶核酸。

图3示出了通过解码寡核苷酸介导的特异性信号的生成和检测的一般概念。它没有示出可以通过此过程实现的编码的一般概念。为了说明图3中示出过程用于生成编码方案的用途，图5示出了使用三种不同核酸序列进行多轮编码实验的一般实例。在该实例中，编码方案包括错误检测。

步骤1：靶核酸。在本实例中，必须通过仅使用两种不同类型的信号来检测和区分三种不同的靶核酸(A)、(B)和(C)。在开始实验之前，设置了一定的编码方案。在本实例中，三种不同的核酸序列由具有两种不同信号(1)和(2)的三轮检测编码，并且产生的汉明距离为2以允许错误检测。计划的码字为：

序列A：(1)–(2)–(2)；

序列B：(1)–(1)–(1)；

序列C：(2)–(1)–(2)。

步骤2：探针组的杂交。对于每种靶核酸，应用自己的探针组，其与相应的目的核酸序列特异性杂交。每个探针组提供唯一标识符序列(T1)、(T2)或(T3)。这样，每种不同的靶核酸都被唯一标记。在本实例中，序列(T)用(T1)标记，序列(B)用(T2)标记，并且序列(C)用(T3)标记。图示总结了图3的步骤1至3。

步骤3：解码寡核苷酸的杂交。对于存在的每个唯一标识符，应用通过其第一序列元件与相应的唯一标识符序列特异性杂交(此处为(t1)与(T1)，(t2)与(T2)和(t3)与(T3))的某个解码寡核苷酸。解码寡核苷酸的每一个都提供了定义信号寡核苷酸杂交后将生成的信号的翻译物元件。这里核酸序列(A)和(B)用翻译物元件(c1)标记，并且序列(C)用(c2)标记。图示总结了图3的步骤4至6。

步骤4：信号寡核苷酸的杂交。对于每种类型的翻译物元件，应用具有可与其他信号寡核苷酸的信号区分开的特定信号(2)的信号寡核苷酸。信号寡核苷酸可以与相应的翻译物元件特异性杂交。图示总结了图3的步骤7至9。

步骤5：用于编码方案的信号检测。检测不同的信号。请注意，在本实例中，核酸序列(C)可以通过它提供的独特信号(2)与其他序列区分开来，而序列(A)和(B)提供相同类型的信号(1)，并且不能在第一个检测循环后区分。这是因为待检测的不同核酸序列的数量超过了可用的不同信号的数量这一事实。图示对应于图3的步骤10。

步骤6：选择性变性。如图3的步骤11和12中所述对待检测的所有核酸序列的解码(和信号)寡核苷酸选择性地变性和去除。之后，不同探针组的唯一标识符序列可以用于下一轮杂交和检测。

步骤7：第二轮检测。下一轮杂交和检测如步骤3至5中所述进行。应注意，在此新一轮中，不同解码寡核苷酸的混合发生了变化。例如，第一轮中使用的核酸序列(A)的解码寡核苷酸包括序列元件(t1)和(c1)，而新解码寡核苷酸包括序列元件(c1)和(c2)。请注意，由于第一轮和第二轮信号的独特组合，现在可以清楚地区分所有三个序列。

步骤8：第三轮检测。再次使用解码寡核苷酸的新组合，从而产生新的信号组合。在信号检测之后，三个不同核酸序列的所得码字不仅是唯一的并且因此是可区分的，而且包括与其他码字的汉明距离为2。由于汉明距离，信号检测(信号交换)中的错误不会产生有效码字，并且因此可以被检测到。通过这种方式，可以在三个检测轮中用两种不同的信号区分三种不同的核酸，从而允许错误检测。

编码策略

与最先进的方法相比，根据本公开的方法的一个特别优势是解码寡核苷酸的使用打破了靶标特异性探针和信号寡核苷酸之间的依赖性。

在不解耦靶标特异性探针和信号生成的情况下，如果使用两个不同的分子标签，则只能针对某靶标生成两种不同的信号。这些分子标签中的每一个都只能使用一次。同一分子标签的多次读出不会增加关于靶标的信息。为了产生编码方案，需要在每一轮之后更改靶标特异性探针组(SeqFISH)，或者同一探针组上必须存在多种分子标签(如merFISH、内含子SeqFISH)。

遵照根据本公开的方法，通过使用不同的解码寡核苷酸重复使用相同的唯一标识符(分子标签)以及少量的不同的、主要是成本密集的信号寡核苷酸来实现不同的信号。与其他方法相比，这带来了几个优势。

(1)编码方案不是由靶标特异性探针组定义的，这是现有技术的所有其他方法的情况。这里编码方案由解码寡核苷酸转录。这导致关于轮数的更高灵活性和码字中信号选择的自由度。查看现有技术的方法(例如merFISH或内含子SeqFISH)，所有靶序列的编码方案(可检测信号的数量、类型和序列)由特异性探针组上不同标签序列的存在来预定义的(在merFISH的情况下，每个探针组16个不同标签中的4个，在内含子FISH的情况下，60个不同标签中的5个)。为了每个探针组产生足够数量的不同标签，这些方法使用相当复杂的寡核苷酸设计，在一个靶标特异性寡核苷酸上存在多个标签。为了改变特定靶核酸的编码方案，必须更换特异性探针组。根据本公开的方法描述了每种分析物使用单个唯一标签序列(唯一标识符)，因为它可以在每一轮检测中重复使用以产生新信息。编码方案由检测轮次中使用的解码寡核苷酸的顺序定义。因此，编码方案不是由特异性探针(或唯一标签序列)预先定义的，而是可以根据不同的需要进行调整，即使在实验期间也是如此。这是通过简单地改变检测轮次中使用的解码寡核苷酸或添加额外的检测轮次来实现的。

(2)利用现有技术的方法不同信号寡核苷酸的数量必须与不同标签序列的数量相匹配(在merFISH的情况下为16个，以及在内含子SeqFISH的情况下为60个)。使用根据本公开的方法，不同信号寡核苷酸的数量与所使用的不同信号的数量相匹配。因此，对于此处描述的方法，信号寡核苷酸的数量保持不变，并且从不超过不同信号的数量，但会随着现有技术方法中编码方案的复杂性而增加(需要更多的检测轮次，需要更多不同的信号寡核苷酸)。结果，此处描述的方法导致大大降低的复杂性(信号寡核苷酸与环境或彼此之间的意外相互作用)，并显著降低了测定成本，因为主要成本因素是信号寡核苷酸。

在现有技术的方法中，靶标特异性探针组生成的不同信号的数量受限于该探针组可以提供的不同标签序列的数量。由于每个额外的标签序列都会增加靶标特异性探针的总尺寸，因此单个探针可以提供的不同标签的数量是有限的。这种限制是由几个问题(意外的分子间和分子内相互作用、成本、扩散速率、稳定性、合成期间的错误等)的尺寸依赖性增加导致的。此外，可以应用于特定分析物的靶标特异性探针的总数是有限的。在核酸的情况下，这种限制是由靶序列的长度和合适的结合位点的比例导致的。这些因素导致探针组可以提供的不同信号的数量受到严重限制(在merFISH的情况下为4个信号，在内含子SeqFISH的情况下为5个信号)。这种限制极大地影响了通过一定数量的检测轮可以产生的不同码字的数量。在本公开的方法中，只需要一个标签，并且可以在每一轮检测中自由地重复使用。这导致低寡核苷酸复杂性/长度，同时导致可能的最大编码效率(颜色数

编码能力

下表1中比较的所有三种方法都使用在不同检测轮之间不变性的特异性探针组。对于内含子SeqFISH，需要4轮检测来产生一轮编码的伪色，因此仅给出第4、8、12、16和20轮的数据。merFISH方法使用恒定的4个信号数量，因此数据从尽可能最少的轮数开始。在8轮检测后，我们的方法超过了20轮merFISH达到的最大编码能力(用一个星号表示)，并且在12轮检测后，超过了内含子FISH的最大编码能力(用两个星号表示)。对于根据本公开的方法，假定使用3个不同的信号(与内含子SeqFISH一样)。

表1:编码能力比较

如图6中示出，merFISH的码字数不会随着检测循环的数量呈指数增长，但随着每轮增加而变得不那么有效。相比之下，根据本公开的方法中内含子SeqFISH的码字数呈指数增长。所提出方法的曲线斜率远高于内含子FISH的曲线斜率，导致在20轮检测后可用的码字增加超过10,000倍。

应注意，在seqFISH的情况下也达到了编码能力的这种最大效率，其中特异性探针在每一轮检测后变性，并且新的探针组与每一轮检测的靶序列特异性杂交。然而，与编码方案仅使用一种特异性杂交的技术(所有其他方法)相比，这种方法具有很大的缺点：

(1)为了使特异性探针有效变性，必须使用相当粗糙的条件(高温、高变性剂浓度、长温育时间)，导致分析物丢失或损坏的可能性更高。

(2)对于每一轮检测，必须对每个靶核酸序列使用自己的探针组。因此，实验所需的特异性探针的数量与编码方案所需的不同信号的数量成比例。这显著增加了测定的复杂性和成本。

(3)由于每个靶核酸分子的杂交效率都受到一定概率的影响，不同检测轮之间信号强度的波动远高于仅使用一个特异性杂交事件的方法，降低了完整代码的比例。

(4)特异性杂交所需的时间比信号寡核苷酸或解码寡核苷酸的杂交要长得多(在内含子SeqFISH、merFISH和seqFISH出版物的方法部分可以看出)，这大大增加了完成实验所需的时间。

由于这些原因，所有其他方法都使用单一的特异性杂交事件并接受较低代码复杂性的主要缺点，并且因此需要更多的检测轮次和更高的寡核苷酸设计复杂性。

根据本公开的方法结合了seqFISH的优点(主要是关于编码方案的完全自由)与仅使用一个特异性杂交事件的方法的所有优点，同时消除了此类方法的主要问题。

应注意，20轮后产生的大量码字也可用于在不同码字之间引入更高的汉明距离(差异)，从而允许对1、2或甚至更多错误进行错误检测，甚至进行错误纠正。因此，即使是非常高的编码能力仍然具有实际意义。

如上所述，多解码物的使用另外增加了编码方案的编码能力。多解码物的使用不再局限于具有与不同信号寡核苷酸和相应翻译物元件完全相同数量的不同信号类型，而是增加了可用于以下的信号类型：(N x(N+1))/2(N为使用的不同信号寡核苷酸的数量)。对于表1中使用的具有3种不同信号寡核苷酸的代码，这意指可以使用以下7种不同的信号类型：(S1)、(S2)、(S3)、(S1/S2)、(S1/S3)、(S2/S3)、(S1/S2/S3)。对编码效率的影响可以在表1b和图17中看到。

表1b示出了四种方法的编码能力。表中比较的所有四种方法都使用在不同检测轮之间不变性的特异性探针组。对于内含子SeqFISH，需要4轮检测来产生一轮编码的伪色，因此仅给出第4、8、12、16和20轮的数据。merFISH方法使用恒定的4个信号数量，因此数据从尽可能最少的轮数开始。在4轮检测后，此处描述的用多解码物的方法超过了用20轮merFISH达到的最大编码能力(用一个星号表示)，在7轮检测后，超过了内含子FISH的最大编码能力(用两个星号表示)，并且在12轮检测后，超过了本公开的方法的最大编码能力(用三个星号表示)。假定使用3种不同的信号寡核苷酸(与内含子SeqFISH一样)。

因此，整个编码过程的效率E可以用以下等式描述：

E＝B

E＝总效率

B

B

B

E

S

n＝检测循环数量

基于此等式，可以针对给定的方法总效率估计每个单步的效率。计算在此基于每个过程具有相同的效率的假设。总效率描述了存在的总信号中的成功解码信号部分。

该方法的总效率取决于由等式描述的不同因素的每个单步的效率。在平均分布效率的假设下，可以绘制总效率相对于单步效率的图，如图7中示出。可以看出，具有5个检测循环的编码方案的实际相关总效率只能在单步效率明显高于90％的情况下实现。例如，要达到50％的总效率，需要每个单步内的平均效率为97.8％。这些计算甚至基于100％信号检测和分析效率的假设。由于各种序列的寡核苷酸的宽DNA解链曲线，本发明人在实验前假设选择性变性对于解码寡核苷酸的变性效率较低，并且序列特异性结合探针不够稳定。与此假设相反，我们发现在选择性变性期间，所有步骤都具有惊人的有效性和序列特异性探针的高度稳定性。

通过实验，发明人基于5个检测循环实现了约30％至65％的总解码效率。通过上式计算每个单步(Bsp、Bde、Bsi、Ede、Ssp)的效率表明平均效率为约94.4％至98％。这些高效率是非常令人惊讶的，并且是该领域技术人员无法轻易预料到的。

4.

该实验示出了10至50种不同的mRNA种类的平行特异性检测，具有单分子分辨率。其基于5个检测循环、3种不同的荧光信号以及无信号间隙且汉明距离为2(错误检测)的编码方案。实验证明了根据本公开的方法的实现性和功能性。

实验中使用的所有寡核苷酸序列(靶标特异性探针、解码寡核苷酸、信号寡核苷酸)都列在附录的序列表中。信号寡核苷酸R:ST05*O_Atto594购自biomers.net GmbH。所有其他寡核苷酸均购自Integrated DNA Technologies。将寡核苷酸溶解在水中。储备溶液(100μM)储存在-20℃。

将50个不同的靶标特异性探针组分为5组。待检测转录物的名称与靶标特异性探针组的名称相同(www.ensemble.org的转录物变体名称)。术语“新”表示经修改的探针设计。探针组的所有寡核苷酸序列都可以在序列表中找到。该表列出了探针组的唯一标识符名称以及在不同检测循环中使用的解码寡核苷酸的名称。生成的代码示出了在5个检测循环期间生成的荧光信号序列(G(绿色)＝Alexa Fluor 488，O(橙色)＝Atto 594，Y(黄色)＝Alexa Fluor 546)。

表2:实验概述

已经进行了实验的一些变化。实验1至4主要在于平行检测的转录物数量方面不同。列为靶标特异性探针组的组参见表6。实验5至8是单轮、单靶标对照，用于与解码信号进行比较。

表3:实验的变化

A.细胞的接种和培养

使HeLa细胞在HeLa细胞培养基中生长至接近100％汇合。HeLa细胞培养基包括DMEM(Thermo Fisher，目录号：31885)和10％ FCS(Biochrom，目录号：S0415)、1％青霉素-链霉素(Sigma-Adrich，目录号：P0781)和1％MEM非必需氨基酸溶液(Thermo Fisher，目录号：11140035)。吸出细胞培养基后，在用PBS(1.424g/l Na

B.细胞的固定

在吸出细胞培养基并用每孔200μl 37℃温热PBS进行两次洗涤步骤后，将细胞用200μl预冷甲醇(-20℃，Roth，目录号：0082.1)在-20℃下固定10min。

C.用苏丹黑复染

吸出甲醇并向每个孔中添加150μl的在70％乙醇中稀释的0.2％苏丹黑溶液。孔在室温下在黑暗中温育5min。温育后，将细胞用每孔400μl 70％乙醇洗涤3次，以去除过量的苏丹黑溶液。

D.分析物/靶标特异性探针的杂交

杂交之前，将细胞用200μl sm-洗涤缓冲液平衡。sm-洗涤缓冲液包括30mM柠檬酸Na

E.解码寡核苷酸的杂交

杂交之前，将细胞用200μl sm-洗涤缓冲液平衡。对于每个解码寡核苷酸，将1.5μl的5μM储备溶液添加至混合物中。用水将混合物的总体积调节至75μl，并与75μl的2x浓缩杂交缓冲溶液混合。将所得150μl解码寡核苷酸杂交混合物添加到相应的孔中，并在室温下温育45min。然后将细胞在室温下用sm-洗涤缓冲液以每孔200μl洗涤3次，2min。

F.信号寡核苷酸的杂交

杂交之前，将细胞用200μl sm-洗涤缓冲液平衡。信号寡核苷酸杂交混合物对于所有实验轮1至4都是相同的，并且包括在1x浓缩杂交缓冲溶液中的0.3μM的每种信号寡核苷酸(参见表A3)。在每一轮中，每孔添加150μl该溶液，并在室温下温育45min。除了每种信号寡核苷酸的最终浓度为0.15μM之外，实验5至8的程序相同。然后，将细胞在室温下用sm-w洗涤缓冲液以每孔200μl洗涤3次，2min。

G.荧光和白光成像

将细胞在室温下用每孔200μl成像缓冲液洗涤一次。在没有Trolox的实验(参见表7，最后一列)中，成像缓冲液包括30mM柠檬酸Na

具有数值孔径为1.4的63x浸油物镜(Zeiss，复消色差物镜)、pco.edge 4.2CMOS摄像头(PCO AG)和LED光源(Zeiss,colibri 7)的Zeiss Axiovert 200M显微镜用于区域成像。滤光片组和LED波长根据所用荧光团的不同最优值进行调整。每张图像的照明时间对于Alexa Fluor 546和Atto 594为1000ms，对于Alexa Fluor 488为400ms。

在每个实验中，随机选择三个区域进行成像。对于每个区域，检测到32张图像的z堆栈(z-stack)，z步长为350nm。此外，从这些区域拍摄了一张白光图像。在具有超过一个检测循环的实验中，第一轮检测的区域会在随后的每一轮中被发现并成像。

H.选择性变性

对于选择性变性，每个孔在42℃下用200μl的sm-洗涤缓冲液温育6min。该程序重复六次。

在实验1至4中，步骤(E)至(H)重复5次。在第5个检测循环中省略步骤(H)。

I.分析

基于自定义ImageJ插件，对原始数据进行了半自动分析，以区分背景中的特定荧光信号。所有三个荧光通道的所得3D点云在计算机中与自定义VBA脚本组合。5个检测循环的所得组合3D点云在VBA脚本的基础上相互比对。所得比对揭示了检测到的唯一独特信号的码字。成功解码的信号用于基于自定义VBA脚本和ImageJ插件的实验的定量和空间分析。

1.解码信号的绝对数量

下表4中列出了每个实验的每个区域的所有转录物的成功解码信号的绝对数量。总之，正确代码的总和描述了分配给相应实验中可检测的转录物的解码信号的总数，而错误代码的总和是相应实验中未检测到的解码信号的总数。信号总数包括成功解码以及未成功解码的信号。

表4：解码信号的绝对数量

表4示出与正确解码信号的数量相比，错误解码信号的数量非常少。某个转录物的解码信号的绝对值在一个实验的不同区域之间非常相似。可以成功解码的信号总数的比例在27.1％至64.5％之间。该比例取决于相应区域/实验中存在的转录物的数量和/或信号的总数。

结论

根据本公开的方法产生少量错误分配的码字，并且因此可以被认为是特异性的。成功解码信号的比例非常高，即使每个区域的信号数量非常高并且平行检测的转录物的数量非常高。可分配信号的高比例和高特异性使该方法具有实用性。

不同实验之间相对转录物丰度的比较

如图8中示出，对于两个比较(A和B)，将实验之间检测到的转录物的重叠用于分析。每个条代表实验的所有三个区的平均丰度。还指出了这些区域之间的标准偏差。

不同实验之间相对转录物丰度的相关性

如从图9中可以看出，实验1的转录物的平均相对丰度与实验3、4和2的重叠转录物的丰度相关。相关系数以及用于线性回归的公式针对每个相关性进行了指示。

图8示出了低标准偏差，表明一个实验的不同区域之间相对丰度的低变化。来自不同实验的转录物之间的相对丰度差异也非常低。对于来自在实验1、2和3中检测到的第1组的转录物的比较(图8A)，也是这种情况。对于来自在实验1、2和4之间重叠的第2、3和4组的转录物，也是这种情况。这些丰度的非常高的相关性也可以在图9中看到。来自实验1的转录物的丰度与其他多轮实验的丰度非常相关。相关因子介于0.88和0.91之间，而线性回归的斜率介于0.97和1.05之间。

结论

转录物的相对丰度在一个实验的不同区域之间而且还在不同实验之间非常相关。这可以通过图3和图4的比较清楚地看出。实验之间的主要差异在于不同靶标的数量和因此检测到的信号的总数。因此，检测到的转录物数量以及信号的数量和密度不会干扰该方法准确量化转录物数量的能力。非常好的相关性进一步支持该方法的特异性和稳定性，即使信号数量非常多。

细胞间信号分布的比较

在图10中，显示了图像堆栈的最大投影。A：实验7的区域1(单轮、单转录物实验检测SPOCK1)，B：来自实验1区域1的所有选定信号的2D投影，分配给SPOCK1，C：实验8的区域1(单轮、单转录物实验检测THRAP3)，D：来自实验1区域1的所有选定信号的2D投影，分配给THRAP3。

细胞内信号分布的比较

在图11中，示出了图像堆栈的最大投影。示出了相应区域的放大子区域。A：实验8的区域1(单轮、单转录物实验检测THRAP3)，B：来自实验1区域1的选定信号的2D投影，分配给THRAP3，C：实验5的区域1(单轮、单转录物实验检测DDX5)，D：来自实验1区域1的所有选定信号的2D投影，分配给DDX5。

图10示出了不同转录物之间细胞间分布的巨大差异。SPOCK1似乎在一些细胞中非常丰富，但在其他细胞中几乎不存在(图10A)。THRAP3在区域的所有细胞中示出更均匀的分布(图10C)。这些空间分布模式也可以通过分配给来自实验1的相应转录物的点云来清楚地观察到(图10B和D)。

图11示出了不同转录物之间细胞内分布的巨大差异。THRAP3可以主要在细胞的外周(细胞质)中观察到(图11A)，而DDX5在细胞的中央(细胞核)中示出更高的丰度(图11C)。这些细胞内分布也可以通过分配给THRAP3和DDX5的实验1的点云来观察(图11B和D)。

结论

除了量化的可靠性之外，多轮实验的点云也示出转录物的相同细胞内和细胞间分布模式。通过将分配的点云与仅检测一种特征mRNA种类的单轮实验信号进行直接比较来清楚地证明了这一点。

不同细胞周期依赖性转录物的分布模式

图12的所有图像都示出了实验1的区域1。在每个图像中，示出了分配给某个转录物的点云，A：CCNA2，B：CENPE，C：CCNE1，D：所有转录物。图12示出了三种不同的细胞周期依赖性蛋白质的转录物。CENPE(图12B)也称为着丝粒蛋白质E，并且在G2期的期间积累。它被提出负责纺锤体伸长和染色体运动。它在分裂间期的期间不存在。CCNA2(图12A)也称为细胞周期蛋白A2。它通过在从G2期到M期的过渡期间与CDK1相互作用来调节细胞周期进程。有趣的是，两种mRNA种类都存在明显的共定位。它们主要存在于区域1的三种中央细胞中。CCNE1(图12C)也称为周期蛋白E1。这种周期蛋白与CDK2相互作用并负责从G1期到S期的过渡。图12清楚地示出，该基因的转录物不存在于三种中央细胞中，而是相当均匀地分布在其他细胞中。因此，它示出了相对于其他两个转录物的反定位。对应点云的数据来源于具有非常多数量的点并且点密度非常高的点云(图12D给出印象)。

结论

图12中示出的细胞周期依赖蛋白的三个解码点云示出了可以通过其相应功能解释的分布模式。这些数据强烈表明，我们的方法可靠地产生生物学相关数据，即使每个细胞的信号数量很少(图12C)并且信号密度非常高(图12D)。

在随附的序列表中，SEQ ID No.1-1247是指示例性靶标特异性寡核苷酸的核苷酸序列。列出的寡核苷酸由靶标特异性结合位点(5'-端)、间隔物/接头序列(gtaac或tagac)和唯一标识符序列组成，这对于一个探针组的所有寡核苷酸都是相同的。

在随附的序列表中，SEQ ID No.1248-1397是指示例性解码寡核苷酸的核苷酸序列。

在随附的序列表中，SEQ ID No.1398-1400是指示例性信号寡核苷酸的核苷酸序列。对于每个信号寡核苷酸，相应的荧光团出现两次。一个荧光团与5'-端共价连接，并且一个荧光团与3'-端共价连接。SEQ ID No.1398在其5'末端包括“5Alex488N”，并且在其3'末端包括“3AlexF488N”。SEQ ID No.1399在其5'末端包括“5Alex546”，并且在其3'末端包括“3Alex546N”。SEQ ID No.1400在其5'末端以及在其3'末端包括“Atto594”。

序列表

<110> 解析生物科学有限公司(RESOLVE BIOSCIENCES GMBH)

<120> 用于检测样品中的不同分析物的多重方法

<130> PPI22172084GB

<160> 1400

<170> BiSSAP 1.3.6

<210> 1

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 1

actactagag accggtagaa atgagtaacg attaccgact tatcc 45

<210> 2

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 2

tggcggggaa cgaagtatat agtaacgatt accgacttat cc 42

<210> 3

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 3

tggcgtcaat ggttgcggtg taacgattac cgacttatcc 40

<210> 4

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 4

tcggtcactc gaataacccg gtaacgatta ccgacttatc c 41

<210> 5

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 5

ctccaaatcg aggtgcacca gtaacgatta ccgacttatc c 41

<210> 6

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 6

ggccagttcc cgagttggtg taacgattac cgacttatcc 40

<210> 7

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 7

agacttcaag cgacatgctc tgtaacgatt accgacttat cc 42

<210> 8

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 8

ggagcaccac cgtagataca agtaacgatt accgacttat cc 42

<210> 9

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 9

ctctccaaat cacgtatttg tgggtaacga ttaccgactt atcc 44

<210> 10

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 10

agagtttgcc tatcaggtct tattgtaacg attaccgact tatcc 45

<210> 11

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 11

ggccaagtcg cactccacag taacgattac cgacttatcc 40

<210> 12

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 12

tccttttcta cgtcatgaca cagtaacgat taccgactta tcc 43

<210> 13

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 13

ttccattaga cgaataagtt tttcagtaac gattaccgac ttatcc 46

<210> 14

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 14

tttctggtaa gctcatcaca tctgtaacga ttaccgactt atcc 44

<210> 15

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 15

gagttagggt agtcataatt gatgagtaac gattaccgac ttatcc 46

<210> 16

<211> 47

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 16

ttcttccaat tcgatgaata taatccgtaa cgattaccga cttatcc 47

<210> 17

<211> 48

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 17

tgttattagg tgtaaagaaa gtgtatggta acgattaccg acttatcc 48

<210> 18

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 18

gagataaggt cgctcacttg cgtaacgatt accgacttat cc 42

<210> 19

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 19

acctctgtct tcgaccaact ggtaacgatt accgacttat cc 42

<210> 20

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 20

acccctggaa cgacctgaac gtaacgatta ccgacttatc c 41

<210> 21

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 21

agtatctgtc ccgacggtca gtaacgatta ccgacttatc c 41

<210> 22

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 22

accccttttg cccgcagagg taacgattac cgacttatcc 40

<210> 23

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 23

tttaagcagg ctagagtaac ctcgtaacga ttaccgactt atcc 44

<210> 24

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 24

gcattggata accaatcata ggtggtaacg attaccgact tatcc 45

<210> 25

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 25

tcccctagtc cgagttgctc gtaaccctaa ttatgggaat c 41

<210> 26

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 26

ccaatttgca cttggatgtg tagtaaccct aattatggga atc 43

<210> 27

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 27

ttttgccagt agaacaagca tggtaaccct aattatggga atc 43

<210> 28

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 28

ggaggcaagg ttccgcaacg taaccctaat tatgggaatc 40

<210> 29

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 29

agaattccac gtaaatcaca tgcgtaaccc taattatggg aatc 44

<210> 30

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 30

tatgcatgta cagggaagta tccgtaaccc taattatggg aatc 44

<210> 31

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 31

gtgtgcatgc cttagaaaaa gcgtaaccct aattatggga atc 43

<210> 32

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 32

agcttttgtg cccttatcat gagtaaccct aattatggga atc 43

<210> 33

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 33

cttcattagt atcttgtcac ttggggtaac cctaattatg ggaatc 46

<210> 34

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 34

agatgatgac cctaccaaat ttgggtaacc ctaattatgg gaatc 45

<210> 35

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 35

aggcaagaga tagatatgtg ggcgtaaccc taattatggg aatc 44

<210> 36

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 36

cagctgccac tataatcatg tttgtaaccc taattatggg aatc 44

<210> 37

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 37

ggaacatgct aatttaaggt gagtgtaacc ctaattatgg gaatc 45

<210> 38

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 38

aggactttgc tatatcaagt agttcgtaac cctaattatg ggaatc 46

<210> 39

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 39

aaaggagata gtaacaatgg ttttcgtaac cctaattatg ggaatc 46

<210> 40

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 40

aaatcagtgg ttcaccctgt tcgtaaccct aattatggga atc 43

<210> 41

<211> 48

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 41

cttgtcataa gataattagg caaattagta accctaatta tgggaatc 48

<210> 42

<211> 47

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 42

tcattaagtt aatgctaagg atctttgtaa ccctaattat gggaatc 47

<210> 43

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 43

tgtcactggt acaagtggac ttgtaaccct aattatggga atc 43

<210> 44

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 44

ttggtcacta tacaagtgac ttctgtaacc ctaattatgg gaatc 45

<210> 45

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

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<210> 46

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 46

ttcatctaca atagggacaa caaacgtaac cctaattatg ggaatc 46

<210> 47

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 47

gataagtcta cgtggaaaag catgtaaccc taattatggg aatc 44

<210> 48

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 48

caggactaca gttaagcatt tactgtaacc ctaattatgg gaatc 45

<210> 49

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 49

gtctaggaaa ttgccgtggt tggtaaccct aattatggga atc 43

<210> 50

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 50

aatcatcgtc tcgaaagcgg tgtaacccta attatgggaa tc 42

<210> 51

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 51

cttgaccaaa ttcgaaggtc cagtaaccct aattatggga atc 43

<210> 52

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 52

gatgactctg ttcgcatcct cggtaaccct aattatggga atc 43

<210> 53

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 53

gatgctagtg tcaaacctgc cgtaacccta attatgggaa tc 42

<210> 54

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 54

tgatacaggg ctcgtactta tccgtaaccc taattatggg aatc 44

<210> 55

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 55

aggagtcaca cgagttgaaa aggtaaccct aattatggga atc 43

<210> 56

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 56

ctcattacac cgaggtatga agggtaaccc taattatggg aatc 44

<210> 57

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<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 57

ctctgtcacg gctcgggtgg taaccctaat tatgggaatc 40

<210> 58

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 58

ctaccatatg tacccgacct cagtaaccct aattatggga atc 43

<210> 59

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 59

aaccttaggt cgggtataga gaggtaaccc taattatggg aatc 44

<210> 60

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 60

gaagcactta gacactgtaa ggcgtaaccc taattatggg aatc 44

<210> 61

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 61

aataatcacc ggcagtaacg ggtaacccta attatgggaa tc 42

<210> 62

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 62

aggaagaaac ctatggcaga cagtaaccct aattatggga atc 43

<210> 63

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 63

catgtgttat tacgatgttc tttgtgtaac cctaattatg ggaatc 46

<210> 64

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 64

actactgttt ggtacttgta tctggtaacc ctaattatgg gaatc 45

<210> 65

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 65

aaatcagtgg cggacagtag cgtaacccta attatgggaa tc 42

<210> 66

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 66

caggcaatgc cgactggatt gtaaccctaa ttatgggaat c 41

<210> 67

<211> 48

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 67

tcttatctaa gaccaactat aggtatggta accctaatta tgggaatc 48

<210> 68

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 68

gggaactgtc tattgagcac tcgtaaccct aattatggga atc 43

<210> 69

<211> 47

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 69

attacaatct ttagtactca tggaaagtaa ccctaattat gggaatc 47

<210> 70

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 70

aaggtattct catgcctaga atattgtaac cctaattatg ggaatc 46

<210> 71

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<212> DNA

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<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 71

tggacagaca cgttgtcatt tggtaaccct aattatggga atc 43

<210> 72

<211> 48

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 72

ctctcattac aatgctatac atttaacgta accctaatta tgggaatc 48

<210> 73

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 73

tgcagctcgc aacggaacaa gtaacggatt ttacaacttt a 41

<210> 74

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 74

gagtccatcc ggacattgac ctgtaacgga ttttacaact tta 43

<210> 75

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 75

cttgaacggc ctcgacgagg gtaacggatt ttacaacttt a 41

<210> 76

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 76

cctcctcggt tatattggcc ccgtaacgga ttttacaact tta 43

<210> 77

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 77

accgagactt cgaaaatgaa cgagtaacgg attttacaac ttta 44

<210> 78

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 78

cctctggctc gaaactgaaa gggtaacgga ttttacaact tta 43

<210> 79

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 79

tgctatggac tagatctcgg caagtaacgg attttacaac ttta 44

<210> 80

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 80

gccttgaccg gtcagaagac ggtaacggat tttacaactt ta 42

<210> 81

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 81

taccacagag atcgcagctg cgtaacggat tttacaactt ta 42

<210> 82

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 82

accagcccga acctcgcccg taacggattt tacaacttta 40

<210> 83

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 83

actgtatgct tgccggtaat tctgtaacgg attttacaac ttta 44

<210> 84

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 84

gaacatgaac cggccccgac gtaacggatt ttacaacttt a 41

<210> 85

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 85

caggaatccc gtcaagggtg ggtaacggat tttacaactt ta 42

<210> 86

<211> 47

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 86

tctcgattta cctcgtttaa gatctcgtaa cggattttac aacttta 47

<210> 87

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 87

agaaccatgg tcgaactgac ctgtaacgga ttttacaact tta 43

<210> 88

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 88

tctgaggggc tacgctgaga gtaacggatt ttacaacttt a 41

<210> 89

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 89

aagcctctgt tacgcccacg gtaacggatt ttacaacttt a 41

<210> 90

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 90

aatgattcaa ctcgtactgg atcccgtaac ggattttaca acttta 46

<210> 91

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 91

cctcggaaat cccgattctg atagtaacgg attttacaac ttta 44

<210> 92

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 92

ggcccctact cggttgtggg gtaacggatt ttacaacttt a 41

<210> 93

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 93

ggaaaatgga acgaaactcc tgttgtaacg gattttacaa cttta 45

<210> 94

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 94

ctgggtcgtg cgaggtcctg taacggattt tacaacttta 40

<210> 95

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 95

cacggggcta ggacggggtg taacggattt tacaacttta 40

<210> 96

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 96

ccgatggcgt actcgtcggg taacccttat tcggtacta 39

<210> 97

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 97

gatcagatca gaatccgagg tggtaaccct tattcggtac ta 42

<210> 98

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 98

ggttgtactc gcgacagttg gtaaccctta ttcggtacta 40

<210> 99

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 99

gacctgctca ttcgaggtga gtaaccctta ttcggtacta 40

<210> 100

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 100

tcacgtagta gcggcttcgg taacccttat tcggtacta 39

<210> 101

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 101

ccaaagatgg gcctacttgt cagtaaccct tattcggtac ta 42

<210> 102

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 102

gacagagctg cacgcttggg taacccttat tcggtacta 39

<210> 103

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 103

ctgggcctgt ttgcgctcag taacccttat tcggtacta 39

<210> 104

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 104

tccttaggca tgcgcggcgt aacccttatt cggtacta 38

<210> 105

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 105

cagcggcagt actcgctgtg taacccttat tcggtacta 39

<210> 106

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 106

atgccaccga tgacccgcgt aacccttatt cggtacta 38

<210> 107

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 107

atcagcgtcg ctccctcggt aacccttatt cggtacta 38

<210> 108

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 108

ctttgagagc tcgaacatcg tgtaaccctt attcggtact a 41

<210> 109

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 109

ttccagtagt taaggcagag cagtaaccct tattcggtac ta 42

<210> 110

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 110

gagctgcagg atcgggtccg taacccttat tcggtacta 39

<210> 111

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 111

acatgagtgg tttcgtagcg ggtaaccctt attcggtact a 41

<210> 112

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 112

tgccgatgac atggaactcg gtaaccctta ttcggtacta 40

<210> 113

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 113

tggtgtaatt gaccttgtag gtagtaaccc ttattcggta cta 43

<210> 114

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 114

cattggccga aagcaggctg taacccttat tcggtacta 39

<210> 115

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 115

gagacctctg ccgaaactgg gtaaccctta ttcggtacta 40

<210> 116

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 116

agtcttgtgc ttcgggtcaa agtaaccctt attcggtact a 41

<210> 117

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 117

cctcttctcg cctggcatag ggtaaccctt attcggtact a 41

<210> 118

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 118

gtaacggtga aaatggaccg ggtaaccctt attcggtact a 41

<210> 119

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 119

tccctctaag ggattaatgc cagtaaccct tattcggtac ta 42

<210> 120

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 120

agttcaagta tcccgcgact agtaacaatt agagtgaaat acc 43

<210> 121

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 121

gaacgcaggc tgtttactgt tgtaacaatt agagtgaaat acc 43

<210> 122

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 122

ggtccaggta aactaatggc tggtaacaat tagagtgaaa tacc 44

<210> 123

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 123

ctctgttgag tttacctcgc aagtaacaat tagagtgaaa tacc 44

<210> 124

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 124

tacttcaact aaccagtcca cggtaacaat tagagtgaaa tacc 44

<210> 125

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 125

ccatgagaca aggcttaaga ctgtaacaat tagagtgaaa tacc 44

<210> 126

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 126

cggccaaaga atagtcgtag cgtaacaatt agagtgaaat acc 43

<210> 127

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 127

ccatttccct aaggtatgtg tgagtaacaa ttagagtgaa atacc 45

<210> 128

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 128

ctctcatact gttagtgatg tctggtaaca attagagtga aatacc 46

<210> 129

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 129

cagctttgtc ccgtgactgt gtaacaatta gagtgaaata cc 42

<210> 130

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 130

tgctgcaatg ctagcagcgg taacaattag agtgaaatac c 41

<210> 131

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 131

aagacaggaa cctatcaatg tagtgtaaca attagagtga aatacc 46

<210> 132

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 132

tagattagat tatgcccaag tcaggtaaca attagagtga aatacc 46

<210> 133

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 133

catgtaaccc actttaggtt tacagtaaca attagagtga aatacc 46

<210> 134

<211> 47

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 134

ccagtctttc gtattaatga ttcaggtaac aattagagtg aaatacc 47

<210> 135

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 135

tgcaacccgt ctcgtcttcg gtaacaatta gagtgaaata cc 42

<210> 136

<211> 47

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 136

gtgtaggtat catctgtaat gtacagtaac aattagagtg aaatacc 47

<210> 137

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 137

tcccggactt cagtaccgcg taacaattag agtgaaatac c 41

<210> 138

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 138

cgaggaggtt gcgaaaggcg taacaattag agtgaaatac c 41

<210> 139

<211> 49

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 139

tatacatata ctcaacactt atagagggta acaattagag tgaaatacc 49

<210> 140

<211> 49

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 140

gtaatagata ccataatttg tacttgggta acaattagag tgaaatacc 49

<210> 141

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 141

tgctgctgcg ctagacccgt aacaattaga gtgaaatacc 40

<210> 142

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 142

gcgtggcgag ccaaagacgt aacaattaga gtgaaatacc 40

<210> 143

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 143

tccgcggttg ttggacgggt aacaattaga gtgaaatacc 40

<210> 144

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 144

ctgtcacata cgcaaactgg tgtaacatcg ttatagctag a 41

<210> 145

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 145

tcgccatata ccggtcaaag agtaacatcg ttatagctag a 41

<210> 146

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 146

tggatggtgc aataatccga gggtaacatc gttatagcta ga 42

<210> 147

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 147

agtgctgatc ccttaagtat gtcgtaacat cgttatagct aga 43

<210> 148

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 148

acctccatta accaatccag aaggtaacat cgttatagct aga 43

<210> 149

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 149

tggtgtactt gacccactta tttgtaacat cgttatagct aga 43

<210> 150

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 150

cagaagagaa cgtggagcag ggtaacatcg ttatagctag a 41

<210> 151

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 151

tccctgtgaa gtttatagac ttcagtaaca tcgttatagc taga 44

<210> 152

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 152

tgtaaaagca aacgcacgcc gtaacatcgt tatagctaga 40

<210> 153

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 153

attcagatga cgagaaatga tacagtaaca tcgttatagc taga 44

<210> 154

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 154

tggtcacgcc atttccggcg taacatcgtt atagctaga 39

<210> 155

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 155

agcaagtata ccataaggaa attcagtaac atcgttatag ctaga 45

<210> 156

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 156

ctcgccgtcc tgtcgatttt gtaacatcgt tatagctaga 40

<210> 157

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 157

agcgagccga gaactccggt aacatcgtta tagctaga 38

<210> 158

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 158

tattttgttc agacaacatg gctgtaacat cgttatagct aga 43

<210> 159

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 159

ccacttggta caacggagcc gtaacatcgt tatagctaga 40

<210> 160

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 160

cagaacacct gcgaggagag gtaacatcgt tatagctaga 40

<210> 161

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 161

ttcatcagcg acgcccctgg taacatcgtt atagctaga 39

<210> 162

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 162

cctgcaaaaa aacggtcacg tgtaacatcg ttatagctag a 41

<210> 163

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 163

tgtgggagtc ccttaggtca agtaacatcg ttatagctag a 41

<210> 164

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 164

gcatcgggag cacgcactgt aacatcgtta tagctaga 38

<210> 165

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 165

ggctctgcac aacgcttgcg taacatcgtt atagctaga 39

<210> 166

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 166

agccaggaca caatagtcag ggtaacatcg ttatagctag a 41

<210> 167

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 167

agccaggaca caatagtcag ggtaacatcg ttatagctag a 41

<210> 168

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 168

ttgcacatcc tacggtcttc tgtaacttac tacggagtta ac 42

<210> 169

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 169

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<210> 170

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 170

cctttaagcg cgtcgtgtcc gtaacttact acggagttaa c 41

<210> 171

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 171

cctcgacgca tgatgccggt aacttactac ggagttaac 39

<210> 172

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 172

gccccatggc tcgtgtaggg taacttacta cggagttaac 40

<210> 173

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 173

ccaattgtgt tccggcaagt tgtaacttac tacggagtta ac 42

<210> 174

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 174

gataggattt ggtcggaaac ctgtaactta ctacggagtt aac 43

<210> 175

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 175

tagttgccaa cggtgttgta gtaacttact acggagttaa c 41

<210> 176

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 176

cttggcctat gcggaagtaa cgtaacttac tacggagtta ac 42

<210> 177

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 177

ctcgcagcga taggaaccat gtaacttact acggagttaa c 41

<210> 178

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 178

tttgcattcg tccatatcaa ctggtaactt actacggagt taac 44

<210> 179

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 179

tcaatatcaa cgggtaaacc gggtaactta ctacggagtt aac 43

<210> 180

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 180

ttgttactga cgtgggaaat attggtaact tactacggag ttaac 45

<210> 181

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 181

tctccgctga tacccgggtg taacttacta cggagttaac 40

<210> 182

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 182

ggccagtcac cgaaatttca tgtaacttac tacggagtta ac 42

<210> 183

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 183

agttcgtagc ctatctcaca ctgtaactta ctacggagtt aac 43

<210> 184

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 184

cacattcccg tacgtttgct ggtaacttac tacggagtta ac 42

<210> 185

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 185

agtgagtccc tatgtatcct ttctgtaact tactacggag ttaac 45

<210> 186

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 186

aagcattata acgtgatcca caggtaactt actacggagt taac 44

<210> 187

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 187

tgcgccctga agcgcacgta acttactacg gagttaac 38

<210> 188

<211> 47

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 188

taaaaaatag cacgattaca gtatacgtaa cttactacgg agttaac 47

<210> 189

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 189

catatcgacg gattgagcct aacgtaactt actacggagt taac 44

<210> 190

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 190

cggtttctcg cgagagaaat agtaacttac tacggagtta ac 42

<210> 191

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 191

cttcccatct cgtgtaacat gagtaactta ctacggagtt aac 43

<210> 192

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 192

gcatttcaca tcggactgta ccgtaacttc gaaacggaaa c 41

<210> 193

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 193

tggaattctc ggcggaccag taacttcgaa acggaaac 38

<210> 194

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 194

gaagtggaaa tacgaccttt gcgtaacttc gaaacggaaa c 41

<210> 195

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 195

gctggtccct tgcgtaacat gtaacttcga aacggaaac 39

<210> 196

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 196

ttttcatcta ttcgagatgc tcccgtaact tcgaaacgga aac 43

<210> 197

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 197

tattcatccc gtggggtagt agtaacttcg aaacggaaac 40

<210> 198

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 198

taaaaatagg cccggatttg tctgtaactt cgaaacggaa ac 42

<210> 199

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 199

tccaaccttg acgacaagat agggtaactt cgaaacggaa ac 42

<210> 200

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 200

aggcaacagt cgaaccattc tgtaacttcg aaacggaaac 40

<210> 201

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 201

gcttcatttg cgactgctct tgtaacttcg aaacggaaac 40

<210> 202

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 202

catcaggacg cttgtattgg tggtaacttc gaaacggaaa c 41

<210> 203

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 203

atcttcaatc cgagaatcca gcgtaacttc gaaacggaaa c 41

<210> 204

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 204

ctgtagtgtg gtagtaagga agagtaactt cgaaacggaa ac 42

<210> 205

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 205

gaacacctta cttacaacac ctggtaactt cgaaacggaa ac 42

<210> 206

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 206

gtacattgta caccgttaca atgggtaact tcgaaacgga aac 43

<210> 207

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 207

tttcaagtcg tctatgttag ctggtaactt cgaaacggaa ac 42

<210> 208

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 208

caaagcaact atatgaagct tcattgtaac ttcgaaacgg aaac 44

<210> 209

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 209

catacttcta tcgagagctc agggtaactt cgaaacggaa ac 42

<210> 210

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 210

acgaagaaat cgagtaggtc tagggtaact tcgaaacgga aac 43

<210> 211

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 211

gaatcattga gtcgaccctt cagtaacttc gaaacggaaa c 41

<210> 212

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 212

tgatgtgctt aagtagtgca gcgtaacttc gaaacggaaa c 41

<210> 213

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 213

tccacggcat gatacataca acgtaacttc gaaacggaaa c 41

<210> 214

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 214

tctcagagca tcccgaatcc agtaacttcg aaacggaaac 40

<210> 215

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 215

gtggaacgaa gagtaggtag tttgtaactt cgaaacggaa ac 42

<210> 216

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 216

gatcaatact ggacggagtc aggtaacctc gtcggatca 39

<210> 217

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 217

gagcttgtta ctcgtgcctt ggtaacctcg tcggatca 38

<210> 218

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 218

cttcttacac ttgcggacgc gtaacctcgt cggatca 37

<210> 219

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 219

caatacctat tccgttacac acttgtaacc tcgtcggatc a 41

<210> 220

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 220

gctccttcag tccggtttta ttgtaacctc gtcggatca 39

<210> 221

<211> 36

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 221

gacgcacgag ccgtgatctg taacctcgtc ggatca 36

<210> 222

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 222

gactgctaag gcataggaat tttcgtaacc tcgtcggatc a 41

<210> 223

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 223

caccacataa ttacggggac acgtaacctc gtcggatca 39

<210> 224

<211> 34

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 224

cggcaaggcc cttcgcagta acctcgtcgg atca 34

<210> 225

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 225

tccatctggt acgtggtggg gtaacctcgt cggatca 37

<210> 226

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 226

gtcctgccgc gtatgatttc tgtaacctcg tcggatca 38

<210> 227

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 227

tgttcaggct gacgactgca gtaacctcgt cggatca 37

<210> 228

<211> 36

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 228

gcatggaggt ccgtcctgtg taacctcgtc ggatca 36

<210> 229

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 229

ttgagggagc gtaatcccaa ggtaacctcg tcggatca 38

<210> 230

<211> 36

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 230

ccggcgtctg cgtacttccg taacctcgtc ggatca 36

<210> 231

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 231

cgactatctg cgtctatcat ccgtaacctc gtcggatca 39

<210> 232

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 232

gagaattcga tgatcaactc acggtaacct cgtcggatca 40

<210> 233

<211> 35

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 233

tggcctgtcg tccggtctgt aacctcgtcg gatca 35

<210> 234

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 234

cagggattcc gtcatatggc tgtaacctcg tcggatca 38

<210> 235

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 235

agacatcgat ggtacatatg ggtgtaacct cgtcggatca 40

<210> 236

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 236

tctgagctgt atcgctgcaa gtaacctcgt cggatca 37

<210> 237

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 237

tcttaggccc attcgttgga gtaacctcgt cggatca 37

<210> 238

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 238

ttatacaccg tgccgaacgc gtaacctcgt cggatca 37

<210> 239

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 239

atgccctttg cgatctgcac gtaacctcgt cggatca 37

<210> 240

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 240

ggcagaattc cgaagttcag cgtaacataa tcgtagtttc gg 42

<210> 241

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 241

gtttccttca cgacaggtgt ggtaacataa tcgtagtttc gg 42

<210> 242

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 242

ctggtagaaa tgcgactaaa gacgtaacat aatcgtagtt tcgg 44

<210> 243

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 243

tgaccagcat cgtttcatct aatgtaacat aatcgtagtt tcgg 44

<210> 244

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 244

ttcgaagttc aaccgagtga cgtaacataa tcgtagtttc gg 42

<210> 245

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 245

ccaccaatcc aatgcggaat tgtaacataa tcgtagtttc gg 42

<210> 246

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 246

agactcggtg ccattcgtat tgtaacataa tcgtagtttc gg 42

<210> 247

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 247

ataactgcta actgcgcaac cgtaacataa tcgtagtttc gg 42

<210> 248

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 248

gtagtgaggc cgcttataac cagtaacata atcgtagttt cgg 43

<210> 249

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 249

ggtgatgatt cgatggagtg aagtaacata atcgtagttt cgg 43

<210> 250

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 250

ctgctgcttt acgtttggtg cgtaacataa tcgtagtttc gg 42

<210> 251

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 251

tcatcaacca cgtctttgga tagtaacata atcgtagttt cgg 43

<210> 252

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 252

aggcagatct taaagtgttg gttgtaacat aatcgtagtt tcgg 44

<210> 253

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 253

tgagggctta tacgaaagca aggtaacata atcgtagttt cgg 43

<210> 254

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 254

gctcagtact gactttggta tgtgtaacat aatcgtagtt tcgg 44

<210> 255

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 255

cagtcaatca ttagatccac atctgtaaca taatcgtagt ttcgg 45

<210> 256

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 256

ggaagctgct cgtcgaagcg taacataatc gtagtttcgg 40

<210> 257

<211> 47

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 257

gagaagatac ttatagcttc ttgtctgtaa cataatcgta gtttcgg 47

<210> 258

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 258

tcaatgctat ctaactgatg aagagtaaca taatcgtagt ttcgg 45

<210> 259

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 259

atcttcccaa ttgatgtaag tacttgtaac ataatcgtag tttcgg 46

<210> 260

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 260

catcacagtc cgagacgccg taacataatc gtagtttcgg 40

<210> 261

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 261

cattccaccg gcctgtgcgg taacataatc gtagtttcgg 40

<210> 262

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 262

ggacagcact actctagagt aaggtaacat aatcgtagtt tcgg 44

<210> 263

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 263

tgccaagtaa cttagcacac ccgtaacata atcgtagttt cgg 43

<210> 264

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 264

gtgccacctt tcaccgtgag taaccggtag aattacgg 38

<210> 265

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 265

ccgcaggtac gacttgcctg taaccggtag aattacgg 38

<210> 266

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 266

tgggcttcaa tcagatggtc agtaaccggt agaattacgg 40

<210> 267

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 267

agaacaccag ggtacgcata gtgtaaccgg tagaattacg g 41

<210> 268

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 268

tctccgagag tgtcagcggg taaccggtag aattacgg 38

<210> 269

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 269

gtcttcccgg ccggtcttgg taaccggtag aattacgg 38

<210> 270

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 270

catgttgcag attgtcgcca gtaaccggta gaattacgg 39

<210> 271

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 271

ggttcagtcg tttgcgaaca gtaaccggta gaattacgg 39

<210> 272

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 272

agctaccaat tagacccact cggtaaccgg tagaattacg g 41

<210> 273

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 273

cgtagttctc gtctccgatc agtaaccggt agaattacgg 40

<210> 274

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 274

ggagctgaac ttgacgccag gtaaccggta gaattacgg 39

<210> 275

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 275

taatggatgt actcgttggg cgtaaccggt agaattacgg 40

<210> 276

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 276

tctgtgcata gccgtcccgg taaccggtag aattacgg 38

<210> 277

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 277

tggctggacg gatcggatcg taaccggtag aattacgg 38

<210> 278

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 278

ggtttgcgtc gttgcggcgt aaccggtaga attacgg 37

<210> 279

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 279

tctctgggga cgtgacaaag gtaaccggta gaattacgg 39

<210> 280

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 280

gaattcatca gctagattgg caagtaaccg gtagaattac gg 42

<210> 281

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 281

tcactccgtg ggctaagcgg taaccggtag aattacgg 38

<210> 282

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 282

tgtaagggaa cacggaagtg ggtaaccggt agaattacgg 40

<210> 283

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 283

ctcaatggtg gcgcggatcg taaccggtag aattacgg 38

<210> 284

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 284

aaccactcaa tctgcgtctc ggtaaccggt agaattacgg 40

<210> 285

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 285

gctgtagggc gccattttgt gtaaccggta gaattacgg 39

<210> 286

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 286

tgagtgacgg cattgcgcag taaccggtag aattacgg 38

<210> 287

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 287

caaagtggct catcgccacc gtaaccggta gaattacgg 39

<210> 288

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 288

tctatatgct aaatgtattg ccatggtaac gcttctcata acact 45

<210> 289

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 289

ctatgaaact tcgtggtcac tccgtaacgc ttctcataac act 43

<210> 290

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 290

aactaactca tctgcagtac catgtaacgc ttctcataac act 43

<210> 291

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 291

aaaacctgct tgatccacat tctgtaacgc ttctcataac act 43

<210> 292

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 292

acattaacaa atcactcttg attcagtaac gcttctcata acact 45

<210> 293

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 293

ttttgcttag ctcatggtaa acagtaacgc ttctcataac act 43

<210> 294

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 294

gaggagctgt tggataaata attttgtaac gcttctcata acact 45

<210> 295

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 295

aagcaggcag gtattgtatg attgtaacgc ttctcataac act 43

<210> 296

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 296

gcaacttata tatcagtggt gaatggtaac gcttctcata acact 45

<210> 297

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 297

agattatgta tgcatgagaa ccaacgtaac gcttctcata acact 45

<210> 298

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 298

gatcatgact ctccttatgg ttaatgtaac gcttctcata acact 45

<210> 299

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 299

tgtgaaaccg gtttataaac ctagtaacgc ttctcataac act 43

<210> 300

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 300

aataagatta gctactgtct acagtggtaa cgcttctcat aacact 46

<210> 301

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 301

taaacaaata gtgatacatc cacacgtaac gcttctcata acact 45

<210> 302

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 302

ttcagtcatc taacaatgta ttcctgtaac gcttctcata acact 45

<210> 303

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 303

agctgtggga aagtctttaa ctcgtaacgc ttctcataac act 43

<210> 304

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 304

atagatgaac tattgatgta cacaacgtaa cgcttctcat aacact 46

<210> 305

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 305

tacagatgaa attgagacct aaaacgtaac gcttctcata acact 45

<210> 306

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 306

agcaatttgg gttaacagaa atagagtaac gcttctcata acact 45

<210> 307

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 307

aatccaatgg gataagtact attagtgtaa cgcttctcat aacact 46

<210> 308

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 308

aatgttattc cgtggaaaat tacatgtaac gcttctcata acact 45

<210> 309

<211> 47

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 309

ttacagaatt gtgtctgaaa aattatggta acgcttctca taacact 47

<210> 310

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 310

atcagagagg cgctatgcct gtaacgcttc tcataacact 40

<210> 311

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 311

cggcgacacg atacagcggt aacgcttctc ataacact 38

<210> 312

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 312

cacttcaaat gcgcaacaag cgtaacgtcg ctgaaaaatc 40

<210> 313

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 313

gtaagcactg cgcaagacaa gtaacgtcgc tgaaaaatc 39

<210> 314

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 314

gtgatgagct cgacaggata ttgtaacgtc gctgaaaaat c 41

<210> 315

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 315

atggcgtcgt cggcacacgt aacgtcgctg aaaaatc 37

<210> 316

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 316

tttacaacag cgtggcaagt ggtaacgtcg ctgaaaaatc 40

<210> 317

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 317

aggcatgaag tgagacaatg cgtaacgtcg ctgaaaaatc 40

<210> 318

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 318

cctggctagt ggtatatgtc acgtaacgtc gctgaaaaat c 41

<210> 319

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 319

gctgatgatg ttcaagcgca gtaacgtcgc tgaaaaatc 39

<210> 320

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 320

ctgccagtta gttaggcaag ttgtaacgtc gctgaaaaat c 41

<210> 321

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 321

gcagctccgg gctacaagtg taacgtcgct gaaaaatc 38

<210> 322

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 322

tggcagctgt ctaactggag cgtaacgtcg ctgaaaaatc 40

<210> 323

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 323

acgcgtgtgc gagtagatgg taacgtcgct gaaaaatc 38

<210> 324

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 324

agctccacga aggatgccag taacgtcgct gaaaaatc 38

<210> 325

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 325

tgaggacggc atcgagatcc gtaacgtcgc tgaaaaatc 39

<210> 326

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 326

gtcttgagac ccggtcttgg gtaacgtcgc tgaaaaatc 39

<210> 327

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 327

agtggtctgg atcggtgcgg taacgtcgct gaaaaatc 38

<210> 328

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 328

tccattctgg gtcgagtgga gtaacgtcgc tgaaaaatc 39

<210> 329

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 329

ggaccccaag gtgttccaag gtaacgtcgc tgaaaaatc 39

<210> 330

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 330

agcagcttgg ctactccccg taacgtcgct gaaaaatc 38

<210> 331

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 331

tttgggtatg ggtactgtgt agagtaacgt cgctgaaaaa tc 42

<210> 332

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 332

gccgcaggga tagatccagg gtaacgtcgc tgaaaaatc 39

<210> 333

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 333

tgaagacagt cctatggact tccgtaacgt cgctgaaaaa tc 42

<210> 334

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 334

aagctgaagc gcgggtcagt aacgtcgctg aaaaatc 37

<210> 335

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 335

ccacgcagcc cttcgagagt aacgtcgctg aaaaatc 37

<210> 336

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 336

tagtaggtgt cgacaactag agcgtaactc ttcaagatta atacc 45

<210> 337

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 337

gatggtcctg atcgagaaac cagtaactct tcaagattaa tacc 44

<210> 338

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 338

aagaggactt cgctgaattg acgtaactct tcaagattaa tacc 44

<210> 339

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 339

gaacctccga ctgtatgtca gcgtaactct tcaagattaa tacc 44

<210> 340

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 340

tctgaattag agcgatgttg acagtaactc ttcaagatta atacc 45

<210> 341

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 341

gcattcctcc gatcgcacag taactcttca agattaatac c 41

<210> 342

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 342

ctctatattt agctcgctgt tcaagtaact cttcaagatt aatacc 46

<210> 343

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 343

tattcatcac ggcgcgcttg taactcttca agattaatac c 41

<210> 344

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 344

cattggggac cgtgcataaa agtaactctt caagattaat acc 43

<210> 345

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 345

caaggggtgc actatttggg agtaactctt caagattaat acc 43

<210> 346

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 346

ggaccgtatt tcggcgaaat agtaactctt caagattaat acc 43

<210> 347

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 347

atactgcact tgtcggcatg agtaactctt caagattaat acc 43

<210> 348

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 348

atggcagatc gatccattgg tgtaactctt caagattaat acc 43

<210> 349

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 349

tccctttgga ccgtcaagaa ggtaactctt caagattaat acc 43

<210> 350

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 350

aggcttgctg acatacgcag gtaactcttc aagattaata cc 42

<210> 351

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 351

cttgctttgt gcgaacaccc gtaactcttc aagattaata cc 42

<210> 352

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 352

ctgatatcga atgcaatgga tgagtaactc ttcaagatta atacc 45

<210> 353

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 353

taggactggt ccgtcaaaaa cgtaactctt caagattaat acc 43

<210> 354

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 354

tgaccattct cgggacacta acgtaactct tcaagattaa tacc 44

<210> 355

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 355

atgattgggt ccgtaaaaat gcgtaactct tcaagattaa tacc 44

<210> 356

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 356

gtttcatgta tggtaggacc accgtaactc ttcaagatta atacc 45

<210> 357

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 357

ctcttgcatc gtagcgaact agtaactctt caagattaat acc 43

<210> 358

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 358

atgatgattc cctcggtcag agtaactctt caagattaat acc 43

<210> 359

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 359

agtagagaag atcgctgata tccggtaact cttcaagatt aatacc 46

<210> 360

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 360

aacccttgac atcgccagtt tgtaacgtac cgtttgtata tg 42

<210> 361

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 361

gaaggttaaa cgagatttcc aaaggtaacg taccgtttgt atatg 45

<210> 362

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 362

gccactcgac atttctgccg gtaacgtacc gtttgtatat g 41

<210> 363

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 363

tcatactgtc cgcaacatcc ggtaacgtac cgtttgtata tg 42

<210> 364

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 364

gccactcgac atttctgccg gtaacgtacc gtttgtatat g 41

<210> 365

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 365

tcatactgtc cgcaacatcc ggtaacgtac cgtttgtata tg 42

<210> 366

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 366

tgaattttgc ccgaacttca ctgtaacgta ccgtttgtat atg 43

<210> 367

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 367

acacactcgg agcgcgcgta acgtaccgtt tgtatatg 38

<210> 368

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 368

caaacctata tgcccgttga ctgtaacgta ccgtttgtat atg 43

<210> 369

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 369

caggaacctt taccatgttc atggtaacgt accgtttgta tatg 44

<210> 370

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 370

gaaaatctct acggatgaat ttcttgtaac gtaccgtttg tatatg 46

<210> 371

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 371

gctgctaaga tagccttgtg aggtaacgta ccgtttgtat atg 43

<210> 372

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 372

tggcactaaa aaccggagaa cgtaacgtac cgtttgtata tg 42

<210> 373

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 373

tgcgggaccg ccgatacagt aacgtaccgt ttgtatatg 39

<210> 374

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 374

ggaaattaaa cggagtctta caacgtaacg taccgtttgt atatg 45

<210> 375

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 375

agccagagag cggtatgccg taacgtaccg tttgtatatg 40

<210> 376

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 376

ccaccaagtg gggatgtgac gtaacgtacc gtttgtatat g 41

<210> 377

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 377

cacacatgac ctttaagcgc tgtaacgtac cgtttgtata tg 42

<210> 378

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 378

tccacagatt gcgctgtcta gtaacgtacc gtttgtatat g 41

<210> 379

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 379

ctccacggac aggttactgc gtaacgtacc gtttgtatat g 41

<210> 380

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 380

gcgtcatggc gtcagcacgt aacgtaccgt ttgtatatg 39

<210> 381

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 381

tcctggccgg caacacacgt aacgtaccgt ttgtatatg 39

<210> 382

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 382

agccattttg tcgaggtttg ggtaacgtac cgtttgtata tg 42

<210> 383

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 383

catccgaagc atgatagttg atggtaacgt accgtttgta tatg 44

<210> 384

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 384

tagtgtgttg cgtatcaagt atctagacga tgcgaattaa cac 43

<210> 385

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 385

ttattgtgaa ctctagacat gagagtagac gatgcgaatt aacac 45

<210> 386

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 386

acagtgaata ctaagactgt aaaaactaga cgatgcgaat taacac 46

<210> 387

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 387

acacaaggca cgtagaaaca gtagacgatg cgaattaaca c 41

<210> 388

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 388

caatggacag cggttgtgaa atagacgatg cgaattaaca c 41

<210> 389

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 389

caccatcacc tatcgacaga gttagacgat gcgaattaac ac 42

<210> 390

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 390

cattgcatta cgttccacat ggtagacgat gcgaattaac ac 42

<210> 391

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 391

acacagagtg tccgataccc atagacgatg cgaattaaca c 41

<210> 392

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 392

ggtgattaca ttgagtgcta ggatagacga tgcgaattaa cac 43

<210> 393

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 393

tccacataag cgttcaaggt atagacgatg cgaattaaca c 41

<210> 394

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 394

cagaataatc gctattccta gctgtagacg atgcgaatta acac 44

<210> 395

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 395

ttacactcat acgtcgccgg tagacgatgc gaattaacac 40

<210> 396

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 396

tggccataaa ggctacttac aattagacga tgcgaattaa cac 43

<210> 397

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 397

tttcaagtta ttcgatctgc taacctagac gatgcgaatt aacac 45

<210> 398

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 398

agttagtcaa ggactttact aaggttagac gatgcgaatt aacac 45

<210> 399

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 399

ttacctcaaa tacgggctac catagacgat gcgaattaac ac 42

<210> 400

<211> 47

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 400

gagttatatt actctaacta aagccagtag acgatgcgaa ttaacac 47

<210> 401

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 401

ttgtcaacac gcataaaatc tgctagacga tgcgaattaa cac 43

<210> 402

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 402

tcatatacaa tcggggatct gagtagacga tgcgaattaa cac 43

<210> 403

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 403

cccacaaaaa tacccgtaag ttatagacga tgcgaattaa cac 43

<210> 404

<211> 47

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 404

cactaaatta ttacgaattt tgcaaagtag acgatgcgaa ttaacac 47

<210> 405

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 405

tcaaataaaa accgtcaaaa gtttatagac gatgcgaatt aacac 45

<210> 406

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 406

agtgcaatgg tatcacgtac tgtagacgat gcgaattaac ac 42

<210> 407

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 407

atgtgtcttg caattggatt ccctagacga tgcgaattaa cac 43

<210> 408

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 408

ggtgtgcgcg tcgtacacta gacccgttat aagtgttg 38

<210> 409

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 409

gtgtttaggg tcgcggttga tagacccgtt ataagtgttg 40

<210> 410

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 410

gagaatggcg aagtaaatgc cctagacccg ttataagtgt tg 42

<210> 411

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 411

gtagatggaa tagacacggc tgtagacccg ttataagtgt tg 42

<210> 412

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 412

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<210> 413

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 413

aaaccagtat ttcgtcacag tgatagaccc gttataagtg ttg 43

<210> 414

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 414

gatgggaacg gtgtagagat gttagacccg ttataagtgt tg 42

<210> 415

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 415

ttccaaatgc cgtcaaaact gttagacccg ttataagtgt tg 42

<210> 416

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 416

tgggtcacag acggtgtggt agacccgtta taagtgttg 39

<210> 417

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 417

aatcaggtat acttctatcc ttgaaataga cccgttataa gtgttg 46

<210> 418

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 418

tgctgtatta gcaacttgga acttagaccc gttataagtg ttg 43

<210> 419

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 419

gccaataaag cgatggttga tctagacccg ttataagtgt tg 42

<210> 420

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 420

gtaaggatca ctggatccta ctgtagaccc gttataagtg ttg 43

<210> 421

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 421

gacctcattc agttgatgag aggtagaccc gttataagtg ttg 43

<210> 422

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 422

gcataacaga cggttgcaag ttagacccgt tataagtgtt g 41

<210> 423

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 423

acctaaagcg agttgctgag ttagacccgt tataagtgtt g 41

<210> 424

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 424

gagtcagaaa cacgcatgga atagacccgt tataagtgtt g 41

<210> 425

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 425

agcaactctg ataggctcac actagacccg ttataagtgt tg 42

<210> 426

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 426

ccatacccac tacggataaa gatgtagacc cgttataagt gttg 44

<210> 427

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 427

gctttctgta cgactcaggt tttagacccg ttataagtgt tg 42

<210> 428

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 428

caatgttgag ccactaaacc actagacccg ttataagtgt tg 42

<210> 429

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 429

atgcttggat taggtccaaa gctagacccg ttataagtgt tg 42

<210> 430

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 430

cccggtgatg gattagtttg gtagacccgt tataagtgtt g 41

<210> 431

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 431

ccatggccat accctggaat ttagacccgt tataagtgtt g 41

<210> 432

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 432

attatactgt ccagcgtagg tggtagacaa ccgtcgttaa g 41

<210> 433

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 433

tcctggtaag gataggtacc atgtagacaa ccgtcgttaa g 41

<210> 434

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 434

cactgaaata ggacggaatc tgctagacaa ccgtcgttaa g 41

<210> 435

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 435

aaagtttatt ggcgcttgcc gtagacaacc gtcgttaag 39

<210> 436

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 436

gcaatgccat tagcgatacg atagacaacc gtcgttaag 39

<210> 437

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 437

tgattgaaca ccacgcgaca tagacaaccg tcgttaag 38

<210> 438

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 438

agtcttcgaa gcactattgc catagacaac cgtcgttaag 40

<210> 439

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 439

tcaatggttg atcggcctct ctagacaacc gtcgttaag 39

<210> 440

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 440

tggcatgatg tctaatagga gtctagacaa ccgtcgttaa g 41

<210> 441

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 441

ctgcggttta gccttgacgt tagacaaccg tcgttaag 38

<210> 442

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 442

cccagaggac gccatcattt tagacaaccg tcgttaag 38

<210> 443

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 443

tttcttgaaa gacgacagca gttagacaac cgtcgttaag 40

<210> 444

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 444

attaaatgtt cggaaggatg acctagacaa ccgtcgttaa g 41

<210> 445

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 445

tcttttgtca gcacggttgc tagacaaccg tcgttaag 38

<210> 446

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 446

ctggatcagc tcgaccagga tagacaaccg tcgttaag 38

<210> 447

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 447

accatggtcc gacttctgcc tagacaaccg tcgttaag 38

<210> 448

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 448

ctggatattc ggttatctgg gctagacaac cgtcgttaag 40

<210> 449

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 449

atccccttta cgatactctt cagtagacaa ccgtcgttaa g 41

<210> 450

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 450

tccagagcgg gaacagtatg tagacaaccg tcgttaag 38

<210> 451

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 451

gttgcctgca taagatgggc tagacaaccg tcgttaag 38

<210> 452

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 452

ccttttgtgc cgatgacccg tagacaaccg tcgttaag 38

<210> 453

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 453

gcttccgtgg actgggacgt agacaaccgt cgttaag 37

<210> 454

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 454

ccatagaagg acgaggtatt tcctagacaa ccgtcgttaa g 41

<210> 455

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 455

agaatgagtc gctgctcgat atagacaacc gtcgttaag 39

<210> 456

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 456

gcttcgacaa acgcaaagcg tagactcaat gatgataaag a 41

<210> 457

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 457

gctagttcac agaaagacca ttttagactc aatgatgata aaga 44

<210> 458

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 458

cagctcatcg aaagcgaccc tagactcaat gatgataaag a 41

<210> 459

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 459

cggctgctac aaacctcggt agactcaatg atgataaaga 40

<210> 460

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 460

aacaatttga aggccccaca atagactcaa tgatgataaa ga 42

<210> 461

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 461

gcgtctgcac cggagactta gactcaatga tgataaaga 39

<210> 462

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 462

gcgctgctca ggcattggta gactcaatga tgataaaga 39

<210> 463

<211> 47

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 463

ttgttgtgta acaacataat ttcaagtaga ctcaatgatg ataaaga 47

<210> 464

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 464

ctccacgtcg gcgtgcatag actcaatgat gataaaga 38

<210> 465

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 465

ctgcggggat tgtagccggt agactcaatg atgataaaga 40

<210> 466

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 466

atcttagcta ctgaccggct atagactcaa tgatgataaa ga 42

<210> 467

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 467

aagagattat acgcctcacg gatagactca atgatgataa aga 43

<210> 468

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 468

tttcgagtaa cgaaattagc tcctagactc aatgatgata aaga 44

<210> 469

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 469

gacccgcaga ttggcacgta gactcaatga tgataaaga 39

<210> 470

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 470

atggccccaa tctcgtttgg tagactcaat gatgataaag a 41

<210> 471

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 471

ccagtagcta taacgaagtc ctctagactc aatgatgata aaga 44

<210> 472

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 472

acaaattccc ggacactatg gatagactca atgatgataa aga 43

<210> 473

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 473

ttcacagagt tgataaggcc actagactca atgatgataa aga 43

<210> 474

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 474

aactttgccg gtctctttac attagactca atgatgataa aga 43

<210> 475

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 475

ttccaatgtg caagaatgat ttcttagact caatgatgat aaaga 45

<210> 476

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 476

ctccttctgg ggtatttcct gctagactca atgatgataa aga 43

<210> 477

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 477

ccacttcagt tggccggtat agactcaatg atgataaaga 40

<210> 478

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 478

tccgtcaacg tccgcagtta gactcaatga tgataaaga 39

<210> 479

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 479

agtgagatcg ccatagtgca atagactcaa tgatgataaa ga 42

<210> 480

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 480

gaaggtgacc ctataaggag tcatagacta caacaaaaga tcg 43

<210> 481

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 481

aacaccgctt gcatagttgt gtagactaca acaaaagatc g 41

<210> 482

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 482

tacagacgcg gaatcattct ctagactaca acaaaagatc g 41

<210> 483

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 483

tggaggaaat gagcatgacc ttagactaca acaaaagatc g 41

<210> 484

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 484

atggtgtaca ctcgaggctg atagactaca acaaaagatc g 41

<210> 485

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 485

ccttgtggta gacgttcagc ttagactaca acaaaagatc g 41

<210> 486

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 486

ggatcaggtt taatggtcac tatgtagact acaacaaaag atcg 44

<210> 487

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 487

cacacggtca acgctgtaca tagactacaa caaaagatcg 40

<210> 488

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 488

caggtgtttg cggaagttcc tagactacaa caaaagatcg 40

<210> 489

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 489

gtgctcatgg tcgtagagga tagactacaa caaaagatcg 40

<210> 490

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 490

aagtcaaagt acgtctcgat cattagacta caacaaaaga tcg 43

<210> 491

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 491

tcgtagcagc cgttggagat agactacaac aaaagatcg 39

<210> 492

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 492

tcgtggccag agtaggcatt agactacaac aaaagatcg 39

<210> 493

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 493

ggtactctcc aaacgctcgg tagactacaa caaaagatcg 40

<210> 494

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 494

aggtacgaat agggatgtcg tctagactac aacaaaagat cg 42

<210> 495

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 495

agggtatcgt acatcgttcc aatagactac aacaaaagat cg 42

<210> 496

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 496

caggtgatct gcgccgttgt agactacaac aaaagatcg 39

<210> 497

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 497

ccacaggcga tacaaccggt agactacaac aaaagatcg 39

<210> 498

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 498

cagcagcttc gagtgctggt agactacaac aaaagatcg 39

<210> 499

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 499

ccctcacagg acgtcgtcat agactacaac aaaagatcg 39

<210> 500

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 500

gcacgaagcc ttcggtgtct agactacaac aaaagatcg 39

<210> 501

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 501

tgggaagtgt cggctttcat gtagactaca acaaaagatc g 41

<210> 502

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 502

tgggaagtgt cggctttcat gtagactaca acaaaagatc g 41

<210> 503

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 503

tgctcgcact ttggccgcta gactacaaca aaagatcg 38

<210> 504

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 504

gtcttttggc acggtttctg ttagactgta ttcaacgtcc 40

<210> 505

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 505

tacttcttca acgcgaagag ctagactgta ttcaacgtcc 40

<210> 506

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 506

tttgaggttg tatccgctgc ttagactgta ttcaacgtcc 40

<210> 507

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 507

caagttgact aaatctcgta ctttctagac tgtattcaac gtcc 44

<210> 508

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 508

gccttattaa cggtatcttc agaatagact gtattcaacg tcc 43

<210> 509

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 509

tgttctggat ttcgcaggtc ctagactgta ttcaacgtcc 40

<210> 510

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 510

gctttatcag gttatgttgc atgtagactg tattcaacgt cc 42

<210> 511

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 511

gattctggct tatagggtat tcactagact gtattcaacg tcc 43

<210> 512

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 512

ttttcctccc gcaattccta gatagactgt attcaacgtc c 41

<210> 513

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 513

tgtttccgtc aaatcgtgtg gtagactgta ttcaacgtcc 40

<210> 514

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 514

ggttccctct agatcttgcc tttagactgt attcaacgtc c 41

<210> 515

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 515

gcatgtacca cctatcatct aatgtagact gtattcaacg tcc 43

<210> 516

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 516

gttgccaaca cgagctgact tagactgtat tcaacgtcc 39

<210> 517

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 517

actgactact agttcaagcg catagactgt attcaacgtc c 41

<210> 518

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 518

tctcttgctc gctttggacc tagactgtat tcaacgtcc 39

<210> 519

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 519

cactgctaga acaactatca atttgtagac tgtattcaac gtcc 44

<210> 520

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 520

ttacatggct taagttgggg agtagactgt attcaacgtc c 41

<210> 521

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 521

gtgaggggac gctcttgtat ttagactgta ttcaacgtcc 40

<210> 522

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 522

aacggtgcta tgcctagtag atagactgta ttcaacgtcc 40

<210> 523

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 523

tttgccttcc ctagagtgct atagactgta ttcaacgtcc 40

<210> 524

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<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 524

atgtcccaat ggatacttaa agcctagact gtattcaacg tcc 43

<210> 525

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 525

cttccagtaa cgagatactt tccttagact gtattcaacg tcc 43

<210> 526

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 526

caaccatgaa ttagtccctt gggtagactg tattcaacgt cc 42

<210> 527

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 527

cagcattatt agacacttta actgttagac tgtattcaac gtcc 44

<210> 528

<211> 43

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<213> 人工序列

<220>

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<400> 528

tgcacatatg attgacgctc agtagactct tatattgagt ggt 43

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<220>

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<400> 529

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<220>

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<220>

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<220>

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<220>

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tccatcagga ctaaatctca cactagactc ttatattgag tggt 44

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<220>

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gcagtgtaca atgaacgaga aattagactc ttatattgag tggt 44

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<220>

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<220>

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<220>

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<400> 539

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<220>

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ctgagggtcg tcgttgtctt tagactctta tattgagtgg t 41

<210> 541

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<220>

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agcaacagtc gacgagggat agactcttat attgagtggt 40

<210> 544

<211> 48

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<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 544

atatattcca tactactaac agacatatag actcttatat tgagtggt 48

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<220>

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<220>

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<210> 547

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<220>

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<210> 548

<211> 40

<212> DNA

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<220>

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<400> 548

gctttgccag ctcaccactt agactcttat attgagtggt 40

<210> 549

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<212> DNA

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<220>

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aaatacccat aaggcgtgat gctagactct tatattgagt ggt 43

<210> 550

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

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attactatcc tgcgtgaaat ccatagactc ttatattgag tggt 44

<210> 551

<211> 43

<212> DNA

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<220>

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cccaaagtcg aacagttttg tctagactct tatattgagt ggt 43

<210> 552

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<220>

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<210> 553

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<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

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<400> 553

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<210> 554

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 554

actcctctgg ttacgcttca tttagaccta ttctatgctt cg 42

<210> 555

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

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<210> 556

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

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<210> 557

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<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 557

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<210> 558

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 558

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<210> 559

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 559

gcttctttcc cgcccaaaat atagacctat tctatgcttc g 41

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<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

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<210> 561

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<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

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tgacgtgcgg cgaaatttat gtagacctat tctatgcttc g 41

<210> 562

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

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gcttattgca gcgatggatg atagacctat tctatgcttc g 41

<210> 563

<211> 42

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<213> 人工序列

<220>

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<211> 41

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ctcttaagta cgcaataatt ctctctagac ctattctatg cttcg 45

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<211> 43

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<220>

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gttccgtata tgtcggatct ctctagacct attctatgct tcg 43

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<220>

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<213> 人工序列

<220>

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tttgtgaaac cgtagtggct cttagaccta ttctatgctt cg 42

<210> 569

<211> 42

<212> DNA

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<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 569

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<210> 570

<211> 41

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<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 570

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<210> 571

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atctctatat gacgtgctgt tggtagacct attctatgct tcg 43

<210> 572

<211> 43

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<213> 人工序列

<220>

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<220>

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<210> 574

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<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 574

actccgtgta aacgcagtgg tagacctatt ctatgcttcg 40

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<211> 43

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<213> 人工序列

<220>

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acacataact cgttaacacg ttctagacct attctatgct tcg 43

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<220>

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cagatctgtt gagctaacag ggtagacatg ttataccatg cg 42

<210> 577

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<212> DNA

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<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

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<210> 578

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<212> DNA

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<220>

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<210> 579

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<212> DNA

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<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 579

agtcccatat tgccgttcat gctagacatg ttataccatg cg 42

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atttcctcat aacggtcatg gctagacatg ttataccatg cg 42

<210> 581

<211> 42

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<220>

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ttactgccta gctagcaggt tatagacatg ttataccatg cg 42

<210> 582

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<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

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<210> 583

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<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 583

cttgccaaac cctagcttgg atagacatgt tataccatgc g 41

<210> 584

<211> 45

<212> DNA

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<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

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<210> 585

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<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

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<220>

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<220>

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<210> 588

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<220>

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<210> 590

<211> 43

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<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 590

aaatcagtta taccaagggg agatagacat gttataccat gcg 43

<210> 591

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 591

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<210> 592

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<220>

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<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 601

gttgcaggca tgacgcaagt agacaatcta tttaccctac g 41

<210> 602

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 602

aaaacgccta cgcatcatgt ctagacaatc tatttaccct acg 43

<210> 603

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 603

tggtcctgcg cggatgtcta gacaatctat ttaccctacg 40

<210> 604

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 604

ggtgagcttc tccgtggcgt agacaatcta tttaccctac g 41

<210> 605

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 605

agcgcagggc caattgactt agacaatcta tttaccctac g 41

<210> 606

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 606

ccgggtacac ggttttgatc ttagacaatc tatttaccct acg 43

<210> 607

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 607

ccggctcgat gtcgggtata gacaatctat ttaccctacg 40

<210> 608

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 608

ggcgccttct cgccacatta gacaatctat ttaccctacg 40

<210> 609

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 609

cacgttgaag cgcgggtgta gacaatctat ttaccctacg 40

<210> 610

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 610

gcccacagaa accggtttaa tgtagacaat ctatttaccc tacg 44

<210> 611

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 611

tcagaatgag cgcaatccag gtagacaatc tatttaccct acg 43

<210> 612

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 612

ttcggacaca aagacgctcc tagacaatct atttacccta cg 42

<210> 613

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 613

agcttgacgt aggtgtcggt tagacaatct atttacccta cg 42

<210> 614

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 614

ggttcccgcc aaatttcccg tagacaatct atttacccta cg 42

<210> 615

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 615

cagggctcat gatagtacaa cagtagacaa tctatttacc ctacg 45

<210> 616

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 616

ggactttagc gcggtctcct agacaatcta tttaccctac g 41

<210> 617

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 617

gcagccgttc taagcgctgt agacaatcta tttaccctac g 41

<210> 618

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 618

gctggtaaag gcgcttccct agacaatcta tttaccctac g 41

<210> 619

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 619

gaagaagtcg gtgacgcggt agacaatcta tttaccctac g 41

<210> 620

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 620

ggctggaaac ctcgtccact agacaatcta tttaccctac g 41

<210> 621

<211> 48

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 621

tttattagag tttaggaggt cagaaataga caatctattt accctacg 48

<210> 622

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 622

tgggaggtcc catattcaga ggtagacaat ctatttaccc tacg 44

<210> 623

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 623

tccagggatg tcctacttgt cctagacaat ctatttaccc tacg 44

<210> 624

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 624

ccaggtttcc ggcacagtgg gtaactgaat tgtcacttta 40

<210> 625

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 625

tgttatactt tgtcgctctt agtagagtaa ctgaattgtc acttta 46

<210> 626

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 626

agcttttaac caggtttcga cttcgtaact gaattgtcac ttta 44

<210> 627

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 627

gtatgagaat cccgataaaa ctggtgtaac tgaattgtca cttta 45

<210> 628

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 628

aagaggacat cgaccaatcc tcagtaactg aattgtcact tta 43

<210> 629

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 629

ggtttgtgca agggtcgaaa acgtaactga attgtcactt ta 42

<210> 630

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 630

acacctctcg tagctataga tgtggtaact gaattgtcac ttta 44

<210> 631

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 631

atgagagggc aaccgaggtg agtaactgaa ttgtcacttt a 41

<210> 632

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 632

ccgctgtcag ggtctatcat tccgtaactg aattgtcact tta 43

<210> 633

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 633

gcaatgagca tatcctcggg cgtaactgaa ttgtcacttt a 41

<210> 634

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 634

ggcttgagtg ggttcaccca ggtaactgaa ttgtcacttt a 41

<210> 635

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 635

gcaaggtatg gcaatagctg agtgtaactg aattgtcact tta 43

<210> 636

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 636

cagtaatagt agagacgcca ctacagtaac tgaattgtca cttta 45

<210> 637

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 637

cttccaaagt gtcgcttcag agggtaactg aattgtcact tta 43

<210> 638

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 638

aggcaatttt cccgatactt tttattgtaa ctgaattgtc acttta 46

<210> 639

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 639

tgttagcttc tatagtcact attcgagtaa ctgaattgtc acttta 46

<210> 640

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 640

tcaacaagta atgtatcccg ttcatgtaac tgaattgtca cttta 45

<210> 641

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 641

tttccttggc cgtaagttgt tttcgtaact gaattgtcac ttta 44

<210> 642

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 642

gggtcaaccc agtctgttac ctgtaactga attgtcactt ta 42

<210> 643

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 643

tctgagactg atagggaaac atatgggtaa ctgaattgtc acttta 46

<210> 644

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 644

tctttgccac caatagcttg gagtaactga attgtcactt ta 42

<210> 645

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 645

ctcattggaa tggttagtag agcaagtaac tgaattgtca cttta 45

<210> 646

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 646

ctgagtaaag agcgtgtatt ccaggtaact gaattgtcac ttta 44

<210> 647

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 647

tggaggcata aagctggtag gcgtaactga attgtcactt ta 42

<210> 648

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 648

ggatctcaag cgttgcaggc gtaacgatag atttatacga cg 42

<210> 649

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 649

gcaccgcgag cggactagta acgatagatt tatacgacg 39

<210> 650

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 650

tgctgaggtc gctcacgaag taacgataga tttatacgac g 41

<210> 651

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 651

ccggaccacg tagttaaatc ttgtaacgat agatttatac gacg 44

<210> 652

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 652

aagttctttt gggcgatgcc agtaacgata gatttatacg acg 43

<210> 653

<211> 48

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 653

gttcccttat tagtctaatg ttttgcgtaa cgatagattt atacgacg 48

<210> 654

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 654

ttggaccagt gtacataagg atggtaacga tagatttata cgacg 45

<210> 655

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 655

tggcagtgca cggatggtcg taacgataga tttatacgac g 41

<210> 656

<211> 47

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 656

ataccaattc tagtgagaag ttcacgtaac gatagattta tacgacg 47

<210> 657

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 657

tctctgtagg gtaaggctct gtgtaacgat agatttatac gacg 44

<210> 658

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 658

tttagaggta gaccattgtg tgggtaacga tagatttata cgacg 45

<210> 659

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 659

agagagggca ctctacgctt gtaacgatag atttatacga cg 42

<210> 660

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 660

caaaaagccc tagctcagat gggtaacgat agatttatac gacg 44

<210> 661

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 661

cctctcctcc ctatttggct ggtaacgata gatttatacg acg 43

<210> 662

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 662

ttttacaacg aactcattag gtccgtaacg atagatttat acgacg 46

<210> 663

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 663

ggagtagatc ccccatctat tccgtaacga tagatttata cgacg 45

<210> 664

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 664

gtctcttgcc tcgtttctct ccgtaacgat agatttatac gacg 44

<210> 665

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 665

aattctggcg tagcacaaac agtaacgata gatttatacg acg 43

<210> 666

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 666

ggccatgaac ccctaaatct aaagtaacga tagatttata cgacg 45

<210> 667

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 667

gcccactggt accatcttgg gtaacgatag atttatacga cg 42

<210> 668

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 668

taccacgtgg cactaacaca gtaacgatag atttatacga cg 42

<210> 669

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 669

ttctagcttt tagaccagca gttgtaacga tagatttata cgacg 45

<210> 670

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 670

cccaagtgct agtagaacct gcgtaacgat agatttatac gacg 44

<210> 671

<211> 47

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 671

aaacacatct atactcaaag acagagtaac gatagattta tacgacg 47

<210> 672

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 672

cacagacttg ccgactcttt ggtaacgata gatttatacg acg 43

<210> 673

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 673

cacatgttaa tgttcccgac cagtaacgat agatttatac gacg 44

<210> 674

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 674

attaatcgtt tgcggatctg ccgtaacgat agatttatac gacg 44

<210> 675

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 675

tgggtaacat cggacaagtt tggtaacgat agatttatac gacg 44

<210> 676

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 676

tctgaagttt cgagccaatg ttgtaacgat agatttatac gacg 44

<210> 677

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 677

ccattttcac cgctgaaata gagtaacgat agatttatac gacg 44

<210> 678

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 678

ctggatcaca tgcgttgtca ggtaacgata gatttatacg acg 43

<210> 679

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 679

atatttgcct cgtaagatcc cctgtaacga tagatttata cgacg 45

<210> 680

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 680

ctgaagcggt gttgtatcat agcgtaacga tagatttata cgacg 45

<210> 681

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 681

tagaataatg gttcgtgacc ttcgtaacga tagatttata cgacg 45

<210> 682

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 682

acctgaaggc gacgaggagg taacgataga tttatacgac g 41

<210> 683

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 683

gcctggagtc tatcgtacaa tcgtaacgat agatttatac gacg 44

<210> 684

<211> 47

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 684

acatttaatt agaccgtaac ccttcgtaac gatagattta tacgacg 47

<210> 685

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 685

gctctggcca tacttaacag atagtaacga tagatttata cgacg 45

<210> 686

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 686

cagcattgag tgataatgca atctgtaacg atagatttat acgacg 46

<210> 687

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 687

atacacaccc gctaccttac tggtaacgat agatttatac gacg 44

<210> 688

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 688

acaaagacga gaactatggc aagtaacgat agatttatac gacg 44

<210> 689

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 689

aggcagacgc tctaagtcta aagtaacgat agatttatac gacg 44

<210> 690

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

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tctcttactc atcgtgaaag gcgtaacgat agatttatac gacg 44

<210> 691

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<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 691

gcctcaagtt cgcattcagc gtaacgatag atttatacga cg 42

<210> 692

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

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<400> 692

gaaatggaaa cgttaacagc cagtaacgat agatttatac gacg 44

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<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 693

cacctgcttc ggaatctcag tgtaacgata gatttatacg acg 43

<210> 694

<211> 46

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<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 694

gacttgtgct tcgttaatta aacagtaacg atagatttat acgacg 46

<210> 695

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<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 695

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<220>

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<213> 人工序列

<220>

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<220>

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<400> 698

cctcttctcc gtcaagaagt tcgtaactta taaaggatag acatc 45

<210> 699

<211> 45

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<220>

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<400> 699

tgattgagat ggcggtattt gagtaactta taaaggatag acatc 45

<210> 700

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 700

gccaattata agtactcggg ctgtaactta taaaggatag acatc 45

<210> 701

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

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<400> 701

ccaggccagc gtatgttccg taacttataa aggatagaca tc 42

<210> 702

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<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

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<210> 703

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 703

ggctggacaa taggctccca gtaacttata aaggatagac atc 43

<210> 704

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

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<400> 704

aaagctatgg cacgaaagcc ggtaacttat aaaggataga catc 44

<210> 705

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 705

gcagtccatc taaggtggac tgtaacttat aaaggataga catc 44

<210> 706

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 706

tgtatatgga gtaccctctt gctgtaactt ataaaggata gacatc 46

<210> 707

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 707

ctggatcacc aaaacggcaa tgtaacttat aaaggataga catc 44

<210> 708

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 708

ccaggataac ctttacttgc cagtaactta taaaggatag acatc 45

<210> 709

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 709

atttccagct gcgatatcta ctcgtaactt ataaaggata gacatc 46

<210> 710

<211> 47

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 710

tttatagcag ctagtccttt cttggtaact tataaaggat agacatc 47

<210> 711

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 711

tgatatgaga ttttcccgga tgggtaactt ataaaggata gacatc 46

<210> 712

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<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 712

tgacaacagt tagggcggtg gtaacttata aaggatagac atc 43

<210> 713

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 713

ttggttcccg agtactgtct agtaacttat aaaggataga catc 44

<210> 714

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<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

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<210> 715

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<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

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aagagttgcg acagtatcac ccgtaactta taaaggatag acatc 45

<210> 716

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

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gctgctggat atccctcaga agtaacttat aaaggataga catc 44

<210> 717

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<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 717

tgcaagacag actatgtcta tgggtaactt ataaaggata gacatc 46

<210> 718

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 718

cttcaaggac taggtcaatt gcagtaactt ataaaggata gacatc 46

<210> 719

<211> 47

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 719

gatatgctgc actaactagt cttggtaact tataaaggat agacatc 47

<210> 720

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 720

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<210> 721

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 721

ctgtccataa ttagtccatg aggagtaacg gttatcgtgg aaa 43

<210> 722

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 722

atctttggat tatactgcct gaccgtaacg gttatcgtgg aaa 43

<210> 723

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 723

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<210> 724

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 724

agttaaagtt gagagatcat ctccagtaac ggttatcgtg gaaa 44

<210> 725

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 725

aggaatggat ctatcactat ttctagtaac ggttatcgtg gaaa 44

<210> 726

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 726

cagcataatg attaggtatg caaaagtaac ggttatcgtg gaaa 44

<210> 727

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 727

ttcagtctga taaaatctac agtcagtaac ggttatcgtg gaaa 44

<210> 728

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 728

tccaacactt cgtggggtcc gtaacggtta tcgtggaaa 39

<210> 729

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 729

agggctacaa tgtgatggcc gtaacggtta tcgtggaaa 39

<210> 730

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 730

tcaaggtcat aacctggttc atcgtaacgg ttatcgtgga aa 42

<210> 731

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 731

cctacaacaa acttgtctgg aatgtaacgg ttatcgtgga aa 42

<210> 732

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 732

aaacaacaat ccgcccaaag ggtaacggtt atcgtggaaa 40

<210> 733

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 733

aaagctctac taagcagatg gcgtaacggt tatcgtggaa a 41

<210> 734

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 734

actgctgaca aagattcact gggtaacggt tatcgtggaa a 41

<210> 735

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 735

ctgatagtct ataggctcat agtgcgtaac ggttatcgtg gaaa 44

<210> 736

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 736

atcactaatc acgacgccag ggtaacggtt atcgtggaaa 40

<210> 737

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 737

tggcgatgtc aataggactc cgtaacggtt atcgtggaaa 40

<210> 738

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 738

gaactctcat cttaggcttt gtagtaacgg ttatcgtgga aa 42

<210> 739

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 739

tcaacattac tgaaacacta ctaaagtaac ggttatcgtg gaaa 44

<210> 740

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 740

ggtcgccata acggagccgg taacggttat cgtggaaa 38

<210> 741

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 741

ttcttacaga tatgagttca atgtttgtaa cggttatcgt ggaaa 45

<210> 742

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 742

aggacagaac aaaacttctt agatggtaac ggttatcgtg gaaa 44

<210> 743

<211> 36

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 743

tcgcagccgc ctgaagcgta acggttatcg tggaaa 36

<210> 744

<211> 41

<212> DNA

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<220>

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<400> 744

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<210> 745

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<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 745

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<210> 746

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 746

attcaggaag catacactaa ttcttgtaac ggtactttat ctagct 46

<210> 747

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 747

tccagaaata agcgaaaata gcagtaacgg tactttatct agct 44

<210> 748

<211> 47

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 748

atcttttgaa ctactagcta caaaatgtaa cggtacttta tctagct 47

<210> 749

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 749

taacaagctc gtaatggccc agtaacggta ctttatctag ct 42

<210> 750

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 750

catccaaacc gtgtgaaagc tgtaacggta ctttatctag ct 42

<210> 751

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 751

acaacgccat gtgcgatttg gtaacggtac tttatctagc t 41

<210> 752

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 752

ctacctacca ctaggtacct atcagtaacg gtactttatc tagct 45

<210> 753

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 753

aggacattta cgtgtacagc acgtaacggt actttatcta gct 43

<210> 754

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 754

cgcctgaata caacgagtta acgtaacggt actttatcta gct 43

<210> 755

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 755

cttccagatt gtcgccgtta attgtaacgg tactttatct agct 44

<210> 756

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 756

cagatttacc taaaccacca ccagtaacgg tactttatct agct 44

<210> 757

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 757

tttgagctga tctagtaggt cttcgtaacg gtactttatc tagct 45

<210> 758

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 758

tctgtagctc gatccctgga gtaacggtac tttatctagc t 41

<210> 759

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 759

caactgtcat tcggttaaac tgagtaacgg tactttatct agct 44

<210> 760

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 760

tttgcttccg ttcatcatta gtcgtaacgg tactttatct agct 44

<210> 761

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 761

acttccaata gtctggaaat cacagtaacg gtactttatc tagct 45

<210> 762

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 762

tcatctgctg gattaagcta atacgtaacg gtactttatc tagct 45

<210> 763

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<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 763

agataggctc ccgtatgccc gtaacggtac tttatctagc t 41

<210> 764

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 764

gcttctcggc taccacagac gtaacggtac tttatctagc t 41

<210> 765

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 765

agacttactc ttaagaccat acttcgtaac ggtactttat ctagct 46

<210> 766

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 766

gttgagaggt ggcgtttttg agtaacggta ctttatctag ct 42

<210> 767

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 767

tcaatacgtt tctgcaagag tttgtaacgg tactttatct agct 44

<210> 768

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 768

ttatggcctc tatagcatct cccgtaactc catctagacc g 41

<210> 769

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 769

cagtccgggc aactatctta ttgtaactcc atctagaccg 40

<210> 770

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 770

ttcaagatac gaataatcct ccgagtaact ccatctagac cg 42

<210> 771

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 771

gtaggcgctt agcttgattt tcgtaactcc atctagaccg 40

<210> 772

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 772

cttcaagtcg ggctcttgca gtaactccat ctagaccg 38

<210> 773

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 773

agaatgaggc acgcaaagct gtaactccat ctagaccg 38

<210> 774

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 774

ctcagcatcc gataggactt tcgtaactcc atctagaccg 40

<210> 775

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 775

aagtcactat aacacccgtc ctgtaactcc atctagaccg 40

<210> 776

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 776

ttggcatggt agatcgtcca ggtaactcca tctagaccg 39

<210> 777

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 777

caccttccaa cgactcaatc cgtaactcca tctagaccg 39

<210> 778

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 778

acaacctgta agtgtagttc tctggtaact ccatctagac cg 42

<210> 779

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 779

aaatcagata ctcgtctaca gaatggtaac tccatctaga ccg 43

<210> 780

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 780

agcagcaagt cgcattttcc gtaactccat ctagaccg 38

<210> 781

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 781

actggcatgg cggataaaaa ggtaactcca tctagaccg 39

<210> 782

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 782

cgggtgctct cgtgaacaaa gtaactccat ctagaccg 38

<210> 783

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 783

gatcgaagag tcgagataag gatgtaactc catctagacc g 41

<210> 784

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 784

ttgttgaaga cgcttccata agtgtaactc catctagacc g 41

<210> 785

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 785

gtggtgacgc agaatcccgg taactccatc tagaccg 37

<210> 786

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 786

cattataaag acgtaataat ttagggtgta actccatcta gaccg 45

<210> 787

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 787

gctcccactc ctagacatgt tgtaactcca tctagaccg 39

<210> 788

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 788

tttgttacac ggttaaacag ccgtaactcc atctagaccg 40

<210> 789

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 789

gaggtaaata aacgtcgata ggaagtaact ccatctagac cg 42

<210> 790

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 790

ttaatgtgga gtgcaagttg gggtaactcc atctagaccg 40

<210> 791

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 791

ccttgtatct tagcttggga tgtgtaactc catctagacc g 41

<210> 792

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 792

tcaatgatca gcggatacct attgtaactc agtagatata gcg 43

<210> 793

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 793

cgtgtgatct tacgatcctt atagtaactc agtagatata gcg 43

<210> 794

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 794

tcatcctcta cgagtctatc ttggtaactc agtagatata gcg 43

<210> 795

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 795

tcaaagtaac ccgcgtaggc gtaactcagt agatatagcg 40

<210> 796

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 796

ataggacgca tactgtcgca agtaactcag tagatatagc g 41

<210> 797

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 797

ttatgtccgt cgaccttgca tgtaactcag tagatatagc g 41

<210> 798

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 798

ttccaaggaa cggacttcta gggtaactca gtagatatag cg 42

<210> 799

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 799

ataggtacga acgctctcga tcgtaactca gtagatatag cg 42

<210> 800

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 800

tcttggatga tcgcatgaaa ccgtaactca gtagatatag cg 42

<210> 801

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 801

acaacccaat taacgtgaag ccgtaactca gtagatatag cg 42

<210> 802

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 802

atgcggtata acgcacgttc cgtaactcag tagatatagc g 41

<210> 803

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 803

ctcaagtcac gacgcagttc tgtaactcag tagatatagc g 41

<210> 804

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 804

gcaagtcacg aacgtgactc gtaactcagt agatatagcg 40

<210> 805

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 805

ttggcgttat actgcgccac gtaactcagt agatatagcg 40

<210> 806

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 806

agtggtgcgt atcgtaagcg gtaactcagt agatatagcg 40

<210> 807

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 807

atccaggcga cgaaacgaga gtaactcagt agatatagcg 40

<210> 808

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 808

ttggatgaat cggcaggctg gtaactcagt agatatagcg 40

<210> 809

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 809

tcagtcaatt cgtaatgtac accgtaactc agtagatata gcg 43

<210> 810

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 810

catcgaagac gatccactgg cgtaactcag tagatatagc g 41

<210> 811

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 811

cacggatcaa gcggcacttg taactcagta gatatagcg 39

<210> 812

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 812

tccaccgtat cgcaagctgg taactcagta gatatagcg 39

<210> 813

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 813

atgcaaagtt tcgtagggcg agtaactcag tagatatagc g 41

<210> 814

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 814

gcgttggcac gacgacatgt aactcagtag atatagcg 38

<210> 815

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 815

ttgcagacgg acgcccaagt aactcagtag atatagcg 38

<210> 816

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 816

agctgtatcg tcaaggcact cgtaaccttt tgaaacgcta 40

<210> 817

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 817

ctcgctccca gtccgaaatg gtaacctttt gaaacgcta 39

<210> 818

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 818

acttgtacta gtatgcctta agaaagtaac cttttgaaac gcta 44

<210> 819

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 819

gtgaccatga ctaatagcag tgggtaacct tttgaaacgc ta 42

<210> 820

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 820

gctgtgtcga gaatatccaa gagtaacctt ttgaaacgct a 41

<210> 821

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 821

cctactgtcg ctaatggatt gggtaacctt ttgaaacgct a 41

<210> 822

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 822

acactagcac tacctaagga ccgtaacctt ttgaaacgct a 41

<210> 823

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 823

gtctgtgaac tagttcaggc acgtaacctt ttgaaacgct a 41

<210> 824

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 824

ctaggtcagc gcaaccaaat ggtaaccttt tgaaacgcta 40

<210> 825

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 825

cctaataagc tataactggc ccagtaacct tttgaaacgc ta 42

<210> 826

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 826

ctaaattcct atgcagtgtg actcgtaacc ttttgaaacg cta 43

<210> 827

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 827

atcttgttga gctatccaaa ctggtaacct tttgaaacgc ta 42

<210> 828

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 828

aaatacgcat cgtgttatct ctggtaacct tttgaaacgc ta 42

<210> 829

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 829

tgttaagaga actagccaaa cctgtaacct tttgaaacgc ta 42

<210> 830

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 830

cataaagtag cttgatcgaa gagtgtaacc ttttgaaacg cta 43

<210> 831

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 831

taagcaaaca cgcctttaca tagtaacctt ttgaaacgct a 41

<210> 832

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 832

aaggccttag taagatatta cagacgtaac cttttgaaac gcta 44

<210> 833

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 833

acaatatacg tctgctatat tcttccgtaa ccttttgaaa cgcta 45

<210> 834

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 834

tccactggat agggttctgt ctgtaacctt ttgaaacgct a 41

<210> 835

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 835

aagttatact atgaaagagc agtctgtaac cttttgaaac gcta 44

<210> 836

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 836

acatgttaat gcctaagtct atgtagtaac cttttgaaac gcta 44

<210> 837

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 837

gcctagaatg cctacttggg agtaaccttt tgaaacgcta 40

<210> 838

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 838

tcagtggaat cgtagcaaaa cagtaacctt ttgaaacgct a 41

<210> 839

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 839

acaataatta ggagtagtac agttcagtaa ccttttgaaa cgcta 45

<210> 840

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 840

ttccactcgg ataagatgct gagtaactca gacatgtaga tt 42

<210> 841

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 841

aatactccac acgcaaattt ccgtaactca gacatgtaga tt 42

<210> 842

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 842

ggccagacca tcgctatctg gtaactcaga catgtagatt 40

<210> 843

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 843

caccacacta tgtcgaaaag tggtaactca gacatgtaga tt 42

<210> 844

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 844

ccctttcttg cggagattct ctgtaactca gacatgtaga tt 42

<210> 845

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 845

acaaacacgc acctcaaagc gtaactcaga catgtagatt 40

<210> 846

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 846

cccagtagat taccactgga gtgtaactca gacatgtaga tt 42

<210> 847

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 847

gcagtgctcg cttagtgctg taactcagac atgtagatt 39

<210> 848

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 848

ggctcgacgc taggatctga gtaactcaga catgtagatt 40

<210> 849

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 849

aggatgggcc tccggttcag taactcagac atgtagatt 39

<210> 850

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 850

ggaacatctc gaagcgctca gtaactcaga catgtagatt 40

<210> 851

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 851

agacggaaac cgtagctgcc gtaactcaga catgtagatt 40

<210> 852

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 852

tgttcaatat cgtccgggga cgtaactcag acatgtagat t 41

<210> 853

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 853

cattgcttgg gacggcaagg gtaactcaga catgtagatt 40

<210> 854

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 854

agtggagaat gtcagtctga gtgtaactca gacatgtaga tt 42

<210> 855

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 855

agttttttat ggcgggaggt agagtaactc agacatgtag att 43

<210> 856

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 856

tagaaactac caacccaccg agtaactcag acatgtagat t 41

<210> 857

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 857

ttccctggtt agtacggtga aggtaactca gacatgtaga tt 42

<210> 858

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 858

taagctggta tgtcctactc ccgtaactca gacatgtaga tt 42

<210> 859

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 859

ctgacgcaca cctattgcaa ggtaactcag acatgtagat t 41

<210> 860

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 860

tcaccgtcgt ggaaagcacg taactcagac atgtagatt 39

<210> 861

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 861

gtaaactaac ccttaactgc aagagtaact cagacatgta gatt 44

<210> 862

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 862

tttaggtact aaggttcacc aagagtaact cagacatgta gatt 44

<210> 863

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 863

tcatcatata caagagatga aatcctgtaa ctcagacatg tagatt 46

<210> 864

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 864

ccatggtgac gatcctcacg gtaactaaca taaattcgat g 41

<210> 865

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 865

gtgaacgtct tgggttgctt cgtaactaac ataaattcga tg 42

<210> 866

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 866

ggcctggacg gcgtaagagt aactaacata aattcgatg 39

<210> 867

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 867

gaagctcatg cgggaagcgg taactaacat aaattcgatg 40

<210> 868

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 868

tgtcactgta cgagatgttt cggtaactaa cataaattcg atg 43

<210> 869

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 869

ttgaagcttg gtatgtcagg aggtaactaa cataaattcg atg 43

<210> 870

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 870

ggttcccgat acatagctgg agtaactaac ataaattcga tg 42

<210> 871

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 871

atctttgaag tcgaaagaca ggcgtaacta acataaattc gatg 44

<210> 872

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 872

gcttattaac acgaagcttt gaggtaacta acataaattc gatg 44

<210> 873

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 873

tttcattcca cgggaaggag agtaactaac ataaattcga tg 42

<210> 874

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 874

tcagtgcttc gttggccatt gtaactaaca taaattcgat g 41

<210> 875

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 875

ctctgcgtac caagcagtaa ttgtaactaa cataaattcg atg 43

<210> 876

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 876

tttcaaggcc tcgatttctg tcgtaactaa cataaattcg atg 43

<210> 877

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 877

tagttcacac cgtacatctc cagtaactaa cataaattcg atg 43

<210> 878

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 878

cccacatttc cggagtcatc tgtaactaac ataaattcga tg 42

<210> 879

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 879

ggtcctgagc tatcttcaga tattgtaact aacataaatt cgatg 45

<210> 880

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 880

tcctccgtgc gaatcgctgt aactaacata aattcgatg 39

<210> 881

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 881

gcccttttta ttccggattg cagtaactaa cataaattcg atg 43

<210> 882

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 882

gctgtctcct cagaccgcag taactaacat aaattcgatg 40

<210> 883

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 883

cacccctgtc ggagttctca gtaactaaca taaattcgat g 41

<210> 884

<211> 46

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 884

cagatttatt accctttttg gaagcgtaac taacataaat tcgatg 46

<210> 885

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 885

tcatgggcgg gtacgtgggt aactaacata aattcgatg 39

<210> 886

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 886

caaaaatccc cgcttgtgaa cgtaactaac ataaattcga tg 42

<210> 887

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 887

ctggggtcgt agtcaccata cgtaactaac ataaattcga tg 42

<210> 888

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 888

cacacgatac cggcaaagaa ggtaacgtga cgattaccc 39

<210> 889

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 889

ggtgtcagtc tccgacgtga gtaacgtgac gattaccc 38

<210> 890

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 890

gtgatggtga tcatctgggc cgtaacgtga cgattaccc 39

<210> 891

<211> 36

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 891

ttggcctcgg gaccaagcgt aacgtgacga ttaccc 36

<210> 892

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 892

ctgtcatctt ggtcaggtgg tgtaacgtga cgattaccc 39

<210> 893

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 893

atcaccttgc cgaaagtgcc gtaacgtgac gattaccc 38

<210> 894

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 894

actgcacggc cgtagtcatg taacgtgacg attaccc 37

<210> 895

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 895

aggtactcag gtgtgccgcg taacgtgacg attaccc 37

<210> 896

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 896

gaaggtgcgt tcgatgacag gtaacgtgac gattaccc 38

<210> 897

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 897

ctcctcagga gtctccacat ggtaacgtga cgattaccc 39

<210> 898

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 898

gtctggaaag agtacttcag gggtaacgtg acgattaccc 40

<210> 899

<211> 36

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 899

caggacgcgg ttctcggtgt aacgtgacga ttaccc 36

<210> 900

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 900

atctcagcgc catagaagcg gtaacgtgac gattaccc 38

<210> 901

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 901

tcgttcatgg tcacgcggtg taacgtgacg attaccc 37

<210> 902

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 902

cagcccgaag tctgtgatct tgtaacgtga cgattaccc 39

<210> 903

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 903

tcatggtggc accgtccttg taacgtgacg attaccc 37

<210> 904

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 904

ggtagtccag ggctgacaca gtaacgtgac gattaccc 38

<210> 905

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<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 905

ccatcattct tgaggaggaa gtagtaacgt gacgattacc c 41

<210> 906

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 906

acaaagcaga ggcggtcgtg taacgtgacg attaccc 37

<210> 907

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 907

cggtcctcgg agaacacacg gtaacgtgac gattaccc 38

<210> 908

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 908

gagcctcacg ttggtccacg taacgtgacg attaccc 37

<210> 909

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 909

ctccttgtag ccaatgaagg tggtaacgtg acgattaccc 40

<210> 910

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 910

ttcacaatag ccacgtcgct gtaacgtgac gattaccc 38

<210> 911

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 911

ccctcgtttg tgcagccaag taacgtgacg attaccc 37

<210> 912

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 912

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<210> 913

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 913

ttggcacatc gagacatggt tgtaactctc ttctattgca g 41

<210> 914

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 914

ccatcttggt cgtactttgt gagtaactct cttctattgc ag 42

<210> 915

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 915

ccaactgagc atacgctagg agtaactctc ttctattgca g 41

<210> 916

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 916

tcacgtacta gccgttccat cgtaactctc ttctattgca g 41

<210> 917

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 917

tttctccaag tcgtctctca tctgtaactc tcttctattg cag 43

<210> 918

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 918

tcgtaagaaa cgccactaga aagtaactct cttctattgc ag 42

<210> 919

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 919

cactggcgtg cctaaaccag taactctctt ctattgcag 39

<210> 920

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 920

acatatcata cgtggacatt agaacgtaac tctcttctat tgcag 45

<210> 921

<211> 40

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 921

gccgatggaa tgctccatcc gtaactctct tctattgcag 40

<210> 922

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 922

gattagcaat cggtcacaaa gacgtaactc tcttctattg cag 43

<210> 923

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 923

ggtgtagtag tacacattgg agcgtaactc tcttctattg cag 43

<210> 924

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 924

gatgaaactt cggttgtcag ctgtaactct cttctattgc ag 42

<210> 925

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 925

ttcttgaggc tagcaacttg tggtaactct cttctattgc ag 42

<210> 926

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 926

gtcccaaaac tcgattagct tccgtaactc tcttctattg cag 43

<210> 927

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 927

tattcgtgga acccctaaca gcgtaactct cttctattgc ag 42

<210> 928

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 928

caaagttgat atcgcccaaa atggtaactc tcttctattg cag 43

<210> 929

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 929

tagatccaag cggttccatt tcgtaactct cttctattgc ag 42

<210> 930

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 930

tgaccagttc ccgtaaaaca ctgtaactct cttctattgc ag 42

<210> 931

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 931

tggcacatgg tcgatacaca tgtaactctc ttctattgca g 41

<210> 932

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 932

tgacagcaca acgatcacaa cgtaactctc ttctattgca g 41

<210> 933

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 933

aagctcatga actatgccag aggtaactct cttctattgc ag 42

<210> 934

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 934

cgtcatacct gaccgagtac tgtaactctc ttctattgca g 41

<210> 935

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 935

tcttgattgt cgagaaagac ttggtaactc tcttctattg cag 43

<210> 936

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 936

tactgagccc tatcggaaag tgtaactgat cttcatatta cg 42

<210> 937

<211> 42

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 靶标特异性寡核苷酸

<400> 937

ccaaatccct tcgcagcaat tgtaactgat cttcatatta cg 42

<210> 938

<211> 42